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Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

ANOTACIONES

MANUAL DE ENSAYOS
DE SEMILLAS FORESTALES

Secretara de Medio Ambiente


Gobierno del Estado de Coahuila
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GLOSARIO

Aquenio: Fruto seco, indehiscente, monospermo en el cual la


cubierta de la semilla no se adhiere al pericarpo.

Caripside: Fruto seco, indehiscente, monospermo, con el


pericarpio adherido a la semilla, tpico de las gramneas.

Coleoptilo: Envoltura que rodea y protege el brote en el embrin y


plntulas de gramneas.

Cotiledn: Hoja de la semilla, primera o primeras hojas de un


embrin y plntula no es una hoja foliar.

Epicotilo: Parte del tallo de la plntula situada inmediatamente


encima de los cotiledones y por debajo de la hoja primaria.

Esquizocarpo: Fruto seco formado por dos o ms carpelos unidos


que se separan ala madurar quedando las semillas encerradas
dentro de cada carpelo o parte del carpelo (malva sp.)

Hipoctilo: La parte del tallo de la plntula situado entre los


cotiledones y la raz primaria.

Mericarpo: Cada uno de los segmentos en que se dividen


naturalmente ciertos frutos secos como el esquizocarpo.

Manual de Ensayos de Semillas Forestales Meristemo apical: Usado en ensayos de semillas, para designar
Recopilacin de Informacin: el principal punto de crecimiento del tallo de la plntula.
Adriana Antonio Bautista
Plmula: Propiamente el brote inicial del embrin pero se usa en
Edicin 2012 ensayos de semillas para designar la yema terminal de la plntula.

Secretara de Medio Ambiente Tegumento o Testa: La cubierta ms externa de una verdadera


semilla.
www.sema.gob.mx

ISBN-978-607-95357

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Amigo silvicultor

La conservacin, aprovechamiento y recuperacin de los recursos


naturales es uno de los compromisos del Gobierno del Estado de
Coahuila de Zaragoza con la finalidad de privilegiar el
aprovechamiento sustentable y el bienestar social, a travs de la
cultura ambiental, la conservacin y la recuperacin de los
recursos naturales, con un enfoque de racionalidad y armona con
el medio ambiente.

Por ello, con la finalidad de preservar el patrimonio natural, a


travs del uso racional de los recursos naturales trabajamos en
diversas acciones para impulsar la conservacin y recuperacin de
los ecosistemas forestales. A travs de este manual ofrecemos una
herramienta til para quienes estn involucrados en el manejo de
los recursos naturales, en especial para quienes estn inmersos en
el mbito forestal.

Tu participacin es necesaria para el fomento de una cultura


ambiental en nuestro Estado. Este manual queda en tus manos
para que puedas participar activamente en el proyecto ambiental
del Gobierno del Estado de Coahuila de Zaragoza.

Gobierno del Estado

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Plntulas normales de Chilopsis linearis Plntulas anormales de Chilopsis linearis

Plntulas normales de Ceratonia siliquia Plntulas anormales de Ceratoria siliquia

Plntulas normales de Atriplex canescens Plntulas anormales de Atriplex canescens

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CONTENIDO

Introduccin 3

Anlisis fsicos 5

Muestreo 5
Registro y homogenizacin 7
Pureza fsica 9
Porcentaje de semillas vanas 14
Peso de mil semillas 16
Contenido de humedad 17

Plntula normal de Quercus rubra. Evaluacin de la germinacin en Quercus rubra.


Anlisis fisiolgicos 19
Viabilidad 19
Germinacin 22
Mtodos para romper latencia 29

1 2 3 4
1 2 3 4 Anlisis sanitarios 31
Sin incubacin 31
Con incubacin 32
5 6 7 8
5 6 7 8
Bibliografa 35

9 10 11 12
9 10 11 12 Anexo 1 37
1-6 Semilla viables
Anexo 2 49
1-6 Semilla viables
7-12 Semillas no viables 7-12 Semillas no viables

Glosario 55

Semillas viables con el eje embrionario extrado Semillas no viables con el eje embrionario extrado

52 1
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Plntulas normales de Pinus cembroides


Semillas de Pinus cembroides

Plntulas anormales de Pinus cembroides Semillas Muertas de Pinus cembroides

Plntulas normales de Pinus ayacahuite Plntulas anormales de Pinus ayacahuite

2 51
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INTRODUCCIN

Las semillas forestales son consideradas como la fuente ms


importante de germoplasma primario y hasta el momento
constituye el material mayormente utilizado para la produccin
masiva de plantas, por lo que se requiere semilla con las
caractersticas bsicas de calidad, fisiolgica, gentica, fsica y
sanitarias deseadas, para que ello repercuta en un mayor xito de
las repoblaciones y la homogenizacin de nuevos individuos.

Para que los viveristas determinen la calidad de la semilla, es


necesario que puedan contar con informacin bsica, necesaria,
pruebas rpidas, sencillas y confiables que permitan conocer el
estado real de la semilla a sembrar y con ello tomar decisiones
sobre la produccin de planta en el vivero.

La calidad de la semilla es un factor importante a considerar en la


produccin de plantas ya que asegura un establecimiento
uniforme en el campo y fundamenta un manejo adecuado de la
especie vegetal.

50 3
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ANEXO 2

4 49
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ANLISIS FSICOS

MUESTREO
Los muestreos pueden ser hechos tantas veces como sean
necesarios y en el momento adecuado, el tipo de muestra y los
anlisis a realizar dependen de la especie, etapa y factor que se
desea controlar, hacindose esto en referencia a un lote, lo cual
se entiende como una rea, cantidad o volumen especfico de
semillas, semilla a granel o envasada, que sea identificada
fsicamente y que corresponda a una sola especie.

Objetivo
El muestreo es una herramienta fundamental para conocer la
condicin de lote de semillas, al obtener muestras de un tamao
adecuado y que sean representativas del lote de semillas.

Materiales y equipos
El material y equipo depender de cada especie, etapa, tipo de
semilla y punto en que se tome la muestra.

Caladores tubulares de diferentes dimetros y longitudes.


Cubetas y /o charolas de tamao apropiado.
Bolsas de tela o papel.

Procedimiento
1. Introducir suavemente el calador con el orificio hacia abajo y en
un ngulo de 30 grados con respecto de la horizontal del saco.
2. Alcanzando el centro, se da un giro de 180 grados para que la
semilla entre al calador.
3. Se procede a sacar el calador suavemente.
4. La muestra de semilla se enva a la bolsa y posteriormente se
traslada al laboratorio

Intensidad de muestreo
sto corresponde al nmero de muestras primarias que se deben
tomar de un lote de semillas. Para formar la muestra compuesta,
se debe conocer el nmero de sacos por lote, o bien, el volumen
del granel, ya que el nmero de muestras primarias depende del
tamao del lote.

48 5
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De acuerdo a las reglas para anlisis de semillas de la Especies que presentan algn tipo de latencia y que son
International Seed Testing Association (ISTA, 2004) la intensidad trabajadas en el Banco de Germoplasma.
del muestreo se describe en las tablas siguientes:
Especie Tratamiento Duracin
No. de sacos No. de sacos a muestrear
Acacia farnesiana En semillas de reciente colecta de 2
a 3 hrs.
1-5 Todos o al menos 5 muestras primarias. 1
Y de colecta de 2 aos anteriores
6-30 5 o al menos 1 en cada 3 al azar*. de 40 a 60 min.
31-400 10 o al menos 1 de cada 5 al azar*.
401-a ms 80 o al menos 1 en cada 7 al azar*. Prosopis glandulosa Hasta que el agua vuelva tomar la
2
temperatura ambiente.
*siempre el mayor
Shopora secundiflora 1 De 1 a 1.5 hrs.
Juniperus sp. 3 Por un perodo de 60 das.
Tamao del lote semilla a granel Puntos a muestrear
Atriplex canescens Por un perodo de 60 das en
Hasta 500 Kg. Al menos 5 muestras primarias (5 posiciones). semillas recin colectadas y de
3
501-3,000 Kg. 1 muestra primaria por cada 300 Kg. pero no menos de 5. colecta de dos aos anteriores de
3001-20000 Kg. 1 muestra primaria por cada 500 Kg. pero no menos de 10. 20 a 30 das.
20001 a ms Kg. 1 muestra primaria por cada 700 Kg. pero no menos de 40.
Ceratonia siliquia Hasta que el agua vuelva a tomar
2
la temperatura ambiente.
Dasylirion cedrosanum Hasta que el agua vuelva a tomar la
2
temperatura ambiente.
De acuerdo a las reglas de anlisis de la Association of Official
Seed Analysts (AOSA, 1993), la intensidad de muestreo se
describe en las tablas siguientes: 1 Sumergir en cido sulfrico concentrado
2 Sumergir en agua muy caliente
Sacos No. de sacos a muestrear
3 Estratificacin en fro a -7 C
1-6 Cada uno o 5 muestras primarias.
6 a ms 5 sacos ms 10 %.

No. de envases Muestras primarias

7 6
10 6
23 7
50 10
100 15
200 25
300 30
400 30

Los sacos y envases a muestrear o las posiciones en el granel sern


escogidos al azar, variando el muestreo de la parte superior,
media o inferior de los envases asignados, muestreando en slo
uno de estos puntos.

6 47
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Remojo en agua caliente hasta que llegue a


Recomendaciones para romper Latencia

Preenfriar 9 meses de 3-5 C.


Preenfriar 30 das de 3-5C.

temperatura ambiente.
Remover el pericarpio.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Muestreo de semillas en costales
2o Conteo

Muestreo de semillas a granel


Das

14
28

21
28

28

21
21

28

28
28 REGISTRO Y HOMOGENIZACIN
1o Conteo

Una vez obtenida la muestra, se realiza el registro en el cual se


Das

14

14

14

14
14
7
7
7

toman en cuenta todos los parmetros que puedan distinguir las


muestras, es decir, todos los datos importantes de la especie,
tamao de muestra, colecta, lote, etc.
Temp. oC

20-25

20-25
20-30

20-30

20-30
20-25

20-25

20-25
20-25
2-30

La homogenizacin es la mezcla de muestras primarias para


obtener una muestra de envo o mezcla de una muestra de envo.
Sustrato

Para obtener la muestra de trabajo que se refiere a mezclar


SP
SP

SP
SP
SP

SP

SP
SP
S

uniformemente la muestra y reducir al tamao deseado.

La muestra de envo, ya en el laboratorio, es necesario


Palma samandoca
Palma de abanico
Nombre Comn

Palma china

homogenizarla y reducirla a la muestra de trabajo en la que se


San Pedro
Sabino
Sabino

Thuya
Thuya

harn las determinaciones de calidad, donde se tomar el peso


requerido o especificado en la reglas de ISTA. Para esta
homogenizacin y divisin se hace uso de equipo, que puede ser
mediante los mtodos y aparatos siguientes:

Mtodo de divisores mecnicos


Taxodium distichum (L.)Rich

A: ARENA O PEAT MOST


Especie

Taxodium macronatum

Thuja occidentalis L. f.

ste es adecuado para toda clase de semillas, excepto para


Ulmus americana L.

Yucca carnerosana

SP: SOBRE PAPEL


EP: ENTRE PAPEL
Thuja orientalis L.

Washingtonia sp

aqullas extremadamente brozosas. Los aparatos dividen la


Tecoma stans

Yucca filifera

muestra en aproximadamente dos partes iguales. La muestra de


Taxus spp.

envo es mezclada, pasndola en el divisor, recombinando las dos


partes y pasando la muestra compuesta una segunda vez.

46 7
8
v

la vlvula.
requerido.
Divisor tipo Boerner

Divisor de suelo o de tipo Rifle


Divisor cnico o de tipo Boerner

Boerner, sus canales estn arreglados en lnea recta.


La muestra es dividida, pasando la semilla nuevamente
Divisin manual

serie de canales que dirigen la semilla hacia dos conductos.


trabajo del tamao aproximado, sin ser menos del tamao
de divisin sucesiva, se contina hasta obtener la muestra de
repetidas veces y removiendo una mitad cada vez. Este proceso

de canales, salida y charola de reciba. Tiene el mismo principio del


Este aparato consta de: tolva con o sin vlvula o compuerta, rea
limpieza, para ello es conveniente evitar que la semilla se atore en
Este aparato homogenizador consta de: una tolva, cono y una

Una desventaja para este divisor es su dificultad para verificar su


Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Especie Nombre Comn Sustrato Temp. oC 1o Conteo 2o Conteo Recomendaciones para romper Latencia
Das Das
Prosopis glandulosa semilla desnuda Mezquite Remojo en agua caliente hasta que llegue a
SP 20-25 7 14
temperatura ambiente.
Prunus avium
Ciruelo SP 20-30 3 10
Prunus amigdalus
Ciruelo
Pseudostsuga menziesii (Mirb.) Franco Preenfriar a 21 das de 3-5 C.
Oyamel SP 20-30 7 21
Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Pseudotsuga sp Sin tratamiento.


Oyamel rojo SP 20-25 7 21
Ptelea trifoliala
Pinacate SP 20-30
Quercus spp.
Encino A 20 7 28
Rosa spp Preenfriar en sustrato hmedo por 12 meses.
Rosal SP 20-30 7 14
Schinus molle - Remojo por 3 hrs. en sosa custica al 4%,
enseguida se deja en remojo en agua a
Pirul SP 20-25 14 28
temperatura ambiente por 24 hrs.
- Sin tratamiento.
Shopora japonica L.
SP 20-30 7 28
Shopara secundiflora Sumergir en H2SO4 concentrado por 3 hrs.
Colorn EP 20-25 7 28
Sacarlas y lavarlas con mucha agua.
Spatodea campanulata Sin tratamiento.
SP, EP 20-25 14 28
Spheroale funifera Sin tratamiento.
Samandoque SP 20-25 14 28
Tabebuia rosea Sin tratamiento.
EP 20-25 14 21
45
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ANLISIS DE PUREZA FSICA

Remojo en agua caliente hasta que llegue a


Recomendaciones para romper Latencia

Remojar con agua un da antes de la prueba.


Es un anlisis que se lleva a cabo durante la recepcin de la
materia prima, procedente de campo, con el objetivo de

Preenfriar por 4 meses a 3-5 C.


recomendar algn proceso de beneficio especial, dicho anlisis se
realiza nuevamente durante el acondicionamiento para la

temperatura ambiente.
calibracin del proceso, y finalmente se hace a toda la semilla

Preenfriar de 3-5 C.
acondicionada, antes de su envasado para llevar a cabo su

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

comercializacin.
En forma general, el anlisis de pureza fsica consiste en examinar
una muestra de trabajo de un peso, especificado en reglas de
anlisis, y separarla en tres componentes: semilla pura, semillas de
2o Conteo
Das

otras especies y materia inerte.


14

28
21

28
28

21

21
28

28
28

10
28
21
21

21
Semilla pura. Semilla en cuestin o que predomina en la muestra e
1o Conteo

incluye las variedades botnicas y mejoradas de esa especie;


Das

7
7

7
7

7
7

3
7
7

7
7

7 adems semilla manchada, semilla quebrada (mayor de la mitad),


semilla germinada, semilla inmadura, enfermas o germinadas.
20-25

20-25
20-25

20-30

20-25
20-30

20-30

20-25
20-30
20-25
20-30
20-30

20-30
Temp. oC

20

20

Semilla verdadera.
Caripsides y flores individuales.
Florecillas.
Sustrato

SP, EP
A, EP

Flsculos.
SP
EP
SP

SP

SP
SP

SP

SP
SP

SP
SP

SP
EP

Unidades mltiples pastos (flor frtil ms ciertas estructuras como


glumas, flores estriles, aristas, etc).
Semillas pequeas.
Nombre Comn

Pino ponderosa
Pino de piedra
Pino amarillo
Pino ocarpa

Pino ocote
Monterrey

Semilla chupada.
mexicano

Sicomoro
Pino rudo

Mezquite
Pino de

Alamo
Pino

Semilla inmadura.
Semilla manchada.
Semilla germinada.
Semillas rotas o daas ms de , excepto leguminosas y
Pinus ponderosa P. Lawson & C. Lawson

Pinus pseudostrobus forma megacarpa


Pinus patula Shciede ex Schltdl & cham

crucferas con testa removida.


Pinus oocarpa Schiede ex Schltdl.

Semilla daada por insecto cuando el dao no es demasiado


Pinus lambertiana Douglas

obvio.
Pinus pumila (Pall.)Regel
Especie

Pinus teocote var. Schl


Pinus radiata D. Don.
Pinus pinceana Gord

Fragmentos de aquenios y pericarpios mayores de la mitad.


Prosopis glandulosa

Semillas llenas o no.


Pinus johannis

Pinus pinea L.

Platanus spp

Populus spp

Aquenios, esquizocarpos, mericarpos que contengan o no


Pinus rudis

semilla.

44 9
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Semillas de otras especies. Semillas de otras especies de las

Remojo en agua caliente hasta que llegue a


Recomendaciones para romper Latencia
caractersticas consideradas para semilla pura, unidades de
semilla de cualquier especie de plantas diferentes, que
generalmente estn contaminando un lote o muestra determinada
de una especie de semilla.

Preenfriar 21 das con 3-5 C.

Preenfriar 21 das de 3-5 C.


Preenfriar 21 das de 3-5 C.
temperatura ambiente.
Semilla de especies cultivadas.
Semillas de malezas: comunes y nocivas.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Estas semillas extraas son otras, pero siguen los mismos
criterios de semilla pura.

---
Materia inerte

2o Conteo
Das
Todo material considerado impureza, que no fue clasificado en los

28
28
28

28
21
28

21

21
28
21

14

21
21

28
28
dos componentes anteriores. La materia inerte deber incluir
semillas que no sean definidas como puras, estructuras semejantes

1o Conteo
a semilla, tanto de cultivos como de hierbas.

Das

14
14

7
7

7
7
7

7
7
7

7
7

7
Semilla con testa completamente removida.

20-25

20-25
20-30
20-30

20-30
20-25
20-25

20-30

20-30
20-30

20-30
20-25
Pedazos de semillas (semillas puras u otras semilla), igual o

Temp. oC

20
20
menos de la mitad.
Semilla daada por insecto menos de la mitad.
Cotiledones separados.

Sustrato
Basura.

SP
EP
SP
EP
SP

SP
EP

SP
EP
SP

SP
SP
EP

SP
Alas de algunas conferas.
Tierra.
Paja.

Nombre Comn

Palma datilera

Pino pionero

Pino de orilla
Pino cubano
Pino vikingo

Pino prieto
Piracantho
Insectos, etc.

Cortadillo

Pino gato
Picea

Picea

Pino
Metodologa
Muestra de trabajo
El anlisis de pureza deber ser hecho en una muestra de trabajo

Pinus contorta Douglas ex. Loudon.


tomada de la muestra de envo de acuerdo a las reglas de la ISTA.

Picea engelmannii Parry ex Engelm

Pinus ayacahuite var. brachyptera


Picea mariana (Mill.) Britton et al.
El peso de una muestra de trabajo se debe considerar que tenga

Pinus arizonica var. Stormiae

Pinus culminicola Andresen


como mnimo 2500 semillas.
Especie

Pinus caribaea Morelet.

Pinus cembroides Zucc.


Pinus banksiana Lamb.
Phyracantha coccinea

Pinus halepensis Mill.


Pinus flexilis E. James

Pinus greggii Engelm


Phoenix dactilifera
Nolina cespitifera

Separacin de la muestra de trabajo


La muestra de trabajo, despus de pesarla, deber ser separada
en sus componentes ya definidos ( materia inerte, semilla pura y
semilla de otras especies).

10 43
42
Especie Nombre Comn Sustrato Temp. oC 1o Conteo 2o Conteo Recomendaciones para romper Latencia
Das Das
Juniperus monosperma Junipero/ tascate SP 20-25 7 30-35 Estratificacin en fro (4), por 1 mes.

Juniperus virginiana L. Pretratamiento por 60 das a 20 C seguido de


Junipero/ tascate SP 15 14 42
40 das a 3-5 C.
Koelreuteria paniculata Sin tratamiento.
Sombrilla china SP 15 14 28
Leucaena leucocefala
Huajillo EP 20-25 14 21
Ligustrum japonicum Remojo por 24 hrs. en agua a temperatura
Troeno semilla SP 20-25 21 36
ambiente.
Ligustrum japonicum Remojo por 24 hrs. en agua a temperatura
Troeno fruto SP 20-25 21 36
ambiente.
Ligustrum vulgare L.
Troeno SP 20-30 7 21
Lippia graveolens H.B.K Sin tratamiento.
Oregano SP 20-25 7 21
Liquidambar styraciflua L. Sensible a secarse en la prueba.
Goma dulce SP 20-30 7 21
Liquidambar tulipifera. Goma dulce SP 20-30 7 21
Malus spp.
SP 20-30 7 28
Malus sargentii Rehder
SP 20-30 7 28
Malva sylvestris L.
SP 20-30 7 21
Melia azedarach Sin tratamiento.
Lila fruto A 20-25 28 36
Melia azedarach Sin tratamiento.
Lila SP 20-25 14 28
Morus spp. Sin tratamiento.
Mora SP 20-30 14 28
Manual de Ensayos de Semillas Forestales
Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Pureza % =
1.0 - 9.9 gr.
10.0 - 99.9 gr.

1000.0 - mayor
Menor de 1.0 gr.

100.0 - 999.9 gr
Tamao de la muestra
fracciones de los componentes por 100.
Clculo y expresin de resultados

Separacin de los componentes


0.0 en el formato del reporte correspondiente.
0
1
2
3
4

Peso del componente


Peso total de la muestra
No. de Decimales

x 100
Si el resultado para un componente es nulo, este se reporta como
materia inerte, debern ser reportados en cada espacio provisto.
100. Los porcentajes de semilla pura, semilla de otras especies y
decimal y el porcentaje de todos sus componentes deber sumar
El resultado del anlisis de pureza deber ser dado a un lugar
manera: el peso del componente entre la suma de los pesos de las
original de la muestra. El porcentaje se calcula de la siguiente
muestra de trabajo. Esta suma deber compararse con el peso
Sumar todos los pesos de las fracciones de los componentes de la

11
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Tamaos de la muestra segn la ISTA 2004

Pretratamiento por 2 meses a 20C seguido de


Sumergir la semilla en H2SO4 por 60-120 min,

Sumergir la semilla en H2SO4 por 60-120 min,

1 gr. Por repeticin para la siembra/ preenfriar

0.10 gr. Por repeticin para la siembra/

0.50 gr. Por repeticin para la siembra/

0.10 gr. Por repeticin para la siembra/

0.10 gr. Por repeticin para la siembra/


Recomendaciones para romper Latencia
Muestra de trabajo
Tamao mximo Muestra de

preenfriar 21 das a 3-5 C o no preenfriar.

preenfriar 21 das a 3-5 C o no preenfriar.

preenfriar 21 das a 3-5 C o no preenfriar.

preenfriar 21 das a 3-5 C o no preenfriar.


Especie para anlisis de
del lote (Kg) envo (gr)
pureza (gr)

Abies alba Mill 1000 240 120

Estratificacin en fro (4), por 1 mes.


Estratificacin en fro (4), por 1 mes.
Abies amabilis Douglas ex. J.Forbes 1000 200 100
Abies balsamea (L.) Mill 1000 40 20

21 das a 3-5 C o no preenfriar.

Remover la capa de la semilla.


Abies Cephalonica Loudon 1000 360 180

o hasta que pierdan su brillo.

o hasta que pierdan su brillo.

Preenfriar 90 das a 3-5 C.


Abies cilicica (Antonie & Kostschy) Carriere 1000 1000 500
160 80

por 7 meses de 3-5 C.


Abies concolr (Gordon & Glend) 1000
Abies firma Siebold & Zucc 1000 200 100
Abies fraseri (Pursh) Poir 1000 40 20

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Abies grandis (Douglas ex D. Don) Lindl 1000 100 50
Abies homolepis Siebbold & Zucc. 1000 80 40
Abies vejari 500 100 55
Acacia farnesiana 35 140 70
Acacia sp. 1000 70 35
Acer campestre L. 1000 400 200

2 Conteo
Acer negundo L. 500 200 100

30-35
30-35
Das
100 50

30
28
500

28

28
Acer palmatum Thunb

28

14

14

14

14

14

21
Agave atrovirens 100 140 70

o
Agave asperrima 100 14 7
Agave salmiana 100 70 35

2 Conteo
Agave spp * 100 70 35

Das
Agave victoriae-reginae 100 15 7

21
21

14

10

7
7
7
7
5

5
Alnus cordata (Loisel.) Duby 1000 12 6

o
Alnus rubra 1000 1000 150
Arbutus xalapensis 100 16 8
Arctortaphillus pungens 500 120 60

Temp. C

20-30

20-30
20-25

20-25
20-25

20-25

20-25

20-30

20-30

20-30

20-30

20-30

20-25
Atriplex canescens * 500 50 25

3-5

20
Atriplex canescens 1000 120 60
Betula papyrifera Marshall 300 10 3
Betula pubescens Ehrh 300 10 1
Brehae dulcis 1000 1100 550
Cassuarina equisetifolia 100 4 2

SP, EP, A
Sustrato

SP, A

SP, EP
SP, A

SP, A

SP, A
Cedrela spp 1000 120 60

EP
EP

EP
SP

SP

SP

SP

SP
SP
Celtis laevigata 1000 600 300
Ceratonia siliquia 1000 850 425
Cercis canadensis 60 120 250
Chilopsis linaeris * 100 14 7

Junipero/ tascate
Junipero/ tascate
Junipero/ tascate
Nombre Comn
Crataegus bourosuna * 100 400 200

Puerto de flores
framboyan
Crataegus monogyna Jacq. 1000 400 200

Tabachin,

Eucalipto
Eucalipto

Eucalipto

Eucalipto

Eucalipto
Biznaga

Fresno

Fresno
Parota,
orejn
burra
Cupressus arizonica Greene 1000 60 30
Cupressus macrocarpa Hartw. Ex Gordon 1000 60 20
Cupressus sempervirens L. 1000 40 20
Dasylirion cedrosanum * 1000 80 40
Dasylirion cedrosanum * 500 50 25
Delonix regia * 1000 2200 1100
Echinocactus sp * 50 10 5

Eucalyptus grandis W. Hill ex Maiden


Enterolobium ciclocarpum 1000 2200 1100

Eucalyptus radiata Sieber ex DC.


Eucalyptus globulus Labill 1000 60 20
Eucalyptus grandis W. Hill ex Maiden 1000 15 5

Enterolobium ciclocarpum

Hunnemannia fumarifolia
Eucalyptus radiata Sieber ex DC. 40 15

Eucalyptus globulus Labill


1000
Especie

Eucalyptus robusta Sm 1000 15 5

Juniperus communis L.
Eucalyptus robusta Sm

Juniperus deppeanna
Eucalyptus rudis Endl
Eucalyptus rudis Endl 1000 15 5

Juniperus flaccida
40 20

Ginkgo biloba L.
Fraxinus greggi * 200
Echinocactus sp

Fraxinus greggii
Fraxinus spp. 1000 400 200
Delonix regia

Fraxinus spp.
Ginkgo biloba L. 5000 500 semillas 500 semillas
Hunnemannia fumarifolia * 500 22 11

semilla
12 41
Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Tamaos de la muestra segn la ISTA 2004

Remojo en agua caliente hasta que llegue a


Remojo en agua caliente hasta que llegue a
Recomendaciones para romper Latencia

Muestra de trabajo
Tamao mximo Muestra de
Especie para anlisis de
del lote (Kg) envo (gr)
pureza (gr)

Estratificacin a 10-15 C por 30 das.


Juniperus communis L.
fruto 1000 300 150
Semilla 1000 40 20
Juniperus deppeanna 100 250 110

Preenfriar 21 das con 3-5 C.


Juniperus flaccida * 100 250 110
Juniperus monosperma 100 250 110

temperatura ambiente.
temperatura ambiente.
Juniperus virginiana L. 1000 100 50
Koelreuteria paniculata 1000 800 400

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.
Leucaena leucocefala * 500 200 100
Ligustrum japonicum * 100 50 100
Ligustrum japonicum (en fruto) * 500 300 150
Ligustrum vulgare L. 1000 100 50
Liquidambar tulipifera L. 1000 180 90
300
.

Liquidambar styraciflua L. 30 15
2o Conteo

Lippia graveolens H.B.K 50 5 2


Das

50 5
28

2
28

28

35

28
21
21

Lippia graveolens H.B.K


28

14
28

21
21

Malus spp. 1000 50 25


Malus sargentii Rehder 1000 24 12
Malva sylvestris L. 5000 30 15
2o Conteo

Melia azedarach (en fruto) * 1000 3000 1500


Das

500 110
14

55
14

14

Melia azedarach *
7
7

7
14
7

7
Morus spp. 1000 20 5
Nolina cespitifera * 500 250 110
Phoenix dactilifera * 1000 3000 1500
Phyracantha coccinea * 100 30 15
Temp. oC

20-25

20-30

20-30

20-30
20-30

20-30

20-25
20-25

20-25

20-25
20-25

20-25

20-25

Ptelea trifoliala * 50 170 85


20

Picea engelmannii Parry ex Engelm 1000 16 8


Picea mariana (Mill.) Britton et al. 1000 6 3
Pinus arizonica var. Stormiae 1000 200 85
Pinus ayacahuite var. brachyptera 1000 1500 700
Pinus banksiana Lamb. 1000 25 9
Sustrato

EP, SP

Pinus caribaea Morelet. 1000 100 50


SP

SP

SP

SP
EP
SP

SP

EP
SP

SP

SP

SP
SP

Pinus cembroides Zucc. 1000 1000 700


Pinus contorta Douglas ex. Loudon. 1000 25 9
Pinus culminicola Andresen * 1000 1800 900
Pinus greggii Engelm 100 50 25
Cipres de Arizona
Nombre Comn

Pinus flexilis E. James 1000 500 250


Palo blanco
Casuarina

1000 100
Monterrey
Algarrobo

Duraznillo

Pinus halepensis Mill. 50


Cipres de
Tejocote
Palmito

Mimbre
Abedul

Cedro

Cipres

Sotol

Sotol

Pinus johannis * 1000 1700 850


Pinus lambertiana Douglas 1000 1000 500
Pinus oocarpa Schiede ex Schltdl. 1000 70 35
Pinus patula Shciede ex Schltdl & cham 1000 40 20
Pinus pinea L. 1000 1000 1000
Pinus pinceana Gord 1000 1900 950
Cupressus macrocarpa Hartw. Ex

Dasylirion cedrosanum semilla desnuda

Pinus ponderosa P. Lawson & C. Lawson 1000 200 100


Pinus pseudostrobus forma megacarpa * 100 140 65
Pinus pumila (Pall.)Regel 1000 40 20
Pinus radiata D. Don. 1000 160 80
Cupressus arizonica Greene
Crataegus monogyna Jacq.

Cupressus sempervirens L.

Pinus rudis 500 150 75


Especie

Cassuarina equisetifolia

Dasylirion cedrosanum

Pinus teocote var. Schl 50 200 98


Betula pubescens Ehrh

Crataegus bourosuna

Platanus spp 1000 25 6


Cercis canadensis
Ceratonia siliquia

50 5
Chilopsis linaeris

Populus spp 2
Celtis laevigata

Prosopis glandulosa, semilla desnuda * 1000 200 90


Brehae dulcis

Cedrela spp

Prosopis glandulosa * 1000 200 100


Gordon

Prunus amigdalus 1000 900 450


Prunus avium 1000 900 450
Pseudotsuga sp 100 80 40

40 13
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Tamaos de la muestra segn la ISTA 2004

Remojo en agua caliente hasta que lleguea

Remojo en agua caliente hasta que llegue a


temperatura ambiente. En semillas frescas se
recomienda estratificar en fro (5), por 30-60

Remojo en agua caliente hasta que llegue a


Recomendaciones para romper Latencia
Muestra de trabajo
Tamao mximo Muestra de
Especie para anlisis de
del lote (Kg) envo (gr)
pureza (gr)

Pseudostsuga menziesii (Mirb.) Franco 1000 90 60


Quercus spp. 5000 500 semillas 500semillas
Rosa spp 1000 50 25

das y posteriormente remojar.


Schinus molle * 100 200 100
Shopora japonica L. 1000 100 50

temperatura ambiente.

temperatura ambiente.
Shopara secundiflora 1000 3800 1900
Spatodea campanulata 100 30 15
Spheroale funifera * 1000 120 60

Conteo Das

Sin tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

2o tratamiento.
Sin tratamiento.

Sin tratamiento.

Sin tratamiento.
Tabebuia rosea * 100 400 200
Taxodium distichum (L.)Rich 300 500 250
Taxodium macronatum 40 80 160
Taxus spp. 1000 320 160

Sin
Tecoma stans * 100 40 20
Tectona grandis 1000 2000 1000

2o Conteo
Thuja occidentalis L. f. 1000 25 4

Das

28

21
14

21

21

21

21

21

21

21
14

14

14
Thuja orientalis L. 1000 120 60
Ulmus americana L. 1000 30 15
Washingtonia sp * 500 520 260
Yucca carnerosana * 60 120 250

2o Conteo
Yucca filifera * 200 400 800

Das

14

7
7

7
7

7
* Especies que no aparecen en la Regla de la ISTA, pero que siguiendo la normativa de la regla, se consideran estos
pesos para la muestra de trabajo.

PORCENTAJE DE SEMILLAS VANAS

Temp. oC

20-25
20-25

20-30
25-30

20-30

20-30

20-30

20-30

20-30

20-25

20-25
20-25

20-25

20
Esta prueba se puede realizar en tres mtodos, los cuales son:

Sustrato
Soplado:

SP;A

SP

SP
SP

SP

SP

SP

SP

SP

SP

SP
EP

EP

EP
ste se realiza a travs de un
soplador, el cual se calibra la
abertura segn la especie y se

Abedul de papel
Nombre Comn

Costilla de vaca

Costilla de vaca
aguamielero
Maguey del
inicia el soplado por 2 minutos.

Manzanita
Aliso rojo

Madroo
Maguey

Maguey
monte

Noha

Aliso
Arce

Arce

Arce
sto se realiza en semilla que
consideramos como pura en el
anlisis de pureza.
(Pinus greggii, Pseudotsuga

Atriplex canescens semilla desnuda


flahualttii, Dasylirion

Tipo de Latencia
cedrosanum, etc.)

Alnus cordata (Loisel.) Duby

Betula papyrifera Marshall


Especie

Agave victoriae-reginae

Arctostaphilus pungens
Acer palmatum Thunb

Atriplex canescens
Arbutus xalapensis
Acer campestre L.
Agave asperrima

Acer negundo L.
Agave salmiana

Alnus rubra
Agave spp

14 39
38
Especie Nombre Comn Sustrato Temp. oC 1o Conteo 2o Conteo Recomendaciones para romper Latencia
Das Das
Abies alba Mill Abeto de plata Preenfriar 21 das con 3-5 C.
SP 20-30 7 28
Abies amabilis Douglas ex. J.Forbes Abeto de plata Preenfriar 21 das con 3-5 C.
SP 20-30 7 28
pacifico
Abies balsamea (L.) Mill Preenfriar 21 das con 3-5 C.
Abeto SP 20-30 7 28

Abies Cephalonica Loudon Preenfriar 21 das con 3-5 C.


SP 20-30 7 28

Abies cilicica (Antonie & Kostschy) Preenfriar 21 das con 3-5 C.


SP 20-30 7 28
Carriere
Abies concolor (Gordon & Glend) Preenfriar 21 das con 3-5 C.
Abeto blanco SP 20-30 7 28

Abies firma Siebold & Zucc Preenfriar 21 das con 3-5 C.


Abeto japones SP 20-30 7 28

Abies fraseri (Pursh) Poir Preenfriar 21 das con 3-5 C.


Abeto SP 20-30 7 28

Abies grandis (Douglas ex D. Don) Lindl Preenfriar 21 das con 3-5 C.


Abeto SP 20-30 7 28

Abies homolepis Siebbold & Zucc. Preenfriar 21 das con 3-5 C.


Abeto SP 20-30 7 28

Abies vejari Sin tratamiento/recomedable almacenar antes


Oyamel, Abeto SP 20-25 7 21
de la prueba.
Acacia farnesiana Sumergir la semilla en H2SO4 por 60-120min,
Huizache EP 20-25 7 21
hasta que pierdan su brillo.
Acacia sp. Sumergir la semilla en H2SO4 por 60-120 min. o
hasta que pierdan su brillo. En semillas frescas
SP, EP 20-30 7 21 sumergir de 4-5 hrs. es lo ms recomendable.
Lavar con agua corriente despus del tratamiento.

Agave atrovirens Sin tratamiento.


Maguey azuloso EP 20-25 7 14
Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Partido:
Alcohol:
Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Pinus pinceana, Pinus culminicola, Pinus johanis).

semillas. Se parten y se reporta en porcentaje (Atriplex canescens).


presentes o ausentes. Se toman cuatro repeticiones de 100
corte en la semilla permitiendo observar las estructuras internas
reportada en porcentaje (Pinus cembroides, Pinus ayacahuite,

no permite hacerlo de las dos formas anteriores. Se realiza un


Esta prueba se realiza cuando la semilla, por su tipo de estructura,
recipiente. stas se cuentan y se hace una relacin para ser
un minuto, quedando las semillas vanas en la parte superior del
consideramos puras, y se someten en alcohol por poco menos de
En este mtodo se toman cuatro repeticiones de 100 semillas que

15
Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

PESO DE MIL SEMILLAS


El peso de mil semillas se utiliza para determinar la cantidad
necesaria de semilla para lograr un nmero de plantas
predeterminado, ste es variable y est determinado en gran parte
por las condiciones ambientales en que se desarrollan los rboles.

As mismo, entre especies hay diferencias en el peso de 1000


semillas, debido a los diferentes tamaos de las semillas.

Procedimiento

1. Puede llevarse a cabo en la totalidad de la semilla pura


obtenida en el anlisis de pureza.
2. O bien, en ocho repeticiones de 100 semillas cada una.

En el primer caso se cuenta la totalidad de la semilla pura y se pesa


en gramos con el mismo nmero de cifras decimales que en el ANEXO 1. Tratamientos y das a conteo en la evaluacin de la
anlisis de pureza. germinacin.

En el segundo caso de la semilla pura obtenida en el anlisis de


pureza, se toman al azar ocho repeticiones de 100 semillas cada
una, el conteo se realizar con un contador o manualmente.
Cada una de las ocho repeticiones se pesarn en gramos con el
mismo nmero de cifras decimales que en el anlisis de pureza.
Se calcula la varianza (S2), la desviacin tpica (S) y el coeficiente
de variacin (CV).

2
n(sumatoria X2) - (sumatoria X)
S =
n(n-1)

2
S=S

S
CV = *100
x

X = peso en gramos de cada repeticin.


N = nmero de repeticiones
x = media del peso de 100 semillas.

16 37
Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Si el coeficiente de variacin CV no excede del 6.0 para semillas


brozosas de Atriplex canescens o de 4.0 para otras, el resultado
de la prueba puede ser calculado y aceptado. Si el coeficiente de
variacin excede de los lmites mencionados, cuente y pese otras
ocho repeticiones y calcule la desviacin tpica (S), para las 16
repeticiones. Descarte cualquier repeticin que difiera de la media
por ms del doble de la desviacin tpica calculada.

CONTENIDO DE HUMEDAD

El contenido de humedad es uno de los factores ms importantes


que afectan las semillas. El efecto de la humedad sobre el
mantenimiento de la calidad de semillas tiene an mayor
importancia. Semillas secas y sanas pueden ser mantenidas bajo
almacenamiento apropiado por mucho ms aos; en tanto,
semillas hmedas se pueden deteriorar en tan slo unos cuantos
das. Es bien conocido que el tiempo de almacenamiento de
semillas disminuye a medida que el contenido de humedad
aumenta. As el contenido de humedad ha tenido un efecto
dominante en el predominio y en la actividad de insectos y hongos
durante el almacenamiento.

36 17
Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Este anlisis puede ser determinado por dos mtodos: el directo BIBLIOGRAFA
e indirecto.
Amaral, A.D. S. y Peske, S.T. 1984. pH exudado para estimar en 30 minutos,
viabilidad de sementes desoja. Revista Brasilea de Sementes 6(3):85-92
El mtodo directo, es por medio de la estufa. Este mtodo es el ms
confiable. Se recomienda el secado de semillas a 103 C 3 C Association Of Official Seed Analysts (1993). Journal Of Seed Technology.
por un perodo de 17 horas o a una temperatura de 130C 1 Volume16 Number 3. Bozeman, Montana.
C por un perodo de cuatro horas.
Curso sobre recoleccin y manejo de germoplasma forestal ____ Programa
Se calcula mediante la siguiente frmula: Nacional de Reforestacin.

100 Douglas, J.G. 1980. Successful seed Programes: A planning and


(M2-M3) * management guide. Wetview Press. Boulder, Colorado. 1980.
M2 - M1
Garay E. A. 1981. Calidad de la Semilla y su Importancia en la
Donde: Productividad.
M1= peso en gramos de la caja de aluminio y su tapa. Curso Tecnologa de Semillas. Cali, Colombia.
M2= peso en gramos de la caja, su tapa y la semilla entera.
International Seed Testing Association (1996). Rules for Seed Testing. Seed
M3= peso en gramos de la caja su tapa y la semilla despus del
Sc. And Tech. 13 (2). The Netherlands.
perodo de secado en la estufa.
International Seed Testing Association (2004). Rules for Seed Testing. Seed
Se expresa en porcentaje. Sc. And Tech. 24 (Supplement).

Los mtodos indirectos son algunos aparatos electrnicos: Johnson, J.R. 1979. An Introduction to Seed Technology. Leonard Hill. Great
Britain.
MOTOMCO, DOLE, etc; para las especies con las cuales se
trabaja, se tendra que realizar una serie de pruebas para calibrar Moreno Martnez Ernesto (1996). Anlisis Fsico y Biolgico de Semillas
estos aparatos. Agrcolas, Universidad Autnoma de Mxico. Tercera Edicin, Mxico D.F.

Moreno, M. E. 1988. Manual para la identificacin de Hongos en Granos de


Almacenados y sus Derivados. Universidad Nacional Autnoma de Mxico.
Mxico. 1 Edicin.

Paquetes Tecnolgicos ______. CONABIO-CONAFOR.

Paredes, M. G. 1999. Control de Calidad en la Produccin de Semillas.


Reunin de Trabajo Unidad de Control de Calidad. PRONASE Guadalajara.
Agosto 1999.

Perritti, A. 1994. Manual para Anlisis de Semillas. Instituto Nacional de


Tecnologa Agropecuaria. Ed. Hemisferio Sur. Buenos Aires, Argentina.

Warham E. J., Butler L. D. Sutton B. C. Ensayos para la semilla de Maz y Trigo,


Manual de laboratorio. CIMMYT, Mxico.

18 35
Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Para la preparacin de un litro de medio se utiliza: ANLISIS FISIOLGICO


20 gramos de Agar Bacteriolgico. VIABILIDAD
20 gramos de Extracto de Malta.
60 gramos de Cloruro de Sodio. Con Sal de Tetrazolio
Se mezclan en un matraz Erlenmeyer con agua destilada.
Se coloca un tapn de algodn seguido de una envoltura de Esta prueba se fundamenta en la reaccin bioqumica de ciertas
papel estraza. enzimas de las clulas vivas con la sal de tetrazolio, la cual consiste
Se introduce el matraz en un autoclave a una presin de 18 en la reduccin de ste hasta formar un compuesto rojo llamado
2
libras/pulg y 120C por 15 min. formazan.
Se vaca el medio en cajas petri estriles dentro de una cmara
de flujo laminar y se guardan en un refrigerador hasta que vayan Es til para el anlisis de semillas latentes, as como para
a ser utilizadas. complementar los datos obtenidos en una prueba de germinacin
y en el diagnstico de las causas del deterioro de las semillas.
Modo de siembra en las placas de Agar Debe llevarse a cabo solamente con semillas que no muestren
signos de brote de rganos germinales; es decir, que no hayan
Se realizan tres repeticiones de 10 semillas, stas debern ser estado en condiciones adecuadas de humedad y temperatura
tomadas al azar de unas submuestras despus de un mezclado para iniciar su germinacin.
completo.Se desinfectan las semillas con hipoclorito de sodio al
2% durante un minuto, posteriormente se siembra en el medio y se Materiales
incuba a 27 C por siete das.
Solucin de tetrazolio al 0.1 % y 1 %.
Cajas petri.
Identificacin de patgenos Pinzas.
Bistur.
Se pueden identificar a simple vista por la forma, tamao y color Papel aluminio.
de las colonias, de cada patgeno presente en la placa de agar Lmpara con lupa.
con ayuda de literatura para su identificacin. Estereoscopio.
Agujas.
Con una aguja de diseccin se toma una muestra del patgeno a
identificar. Se coloca en un portaobjetos con una gota de Metodologa
lactofenol y se cubre delicadamente con un cubreobjetos. Se
procede a ver en un microscopio compuesto con el objetivo de 10x La solucin al 1.0% es usada para semillas que no han sido
para localizar la estructura del hongo, despus con el objetivo bisectadas y expuesto el embrin, mientras que la solucin al 0.1%
40x, para una mejor visin. Por ltimo se identifica el hongo con son utilizados en semillas donde el embrin es bisectado. Tambin
ayuda de manuales de estructuras de hongos presentes. Todo sto se utilizan otras concentraciones como 0.2 % o 0.5 %.
se realiza cerca de una lmpara de alcohol para evitar
contaminaciones. Se cuentan al azar 400 semillas. El nmero de repeticiones en la
prueba depender de la premura y precisin con que se quiera
obtener la informacin.

34 19
Manual de Ensayos de Semillas Forestales Manual de Ensayos de Semillas Forestales

Acondicionamiento Preparacin de medio de cultivo Agar Papa-Dextrosa (PDA)

Con excepcin de semillas pequeas y con testa permeable, las Material:


dems requieren de un acondicionamiento previo para facilitar el Agar Papa-Dextrosa.
contacto de la solucin con los embriones. Este Agua destilada.
acondicionamiento consiste en humedecer la semilla, la cual en Matraz Erlenmeyer.
algunas ser suficiente para hacerlas permeables al paso de la Mechero Fisher.
solucin de tetrazolio, y en otras ser necesario realizar un corte o Autoclave.
remover la testa y posteriormente humedecer para luego llevarla a Balanza analtica.
la solucin de tetrazolio. Campana de Flujo Laminar.
Cajas Petri de plstico estriles.
En otras especies, el humedecimiento no es suficiente para
permeabilizar su testa, pero facilita la biseccin, puncin o Para la preparacin de un litro de medio se utiliza:
remocin de la testa. 39 gramos de PDA.
Se disuelve en un matraz por calentamiento hasta que no haya
Tincin grumos.
Se coloca un tapn de algodn seguido de una envoltura de
Para efectuar la tincin de las semillas hay que colocarlas en un papel estraza.
recipiente acorde con su tamao: vidrios de reloj para semilla Se introduce el matraz en un autoclave a una presin de 18
pequeas; cajas petri u otros recipientes como vasos de libras/pulg2 y 120C por 15 min.
precipitado, para semillas ms grandes. stas debern quedar Se vaca el medio en cajas petri estriles dentro de una cmara
completamente cubiertas por la solucin de tetrazolio. de flujo laminar y se guardan en un refrigerador hasta que vayan
a ser utilizadas.
Cubrir el recipiente con papel aluminio y poner en la estufa
durante 18 horas a 30 grados. Preparacin de medios de cultivo Malta Sal Agar (MSA)

Evaluacin Material:
Agar Bacteriolgico.
La evaluacin de la viabilidad de las semillas mediante la prueba Extracto de Malta.
de tetrazolio se puede hacer a travs de las indicaciones del ISTA. Cloruro de Sodio (Sal comn).
Hay que enfatizar que existen tejidos esenciales para el desarrollo Agua destilada.
de una plntula normal, como lo son meristemos y dems Matraz Erlenmeyer.
estructuras reconocidas como vitales, para que al germinar las Mechero Fisher.
semillas, stas den lugar a plntulas capaces de establecerse en Autoclave.
campo y llegar hacer plantas productivas. Balanza analtica.
Campana de Flujo Laminar.
El analista debe concentrar su atencin en los tejidos Cajas Petri de plstico estriles.
vitales(embrin y tejidos de reserva).

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EXAMINACIN CON INCUBACIN Viabilidad Mediante pH de Exudados

Mtodo de Placas de Agar La prueba de pH de exudados es relativamente reciente en


implementacin. Fue propuesta por Amaral y Peske en 1985. Ha
Son usadas para obtener crecimientos identificables de sido empleada con resultados favorables en soya, maz, frjol;
microorganismos en las semillas. Pueden emplearse medios de aunque es posible utilizarla en otras especies realizando los ajustes
cultivo generales, que permitan el desarrollo de diversos necesarios en las concentraciones de los reactivos y en el tiempo
patgenos, o bien, medios especficos que favorecen el desarrollo de remojo de la semilla.
de determinados organismos. La prueba se basa fundamentalmente en la determinacin por
medio de soluciones tituladoras colorimtricas del pH producido
Permiten el desarrollo de hongos y de sntomas. Existen variaciones por los exudados de las semillas despus de un perodo de remojo.
en cuanto a las condiciones de incubacin aunque en general las
semillas de especies de zonas templadas se incuban entre 14C y Cuando la semilla es de mala calidad presentar exudados altos
20C, los de zonas tropicales a 28C. Se recomienda el uso de la que darn un pH cido, mientras que semilla de buena calidad
luz ultravioleta durante 12 horas y 12 horas de oscuridad para tendr exudados bajos con un pH alcalino.
favorecer la esporulacin de los hongos.
Material
Materiales Charolas de plstico de 100 compartimentos individuales con
capacidad de al menos 2.5 4 cm cbicos cada uno.
Solucin de hipoclorito de sodio (cloro comn) al 2%. Agitador de vidrio.
Alcohol etlico. Dos goteros.
Solucin de lactofenol. Cajas Petri con PDA (agar papa- Agua destilada (pH6-7).
dextrosa). Fenolftaleina al 0.5 % (1 gr. De fenolftaleina en 100 ml. de
Cajas Petri con MSA (Malta Sal Agar). alcohol ms 100 ml. de agua destilada, ms NaOH al 0.01 N,
Papel filtro estril. hasta adquirir tono rosa tenue).
Algodn. Carbonato de Sodio Na2CO3 al 0.16 % (0.16 g en 100 ml. de
Colador. agua destilada).
Pinzas.
Aguja de diseccin. Procedimiento
Frasco con tapa. 1. Colocar dos repeticiones de 100 semillas de la fraccin de
Lmpara de alcohol. semilla pura, depositando una semilla par cada
Campana de Flujo Laminar. compartimiento de la charola.
3
Incubadora a 23-25C. 2. Agregar 2 cm de agua destilada en cada compartimiento.
Microscopio Compuesto. 3. Dejar imbibir las semillas por espacio de 30 minutos a una
Microscopio Estereoscopio. temperatura ambiental. Posterior a la imbibicin, colocar una
Portaobjetos. gota de Na2CO3 y una gota de fenolftaleina.
Cubreobjetos. 4. Agitar durante dos segundos.
Cinta adhesiva transparente.

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Procedimiento ANLISIS SANITARIOS

1. Colocar dos repeticiones de 100 semillas de la fraccin de La calidad de la semilla se ve fuertemente afectada por los hongos
semilla pura, depositando una semilla par cada compartimiento que se alojan en ellas causando diferentes daos; si la infeccin
de la charola. es muy severa, el dao puede ocasionar la muerte del embrin.
3
2. Agregar 2 cm de agua destilada en cada compartimiento.
3. Dejar imbibir las semillas por espacio de 30 minutos a una Todas las semillas son invadidas por diversos microorganismos
temperatura ambiental. Posterior a la imbibicin, colocar una durante su desarrollo en el campo, siendo los hongos los ms
gota de Na2CO3 y una gota de fenolftaleina. abundantes y la principal causa de enfermedades, ocasionando
4. Agitar durante dos segundos. severas prdidas econmicas al reducir el potencial fisiolgico de
las semillas.
Interpretacin de los resultados
La principal diferencia entre los hongos de campo y los hongos
La interpretacin de los resultados se basa en las tonalidades de de almacn son los requerimientos de agua para crecer. Los
color rosa que alcance cada compartimiento. Una coloracin rosa hongos de almacn, especies de Aspergillus y Penicillium, causan
fuerte corresponder a semillas con alta capacidad germinativa, diversos daos a semillas almacenadas, siendo lo ms
que producirn plntulas normales; una coloracin rosa tenue sobresaliente la reduccin del poder germinativo.
provendr de semillas que originarn plntulas anormales y si
existe ausencia de tincin, simplemente las semillas no tienen
capacidad germinativa. Objetivo

Determinar el nivel de sanidad de una muestra de semillas y


GERMINACIN ESTNDAR determinar el tipo de tratamiento a seguir.

La germinacin en el laboratorio es la mayor emergencia y EXAMINACIN SIN INCUBACIN


desarrollo de la plntula hasta un estado tal, donde el aspecto de
sus estructuras esenciales manifiestan si la semilla es o no capaz de Inspeccin externa- semilla seca.
desarrollar una planta normal bajo condiciones favorables.
Este parmetro es utilizado para definir la densidad plantas en Se basa en la limpieza de la semilla y los cambios externos que
campo. muestre como consecuencia del desarrollo del patgeno. Las
semillas se observan en seco con la ayuda de una lupa o
microscopio. Pueden distinguirse estructuras de hongos. Tambin
pueden observarse alteraciones de color, manchas,
enegrecimiento del embrin, presencia de crecimiento fungoso en
la semilla, fructificaciones de hongos, etc.

Esta prueba tambin es realizada en la germinacin, al observar


estructuras de hongos en el sustrato.

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PRINCIPIOS A SEGUIR EN PRUEBAS DE


GERMINACIN DE ACUERDO A LAS REGLAS DE
ANLISIS DE SEMILLAS

MUESTRA DE TRABAJO. Esta prueba se debe hacer con semilla


resultante del anlisis de pureza, es decir, semilla pura. Se deben
poner 400 semillas distribuidas en cuatro repeticiones, en el
sustrato correspondiente. En cuanto al nmero de semillas a
utilizar en esta prueba, por lo general est definido por la reglas de
la ISTA, existiendo algunas excepciones prcticas en especies
donde la semilla es demasiado pequea, pues en ellas es
imposible o muy difcil separar la semilla de la materia inerte o
granzas que la acompaan. En estos casos el ensayo se efecta
con el mismo nmero de rplicas, pero stas son de igual peso y no
de igual nmero de semillas.
SUSTRATO. Para proveer humedad adecuada y sostn a las
semillas durante el ensayo, existen diferentes tipos de sustratos
para realizar esta prueba.
a) PAPEL. La porosidad de este debe ser tal, que pueda
retener la humedad y no tenga sustancias txicas que
puedan afectar la germinacin; adems, que permita el
desarrollo de las races sobre la superficie y no dentro.
Sobre papel. Las semillas son colocadas sobre una capa
o dos capas de papel y se colocan en una caja petri, para
posteriormente ser enviadas a la cmara de germinacin.
Entre Papel. Las semillas son colocadas entre hojas de
papel, que debe quedar enrollado y acomodarse en forma
vertical o inclinado en la germinadora, pero nunca
horizontal.

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b) ARENA. Las semillas se colocan MTODOS PARA ROMPER LATENCIA


en una capa de arena de 2cm y se
cubren con otra capa igual sin La latencia es una condicin en donde una semilla viable no
compactar. sta debe estar germina aun cuando se le proporcionen los medios adecuados de
esterilizada y se utiliza en semillas luz, temperatura, humedad y aireacin. La latencia no es
difciles de ensayar en papel, por considerada como un estado permanente de la semilla, ya que
problemas de enfermedad. pueden cambiar en ocasiones de latentes a no latentes y viceversa.
En la propagacin de plantas cuyas semillas presentan algn tipo
c) SUELO. En algunos casos es de latencia, es necesario recurrir a una aplicacin de un
posible utilizar suelo, en lugar de los tratamiento que facilite la germinacin, con el propsito de
sustratos anteriores, cuando la obtener producciones de plantas uniformes y reducir los periodos
semilla tiene exceso de tratamiento de germinacin.
qumico y presenta fitotoxicidad. El principal problema que se tiene con las semillas latentes es el
Es conveniente repetir la prueba en suelo para una mejor poder elegir el mejor tratamiento para estimular la germinacin.
evaluacin de la germinacin o tambin se hace cuando es Existen recomendaciones generales por tipo de semillas o por tipo
dudoso en papel. de latencia. Lo ms recomendable es desarrollar los
requerimientos especficos para cada especie y en cada vivero.

Condiciones Estndar Cuando en una prueba de germinacin existan semillas frescas o


latentes, se podr recurrir a otra prueba despus de un perodo de
almacenamiento en un medio seco, pero tambin se pueden
aplicar los mtodos descritos en el anexo I. El uso de un
tratamiento especial debe registrarse en los resultados de la
prueba.
HUMEDAD Y AIREACIN.
Tipo de Latencia Factores que las Causan Tratamiento para Romperla
El sustrato debe tener suficiente
L a t e n c i a Mecnica. Resistencia mecnica de la Destruccin del pericarpio o
humedad para suplir las exgena (es cubierta al crecimiento del cubierta de la semilla
necesidades de agua de la semilla. debida a las embrin. (rosceas, tejocote,
p a r t e s chabacano,ciruelo,
Nunca deber estar tan hmedo, ya exteriores de la durazno).
semilla, testa o
que forma una pelcula de agua pericarpio)
Fsica. Impermeabilidad de la Escarificacin inmersin en
semilla al agua. agua caliente o en cidos
alrededor de la semilla lo cual evita (leguminosas).
la aireacin. Qumica. Inhibidores en el pericarpio. Remocin del pericarpio o
lixiviado en agua
caliente(pirul, palo dulce).
TEMPERTATURA. Las diferentes especies de semillas tienen
L a t e n c i a Morfolgica. Desarrollo incompleto del Tratamiento con humedad y
requerimientos diferentes de temperatura para su germinacin. Es endgena (es embrin. temperatura tibia (Atriplex,
recomendable utilizar cmaras o estufas germinadoras con debida a las anona).
estructuras
control de temperatura. En ausencia de stos, se puede utilizar un internas de las
Fisiolgica. Inhibicin fisiolgica del Tratamiento en humedad y
m e c a n i s m o d e fro (estratificacin)
cuarto germinador en donde sea posible mantener una semilla)
germinacin. Rosceas. (Pinaceas).
temperatura de 20 - 25 C.

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Clculo y Expresin de Resultados Evaluacin de Plntulas

El resultado de la prueba de germinacin se obtiene con el Generalidades de Plntulas Normales


promedio de las 4 repeticiones de 100 semillas y se expresa como
porcentaje de plntulas normales. nicamente de las plntulas Se consideran plntulas normales aquellas que poseen sus
normales de los dos conteos. El porcentaje de plntulas anormales estructuras esenciales para producir una plntula en sustrato bajo
y dems semillas se calcula igual, debiendo sumar todo 100. condiciones de agua, luz y temperatura.

ndices Compuestos para Semillas Cuando la prueba de germinacin haya sido en sustrato artificial,
se consideran plntulas normales aquellas que presenten las
En semillas algunas especies Forestales, la informacin en forma siguientes estructuras esenciales:
individual de la condicin fsica y fisiolgica de un lote de semillas - Sistema radicular bien desarrollado, incluyendo raz primaria,
no es suficiente para interpretar si es una semilla buena o de mala excepto para aquellas plantas, por ejemplo gramneas, que
calidad. As la pureza analtica y la capacidad de germinacin generalmente presentan races seminales, de las cuales
pueden ser combinadas y expresadas en un valor conocido como deben estar presentes cuando menos dos de ellas.
ndice Compuesto o Valor Cultinal y se tienen los siguientes ndices - Hipoctilo bien desarrollado e intacto y/o un epicotilo sin
compuestos: dao en el tejido conductor.
- Un cotiledn en monocotiledneas y dos cotiledones en
dicotiledneas.
% SP * % Germinacin
Semilla Pura Germinable = Aquellas que presenten los siguientes defectos ligeros, siempre y
100
cuando el resto de sus estructuras revelen un desarrollo
vigoroso y balanceado
% SP * % Vt - Plntulas de todas las especies de semilla grande que presenten
Semilla Pura Viable Pura Total = una raz primaria daada, pero con races adventicias y
100
laterales lo suficientemente largas y vigorosas como para
sostener la plntula en el suelo.
% SP * VTZ - Plntulas con dao superficial o deterioro en el hipoctilo,
Semilla Pura Viable en TZ = epicotilo o cotiledones, siempre y cuando el dao no afecte
100
los tejidos conductores.
- Plntulas dicotiledneas que presenten solamente un
cotiledn sano.

% SP * % E Aquellas que estn invadidas por hongos y bacterias, siempre y


Semilla Pura Emergente =
100 cuando sea evidente que la fuente de infeccin no es la semilla,
y que presenten las estructuras esenciales.

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Aquellas que presentan las estructuras esenciales bien Plntulas con estructuras esenciales deterioradas por hongos o
desarrolladas e indicativas de su habilidad para producir plantas bacterias, excepto en el caso que se determine que dicha infeccin
normales bajo condiciones favorables de suelo. Las plntulas no provienen de la semilla.
normales pueden ser de 3 categoras:
1. Plntulas intactas: Pueden presentar una combinacin de Aqullas que presentan una combinacin de defectos en sus
estructuras esenciales como: sistema de raz bien estructuras esenciales que limitan la continuacin de su
desarrollado, sistema apical bien desarrollado; nmero crecimiento y desarrollo. Estos defectos son bien marcados y
especfico de cotiledones; hojas primarias verdes y varan segn las especies.
expandidas; brote terminal o pice; coleptilo rgido y bien
desarrollado.
2. Plntulas con ligeros defectos: Muestran ligeros defectos en Generalidades de las Semillas sin Germinar
las estructuras anteriores o cierto retardo, sin que esto limite
su crecimiento y desarrollo. Estas pueden ser semillas duras, incapaces de absorber humedad,
3. Plntulas con infeccin secundaria: Aqullas daadas por presentes en muchas especies forestales del semidesierto. Tambin
hongos bacterias, pero que es evidente que la semilla misma pueden ser semillas frescas que resultan por latencia fisiolgica,
no es la fuente de la infeccin y se observa que las estructuras son capaces de absorber humedad pero su desarrollo es
esenciales estaban presentes. bloqueado.

Generalidades de Plntulas Anormales Semillas Duras


Son aqullas que permanecen duras al final de la prueba de
Las que no se pueden clasificar como normales por tener alguna germinacin, ya que no absorben agua porque tienen cubierta
deficiencia en desarrollo de sus estructuras esenciales, lo que les impermeable.
impide su desarrollo cuando crece en sustrato y en condiciones
favorables de agua, luz y temperatura. Semillas Latentes
Se denominan as las semillas viables (diferentes de las semillas
Las que presenten los siguientes defectos al germinar en su sustrato duras) que no germinan aun cuando estn bajo las condiciones
artificial: que se especifican para dicha especie. La viabilidad de esta
Plntulas daadas, sin cotiledones con fisuras o lesiones que semilla se puede determinar con la prueba de tetrazolio y su
daen el tejido conductor de hipoctilo, epicotilo o raz; sin raz germinacin se puede acelerar mediante escarificacin y
en aqullas especies donde esta estructura es esencial. aplicacin de sustancias promotoras de la germinacin. Se debe
Plntulas deformes, con desarrollo dbil o desequilibrado de las registrar el porcentaje de semillas latentes.
estructuras primordiales: plmulas retorcidas en espiral;
plmulas y epicotilos poco desarrollados; talluelos hinchados y Semillas Muertas
races sin desarrollo; plmulas hendidas o coleptilos sin hojas Aquellas que no germinen y que no se les clasifique como latentes
verdes; plantas acuosas o bien que no presentan desarrollo o duras, debern ser consideradas como semillas muertas. Se
despus de haber salido de los cotiledones. debe registrar el porcentaje de este tipo de semillas. No muestran
ningn signo de desarrollo y comnmente estn flcidas,
decoloradas y con presencia de hongos.

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