UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

CENTRO UNIVERSITARIO DE OCCIDENTE

DIVISIN DE CIENCIA Y TECNOLOGA

EVALUACIN DEL EFECTO DE (Beauveria Bassiana) y (Metarhizium Anisopliae),

CON TRES DOSIS PARA EL CONTROL DE VARROASIS (Varroa destructor)
ECTOPARSITO DE (Apis mellifera). EN SAN PABLO, SAN MARCOS.

Por:
Investigador Principal: Ing. Agr. Pablo Osmani Lpez Xicar

Asociado Mara Helda Leticia Chay Santizo

Auxiliar Csar Ismael Lpez Prez

QUETZALTENANGO, ABRIL 2017

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Contenido
1. INTRODUCCIN ...................................................................................................................... 1
2. MARCO TERICO .................................................................................................................... 2
2.1. Produccin de Miel ............................................................................................................. 2
2.2. Datos importantes de la abeja.............................................................................................. 2
2.3. Sanidad ................................................................................................................................ 2
2.4. Enfermedades Producidas por caros ................................................................................. 2
2.4.1. Varroasis...................................................................................................................... 3
2.4.2. Caractersticas Morfolgicas del caro ...................................................................... 3
2.4.3. Ciclo de Vida de la Varroa .......................................................................................... 5
2.4.4. Sintomatologa ............................................................................................................ 6
2.4.5. Formas de diseminacin del caro .............................................................................. 7
2.4.6. Diagnostico.................................................................................................................. 7
2.4.7. Diagnstico en la cra .................................................................................................. 9
2.4.8. Alternativas de control .............................................................................................. 10
2.4.9. Tratamientos contra Varroa destructor ...................................................................... 10
3. OBJETIVOS ............................................................................................................................. 14
3.1. Objetivo General ............................................................................................................... 14
3.2. Objetivos especficos......................................................................................................... 14
4. HIPTESIS ............................................................................................................................... 15
4.1. Hiptesis nula .................................................................................................................... 15
4.2. Hiptesis alternativa .......................................................................................................... 15
5. METODOLOGA ..................................................................................................................... 16
5.1. Definicin del mtodo de investigacin ............................................................................ 16
5.2. Contexto micro espacial y temporal de la investigacin ................................................... 16
5.3. Diseo experimental .......................................................................................................... 16
5.4. Descripcin de Tratamientos ............................................................................................. 18
5.5. Distribucin espacial de los tratamientos a evaluar .......................................................... 18
Croquis del ensayo en campo .................................................................................................... 18
5.6. Variables de la investigacin............................................................................................. 19
5.7. Tcnicas de anlisis de datos ............................................................................................. 19

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 5.8. Manejo del Experimento ................................................................................................... 20
6. CRONOGRAMA ...................................................................................................................... 22
7. PRESUPUESTO ....................................................................................................................... 23
8. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ...................................................................................... 27
9. ANEXO ..................................................................................................................................... 28

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 1. INTRODUCCIN

Los hongos entomopatgenos son organismos de importante valor ecolgico al

desempear funciones de regulacin sobre insectos, quienes debido al mal manejo de
pesticidas realizado por el humano para su control se han convertido en plagas
incontrolables y resistentes, convirtiendo a los hongos entomopatgenos en una opcin
viable para la elaboracin de bioplaguicidas que permitan el control de los mismos sin
contaminacin y deterioro del medio ambiente; no obstante, se debe tener en cuenta que el
impacto en el ambiente puede ser negativo al controlar especies de insectos benficas como
es el caso de las abejas (Api mellifera), polinizadoras por excelencia en el ecosistema.

El desarrollo de productos a base de hongos entomopatgenos debe involucrar

investigacin para determinar el nivel de interaccin del hongo con su hospedero y con el
medio ambiente, la concentracin del producto y el mtodo de formulacin adecuado que
permita llevar estos microorganismos a condiciones de campo para que desempeen una
funcin de buena capacidad reguladora de las plagas dentro del agroecosistema.

Por lo que la presente investigacin plantea el uso de un control biolgico con diferente
dosis, prctica que en los ltimos aos ha cobrado creciente inters, debido a la
preocupacin por contar con nuevas formas de control de plagas no contaminantes y ms
amigables con el medio ambiente.

A partir de ello determinar el efecto de los hongos con diferentes concentraciones para el
control y disminuir las poblaciones de Varroa destructor sobre las abejas Apis mellifera en
colmenas.

Por lo anterior, se considera de vital importancia la investigacin debido a la carencia de

alternativas para el control de plagas y enfermedades en la regin, siendo esta una
alternativa factible amigable con el ambiente, conjuntamente se estar favoreciendo al
incremento de rendimiento de miel que conllevara a la mejora en la calidad de vida de la
poblacin.

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2. MARCO TERICO

2.1. Produccin de Miel

En Guatemala la produccin de miel es uno los principales productos exportables
a nivel mundial, apreciada especficamente en pases de la Unin Europea, Alemania,
Reino Unido y Espaa (respectivamente), asimismo Estados Unidos, Inglaterra,
Japn, Austria, Italia, Holanda, Suiza y Blgica; por lo menos el 80% de la miel es
exportada y un 20% es para consumo en el pas, de forma cuantificada se tiene un
estimado de 3 a 4 millones de dlares, beneficiando la economa nacional.. El precio
a pequea escala vara desde los Q30.00, Q60.00 o Q100.00, segn factores de lugar,
la calidad y tipo de miel (Arevalo, 2017).

Segn la base de datos del Registro Guatemalteco Apcola -REGAPI-, existen por lo
menos un total de 1,465 apicultores registrados, que mantienen la produccin en diferentes
partes del pas (MAGA, 2015). Los departamentos que estn involucrados en la
produccin son: San Marcos, Quetzaltenango, Retalhuleu, Suchitepequez y Huhuetenango,
entre otros (Arevalo, 2017).

2.2. Datos importantes de la abeja

Es importante conocer las caractersticas de las castas en la colmena, la abeja reina es
la nica hembra frtil, posee alas pequeas y angostas, el cuerpo es ms largo y delgado
que el zngano, este el macho en la colmena y colabora en la elaboracin de miel,
repartiendo alimentacin entre las obreras; las hembras infrtiles y de menor tamao son
denominadas abejas obreras.

2.3. Sanidad
Las colonias de abejas son desarrolladas, los miembros son
interdependientes, es decir, ninguno de ellos puede sobrevivir aislado, sino dentro del
conjunto, siendo unidades biolgicas bsicas, capaz de regular su temperatura a travs
de mecanismos que requieren de un gasto energtico. Segn lo anterior, la colmena
saludable es la que tiene una adecuada condicin corporal, cantidad adecuada de
abejas por marco, cra y reservas (miel y polen), asimismo presentando ausencia de
manifestaciones de enfermedad (Jos Vaquero).

2.4. Enfermedades Producidas por caros

Existen enfermedades que son producidas por agentes etiolgicos, siendo uno de los
principales, los caros de Varroa destructor (Jos Vaquero).

2
 2.4.1. Varroasis
Se denomina varroasis a la enfermedad producida por el ataque del ectoparsito Varroa
destructor, un caro que parasita a las abejas adultas y a sus cras. En las abejas adultas,
penetra las placas abdominales para succionar la hemolinfa, sin embargo es comn tambin
verla localizada entre la cabeza y el trax (Montenegro, 2016).

Adems de ser ectoparsito obligado, es un parsito fortico, se desplaza de una

colmena a la otra siendo transportado por las mismas abejas, este se alimenta de la
hemolinfa, el curso de invasin y destruccin es lento, provocando el colapso de la
colonia en un plazo de 3 a 4 aos en un clima templado [] El desarrollo de la
varroasis pasa inadvertido desde el punto vista clnico durante un periodo de uno a
tres aos, posteriormente aumenta el nmero de parsitos, se debilitan las colonias y
su productividad disminuye. Finalmente la infestacin es intensa y hay un alto riesgo
de desaparicin de las colonias si no se les aplica ningn tratamiento (Barrios Rivera,
2012).

2.4.2. Caractersticas Morfolgicas del caro

Segn Barrios Rivera, las caractersticas que presentan difieren segn su sexo, dentro de las
cuales se encuentran las siguientes: (Fig. 1).

Hembra:
- Las hembras son ms anchas que largas, es decir 800 - 1,500 m de longitud por
1,300 1,900 m de anchura.
- Forma del cuerpo es elipsoidal de color castao claro a oscuro.
- Presenta numerosos pelos rgidos que le permiten desplazarse y sujetarse al
hospedero, su escudo dorsal cubre todo el cuerpo (idiosoma), con los bordes
encorvados hacia la parte ventral.
- El aparato bucal (gnatosoma) est adaptado para picar y chupar, formado por 2
piezas mviles o quelceros.
- Presentan rganos sensitivos en el primer par de patas, que hacen el papel de
antenas y permiten la fijacin sobre las abejas.
- Se orientan a las abejas debido al olor, vibraciones y sonidos.

Macho:
- Largo aproximado de 750 m a 900 m y un ancho de 700-900 m.
- Color blanco amarillento.
- Menor consistencia, traslcido, piriforme y muy poco esclerotizado.

Jos Vaquero tambin indica de que se localiza nicamente en el interior de las celdas
de cra, no se alimenta y vive pocos das.
- No son capaces de sobrevivir fuera de la cra operculada,
- No pueden alimentarse por s mismos porque el aparato bucal es usado
exclusivamente para transferir esperma al tracto genital de la Varroa hembra.

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Fig. 1 Vista dorsal y ventral de una hembra de V. destructor
Fuente: (Formato G., 2017)

Fig. 2 Macho y hembra en acoplamiento

Fuente: (Formato G., 2017)

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 2.4.3. Ciclo de Vida de la Varroa
El ciclo biolgico del caro en su etapa adulta se divide en dos fases: fortica (del griego
fores, cargar), y reproductiva. En la fortica el caro, parasita sobre el cuerpo de la abeja
y en la reproductiva los caros se introducen al interior de las celdas con cra operculada
(Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias, 2011)

Fig. 3 Ciclo biolgico del caro en su etapa adulta

Fuente: (Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias, 2011)

La hembra del caro Varroa vive sobre el adulto de la obrera mientras no est en la etapa
reproductiva. A sta etapa se llama estado fortico. La etapa reproductiva del caro se lleva
a cabo dentro de la celda operculada de la obrera o del zngano coincidiendo con las etapas
pupales de la metamorfosis de la abeja melfera.

Los machos adultos del caro no pueden vivir fuera de la celda operculada. Para
reproducirse, la hembra se introduce en las celdillas que contienen las cras de abeja
alrededor de 24 y 48 horas antes del sellado de las celdillas. Una vez la celda ha sido
operculada, comienza a alimentarse perforando con su aparato bucal la piel de la larva, y
luego de 2 das pone el primer huevo y cada un da y medio pondr otro ms, poniendo en
total 3 a 7 huevos. Los huevos se demoran 2 das en eclosionar y del primero generalmente
nacer un macho, que demora 3 a 4 das en convertirse en adulto. De los siguientes huevos
nacern hembras, que demoran 5 a 6 das en transformarse en adultos. Luego se lleva a
cabo el apareamiento dentro de la misma celdilla y una vez que la abeja nace y rompe el
oprculo, las hembras de Varroa salen con ella. El macho muere de inanicin, pues no es
capaz de alimentarse.

Solo 2 o 3 de las Varroas logran llegar a la etapa de adultas antes de que la abeja nazca, que
sumado a la madre, pueden llegar a salir con la abeja hasta 4 Varroas fecundadas.

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Al alimentarse de las abejas adultas, el caro busca las partes ms blandas para perforar,
siendo stos lugares los intersegmentos de los primeros segmentos de abdomen, la base de
las alas y las reas entre la cabeza y el trax y el abdomen. Esto hasta que el parsito vuelva
a bajar en una celdilla para reiniciar el ciclo (Montenegro, 2016).

Fig. 4 Sincronizacin del ciclo de desarrollo de Varroa con el ciclo de la abeja.

Fuente: (Vandame, 2000)

2.4.4. Sintomatologa

En las colonias de abejas fuertemente infestadas, los primeros sntomas clnicos de la

Varroasis comienzan a observarse normalmente durante el final de la temporada,
coincidiendo con la disminucin de las cras.

Los signos ms claros de la enfermedad son:

Reduccin del peso al nacer (-10 a 22%).

Malformacin corporal.
Reduccin tamao glndulas hipofarngeas.
Reduccin protena hemolinfa (-27 a 50%).
Introduccin y activacin de virus y bacterias.
Alteraciones anatmicas y fisiolgicas de znganos y su nmero decrece.
Reduccin de longevidad de abejas adultas.
Menor tolerancia agroqumicos debido a la reduccin peso cuerpos grasos.
Inmuno depresin de abejas y colonias.

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Slo en la etapa letal de las colonias aparecen los sntomas clnicos, tales como la atrofia de
las alas y el acortamiento del abdomen. Esto se debe a una elevada sensibilidad a virus que
deforman las alas y provocan parlisis aguda as como a la infeccin de heridas y prdida
de hemolinfa. Adems existe una reduccin de los anticuerpos por la prdida de hemolinfa
lo que hace a las abejas ms susceptibles al ataque de virus, bacterias y hongos.

2.4.5. Formas de diseminacin del caro

La diseminacin de la Varroasis de una colmena a otra o entre distintos apiarios se produce

principalmente por el contacto directo entre individuos sanos con individuos parasitados.
ste contacto se ve favorecido por conductas propias de las abejas como la deriva, abejas
que salen a pecorear y regresan a la colmena equivocada, los znganos que entran
libremente a cualquier colmena, el pillaje o ataque y robo de miel entre colmenas
(Montenegro, 2016).

2.4.6. Diagnostico
Se orienta a determinar de manera cuantitativa la presencia del parsito, estimando los
porcentajes de infestacin.

Al realizar el diagnstico, se debe muestrear el 10% de colmenas al azar, con un mnimo de

5 colmenas si el apiario es de 50 colmenas o menos. A continuacin se detallan 3 de los
mtodos ms utilizados para el diagnstico de Varroasis.

a) Prueba de David De Jong o del agua jabonosa

Es una tcnica muy sencilla y econmica. Se utiliza para diagnosticar la presencia de

Varroas en abejas adultas. Entrega un diagnstico bastante acertado del nivel de
infestacin, sobre todo en ausencia de cras. Las muestras se pueden analizar en terreno sin
problemas. Para llevarla a cabo hay que seguir los siguientes pasos:

Se debe preparar un envase o recipiente con un doble tamiz, el primero donde

queden atrapadas las abejas y el segundo donde queden retenidos los caros Varroa.
Tambin puede un recipiente con un tamiz, donde queden atrapadas las abejas y un
pao blanco donde se contarn las Varroas. Bien puede utilizarse un colador de
cocina para el tamiz ms grande.
En un frasco boca ancha con tapa, llenar partes con agua y una cucharada de
detergente para lavar loza o alcohol al 70%. En caso de que las muestras se enven a
un laboratorio, se debe llenar con alcohol al 70%.
Se abre la cmara de cras, y se obtiene un nmero de 200 abejas aprox. desde los
marcos con cra, deslizando el frasco desde arriba hacia abajo, para que las abejas
caigan. Esto se debe realizar en 3 marcos distintos, por ambos lados, para que la
muestra sea significativa. Al realizar este procedimiento, es muy importante iden-
tificar el marco donde est la Reina y dejarlo aparte, para que ella no caiga en el
frasco que se va a analizar.
Rotular el envase con fecha, colmena y apiario.
Agitar el frasco vigorosamente durante un perodo de al menos 30 segundos.
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 Se vaca el frasco en el envase de doble tamiz preparado. Lavar con agua, de forma
que las Varroas se suelten de las abejas y caigan hacia el tamiz ms fino, donde
quedarn retenidos.
Recuperar las abejas y repetir el procedimiento 2 veces ms.
En una superficie clara, como un pao blanco, se vaca el contenido del tamiz fino
donde estn retenidos los caros. De sta forma contamos la cantidad de Varroa que
ha cado.
Luego se cuenta la cantidad de abejas muertas.

Para calcular el nivel de infestacin, colocar los datos obtenidos en la Siguiente frmula:

Fuente: (Montenegro, 2016)

b) Mtodo del Piso Sanitario

El un mtodo utilizado para detectar la enfermedad y estimar el nivel de parasitismo de la

colmena. Adems, el mtodo que se utiliza para determinar la eficiencia que presenta el
producto.

Consiste en un piso mvil de madera cubierto por una malla metlica que permite el paso
de los caros cados, pero no el de las abejas para limpiarlo. En lugar de este piso puede
utilizarse una cartulina o una bandeja de plstico o chapa siempre provistas de malla que
impida la limpieza por parte de las abejas.

En cualquiera de los casos debe untarse alguna sustancia adhesiva como vaselina o aceite
vegetal hidrogenado para que queden adheridos los caros cados y despus recolectarlos
para el conteo (si se utiliza para pruebas de eficiencia no se debe colocarse sustancia
adhesiva). Al retirar el piso y al contar los caros muertos en forma natural obtenemos una
aproximacin del parasito de esa colonia (SENASA, 2005).

Para el conteo de Varroas se puede realizar a los 7 das despus. Al contar las Varroas, se
aplicar la siguiente frmula:

Fuente: (Montenegro, 2016)

Ejemplo: Si encontramos 21 Varroas, por un perodo de 7 das, el clculo queda as:

Varroas muertas por da = 21 7 = 3 Varroas muertas por da.

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Determinacin de Reduccin de Infestacin:

Fuente: (SENASA, 2005)

2.4.7. Diagnstico en la cra

ste mtodo permite calcular la carga de Varroa en la cra, con un alto grado de certeza. Lo
malo es que es necesario sacrificar cras y no es sencillo de realizar. Adems no da el total
de la carga parasitaria existente en la colmena. La evaluacin consiste en buscar caros en
celdas de cra operculada, preferentemente de znganos y si no hubiera, en cras de obrera.

Abrir la colmena y sacar un marco con cra operculada, preferentemente de

znganos.
Despejar muy bien de abejas.
Con una pinza, peine o aguja de diseccin, abrir las celdas y buscar la presencia del
caro, ya sea en el cuerpo de la pupa o en la celda. Desopercular y revisar al menos
50 celdillas.
Se debe anotar el nmero de las celdas donde se encontr Varroa.
Si no es posible realizar el ensayo en campo, cortar un pedazo de marco de unos
10x10 cm. Y llevarlo a un lugar donde poder realizar el conteo.

Para el clculo del nivel de infestacin, se aplica la siguiente frmula:

Si la tasa de infestacin es de: 5% o menos, infestacin baja que no requiere tratamiento.

Entre 5-10%, infestacin media, que no requiere tratamiento pero que nos mantiene alerta.
Sobre el 10%, infestacin alta que requiere tratamiento.
Ejemplo: Si se contaron 12 celdas con Varroa, y se desopercularon 63 celdas:

Esto da un total de 15.9% de infestacin, muy alta y requiere un tratamiento. Hay que
recordar que la tasa de infestacin se debe calcular para todo el apiario (Montenegro,
2016).

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 2.4.8. Alternativas de control
En la actualidad, las colonias infestadas con Varroa destructor son tratadas con productos
qumicos, que si bien permiten cierto grado de control, no eliminan al 100 por ciento la
parasitosis, adems, su uso ocasiona serios inconvenientes, entre los que destacan:

La resistencia que el caro ha desarrollado hacia estos productos, ya que muchos

acaricidas no eliminan al parsito que se encuentra protegido dentro de las
celdas de cra operculada.

Pueden dejar residuos que contaminan la miel, cera y otros productos, lo cual ha
generado amenazas de cierre de mercados para las mieles.

Son txicos, tanto para las abejas, como para el hombre, e incluso algunos pueden
ser carcinognicos.

El tratamiento qumico tiene un efecto directo sobre el incremento en el costo de la

elaboracin de miel y otros productos apcolas, debido al alto precio del
acaricida, as como al tiempo y mano de obra que se invierten en su aplicacin
(Imagen Veterinaria:, 2004).

2.4.9. Tratamientos contra Varroa destructor

Desde la aparicin del parsito en las colonias de A. mellfera, se han realizado distintos
experimentos con el fin de obtener un mtodo, que logre controlar el crecimiento
poblacional del caro. Se han probado un nmero considerable de sustancias y mtodos,
teniendo en cuenta la toxicidad para V. destructor y al mismo tiempo, los efectos sobre las
abejas. Entre ellos se encuentran los acaricidas sintticos, los cidos orgnicos, los aceites
esenciales (Evaluacion del efecto de Beauveria bassiana en el control biolgico de Varroa
destructor, parasito de la abeja melfera (Apis mellifera) en la finca Felisa en el municipio
de los Patios, Norte de Santander).

Para evitar los inconvenientes por el uso de acaricidas, actualmente se ha incrementado el

empleo de productos orgnicos naturales como los cidos frmico, lctico y oxlico.
Tambin se han empleado aceites esenciales como el timol y el mentol, adems de la
aplicacin de medidas biotcnicas: fomentar la cra de znganos para atraer de manera
natural a los caros y eliminarlos conjuntamente con la cra.

Una alternativa de control que an no ha sido explotada es el uso de agentes de control

biolgico, prctica que en los ltimos aos ha cobrado creciente inters, debido a la
preocupacin por contar con nuevas formas de control de plagas no contaminantes y ms
amigables con el medio ambiente. Adems, se dispone de ms informacin sobre la
biologa y produccin masiva de estos organismos, incluyendo los hongos que atacaban a la
varroa

Los hongos entomopatgenos tienen un gran potencial como agentes controladores,

constituyendo un grupo con ms de 750 especies, diseminados en el medio ambiente y

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provocando infecciones fungosas a poblaciones de artrpodos, entre los gneros ms
importantes estn: Metarhizium, Beauveria, Aschersonia, Entomophthora, Zoophthora,
Erynia, Eryniopsis, Akanthomyces, Fusarium, Hirsutella, Hymenostilbe, Paecelomyces y
Verticillium, para la FAO, los gneros de importancia son Metarhizium, Beauveria,
Paecilomyces, Verticillium, Rhizopus y Fusarium. (Hongos entomopatgenos como
alternativa para el control biolgico de plagas, 2011).

Antecedentes sobre el uso de hongos entomopatgenos (HEP) sealan que es posible

controlar caros en todos sus estadios, con hongos tales como Beauveria bassiana y
Metarhizium anisopliae. Ensayos de campo realizados sobre colmenas de abejas en Estados
Unidos han demostrado la capacidad de M. anisopliae para controlar V. destructor.

En Chile, desde el ao 2005, el Centro Tecnolgico de Control Biolgico del Instituto de

Investigaciones Agropecuarias -INIA-, (ubicado en el Centro Regional de Investigacin
Quilamapu, Chilln) en conjunto con la Universidad Austral de Chile y con el apoyo del
Fondo para la Innovacin Agraria (FIA), han estado desarrollando el proyecto Desarrollo
de un acaricida biolgico para el manejo no contaminante de Varroa destructor en
colmenares comerciales, cuyo objetivo es establecer una estrategia de manejo de varroa,
mediante la elaboracin y uso de un bioacaricida en base a HEP chilenos.

Hasta el momento los resultados obtenidos han permitido seleccionar un aislamiento del
hongo M. anisopliae denominado Qu-M845, que en ensayos de laboratorio ha logrado un
control del 98% de caros. Asimismo, en evaluaciones de terreno este aislamiento ha
logrado un control de 67% de varroas cuando se aplicaron las esporas sobre y entre los
panales de las colmenas en otoo. En aplicaciones en primavera este aislamiento
increment la cada de varroa en un 50% en comparacin a colmenas en las cuales no se
aplicaron estas esporas. La especificidad de este tipo de control asegura que su aplicacin
no daar a las abejas. Lo anterior, junto con la capacidad patognica del aislamiento
seleccionado para el manejo de Varroa destructor y su tolerancia a las condiciones
ambientales a las que ser expuesto, permite considerar a los HEP como una nueva
alternativa de control para esta plaga.

A si mismo de acuerdo a los resultados obtenidos, la infestacin en estado adulto de V.

destructor en A. mellifera africanizada en el muestreo realizado en la finca Felisa ubicada
en el municipio de Los Patios, registr porcentajes de infestacin en colmenas entre 3.4 % a
8.3%, en estado de cra la infestacin fue de 4.5% a 13.7%. Durante las pruebas de
laboratorio se logr observar que el hongo B. bassiana atac el caro realizando un control
eficaz sin perjudicar a las abejas, el propleo y la miel permitindole a este insecto seguir
con sus actividades normales, controlando la enfermedad de forma biolgica y no qumica.

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Beauveria bassiana
Es un hongo filamentoso de la clase Hyphomycete, divisin Deuteromicetes, es un
organismo eucaritico, hetertrofo que posee clulas quitinizadas y parasita otros insectos,
gracias a sus mecanismos fsicos y qumicos de infeccin.

Morfologa
Se caracteriza por presentar un micelio blanco, conformada por hifas septadas de 2,5 a 25
m de dimetro, de donde se forman conidiforos simples sencillos, irregularmente
agrupados o en grupos verticilados, con apariencia de jarrn (ms ancho en el centro que en
los extremos), en algunas especies hinchados en la base y adelgazndose hacia la porcin
que sostiene la conidia, originados de forma simpodial o acrpeta, dando una apariencia en
zigzag al raquis, las conidias son hialinas, redondeadas a ovoides y unicelulares, globosas a
subglobosas (2-3 2.0-2.5 m) y las estructuras conidiforas forman densos grupos.

Su reproduccin, no se a determinado la fase sexual, limitndose nicamente al estado

vegetativo; reportan que existe recombinacin para sexual, consiste en la formacin de un
heterocarin (una clula con dos o ms ncleos genticamente diferentes), donde se
produce la fusin de dos ncleos haploides diferentes para formar un ncleo diploide
heterocigoto; luego se produce una recombinacin mittica, reduciendo la informacin
gentica por el ncleo al nivel original del haploide, este proceso genera grandes
variaciones genticas, debido a cruces intercromosmicos, pero se ve limitado muchas
veces por incompatibilidad vegetativa.

Ciclo de vida
Vive de manera parastica y saproftica, en presencia o ausencia de insectos husped, en el
suelo se encuentra en materia orgnica, su morfologa micelial genera una red amplia y
filamentosa originada a partir de un conidio; en presencia de un insecto husped, el conidio
germina y una vez dentro del insecto, pasa a formar una red de hifas, una vez colonizada,
forma similar a la de levadura (blastspora).

El gnero Beauveria est compuesto por varias especies: B. bassiana, B. brongniartii B.

tenella, B. amorpha, B. velata, sin embargo las ms frecuentemente estudiadas son B.
bassiana y B. brongniartii.

Metarhizium anisopliae
Es un hongo imperfecto, cosmopolita, pertenece a la clase Deuteromycetes, orden
Moniliales, Familia Moniliaceae, puede crecer bien como parasito de insectos o como
saprofito, tiene un amplio rango de insectos huspedes, ataca a ms de 300 especies de
insectos de diversos rdenes ( ortpteros, hempteros, dpteros, lepidpteros, dermpteros,
himenpteros y colepteros), principalmente es un parasito de colepteros en la naturaleza.

Morfologa
Su reproduccin es asexual, esporas sostenidas sobre filamentos (conidios), el hongo
germina cuando est en contacto fsico con insectos.
El conidiforo es ramificado, las esporas son alargadas y se forman en cadenas originadas
en fialides; la conidia ms joven es de la base del conidiforo, crecen unidas formando una
12
masa prismtica de cadenas de esporas, las conidias son blancas cuando son jvenes,
conforme madura se torna verde oscuro, el tamao de la conidia permite diferenciar las
especies del gnero.
Modo de accin
En la mayora de los casos es la obstruccin del paso de aire a travs de los dos conductos
traqueales de las larvas, comienza por la penetracin de la cutcula, o directamente por los
tubos de los conidios o por medios de estacas de infeccin, producidas por estructuras de
tipo botn (apresorio) que se desarrollan en el extremo de los tubos cortos de los grmenes;
el desarrollo tiene lugar en el hemocelo, usualmente como cuerpos hifales tipo levadura, el
insecto muere por toxinas seguidas por la invasin de los rganos por el micelio. El insecto
puede permanecer como esclerotium si el microclima es seco, en condiciones hmedas y
clidas las conidioforas pueden extenderse a travs de la cutcula para cubrir al insecto con
conidios.

Algunas plagas que son afectadas por este hongo son la salivita de la caa de azcar
(Aeneolamia varia), y chinches plagas de diversos cultivos. Los insectos muertos por este
hongo son cubiertos completamente por micelio, el cual inicialmente es de color blanco
pero se torna verde cuando el hongo esporula.

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 3. OBJETIVOS

3.1. Objetivo General

Contribuir a la produccin sostenible de miel a travs de la evaluacin de hongos
entomopatgenos para el control de varroasis (Varroa destructor) ectoparsito de
(Apis mellifera), como alternativa de control eficaz, rentable y ecolgicamente
sostenible.

3.2. Objetivos especficos

a. Determinar a travs de la mortandad de las abejas (Apis mellifera), si los

tratamientos y las diferentes dosificaciones en estudio presentan o no, toxicidad.

b. Identificar los niveles de infestacin del acaro (Varroa destructor) en colmenas de

abejas (Apis mellifera).

c. Establecer que tratamiento tiene efecto en la reduccin los niveles de incidencia y

severidad del ectoparsito (Varroa destructor) sobre (Apis mellifera).

d. Identificar que tratamiento es ms econmico y rentable para el control del acaro

(Varroa destructor).

Son diferentes variables dependientes mencionadas. Sin embargo en el apartado

donde se espera la descripcin de cada una y sus unidades de medida, no est claro.

14
 4. HIPTESIS

Un trabajo de investigacin debe llevar hiptesis de trabajo que involucre la perspectiva del
investigador y su relacin con el marco terico. Las hiptesis actualmente incluidas son de corte
estadstico y no resultan ser adecuadas como explicacin tentativa del problema.

4.1. Hiptesis nula

1. H0. Ninguna de las dosificaciones de (Beauveria Bassiana y Metarhizium
Anisopliae), aplicadas a las colmenas, presentara mortandad sobre las abejas
(Apis mellifera).

2. H0. Ninguno de los tratamientos brindar control eficaz sobre los niveles de
infestacin del caro (Varroa destructor) ectoparsito de Apis mellifera.

3. H0. Ningn efecto se observara entre la interaccin hongos/dosis sobre la

reduccin del porcentaje de infestacin caro (Varroa destructor).

4. H0. Ningn tratamiento constituir una mejor alternativa financiera, para los
productores de miel.

4.2. Hiptesis alternativa

1. HA. Al menos una de las dosificaciones de (Beauveria Bassiana y Metarhizium

Anisopliae), aplicadas a las colmenas, presentara mortandad sobre las abejas
(Apis mellifera).

2. HA. Al menos uno de los tratamientos alcanzara disminuir significativamente los

niveles de infestacin del caro (Varroa destructor) ectoparsito de (Apis
mellifera).

3. HA. La interaccin hongo/dosis mostrar algn efecto sobre la reduccin del

porcentaje de infestacin inicial.

4. HA. Por lo menos la aplicacin de un tratamiento para control biolgico del

caro (Varroa destructor), ser rentable para los productores de miel.

15
 5. METODOLOGA
5.1. Definicin del mtodo de investigacin
El mtodo a utilizar ser el experimental donde se evaluaran datos cuantitativos y el
diseo experimental ser el de bloques al azar, con arreglo de Parcelas Divididas.
Evaluando dos factores: factor A (Hongos Biolgicos) y factor B (dosis) con un total de 7
tratamientos provenientes del factorial 2 hongos por 3 dosis + el testigo absoluto (sin
control), todos estos con tres repeticiones.

5.2. Contexto micro espacial y temporal de la investigacin

El rea en el cual se evaluaran los mtodos biolgicos con diferentes dosis para el
control del caro (Varroa destructor), ser en el municipio de San Pablo que se encuentra
ubicado en el Sur Occidente del departamento de San Marcos, en la regin denominada
boca costa, a 48 kilmetros de la Cabecera departamental de San Marcos y 286 kilmetros
de ciudad capital de Guatemala por la carretera internacional del Pacifico. La cabecera
municipal se ubica en las siguientes coordenadas; latitud 145555 Norte y Longitud
920016 Oeste, ubicndose a una altitud de 616 metros sobre el nivel del Mar. El
municipio registra 124km2 de extensin de la superficie territorial (INE).

La investigacin se realizar en un periodo de 7 meses.

5.3. Diseo experimental

Diseo bloques al azar, con arreglo de Parcelas Divididas: El arreglo de parcelas

divididas se utiliza cuando algunos factores son grandes mientras que otros pequeos,
algunas veces encontramos que la aleatorizacin completa no es factible porque es ms
difcil cambiar los niveles de algunos factores, por lo que los factores difciles van a las
parcelas grandes, mientras que los fciles van a las pequeas, como se realizara en la
presente investigacin distribuyendo las los hongos en las parcelas grandes, y las dosis en
las parcelas pequeas. En cuanto a mayor nmero de repeticiones la precisin del anlisis
es mucho ms confiable.

Numero de tratamientos 7
Numero de repeticiones 3

16
Es necesario modificar el modelo estadstico si se usar un arreglo en parcelas divididas, de
la siguiente manera:

Detalles en: https://goo.gl/FGKtwy

Adems, es necesario considerar para el anlisis la inclusin del testigo absoluto en el

anlisis, porque en el modelo descrito no puede ser agregado.

Modelo matemtico: Yijk = + Ri + Aj + Eij +Bk +ABik + Eijk

Dnde:

Yijk = Valor observado de las variables de respuesta en la ijk-sima unidad

experimental
= Efecto de la media general.
Ri = Efecto del i-simo bloque (repeticin).
Aj = Efecto del j-simo del factor A (Hongos Biolgicos)
Eij = Error experimental asociado a la ij-sima del factor A (Hongos Biolgicos)
Bk = Efecto del i-simo factor B (Dosis)
ABjk = Efecto debida a la interaccin entre A (Hongos Biolgicos) con B
(Dosis)
Eijk = Error experimental asociado a la ijk-sima unidad experimental.

17
5.4. Descripcin de Tratamientos

No. Dosis
Tratamiento
1 Bauberia Basianna
2 Bauberia Basianna
3 Bauberia Basianna
4 Testigo Absoluto 000000
5 Metarhizium Anisopliae
6 Metarhizium Anisopliae
7 Metarhizium Anisopliae

Falta clarificar las dosis especficas para cada uno de los tratamientos

5.5. Distribucin espacial de los tratamientos a evaluar

Croquis del ensayo en campo

A A A B B B

I T1 T2 T3 T4 T1 T2 T3

B B B A A A
II T3 T1 T2 T4 T1 T3 T2

A A A B B B
III T3 T1 T2 T4 T2 T1 T3

18
 DOSIS (*)
A = Metarhizium Anisopliae T1 = 1 ml
B = Bauberia Basianna T2 = 0.5 ml

T3= 2 ml
* Sujeto a cambios segn las indicaciones del panfleto T4 = testigo

5.6. Variables de la investigacin

Las variables independientes corresponden a la combinacin de hongos y dosis. No est clara la

definicin de las variables de respuesta as como sus unidades de medida

a. Dependientes
Porcentaje de toxicidad (mortandad de las abejas).
Porcentaje de reduccin de infestacin del caro en las colmenas.
Anlisis econmico de los tratamientos.

b. Independientes.

Porcentaje de infestacin de la plaga, tomando en cuenta la previa identificacin

de la especie caro varroa (Varroa Destructor), el cual ser identificado en las
colmenas mediante la realizacin de un diagnstico previo para determinar el
grado o porcentaje de infestacin.
Tratamientos a evaluar con tres dosis.

5.7. Tcnicas de anlisis de datos

Para cada una de las unidades experimentales se realizara un anlisis estadstico, para el
nivel de infestacin del acaro Varroa destructor, el grado de toxicidad de los tratamientos a
travs de la mortandad de Apis mellifera, porcentaje de reduccin final de caro Varroa
destructor, con la finalidad de determinar la existencia de diferencias significativas, entre
los tratamientos, los cuales sern determinados por medio de la regla de decisin si el valor
de la p-valor de tratamientos es menor a 0.05, entonces existirn diferencias significativas
entre los mismos. Al encontrar significancia, se har necesaria la comparacin mltiple de
medias utilizando la prueba de Tukey, con el fin de encontrar el o los mejores tratamientos.
Para dicho anlisis se utilizara el programa INFOSTAT. Para su mejor comprensin se
presentaran los resultados mediante la elaboracin de cuadros y figuras para facilitar la
interpretacin de los resultados.

El anlisis de rentabilidad econmica de la investigacin se efectuara mediante el uso de

anlisis econmico costo-beneficio para el cual se enfocara el estudio en los registros de la
19
efectividad para el control o reduccin del porcentaje de infestacin de Varroa destructor
dentro de las colmenas y el costo variable sern los hongos y dosis empleados para el
control. El anlisis econmico, tendr la finalidad de concluir cul o cules de los
tratamientos son ms rentables.

5.8. Manejo del Experimento

La investigacin se dividir en dos fases: fase de laboratorio y fase de campo.

Fase de laboratorio.

En la primera fase se proceder a evaluar la patogenicidad de los tratamientos a las

abejas (Apis mellifera), por medio del registro de la mortandad que se llegue a presentar.

La cual consistir en una visita a los apiarios de San Pablo, San Marcos, y con ello
poder obtener una muestra de abejas (Apis mellifera), para ser trasportados en jaulillas al
laboratorio del Centro Universitario de San Marcos CUSAM -, para poder realizar la
aplicacin de cada tratamiento bajo diferentes dosis y con ello establecer el grado de
toxicidad que llegaran a tener las dosificaciones de los hongos a evaluar mediante una tabla
de registro. (Ver Anexo 1).

Adquiriendo el promedio de mortandad y si esta llegara a tener efectos de toxicidad

en alguno de los tratamientos se proceder al descarte de los mismos. Y los que posean
efectos positivos o una aceptabilidad de los tratamientos por las abejas sern aplicados en
campo para su posterior evaluacin.

Se identificara cada una de las colmenas a ser evaluadas mediante una etiqueta con el
objetivo de tener un adecuado control al momento de la recoleccin de los datos.

Se realizara un muestreo para la identificacin del ectoparsito varroa destructor para

determinar el grado de infestacin entre cada una de las colmenas a evaluar el cual
consistir en Prueba de David De Jong o del agua jabonosa. (Montenegro, 2016).

Realizando un conteo inicial del porcentaje de infestacin mediante la siguiente

formula:

(Montenegro, 2016).

Material necesario para el muestreo

Malla de alambre (2-4 mm por perforacin)
Botella de platico vaca, con tapa

20
 Pedazo de tela blanca (tipo pauelo, de 30 x 30 cm)
Frasco de boca ancha con tapa y capacidad de aproximadamente 500 ml
Recipiente, por ejemplo una pequea vasija plstica
Cepillo de apicultor
Detergente de uso domstico
Pedazo de plstico y tira elstica
a. Corte el fondo de la botella de plstico
b. Recorte la maya de alambre en crculo de dimetro un poco mayor que el de la
botella de plstico e introdzcala en botella invertida
c. Recoja de un cuadro del centro de la colmena, de 200 a 300 abejas en el frasco de
boca ancha en cual debe de contener alrededor de 200 ml de agua con unas gotas de
detergente. Tpelo y agtelo durante un minuto o ms o menos
d. Vace el contenido del frasco dentro de la botella de plstico sobre la malla de
alambre
e. Tpelo con el pedazo de plstico, amarrndolo con una tira elstica
f. Agtelo horizontalmente con movimientos circulares, durante un minuto
g. Coloque la tela (pao blanco) sobre la vasija y sostenga la botella plstica sobre ella
tirando la tapa de la botella y dejando escurrir todo el lquido.

Las abejas quedarn retenidas por la malla de alambre y los caros por la tela (pao
blanco), examine la tela atentamente; para el conteo de caros encontrados en el mumero de
abejas muestreadas para sacar el porcentaje.

Fase de campo

Para ejecutar la aplicacin de cada uno de los tratamientos ser por medio de un atomizador
para impregnar la mayor cantidad de abejas entre los marcos segn la dosificacin
planteadas en el panfleto del producto y con ellos realizar media y una doble segn las
indicaciones del producto realizando las aplicaciones en un intervalo de tiempo de 15 das
entre cada aplicacin realizando un total de 6 aplicaciones.

A si mismo despus de aplicado cada uno de los tratamiento se en un periodo de tiempo de

7 das se realizara un conteo mediante el Mtodo del Piso Sanitario para determinar la
eficiencia que presenta el producto y el nmero aproximado del caro Varroa destructor
muerto por da . (SENASA, 2005)

21
Para el conteo de Varroas a cada 7 das, se aplicar la siguiente frmula:

(Montenegro, 2016)

Al finalizar las aplicaciones se realizara un muestreo final para determinar nuevamente el

grado o porcentaje de infestacin y con ello establecer la efectividad de los tratamientos
evaluados si redujo el porcentaje de Varroa destructor dentro de las colmenas con la
siguiente formula:

Determinacin de Reduccin de Infestacin

(SENASA, 2005)

6. CRONOGRAMA
* Fecha de inicio cuando est aprobado el proyecto planteado

22
 Ao 2017
ACTIVIDADES Abril Mayo Junio Julio Agosto Septiembre Octubre
Semanas Semanas Semanas Semanas Semanas Semanas Semanas
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Fase de laboratorio
Prueba de toxicidad de los
tratamientos
Diagnstico del porcentaje de
infestacin de varroa
destructor.
Aplicacin de los tratamientos
Conteo de Acaros (piso
sanitario)
Recoleccin de datos
Diagnostico porcentaje de
reduccin de Varroa
destructor
Fase de Gabinete

Anlisis de resultados
Presentacin de Resultados

7. PRESUPUESTO

No. del Proyecto:

Nombre del Responsable Principal Ing. Agrnomo Pablo Osmani Lpez Xicar

23
Nombre de la Unidad Ejecutora IICA-CRIA
Nombre de las otras instituciones involucradas CUNOC

DESCRIPCION DEL PRESUPUESTO

DESCRIPCION MONTO Monto Monto Saldo

Cdigo Nombre Programado A Ejecutar Disponible
Monto Total del Proyecto Q150,000
400 VIAJES OFICIALES
407 Viticos Internacionales
409 Viticos Nacionales 16,560.00 133,440.00 133,440.00
411 Otros Gastos de Viajes Nacionales 0.00
500 DOCUMENTOS Y MATERIALES E INSUMOS
130,940.00
501 Publicaciones 2,500.00
130,940.00
503 Reproduccin de Documentos Impresos y Electrnicos
130,270.00
505 Material e Insumos 670.00
110,270.00
509 Materiales diversos 20,000.00
110,270.00
511 Adquisicin de Libros y Otras Publicaciones
110,270.00
513 Informacin Especializada
110,270.00
515 Servicios de Edicin, Traduccin e Interpretacin
600 PLANTA, EQUIPO Y MOBILIARIO
611 Equipo y Mobiliario 15,240.00 95,030.00
701 Correspondencia 91,790.00
703 Telecomunicaciones y Enlaces de Internet 3,240.00 0.00
709 Combustibles 91,790.00
711 Mensajera y Movilizacin Local 0.00
729 Jornales (Mano de Obra) 11,500.00 80,290.00
823 Investigador Principal 29,000.00 51,290.00
Investigador Asociado 25,000.00 26,290.00
Investigador Auxiliar 21,568.00 4,722.00

Otros 2,900.00 1,822.00

148,178.00
TOTAL

No. del Proyecto:

24
Nombre del Responsable
Principal Ing. Agrnomo Pablo Osmani Lpez Xicar

Nombre de la Unidad
Ejecutora IICA-CRIA

Nombre de las otras

instituciones involucradas CUNOC

Programacin Jornales

Semana Semana Semana Semana Total Costo *** Total

Jornales por
1
MES 2 3 4 Das da Monto
Mayo 0 9 6 6 21 Q 2,100
Junio 6 4 6 4 20 Q 2,000
Julio 6 4 6 4 20 Q 2,000
Agosto 6 4 6 4 20 Q 100.00 Q 2,000
Septiembre 6 6 6 6 24 Q 2,400
Octubre 10 10 Q 1,000
Total Jornales Programados Q 11,500

OBSERVACIONES
*** Costo Jornal CRIA 100
100

FICHA PRESUPUESTARIA FINANCIERA

Nombre del Proyecto: EVALUACIN DE (Beauveria Bassiana) y

25
 (Metarhizium Anisopliae), CON TRES
DOSIS PARA CONTROL DE VARROA
DESTRUCTOR. SAN PABLO, SAN
MARCOS.

POR FAVOR LLENAR ESTA

No. del Proyecto: INFORMACIN

Nombre del Responsable Ing. Agrnomo Pablo Osmani Lpez

Principal Xicar

Nombre de la Unidad
Ejecutora IICA-CRIA

Nombre de las otras

instituciones involucradas CUNOC

Programacin Viticos

Semana Semana Semana Semana Total Tarifa ** Total

No. MES 1 2 3 4 Das Viticos Monto
1 Mayo 0 2 1 1 4 Q 3,680
2 Junio 1 1 1 1 4 Q 3,680
3 Julio 1 1 1 2 5 Q 4,600
4 Agosto 1 1 1 2 5 Q 920 Q 4,600
5 Septiembre Q -
6 Octubre Q -
Total Viticos Programados Q 16,560

OBSERVACIONES
** Desayuno 80
** Almuerzo 160
** Cena 80
** Hospedaje 600
920

26
 8. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Arevalo, Luis. 2017. Apicultura en Guatemala poco impulsada pese a ser de las mejores de la
regin. La Hora. 28 de marzo de 2017, pg. 1.

Barrios Rivera, Donald Veracruz. 2012. Relacin entre la generacin gentica (F1, F2) de abejas
reina (Apis mellifera, Apidae), su resistencia al ataque del caro (Varroa destructor, Acarina Oud.) y
su efecto sobre la produccin de miel, en Copiasuro, R. L., Catarina,San Marcos, Guatemala, C.A.
Coatepeque, Quetzaltenango, Guatemala : URL, 2012.

Evaluacion del efecto de Beauveria bassiana en el control biolgico de Varroa destructor, parasito
de la abeja melfera (Apis mellifera) en la finca Felisa en el municipio de los Patios, Norte de
Santander. UDES. Colombia : Universidad de Santander.

Formato G., Menegotto A., Jannoni-Sebastianini R. 2017. Teca FAO. Teca FAO.org. [En lnea] FAO,
2017. [Citado el: 2017 de Marzo de 29.] http://teca.fao.org/es/read/8694.

Hongos entomopatgenos como alternativa para el control biolgico de plagas. Ordoez, Pablo
Andrs Motta Delgado y Betselene Murcia. 2011. Taubat, Brasil : UNITAU, 2011. ISSN: 1980-
993X.

Imagen Veterinaria:. UNAM. 2004. 22, Mxico : Secretara de Comunicacin Facultad de Medicina
Veterinaria y Zootecnia UNAM, 2004, Vol. 4. ISSN 1405-9002.

Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias. 2011. Prevencin de

Varroosis y Suplementacin. Manual de Capacitacin. Mxico : INIFAP, 2011. ISBN: 978-607-425-
555-3.

Jos Vaquero, Pedro Vargas e Danilo Plata. Gua Tcnica de Sanidad Apcola. [ed.] Esther Galeano
y Marco Vsquez. Nicaragua : s.n.

MAGA. 2015. Portal Web MAGA. [En lnea] MAGA, 2015. [Citado el: 2017 de Marzo de 28.]
http://visar.maga.gob.gt/?page_id=5731.

Montenegro, Gloria. 2016. Manual Apcola. Chile : INDAP, 2016.

SENASA. 2005. Enfermedades de las Abejas. Buenos Aires, Argentina : SENASA, 2005.

Vandame, Rmi. 2000. Oocities. Oocities.org. [En lnea] Noviembre de 2000. [Citado el: 2017 de
marzo de 30.] http://www.oocities.org/sitioapicola/organica/remy/remyvandame.html.

27
 9. ANEXO

Prueba de toxicidad (Mortandad) en Apis mellifera

Tratamiento No. Dosis:
Tiempo en horas Repeticin I Repeticin II Repeticin III Media

24
48
72

28