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MATEMTICAS Y CRECIMIENTO BACTERIANO: UN TRABAJO DE

LABORATORIO PARA EL APRENDIZAJE SIGNIFICATIVO


Eje 3: Interdisciplina y articulacin entre materias
Leonardo Gualano,a Augusto Graieb,b, c Esteban Baragatti,c@ Leandro Andrinic
a. Ingeniera en Agrobiotecnologa; IBB-INTECH, Chascoms, Universidad Nacional de San Martn.
b. Instituto de Ciencias de la Salud, Universidad Nacional Arturo Jauretche.
c. Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata.
@ eebaragatti@gmail.com
Palabras claves: ENSEANZA DE LA MATEMTICA, LABORATORIO, INTERDISCIPLINA, CRECIMIENTO
BACTERIANO

En el presente trabajo se relatar una experiencia didctica desarrollada en la carrera de Ingeniera en


Agrobiotecnologa, dentro del curso Tpicos de Matemtica.
La Ingeniera en Agrobiotecnologa es una carrera que depende de la Universidad Nacional de San
Martn y se dicta en el Instituto de Investigaciones Biotecnolgicas e Instituto Tecnolgico de
Chascoms (IIB-INTECH). La primera cohorte ingres en 2012, y se requiere que lxs ingresantes
deban tener pre-aprobado el primer ao de una carrera afn en cualquier institucin universitaria del
pas. La materia Tpicos de Matemtica se encuentra encuadrada dentro del trayecto de
Conocimientos Bsicos en el bloque de Ciencias Bsicas de la carrera, en el primer cuatrimestre de
cursada.

UN CUERPO DOCENTE INTERDISCIPLINARIO


Los fundamentos sobre el por qu de un cuerpo docente interdisciplinario pueden leerse Graieb et
al. (2012) y en el trabajo presentado en estas jornadas Matemticas en Agrobiotecnologa (Baragatti
et al., 2017). Tal se explicita en dichos trabajos, al momento de concursar la propuesta, en 2011
propusimos a los responsables de la carrera la posibilidad de integracin de un grupo
interdisciplinario que se hiciera cargo de la materia Tpicos de Matemtica. Fue integrado
inicialmente por un doctor en Biologa Molecular, un licenciado en Matemtica, y un doctor en
Fsica (los tres ltimos autores de este trabajo). En 2013 se incorpor a este equipo el primer autor,
miembro de la primera cohorte de la carrera, inicialmente en calidad de ayudante alumno (que hoy
contina como ayudante graduado). Y desde 2015 la continuidad de la propuesta est a cargo del Dr.
Andrs Porta (lic. en Matemtica), y los ayudantes diplomados Leonardo Gualano (ingeniero en
Agrobiotecnologa) y rika Porten (lic. en Matemtica).
Al momento de planificar el curso en 2012, luego de analizar otras alternativas, tomamos como eje
articulador de la materia el trabajo con modelos matemticos de fenmenos naturales (mayormente
biolgicos). Los contenidos mnimos fueron desarrollados a lo largo del curso de tal manera que su
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estudio fuera solidario con esa decisin. Fue, en este contexto, en el cual en 2013 decidimos incluir
un trabajo experimental. Entre nuestros propsitos podemos mencionar:
- la aplicacin de herramientas matemticas que forman parte del curso a situaciones prcticas
habituales en la carrera de agro biotecnologa
- la formulacin de preguntas relevantes sobre un modelo matemtico que pudieran ser
contestadas mediante la experimentacin
- el anlisis y discusin de resultados experimentales
- la implicacin de lxs estudiantes en alguna tarea que resulte motivante a la vez que implique
un trabajo matemtico pormenorizado
- la incorporacin, a modo de primera experiencia, de lxs estudiantes al mbito de los
laboratorios del IIB-INTECH
Aprovechando la conformacin del equipo docente nos inclinamos por estudiar la aplicabilidad de un
modelo matemtico ampliamente analizado en las clases al crecimiento bacteriano. El modelo
matemtico elegido fue el conocido como de crecimiento logstico (Verhulst, 1977, Lewis y
Powell, 2017). Como sistema experimental utilizamos cultivos lquidos de la bacteria Escherichia
coli. Antes de pasar al diseo experimental y las distintas condiciones evaluadas vamos a referirnos a
dos modelos simples para representar el crecimiento bacteriano.
En el modelo ms sencillo la variacin del nmero de bacterias en el tiempo () puede ser escrita
como:

= . (1)

donde es la tasa reproductiva por unidad de tiempo ( > 0). A partir de esta expresin, y
suponiendo que sea una constante que no dependa ni de ni de , podemos llegar a que la funcin
() = 0 . es una solucin de la ecuacin (1), para una poblacin inicial 0 .
Esta funcin () representa un crecimiento exponencial para todo tiempo . Aunque puede ser
vlida para la fase de crecimiento denominada exponencial, experimentalmente podemos observar
que no ser adecuada cuando los nutrientes disponibles comiencen a disminuir respecto del nmero
de microorganismos (esto es, los nutrientes son finitos). Si queremos utilizar un modelo aplicable
ms all de la fase exponencial debemos asumir, en cambio, que la tasa de reproduccin no ser
constante en el tiempo.
En otras palabras, mientras hay suficiente nutriente el crecimiento puede ser exponencial, y cuando
el nutriente limitante se agota, el crecimiento cesa. Pero cul ser la tasa de crecimiento en
situaciones intermedias, cuando los nutrientes no alcanzan para solventar el crecimiento exponencial,
pero s un crecimiento menor? Hay, por supuesto, muchas formas de matematizar esta dependencia

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de con la concentracin del nutriente limitante. La ms sencilla y habitual es plantear una
dependencia lineal (o proporcional). Si llamamos a la concentracin del nutriente que limita el
crecimiento podemos escribir:
= . (2)
donde es una constante de proporcionalidad. Esta primera hiptesis que hemos adoptado en el
planteo del modelo de crecimiento logstico, representado por la ecuacin (2), es aquella sobre la
cual nos proponemos trabajar en esta experiencia de laboratorio.
Por otro lado, a medida que las bacterias se multiplican, consumen el nutriente. Debido a esto es
razonable pensar que la cantidad en el cultivo vare en forma proporcional a la variacin del
nmero de bacterias, tal como expresa la siguiente ecuacin diferencial:


= . (3)

donde es la cantidad de consumida por unidad de formada. La ecuacin (3) representa otra
suposicin del modelo sobre la que trabajaremos en clase al momento de discutir los resultados del
trabajo prctico. Commented [a1]: Lo saque porque haba quedado por error
pegado de la gua, pero aca no se retoma
Si aceptamos la ecuacin (3), integrando podemos obtener la expresin:
() = . () + 0 (4)
donde 0 satisface la condicin inicial (es decir, representa la concentracin inicial de nutriente a 0 )
para . Por otro lado, reemplazando (2) en (1) tenemos:


= . . (5)

Si ahora reemplazamos en (5) a (que es ()) por la expresin (4) llegamos a:




= (0 ) (6)1

Usualmente se reescribe la ecuacin (6) en la forma siguiente:



= (1 ) (7)

donde = . 0 y = 0 /
Al resolver la ecuacin diferencial (7) se llega a la expresin utilizada en procesos de crecimiento
logstico:
0 .
() = (8)
0 +(0 )

1. En la ecuacin (6) vemos que el efecto de considerar una dependencia lineal de la tasa de crecimiento con la
concentracin del nutriente limitante es matemticamente equivalente a asignar una dependencia de con del tipo
() = (0 ).

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En la ecuacin (8) podemos ver que a tiempos largos 2 el trmino exponencial tiende a un valor
cercano a cero, por lo que () . Hemos llegado en las clases a que () = es un punto
estacionario del sistema que resulta, adems, estable. Esto justifica que designemos a como la
capacidad de carga del sistema, y es en este modelo el mximo valor posible para .
Para aplicar este modelo matemtico debemos medir experimentalmente el nmero de bacterias en el
tiempo, y luego realizar un ajuste de los parmetros tal que los datos experimentales y los estimados
por la ecuacin (8) concuerden lo mejor posible. Es decir, que a partir de los datos experimentales
obtenemos valores concretos para B y r.
Estamos ahora en condiciones de plantear los objetivos del trabajo de laboratorio:
- evaluar la ecuacin diferencial logstica como modelo para el crecimiento de E. coli en el
laboratorio
- indagar sobre la validez de uno de los supuestos que llevan al modelo logstico, en particular
que la tasa de reproduccin resulte proporcional a la concentracin del nutriente limitante
(ecuacin 2, es decir = . ).
DISEO EXPERIMENTAL
Se comparan dos condiciones de crecimiento que difieran en la cantidad de nutrientes presentes en el
medio. Por un lado, una condicin en que la cantidad de nutrientes sea la normalmente utilizada en el
cultivo del microorganismo (medio estndar), y por el otro una condicin en la que se utiliza el
medio de cultivo diluido en un factor de 4 (medio diluido).
Metodologa
Los cultivos bacterianos de E. coli BL21 se incuban a 37 C con agitacin (180 rpm). El medio
estndar utilizado es el de Luria-Bertani. La biomasa se estima mediante la medida de la densidad
ptica de alcuotas del cultivo cada una hora, durante nueve horas o hasta saturacin del cultivo.
Clculos
Para poner a prueba el postulado de una constante a partir de datos experimentales debemos
utilizar alguna relacin entre los parmetros que podemos obtener de la curva y el valor de . Como
ya mencionamos, los parmetros que definen la forma de la ecuacin logstica son 0 , y . El
parmetro est incluido en la definicin de :
= . 0 (9)

2. Aqu se da sentido al proceso de paso al lmite, donde tiempos largos equivale a .

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RESULTADOS EXPERIMENTALES Y DISCUSIN

El Grfico 1 muestra, a modo de ejemplo, los resultados obtenidos por dos grupos de estudiantes.
Como puede verse el cultivo en el medio estndar crece ms rpidamente que el correspondiente al
del medio diluido. En este caso los cultivos no llegan a la saturacin dentro del intervalo de medidas.

Grfico 1

Los valores obtenidos fueron ajustados mediante la ecuacin logstica linealizada usando el
programa Excel. En el caso del cultivo estndar se obtuvo un coeficiente de determinacin
(estadstico r2) de r2 = 0,994; y en el caso del cultivo diluido un valor para r2 de 0,991. Dado que el
coeficiente define la calidad del modelo para replicar los resultados cuando r2 1, por lo tanto, la
ecuacin logstica result un buen modelo para representar el crecimiento bacteriano en ambos casos.

Los valores obtenidos para la capacidad de carga B resultantes fueron de 1,87 para el cultivo
estndar y de 0,96 para el cultivo diluido (expresados en unidades de absorbancia). Es decir que a
pesar de que la dilucin empleada fue de 1/4, la capacidad de carga slo disminuy
aproximadamente a la mitad.

Por ltimo, segn la ecuacin (9), si k es constante tal como se asume en el planteo del modelo
logstico, r deber ser proporcional a la concentracin de nutriente limitante c0. Aunque el valor de r
para el cultivo estndar result mayor que el correspondiente al cultivo diluido, el cociente entre
ellos es de apenas 1,32 en lugar del valor esperado, 4.

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Condicin B r
Medio estndar 1,87 0,0144
Medio diludo 0,96 0,019
Tabla 1

Los resultados que hemos resumido nos permitieron una rica discusin en el aula. Es interesante
notar que si la experiencia hubiese consistido solamente en el crecimiento en una condicin
cualquiera y el ajuste mediante el modelo logstico, sin duda hubiramos llegado a la conclusin de
que el modelo resultaba adecuado. En esa situacin las suposiciones que permitieron deducir la
ecuacin logstica no tendran por qu ser cuestionadas, y probablemente lxs estudiantes se hubieran
convencido de lo acertadas que resultaron.
El diseo experimental nos permiti poner a prueba el modelo en una situacin ms exigente, en la
que la suposicin de que la velocidad de crecimiento sera proporcional a la concentracin de
nutrientes no se comprob. De aqu se sigue que el solo hecho de que un modelo matemtico que
reproduzca o permita interpretar una serie de datos experimentales de manera adecuada no nos
autoriza a concluir que todos los postulados realizados para obtenerlo sean vlidos.
Los resultados resultan disruptivos y promueven en lxs estudiantes una revisin de todo el proceso
por el cual se llega a la ecuacin logstica, tanto en lo que hace a la matemtica como a los criterios
extra matemticos. De esta manera pensamos que el diseo propuesto cumple con un rol epistmico
adems de satisfacer otros propsitos habituales de este tipo de actividades.

REFERENCIAS

Baragatti, E., Gualano, L., Graieb, A., Andrini, L. (2017). Matemticas en Agrobiotecnologa. 1ras
Jornadas sobre Enseanza y Aprendizaje en el Nivel Superior en Ciencias Exactas y Naturales.
Facultad de Ciencias Exactas, UNLP.

Graieb, A., Baragatti, E., Andrini, L. (2012). Fundamentacin didctico-epistemolgica del dictado
del curso Tpicos de Matemtica para la ingeniera en agrobiotecnologa. III Jornadas de
Enseanza e Investigacin Educativa en el campo de las Ciencias Exactas y Naturales. Facultad de
Humanidades y Ciencias de la Educacin, UNLP. http://jornadasceyn.fahce.unlp.edu.ar/iii-2012

Lewis, M., Powell, J. (2017). Yeast for Mathematicians: A Ferment of Discovery and Model
Competition to Describe Data. Bulletin of Mathematical Biology, 79(2), 356-382. doi:
10.1007/s11538-016-0236-3

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Verhulst, P.F. (1977). A note on the law of population growth. En Mathematical Demography,
Biomathematics, Vol 6 (pp. 333-339). Springer: Berlin. doi: 10.1007/978-3-642-81046-6_37