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CIENCIAS MDICAS

ESCUELA PROFESIONAL TECNOLOGIA MDICA


ESP. LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA
PATOLOGICA

AREAS:
MICROBIOLOGIA
PARASITOLOGIA
MICOLOGIA
BACILOSCOPIA
TUTOR DE AREA:
Mblgo. Liliana Soledad Cabanillas Arana
Mblgo. Vitaliano O. Fernandez Maguia

ROTACION: 20 DE ABRIL
19 DE JUNIO

PERU ANCASH HUARAZ


INTRODUCCIN
La microbiologa es el estudio de los microorganismos y organismos unicelulares
generalmente microscpicos que se dividen en: Bacterias ; Virus ; y Hongos.
Actualmente la microbiologa se compone de diversas disciplinas independientes
entre s, Ej.:
Microbiologa Clnica (estudio de microorganismos que producen
enfermedad y su proceso infeccioso consecuente)
Fisiologa bacteriana (estudio de mecanismos bioqumicos
del metabolismo bacteriano),
Microbiologa (hongos), ficologa (algas), protozologia (protozoarios),
bacteriologa (bacteria).

Las bacterias son organismos unicelulares, el citoplasma se encuentra rodeado


de una membrana celular, el ncleo contiene ADN pero carece de una
membrana nuclear. Muchas formas son mviles, impulsados por un apndice
filamentoso denominado flagelo.
Las Bacterias pueden diferenciarse en relacin a la estructura de su pared
celular mediante una tincin diferencial denominada Tincin de Gram.

Se puede discriminar entre dos grandes grupos de bacterias:


Gram positivas ( se tien de violeta )
Gram negativas (se tien rosadas)

Protozoarios: Mayores que las bacterias y sus estructuras internas fcilmente


observables la morfologa es diagnstico de la especie.
Hongos: varan en tamao presentan un crecimiento filamentoso, un filamento
individual es denominado hifa, cuyo conjunto es denominado micelio el cual
puede estar en contacto sobre el medio y se le denomina vegetativo y el que se
encuentra por encima se denomina micelio areo, las colonias en placa son de
aspecto algodonoso y crecimiento radial.

La Parasitologa es una disciplina que estudia a organismos eucariontes que


viven a expensas de un husped, al que le pueden producir dao. Comprende
agentes biolgicos de diferentes formas y tamao, los parsitos se dividen en
tres grandes grupos: protozoos, helmintos y artrpodos. La importancia de la
disciplina radica en la gran prevalencia de las infecciones en humanos y
animales, en la cantidad y heterogeneidad de los agentes biolgicos, en la
diversidad de los ciclos biolgicos, y en la distribucin geogrfica de stos
agentes en el mundo.

La presencia de una infeccin parasitaria se asocia en forma estrecha a factores


geogrficos y climticos, as como a factores antropolgicos y sociales de las
poblaciones humanas. Actualmente la importancia de las parasitosis ha
aumentado con la presencia de inmunodeprimidos, y con el aumento de
poblaciones migrantes y de viajeros.
OBJETIVOS
Mi objetivo primordial de estos dos meses de rotacin que pase en el rea de
Microbiologa, Micologa, Bacteriologa y el rea de Parasitologa es aprender
las diferentes tcnicas que se realiza en cada rea, ya que son procedimientos
diferentes.

Los procedimientos que fui aprendiendo en el transcurso de mi rotacin son


procedimientos amplios y concretos ya que en el rea se puede observar en
cada procedimiento que realiza es los diferentes grmenes, bacterias, parsitos,
entre otros microorganismos que se fueron observando en el transcurso de mi
rotacin en las diferentes reas que pase, fue una etapa experimental.

El objetivo de este informe y en los dos meses que rote por estas reas fue
reconocer, identificar, procesar, prepara los diferentes materiales que se da en
uso como son: Agar Mac conkey, Miuller Hinton y Agar chocolate.

En este informe dar a presentar las diversas tcnicas que aprend, con ciertas
limitaciones, presentare lo ms fundamental que realice en cada procedimiento.

Dar conocimiento lo que aprend en las mencionadas reas y haber aprendido


lo bsico de estas.
Estoy agradecida por los jefes de cada rea que pase por brindarme su
conocimiento, su entera disponibilidad y de tenerme la absoluta paciencia de
poder ensearme.
BIOSEGURIDAD
Los laboratorios de microbiologa constituyen ambientes de trabajo especiales,
que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas para las personas
que se encuentren en o cerca de ellos. El trabajo diario en el laboratorio es un
trabajo de grupo, en donde la actitud de cada uno de los integrantes ante las
prcticas, as como el entrenamiento que posean en las tcnicas requeridas para
el manejo de material contaminado, determina su propia seguridad. El estudio de
cualquier agente patgeno constituye un elemento de riesgo.
PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD

Bioseguridad La seguridad biolgica o bioseguridad, es la aplicacin del


conocimiento, de las tcnicas y de los equipos necesarios para prevenir la
exposicin del personal, del rea de laboratorio y del medio ambiente a agentes
potencialmente infecciosos o biopeligrosos.

Agentes Biopeligrosos: Son todos aquellos agentes biolgicos y materiales


que son potencialmente peligrosos para los seres humanos, los animales y
las plantas. Entre ellos podemos citar: bacterias, virus, hongos, parsitos,
productos recombinantes, alrgenos, priones, etc.
Riesgo Microbiolgico: El Riesgo Microbiolgico se encuentra presente cada
vez que se realiza una actividad prctica en el Laboratorio, donde se requiera
la manipulacin de cultivos de microorganismos, los cuales pueden alcanzar
concentraciones muy elevadas y pueden llegar a provocar una infeccin si no
son manipulados adecuadamente.
La boca: Comer, beber y fumar en el laboratorio. Realizar transferencias con
pipetas sin utilizar ningn tipo de proteccin. Transferencia indirecta de
microorganismos a travs de los dedos o utensilios contaminados (lpices,
bolgrafos, etc.).

La piel: Inoculacin accidental con una aguja hipodrmica u otros instrumentos


punzantes o de vidrio Cortaduras o rasguos.

Los ojos: Salpicaduras de materiales infecciosos. Transferencia indirecta de


microorganismos a travs de los dedos contaminados.
Los pulmones: Inhalacin de microorganismos transportados por el aire.
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros


objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin.
Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe
permanecer completamente cerrada.
Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al
finalizar la sesin prctica.
Lavar las manos con agua y jabn antes de realizar las actividades
programadas, antes de salir del laboratorio y siempre despus de manejar
materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes.
Trabajar cerca del mesn, adoptando una buena postura y estando
fsicamente cmodo.
Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela
antideslizante en las reas de laboratorio.
Evitar llevar en el laboratorio accesorio que podran ser fuente de
contaminacin (por ejemplo joyas).
Recoger el cabello largo.
Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar slo
lo indispensable.
No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos personales o
utensilios, aplicarse cosmticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto
en ningn rea del laboratorio.
Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de
iniciar las actividades indicadas en la prctica. Si usted tiene alguna duda,
dirjase al profesor.
Mantener el rea de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos
personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para
la realizacin del trabajo prctico.
Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe
dejar ste desatendido.
Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.),
limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la
actividad. Reporte cualquier dao de los mismos al profesor.
Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes
dispuestos para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pepiteros, tubos y
placas de Petri en las ollas de desecho, etc.
No usar ningn reactivo que no est debidamente identificado, verificar
las etiquetas de los mismos y estar seguro de cmo emplearlo.
No devolver sustancias a sus envases originales.
Emplear la pro pipeta al medir lquidos. Est rigurosamente prohibido
pipetear con la boca. De igual manera las pipetas tendrn tapones de
algodn para reducir la contaminacin de estos dispositivos de pipeteo.
Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de
material contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser
catalogado como menor.
Reducir al mnimo la formacin de aerosoles durante la realizacin de
cualquier trabajo prctico.
Emplear tcnicas aspticas para el manejo de cultivos de
microorganismos.
DESARROLLO DEL TEMA
MICROBIOLOGIA
La microbiologa es el estudio de los microorganismos, de su biologa, su
ecologa y, en nuestro caso su utilizacin en la produccin de bienes agrcolas o
industriales y su actividad en la alteracin y deterioro de dichos bienes. Esta
definicin hace necesaria la de tres conceptos que se incluyen en ella:
microorganismo, biologa y ecologa.

El conocimiento de la biologa y la ecologa microbiana son imprescindibles para


poder comprender de qu forma los microorganismos interaccionan con los
seres humanos y qu tipos de relaciones establecen con ellos. Por
microorganismo entendemos cualquier organismo vivo que no sea visible a
simple vista.

Esta definicin operativa no incluye los hongos, tanto inferiores como superiores,
ni las algas aunque ambos grupos son considerados microorganismos porque
su organizacin es esencialmente unicelular (las clulas que los constituyen
mantienen un alto grado de autonoma entre s). Por otra parte, organismos
pluricelulares pueden ser de tamao tan pequeo que entren dentro de la
definicin anterior sin dejar por ello de ser estructuralmente tan complejos como
cualquier animal superior. En nuestro curso nos centraremos principalmente en
bacterias, virus y hongos.

1. LAS BACTERIAS
Las bacterias son microorganismos unicelulares que se presentan un tamao de
algunos micrmetros de largo. Las bacterias son procariotas, no tienen ncleo ni
orgnulos internos. Generalmente poseen una pared celular. Muchas bacterias
disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento.

Las bacterias son los organismos ms abundantes del planeta. Son


imprescindibles pues muchos pasos importantes de los ciclos biogeoqumicos
dependen de estas.
1.1 BACTERIAS GRAM POSITIVAS

En microbiologa, se denominan bacterias Gram positivas a aquellas bacterias


que se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram. Esta caracterstica
est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja
un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los principales grupos de
bacterias, cuando se tratan como taxn se utilizan tambin el nombre de
Posibacteria. La envoltura celular de las bacterias Gram positivas comprende
la membrana citoplasmtica y una pared celular compuesta por una gruesa
capa de peptidoglucano, que rodea a la anterior. La pared celular se une a la
membrana citoplasmtica mediante molculas de cido lipoteicoico. La capa
de peptidoglicano confiere una gran resistencia a estas bacterias y es la
responsable de retener el tinte durante la tincin de Gram.
Incluyen especies tanto mviles (va flagelos) como inmviles con forma
de bacilo (Bacillus, Clostridium, Corynebacterium,Lactobacillus, Listeria)
o coco (Staphylococcus, Estreptococos); con gruesas paredes celulares o sin
ellas (Mycoplasma). Algunas especies son fotosintticas, pero la mayora
son hetertrofas. Muchas de estas bacterias forman endosporas en condiciones
desfavorables. Realmente, no todas las bacterias del grupo son Gram positivas
(no se tien por la aplicacin de ese mtodo), pero se incluyen aqu por su
similitud molecular con otras bacterias Gram positivas.
La clula bacteriana est rodeada por una envoltura que, observada al
microscopio electrnico, se presenta como una capa gruesa y homognea,
denominada pared celular. Luego en seccin (corte) se observa una estructura
semejante a dos lneas paralelas separando una capa menos densa; esto
corresponde a la membrana plasmtica. Entre la membrana plasmtica y la
pared celular se encuentra el periplasma o espacio periplasmtico. En el interior
de la membrana plasmtica se encuentra el citoplasma que est constituido por
una disolucin acuosa, el citosol, en el cual se encuentran ribosomas y otros
agregados de macromolculas, y en el centro se ubica la zona menos densa
llamada nucleoide, que contiene una madeja de hebras difcil de resolver
(distinguir) y cuyo principal componente es el ADN.
Las siguientes caractersticas estn presentes generalmente en una bacteria
Gram positiva:

Membrana citoplasmtica.
Capa gruesa de peptidoglicano.
cidos teicoicos y lipoteicoicos, que sirven como agentes quelantes y en
ciertos tipos de adherencia.
Polisacridos de la cpsula.
Si algn flagelo est presente, este contiene dos anillos como soporte, las
bacterias Gram positivas tienen solamente una capa membranal.

1.2 BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

En microbiologa, se denominan bacterias gramnegativos aquellas que no se


tien de azul oscuro o de violeta por la tincin de Gram, y lo hacen de un
color rosado tenue: de ah el nombre de "gramnegativos" o tambin "Gram-
negativas. Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura di
drmica dada por la envoltura celular, pues presenta doble membrana celular
(una externa y la otra citoplasmtica), lo que refleja un tipo natural de
organizacin bacteriana. Las bacterias gramnegativos presentan dos
membranas lipdicas entre las que se localiza una fina pared
celular de peptidoglicano. Muchas especies de bacterias gramnegativos causan
enfermedades.
Algunos cocos gramnegativos causan la gonorrea (Neisseria gonorrhoeae),
la meningitis (Neisseria meningitis) y sntomas respiratorios (Moraxella
catarrhalis), entre otros.
Los bacilos gramnegativos incluyen un gran nmero de especies. Algunos de
ellos causan principalmente enfermedades respiratorias (Haemophilus
influenzae, Klebsiella pneumoniae , Legionella pneumophila, Pseudomonas
aeruginosa), enfermedades urinarias (Escherichia coli, Proteus
mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens) y enfermedades
gastrointestinales (Helicobacter pylori, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi).
La envoltura celular de las bacterias gramnegativos est compuesta por
una membrana citoplasmtica (membrana interna), una pared celular delgada
de peptidoglicano, que rodea a la anterior, y una membrana externa que recubre
la pared celular de estas bacterias. Entre la membrana citoplasmtica interna y
la membrana externa se localiza el espacio periplsmico, relleno de una
sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes para la
nutricin en estas bacterias. Retienen la safranina.
La membrana externa contiene diversas protenas; entre ellas, las porinas o
canales protecos que permiten el paso de ciertas sustancias. Tambin presenta
unas estructuras llamadas lipopolisacridos (LPS), formadas por tres regiones:
el polisacrido O (antgeno O), una estructura polisacrida central (KDO) y el
lpido A (endotoxina).
Las bacterias gramnegativos pueden presentar una capa S que se apoya
directamente sobre la membrana externa y no sobre la pared de peptidoglicano.
Si presentan flagelos, estos tienen cuatro anillos de apoyo. Las lipoprotenas se
unen al ncleo de polisacridos. La mayora no forma endosporas (Coxiella
burnetti, que produce estructuras similares a las endosporas, es una notable
excepcin). Para clasificar a las bacterias debemos tener en cuenta su
tamao, forma, disposicin espacial, propiedades.
1.3 BACTERIAS:
a) Caractersticas:
Las bacterias son de vidas libres, cosmopolitas y patgenas para el
hombre y animales.
Miden entre 1 y 10 um
Estos causan enfermedades infecciosas en los seres vivos.
1.4 FUNCIONES:
Nutricion: auttrofa: por fotosntesis y quimiosintesis y hetertrofa
(bacterias)
Reproduccion: asexual y sexual, la reproduccin de las bacterias se
realiza a gran velocidad; algunas se dividen una vez cada 20 minutos.
1.5 DIFERENCIAS MOLECULARES ENTRE UNA BACTERIA GRAM
POSITIVA Y OTRA GRAM NEGATIVA

BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS


Poseen una pared celular interna y una
pared de peptidoglucano. Poseen una pared celular ms compleja:
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto que -pared celular interna
da consistencia y forma esencial para -pared de peptidoglucano
replicacin y supervivencia de la bacteria. - bicapa lipdica externa

No tiene membrana externa Membrana externa: forma un saco rgido alrededor


de la bacteria, mantiene estructura y es barrera
impermeable a macromolculas, ofrece proteccin
en condiciones adversas

No tiene espacio periplasmtico Espacio periplasmtico: espacio entre la superficie


externa de la membrana citoplasmtica y la interna
de la membrana externa.

La red de murena est muy desarrollada y La red de murena presenta una sola capa
llega a tener hasta 40 capas

La penicilina mata a las Gram positivas, ya La penicilina no mata a las Gram negativas, a causa
que bloquea la formacin de enlaces de la capa de lipopolisacridos situada en la parte
peptdicos entre las diferentes cadenas del externa de la pared celular.
peptidoglucano

No contiene LPS Contiene LPS: estimulador de respuestas inmunes:


activa clulas B, liberacin de IL, FNT, IL 6 por
macrfagos.

En la tincin de Gram, retienen la tincin Quedan decoloradas.


azul

Conservan el complejo yodo colorante Pierden el complejo yodo colorante

Son esporulantes y no esporulantes, como Pueden ser anaerobios o aerobios


Streptococcus, Cisteria, Frankia

Poseen otros componentes: cidos Poseen protenas con concentraciones elevadas.


teicoicos y lipoteicoicos, y polisacridos
complejos.
2. TIPOS DE MUESTRAS A CULTIVAR

2.1 LIQUIDO CEFALORRAQUDEO:


a) Toma de muestra:
Lavarse las manos con antisptico y secarlas con toalla descartable.
Colocarse los guantes estriles
Realizar una adecuada limpieza de la piel con alcohol 70: Dejar secar.
Aplicar el antisptico en la zona a punzar. Dejar actuar 1 a 2 minutos.
Realizar la puncin segn las pautas establecidas

Separar el volumen obtenido: En un tubo estril con tapa rosca para el


laboratorio de Microbiologa.

2.2 CATTERES:
a) Toma de muestra:
Lavado de manos con antisptico.
Colocarse los guantes estriles
Realizar la desinfeccin de la piel con alcohol 70. Dejar secar.

Realizar la desinfeccin de la zona peri catter con antisptico. Dejar


secar
Con pinza estril, retirar el catter cuidando que no rozar la piel.

En forma asptica cortar con tijera estril 3 5 cm de la porcin distal


y colocarla en un tubo estril con tapa a rosca.

Remitir inmediatamente al Laboratorio de Microbiologa para su


procesamiento.

2.3. UROCULTIVO
a) Instrucciones para pacientes que no controlan esfnteres:
Lavar los genitales con abundante agua y jabn. En los varones,
retraer el prepucio para su mejor higiene.

Abrir la tapa del frasco en el momento de comenzar la recoleccin al


acecho.
Si se demora la miccin espontnea, reiterar la higiene cada 30
minutos.
Rotular y enviar al Laboratorio INMEDIATAMENTE
b) Puncin supra pbica
Lavado de manos y colocacin de guantes.
Realizar limpieza de la piel con alcohol 70, Dejar secar.

Aplicar antisptico en forma concntrica en la zona de puncin. Dejar


secar.
Aspirar el contenido de vejiga con aguja y jeringa estril y colocar la
orina obtenida en recipiente estril (frasco para urocultivo, tubo cnico
con tapa a rosca).
Rotular y enviar al Laboratorio INMEDIATAMENTE.

Esta forma de obtencin es mandatorio en la evaluacin de recin


nacidos con sospecha de infeccin urinaria.
c) Muestras no aptas:
Punciones de sondas en extremo distal.

2.4. COPROCULTIVO
a) Toma de Muestra
Con el hisopo, tomar la materia fecal recin emitida, eligiendo las
partes mucosas y/o sanguinolentas. No arrastrar demasiado material.
Colocar en un tubo sin medio de transporte.
Enviar inmediatamente al Laboratorio de Microbiologa.

2.5. SECRECIONES CONJUNTIVALES


a) Toma de Muestra

Realizar el hisopado con hisopo de madera y colocarlo en un tubo de


ensayo.

Con otro hisopo: realizar un extendido para coloracin de Gram.


Dejarlo secar al aire y colocarlo dentro de una manopla de polietileno.
Remitirlo al Laboratorio de Microbiologa.
2.6. MUESTRAS RESPIRATORIAS

Para investigacin de Virus, Mico plasmas y Chlamydias: Remitir sonda


con secreciones nasofarngeas. Procesar en forma INMEDIATA de no ser
posible, conservar en refrigeradora (4 - 8C).
Este mismo mtodo se utiliza para la investigacin de Chlamydias en
secreciones conjuntivales.
1. En Refrigeradora:
Uro cultivos.
Punta de catteres en 1ml de solucin fisiolgica.
Soluciones parenterales.
Coprocultivos en medio de transporte semislido si el lapso de
conservacin es mayor de 6 hs.
Muestras para investigacin de:
Micobacteria (esputos, aspirados gstricos)
Chlamydias.
Micoplasmas

3. PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE BACTERIAS

3.1. TINCIN DE GRAM


a) Reactivos usados en la tincin de Gram:
Agua estril para realizar el frotis
Cristal de violeta (violeta de genciana)
Lugol
Alcohol-acetona
Safranina
Agua corriente para enjuagar.

b) Tcnicas de la tincin de Gram:


De preferencia la tincin debe ser realizada sobre un recipiente para que
los desechos sean desechados adecuadamente.

c) Frotis bacteriano
1. Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriolgica hasta el
rojo vivo y esperar a que enfre un poco.
2. Tomar con el asa una gota de agua estril y agregarla en un
portaobjetos.
3. Flamear nuevamente el asa y esperar a que enfre.
4. Tomar con el asa un poco de muestra bacteriana a partir de una
colonia aislada.
5. Despus agregar la muestra en la gota de agua que est en el
portaobjetos y homogeneizar suavemente con movimientos circulares.
6. Esperar que seque al aire libre o poner durante uno o dos segundos
con la llama de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta
que el calor no debe ser directo (slo se pasa por la llama), puesto que
el calor excesivo puede cambiar la morfologa celular de las bacterias
a observar.

d) Tincin:
1. Agregar cristal violeta, solo el suficiente para que se cubra el extendido
bacteriano, dejar actuar durante 60 segundos.
2. Agregar el lugol, solo el suficiente, dejar actuar durante 60 segundos.
3. Enjuagar con agua corriente.
4. Agregar una o dos gotas de alcohol-acetona e inmediatamente
enjuagar con agua corriente.
5. Agregar Safranina, solo la suficiente, Dejar actuar durante 60
segundos.
6. Enjuagar con agua corriente.
7. Dejar secar a temperatura ambiente.
8. Observar en un microscopio ptico con un objetivo 100X usando aceite
de inmersin.

KIT DE COLORACION DE GRAM

BACILOS GRAM POSITIVOS

BACILOS GRAM POSITIVOS BACILOS GRAM NEGATIVOS

e) Fundamento de la tincin de Gram.


1. Los lavados con agua tienen el objetivo de arrastrar mecnicamente el
exceso de colorante y quitar el alcohol-acetona.
2. El colorante cristal violeta es de naturaleza bsica y por lo tanto tiene
afinidad por sustancias cargadas negativamente como la pared celular de
cualquier bacteria. Por lo que bacterias Gram positivas y Gram negativas
son teidas de color violeta.
3. Un mordiente es una sustancia que aumenta la fijacin de algn colorante
sobre una superficie determinada, en este caso el cristal violeta aumenta
su fijacin a la pared celular bacteriana usando de mordiente al lugol, en
la pared bacteriana el lugol forma un complejo con el cristal violeta
insoluble en agua lo que evita que se disuelva y se pierda el colorante
durante el enjuague.
4. Ya sabemos que la pared de los Gram positivos son ricos en cidos
teicoicos no saturados estos muestran gran afinidad por los agentes
oxidantes, todos los mordientes por ejemplo el lugol son agentes
oxidantes y su efecto en general consiste en dar un carcter ms acidez
de los cidos teicoicos lo que aumenta la afinidad de estos por el colorante
bsico cristal violeta.
5. La mezcla de alcohol-acetona es un disolvente orgnico que decolora la
pared bacteriana disolviendo el complejo cristal violeta-lugol, esta
decoloracin no afecta a las bacterias Gram positivas, hay varias
explicaciones al respecto, les menciono las dos ms aceptadas.
Una teora dice: El alcohol-acetona, deshidrata la pared rica en
peptidoglicano de los microorganismos Gram positivos lo cual cierra los
poros de la pared, propiciando una barrera que no permite la salida del
complejo cristal violeta-lugol.
6. En la pared de las bacterias gramnegativos hay poco pptido glicano y
una gran cantidad de lpidos estos ltimos son disueltos por el alcohol-
acetona, lo que permite el escape del complejo cristal violeta-lugol.
7. Otra teora dice: Las bacterias Gram positivas tienen una capa muy
gruesa de peptidoglicano con gran cantidad de enlaces entrecruzados de
cidos teicoicos los cuales son poco solubles en alcohol-acetona
formando una especie de barrera en la pared bacteriana que no permite
la salida del complejo cristal violeta-lugol por ende se retiene el cristal
violeta-lugol en la pared en el proceso de decoloracin.
8. La safranina es un colorante catinico que tie las paredes bacterianas
ya que estas tienen compuestos cargados negativamente, por
consiguiente las bacterias Gram negativas se tien de color rosa, sin
embargo las bacterias Gram positivas no se tien debido a que su pared
celular est saturada del colorante cristal violeta y esto no permite la
entrada de la safranina.
f) Factores que considerar en la tincin de Gram.
1. No se debe sobrepasar los tiempos de tincin y decoloracin.
2. Los cultivos viejos hacen que las bacterias Gram positivas se tian parcial
o totalmente de color rosa.
3. Hay que tomar en cuenta que el agua usada en el frotis se encuentre en
el rango de PH 7-7.8 ya que: Los Gram positivos pueden hacerse
gramnegativos al aumentar la acidez.
Los gramnegativos pueden hacerse Gram positivos al aumentar la
alcalinidad.
4. PRUEBA DE LA CATALASA
4.1. Fundamento de la pruebe de catalasa.
El perxido de hidrgeno es el producto final del metabolismo oxidativo de
carbohidratos, a esta va metablica recibe el nombre de metabolismo aerobio-
oxidativo. La acumulacin del perxido es muy toxico por lo que la mayora de
las bacterias aerobias y anaerobias facultativas exceptuando a Estreptococos
sp. Producen una enzima llamada catalasa que degrada el perxido de
hidrgeno obteniendo agua y oxigeno gas.

4.2. Tcnica e interpretacin de la prueba.


El reactivo utilizado en la prueba es el perxido de hidrogeno al 30%, Hay
diferentes tcnicas para realizar la prueba la ms comn es poner una gota de
perxido en el portaobjetos y posteriormente con un palillo plano tomar un poco
de bacteria a partir de una colonia aislada, si se observa el burbujeo
generalmente intenso significa que hay produccin de oxgeno por lo tanto se
entiende que hay presencia de la enzima catalasa, hay bacterias que dan una
reaccin positiva dbil aunque son las menos.

Control positivo: Staphylococcus aureus

Control negativo: Estreptococos pyogenes

Consideraciones:
No Agar sangre (peroxidasa en los eritrocitos).
5. PRUEBA DE LA COAGULASA
5.1. Fundamento:
Detecta un factor de agregacin clumping factor en la superficie de la
bacteria.
5.2. Coagulasa procedimiento:

Mezcle un asa cargada con el microorganismo obtenido de un cultivo en


medio slido, 0,1 mL de un cultivo en un medio lquido, con 0,5 mL de
plasma, contenido en un tubo pequeo de aproximadamente 7 mm de
dimetro.
Incubar y examine peridicamente.
5.3. Resultados

Se considera que la prueba es positiva si el plasma es coagulado en 3 a


4 horas, aunque algunas cepas con escasa produccin de coagulasa slo
coagulan el plasma despus de 24 horas de incubacin

RESULTADO
NEGATIVO
RESULTADO
POSITIVO

RESULTADO POSITIVO

Nota: los microorganismos diferentes a los estafilococos pueden coagular el


plasma, pero no porque sean productores de coagulasa sino porque utilizan el
citrato empleado como anticoagulante en la obtencin del plasma. Para obviar
esta posible fuente de error, se recomienda utilizar plasma en el cual se ha
utilizado EDTA como anticoagulante.

6. PRUEBA DE LA OXIDASA
Esta prueba est basada en la identificacin de una enzima bacteriana llamada
citocromo C oxidasa y para reducir el nombre se le dice oxidasa.
Todas las bacterias aerobias obtienen su energa en forma de ATP a partir del
proceso de respiracin tambin llamado cadena respiratoria, este se lleva a cabo
en la membrana celular bacteriana, en las siguientes lneas se dar una breve
explicacin de la cadena respiratoria solo con la finalidad de entender de donde
proviene y que realiza la enzima citocromo C oxidasa, entindase que todo este
proceso tiene la finalidad de producir ATP.

6.1. Reactivos usados en la prueba de oxidasa:


Se utilizan colorantes cromgenos que actan como aceptadores artificiales de
electrones que sustituyen de cierta manera al oxigeno usado por la bacteria, los
ms usados son:
Tetrametil-p-fenilendiamina.
Dimetil-p-fenilendiamina.
Indofenol.
El reactivo basado en una disolucin acuosa de tetrametil-p-fenilendiamina al
1%, es el ms comn y recibe el nombre de reactivo de Kovacs. Este reactivo se
puede impregnar en discos o fragmentos de papel filtro grueso. En el comercio
ya se venden tiras o discos impregnados con el reactivo.

6.2. Fundamento bsico:


El reactivo de Kovacs es incoloro pero al ponerlo en contacto con la
enzima citocromo C oxidasa cambia a un color morado debido a que
el tetrametil-p-fenilendiamina es una amina aromtica y la oxidacin de
esta produce quinolonas de color morado-azulado.

6.3. Como realizar la prueba de la oxidasa.


Se toma con un palillo grueso de madera una muestra bacteriana a partir
de una colonia aislada proveniente de un cultivo de 24h.
La muestra se pone en contacto con la tira o disco impregnado.
Se debe observar una coloracin morada en un lapso no mayor a
30segundos para que sea positivo, de lo contrario el resultado es
negativo.

CONTROL POSITIVO CONTROL NEGATIVO

Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli

6.4. Factores a considerar en la prueba de oxidasa.


No considerar un resultado positivo despus de 30 segundos ya que
el oxgeno molecular del ambiente oxida al reactivo.
No usar asa bacteriolgica metlica ya que la mayora de estas con
tienen hierro y este es capaz de oxidar el reactivo dando nos falsos
positivos.
No realizar la prueba de bacterias que provienen de colonias obtenidas
de medios de cultivos que contienen glucosa u otro carbohidrato ya
que la fermentacin del carbohidrato inhibe a la oxidasa dando como
resultado falsos negativos en la prueba.
Para realizar la prueba usar bacterias provenientes de medios de
cultivo como son: Agar sangre, Agar BHI, agar tripticasa soya, agar
nutritivo, agar Mueller Hilton.
7. SISTEMAS MINIATURIZADOS API
Los sistemas miniaturizados API son mtodos rpidos que permiten la
identificacin de microorganismos a travs de la realizacin de diferentes
pruebas bioqumicas. Estos sistemas consisten en un dispositivo de plstico con
varios microtubos que contienen diferentes medios de cultivo deshidratados o
diferentes sustratos de enzimas de acuerdo al tipo de prueba que se requiere
montar. Entre algunas de las pruebas bioqumicas que pueden realizarse con
estos sistemas estn las pruebas de fermentacin de carbohidratos, la
determinacin de la produccin de H2S, la determinacin de la hidrlisis de la
gelatina, entre otras. En el mercado existe una variedad de galeras para ser
utilizadas en la identificacin de diferentes tipos de microorganismos, por ello
aunque todos estos sistemas tienen el mismo fundamento, difieren en el nmero
y tipo de pruebas que permiten realizar, ya que su seleccin est directamente
relacionada con la actividad metablica del gnero al que pertenece el
microorganismo a identificar.

API 20E Permite la identificacin de microorganismos pertenecientes al grupo


de las enterobacterias y de otros bacilos gran negativos. Es una galera
conformada por 20 microtubos. Cuando se utiliza esta galera las cartas de
colores correspondientes a las pruebas negativas y positivas son las siguientes:

7.1. API 20: NE Permite la identificacin de bacilos Gram negativos no


pertenecientes al grupo de las enterobacterias como por ejemplo
Pseudomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Moraxella, Vibrio,
Aeromonas, entre otros. Es una galera conformada por 20 microtubos.
Cuando se utiliza esta galera las cartas de colores correspondientes a
las pruebas negativas y positivas son las siguientes:
a) Inoculacin de los sistemas miniaturizados

Cada microtubo del sistema debe


inocularse con una suspensin en
solucin salina al 0,85% de un cultivo
puro del microorganismo a ser
identificado. En algunos casos estos
microtubos deben llenarse
completamente con la suspensin,
mientras que en otros se requiere del
aadido de parafina lquida estril, que
proporciona las condiciones
anaerbicas necesarias.

Todas las instrucciones para la preparacin de la suspensin, as como para la


inoculacin de cada uno de los microtubos, y las condiciones de incubacin se
pueden encontrar claramente especificadas en los instructivos de uso sealados
por el fabricante para cada tipo de galera.
b) Interpretacin de los resultados

La presencia de enzimas y/o de productos metablicos generados durante el


periodo de incubacin reacciona con los sustratos contenidos en los microtubos
y desarrollan en los mismos una coloracin que puede aparecer en forma
espontnea o con el agregado de algn reactivo para su revelado. La
interpretacin de los resultados se basa en la observacin de las coloraciones
desarrolladas, sta se lleva a cabo mediante la comparacin del color obtenido
en cada microtubo con el que muestra la carta de colores. De acuerdo a esa
interpretacin se puede establecer un resultado positivo (+) o negativo (-). A
manera de ejemplo sealamos los resultados obtenidos con un sistema
miniaturizado API 20E.

Despus del periodo de incubacin y comparar, con la carta de colores, los


resultados obtenidos en cada microtubo se colocan en la hoja de resultados que
suministra el fabricante.
Los datos as obtenidos pueden transformarse en un cdigo de 7 dgitos
denominado perfil numrico que resulta de la suma de los valores
correspondientes a las pruebas positivas asignados previamente en la planilla.
En algunos sistemas miniaturizados se recomienda la realizacin de pruebas
bioqumicas opcionales, que permiten obtener dos dgitos adicionales.

El cdigo obtenido se corresponder a un determinado gnero o especie de


acuerdo a la informacin contenida en las bases de datos suministradas por el
fabricante y que pueden encontrarse disponibles en forma impresa y/o
electrnica.

c) Materiales para el Sistema API

1. Agua destilada
2. Pipetas Pasteur
3. Capucho para sostener la
pipeta
4. Parafina
5. Pipeta para coger el agua
destilada para colocar a los
posillos.
6. La suspensin de la bacteria
en agua destilada
7. El sistema API

d) PREPARACIN DE LA SUSPENSIN BACTERIANA

1. Tomar una colonia bien aislada de cada


microorganismo y re suspenderla
homogneamente en 5 mL de solucin salina (1%
de NaCl) o 5 mL de agua estril.

e) SIEMBRA DE LA GALERIA API


Cada pocillo tiene un tubo y una cpula (parte aerobia).

1. Llenar con la suspensin de bacterias los


tubos, no la cpula, de todos los pocillos.
2. Llenar la cpula de los pocillos CIT, VP,
GEL con la suspensin n de bacterias.

f) TAPAR CON PARAFINA LIQUIDA

1. Llenar con parafina las cpulas de los


pocillos ADH, LDC, ODC, URE, H2S para
obtener anaerobiosis.

g) PONER LA GALERA EN SU PROPIA CMARA HMEDA DE


INCUBACIN
1. Poner la tira en su propia cmara hmeda
de incubacin. Previamente poner agua
en los alvolos de la cmara para
proporcionar una atmsfera hmeda
durante la incubacin.

h) INCUBACIN EN ESTUFA

1. Incubar a 37 C durante 18-24 h.

i) ANOTAR LOS RESULTADOS INMEDIATOS

1. La lectura de los resultados se lleva a cabo


por comparacin de los colores de cada
pocillo con los de las tablas de lectura.
Y anotando el resultado como positivo o
negativo.
j) REVELADO DE PRUEBAS QUE REQUIEREN REACTIVOS

Para la lectura se tienen en cuenta los siguientes criterios:

Si la glucosa da negativo y los tests positivos son 2 o menos de 2,


no hay que aadir reactivos. Cuando sto ocurre se hacen otros
tipos de API como el API 20NE, API OF, el API M o el API 10S para
ver determinados metabolismos especiales.
Si la glucosa es positiva y/o 3 o ms tests son positivos se revelan
los test que requieren reactivos:

a. TDA

Aadir una gota de FeCl3 10 %. Positivo = color


marrn oscuro

b. VP

Aadir una gota del reactivo 1 (KOH al 40%) y


una gota del reactivo 2 (C2 H5 OH). Positivo =
color rosa fuerte o rojo en 5-10 minutos.

c. IND

Aadir una gota de reactivo de Kovacs (1) o de


Dimetilamino-cinamaldehido (2). Dependiendo del
reactivo utilizado pueden darse las posibilidades
siguientes:

(1)Positivo = aparece un anillo rosa-rojo

(2)Positivo =color de rosa a morado en todo el


pocillo

d. Oxidasa

Aadir una gota del reactivo (tetrafenilendiamina)


recin preparado. Positivo = color azul que aparece
inmediatamente
k) ANOTAR EL RESTO DE RESULTADOS

La lectura de los resultados se lleva a cabo por


comparacin de los colores de cada pocillo con los
de las tablas de lectura.

Y anotando el resultado como positivo o negativo.

l) PERFIL NUMRICO E IDENTIFICACIN

Del conjunto de reacciones y resultados se obtiene


un perfil numrico de 7 cifras. Los pocillos estn
separados en grupos de tres: en total tenemos 7
grupos de tres tubos o tripletes (el test nmero 21
corresponde al test de la oxidasa). A cada pocillo se
le da el valor 0, 1, 2 o 4.

Si la reaccin es negativa se pone 0


Si la reaccin es positiva se pone: 1 si es el primer pocillo de un triplete;
2 si es el segundo. 4 si es el tercero.
Se suman los valores de cada triplete y se obtiene un cdigo de 7 cifras.
Con este cdigo se busca en la tabla de identificacin la especie de que
se trata.
Si la reaccin es negativa se pone 0.

8. DESCRIPCIN Y UTILIZACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

8.1. MEDIOS DE CULTIVO COMUNES:


a) Agar sangre: Es un medio enriquecido que se utiliza adems para la
investigacin de los diversos tipos de hemlisis (, o gamma). Se utiliza
para el crecimiento de estreptococos. Para la preparacin del agar sangre
se puede utilizar el agar nutritivo enriquecido con cloruro sdico o un
preparado enriquecido con otras sustancias como Columbia o el tripticase
de soja.
La adicin de sangre a un medio de cultivo no proporciona las sustancias
que estn en el interior de los hemates, pero s puede aadir factores
inhibidores del crecimiento bacteriano presentes en el suero. Este es un
inconveniente que puede solucionarse calentando la sangre para romper
los eritrocitos y para que se destruyan las sustancias inhibidoras, que son
termolbiles. La sangre utilizada como aditivo a estos medios suele ser
sangre de carnero diluida al 5%, pero en algunas ocasiones es necesario
utilizar sangre de otras especies (caballo, conejo, humana), pues facilitan
las reacciones hemolticas o contienen determinados factores de
enriquecimiento o no poseen sustancias inhibidoras del crecimiento de
determinados grmenes.

b) Agar chocolate: El agar chocolate se obtiene calentando la sangre antes


de adicionarla a la media base. Por esta razn el agar chocolate contiene
hemoglobina, que aporta al medio un importante elemento para el
crecimiento: el factor X o hemina termoestable. El agar chocolate es un
medio destinado principalmente al aislamiento de Neisserias (gonococos
y meningococos) y Haemophilus, pero en l pueden crecer muchos otros
microorganismos exigentes.
El agar chocolate puede convertirse quizs en uno de los medios ms
enriquecidos si aadimos una mezcla de factores de crecimiento no
contenidas en la sangre.

c) Agar Mac Conkey: Es un medio utilizado para el aislamiento e


identificacin de entero bacterias. Es un medio inhibidor de los grmenes
Gram positivos por su contenido en cristal violeta y selectivo para entero
bacterias por su contenido en sales biliares.
En su composicin lleva un azcar (lactosa) y un indicador (rojo de metilo)
que lo convierten en un medio diferencial. Los grmenes que fermenten
la lactosa producen una acidificacin del medio que hacen aparecer de
color rojo fuerte a las colonias resultantes. Las colonias lactosa negativas
sern incoloras, apareciendo del mismo color que el medio subyacente
(naranja).

d) Agar Mueller-Hinton: Es el medio universalmente aceptado para la


realizacin de los antibiogramas o pruebas de sensibilidad a los
antimicrobianos. A l nos referiremos ms ampliamente en el captulo
correspondiente
ANEXOS

N.Gonorrea polimorfonuclear Staphylococcus Gram


Tincin Gram positivos

Leishmania Cutanea Tincion Giemsa Levadura en una muestra de isopado


faringeo Tincin de Gram

Hongo en muestra de hisopado


Espermacultivo en Tincin de Gram
farngeo Tincin de Gram
Bartonella baciliforme Pseudohifas de hongos

Bacilos Gram Negativo Gargerella vaginalis

Leishmania Lesihmania (nido de amastigotes)


Leishmania (nido de amastigotes) Bacilo Gram Positivo

Estafilococos en directo

LAMINAS TOMADAS CON CMARA EN EL


TRANSCURSO DE LA ROTACIN.
9. ANTIBIOGRAMA

9.1. LOS ANTIBITICOS

Un antibitico ha sido definido como una sustancia qumica producida por un


microorganismo capaz de inhibir el desarrollo de otros microorganismos. Los
antibiticos modificados por manipulaciones qumicas a un se consideran como
tales. Un agente antimicrobiano es activo contra los microorganismos y puede
ser producido en forma natural por microorganismos o sintticamente en el
laboratorio. El trmino agente quimioterpico ha sido empleado para referirse a
agentes antimicrobianos sintticos o no y tambin se refiere a agentes que
actan contra clulas humanas como inmunomoduladores y drogas
antitumorales. Los trminos agente antiviral y agente antimictico son trminos
ms especficos, incluidos dentro de la categora ms general de agentes
antimicrobianos.

Ya que no se puede predecir la susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus


a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es necesario estudiar la
sensibilidad individual de cada patgeno a estas drogas, pudindose elegir
entonces el agente apropiado (el ms activo contra el patgeno, el menos txico
para el husped, con las caractersticas farmacolgicas apropiadas y el ms
econmico), que proporciona mayores posibilidades de una evolucin favorable.

Un concepto importante sobre el que es necesario insistir es que no se pueden


realizar pruebas de sensibilidad in vitro con cultivos mixtos, slo los cultivos
puros proporcionarn resultados vlidos sobre la eficacia de un antibitico.

En lneas generales y en funcin sobre su forma de actuar sobre los


microorganismos, hablamos de dos grandes grupos de antibiticos

a) Antibiticos primariamente bactericidas: Ejercen una accin letal e


irreversible sobre el microbio (Fosfomicina Vancomicina. B-
Lactmicos Polimixina. Aminoglucsidos Rifampicina. cido Nalidxico
Quinoleinas. Nitrofurantoinas).
b) Antibiticos primariamente bacteriostticos: Inhiben el crecimiento
pero no matan al microorganismo, permitiendo que las propias
defensas del husped pueden eliminar a las bacterias (Tetraciclina
Cloranfenicol. Sulfonamidas Trimetroprim. Lincomicina Clindamicina.
Macrlidos)
9.2. EL ANTIBIOGRAMA

a) Por qu realizar un antibiograma?


El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una cepa
bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a uno o varios
antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los requisitos previos
para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico. El antibiograma sirve, en
primer lugar, para orientar las decisiones teraputicas individuales.

El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las


resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a escala
de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un pas, es como
puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse regularmente los espectros
clnicos de los antibiticos y adoptarse ciertas decisiones sanitarias, como el
establecimiento de programas de prevencin en los hospitales.

b) Cundo realizar un antibiograma?


Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad diagnstica haya permitido el
aislamiento de una bacteria considerada responsable de la infeccin.

Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el bacterilogo y


el clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el microbilogo no podr
determinar con certeza que el aislamiento de una bacteria exige un antibiograma,
sin los datos clnicos que le aporta el mdico. Por ejemplo, una bacteria no
patgena puede ser responsable de la infeccin de un enfermo inmunodeprimido
o en un lugar determinado del organismo. La presencia de signos clnicos puede
ser tambin determinante para la realizacin de un antibiograma (por ejemplo: la
infeccin urinaria con un nmero reducido de grmenes).

c) Sensibilidad bacteriana a los antibiticos:


La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base de la
medida de la sensibilidad de una bacteria a un determinado antibitico. La CIM
se define como la menor concentracin de una gama de diluciones de antibitico
que provoca una inhibicin de cualquier crecimiento bacteriano visible. Es el
valor fundamental de referencia que permite establecer una escala de actividad
del antibitico frente a diferentes especies bacterianas.

Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina, y


de manera semicuantitativa, las CIM (mtodos manuales y mtodos
automatizados o semiautomatizados). Estos diferentes mtodos de rutina
permiten categorizar una cierta cepa bacteriana en funcin de su sensibilidad
frente al antibitico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia (I)
o Resistente (R) al antibitco.

Para un determinado antibitico, una cepa bacteriana es:


a. Sensible: si existe una buena probabilidad de xito teraputico en
el caso de un tratamiento a la dosis habitual.
b. Resistente: si la probabilidad de xito teraputico es nula o muy
reducida. No es de esperar ningn efecto teraputico sea cual
fuere el tipo de tratamiento.
c. Intermedia: cuando el xito teraputico es imprevisible. Se puede
conseguir efecto teraputico en ciertas condiciones (fuertes
concentraciones locales o aumento de la posologa).

9.3. DISCOS QUE SE USAN EN LAS DIFERENTES MUESTRAS

a) UROCULTIVO

ORINA Echerichia coli

- Gentamicina - Ciprofloxacino
- Ceftriaxona
- Ceftazidima
- Amikacina
- Nitrofurantoina
- Sulfatrimetoprim (cotrimoxasol)
- Ac. Nadilixico
ORINA Streptococcus Fecalis

- Impenem
- Amoxicilina
- Vancomicina
- Azitromicina
- Clorafenicol
- Ampicilina Sulbactam
- Penicilina
- Cefotaxima acida clavulanico

b) COPROCULTIVO

HECES Escherichia Coli

- Gentamicina
- Ceftazidima
- Ceftriaxona
- Furazolidona
- Cefoxitima
- Clorafenicol
- Amikacina
- Ciprofloxacino
c) SECRECIN FARINGEA

ESPUTO Streptococcus viridaes

- Amikacina
- Cefotaxima clavulanico
- Ceftriaxona
- Levofloxacino
- Ampicilina Sulbactam
- Piperaciclina- tazobactam
- Cefadroxilo

ASPIRADO TRAQUEAL Streptococcus Neumoniae

- Ampicilina Sulbactam
- Penicilina
- Vancomicina
- Gentamicina
- Amoxici clavulanico
- Imipenem
- Ciprofloxacino
- Azitromici
9.4. PROCEDIMIENTO PARA EL ANTIBIOGRAMA

a) Principalmente se realiza una suspensin


en un frasco de agua destilada con la
colonia obtenida de la placa donde creci
sea en el Agar Mc Conkey o Mueller Hilton
Sangre.

b) Luego se coge una placa de Mueller Hilton


sangre si creci en el Agar Mueller Hilton
sangre y si creci en el Agar Mc Conkey
se coger un Mueller Hilton solo.

c) Luego se proceder a realizar la


suspensin que es vaciar el contenido del
frasco donde se hizo la suspensin en la
placa correspondiente y luego se llevara a
encubar para que pueda secar bien el
lquido que se vaco.

d) Luego de haber pasado 30 minutos en la


incubadora se proceder a colocar los
discos referentes a la bacteria y tipo de
muestra que se suspendi en la placa.

e) Luego se llevara a la incubadora por 24


horas, para poder observar la resistencia
de la bacteria a dichos discos de
medicamentos, referente al tipo de
muestra.
MICOLOGIA
La Micologa es la rama de la microbiologa que estudia los hongos desde el
punto de vista bsico y aplicado, con el fin de conocer su morfologa, estructura,
fisiologa, bioqumica y gentica, as como sus interacciones con otros
organismos bien sean positivas o negativas.

1. MORFOLOGA.

a) Las hifas son estructuras cilndricas, cenocticas (aceptadas) o tabicadas


(con septos), generalmente multinucleadas. Crecen por el pice (elongacin)
y pueden hacerlo en cualquier direccin, incluso dentro del sustrato. Un
conjunto de hifas se denomina micelio y cuando alcanzan cierto tamao se
dice que forma colonias.
b) Las levaduras presentan formas diversas, esfrica, ovoide, elipsoidal y
cilndrica; crecen de forma isodiamtrica (por todos lados) constituyendo la
parte vegetativa y en poco tiempo se reproducen asexualmente por
gemacin, fisin binaria o fragmentacin. Algunas levaduras forman cadenas,
estructuras a las que se denomina seudohifas (por lo que la agregacin de
varias de ellas se conoce como seudomicelio).

En la Micologa Mdica se consideran los hongos dimrficos. Habitualmente, en


estos casos, se identifica una forma infectiva, y una forma parasitaria, la primera
presente en la naturaleza, la segunda en el hospedero. La reproduccin puede
ser asexual (mitosis) o sexual (meiosis), y pueden presentarse simultneamente.

a. Micosis Superficiales: Dermatofitosis, Pitriasis versicolor, tia negra.


b. Micosis Subcutnea: Esporotricosis, Cromoblastomicosis, micetoma
c. Micosis Sistmica: Histoplasmosis, Coccidioidomicosis,
paracoccidioidomicosis
d. Micosis por Oportunista: Candidiasis o Candidiasis, Criptococosis,
Mucomicosis, Aspirgilosis, Neumocistosis, Microsporidiosis

2. PRUEBA DE IDENTIFICACIN PARA HONGOS


Los procedimientos del laboratorio incluyen:

2.1. . Demostracin de los hongos en los especmenes a estudiar mediante


a) Microscopa ptica:
Frescos (KOH, Tinta china).
Tinciones (Gram, Giemsa)
b) Cultivos (incluye identificacin hasta especie y la determinacin de la
sensibilidad in vitro).
2.2. Deteccin de la respuesta humoral especfica en determinados hongos
patgenos.
2.3. Deteccin de antgenos fngicos y metabolitos en fluidos corporales o
tejidos mediante tcnicas serolgicas.

2.4. PASOS:

a) Se realiza un raspado de la zona donde


est creciendo el hongo, con un bistur
nmero 21.

b) Se coloca una gota del KOH en la lmina.

c) Luego se procede a colocar un poco de la


muestra del raspado realizado y se realiza
un scroash con la laminilla.

d) Y se proceder a leer en el microscopio


para identificar el tipo de micosis de la
muestra obtenida del paciente.

LAMINA CON KOH


3. TECNICA PARA EL CULTIVO DE HONGOS EN AGAR
SABURAUD

3.1. PASOS:

a) Tener el tubo de Agar Saburaud ya preparado


y los materiales que se requiere.

b) Se procede a agarrar con el asa de


Henle la muestra.

c) Se coge el tubo de Agar Saburock y


se procede a colocar la muestra del
raspado de hongo que se obtuvo con
el asa de Henle.

d) Se realiza un extendido cuidadosamente con


el asa de Henle impregnando la muestra en
el agar con mucho cuidado.

e) Luego se coloca en la incubadora y se espera 15 das a su


crecimiento.

AGAR SABURAUD PARA


INCUBADORA
CULTIVAR MUESTRAS DE
HONGOS
4. MICROCULTIVO
El microcultivo es el procedimiento idneo para la identificacin de estructuras
fngicas, pues te permite visualizar al microscopio el micelio en su conjunto no
solo una parte del mismo, como ocurre con el mtodo de disociacin.
4.1. PASOS

a) En la placa Petri se colocara dos varillas de vidrio


en forma de V. Todos estos materiales antes han
tenido q esterilizarse en el autoclave.

b) Colocar el portaobjetos sobre la barra de vidrio.

c) Recortar un cuadradito de
medio de cultivo (superficie =
de la del cubreobjetos).

d) Colocarlo sobre el portaobjetos con ayuda de un bistur.

e) Tomar un fragmento del


hongo y sembrarlo en
los cuatro lados del
medio de cultivo.

f) Colocar el cubreobjetos sobre el medio de cultivo


inoculado.
g) Aadir el agua destilada estril en la placa.

h) Cerrar la placa y sellar con para film e incubar


7 das a 25C.

i) Colocar una gota de lacto fenol sobre un


portaobjetos limpio.

j) Flamear las pinzas

k) Retirar el cubreobjetos

l) Colocar el cubreobjetos sobre el portaobjetos y


esperar unos instantes para que acte el lactofenol.

m) Si se desea, se sella la preparacin para su mejor


conservacin, con barniz de ua.

n) Observar al microscopio con el objetivo seco


fuerte (x40). Y localizar las estructuras
caractersticas del hongo a observar.
ANEXOS

Aspergillus en raspado farngeo Aspergillus en raspado farngeo

Microconidias en racimo Epidermophyton

Pseudohifas en herida de muslo Pseudohifas en secrecin vaginal


Hifas septadas en muestra de heces Trichophyton sp

Candida albicans Fonsecaea sp

Penisillun sp. Trichophyton rubrum microconidias


Alternaria sp. Trichophyton rubrum

Aspergillus sp. Trichophyton sp. en KOH

Fonsecae sp Cladosporium sp.


Sporothrix schenckii Blastomicis dermatidis

LAMINAS TOMADAS CON CMARA EN EL


TRANSCURSO DE LA ROTACIN.
BACILOSCOPIA
La tuberculosis (abreviada TBC o TB), llamada antiguamente tisis; es una
infeccin bacteriana contagiosa que compromete principalmente a los pulmones,
pero puede propagarse a otros rganos. La especie de bacteria ms importante
y representativa causante de tuberculosis es Mycobacterium
tuberculosis o bacilo de Koch, perteneciente al complejo Mycobacterium
tuberculosis. La TBC es posiblemente la enfermedad infecciosa ms prevalente
en el mundo. Aunque la tuberculosis es una enfermedad predominantemente de
los pulmones, puede afectar tambin el sistema nervioso central, el sistema
linftico, el sistema circulatorio, el sistema genitourinario, el aparato digestivo,
los huesos, las articulaciones e incluso la piel.

1. TRANSMISIN
La tuberculosis es transmitida de persona a persona principalmente por va
respiratoria, a travs de las gotitas de Pflge. Los bacilos tuberculosos (en
nmero de 1 a 3) forman los ncleos de estas pequeas gotitas, lo
suficientemente pequeas (1-5 micras de dimetro) como para evaporarse, y
permanecer suspendidas en el aire varias horas.
Las partculas de mayor tamao, aunque tengan mayor nmero de bacilos, son
menos contagiosas, pues caen por gravedad, o en el caso de ser inhaladas, son
eliminadas por el sistema mucociliar y la tos. Cuando una persona
con tuberculosis pulmonar o larngea tose, estornuda, habla o canta, emite estas
pequeas partculas.
La posibilidad de que la enfermedad se transmita depende de cuatro factores:

Las caractersticas del enfermo.


El entorno en que tiene lugar la exposicin.
La duracin de la exposicin.
La susceptibilidad del receptor

Las micobacterias son sensibles a la radiacin ultravioleta. As, raramente, se


produce el contagio en la calle, a la luz del da.
El hacinamiento facilitar la posibilidad de transmisin. De nuevo, una medida
tan simple como una buena ventilacin har disminuir esta posibilidad (con seis
o ms intercambios del aire de la habitacin en una hora son suficientes).
El contagio se puede producir en un contacto espordico con un enfermo, pero
evidentemente cuanto ms ntimo y prolongado sea el contacto, mucho mayores
sern las posibilidades: familiares, compaeros de habitacin, compaeros
de trabajo etc., sern los que ms frecuentemente se infecten. En general, se
acepta que el 23-25 por ciento de los contactos con un caso infeccioso se
infectarn.
La tuberculosis extra pulmonar rara vez es contagiosa. Sin embargo, se han
publicado casos de transmisin al realizar tcnicas que producen aerosoles,
como pudiera ocurrir en las autopsias. No se transmite a travs de utensilios,
vajillas etc.
Aunque extremadamente rara, se ha documentado la transmisin
del hombre a animales de compaa y viceversa.
Clsicamente, se hablaba de la posibilidad de transmisin de M. bovis a travs
de la ingestin de lecha de vaca, penetrando a travs de la mucosa
gastrointestinal. Hoy en da, con las tcnicas de higienizacin de la leche, es
prcticamente inexistente.

2. CALIDAD DE MUESTRA
a) La muestra de esputo mucopurulenta, proveniente de rbol bronquial, es la
que asegura mayor probabilidad de que se puedan observar bacilos
b) Una buena muestra tiene aproximadamente 3 a 5ml, es generalmente espesa
y mucoide. Puede ser fluida con partculas de material purulento. El color es
variable (blanco, amarillento y hasta verdoso).

3. OBSERVACION MICROSCOPICA Y LECTURA DE


EXTENDIDOS
LA OBSERVACIN MICROSCPICA DEBE CUMPLIR PRINCIPALMENTE
DOS OBJETIVOS:
Determinar si en el extendido hay BAAR.
Cuantifica la riqueza en bacilos.
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DEL BACILO DE LA
TUBERCULOSIS
De 1 y 10 um de largo
Con coloracin de ziehl neelsen se observan como bastoncitos delgados,
ligeramente curvos, rojo fucsia, destacndose claramente contra el fondo
azul.
Pueden presentarse aislados, apareados o agrupados
OBSERVACIN MICROSCPICA
Colocar una gota de aceite de inmersin en el extremo izquierdo del frotis
teido,
Enfocar el portaobjetos con el lente objetivo de 40x antes de 100x
Despus de encontrar el rea adecuada, cambiar a la lente objetivo de
100x.
La lente objetivo no debe tocar el portaobjetos (falsos positivos)
Examinar sistemticamente 100 campos tiles.
Despus de observar un campo microscpico, desplazar el portaobjetos
longitudinalmente para poder examinar el campo contiguo.
CONTEO DE BAAR
Contar el nmero de campos que ha ledo y el nmero de BAAR que ha
identificado.
Se puede utilizar una cuadricula de 10 cuadrados por 10 cuadrados, que
representan los 100 campos microscpicos, como ayuda para registrar la
cuenta.
En cada cuadrado anotar el nmero de BAAR que se observa.
Si no observa BAAR consignar 0.

REPORTE DE RESULTADOS

POSITIVO + POSITIVO ++ POSITIVO +++


PARASITOLOGIA
1. GENERALIDADES DE LOS PROTOZOOS
a) Filo Sarcomastigophora: Microorganismos con seudpodos o flagelos como
orgnulos de locomocin; este filo comprende amebas y parasitos flagelados.
b) Filo Ciliophora: Microorganismos provistos de cilias, entre los cuales uno solo,
Balantidium coli, es parasito del hombre.
c) Filo Apicomplexa: Este filo extenso y variado abarca coccidios instestinales
parasitos de la sangre y los tejidos.
d) Filo Microspora: Microorganismos formadores de esporas, representados por
parasitos del ser humano de los generos Encephalitozoon, Enterocytozoon,
Vittaforma, Nosema, Pleistophora, Trachipleistophora y Microsporidium,
gnero al que se le asigna microorganismos no bien descritos o no
clasificados

2. DIAGNOSTICO DE INFECCION POR PROTOZOOS


La identificacin de protozoos intestinales parasitos del ser humano se basa en
el reconocimiento de sus estadios de quistes, de trofozoitos o de ambos. Loa
trofozoitos tienen una membrana delgada, y presentan tamaos y formas
diversos. Los quistes son esfricos, subesfericos o alargados. Tienen poca
variacin de tamao, y su pared es lisa y uniforme.

Caractersticas morfolgicas que permiten identificar protozoos intestinales y


auriculares:

a) TAMAO: Despus de la fijacin, los trofozoitos y quistes se contraen, de


manera que los microorganismos vivos tienen mayor tamao que los fijados.
b) MOTILIDAD: Los trofozoitos de amebas, de flagelados y del ciliado B. coli
pueden mostrar un movimiento caracterstico en heces liquidas recientes o
en muestras blandas. Rara vez, se encuentran trofozoitos de protozoos
intestinales en la materia fecal bien formada, aunque en ocasiones se
observan trofozoitos de Dientamoeba Fragilis en heces formadas o
semiformadas. Algunas amebas, como Entamoeba histolytica, tienen un
movimiento direccional progresivo, mientras que otras presentan movimiento
aleatorio lento (Entamoeba coli y Endolimax nana). Los flagelos Giardia,
Chilomastix, Pentatrichomonas y Trichomonas tienen una motilidad bastante
caracterstica, al igual que el ciliado B. coli
c) NUCLEOS: La mayor parte de los trofozoitos contiene un solo nucleo, con
excepcin de los flagelados Dientamoeba y Giardia, y del ciliado B. coli.
Segn la especie, en los quistes maduros se observan un nmero de ncleos
caracteristicos, entre uno y ocho. La morfologa nuclear es de gran
importancia para el diagnstico de especie. Son aspectos de inters el
tamao y la localizacin del cariosoma, la presencia o ausencia de cromatina
perifrica en la superficie interna de la membrana nuclear y su patrn de
distribucin, y la presencia de cromatina adicional en el nucleo.
d) CITOPLASMA: El aspecto del citoplasma, en especial en los trofozoitos, es
util para el diagnostico. Puede ser granuloso grueso o fino. Puede contener
vacuolas, fibrillas u organulos y sustancias ingeridas (eritrocitos, globulos
blancos, bacterias, levaduras). Los quistes de las amebas pueden contener
cuerpos cromatoides y glucogeno (mas comun en quistes inmaduros); en los
flagelados puede haber diversos tipos de fibrillas.

Si bien los microscopistas experimentados a menudo pueden detectar un


diagnstico preciso de protozoos intestinales hacer un diagnstico preciso de
protozoos intestinales en preparaciones en fresco de materia fecal, se
recomiendan los frotis de materia fecal con tincin permanente para un examen
parasitolgico minucioso y completo. Los frotis de materia fecal teidos tienen
algunas ventajas con respecto a los de preparaciones en frescos:

Permiten un diagnstico ms preciso de los microorganismos hallados.


Permiten detectar y reconocer microorganismos que no se identifican en
las preparaciones en fresco.
En las preparaciones teidas se observan mejor los detalles nucleares.
Pueden Conservarse como registro en forma permanente.

3. AMEBAS

La capacidad de identificar amebas sobre la base de la morfologa nuclear en


preparaciones con solucin fisiolgica o con yodo es limitada. El yodo permite
la tincin del glucgeno y la visualizacin de los ncleos en preparaciones
temporarias. Si bien a menudo es posible visualizar los ncleos de los quistes
de E. coli preparaciones con solucin fisiolgica o formol, no es fcil ver los
quistes de E. histolytica, Entamoeba Hartmanni y Endolimax nana. El uso de
yodo permite enumerar los ncleos de estas especies, pero no percibir los
detalles morfolgicos.

Los quistes de las amebas suelen mostrar una granulacin fina. En su estado
maduro, el nmero de nucleos varia de uno (Iodomoeba, Entamoeba polecki), a
cuatro (E. histolytica/ E. hartmanni, E. nana) u ocho (E. coli). Las masas de
glucgeno, asociadas sobre todo con quistes de Iodamoeba, pueden verse
tambin en quistes inmaduros o maduros (con menor frecuencia) de especies de
Entamoeba y E. nana. Otras inclusiones citoplasmticas de los quistes son
cuerpos cromatoides refringentes en forma de bastones con extremos
redondeados (E.Histolytica / E. dispar y E. hartmanni) o con estremos irregulares
(E. coli). Se tie de color rosado a rojo con tincin tricromica o de color azulado
a negro con hematoxilina ferrica, pero no se tien con yodo.

4. FLAGELADOS
Giardia duodenales (=G. lamblia), denominada tambin G. intestinales, es
robablemente el flagelado humano mas conocido. Dientamoeba fragilis,
clasificada antes como ameba, ha sido reclasificada como flagelado y esta
relacionada con tricomonas. Las tricomonas y D. fragilis carecen de estadio
qustico.
Dientamoeba fragilis, si bien se suele afirmar que no es patgena para el ser
humano, se asocia con diarrea y otros sntomas intestinales en muchas
personas. Por lo general, los trofozoitos de Dientamoeba tienen uno o dos
ncleos, aunque predominan las formas binucleadas. El ncleo carece de
cromatina perifrica, y el cariosoma est fragmentado en cuatro o ms grnulos
en una masa central.
Giardia duodenales es uno de los protozoos intestinales diagnosticados con
mayor frecuencia en los Estados Unidos. Se consideraba no patgeno, aunque
en la actualidad se reconoce que en general es patgeno y que provoca
sntomas que varan desde la diarrea leve hasta sndrome de malabsorcin, por
ejemplo esteatorrea; la infeccin es ms complicada en los nios.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA DE
AZUCARES REDUCTORES (BENEDICT)

EN UN TUBO SE COLOCA UN EN EL MISMO TUBO CON EL


POCO DE MUESTRA Y SOLUCION EN OTRO TUBO SE COLOCA SOBRENANDANTE SE COLOCA
SALINA, SE DEJASEDIMENTAR 1.5 DEL SOBRENADANTE DE 1.5 DEL REACTIVO DE
POR 30 MINUTOS LA MUESTRA PREPARADA BENEDICT

SE OBSERVARA QUE SE AGITA SUAVEMENTE EL AGARRADO EL TUBO DE UNA


COMIENZA A EBULLISIONAR TUBO CON LA MUESTRA PINZA EN FORMA DE TIJERA SE
Y A CAMBIAR DE COLOR, SOBRE EL MECHERO DURANTE COLOCA AL MECHERO Y SE
LUEGO SE DEJA ENFRIAR 2 MINUTOS COMIENZA A MOVER

LECTURA:

Reaccin Positiva:

1+ Turbidez con precipitado verde


2+ Amarillo
3+ Rojo ladrillo
PROCEDIMIENTO DE SANGRE OCULTA
(THEVENON)

EN UN TUBO HACER LA COLOCAR EN OTRO


AGREGAR TRES GOTAS DE
SUSPENSION DE HECES. TUBO 1ML DEL
ACIDO ACETICO Y LUEGO
DEJAR SEDIMENTAR POR SOBRENADANTE
AGITAR
30 MINUTOS

AADIR 0.5 ML. DE AGUA AADIR 0.5 ML. DE


OXIGENADA PIRAMIDON, LEERLO LUEGO DE UN
DESLIZANDOLO POR LA DESLIZANDOLO POR LA MINUTO
PARED DEL TUBO PARED DEL TUBO
SUAVEMENTE. SUAVEMENTE.

LECTURA:
Reaccin Positiva: Se formara un anillo visible en la
superficie de color violeta o negro
PROCEDIMIENTO DE LEUCOCITOS EN HECES
(REACCIN INFLAMATORIA)

Se codifica el tipo de muestra que piden para la reaccin inflamatoria.


Luego se agarra una baja lengua, y se comienza a buscar en la muestra
un poco de moco.
Ya encontrado el moco se coge con la baja lengua y se hace un
extendido en la lmina y se deja secar por 30 minutos.

MUESTRA CON HECES, SE


REVUELVE BIEN BUSCANDO LAMINA CON MOCO DE LAS
PRESENCIA DE MOCO HECES

Lectura:

Reaccin Positiva:

Ms de 3 leucocitos por campo


METODO DE SEDIMENTACIN ESPONTANEA Y
MICROFLOTACION DE FAUST
MATERIALES:
- Copas cnicas de vidrio
- Coladores finos de plstico
- Gasa
- Baja lenguas
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Microviales de base cnica
- Pipetas descartables
REACTIVOS:
- Solucin de lugol
- Solucin de sulfato de Zinc
- Agua destilada
- Solucin de leja
EQUIPOS E INSTRUMENTOS:
- Centrifuga para micro viales
- Microscopio

AZUL DE
SULFATO DE LUGOL METILENO
AGUA DESTILADA ZINC

MICROCENTRIFUGA MICROSCOPIO
PROCEDIMIENTO

1. Se prepara los coladores de plstico con una doble capa de gasa sobre
las copas de vidrio.
2. Se colocan aproximadamente 4 gr. De heces, usando el baja lenguas. La
muestra se hace pasar con agua destilada, tratando de homogenizar al
filtrar.
3. Se deja reposar 45 minutos.
4. Con una pipeta se llenara el sobrenadante en el micro vial hasta la mitad
y la otra mitad se llena la solucin de sulfato de Zinc hasta el borde.
Centrifugar a 2.300 rpm, durante un minuto.
5. De ah se deja solo el sedimento en la copa y lo que resta del
sobrenadante se desecha.
6. Tomar con una pipeta una alcuota de la superficie del micro vial. Colocar
en el portaobjetos 1 gota de la muestra con 1 gota del Lugol y cubrirlo con
una micro laminilla
7. Simultneamente colocar en el otro extremo del portaobjetos 1 gota del
sedimento del micro vial y cubrir con un micro laminilla.
8. Y luego llevarlo al microscopio a menor y mayor aumento para su lectura.

HECES CON EL METODO DE SEDIMENTACIN


LAMINAS DE PARACITOLOGIA

Leucocitos en heces Entamoeba coli

Enterobius vermicularis u Trichuris trichura


oxiuros
Trofozoito Giardia lamblia Trofozoito de Entamoeba hominis

Ascaris lumbricoides Hymenolepis nana - huevo

Hongos en heces Fasciola hepatica


Huevo fertilizado de Ascaris Trofozoito de Blastocystis
lumbricoides hominis

Hongos con septas y levaduras en


muestra de heces

LAMINAS TOMADAS CON CMARA EN EL


TRANSCURSO DE LA ROTACIN.
CONCLUSIONES
En estos dos meses de rotacin fue una experiencia buena e
investigadora ya que conoc los mtodos primordiales que se aplica
en la Microbiologa y cmo podemos identificar varias bacterias por
intermedio de las tcnicas utilizadas, a la vez que debemos tener una
bioseguridad absoluta ya que es un rea realmente muy expuesta a
muchos microorganismos en el ambientes.

Se trabaja con mucha bioseguridad y realizando las tcnicas o


procedimientos correctos ya que lo que nos importa es darle al
paciente un buen resultado para su mejora, por eso seguimos los
mtodos correctos y la absoluta identificacin en todo aspecto
realizado tan to como es en el rea de microbiologa, parasitologa y
la seccin de Bk.

Fue dos meses de absoluto aprendizaje y enseanza, dos meses de


investigacin y reconocimiento de lo que no saba y lo puse en
prctica.
ESTADISTICA DEL AREA DE MICROBIOLOGIA

(1 MES)
20 DE ABRIL AL 19 SECRECIN LIQUIDO COPROCULTIVO UROCULTIVO
DE MAYO)
PLASMA SEMINAL 1
ORINA 77
HECES 5

LCR / LP / LA 5
HISOFADO
4
FARINGEO
SONDA FOLEY
CUERO
2
CABELLUDO
CANTIDAD DE
TIPOS DE 7 5 5 77
MUESTRAS
TOTAL DE MUESTRAS 94

(2 MES)
19 DE MAYO AL 19 SECRECIN LIQUIDO COPROCULTIVO UROCULTIVO
DE JUNIO)
PLASMA SEMINAL 9
ORINA 80
HECES 17

LCR / LP / LA 8
HISOFADO
10
FARINGEO
SONDA FOLEY
CUERO
4
CABELLUDO
CANTIDAD DE
TIPOS DE 23 8 17 80
MUESTRAS
TOTAL DE MUESTRAS 128

El total de muestras de los dos meses de rotacin son 222 muestras todas estas
muestras se les cultiva en agar Miuller Hinton sangre y Miuller Hinton (cada uno
de las muestras) y referente a su Gram del crecimiento de las colonias se les
hacia su antibiograma.
ANEXOS
EQUIPOS DE MICROBIOLOGIA PARASITOLOGIA Y BK

CAMPANA DE FLUJO LAMINAR ESTERILIZADOR PARA MATERILAES


JARRA DE GAS PARK
DE MICROBIOLOGIA

INCUBADORA PARA CULTIVOS MICROSCOPIO OPTICO DE MICROSCOPIO OPTICO DE


PARACITOLOGIA MICROBIOLOGIA

MICROCENTRIFUGA PARA CAMARA DE FLUJO LAMINAR DE BK AUTOCLAVE


MICROCRIOVIALES