BACTERIOLOGA

Unidad I. ESTRUCTURA BACTERIANA

Unidad II. PRINCIPIOS BSICOS DE
MICROBIOLOGA

MC. Edith Salazar Villa

salazarv_e@hotmail.com
 ndice

Unidad I.ESTRUCTURA BACTERIANA

1.1. Estructura de la clula eucarionte
1.2. Estructura de la clula procarionte
1.3. Esporas
1.4. Tinciones
Unidad II. PRINCIPIOS BSICOS DE MICROBIOLOGA
2.1. Clasificacin de las bacterias
2.2. Tamao y forma de las bacterias
2.3. Metabolismo y crecimiento de las bacterias
2.4. Flora microbiana comensal y patgena en el ser humano
 Bacteriologa
Ciencia que estudia las bacterias, incluyendo su
clasificacin, y la prevencin de enfermedades de
etiologa bacteriana.
Las materias que componen la bacteriologa son objeto
de estudio no slo de los microbilogos, sino tambin
de qumicos, bioqumicos, genetistas, patlogos,
inmunlogos y mdicos.
 Objetivo General
Proveer al alumno con la informacin y experiencia prctica
necesaria para realizar una identificacin correcta de los
microorganismos ms importantes para el hombre,
impactando en las reas de la salud, medio ambiente
industria e investigacin.

Proporcionar los conocimientos de los aspectos clnicos,

epidemiolgicos, teraputicos y de profilaxis de las
enfermedades bacteriolgicas infecciosas.

Tiene como objetivo fundamental formar profesionales

capaces de desarrollar sus conocimientos en el sector salud,
industrial, medio ambiente y de investigacin.
 UNIDAD I

Estructura bacteriana.
1.1. Estructura de la clula eucarionte
1.2. Estructura de la clula procarionte
1.3. Esporas
1.4. Tinciones
 UNIDAD I

Objetivo General

El alumno describir el desarrollo de la

bacteriologa como ciencia.
Describirn el panorama actual e
importancia de la bacteriologa para el
biomdico.
 UNIDAD I

Relacin con otras ciencias

Microbiologa Bioqumica
Biologa

BACTERIOLOGA

Ecologa Qumica
 UNIDAD I

El mundo bacteriano

Relacin entre microorganismos con

los humanos
Efectos dainos
Efectos benficos
Las bacterias generalmente se
asocian con infecciones y
contaminacin de alimentos.
La mayora de los microorganismos
son cruciales para el bienestar de la
humanidad
 UNIDAD I

Balance entre los organismos

vivos
Balance qumico
Bacterias marinas
Bsicas en la cadena alimenticia en ocanos,
lagos, y ros
Bacterias del suelo
Desdoblan los desechos e incorporan el
nitrgeno (gas) del aire a compuestos
orgnicos
Fotosntesis
Bacterias que residen en humanos y
animales
Dependen de bacterias para la digestin de
alimentos, sntesis de vitaminas (B y K).
 UNIDAD I

Aplicaciones de la Bacteriologa

Bacterias en aplicaciones comerciales

Sntesis de compuestos qumicos
Acetona, cidos orgnicos, enzimas,
alcoholes, y algunas drogas
Bacterias en los alimentos
Vinagre, yogurt.
Bacterias en la medicina
Ingeniera gentica
Bacterias patgenas
La minora
 UNIDAD I

Breve historia de la bacteriologa

Robert Hooke (1665). Inicio de la teora celular

Todos los organismos vivos estn compuestos de
clulas
Anton Van Leeuwenhoek (1673)
Observo animaluchos en agua de lluvia y en raspado
dental
La poca de oro de la microbiologa (1857 1910)
Paul Ehrlich (1910). Primera droga sinttica
Derivados de Arsnico contra la sfilis
Alexander Fleming (1920). Accidente afortunado
Penicilina a partir del Penicillium notatum
La poca moderna de la microbiologa
Tecnologa recombinante de DNA
PROCARIOTAS

FCQB-Maestra en Ciencias Biomdicas

 Clasificacin Celular
Clulas Procariotas (pro, antes de y
karyon, ncleo)

No poseen un ncleo celular delimitado por una

membrana.
Los organismos procariontes son las clulas ms
simples que se conocen.
Pueden dividirse en dos grupos, en base a
diferencias nucleicas y de secuencia de bases
En este grupo se incluyen las algas azul-
verdosas (Archae) y las bacterias.

FCQB-Maestra en Ciencias Biomdicas

Estructura bacteriana
 Bacterias
Estructura Bacteriana
Envoltura celular
Glicoclix, pared celular y
membrana celular
Protoplasma
Metabolitos y nutrimentos
Nucleoide, Ribosomas,
Mesosomas y grnulos
Apndices
Flagelos y pilis
Motilidad
Pilis (Gram negativas)
Conjugacin de DNA
Fimbrias
Adherencia
 Envoltura Celular
Capas que rodean a la clula
La estructura y organizacin es
diferente
Bacterias grampositivas
Membrana citoplsmica (celular)
Capa de peptidoglucano (gruesa)
Cpsula
Bacterias gramnegativas
Membrana interna (citoplsmica)
Capa de peptidoglucano (delgada)
Espacio periplsmico
Membrana externa
Cpsula
 Membrana Citoplsmica
Estructura
Mosaico de protenas
incrustado en una bicapa de
fosfolpidos.
Ausencia de esteroles,
presentan hopanoides
Poseen Mesosomas,
invaginaciones
contorneadas
Mesosomas de tabique
Forman paredes celulares
transversales
Divisin celular
Mesosomas laterales
Sntesis de protenas
 Membrana Citoplsmica
Funcin
1. Permeabilidad selectiva y transporte de solutos
2. Transporte de electrones y la fosforilacin
oxidativa
3. Excrecin de exoenzimas hidrolticas
4. Posee enzimas y molculas transportadoras
Biosntesis del DNA
Polmetros de la pared celular
Lpidos de la membrana
5. Receptores de membrana
Seales quimiotcticas
Transduccin sensorial
Debe permanecer el 50% en estado semilquido para que
ocurra el crecimiento celular.
 Membrana Citoplsmica
Funcin
1. Permeabilidad selectiva y transporte de solutos
Forma una barrera hidrfoba impermeable a molculas
hidrfilas.
Posee 4 sistemas de transporte
Nutrientes al interior
Desechos al exterior
 Membrana Citoplsmica
Difusin facilitada
No requiere energa
Difusin pasiva de un sustrato en contra de un gradiente de
concentracin.
Glicerol
Transporte dependiente de unin de protenas
Protenas fijadores especificas,
Sustrato fijado a un complejo proteico
Transporte quimiosmtico
Llevan a una molcula a travs de la membrana a expensas de un
gradiente inico
Impulsado por protones o impulsado por Na (Uniporte,
simporte y antiporte).
E. coli transporta el 40% de sus nutrimentos
Translocacin de grupo (metabolismo vectorial).
Fosforilacin del sustrato durante el transporte hacia al
citoplasma
Sistemas fosfotransferasas.
 Membrana Citoplsmica
Funcin
2. Transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa
Componentes de la cadena respiratoria
Citocromos, enzimas y algunas deshidrogenasas.
3. Excrecin de exoenzimas hidrolticas y protenas de
patogenicidad
Hacia el medio exterior (gram+) y al espacio periplsmico
(gram -)
Tipos I-V
4. Funciones biosintticas
Enzimas que participan en la sntesis de fosfolpidos
5. Sistemas quimiotcticos
Unin de receptores especficos a sustancias atrayentes y
repelentes.
E. coli existen 20 quimiorreceptores diferentes
 Pared Celular

Estructura
Envoltura celular ubicada entre membrana citoplsmica
y cpsula
Permeabilidad inespecfica
Gram (+); peptidoglucano, y cido teicoicos
Gram (-); peptidoglucano, y membrana externa
Funcin
Proteccin osmtica, divisin celular, biosntesis
propia, determinante antignico y un componente
participa como endotoxina (LPS, Gram -)
 Pared celular
Acido
lipoteicoico
Acido teicoico
Porinas Lipopoliscaridos

Membrana
externa Peptidoglicano

Espacio
periplasmico
Protenas
Membrana
celular

Protenas

Gram Negativa Lpidos Gram Positiva

Diferencias entre Gram (+) y (-)
 Pared Celular

Composicin del
peptidoglucano (murena o
mucopptido)
N-acetilglucosamina,
cido N-acetilmurmico
alternados,
Cadenas tetrapeptidicas (L-
Ala, D-Glu,L-Lis,D-Ala)
Puentes peptdicos.
cido diaminopimlico
(gram -)
Precursor de biosntesis
de la lisina
 Pared Celular

Bacterias Gram +
40 capas de peptidoglucano
cido teicoico y teicurnico
50% del peso seco de la
pared celular y el 10%
del peso total de la
bacteria
Antgenos de superficie
Polisacridos
Duda si son subunidades
separadas
 Pared Celular

Bacterias Gram
Lipoprotenas
Protena mas abundante en la clulas Gram -
Estabilizan la membrana externa y la fijan en la capa del
peptidoglucano
Membrana externa
Bicapa asmtrica que excluye molculas hidrfobas pero permite el
acceso a molculas hidrfilas
Porinas
Permite difusin pasiva de compuestos hidrfilicos de bajo
peso molecular
Los antibiticos penetran de manera lenta
 Pared Celular

Bacterias Gram
Lipopolisacridos (LPS)
Lpido A, unidades de disacridos de glucosamina
fosforilado
Lpido A, altamente toxico
Endotoxina, solo se libera cuando la clula es lisada
Polisacrido
Antgeno O, de superficie
Espacio periplsmico
Entre membrana interna y la externa
Capa de Murena y solucin de protenas
Constituye entre el 20 y 40% del volumen celular
Protenas de enlace para sustratos especficos
Enzimas hidrolticas
Enzimas detoxificantes
 Caracterstica Gram positiva Gram negativa
Tincin de Gram Retiene el cristal Se decolora y atrapa la
violeta safranina
Capas de Grueso Delgado
peptidoglucano
Acidos teicocos Presente Ausente
Espacios Ausente Presente
periplasmicos
Membrana externa Ausente Presente

Lipopolisacridos Ausente Alta concentracin

Toxinas Exotoxinas Endotoxinas
producidas
Destruccin fsica Alta Bajo
Susceptibilidad a Alta Bajo
penicilina
Resistencia a la Alta Bajo
desecacin
Tincin Gram
1. Cristal
violeta
2. Yodo
3. Acohol
cido
4. Safranina

Gram positivo (violeta) Gram negativo (rojo)

Gram positivo
Gram negativo
 Cpsula
Condensado de polmeros extracelulares.
Polipptido (Bacillus anthracis)
cido hialuronico (Streptococcus spp.)

Capa bien definida estrecha a la clula.

Contribuyen a al invasivilidad de las bacterias patgenas.
Protegen a la bacteria contra la fagocitosis
El grosor varia segn la nutricin y la temperatura, as como
a mutaciones.
Cpsula
 Glucocliz (Glicoclix)
Cubierta de macromolculas (protenas y/o CHOs) que cubre a la
clula
Maraa de fibras que se extienden fuera de la clula.
Participa en la adherencia bacteriana
Adhesinas, protenas que le sirven para colonizar nichos
especficos
Composicin Qumica del Polmero
Extracelular en Bacterias

Microorganismo Polmero Subunidades

qumicas
Bacillus anthracis Polipptido cido D-glutmico
Enterobacter Polisacrido Glucosa, fructosa,
aerogenes complejo cido glucornico
Streptococcus Levano Fructosa
salivarus
Streptococcus cido N-acetilglucosamina,
pyogenes hialurnico cido glucornico
 Flagelos: Estructura
Del latn, Flagelo: Ltigo
Apndices filiformes, compuestos por
protenas
(12-30 nm diam. y de 3-12m de long.)
rganos de locomocin
Montricos (polar)
Lofotricos (dos flagelos polares)
Pertricos (distribucin en toda la
clula)
Amftricos (mltiples flagelos polares)
Composicin
Subunidades protecas
Flagelina
Altamente antignicas (Antgeno
H)
 Flagelos
Slo detectados por tcnicas de tincin especficas.
Anaerobaculum mobile sp. nov. Flagelo
insertado lateralmente

Barra 0,5 micras

 Flagelos:
Estructura
Estructura compleja
Mas de 40 productos
genticos
Intervienen en el
ensamblaje y Gancho
funcionamiento
Cuerpo basal
Gancho
Estructura curva y
corta
Articulacin
Cuerpo basal
Anillos
Gram (+) 1 par
Gram (-) 2 pares
Mas de 40 genes involucrados
La energa la proporciona la fuerza
protomotriz
 Flagelos: Motilidad
Rotores helicoidales semirgidos
Movimiento rotatorio del cuerpo basal
Taxia
Movimiento hacia o en contra de un estmulo
Quimiotaxia, hacia una fuente de un atrayente
qumico.
Aerotaxia, hacia la concentracin optima de oxigeno
Fototaxia, bacterias fotosintticas hacia la luz
Estmulo positivo
Compuestos atrayentes
Inhibicin de la desmetilacin proteca
Estmulo negativo
Compuesto repelente
Estmula la metilacin proteca
 Fimbrias o Pilis
Fimbrias (del latn flecos) Pilis (del latn, pelos)
Apndices cilndricos rgidos
Mas delgados y cortos que los flagelos
Carecen de cuerpo basal completo
Constituidos por subunidades proteicas llamadas
pilinas, ordenadas helicodialmente.
Bacterias Gram (-)
 Fimbrias o Pilis
Fimbrias ordinarias
Adherencia
Adhesinas:
Lectinas, protenas con afinidad
hacia CHOs especificos
Caracterstica importante de la
virulencia
Activan al sistema inmune
Fimbrias sexuales (pilis)
Elongacin de la membrana o
apndice usado para transferir
DNA a otras bacterias.
Conjugacin bacteriana
Contacto con la clula receptora
 Protoplasma
Nucleoide
Equivalente al ncleo eucariota
Ausencia de membrana nuclear y
aparato mittico
Constituye el 10% del volumen
celular total
DNA (cromosoma nico,
haploide) circular
Unido a cantidades menores de RNA, RNA
polimerasa y protenas
2 hasta 1200 micras (1.2 mm) de largo
Estructura en forma de cuentas de collar
Unido en un punto a
invaginaciones de la membrana
citoplsmica (mesosoma).
 Protoplasma
Grnulos
Almacenamiento de material de reserva
Convierten el exceso de C en acido -hidroxibutirico
Transforman a polmeros de Glucosa: almidn y glicgeno, entre otros
Grnulos de azufre, polifosfato (volutina o metacromticos)
Ribosomas
Numerosos, adheridos dbilmente a la membrana
plasmtica
Sntesis de protenas
Ribosomas 70S- Subunidades 50S y 30S
 Protoplasma
Plsmidos
Numerosas bacterias los
poseen adems de su
cromosoma
Doble cadena de DNA
circular autnomo
Se replican independientemente
del cromosoma o se integran a
este.
Durante la divisin celular una de
las hijas no lo adquiere.
Transfiere informacin gentica a
otras bacterias (Transferencia
Horizontal)
Resistencia a frmacos
Capacidades metablicas
Patogenicidad
 Estructura Bacteriana
Endosporas
Estructuras esfricas u ovales formadas dentro de
ciertas especies bacterianas.
Representan un estado de latencia o de reposo
Altamente resistente a la desecacin, al calor, presin y
agentes qumicos.

Bacilos gram (+)

Bacillus (aerobio obligado)
Clostridium (anaerobio obligado)
Cocos gram (+)
Sporosarcina
Coxiella burnetti
 Endosporas
Resistencia al calor, radiacin, desecacin.
Producidas principalmente por los gneros Bacillus y
Clostridium
Permite la supervivencia en ambientes desfavorables
DNA protegido por cido dipicolnico y protenas.
Luego de la activacin por stress, la disponibilidad de
nutrientes dispara la germinacin y el crecimiento
La localizacin de la espora en la clula puede ser usada
para la identificacin
Una espora por bacteria, algunos casos pueden producir
hasta 7 endosporas Metanobacterium polyspora y
Anaerobacter polyendosporus
 Estructura Bacteriana
Esporulacin
Se produce en condiciones que no favorecen a la
bacteria
Agotamiento de N o C (o ambos)
Activacin de genes
Determinantes en la formacin y composicin de la
espora
Inactivacin de genes
Determinantes en la actividad vegetativa de la bacteria
 Estructura de la Endospora
Centro
Protoplasto
Ncleoide (un cromosoma)
Ribosomas Capa
Sist. generador de energa.
Enzimas: cido dipicolinico sintetasa Corteza
Ausencia de componentes de la
respiracin Exosporio
Pared de la espora Pared
Capa mas profunda que rodea a la
membrana interna DNA

Contiene peptidoglucano Ribosomas

Se transforma en la pared, cuando
germina
Corteza
Capa gruesa contiene peptidoglucano
Sensible a lisozimas
Capa
Protena semejante a la queratina
Resistencia a los agentes qumicos
Exosporio
Lipoprotena de la membrana con
algunos CHOs.
 Formacin de Esporas

A- el ADN se duplica y enrolla alrededor del eje central

(filamento axial)
B- Uno de los cromosomas se rodea de membrana plasmtica.
C- el protoplasto es rodeado por la clula madre
D- se sintetizan las cubiertas de la espora.
E- se elimina agua, se forma estructura resistente al calor.
F- se libera la espora por lisis de la clula madre.
En B. subtilis 6-7 horas, 50 genes.
Formacin de una Endospora

Etapa 0
La clula se encuentra en la etapa final de
crecimiento exponencial y contiene dos
cromosomas.

Etapa 1
El DNA celular se hace ms denso y ocupa
el centro de la clula. Comienza un
importante recambio intracelular de
protenas.
Etapa 2
Se forma un tabique (septo) cerca del polo celular a
causa de la invaginacin de la membrana
citoplasmtica. El DNA es segregado en dos
compartimentos (la espora en desarrollo y la clula
madre).

Etapa 3
El citoplasma de la espora en formacin queda
delimitado por dos membranas debido al
crecimiento de la membrana citoplasmtica
alrededor del protoplasto.
Etapa 4
Comienza a formarse la corteza de la espora por el
deposito de peptidoglicano esporoespecfico
entre la membrana interna y externa. La espora
aparece como un cuerpo refractario, comienza a
acumularse calcio y a sintetizarse Acido
Dipicolnico.

Etapa 5
Aparece el exosporio. La membrana exterior se
transforma en la capa cortical por la incorporacin
de protenas ricas en cistena. Esta etapa le confiere
a la espora resistencia frente a los agentes
antimicrobianos.
Etapa 6
Maduracin de la espora. Su citoplasma se vuelve
homogneo y electrodenso. La capa cortical se
completa.

Etapa 7
La endospora es liberada por la lisis de la clula.
Esporulacin
 Germinacin
La espora debe hallarse en un medio rico para
podre germinar
Se inicia al ser activada por calor

Se rompen las estructuras protectoras

Absorcin de agua, activacin de enzimas y

actividad respiratoria
La bacteria comienza su crecimiento y pierde
completamente las estructuras de proteccin
Una vez geminada la bacteria esta continua
con su desarrollo normal
 Base de la resistencia
Resistencia al calor: se cree que los enlaces
entre el Ca++ y el dipicolinato estabilizan a las
protenas frente al procesos de
desnaturalizacin.

Resistencia qumica: esta dada por la

impermeabilidad de la espora.

Resistencia a la radiacin: se da por el

contenido de compuestos azufrados que se
unen a los radicales libres
Clasificacin de las endosporas

Endospora central Endospora Endospora terminal,

de subterminal redonda, en el extremo
Bacillus megaterum de de una clula de
B. antrhacis Clostridium tetani
Clulas Eucariotas (del griego
eu,'verdadero', y karyon, 'nuez' o 'ncleo')

Poseen un ncleo celular delimitado por una

membrana.
Forman el dominio Eukarya que incluye a los
organismos ms conocidos, repartidos en
cuatro reinos: Animalia, Plantae, Fungi y Protista
 Origen de las Eucariotas
De las muchas teoras propuestas para la explicacin del
origen de la clula eucaritica, la que es ms aceptada,
actualmente, es la Teora de la endosimbiosis.

Cianfito o proclorfito
Arquebacteria
ADN Ncleo
ADN

Procariota Protocariota
(PROCITO) (PROTOCITO) Eubacteria
 Origen de las Eucariotas

Por fagocitosis absorbe

sus presas invaginando
la membrana
plasmtica
Los lisosomas provocan
la formacin de vacuolas
digestivas que cesan su
Se forman vacuolas
accin al producirse la
alimenticias
endosimbiosis
 Origen de las Eucariotas
CLULA EUCARIOTA

Mitocondrio

Plastidio

Las clulas apresadas sobreviven en la clula hospedante como

simbiontes o como parsitos (mitocondrios o plastidios), que
pueden multiplicarse y realizar las funciones de respiracin o
fotosntesis
Diferencias entre Clula Vegetal y
Animal
 Clula Eucariota
En las clulas eucariotas se pueden
distinguir las siguientes partes principales:

Clula animal Clula vegetal

Membrana celular Pared celular
Citoplasma Membrana celular
Ncleo Citoplasma
Orgnulos Ncleo
Orgnulos
 Eucariotas

Clula
Animal
Membrana Celular
 Membrana Celular
Superficie externa que regula la entrada y
salida de molculas
Presenta una permeabilidad selectiva, ya que
permite el paso de DETERMINADAS pequeas
molculas.
Los mecanismos de transporte pueden verse
en el siguiente esquema:
Membrana Celular
Transporte en Membranas
 Membrana Celular
Composicin qumica

40% Lpidos
Fosfolpidos
Glucolpidos
Colesterol

50% Protenas
Transmembranales
Extramembranales
Intramembranales

10% Glcidos
Monosacridos,
polisacridos...
 Citoplasma

Medio acuoso, de apariencia viscosa, en

donde estn disueltas muchas sustancias
alimenticias.
Liquido fuera del ncleo que contiene
organelos:
 Ncleo
Contiene el material gentico
(DNA) organizado en
cromosomas
Es el centro de control de la
clula
Rodeado por una membrana
nuclear que es porosa por
donde se comunica con el
citoplasma,
Situado en la parte central y
presenta forma esfrica u oval Tamao: 5m
Una clula puede contener -Cromatina
mas de un ncleo
-Nucleoplasma
-Cromosoma
 El Genoma de la Clula

ADN (Pb) Cromosomas

E. coli 4.7x106 1

H. sapiens 6x109 46:

22 autosomas
2 sexuales
Microscopa electrnica de transmisin del
ncleo
Poros nucleares
 Orgnulos de Sntesis
Almacenamiento y Transporte.
Los ribosomas realizan la sntesis de
sustancias llamadas protenas, segn ordenes
del ncleo. Se encuentran libres en el
citoplasma o adosados a la pared del retculo
endoplasmtico.
Partculas no membranosas
enlazadas
Tamao: 20-30nm
El numero en la clula vara
dependiendo de sus funciones.
Polirribosomas: gpos. de
ribosomas
Ribosomas
Unidades Ribosomales
 Orgnulos de Sntesis
Almacenamiento y Transporte.
Retculo Endoplasmtico: Consiste en un sistema de
conductos y sculos membranosos que forman
cavidades comunicados entre si .
Existen dos tipos:
1.-RE rugoso: que presenta ribosomas adosados.
Sntesis de protenas.
2.-RE liso: carece de ribosomas
Continua del rugoso.
Su funcin depende del tipo celular.
Se encarga del almacenamiento y transporte de
sustancias por el citoplasma celular.
Aumenta en cantidad cuando una persona ingiere o
consume barbitricos.
 Aparato de Golgi
Est formado por sacos
membranosos aplanados
y apilados y ligeramente
encorvados
No comunicados entre si
y rodeados por pequeas
vesculas.
Se encargan del
empaquetamiento y
transporte de protenas y
lpidos que deben ser
exportadas al exterior
celular.
 Funciones del AG
1. Transporte, maduracin, acumulacin y secrecin de
protenas procedentes del RE.
2. Glucosilacin de lpidos y protenas. Mediante la
unin a stos de cadenas de oligosacridos, dando
lugar a glucolpidos o glucoprotenas de membrana o
de secrecin
3. Sntesis de polisacridos, constitutivos de la pared
celular vegetal (pectina, hemicelulosa).
 Son pequeas vesculas
Lisosomas rodeadas por membrana y
que contienen enzimas
digestivos.
Su funcin es digerir los
alimentos que llegan a la
clula.
Destruccin de organelos
no funcionales
Tienen pH bajo
Enf. Tay-Sachs
Apoptosis

Peroxisomas: Vesculas que

rompen cidos grasos y
convierten el peroxido en agua
 Vacuolas
Son estructuras parecidas a
bolsas rodeadas por una
membrana .
En las clulas animales son
pequeas y numerosas .
En clulas vegetales hay
pocas, a veces una nica
vacuola y de gran tamao.
Sirven para almacenar agua
nutrientes y desechos.
Contrctiles
Digestivas
Almacn
 Orgnulos de Transformacin de Energa
Mitocondrias
Orgnulos celulares
encargados de suministrar
la mayor parte de la energa
necesaria para la actividad
celular
Actan por tanto, como
centrales energticas de la
clula .
Produccin de ATP a partir
de carbohidratos.
Permanecen donde se
requiere mayor energa
Estructura de la mitocondria
 Mitocondrias
Respiracin celular
Es un complejo proceso de reacciones
qumicas que tienen como finalidad la
obtencin de energa, a partir de
compuestos orgnicos como la glucosa.

Se desarrolla en dos etapas sucesivas: el

ciclo de Krebs y la cadena respiratoria,
asociada a la fosforilacin oxidativa.

La mayor cantidad de nucletidos con valor

energtico se obtiene en la fase de la llamada
respiracin celular o ciclo de Krebs.

Mediante la respiracin celular, el cido

pirvico formado en la gluclisis se oxida
completamente a CO2 y agua en presencia de
oxgeno.
 Estructuras de Soporte
Citoesqueleto
Conjunto de filamentos que sirven de soporte a
los orgnulos y da forma a la clula.
Permite el desplazamiento de orgnulos por el
citoplasma.
Centriolos: cilindros cortos de microtbulos
Centrosomas: microtbulos que contiene un
par de centriolos
MEB Citoesqueleto
Partes del Citoesqueleto
 Filamentos de Actina
(Microfilamentos)
Formados por
subunidades de actina
Son polmeros
helicoidales enroscados
de dos en dos
Son largos,
extremadamente
delgados (7 nm de
dimetro).
Encontramos:

Debajo de la membrana plasmtica

(crtex celular)
Deslizamiento de las clulas
(seudpodos)
 Filamentos intermedios
Tienen un dimetro de 8 11
nm
Formados por protenas
fibrosas
Proporciona resistencia
mecnica durante la
deformacin celular
Son mas resistentes
Citoplasma y en el ncleo.
Permite uniones clula-
clula
 Microtbulos
25 nm de dimetro y 0.2-0.25
m de longuitud
Formados por tubulina
Dos tipos y
Formados por 13
protofilamentos paralelos
El transporte mediado por microtbulos esta
determinado por las protenas dinenas y
cinesinas.
 Formacin del huso mittico

Organizan el desplazamiento de los orgnulos a

travs de la clula y son los responsables de la
polarizacin celular
Ejemplos:
 Clula Vegetal
Pared Celular:
Superficie externa que proporciona forma, soporte y
proteccin, formada por celulosa
Cloroplastos:
Realizan la fotosntesis, produccin de azucares
Cromoplastos:
Sintetizan y almacenan pigmentos
Vacuolas de gran tamao:
Acumula sustancias de reserva o de desecho de la
clula
Vacuolas: Turgencia en las clulas
 Cloroplastos
Orgnulos exclusivos de
clulas vegetales.
Tiene forma redondeada
y su tamao varia de
unas clulas a otras.
Poseen una membrana
externa y otra interna que
forma sacos apilados
denominados grana.
La energa luminosa es
captada por un pigmento
de color verde
denominado clorofila.
Fotosntesis
Clula eucariota vs clula procariota
 Tinciones diferenciales

Como su nombre lo indica, nos permiten

diferenciar entre grupos de bacterias que tienen
distintas propiedades tintoriales

Las tinciones diferenciales ms comnmente

utilizadas son la tincin de Gram y la tincin
de Ziehl-Neelsen
 Tincin de Gram

La tincin de Gram. Fue desarrollada empricamente por

Christian Gram en 1884, a pesar del tiempo
transcurrido la tincin apenas se ha modificado y es uno
de los primeros pasos que se realiza para cualquier
identificacin bacteriana.

La tcnica es capaz de diferenciar dos grandes grupos

de eubacterias: Gram positivas y Gram negativas.
 Fundamento de la Tcnica
La diferenciacin entre las bacterias Gram positivas y Gram
negativas se establece en la naturaleza y caractersticas de la
pared celular bacteriana.

Las bacterias Gram positivas poseen una gruesa capa de

peptidoglicano que es capaz de retener al complejo colorante-
mordiente (cristal violeta-yodo). Durante la decoloracin con alcohol
acetona se provoca una deshidratacin de esta gruesa pared y se
reduce la porosidad, atrapando entonces al complejo en el interior
de la clula. Color azul.

Las bacterias Gram negativas, poseen una delgada capa de

peptidoglicano no puede impedir la salida del complejo colorante-
mordiente (cristal violeta-yodo) y es entonces fcilmente teida por
el colorante secundario o de contraste. Color rosa.
 Reactivos y Colorantes
La tincin de Gram. requiere cuatro soluciones:

1. Primer colorante. Un colorante bsico (+) que en contacto con

las clulas cargadas negativamente, reacciona con ellas
colorendolas. El mas utilizado es el cristal violeta.

2. Solucin mordiente. Fija las tinciones y aumenta la afinidad

entre el colorante y las clulas. Los mordientes usados suelen ser
sales metlicas, cidos o bases, como por ejemplo, una sol. diluida
de yodo.

3. Agente decolorante. Es un disolvente orgnico; por ejemplo

alcohol acetona (1:1).

4. Colorante de contraste. Es un colorante bsico de distinto color

que el primer colorante, como por ejemplo, la Safranina.
 Procedimiento Tcnico

1) Realizar el extendido de la muestra

2) Fijacin del extendido
Mtodos fsicos: accin del calor
Mtodos qumicos: metanol
3) Primer colorante: cristal violeta
4) Mordiente: Lugol
5) Decoloracin: mezcla alcohol-acetona 1:1
5) Segundo colorante: safranina
 Tincin de Ziehl-Neelsen
La tincin de Ziehl-Neelsen desarrollada inicialmente por
Paul Ehrlich para poner de manifiesto la presencia de
los bacilos causantes de tuberculosis en muestras
clnicas de pacientes es otra muy importante tincin
diferencial.

La tcnica es capaz de diferenciar dos grandes grupos

de eubacterias: BAAR positivas y BAAR negativas.

BAAR: bacilos cido alcohol resistentes

 Fundamento de la Tcnica
Las paredes celulares de ciertos parsitos y bacterias. contienen
cidos grasos (cidos miclicos) de cadena larga (50 a 90 tomos
de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la
decoloracn con alcohol-cido, despus de la tincin con
colorantes bsicos. Por esto se denominan cido-alcohol
resistentes. Las micobacterias como M. tuberculosis y M. marinum y
los parsitos coccdeos como Cryptosporidium se caracterizan por
sus propiedades de cido-alcohol resistencia. La coloracin clsica
de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante
atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el
calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificacin
de lo cidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de
las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energa
cintica de las molculas del colorante lo cual tambin facilita su
entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloracin
son de color rojo y la que no se ven de color azul.
 Procedimiento Tcnico
1) Hacer un frotis
2) Secar al aire y fijar por calor
3) Cubrir todo el porta-objetos con fucsina fenicada
4) Calentar suavemente con el mechero hasta la emisin de vapores.
5) El colorante no debe secarse ni hervir, aadir ms si es necesario.
6) Mantener la emisin de vapores durante 5 minutos.
7) Lavar con un chorro suave de agua.
8) Decolorar con alcohol cido
9) Lavar con agua
10) Cubrir el frotis con azul de metileno y dejarlo actuar durante un
minuto.
11) Lavar con agua, escurrir y dejar secar al aire Observar al
microscopio con el objetivo de inmersin

Las bacterias ZN+ o BAAR se observarn teidas intensamente de

color rojo.
Mycobacterium tuberculosis
Coloracin de esporas tcnica de
Shaeffer y Fulton
Las endosporas son impermeables a los colorantes, por lo que
cuando se hace una tincin, se observan al microscopio como
cuerpos altamente refringentes y sin teir. Sin embargo, las
endosporas se pueden teir aplicando calor a la preparacin
previamente cubierta con una solucin de colorante que en la
tcnica de Shaeffer y Fulton es el verde de malaquita. El lavado con
agua elimina este colorante de las clulas vegetativas y la
aplicacin de un colorante de contraste permitir distinguir
claramente a las esporas de color verde.
Bacillus clostridium
 UNIDAD II

Principios bsicos de microbiologa

2.1. Clasificacin de las bacterias
2.2. Tamao y forma de las bacterias

2.3. Metabolismo y crecimiento de las bacterias

2.4. Flora microbiana comensal y patgena en el ser

humano
 Clasificacin

4. Actividad
3. Por Su 5. Formas
2. bioqumica 6. Por su
1. Su Forma color de
Crecimiento y locomocin
(Tincin) agrupacin
metablica
 1. Morfologa Bacteriana

Se dividen en tres
grandes grupos con base
en su forma:
Cocos-Esfricos
Bacilos-Cilndricos
(Forma de Bastn)
Formas Espirales-
Bastones (curvos o
espirales)
 Cocos

Esferas diminutas o
bayas redondas
Pueden estar aislados,
pares, cubos o cadenas
largas.
Se reproducen por
particin:
Staphylococcus aureus
 Cocos
Se dividen en dos y se
adhieren. (Diplococos)
Se divide continuamente.
(Estreptococos)
Se dividen en tres planos
en ngulos rectos para
obtener formas cubicas.
(Sarcinas)
Se dividen en dos planos
para formar ttradas de
clulas. (Pediococos)
Se dividen en dos planos
para formar grupos
irregulares. (Estafilococos)
 Bacilos

Son Bacterias que

tienen forma de
bastones o cilindros.
Se dividen en un solo
plano
Se pueden observar
como clulas nicas,
en pares o en
cadenas.
Bacillus anthracis
 Espirilos

Bacterias Gram-negativas.
Mviles.
De forma espiralada.
Se encuentran en suelos, agua
dulce, ambientes marinos,
entre las races de las plantas,
rganos reproductivos, zona Treponema pallidum
intestinal, cavidad bucal en
hombres y animales.
 Vibriones

Son bastones
curvos que
parecen
comas.
En ocasiones
crecen en forma
de S
vibrio cholerae
 Espiroquetas

Gram-negativas
Clulas alargadas y enrolladas
helicoidalmente.
Tienen una longitud comprendida
entre 5 y 500 m y un dimetro
de alrededor de 0,1-0,6 m.
Casi todas son unicelulares, si
bien se sospecha que
Spirochaeta plicatis pudiera
ser pluricelular.
Treponema, Borrelia y Leptospira
2. Crecimiento Bacteriano

Los requisitos para el crecimiento

bacteriano incluyen factores fsicos:
Temperatura, el PH y la presin osmtica.
 Temperatura

La temperatura a crecimiento ptimo

permite el crecimiento ms rpido de
las bacterias (12 y 14 horas).
Los microorganismos se dividen en
3 grandes grupos en base a su
preferencia de rango de
temperatura.
 Sicrfilos: Son capaces de crecer a 0C,
tienen una temperatura ptima de 15C y una
mxima de aproximadamente 20C.
Los sicrfilos estrictos mueren a <20C,
Tardan en crecer de 2 a 3 semanas.
Los sicrfilos facultativos o sicrotrofos:
0C, Temp. Optima: 20 a 30C.
Mesfilos crecen a temperaturas 25C a
40C. Los patgenos de humanos y
animales, crecen mejor a 37C.
Termfilos son bacterias que crecen a una
temperatura ptima sobre los 45C.
Termfilos facultativos: 50 a 60C.
Termfilos extremos: Mayor de 90C.
 pH

Es una medida
de acidez o alcalinidad de
una disolucin. El pH indica la
concentracin de
iones hidrgeno [H]+ presentes en
determinadas disoluciones
Clasificacin de los microorganismos
segn su pH ptimo:
Acidfilas: Se desarrollan a pH entre
1.0 y 5.0 (< 7.0). Ejemplo muchas
Archeobacterias y hongos.
Neutrfilas: Se desarrollan a pH entre
5.5 y 8.5. Ejemplo bacterias patgenas
para el hombre.
Basfilas: Se desarrollan pH entre 9.0
y 10.0 (> 7.0). Ejemplo suelos y aguas
ricas en carbonatos.
 Presin osmtica
Los microorganismos requieren agua para su
crecimiento, adems para obtener nutrientes de sta.
Una presin osmtica alta causa prdida de agua y
plasmlisis de la clula, por lo que se utiliza este
fenmeno para conservar los alimentos ya sea
aadiendo sal o azcar, lo que previene el crecimiento
bacterial.
Sin embargo algunas bacterias se han adaptado a altas
concentraciones de sal, a stas se les conoce como
halfilos extremos. Por otro lado, los halfilos
facultativos no requieren una alta concentracin de sal,
pero pueden crecer hasta una concentracin de 2%.
Otras bacterias pueden tolerar hasta un 15% de sal.
 3. Tincin de las bacterias

Cuando se descubri que las

bacterias se tean con colorantes
surgi otro criterio de agrupacin, su
afinidad tintorial. As la tincin de
Gram formo dos grandes grupos
bacterianos: Gram+ y Gram-
 Gram positivas (se Gram negativas (se
tien de color tien de color
violeta) rosado)

Debido a las diferencias en la composicin

de su pared celular
Bacterias Gram-positivas Bacillus anthracis (bastones
prpuras) en una muestra de fluido cerebroespinal. Las
otras clulas son leucocitos.
Neisseria gonorrhoeae, agente causal de la gonorrea.
Las otras clulas son leucocitos.
Comparacin de las envolturas
celulares bacterianas.
Arriba: Bacteria Gram-positiva.
1- membrana citoplasmtica,
2-peptidoglicano,
3-fosfolpidos, 4-protenas, 5-cido
lipoteicoico.
Abajo: Bacteria Gram-negativa.
1-membrana citoplasmtica
(membrana interna), 2-espacio
periplasmtico,
3-membrana externa, 4-
fosfolpidos,
5-peptidoglicano, 6-lipoprotena,
7-protenas, 8-lipopolisacridos, 9-
porinas.
 Bacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular
Pared celular simple.
compleja.
Capa de
Capa de
peptidoglicano
peptidoglicano fina.
gruesa.
Capa externa de
No capa externa de lipopolisacridos.
lipopolisacridos.

Azul/violeta. Rojo/rosado.
4. Actividad bioqumica y
metablica
 Por el tipo de respiracin

AEROBIAS y
AEROBIAS ANAEROBIAS MICROAERO-
ESTRICTAS: ANAEROBIAS FACULTATIVAS: FILICAS:
ESTRICTAS:
Aquellas que Requieren de
requieren del Utilizan sales Pueden respirar menor
oxigeno. inorgnicas en presencia y concentracin
en lugar del ausencia de de oxigeno en
oxigeno para oxigeno, ya que el medio para
transferir cuentan con realizar mejor
electrones. sistemas la respiracin.
enzimticos que
pueden
activarse.
 Por el tipo de nutricin

Litotrofas: Autotrofas: Heterotrofas:

Organotrofas:
Requieren Crecen Su fuente de
Requieren
sustancias sintetizando sus carbono es
compuestos
inorgnicas materiales a orgnica.
orgnicos
sencillas partir de
(carbohidratos,
(SH2SO, sustancias
lpidos,
NH3, NO2-, inorgnicas
protenas, etc) .
Fe, etc). sencillas
(fuente de
carbono CO2)
 Por el tipo de nutricin

Fotosauttrof Quimioautotrofo Fotohetertrofos: Quimiohetertr

os: s: ofos:
Utilizan la Necesitan CO2 Utilizan luz Utilizan
energa solar para obtener solar para mleculas
y producen energa de producir energa orgnicas
azcares elementos a partir de para producir
inorgnicos compuestos su energa.
orgnicos

http://slideplayer.es/slide/157700/
5. Forma de agrupacin
 Agrupacin bacteriana
COCOS

Ttrada

Diplococos

Sarcina

Estreptococos

Estafilococos
 Bacilo normal

Diplobacilos
Agrupacin
bacteriana
BACILOS
Estreptobacilo

Cocobacilos
 Vibrio

Agrupacin
bacteriana
HELICOIDALES

Espirilos

Espiroquetas
Agrupacin
bacteriana
PLEOMRFICOS

Forma de cubo
Forma de estrella

Stella sp Haloarcula sp

Rhizobium y Corynebacterium
 6. Locomocin

Las bacterias se clasifican por la disposicin

de los flagelos
Por la disposicin de los flagelos

Monotrico Lofotrico

Anfitrico Peritrico

E
tricas
V. cholerae
Helicobacter pylori
Spirillum sp
Proteus vulgaris
 Metabolismo bacteriano
Conjunto de procesos por los cuales un microorganismo
obtiene la energa y los nutrientes que necesita para vivir
y reproducirse.

Los microorganismos utilizan numerosos tipos de

estrategias metablicas distintas y las especies pueden a
menudo distinguirse en base a estas estrategias.

Las caractersticas metablicas especficas de un

microorganismo constituyen el principal criterio para
determinar su papel ecolgico, su responsabilidad en los
ciclos biogeoqumicos y su utilidad en los procesos
industriales
 Metabolismo bacteriano
Catabolismo
Consiste en la degradacin enzimtica de macromolculas
como lpidos, hidratos de carbono y protenas que el
organismo obtiene del entorno en que vive o de sus propias
sustancias de reserva. Liberacin de energa.
Anabolismo
Es el proceso inverso, es la sntesis enzimtica de
macromolculas a partir de compuestos sencillos, con
consumo de energa.
Inicio del
metabolismo
hidrolizando con
enzimas especficas
o exoenzimas.
Etapa 1. Reacciones
de degradacin; 2.
Reacciones
anaerobias; 3.
Reacciones aerobias
 Metabolismo bacteriano

Metabolismo de la glucosa (fermentacin)

Va de Embden-Meyerhof-Parnas
Va de los fosfatos de pentosa
Ciclo del cido tricarboxlico (Proceso aerbico)
 Metabolismo de la glucosa
Para producir energa en un intento de aumentar la
eficiencia, las bacterias son capaces de obtenerla a partir de
la glucosa por fermentacin o por respiracin anaerobia
(ausencia de oxgeno) o por respiracin aerobia.
 Va de Embden-Meyerhof-Parnas

Es la ms comn. Esta ruta puede funcionar en

condiciones aerobias y anaerobias. Presenta 10
reacciones enzimticas.

Como resultado de esta ruta se obtiene una pequea

cantidad de energa (dos moles de ATP por mol de
glucosa) por procesos de fosforilacin a nivel de
substrato, se obtienen dos moles de NAD reducido
(NADH+ H+) y se ha logrado una oxidacin parcial del
carbono de la glucosa para producir como metabolito
final dos moles de piruvato por mol de glucosa
catabolizada.
 Va de Embden-Meyerhof-Parnas

Consiste en dos reacciones:

no oxidacin y de oxidacin
 Va de la pentosa fosfato

Esta ruta est presente en muchas bacterias y en la

mayora de los eucariontes.
Simultneamente se dan ambas rutas.
La ruta PF funciona en condiciones aerobias y anaerobias y
tiene importancia en procesos catablicos y anablicos tales
como en la sntesis de nucletidos y de aminocidos
aromticos.
Va de la pentosa fosfato
 Ciclo del cido tricarboxlico

Es una sucesin de reacciones qumicas, que forma parte de

la respiracin celular en todas las clulas aerbicas, donde
es liberada energa almacenada a travs de la oxidacin
del acetil-CoA derivado
de carbohidratos, grasas y protenas en dixido de
carbono y energa qumica en forma de trifosfato de
adenosina (ATP).
Ciclo del cido tricarboxlico
 Crecimiento de las bacterias

La multiplicacin celular es una consecuencia directa del crecimiento

y da lugar, en el caso de las bacterias, a colonias, mediante un
sistema de reproduccin asexual denominado divisin binaria.

La velocidad de crecimiento es el cambio en nmero de bacterias

por unidad de tiempo, y se expresa como el tiempo de generacin,
que es el tiempo necesario para que se duplique una bacteria o una
poblacin de ellas.

En un sistema cerrado o cultivo en medio no renovado se obtiene

una curva de crecimiento tpica que se ha dividido en cuatro fases:
fase de latencia, fase exponencial, fase estacionaria y fase de
muerte.
Crecimiento de las bacterias
Crecimiento de las bacterias

Tiempo de generacin
 Multiplicacin celular

La multiplicacin celular es una consecuencia directa del

crecimiento y da lugar, en el caso de las bacterias, a colonias,
mediante un sistema de reproduccin asexual denominado
divisin binaria.
Es un proceso en el cual de la divisin de una clula resultan
dos clulas del mismo tamao y forma.
Multiplicacin celular
 Referencias Bibliogrficas
Mader, S.S. (2007). Biologa. Ed. McGraw Hill. 9na Edicin. Mxico.
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http://www.insht.es/portal/site/Insht/;VAPCOOKIE=Y5pNYhJDxfsXxn4rH
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496631713
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http://www.msdmanuals.com/es-mx/professional/enfermedades-
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