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La biotecnologa de Bacillus thuringiensis

en la agricultura

Diana Daniela Portela-Dussn1, Alejandro Chaparro-Giraldo1, Silvio Alejandro Lpez-Pazos1,2

1. Grupo de Ingeniera Gentica de Plantas, Departamento de Biologa,


Universidad Nacional de Colombia, A.A 14-490, Bogot D.C., Colombia.

2. Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca,


Bogot D.C., Colombia

Correspondencia: salopez@unicolmayor.edu.co

Recibido: 04/03/2013 Aceptado: 23/05/2013

Resumen
Bacillus thuringiensis es un bacilo Gram positivo que durante su fase de esporulacin produce una
inclusin parasporal, conformada por protenas Cry con actividad biolgica contra insectos-plaga.
Gracias a estas protenas Bacillus thuringiensis presenta toxicidad contra larvas de insectos-plaga de
los rdenes Lepidptera, Coleptera y Dptera, entre otros. Adems es amigable con el medioam-
biente, razones por la cuales se ha hecho comn el uso y desarrollo de productos comerciales y
plantas transgnicas a base de toxinas Cry en el sector agrcola. En esta revisin se describir los
aspectos ms importantes de Bt y su aplicacin como herramienta biotecnolgica para el sector
agrcola, con una consideracin sobre bioensayos usando esta bacteria.

Palabras clave: Bacillus thuringiensis, biopesticida, insecto-plaga, planta transgnica, protena


Cry, ensayo biolgico.

Bacillus thuringiensis biotechnology in agriculture

Abstract
Bacillus thuringiensis (Bt) is a Gram-positive rod-shape bacterium that during its sporulation pha-
se produces a parasporal inclusion formed by Cry proteins having biological activity against pest
insects. Because of these proteins, Bt shows toxicity toward pest insect larvae of Lepidoptera, Co-
leoptera and Diptera orders among others, besides of friendly with the environment, and for this
reason Bt has a very common use for commercial products and transgenic plants with Cry protein
basis in agriculture. In this review is described the most important Bt factors and their application
as biotechnological tool in agrobusiness, considering Bt bioassays.

Key words: Bacillus thuringiensis, Cry protein, pest insect, biopesticide, transgenic crop.

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NOVA - Publicacin Cientfica en Ciencias Biomdicas - Issn: 1794-2470 - Vol. 11 No. 20 julio - Diciembre de 2013

Introduccin
Los cultivos comerciales constituyen una fuente utilizadas ampliamente como biopesticidas o en el
importante para la economa del mundo, ya que desarrollo de cultivos transgnicos. En esta revisin
parte de la base alimentaria de la poblacin des- se describen los aspectos ms relevantes en la aplica-
cansa en la produccin agrcola, situacin que re- cin biotecnolgica de Bt en la proteccin de espe-
quiere la atencin por parte de los gobiernos. Uno cies vegetales comerciales.
de los principales factores que se debe controlar
para evitar la volatilidad de la produccin son los Protenas Cry
insectos-plaga, pues se estima que la produccin La forma estructural de las toxinas Cry est cons-
agrcola mundial se ve afectada aproximadamente tituida por tres dominios determinantes para su
en un 18% por esta causa, situacin por la cual se actividad biolgica contra insectos.
considera que anualmente deja prdidas de miles
de millones de dlares (1). El dominio I consiste en un paquete de siete
-hlices antiparalelas, donde la hlice 5 est ro-
Una herramienta de la biotecnologa para afrontar deada por las dems; el dominio II consta de tres
esta problemtica es la aplicacin de las propieda- lminas antiparalelas distribuidas en una tpica
des de la bacteria entomopatgena Bacillus thu- topologa de llave griega, acomodada en lo que
ringiensis (Bt), un bacilo Gram positivo, aerobio se ha llamado un -prisma; el dominio III consiste
facultativo, esporulado, cuyo tamao oscila entre de 2 lminas antiparalelas formando un snd-
1 a 1.2 micrmetros de ancho y de 3 a 5 micrme- wich (12-14). El dominio I es el responsable de la
tros de largo (2, 3), nativo del suelo y catalogado formacin del poro, el cual se cree que adquiere su
como cosmopolita (4-6) la cual se ha aislado de forma final de poro por accin de las hlices 5 y
ecosistemas como bosques tropicales y templados, 6 que se juntan manera de bucle en el extremo
zonas desrticas, sabanas, archipilagos, frutales, de la estructura insertndose en la superficie de la
suelos agrcolas, arena y cuevas en los cinco con- membrana lipdica de las clulas intestinales del
tinentes (6-9). Pertenece al reino Eubacteria, a la insecto susceptible.
familia Bacillaceae y al gnero Bacillus junto con
B. cereus y B. anthracis, de los cuales se diferencia Dado que la conformacin de las lminas , del
por la formacin de una inclusin parasporal re- dominio II, tienen parecido con regiones de unin
fringente al microscopio de contraste de fases (3). antgeno-anticuerpo en otras protenas, ade-
ms de su relacin con las lectinas, se considera
La inclusin parasporal, puede ocupar hasta que esta zona reconoce el receptor de superficie en la
el 30% de la clula y se produce en la fase es- membrana apical del intestino del organismo que es
tacionaria de crecimiento de la bacteria. Esta sensible a estas toxinas. Finalmente, se tiene eviden-
inclusin est conformada por diversas estruc- cia de que la estructura de -sndwich del dominio
turas proteicas, denominadas Cry y Cyt (3). III mantiene la estructura de la toxina, principalmen-
Las protenas Cry son el principal factor de vi- te hacia el ataque de proteasas, reconoce al receptor
rulencia de Bt, las cuales poseen pesos que osci- (conjuntamente con el dominio II) y tiene funcio-
lan entre ~60 y 140 kDa, y que al estar en pre- nalidad en la formacin del poro ltico (2, 15). En
sencia de un ambiente reductor modifican su consideracin de la estructura de tres dominios fun-
estructura volvindose altamente txicas contra cionales de la protena Cry, el dominio II es una zona
insectos de los rdenes Lepidptera, Dptera, Co- altamente variable, y se considera que es el principal
leptera Himenptera, Homptera, Ortptera determinante de la especificidad ya que est encar-
y Malfaga (3, 11). Las protenas Cry han sido gado de reconocer al receptor del insecto (Figura 1).

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Por otro lado, se ha descubierto que las toxinas de la proteasas presentes en el intestino medio del
Cry presentan cinco bloques conservados. El blo- insecto, escindiendo una seccin de aminocidos
que 1 est conformado por cinco hlices del do- en la regin N- terminal y en el extremo C- ter-
minio I, una zona altamente conservada, por lo minal dependiendo de la naturaleza de la protena
que se cree que est implicado en la formacin del Cry, dejando una toxina activa de un peso mole-
poro. El bloque 2 incluye siete hlices de dominio cular oscilante de 49 a 70kDa. (10,19, 20).
I y la primera lmina del dominio II, es la regin
de contacto de estos dominios, lo cual puede ser Se ha encontrado que las enzimas digestivas que
importante si el dominio I cambia su orientacin predominan en los lepidpteros y dpteros son
relativa para la interaccin con el receptor, y para las tripsina, quimiotripsina, serino proteasas y
mantener la forma globular de la protena durante termolisinas; mientras que en los colepteros pre-
la solubilizacin y activacin (2, 15, 16). Los blo- dominan la quimiotripsina, cisteno y aspartato
ques 3, 4 y 5 se encuentran dentro del dominio III proteasas (10, 18). Una vez se activa la toxina,
(2, 15). El bloque 3 contiene la ltima lmina sta debe reconocer receptores especficos sobre
del dominio II, una estructura involucrada en las vesculas de membrana de la microvellosidad api-
interacciones entre los dominios II y III (2, 15). cal de las clulas columnares del intestino medio
El bloque 4 contiene 2 argininas centrales envuel- (VMMA) (19). Esta unin se realiza en dos fases,
tas en los puentes salinos, involucrados en la agre- una reversible, en la que se da la interaccin entre
gacin oligomrica . La razn biolgica del bloque la toxina y su sitio de unin, del receptor en la que
5 no es clara (15). actan los dominios II y III y otra irreversible en
la que la protena se une a la protena receptora del
Mecanismo de accin de las toxinas Cry insecto susceptible, insertndose en la membrana,
El insecto cuando consume la protena Cry pre- lo cual requiere de la actuacin del dominio I (21).
senta cese de la ingesta, parlisis del intestino, v- Entre los receptores encontramos caderinas, ami-
mito, diarrea, descompensacin osmtica, parli- nopeptidasa N (APN), fosfatasa alcalina y prote-
sis total y la muerte (10, 17, 18). Para que se lleve a nas de 210 kDa (10, 21).
cabo la muerte del insecto, la protoxina debe estar
presente en un ambiente reductor que desestabi- Una vez se ha dado la insercin dentro de la mem-
lice sus puentes disulfuros y pueda ser activada. brana apical, la toxina induce la formacin de ca-
Dependiendo de la naturaleza de la protena Cry nales de iones o poros con un dimetro de 1 a 2
se realizar la solubilizacin y activacin de la mis- nanometros en la membrana celular en forma de
ma, pues se ha demostrado que las protenas Cry1 oligmeros que rompen el potencial de membra-
presentan mayor cantidad de aminocidos bsicos na (2, 21), esto finalmente hace que se aumente la
por lo cual los cristales se solubilizan a un pH al- permeabilidad de la membrana celular, permitien-
calino presente en el intestino medio del insecto; si do la entrada de agua, aniones, cationes, afectando
es una protena Cry3 existen cuatro puentes salinos el pH al alcalinizar el citoplasma y permitiendo
intercatenarios que estabilizan el cristal por lo que la entrada de molculas de mayor peso molecu-
se puede solubilizar en pH cidos (pH 5 6) , aun- lar que finalmente destruirn el epitelio intestinal
que pueden estar activadas naturalmente (10, 18). (22). Una vez se destruye el epitelio las esporas de
Bt se introducen en la hemolinfa donde se difun-
Sin embargo para que sean activadas no es sufi- den generando una septicemia y muerte de la larva
ciente con la solubilizacion, se requiere de la accin (10, 18, 21).

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Figura 1. Comparacin entre los dominios II de las toxinas Cry3Aa y Cry8Aa. A. Se puede observar la alta variabilidad, el
asterisco indica identidad, los dos puntos corresponde a sustitucin conservativa y el punto ensea sustitucin semiconservativa.
El alineamiento se realiz con el programa Clustal Omega (http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/). B. La tabla de la parte
inferior relaciona la escala de colores vs tipo de aminocido segn el programa Clustal Omega.

Formulaciones que contienen a Bt y sus toxi- 8 billones de dlares por ao. De igual forma se
nas Cry considera que el 80% de los productos biolgicos
Debido a su capacidad de combatir insectos pla- utilizados en la agricultura son preparados con
gas sin afectar el medio ambiente, y no generar componentes de este microorganismo (20, 23).
reacciones adversas en el ser humano u otros seres Para el desarrollo de productos a base de Bt se re-
vivos, el uso de productos a base de Bt, ha au- quiere emplear cepas debidamente caracterizadas
mentado constituyendo del 1 al 2% del merca- y que no sean productoras de -exotoxina (20, 24,
do global de insecticidas, dejando ganancias de 25) y su produccin se realiza principalmente con

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el mtodo de fermentacin sumergida a una tem- El estudio continuo de la actividad txica de Bt ha


peratura entre 27-35C y un pH de 6.8 a 7.2, bajo permitido encontrar nuevas cepas que presentan
una regulacin de nutrientes, cintica y transfe- actividad contra insectos sobre los cuales anterior-
rencia de oxigeno adecuada para una buena recu- mente no se haba encontrado algn tipo de ac-
peracin de biomasa y protena insecticida para su cin txica con protenas Cry debido a las condi-
posterior formulacin y envase (25, 26). ciones del pH del intestino medio que no eran las
apropiadas para su activacin (por ejemplo en el
Los bioinsecticidas a base de Bt se clasifican en orden Coleptera se ha observado condiciones de
productos de primera generacin, los cuales estn pH intestinal cido), siendo resistentes a la accin
constituidos por esporas y cristales, presentan varios de Bt, lo cual permite pensar en ampliar la utili-
inconvenientes pues presentan un rango estrecho dad de esta bacteria y el desarrollo de novedosos
de actividad cuando se presenta ms de un insecto biopesticidas (27).
plaga, poca persistencia en campo debido a la radia-
cin solar, y no alcanzan insectos que atacan races Plantas con genes cry
o partes internas del vegetal. Sin embargo, estos La compaa Plant Genetic Systems de Blgica
problemas se han logrado solucionar con el empleo desarroll en 1985 la primera planta transgni-
de productos de segunda generacin, que contienen ca de tabaco portadora de genes cry. La primera
como ingrediente activo esporas y toxinas de cepas plantacin con un cultivo transgnico en los Es-
con introduccin de genes de otras cepas la cual es tados Unidos se llev a cabo en el ao de 1994,
de gran utilidad al mejorar la accin frente al insecto cuando la agencia para la proteccin ambiental
generando un sinergismo, adems de disminuir las (EPA) aprob el cultivo de patata Bt, y en 1996 se
posibilidades de resistencia (25). comenz la produccin a gran escala de este tipo
de cultivos. El primer cultivo con genes cry que se
Los biopesticidas Bt de tercera generacin, que comercializ fue el maz, y posteriormente fueron
contienen como ingrediente activo bacterias re- liberados muchas variedades resistentes a insectos
combinantes, especialmente Pseudomonas fluores- como patata-Bt, soya-Bt y algodn-Bt, entre otros.
cens o Clavibacter xyli subsp. cynodontis, son capa- Actualmente las plantas transgnicas a base de Bt
ces de llegar hasta tejidos vegetales y crecer en la son comercializadas por el sector privado en ms
rizosfera. La cuarta generacin de estos bioinsecti- de 32 millones de hectreas alrededor del mun-
cidas la constituyen quimeras de protenas (25). La do, ms de la mitad son de Estados Unidos,
compaa Abbott tiene, entre otros, los productos 30% de Europa y Rusia y el 18% en compaas
Dipel a base de la serovariedad kurstaki (genes Japonesas; el 57% de las patentes pertenecen a
cry1Aa, cry1Ab1, cry1Ac1, cry2Aa1, cry2Ab1) y compaas como Monsanto, Micogen, Novar-
Xentari (Bt aizawai con genes cry1Aa1, cry1Ab1, tis, AgrEvo, o Syngenta (27-30). Entre las plan-
cry1Ba1, cry1Ca1, cry1Da1) que poseen letalidad tas transgenicas desarrolladas estn arandano
hacia insectos lepidpteros. Ecogen Inc. Ha pro- (gen cry1Aa), algodn y papa (gen cry1Ac),
mocionado los biopesticidas Lepinox (a base de Bt alfalfa y tabaco (gen cry1Ca) para resistencia
kurstaki) y Crymax (cepa Bt ED7826 con genes a lepidpteros. Tambin se ha transformado
cry1Ac, cry2A y cry1C) de letalidad hacia lepi- genticamente berenjena, papa y tabaco con el
dpteros. Biochem desarrollo una formula a base gen cry3A para resistencia a colepteros entre
de Bt israelensis para el control de dpteros (toxi- otros (27).
nas Cry4Aa1, Cry4Ba1, Cry10Aa1, Cry11Aa1).
Mycogen desarrollo M-trak, producto por el cual La ingeniera gentica ha logrado desplazar el uso
fue demandada por la empresa Novo Nordisk por de insecticidas qumicos con el empleo de cultivos
uso indebido de la cepa. transgnicos que permiten resistir a insectos plaga

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dejando ganancias promedio de hasta 60 millones Para disminuir las posibilidades de generacin
de dlares para algodn anualmente, y entre 19 a de resistencia se deben emplear estrategias como
190 millones para maz (27-29). Para lograr pro- de alta/dosis, en donde se garantice la expresin
ducir plantas transgnicas se han empleado mto- de toxinas que cause un elevado porcentaje de
dos como transferencia de ADN por medio de la mortalidad en el insecto susceptible, el uso de
bacteria Agrobacterium tumefaciens, la cual posee cultivos normales dentro de los transgnicos
un plsmido denominado Ti con la capacidad de para evitar fenmenos de presin selectiva en
transferir ADN al genoma de la planta; otros m- el insecto a combatir y de esta forma mantener
todos muy eficaces son la transferencia del plsmi- alelos susceptibles dentro de la poblacin, em-
do portador de genes cry por bombardeo (pistola pleando de modelo de refugio activo que se basa
de genes) o mediante electroporacin de proto- en una resistencia cruzada negativa (NCR) en
plastos, suministrando la aplicacin de un voltaje donde un alelo confiere resistencia a una toxina
causando orificios en los protoplastos donde se in- e hipersensibilidad a otra (2).
sertar la solucin de ADN. Estas plantas presen-
tan la caracterstica de producir aproximadamente Otra estrategia consiste en emplear cultivos que ex-
1 ng/mg de protena Cry soluble (27, 29, 31). presen ms de una toxina con diferente mecanismo
de accin y baja homologa (por ejemplo no se acon-
La transformacin de las plantas, mediante la in- seja el uso de toxinas Cry1 en un mismo cultivo),
corporacin de genes codificadores de protenas por otro lado, para evitar el flujo de genes a travs
Cry, trae muchos beneficios: le confiere proteccin del polen, se debe evitar usar plantas silvestres, aislar
a los tejidos internos, se mantiene una produccin los cultivos, cosechar antes de la floracin y el de-
constante de protena por lo cual no requiere de sarrollo de plantas estriles o hermafroditas (2, 27,
un cuidado rutinario ni mayor gasto econmico 29, 31).
o de tiempo por parte del agricultor, y no genera
un impacto ambiental perjudicial (15). Gracias a Ensayos biolgicos con Bt
estos beneficios que ofrece la tecnologa de Bt su El bioensayo implica la medicin del efecto que
produccin se ha aumentado, desde 1996 hasta el ejerce un determinado estimulo sobre una po-
2009 se han cultivado cerca de 1 billn de hect- blacin de organismos. Para Bt se mide la poten-
reas de tierra y a medida que se avanza en el de- cia del agente activo sobre un estado especfico
sarrollo de nuevos productos su comercializacin del organismo potencialmente susceptible para
se incrementa, en el ao 2009 se llegaron a culti- lo cul se aplica una metodologa que permite
var hasta 134 millones de hectreas de tierras en evaluar la actividad txica de una cepa, produc-
ms de 25 pases como Australia, Mxico, Estados to activo u organismo recombinante sin que los
Unidos, Argentina, China, Sudfrica e India, en- resultados se vean afectados por las variaciones
tre otros (29). propias de los sistemas biolgicos (32). No se
ha aprobado una estandarizacin internacional
Esta tecnologa ha reducido el uso de pesticidas debido a factores variables como la cepa del in-
qumicos en 21,000 toneladas (20). Sin embargo secto por lo que cada laboratorio estandariza sus
en los ltimos aos se ha detectado resistencia por propias metodologas, aunque se han recomen-
parte de los insectos a este tipo de cultivos, prin- dado varios protocolos ya que se descubren nue-
cipalmente por el uso de genes Bt no especficos, vas protenas susceptibles de ser manipuladas
presencia de enzimas proteolticas en la planta, in- para escalamiento de nuevas formulaciones y en
hibidores de tripsina, el posible flujo de genes en- la ingeniera del DNA recombinante, procesos
tre plantas transgnicas y silvestres y modificacin que involucran diversos ensayos analticos (33).
de receptores en los insectos (2, 29).

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En cuanto al sustrato alimenticio (dieta) es la he- la cepa bacteriana, generalmente son los instares
rramienta bsica que provee un rpido, estandari- a controlar en campo, esta disponible en un n-
zado y simple procedimiento que permite estimar mero ms grande que otros instares, el periodo de
la actividad de una cepa microbiana (33). Las die- bioensayo es generalmente corto y la precisin es
tas pueden ser naturales si implica la utilizacin ms alta ya que la mortalidad es uniforme y los
de los mismos materiales que el insecto consume intervalos de confidencia son ms pequeos (33).
en campo; artificiales si los componentes naturales Para evaluar efectos a largo plazo y daos intesti-
son suplementados con otro tipo de nutrientes que nales se puede utilizar instares avanzados. Es con-
se suponen suplen las necesidades de la plaga o son veniente monitorear el peso, tamao y describir el
reemplazados totalmente por materiales diferentes instar larval, se deben utilizar neonatos de 0 a 12
a los naturales; artificiales-merdicas si incluyen a horas de eclosionadas y con privacin de alimen-
la vez elementos de composicin conocida (acido to, la mortalidad se evala entre 48 a 96 horas.
ascrbico, vitaminas, colesterol, etc.) y desconoci- Los diseos experimentales ms empleados son el
da (harinas, levaduras, aceites, etc.); y oligdicas completamente aleatorizado, cuando la variabili-
si tienen elementos de composicin desconocida dad natural no tiene ninguna tendencia clara, o
o materiales crudos. Para adicionar el producto el de bloques completamente aleatorizados cuan-
microbiano (esporas, cristales, protoxinas, toxinas do existe una variable con una tendencia clara. Se
activadas u otros) en la dieta del insecto se puede considera que 30 es el nmero mnimo de larvas
mezclar con el agua de preparacin de la dieta, a emplear por concentracin con no menos de 3
o contaminar superficialmente (el bioproducto repeticiones. Los ensayos biolgicos deben repe-
se esparce y se deja secar), aplicar microgoteo de tirse cuatro veces en das diferentes para corregir
la muestra a evaluar a manera de atrayente (ge- variaciones dadas por calidad del insecto, condi-
neralmente sacarosa), la contaminacin del ali- ciones locales o procedimientos experimentales.
mento natural (hojas, tubrculos o tallos) con la La respuesta ms fcil de evaluar en un bioensayo
suspensin de la muestra por aspersin, barnizado es el porcentaje de mortalidad. La expresin ms
o inmersin; con dpteros se utiliza mezclar el in- empleada de la actividad txica es la concentracin
grediente activo con el agua donde se colocaran las letal 50 (CL50), parmetro que indica la concen-
larvas, en insectos de instares avanzados se puede tracin a la cual se origina la muerte del 50% de
inyectar directamente el producto en el tracto di- la poblacin de insectos evaluados, aunque en oca-
gestivo por va oral. El agente activo bacteriano siones se utiliza el tiempo letal 50 (tiempo en que
debe ser cuantificarse. El bioensayo se realiza con muere la mitad de la muestra analizada) y la dosis
pruebas que consisten en amplios rangos de con- letal 50 (donde se tiene que asegurar que el insecto
centracin de producto activo y un control negati- recibe exactamente la concentracin a evaluar, se
vo que debe contemplarse agua o soluciones buffer hace generalmente mediante inyeccin) (32, 33).
(si el bioproducto lo contiene), y un control posi-
tivo (en general una cepa o toxina de la cual ya se La seleccin del insecto problema depende del
reconozca su efecto). En ocasiones se puede usar impacto que tenga ya sea econmicamente o en
un control absoluto que puede ser una sustancia salud. Generalmente se tiene en cuenta las ac-
letal para el insecto, aunque no este relacionada tividades biolgicas reportadas para la bacteria,
con el bioproducto a evaluar (32). aunque esto no siempre es posible. Los autores
tenemos experiencia en insectos para los que no
Los ensayos biolgicos se realizan comnmente existan reportes de actividad hacia Bt, pero que
sobre larvas de primer o segundo instar ya que su importancia como plagas en Colombia era evi-
son los estados ms susceptibles del insecto, dan dente (Figura 2). Adems hay que tener en cuenta
una respuesta ms exacta del nivel de actividad de que la susceptibilidad de una plaga a las toxinas

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Cry puede deberse a varios factores como el pH Para terminar, y a manera de conclusin, Bt es una
intestinal, el procesamiento por proteasas, o la bacteria con propiedades que la caracterizan como
presencia de receptores especiales (distintos a los un excelente entomopatgeno, razn por la cual su
mencionados) (Figura 3). Los insectos se pueden uso, para proteccin de los cultivos comerciales, se
obtener directamente de campo o de cras en labo- ha hecho cada vez ms frecuente, sin generar un
ratorio, pero nosotros hemos preferido iniciar las impacto negativo en el medio ambiente. Gracias a
cras de laboratorio con individuos atrapados en los estudios sobre los genes cry de Bt se han logra-
campo ya que se evita fenmenos asociados a do diferentes tipos de plantas transgnicas que los
variabilidad gentica que podran redundar en expresan, las cuales tienen grandes beneficios ya
diversas respuestas a los bioensayos, sobre todo que la produccin de toxinas expresadas por stas
si ya se tienen muchas generaciones del insecto es constante, y persiste en el tejido de la planta,
en laboratorio. Para nuestro laboratorio preferi- gracias a esto hay una disminucin del uso de pla-
mos renovar las cras constantemente (mximo guicida qumicos reduciendo costos para el sector
cuando lleguen a 10 generaciones). agrcola y generando una produccin sostenible.

Figura 2. Insectos plaga de importancia en Colombia. A. Larva de Tecia solanivora (Lepidoptera: Gelichiidae), B. Adulto de Prem-
notrypes vorax (Coleoptera: Curculionidae), C. Adultos y pupas de Hypothenemus hampei (Coleoptera: Scolytidae), D. Larvas de Asym-
mathetes vulcanorum (Coleoptera: Curculionidae).

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Figura 3. Interaccin virtual entre una protena Cry3 y un posible receptor ADAM metaloproteasa.
El receptor ADAM para la toxina Cry3 (34) tiene color azul. El dominio I en la protena Cry3 es rojo, los
dominios II y III (en verde) se indican con flechas. Se puede observar que la interaccin se dara en una
regin que abarca los loops de superficie de los dominios II y III.

Agradecimientos
Los autores expresan su gratitud a Rojo J. por sus 4. Balaraman K. 2005. Occurrence and diversity of mosquitoci-
dal strains of Bacillus thuringiensis. J. Vector Borne Dis. 42:81-
aportes a este manuscrito. 86.
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