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INFORME DE LABORATORIO

INTRODUCCION

Practica 1: Normas de bioseguridad


Las normas de bioseguridad son un conjunto de medidas y normas preventivas, destinadas a
mantener el control de riesgos laborales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o
qumicos, logrando la prevencin de impactos nocivos frente a riesgos propios de su
actividad diaria, asegurando que el desarrollo o resultado final de dichos procedimientos no
atente contra la seguridad del trabajador.

Practica 2: Reconocimiento de material de laboratorio


Es de suma importancia que los materiales y equipos de laboratorio se identifiquen con su
nombre correcto y uso especfico.

Practica 3:

Practica 4:
OBJETIVOS

Practica 1
Conocer las normas de bioseguridad
Poner en prctica las normas de bioseguridad en el laboratorio
Garantizar la proteccin a los estudiantes y personal de laboratorio

Practica 2
Reconocer las partes del laboratorio
Reconocer los materiales a utilizar en cada procedimiento

Practica 3
Practicar y conocer las diferentes tcnicas de siembra para el desarrollo de cultivos
Conocer e interpretar el nmero aproximado de microorganismos en una muestra
(parte b de la practica 3)

Practica 4
Conocer los diferentes tipos de tincin utilizadas
Reconocer bacterias Grampositivas y gramnegativas
Observar la morfologa de algunos hongos
MATERIALES

Practica 1
Elementos de proteccin personal

Practica 2
Materiales a reconocer

Practica 3
Microorganismos previamente aislados (Bacterias y hongos)
Agar nutritivo en caja de Petri
Agar PDA
Asa redonda
Gradilla
Mechero
Incubadora
Vinipel
Marcador de vidrio
Muestra de suelo o agua residual.
Frascos con solucin salina 0.85% o agua peptonada al 0.1% (90 ml)
Tubos tapa rosca con 9 ml de solucin salina o agua peptonada al 0.1% (6 tubos)
Cajas de Petri con agar Nutritivo, Chromocult o King B.( 6 cajas)
Pipetas de vidrio o pipeta automtica. ( 100 microlitros y 1000 microlitros)
Rastrillos.
Practica 4
Muestras de Microorganismos, ( practica aislamiento)
Colorantes para tincin de Gram (Cristal violeta, lugol. Alcohol acetona, Fucsina de
Gram)
Aceite de inmersin
Microscopio.
Asas redondas
Azul de lactofenol.
Cinta transparente.
Asas rectas o agujas de diseccin.
Lminas y laminillas
PROCEDIMIENTO

Practica 1
Se hace una socializacin sobre los riesgos en el laboratorio y su respectiva proteccin
personal durante el mismo.

Practica 2
Se hace reconocimiento de cada uno de los materiales de laboratorio y una breve
explicacin
Practica 3 Parte a (Mtodos de siembra)
1. Desinfectar el rea de trabajo, prender el mechero y preparar el material de trabajo.
2. Abrir la caja de Petri y seguir el esquema para el aislamiento para el caso de bacterias.
3. Para el caso de Hongos tomar con el asa recta el microorganismo y por puncin
sembrar en la caja de Petri con medio PDA.
4. Incubar a 37 por 24 horas para bacterias y a 25 por 8 das para hongos.
5. Terminado la siembra, marcar las cajas en el borde de la base de la caja y envolverla
en papel Vinipel.
6. Desinfectar el rea de trabajo, apagar el mechero y entregar el material

Practica 3 parte b
1. Pesar 10 gramos de la muestra, mezclarla con los 90 ml de solucin salina o agua
peptonada.
2. Realizar diluciones seriadas desde 10-1 hasta 10-6
3. Tomar las 6 cajas de Petri con agar y marcar 2 con dilucin 102, 2 cajas con
dilucin 104, 2 cajas con dilucin 106
4. Sembrar por duplicado las diluciones 10-2 10-4 10-6 tomando 0,1 ml de cada
dilucin por superficie, con ayuda del rastrillo homogenizar la microgota sobre la
superficie del agar sin romperlo.
5. Incubar por 24 horas a 37C y realizar el recuento.
6. Realizar los clculos donde se toman las diluciones donde se encuentren entre 30 y
300 colonias para realizar el recuento, sacar promedio y aplicar la formula: Nmero
de colonias x Factor de dilucin x 10 (factor de correccin) El resultado es
informado en UFC ( unidades formadoras de colonia)/ g o ml de la muestra.
Practica 4 (Tcnicas de tincin) Parte a Tincin de Gram
1. Tomar las colonias de bacterias que los estudiantes sembraron anteriormente
(tcnicas de aislamiento) y realizar un frotis en una lmina portaobjetos, colocando
una gota de agua y con ayuda del asa redonda homogenizar para expandir el frotis en
la lmina.
2. Dejar secar al aire libre la muestra, una vez se encuentre seca, fijar al calor la muestra
en el mechero (se coloca 3 veces rpidamente sobre el fuego la lmina)
3. Una vez se encuentra la muestra fijada se procede a colocarle varias gotas de cristal
violeta, dejando por un minuto y luego lavar en el grifo (solo para quitar el exceso de
colorante.
4. Colocar unas gotas de lugol, dejar por un minuto y lavar.
5. Colocar una gota de alcohol acetona, dejar por 15 minutos, lavar.
6. Colocar unas gotas de Fucsina de Gram, dejar por un minuto, lavar y dejar secar la
muestra.
7. Una vez se encuentra seca la muestra agregar una gota de aceite de inmersin y
observar en el microscpio en el objetivo de 100x.
8. Observar las morfologas (bacilos, cocos, Grampositivos, Gramnegativos)

Practica 4 Parte B Tincin de Azul de Lactofenol para hongos


1. Tome con una cinta o con las agujas de diseccin un trozo del hongo ( tomar
micelio, parte algodonosa)
2. En una lmina portaobjetos colocar una gota de azul de lactofenol.
3. Si tom la muestra con aguja de diseccin, ponerla en contacto sobre la gota e ir
desglosando las hifas, colocarle una lmina portaobjetos, si utiliz la cinta
transparente slo debe colocarla sobre la gota sin necesidad de laminilla
cubreobjetos.
4. Llevar al microscpio y observar en el objetivo de 40x.
5. Observar las estructuras y anotarlas para el informe.