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Artigo

DOI: 10.3395/vd.v2i4.442

Escherichia coli O157:H7 patgeno alimentar emergente


Escherichia coli O157:H7 emerging food pathogen

Resumo
Cheila Minia Daniel de PaulaI,II,* Segundo a Organizao Mundial da Sade, cerca de 2,2 milhes de pessoas morrem
anualmente em funo de doenas hdricas ou alimentares, a maioria dos quais so
Letcia Sopea CasarinI
crianas. Estas doenas so causadas por patgenos j conhecidos, emergentes ou
Eduardo Cesar TondoI reemergentes, principalmente bactrias. A globalizao tem contribudo na disseminao
de patgenos de origem alimentar, aumentando o desafio relacionado identificao
da origem desses agentes e elaborao de regulamentao e fiscalizao adequadas.
O cenrio das Doenas Transmitidas por Alimentos (DTA) muda constantemente e a
prevalncia de determinada doena varia de poca para poca, assim como os agentes
etiolgicos destas. Dentre os principais patgenos emergentes em nvel mundial, E. coli
O157:H7 tem ganhado grande destaque nos ltimos 20 anos, devido severidade de
seus surtos. At pouco tempo, o Brasil era considerado livre desse patgeno, porm a
bibliografia cientfica e registros epidemiolgicos demonstram o contrrio. Em vista disso,
o presente artigo objetiva realizar uma reviso integrativa da literatura, enfocando as
caractersticas, os mtodos de isolamento e deteco e os dados epidemiolgicos da E.
coli O157:H7 no Brasil e no mundo.

Palavras-chave: E. coli O157:H7; Patgenos Emergentes; Doenas Transmitidas por


Alimentos

Abstract
According to the World Health Organization, about 2.2 million people, most of whom
are children, die each year due to water and foodborne illnesses. These illnesses are
caused by known, emerging, or reemerging pathogens, mainly bacteria. Globalization has
contributed to the spread of foodborne pathogens, increasing the challenge of identifying
the origin of these agents and of developing appropriate regulation and monitoring. The
scenario of Foodborne Illnesses (FI) constantly changes and the prevalence of a particular
illnesses as well as its etiological agents, vary from season to season. Among the major
emerging pathogens at a global level, E. coli O157:H7 has gained great prominence in the
last 20 years, due to the severity of its outbreaks. Until recently, Brazil was considered
to be free of this pathogen, but the scientific literature and epidemiological records
prove otherwise. This article thus aims to perform an integrative review of the literature,
focusing on the characteristics, isolation, and detection methods, and the epidemiological
I
Instituto de Cincia e Tecnologia de
Alimentos, Universidade Federal do data of E. coli O157: H7 in Brazil and the world.
Rio Grande do Sul (ICTA/UFRGS),
Porto Alegre, RS, Brasil Keywords: E. coli O157:H7; Emerging Pathogens; Foodborne Illnesses
II
Departamento de Nutrio,
Universidade Federal de Cincias
da Sade de Porto Alegre (UFCSPA),
Porto Alegre, RS, Brasil

* E-mail: cheilap@ufcspa.edu.br

Recebido: 03 set 2014


Aprovado: 24 out 2014

http://www.visaemdebate.incqs.fiocruz.br/ Vig Sanit Debate 2014;2(04):23-33 | 23


Paula CMD et al. E. coli O157:H7

Introduo
De acordo com a Organizao Mundial da Sade, as doenas tipicamente no patognicas12,13. Entretanto, subgrupos de E.
transmitidas por alimentos (DTA) so aquelas causadas pela coli apresentam fatores de virulncia que os tornam capazes
ingesto de alimentos ou de gua contaminados e podem ser de de causar doenas. Escherichia coli produtoras de toxinas Shiga
natureza infeciosa, quando provocadas por microrganismos, ou (STEC) formam um grupo de bactrias patognicas envolvidas
txica, quando provocadas por toxinas qumicas1. As DTA podem em surtos de DTA, do qual a E. coli enterohemorrgica (EHEC)
ainda ser causadas por agentes fsicos1. As informaes dispon- constitui um subtipo14.
veis no Brasil apontam as bactrias patognicas e/ou suas toxi-
nas, seguidas por vrus, como responsveis pela maior parte dos As STEC se destacam como bactrias emergentes relacionadas com
surtos de DTA . O mesmo cenrio tem sido observado nos pases
2 a ingesto de alimentos15, uma vez que esto ligadas a um amplo
europeus. Segundo a European Food Safety Authority (EFSA) , 3 espectro de doenas humanas que variam desde uma diarreia leve
informaes apresentadas por 27 pases da Unio Europeia at severas diarreias sanguinolentas (colites hemorrgicas CH) que
no ano de 2012 indicaram que a maioria dos surtos notificados fo- podem evoluir para complicaes extra intestinais graves como a
ram causados por Salmonella, toxinas bacterianas, vrus e Cam- Sndrome Hemoltica Urmica (SHU), cuja mais grave possvel se-
pylobacter, respectivamente. O mesmo, no entanto, no tem quela a falncia renal e a Prpura Trombocitopnica (PTT)16,17.
ocorrido nos Estados Unidos onde, segundo Scallan et al. (2011)4,
O termo E. coli enterohemorrgica utilizado para as cepas que pro-
os vrus tm sido os responsveis pela maior parte dos surtos, po-
vocam CH, SHU ou PTT 12,18,19,20 e, de acordo com essa definio, todas
rm as maiores taxas de mortalidade so atribudas s bactrias.
as cepas EHEC so patognicas21,22 e constituem um importante gru-
Entre os principais agentes causadores de DTA, destacam-se po de patgenos emergentes transmitidos por alimentos nos ltimos
aqueles designados como clssicos, ou seja, microrganismos bem anos principalmente o sorotipo E. coli 0157:H723, 24, 16, 25.
conhecidos, clnica e epidemiologicamente, como Staphylococ-
Escherichia coli O157:H7 o sorotipo de E. coli pertencente ao gru-
cus aureus, Bacillus cereus, Clostridium botulinum, Clostridium
po EHEC que melhor representa a categoria de patgenos emergen-
perfringens, entre outros5.
tes, desde sua primeira associao com surto alimentar em 1982,
Todavia, um problema que vem sendo observado a reemer- nos Estados Unidos26, no entanto, apesar da severidade dos sinto-
gncia desses patgenos ditos clssicos, os quais estiveram mas, os surtos no foram amplamente divulgados na poca.
controlados, mas que voltaram a causar surtos, pois adquiriram
novas caractersticas e ressurgiram veiculados por diferentes ali- Foi somente depois de uma dcada, em 1992, que E. coli O157:H7
mentos, causando novos tipos de infeces ou aparecendo em ganhou notoriedade, quando acometeu mais de 700 pessoas em
regies onde anteriormente no existiam. Como, por exemplo, um surto de colite hemorrgica que resultou na morte de quatro
pode-se ressaltar surtos causados por Salmonella Enteritidis, re- crianas27. Desde ento, esse microrganismo vem sendo reco-
latados nos Estados Unidos e em vrios pases da Europa, desde o nhecido como um importante patgeno alimentar emergente em
final da dcada de 1970 . Apesar de ser uma doena causada por
6 nvel mundial28, 23,29,30.
um microrganismo clssico, a salmonelose causada por S. Enteri-
Alm do sorotipo O157:H7, outros sorotipos de STEC tambm so
tidis passou a ser considerada uma DTA causada por um patgeno
identificados como problema de sade pblica devido a sua as-
reemergente, devido incidncia crescente, nas duas ltimas
sociao com CH e SHU31,32. Acredita-se que, embora no sejam
dcadas, em muitos pases, incluindo o Brasil7,8,9,10.
ainda muito estudadas, STEC no-O157 esto propensas a seguir
Segundo Machado11 (2013), a reemergncia de agentes patognicos uma tendncia semelhante s STEC-O15733.
depende de vrios fatores, entre eles: os fatores demogrficos, o
Em 2011, a Alemanha apresentou o maior surto com E. coli
comportamento humano, a adaptao microbiana, o desenvolvi-
(STEC) j registrado. Este surto envolveu mais de 3.000 casos
mento de novas tcnicas de isolamento e identificao microbiana,
de diarreia com sangue e sndrome urmica hemoltica. A in-
os avanos na cincia e tecnologia e os diversos fatores econmicos.
vestigao epidemiolgica apontou o consumo de broto de feno
Um problema igualmente importante, ou at mais srio, o sur- grego contaminado como a causa da doena e a transmisso fe-
gimento de novos patgenos, os quais no tinham sido at en- cal-oral foi relatada. O agente causador foi identificado como E.
to identificados como causadores de DTA e, por algum motivo, coli O104:H4 e o estudo das sequncias do genoma desse pat-
comeam a ser responsveis por essas doenas. Tais microrga- geno revelou genes caractersticos de E. coli enterohemorrgica
nismos so chamados de patgenos alimentares emergentes. Na (EHEC) e enteroagregativa (EAEC)34,35.
maioria das vezes, a emergncia destes agentes tem impacto em
Apesar de E. coli O157:H7 ainda ser considerado o principal so-
toda a cadeia de produo de alimentos, constituindo um desafio
rotipo envolvido com surtos de enfermidades veiculadas por ali-
para a sade pblica e gerando demanda de novas medidas de
mentos entre as E. coli produtoras de toxina de Shiga (STEC),
preveno, controle e fiscalizao.
outros sorogrupos esto ganhando importncia, como O26, O45,
Escherichias coli constitui um grupo de bactrias clssicas que O103, O111, O121 e O145, os quais esto sendo denominados de
normalmente habitam a microbiota intestinal do homem, sendo Top Six STEC non O15736,37,38,39,15.

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Paula CMD et al. E. coli O157:H7

Nos Estados Unidos, os sorotipos O26, O45, O103, O111, O121 incluiu-se tambm trabalhos publicados na forma de resumos, dis-
e O145 so responsveis por 70% dos casos de doena devido sertaes e teses. A busca em diversas fontes teve como finalidade
E. coli no-O15731,36,37,38,39. Estima-se que 20-50% das infeces ampliar o mbito da pesquisa e minimizar, na medida do possvel,
sejam causadas por sorotipos de STEC no-O157, o que equivale os vieses que podem surgir neste tipo de pesquisa.
a 37.000 casos por ano, nos Estados Unidos31,32. Por outro lado, o
ndice de hospitalizaes e mortes causadas por STEC permanece Os critrios estabelecidos para incluso das referncias foram:
maior para o sorogrupo O157 do que para sorogrupos no-O157 . 4 artigos completos, resumos, dissertaes ou teses disponveis
eletronicamente que abordam temas relacionados DTA, pat-
O sorotipo O157 continua sendo o mais conhecido patgeno genos emergentes, E. coli produtoras de toxina Shiga (STEC E.
alimentar sendo, sozinho, responsvel por cerca de 50% das coli), E. coli enterohemorrgicas (EHEC E. coli) e SHU, dispon-
doenas causadas por STEC na Unio Europeia. Alm disso, esse veis nos idiomas portugus, ingls ou espanhol. A busca ocorreu
sorotipo est associado com os casos mais graves de CH e poten- nos meses de julho a outubro de 2014 e incluiu referncias entre
cialmente fatais como SHU21,22. os anos de 1982 a 2014.

No Brasil, existem poucos dados epidemiolgicos disponveis que E. coli O157:H7: caractersticas gerais, reservatrios, fatores de
associam alimentos com a ocorrncia de SHU, contudo, registros virulncia e doenas associadas
demonstram a ocorrncia de casos de SHU, nos ltimos anos40,41.
Uma provvel explicao para a falta de associao da doena As linhagens do sorotipo O157:H7 apresentam a maioria das ca-
com surtos alimentares seria a no obrigatoriedade de pesquisa ractersticas bioqumicas tpicas da espcie E. coli49, no entanto
da E. coli O157:H7 em alimentos envolvidos em surtos. Alm dis- a dificuldade encontrada no isolamento e identificao deste mi-
so, as tcnicas microbiolgicas convencionais para isolamento de crorganismo est nas principais caractersticas bioqumicas que
E. coli no so capazes de detectar E. coli O157:H7 ou suas toxi- a distinguem das demais linhagens de E. coli.
nas42,43, e os mtodos capazes de detect-la no esto implemen-
tados na maioria dos laboratrios Centrais (LACENs). Talvez por Entre as principais caractersticas que diferenciam E. coli

estes motivos e muitos outros, at recentemente, o Brasil era O157:H7 das demais bactrias da espcie e que possibilitam o

considerado livre da E. coli O157:H7, contudo h relatos do iso- seu isolamento esto: a incapacidade de fermentar o sorbitol, a

lamento desse microrganismo em territrio nacional em diversas incapacidade de produzir a enzima -glicuronidase (enzima que

bibliografias cientficas e registros epidemiolgicos14,15,44,45. quebra o 4-metilumberiferil--D-glicurondeo -MUG, fornecendo


um produto fluorescente, detectvel sob luz UV) e a multiplica-
Em vista disso, este trabalho tem como objetivo realizar uma o pobre ou nula a 44C em caldo E. coli50,51,19.
reviso integrativa, a fim de demonstrar o panorama atual da E.
coli O157:H7 como patgeno emergente no Brasil e no mundo. Estas caractersticas bioqumicas so utilizadas no isolamento de
E.coli O157:H7 43, no entanto a confirmao da identificao baseia-
se, sobretudo, na presena de genes de virulncia como a produo
Metodologia de toxina Shiga utilizando, para tanto, mtodos moleculares18.

O trabalho foi realizado atravs de uma reviso integrativa sobre Bovinos tm sido identificados como o principal reservatrio de
E. coli O157:H7 no Brasil e no mundo, com a finalidade de reunir E. coli O157:H7, uma vez que podem excretar o patgeno pelas
e sintetizar resultados de pesquisas sobre esse microrganismo, fezes e assim contaminar alimentos, gua e ambiente52,53,54,55. A
de forma sistemtica e ordenada, contribuindo para o aprofun- maioria dos surtos causados por E. coli O157:H7 tem sido rela-
damento do conhecimento sobre o mesmo46,47. cionada, principalmente, ao consumo de carne moda mal cozi-
da56,57,2. No entanto, atualmente, surtos envolvendo alimentos
As etapas para elaborao da reviso foram as seguintes: iden-
no crneos como leite e seus derivados no pasteurizados; su-
tificao da questo de pesquisa e objetivo do estudo, busca da
cos de frutas no pasteurizados; alface; espinafre; legumes crus
literatura, estabelecimento de critrios de incluso e excluso de
e brotos de semente tambm tem sido relatados58,12.
artigos, avaliao e anlise dos dados seguido da apresentao e
discusso48. A seleo dos artigos cientficos foi realizada atravs Uma caracterstica importante da E. coli O157:H7 a sua baixa
de acesso on-line s bases de dados como Portal de Peridicos dose infectante, to baixa quanto a da Shigella, ou seja, inferior
da Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior a 10 organismos59,60,61,62 As doenas causadas por este microrga-
(CAPES), Scientific Eletronic Library Online (Scielo), Sumrios.org, nismo vo desde enfermidades moderadas at doenas severas,
Lilacs (Literatura Latino Americana em Cincias de Sade), Medli- podendo apresentar trs manifestaes diferentes: Colite he-
ne (National Library of Medicine and National Institutes of Heal- morrgica (CH), Sndrome Hemoltica Urmica (SHU) e Tromboci-
th), utilizando-se as seguintes palavras chaves: E. coli O157:H7, topenia Trombtica Prpura (TTP)63,25.
patgenos emergentes, doenas transmitidas por alimentos, food
pathogens, emerging pathogens, foodborne outbreaks. Para a pes- A CH a forma de infeco menos grave, caracterizada por dores
quisa, utilizou-se tambm a busca de informaes em livros de abdominais severas e diarreia aguda, com perodo de incubao
assuntos afins, na legislao em vigor e em sites de institutos de mdio de 3 a 4 dias. A reclamao inicial das vtimas, normal-
pesquisas, rgos governamentais e revistas indexadas. Em funo mente, diarreia precedida de dor abdominal e febre baixa.
do baixo nmero de artigos cientficos brasileiros sobre o assunto, Um ou dois dias, aps o aparecimento dos primeiros sintomas,

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Paula CMD et al. E. coli O157:H7

a diarreia passa a sanguinolenta e aumentam as dores abdomi- mais de 700 pessoas em um surto de colite hemorrgica que re-
nais. Esta dor abdominal descrita como de igual intensidade sultou na morte de quatro crianas27. Esse surto ocorreu aps
da dor do parto, considerada por alguns, pior que as dores de a ingesto de hambrgueres preparados com carne moda mal
apendicite. Esta fase dura, em mdia, de 4 a 10 dias. Nos casos tratada termicamente, em uma lanchonete de uma grande rede
mais srios, amostras fecais so descritas como all blood and de fast-food nos Estados Unidos28, 23, 29,30.
no stool (somente sangue, sem fezes). Pode ocorrer vmito e h
pouca ou nenhuma febre64,20,40. Em 1995, 92 pessoas foram vtimas de um surto em Montana,
EUA, provocado pelo consumo de alface contaminada com gua
Na maioria dos pacientes, a diarreia sanguinolenta termina sem de irrigao73.
sequelas, mas, em aproximadamente 10% das infeces por E. coli
O157:H7, a doena progride para SHU e complicaes subsequen- Em 1996, Armstrong et al.23, aps uma extensa reviso sobre o
tes65,40, especialmente em crianas menores de 5 anos e idosos. assunto, destacaram E. coli O157:H7 como patgeno emergente
nos Estados Unidos e destacaram ainda que seria impossvel con-
Na SHU, o paciente sofre de diarreia sanguinolenta, anemia he- ter sua disseminao no ambiente e rebanho do pas.
moltica e falha renal aguda que pode levar a insuficincia renal
crnica66. Embora a SHU possa ser causada por outros patgenos, O maior surto causado por E. coli O157:H7 registrado at hoje
em 85% dos casos a doena ocorre depois de um episdio de gas- ocorreu no Japo, em Sakai, Osaka, em 1996, onde brotos de
trenterite causada por VTEC, sendo E. coli O157:H7 responsvel rabanete branco, servidos como parte do almoo de uma escola,

por 70% dos casos. foram identificados como o veculo mais provvel da infeco.
Neste surto, mais de 8.000 pessoas foram envolvidas, principal-
Os mecanismos pelos quais E. coli O157:H7 causam CH e SHU mente crianas. Um total de 106 crianas desenvolveu SHU e trs
ainda no esto totalmente esclarecidos, no entanto, acredita- delas morreram73.
se que a capacidade de produzir toxinas Shiga like (Stx) seja o
principal fator de virulncia da E. coli O157:H7 para o desenvol- Na China, em 1999, um surto causado por E. coli O157:H7 foi

vimento de SHU 20,18,67,68,69


. responsvel por 177 mortes, devido a SHU. Pesquisadores inves-
tigaram caractersticas genotpicas e fenotpicas do agente etio-
A toxina Shiga apresenta dois grupos imunologicamente distin- lgico desse surto e compararam com o genoma das cepas de
tos e no passveis de reaes cruzadas, chamados de Stx1 e E. coli, do surto de 1996, em Sakai, Japo, e concluram que os
Stx266,67. Dados epidemiolgicos sugerem que a Stx2 seja a mais isolados foram filogeneticamente relacionados74.
importante no desenvolvimento de SHU , visto que vrios rela-
68

Recentemente, em maio de 2014, a Wolverine Packing Company


tos indicam que cepas de E. coli O157:H7 que expressam apenas
informou o recolhimento de 1,8 milhes de quilos de carne moda
a Stx2 tm maior probabilidade de provocar SHU do que aquelas
que poderiam estar contaminados com STEC O157:H7. A empresa
que expressam apenas a Stx1 ou ambas . 69

informou que a carne moda foi enviada para distribuidores, para


A infeco por E. coli O157:H7 tambm pode desencadear PTT, uso no varejo e restaurantes de todo o pas. Apesar dos esforos
onde os enfermos exibem caractersticas clnicas e patolgicas da empresa, parte dos lotes produzidos permaneceu no merca-
semelhantes a de pacientes com SHU, porm na PTT h o envol- do e no, ms de junho, quatro estados americanos relataram
vimento do sistema nervoso central. Alm disso, esta sndrome casos de doena por E. coli O157:H7. Estudos epidemiolgicos
geralmente acomete adultos, caractersticas esta que a distin- realizados pelas autoridades locais indicaram que carne moda
gue da SHU .
40 contaminada produzida pela Wolverine Packing Company foi a
provvel fonte do surto. O surto envolveu 12 pessoas, destas,
Ocorrncia de E. coli O157:H7 no Brasil e no mundo sete foram hospitalizadas. Nenhum dos envolvidos desenvolveu
SHU e nenhuma morte foi relatada57.
Cepas de E. coli O157:H7 j foram isoladas em todos os con-
tinentes, abrangendo mais de 30 pases70,71,72. O primeiro surto Na Inglaterra e no Pas de Gales, E. coli O157:H7 responsvel
causado por E. coli O157:H7 em humanos foi relatado nos Esta- por 1% dos casos de doenas transmitidas por alimentos notifica-
dos Unidos, em 1982, quando esse microrganismo causou dois das, enquanto que na Esccia esta taxa sobe para 3%75.
surtos de diarreia sanguinolenta severa, envolvendo pelo menos
47 pessoas, aps a ingesto de sanduches contendo hambrgue- A incidncia anual de doenas relacionadas E. coli O157 para
res de carne bovina, molho de cebola e picles, distribudos em cada 100.000 habitantes foi de 0,12 na Austrlia, de 0,33 na Ho-
uma rede de fast-food . 26 landa, de 0,37 na Unio Europeia, de 0,81 na Sucia, de 0,87 no
Japo, de 0,9 nos Estados Unidos, de 3,6 na Nova Zelndia e a
Em 1991, outro surto causado por E. coli O157:H7, tambm nos maior incidncia foi na Argentina com 13,9 casos72.
Estados Unidos, atingiu 23 pessoas que consumiram cidra de ma
no pasteurizada, que aparentemente foi produzida com mas Na Argentina, a SHU causada por E. coli O157:H7 considera-
recolhidas do cho e contaminadas com esterco de ovinos .71 da uma doena endmica, tendo um dos ndices globais mais
altos76,25. Segundo Signorini e Tarabla (2010), aproximadamente
No entanto, foi somente em 1992 que E. coli O157:H7 foi reco- 400 novos casos de SHU so anualmente notificados em unidades
nhecido como patgeno alimentar emergente, quando acometeu de nefrologia de hospitais Argentinos77.

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Paula CMD et al. E. coli O157:H7

Apesar de sua incidncia relativamente baixa em todo mundo se Silveira (2010)81 analisou 95 amostras de carne moda coletadas
comparada com outros patgenos, ainda assim, E. coli O157:H7 em diferentes municpios do Rio Grande do Sul (RS), prximos
constitui srio risco sade pois pode provocar doenas severas fronteira com o Uruguai e a Argentina, a fim de investigar a pre-
sendo, algumas vezes, fatal, particularmente para crianas e sena de E. coli O157:H7. Dentre essas amostras, trs isolados
para idosos, e atualmente reconhecida como patgeno emer- foram identificados como provveis E. coli O157:H7, porm, aps
gente importante causador de DTA28,8. a caracterizao genotpica por PCR-multiplex investigando genes
de virulncia (rfbO157, stx1 e stx2), no Laboratrio de Referncia
No Brasil, somente casos espordicos de diarreia e SHU asso- para a Vigilncia Regional de SHU e Diarreias Sanguinolentas do
ciados com STEC tm sido relatados62,63,64,65,66 e so poucos os Conesul, do Ministrio da Sade da Argentina (INEI-ANLIS), os re-
registros de ocorrncia de STEC em alimentos no Brasil83,85. sultados demonstraram que as amostras no eram E. coli O157:H7.
Alm disso, no h dados sistemticos que possam indicar a si-
tuao da SHU e da PTT, sendo que a incidncia dessas sndro- Tambm no Rio Grande do Sul, em 2012, foram isoladas 22 amostras
mes no conhecida no pas66,73,41. Apesar de escassos, estes de E. coli O157:H7, a partir de carcaas bovinas de um abatedouro
dados so de extrema importncia, pois, embora a SHU possa frigorfico41. No mesmo perodo, outro estudo tambm isolou duas
ser causada por outros patgenos, em 85% dos casos a doena amostras de E. coli O157:H7 a partir de gua de irrigao e gua de
ocorre depois de um episdio de gastrenterite causada por E. lavagem de alfaces, de propriedades rurais do sul do Brasil45.
coli produtora de verotoxina85.
Neste mesmo ano, 248 amostras de carne moda foram coletadas
possvel que o primeiro relato de isolamento de uma cepa de E. em diferentes bairros da cidade de So Paulo a fim de identifi-
coli O157:H7, no Brasil, tenha ocorrido em 1997, a partir de uma car a presena de E. coli O157 e deteco dos sorogrupos O103,
amostra de gua de poo na cidade de So Paulo86, enquanto que O111, O145 e O26. De acordo com os pesquisadores, diferente-
o primeiro relato de isolamento de STEC de um paciente com mente do estudo realizado em 2010 no RS81, dentre as amostras
SHU foi realizado em um hospital da cidade de So Paulo no ano analisadas, uma (0,4%) foi positiva para a presena de E. coli
de 200179. Desde ento, vrias pesquisas tm sido realizadas, a O157:H7. A identificao genotpica e bioqumica caracterizou
fim de identificar a presena de E. coli O157:H7 no Brasil. esse isolado como STEC O157:H7, portador de todos os fatores
de virulncia pesquisados: stx1, stx2, eae e ehx. Foi constatada,
Na tentativa de isolar E. coli O157:H7 no Brasil, os pesqui-
tambm, a expresso das protenas stx em clulas Vero. Esse
sadores tm analisado vrios tipos de amostras, entre elas
possivelmente o primeiro relato da presena de E. coli O157:H7
hambrguer87, carne moda88, fezes de animais, gua89,90,91 e
produtora de toxina Shiga em carne moda no Brasil15.
amostras clinicas de pacientes envolvidos em casos de diar-
reia sanguinolenta41,92, entre outras. Embora exista o registro desses e outros isolamentos, bem como
diversos relatos de casos de SHU no Brasil, a nica implicao
Em 1997, em um dos primeiros estudos realizados a fim de iden-
de E. coli O157:H7 veiculada por alimento envolvido em surto
tificar a ocorrncia de E. coli O157:H7 no Brasil, foram analisa-
alimentar, descrita na literatura, o caso de um surto com dois
das 886 amostras de hambrgueres produzidos por oito fabrican-
casos de diarreia, sem SHU, ocorrido em Campinas, em 2001,
tes no sul e sudeste do pais. Os resultados demonstraram que
supostamente causado por ingesto de carne mal cozida40.
em 17 (1,9%) das amostras havia E. coli capazes de aglutinar o
antisoro para O157. No entanto, testes confirmatrios realizados Estes resultados demonstram que, embora a incidncia de infec-
posteriomente no confirmaram este resultado87. o por E. coli O157:H7 transmitidas por alimentos seja baixa,
a severidade dos sintomas e a frequncia de sequelas justificam
Em 1999, E. coli O157:H7 foi isolada de trs amostras coleta-
a intensificao de sua pesquisa sistemtica em laboratrios cl-
das em um matadouro no estado do Rio de Janeiro/RJ. Das trs
nicos e de alimentos. Diversos fatores, no entanto, dificultam
amostras, uma foi de carne bovina e as outras duas de fezes de
o isolamento e identificao de E. coli O157:H7 e consequen-
gado leiteiro. Este parece ter sido o primeiro relato de E. coli
temente, o seu envolvimento como patgenos alimentares no
O157:H7 isolado de gado leiteiro no Brasil89.
Brasil, entre eles esto as suas caractersticas bioqumicas dis-
Em 2003, outro estudo foi realizado a fim de investigar a presen- tintas, a capacidade deste microrganismo de causar surtos mes-
a de E. coli O157:H7 em vegetais normalmente consumidos crus mo estando presente em baixas quantidades no alimento. Alm
no Brasil. Foram analisadas 869 amostras de vegetais, no entan- destes fatores, contribui tambm o fato deste microrganismo
to, no foi detectada a presena de E. coli O157:H7 .73 no ser pesquisado de maneira adequada, ou mesmo sequer
ser pesquisado, visto que a legislao brasileira94 no exige a
Em 2005, pesquisadores analisaram 153 amostras de fezes bo- pesquisa rotineira desse patgeno em alimentos envolvidos em
vinas e encontraram 202 cepas de STEC, dentre elas duas de E. surtos alimentares.
coli O157:H793.
Mtodos de Deteco
Em outro estudo, foram analisadas 473 cepas de E. coli isoladas
de leite, gua e fezes de bovinos leiteiros, a fim de caracterizar Embora no existam limites microbiolgicos estabelecidos
os principais fatores de virulncia dessas cepas. Entre as cepas, para E. coli O157:H7 na legislao brasileira94, a presena de
duas isoladas de fezes, foram positivas para E. coli O157:H791. 1 a 10 UFC/g pode ser capaz de causar doena no homem e,

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Paula CMD et al. E. coli O157:H7

desse modo, no deve ser permitida a sua presena em nenhuma Numerosos mtodos alternativos quantitativos e qualitativos
amostra de alimento (ausncia em 25g ou 25ml). A sensibilida- esto disponveis visando melhorar a eficincia na determinao
de e especificidade do mtodo so particularmente importantes de microrganismos patognicos em alimentos95, incluindo a E.
quando se analisam alimentos, principalmente para microrga- coli O157:H7. Um destes mtodos o Sistema VIDAS BioM-
nismos como E. coli O157:H7, para o qual a dose infectante rieux S.A. que consiste em um ensaio automatizado qualitativo
bastante baixa23,95. para deteco de patgenos em alimentos, baseado no mtodo
ELISA. O equipamento detecta por meio do uso do kit comercial
Em funo das caractersticas de E. coli O157:H7, estas no so
VIDAS ECO O157, a presena de E. coli O157, atravs de uma
detectadas nas anlises de Coliformes Termotolerantes, pelo
reao antgeno-anticorpo. Entretanto, para que esse resultado
mtodo do Nmero Mais Provvel (NMP), que utiliza a fermenta-
seja confirmado necessrio o isolamento do microrganismo,
o da lactose a 44,5C como caracterstica confirmativa, nem
pelo mtodo convencional107.
nas anlises diretas de E. coli, utilizando substratos para a enzi-
ma -glicuronidase43,43. Nos ltimos anos, mtodos moleculares que compreendem um
conjunto de tcnicas e reagentes capazes de interagir quimi-
Os mtodos convencionais para deteco de E. coli O157:H7
camente com as molculas de DNA ou de RNA do genoma mi-
necessitam de um enriquecimento inicial para que os micror-
crobiano foram desenvolvidos a fim de complementar tcnicas
ganismos recuperem-se e multipliquem-se at alcanar uma
clssicas e permitir identificaes mais rpidas, sensveis e es-
concentrao minima para a deteco. Em seguida, realizado
pecficas que os ensaios microbiolgicos ou imunolgicos108,72.
o isolamento a partir de meios seletivos, com base em diferen-
Estas tcnicas esto adaptadas principalmente para a deteco
as fenotpicas como a incapacidade de fermentar o sorbitol em
dos sorotipos virulentos conhecidos por causar doenas humanas
gar McConkey96. Aps a obteno das colnias tpicas, uma s-
como a O157:H7. Neste caso, a maioria dos mtodos tem como
rie de testes bioqumicos e sorolgicos so aplicados, a fim de
alvo especfico o gene rfb O157 de O157108.
identificar E. coli O157:H797,19. Os mtodos convencionais, embo-
ra confiveis e eficientes, so bastante trabalhos e demorados, Um dos mtodos moleculares utilizados tcnica da Reao em
levando de 5 a 7 dias para a obteno dos resultados e, alm Cadeia da Polimerase PCR, a qual se baseia na polimerizao de
disso, detectam apenas clulas viveis98,19. Outra desvantagem DNA em cadeia realizada in vitro. um mtodo de amplificao,
do mtodo clssico a possibilidade de ocorrncia de falsos po- onde so criadas mltiplas cpias de DNA, por replicao enzi-
sitivos, em gar MacConkey Sorbitol, uma vez que E. hermannii mtica, sem necessitar de um organismo vivo110. Uma vantagem
sorbitol negativa e aglutina em teste com anticorpo O157 de da PCR a possibilidade de investigar simultaneamente vrios
E. coli e pode ser isolada de fezes e alimentos, causando erros genes e a possibilidade de diferenciar os diferentes tipos de Stx.
de diagnstico99,100. A principal desvantagem da PCR a incapacidade de distinguir
entre o DNA a partir de clulas viveis e no viveis podendo,
Franz et al. (2014)72 destacam a necessidade de melhorar os me-
portanto, estimar valores superiores de clulas vivas em relao
tdos para detectar cepas de STEC potencialmente virulentas, a
ao que realmente existe na amostra111,112.
fim de facilitar a investigao das mesmas ao longo da cadeia de
produo e distribuio de alimentos. Garcia et al. (2008) desta- A modernizao dos mtodos moleculares tem permitido uma com-
cam ainda a importncia da busca de novos mtodos eficazes e binao de tcnicas, capazes de tornar os testes muito mais rpi-
que reduzam o tempo para o resultado final95. dos. Entre as alternativas de diagnsticos rpidos baseados em m-
todos moleculares, esto o Bax System, o 3M Molecular Detection
A Separao Imunomagntica (IMS) um exemplo de mtodo
System (MDS) e o GeneDiscPlates Food Pathogen Detection.
sugerido para reduzir o tempo de anlise e melhorar a sensibi-
lidade da deteco de microrganismos patognicos100,101. A IMS O Bax System um mtodo capaz de detectar a presena/au-
descrita pela ISO 16654102 e consiste na utilizao de partculas sncia de E. coli O157:H7 em 25g de amostra. Este mtodo utiliza
superparamagnticas revestidas com anticorpos contra o agente PCR em tempo real e, assim como o Sistema VIDAS BioMrieux
patognico alvo, formando esferas imunomagnticas (Imbs) que S.A., possui um tempo de processamento inferior a uma hora.
podem ligar-se s bactrias alvo. Os Imbs formam um complexo
com a bactria, esta concentrada num volume menor e separa- Outro sistema que utiliza o mtodo molecular rpido o 3M
da da matriz atravs da exposio a um campo magntico. Molecular Detection System (MDS), que consiste em uma com-
binao de tecnologias, envolvendo amplificao isotrmica de
A IMS pode reduzir significativamente o tempo de deteco, me- DNA com deteco por bioluminescncia em tempo real. O 3M
lhorar a sensibilidade e eliminar a interferncia de matrizes ali- MDS um equipamento compacto capaz de identificar atravs
mentares, melhorando, assim, estratgias de deteco de pat- do uso de kits especficos Salmonella spp. Listeria spp. e E. coli
genos de origem alimentar103,104,105,106. Esta tcnica considerada O157:H7, em um mesmo teste113. Cada kit de teste utiliza a mes-
o mtodo principal na etapa inicial no de deteco de E. coli ma interface de software e o mesmo protocolo de extrao de
O157:H7 em amostras de alimentos, sendo utilizado tanto nos DNA. A anlise ao todo dura cerca de 1,5h.
laboratrios onde a pesquisa de E. coli O157:H7 j realizada
como rotina, quanto nas pesquisas cientficas realizadas no Brasil Outro equipamento que utiliza anlise por PCR em tempo
e em diversos paises. real o GeneDiscPlates Food Pathogen Detection, da Pall.

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Paula CMD et al. E. coli O157:H7

O GeneDisc um sistema que permite deteco de EHEC, O desenvolvimento de mtodos de deteco cada vez mais r-
E. coli O157, Salmonella spp., Listeria spp. e Listeria mono- pidos e sensveis tem auxiliado na identificao mais frequente
cytogenes. O equipamento utiliza software e kit de extrao de isolados de E. coli O157:H7 de origem clnica, ambiental e
prprio. O limite de deteco do aparelho de 1 bactria de alimentos no Brasil. Os dados obtidos indicam que, apesar da
vivel em 25g de amostra de alimento e a anlise dura por baixa incidncia de isolamentos desse microrganismo em relao
volta de 60 minutos referentes ao tempo do ciclo de PCR 114. a outros patgenos alimentares, considerando a severidade das
De modo geral, o tempo gasto por estes equipamentos que enfermidades causadas por ele, este deve ser considerado um
utilizam mtodos moleculares varia de uma a, no mximo, importante contaminante alimentar no Brasil.
duas horas. No caso da E. coli O157:H7, no entanto, alm
A adoo de medidas preventivas como pasteurizao do leite,
desse tempo, h sempre a necessidade de incubao prvia
clorao da gua de abastecimento, higienizao de vegetais
da amostra por no mnimo 18h, tempo necessrio para o en- consumidos crus e cozimento adequado dos alimentos, em es-
riquecimento da amostra. Reduzir ou eliminar esse tempo pecial produtos crneos, a fim de evitar a contaminao, so
de incubao tem sido o desafio de muitos pesquisadores, fundamentais. Alm disso, estratgias para diagnstico rpido
pois, quanto mais rpida for a identificao desse patgeno, em caso de surtos devem ser adotadas em laboratrios de micro-
mais rapidamente ocorrer a adoo de medidas preventivas biologia das reas clnicas e de alimentos do Brasil.
e /ou de conteno.
A preveno e o controle da propagao global de DTA requer
vigilncia contnua, para antecipar o surgimento de surtos cau-
Concluso sados por E. coli O157:H7 e outros novos patgenos emergente
ou reemergentes e, assim, traar estratgias que diminuam o
E. coli o157:H7 um importate patgeno emergente em
risco de contaminao dos alimentos distribudos mundialmente.
diversos pases como Estados Unidos e Argentina. No Brasil,
apesar de no existirem dados sistematizados sobre a Neste sentido, estudos epidemiolgicos para avaliao de risco,
investigao de E. coli o157:H7 nem sobre a SHU e de haver bem como estudos para caracterizao de isolados de E. coli
apenas uma refern-cia de envolvimento deste microrganismo O157:H7 encontrados no Brasil, so importantes, pois, atravs
em surtos alimenta-res, deve-se aumentar a vigilncia, uma dos dados obtidos, ser possvel conhecer a incidncia e a distri-
vez que existem vrios registros de casos clnicos de SHU e buio do patgeno, seus possveis reservatrios e estabelecer
ocorrncia cada vez mais frequente de isolamentos deste pontos de referncia para a implantao de um sistema adequa-
patgeno, a partir de amostras de alimentos e de reservatrios do de vigilncia a fim de prevenir problemas de sade pblica.
animais.

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