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FUNDAMENTO TERICO DE LABORATORIO DE BIOLOGA 2014

FUNDAMENTO TERICO
LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL
I. CONTENIDO TEMTICO:

1. BIOSEGURIDAD
2. MATERIAL DE LABORATORIO
3. MICROSCPIO COMPUESTO
4. COMPONENTES QUMICOS MOLECULARES
5. DETERMINACIN DEL pH
6. ESTADO COLOIDAL
7. ACCIONES DE SUPERFICIE
8. CLULA
9. ORGANELOS
10. MITOSIS

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FUNDAMENTO TERICO
LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL

NDICE

Pg.

o BIOSEGURIDAD 04

o MATERIAL DE LABORATORIO 09

o MICROSCPIO COMPUESTO 12

o COMPONENTES QUMICOS MOLECULARES 17

o DETERMINACIN DEL pH 22

o ESTADO COLOIDAL 25

o ACCIONES DE SUPERFICIE 28

o CLULA 31

o ORGANELOS 34

o MITOSIS 36

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INTRODUCCIN

El estudio de la Biologa, como una asignatura bsica, en la formacin del


estudiante universitario se desarrollar en forma terica y prctica.

En la parte prctica de esta asignatura, se ha tomado en consideracin el


desarrollo de las Gua de Prcticas de Biologa General la cual plantea, como
objetivo general, iniciar al estudiante en el campo de la investigacin en el rea
de Biologa.

Para lograr este objetivo se considera necesario que mediante el desarrollo de


las prcticas, el estudiante adquiera la comprensin y el conocimiento de los
principios fundamentales de la Biologa, as mismo adquiera competencias, los
cuales lo estimulen a desarrollar un Pensamiento Cientfico, pieza clave en la
investigacin cientfica.

Considerando que la Gua de Prcticas, est dirigida a los estudiantes del


primer ciclo de estudios superiores, el desarrollo de la misma, permitir con
los procedimientos llevados a cabo en el laboratorio, la comprensin y
adquisicin de los conocimientos de los trminos bsicos de la Biologa.

La gua est orientada a estimular el desarrollo del pensamiento cientfico, as


mismo incentivar la capacidad de crtica y autocrtica y la promocin del trabajo
en equipo, con la finalidad de que los estudiantes desarrollen capacidades que
les permitan Identificar, analizar, evaluar, planear y proponer soluciones a los
problemas de la realidad, procurando siempre el desarrollo del Mtodo
Cientfico como elemento fundamental de la investigacin, en vas de formar
Investigadores altamente calificados en los distintos campos de las ciencias de la
salud.

Por lo manifestado, este libro es un complemento de las guas de prctica, el


cual permitir el mejor entendimiento y logro de los objetivos planteados.

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BIOSEGURIDAD

Conjunto de medidas preventivas reconocidas internacionalmente orientadas


a proteger la salud y la seguridad del personal y su entorno.
Complementariamente se incluye normas contra riesgos producidos por agentes
fsicos, qumicos y mecnicos. Modernamente se incorporan tambin las
acciones o medidas de seguridad requeridas para minimizar los riesgos
derivados del manejo de un organismo modificado genticamente (OMG), sus
derivados o productos que los contengan, y uso de la tecnologa del ADN
recombinante (ingeniera gentica) y otras tcnicas moleculares ms recientes.

El trabajo en Laboratorio, requiere la observacin de una serie de normas de


seguridad que eviten posibles accidentes debido al desconocimiento o a una
posible negligencia.
Las referidas normas tienen por finalidad:
Proteger al estudiante, contra la exposicin innecesaria e injustificada a
agentes contaminantes.
Evitar la contaminacin de las muestras, que pueden echar a perder el trabajo
del laboratorio con resultados falsos.
Mantener la seguridad dentro y fuera del laboratorio.

CLASIFICACIN DE MICROORGANISMOS POR GRUPOS DE


RIESGO PARA EL TRABAJO DE LABORATORIO.

Grupo de Riesgo I.
o Riesgo individual y poblacional, escaso o nulo.
o Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar
enfermedades en el ser humano o los animales.

Grupo de Riesgo II.


o Riesgo individual moderado.
o Riesgo poblacional bajo.
o Agentes patgenos que pueden provocar enfermedades humanas o
animales, pero que tienen pocas probabilidades de representar un riesgo
grave para el personal de laboratorio, la poblacin, o el medio ambiente.
o La exposicin en el laboratorio puede provocar una infeccin grave, pero
existen medidas preventivas y teraputicas eficaces y el riesgo de
propagacin es limitado

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Grupo de Riesgo III.


o Riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo.
o Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades humanas o
animales graves, pero que ordinariamente no se propagan de un
individuo a otro.
o Existen medidas preventivas y teraputicas eficaces.

Grupo de Riesgo IV.


o Riesgo individual y poblacional elevado.
o Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser
humano o en animales y que se transmiten fcilmente de un individuo a
otro, directa o indirectamente. Normalmente no existen medidas
preventivas y teraputicas eficaces.

BARRERAS DE CONTENCION

Los laboratorios presentan diversas barreras de contencin que previenen el


escape y dispersin de agentes biolgicos de riesgo.
Barrera Primaria:
Es aquella que protege al personal y al ambiente inmediato del agente de riesgo
(vestimenta de uso exclusivo, cabina de bioseguridad y equipos provistos de
dispositivos de seguridad).
Barrera Secundaria:
Es aquella que protege el ambiente externo contra los agentes de riesgo (diseo
del laboratorio e implementacin de equipos de seguridad de acuerdo al nivel de
Bioseguridad).
Barrera Microbiolgica:

Es un dispositivo o sistema que evita o limita la migracin de microorganismos


entre los espacios situados a ambos lados del mismo y permite controlar la
concentracin de microorganismos en el ambiente, dentro de lmites prefijados.
Tiene como objetivo proteger al operador y al proceso.

Barrera Microbiolgica Parcial.

En este tipo de barrera se recomiendan Prefiltros, Filtros HEPA (Filtros de alta


eficiencia para el control de partculas en suspensin) as como cabinas de
bioseguridad clase I o II, lo cual depender del tipo de trabajo que se efecta en
un determinado laboratorio.

Barrera Microbiolgica Absoluta.

Dispositivo o sistema hermtico, a prueba de filtraciones de aire o gas, que evita


en forma total la migracin de microorganismos entre el ambiente confinado
por la barrera y el ambiente exterior de la misma. La barrera microbiolgica
absoluta puede confinar al producto o proceso, dejando al operador fuera de la

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misma o viceversa. En este caso se recomienda una cabina de bioseguridad de


tipo III.

Barrera Qumica:

Son dispositivos o sistemas que protegen al operador del contacto con


substancias irritantes, nocivas, txicas, corrosivas, lquidos inflamables,
sustancias productoras de fuego, agentes oxidantes y sustancias explosivas.

En este caso se recomiendan una cabina de seguridad qumica.

Barrera Fsica:

Son dispositivos o sistemas de proteccin individual o colectiva que protegen


contra las radiaciones ionizantes, no ionizantes, ruidos, carga calrica,
quemaduras y vibraciones excesivas.

NIVELES DE BIOSEGURIDAD

De acuerdo con el nivel de riesgo, el tipo de laboratorio, la barrera de contencin


requerida, los procedimientos y tcnicas a usar, se han establecido los siguientes
niveles de Bioseguridad.

Nivel de Bioseguridad I:
Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en un laboratorio
bsico, por personal adiestrado en los procedimientos que se ejecutan en l.
En este nivel se trabaja con agentes clasificados en el Grupo de riesgo I por
presentar un peligro mnimo para el personal del laboratorio y para el ambiente.
En el nivel de Bioseguridad I no se requiere equipo especial ni un diseo
especfico de las instalaciones. El personal de estos laboratorios es generalmente
supervisado por un cientfico con entrenamiento en microbiologa.

Nivel de Bioseguridad II:


Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en un laboratorio
bsico, por personal adiestrado en el manejo de agentes de riesgo del grupo II.
Es similar al nivel I y en l se manejan agentes de peligro moderado hacia el
personal y el ambiente, pero difiere del nivel I en las siguientes caractersticas:
1. El personal de laboratorio tiene entrenamiento especfico en el manejo de
agentes patgenos.
2. El acceso al laboratorio es restringido cuando se est realizando algn
trabajo.
3. Tener mxima precaucion con instrumentos punzo cortantes contaminados.
4. Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes o aerosoles
se llevan a cabo en cabinas de trabajo microbiolgico.

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Nivel de Bioseguridad III:


Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en el laboratorio de
contencin. El personal debe contar con adiestramiento especfico para el
manejo de agentes de alto riesgo clasificados en el grupo de riesgo III. En el
laboratorio se realiza trabajo con agentes que pueden causar un dao serio y
potencialmente mortal como resultado de la inhalacin o exposicin a los
mismos. El laboratorio cuenta con un diseo y caractersticas especiales
tendientes a proteger al operador y al ambiente.
Todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de
proteccin siguiendo protocolos rigurosos. Los laboratorios se mantienen con
una presin de aire negativa, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos
escapen al ambiente.

Nivel de Bioseguridad IV:


Es aquel que corresponde a las actividades desarrolladas en el laboratorio de
contencin mxima. Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes
biolgicos clasificados en el grupo de riesgo IV por representar un alto riesgo
individual de contagio y que adems son un riesgo para la vida. Los agentes
nuevos que presentan caractersticas antignicas, patognicas u otras similares
a agentes de nivel III y IV son confinados a nivel IV hasta que exista suficiente
informacin cientfica para establecer a cual grupo de riesgo pertenecen.
El personal que trabaja en los laboratorios de nivel IV tiene entrenamiento
especfico y extensivo en el manejo de agentes infecciosos, y cuenta con
entrenamiento para trabajar en el ambiente estril y controlado.
El laboratorio cuenta con un diseo y caractersticas especiales tendientes a
proteger al operador y al ambiente.
Todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de
proteccin de caractersticas superiores a las exigidas para el trabajo en un
laboratorio de nivel III. Los trajes estn diseados para cubrir la totalidad del
cuerpo, presentan un sistema de respiracin individual asociado y una leve
sobrepresin interna para evitar as la entrada accidental de partculas
infecciosas. Los laboratorios se mantienen con una presin de aire negativa, lo
cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente.

TIPOS DE LABORATORIOS.

En relacin con el grado de riesgo los laboratorios combinan las caractersticas


de diseo, construccin, medios de contencin, equipo, prcticas y
procedimientos de operacin necesarios para trabajar con agentes patgenos de
los distintos grupos de riesgo.

De esta manera los laboratorios se clasifican en 3 categoras:


Laboratorio Bsico

Dividido en dos grupos, el de nivel de bioseguridad 1; y el de nivel de

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bioseguridad 2.
Laboratorio de Contencin
Con nivel de bioseguridad 3.

Laboratorio de Contencin Mxima


Con nivel de bioseguridad 4.

Fig. 01. Laboratorio Bsico

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o http://es.scribd.com/doc/58053626/BIOSEGURIDAD-MINSA
o http://www.diresacusco.gob.pe/saludindidual/servicios/Normas/Bioseguridad%2
0y%20Laboratorio/Manual%20de%20Bioseguridad%20PRONAHEBAS.pdf

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MATERIALES Y EQUIPOS
DE LABORATORIO
MATERIAL DE VIDRIO:
Generalmente se utilizan para contener, verter y medir soluciones lquidas.
Algunos son de elevada precisin en sus medidas y otros son menos precisos, la
eleccin depender del uso que se requiera.

Entre los ms importantes estn:

Tubos de ensayo: Pequeo tubo cilndrico de vidrio con una punta abierta
(que puede poseer una tapa) y la otra cerrada y redondeada, que se utiliza para
contener pequeas muestras lquidas o slidas, aunque pueden tener otras
fases, como realizar reacciones qumicas en pequea escala, as como exponer a
temperatura el mismo contenedor.

Pipeta: Son instrumentos de vidrio que se usan para medir los lquidos con
mayor exactitud. Estas pueden ser aforadas (miden un volumen exacto) o
parciales (miden un volumen aproximado).

Vasos de Precipitados: Usado como recipiente y tambin para obtener


precipitados. Son resistentes al calor.

Probeta: Instrumento de laboratorio de vidrio o plstico, que se emplea para


medir el volumen de los lquidos. Estas miden volmenes aproximados.

Bureta: Material cilndrico de vidrio graduado, alargado, que termina en una


llave para poder controlar el flujo del lquido que se va a medir.
Se usa en operaciones en que se necesita medir volmenes con gran exactitud.

Baln: Es un recipiente de vidrio resistente al calor, que sirve para preparar


soluciones o reaccin qumica.

Fiola: Tambin llamados "matraces aforados


Son recipientes de vidrio de cuello muy largo y angosto, en el cual tienen una
marca que seala un volumen exacto a una temperatura determinada que est
grabada en el mismo recipiente.
Se emplean en operaciones de anlisis qumico cuantitativo, para preparar
soluciones de concentraciones definidas.

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Matraz Erlen Meyer: Material de vidrio que se emplea en el laboratorio para


calentar lquidos o preparar soluciones.

Cpsula (Placa) de Petri: Son utilizadas en bioqumica para llevar a cabo


cultivos de microorganismos.

Porta objetos: Es una fina placa de cristal sobre el cual se disponen objetos
para su examen microscpico. Sus dimensiones tpicas son de 75 mm x 25 mm.

Cubre objetos: Es una fina hoja de material transparente de planta cuadrada


(normalmente 20mm x 20mm) o rectangular (de 20 mm x 40 mm
habitualmente). Se coloca sobre un objeto que va a ser observado bajo
microscopio, el cual se suele encontrar sobre un portaobjetos.

Tubo capilar: Son pequeos tubos de vidrio, muy estrechos, cerrados por un
extremo. Algunos contienen anticoagulante heparina. Se utilizan para
extracciones de sangre de bajos volmenes.

MATERIALES Y EQUIPO DE CALOR Y FRO

Estufas. Permiten el calentamiento y desecacin de sustancias. Otras se


utilizan como estufas de incubacin para estudios microbiolgicos.

Horno Pasteur: Horno de aire caliente, tambin llamados horno de calor


seco, dispositivo elctrico utilizado para esterilizacin, Puede funcionar con
temperaturas comprendidas entre 50 y 300 C.

Autoclave: Es un equipo de paredes gruesas y cierre hermtico, en el que se


realizan reacciones a altas presiones y temperaturas. Se utiliza para esterilizar
materiales y preparados de microbiologa.

Bao Termorregulado: Se utiliza para calentar a una temperatura no mayor


que el punto de ebullicin del agua. Es un bao de mara metlico.

Mechero: Es un instrumento de vidrio o metal, destinado a proporcionar


combustin. Los ms usados son los de alcohol y los de gas, principalmente, el
de Bunsen.
Los mecheros Bunsen constan de un tubo vertical, enroscado en su parte baja a
un pie por donde entra el gas. Mediante un aro metlico mvil se regula la
entrada de aire. La mezcla se enciende por la parte superior.

Refrigerante: Se utiliza para condensar el vapor en las destilaciones. Para ello


se hace circular agua, en contracorriente, por la camisa exterior. Para ofrecer
una mayor superficie y aumentar el intercambio de calor, el vapor circula a
travs de unos ensanchamientos (bolas).

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MATERIALES DE MEDICIN DE TEMPERATURA, TIEMPO Y MASA


Termmetros: Se utilizan para medir la temperatura, de refrigeradores, baos
termorregulados, congeladores, temperatura ambiente, etc.
Ejm: Termmetros digitales
Balanza: Se utilizan para medir la masa de un compuesto.
Balanza digital
Cronmetros: Se utilizan para medir tiempos de las reacciones qumicas o de
algn proceso clnico.

OTROS MATERIALES Y EQUIPOS:


Centrfuga: Equipo que se utiliza para separar soluciones, generalmente en
una fase lquida o sobrenadante, que corresponde a la porcin superior de la
muestra, y una fase slida, tambin llamada sedimento o pellet, el que se
deposita al fondo del tubo.

Espectrofotmetro: Instrumento usado en el anlisis qumico, sirve para


medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma
magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o
reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los
laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o
espectrofotmetro de masa y visuales.

Tenciometro (pHmetro): Utilizado para medir el nivel de acidez de una de


una solucin.

Pizeta: Frasco cerrado con un tapn y un orificio de salida, por el que sale el
agua al presionar el frasco, usado para enjuagar el material de laboratorio.

Gradilla: Material de laboratorio de madera, metal o plstico, que se usa como


soporte de los tubos de ensayo, o tubos en general.

Mortero: Material de laboratorio de porcelana o de vidrio, que se usa para


moler o reducir el tamao de las sustancias (ejemplo medicamentos). Consta de
dos partes: el mazo y el mortero propiamente dicho.

Pinzas: Instrumento de laboratorio de madera o metal, que se usa para coger


objetos

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39593.pdf
o http://www.bing.com/search?q=materiales+de+laboratorio+pdf&go=Enviar+c
onsulta&qs=ds&form=QBRE
o http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractica1.p
df

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MICROSCPIO COMPUESTO
Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetiva.
Est conformado por tres sistemas:
o El Sistema Mecnico
Constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los
instrumentos a observar.
o El Sistema de Iluminacin
Comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que
producen las ranuras de luz.
o El sistema ptico
Comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los
objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel
subsecuente".
Parte mecnica del microscopio
Sostienen la parte ptica y de iluminacin
Comprende: Pie, tubo, revlver, asa, platina, carrier y tornillo micromtrico.

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene


por lo general forma de Y o bien es rectangular.

La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la


base por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinacin del
tubo para mejorar la captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el
tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

El tubo: tiene forma cilndrica. El tubo se encuentra en la parte superior de la


columna, enfoca el objeto mediante un sistema de cremalleras, las cuales
permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.

El tornillo macromtrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o


desciende el tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un
mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido
de la preparacin.

El tornillo micromtrico o microscopico: mediante el ajuste fino con


movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se
logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor
graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus
movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca el objeto que se va a


observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de
los rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso
permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante

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tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.

Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar el objeto. Se
encuentran en la platina.

El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los
objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan
en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.

Sistema ptico

Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de


lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo
proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe


a la cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar
la imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus
poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de
potencias mayores a 20X y otros que poseen una escala micromtrica; estos
ltimos tienen la finalidad de medir el tamao del objeto observado.

Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y


producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto,
se hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados
corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersin.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre
ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican
el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo,
si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el
objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65,
calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara
con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los
objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes.


Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de
cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en
contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se
distingue por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo
inferior o la palabra oil.

Sistema de Iluminacin

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera
que ilumine la preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la
manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de


tungsteno sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de
ella se sita un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un

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diafragma de campo, que permite controlar el dimetro de la parte de la


preparacin que queda iluminada, para evitar que exceda el campo de
observacin produciendo luces parsitas.

El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del


microscopio y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los
microscopios modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza
de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de
preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los
modelos ms modernos no poseen espejos sino una lmpara que cumple la
misma funcin que el espejo.

Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es


concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un
cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. El condensador
se sita debajo de la platina y su lente superior es generalmente planoconvexa,
quedando la cara superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan
objetivos de gran abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de
inmersin, que piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente superior y
la preparacin. La abertura numrica mxima del condensador debe ser al
menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su
poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un
sistema de cremallera mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos
de poca potencia.

Diafragma: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su


abertura para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular,
para aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si
se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico.

Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio

El haz luminoso procedente de la lmpara pasa directamente a travs del


diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el
condensador, la luz es concentrada sobre la preparacin a observar. El haz de
luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar al ocular, donde es
captado por el ojo del observador.

PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO

Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad


del microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos
prximos que pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados
dos puntos cuando su distancia es menor a una dcima de milmetro. En el
microscopio viene limitado por la longitud de onda de la radiacin empleada; en
el microscopio ptico, el poder separador mximo conseguido es de 0,2 dcimas
de micrmetro (la mitad de la longitud de onda de la luz azul), y en el
microscopio electrnico, el poder separador llega hasta 10 .

Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo


respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la
correccin de las aberraciones de las lentes utilizadas.
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Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin


entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto
quiere decir que si el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen
que estamos viendo es 100 veces mayor linealmente que el tamao real del
objeto (la superficie de la imagen ser 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para
calcular el aumento que est proporcionando un microscopio, basta multiplicar
los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo,
si estamos utilizando un objetivo de 45X y un ocular de 10X, la ampliacin con
que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X = 450X, lo cual quiere decir que
la imagen del objeto est ampliada 450 veces, tambin expresado como 450
dimetros.

CAMPO DEL MICROSCOPIO

Se denomina campo del microscopio al crculo visible que se observa a travs


del microscopio. Tambin podemos definirlo como la porcin del plano visible
observado a travs del microscopio.

Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo


es inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el
dimetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el
micrmetro, al que se har referencia en el siguiente punto.

MEDICIN A TRAVS DEL MICROSCOPIO

Muchas veces interesa al observador conocer el tamao real de los objetos o


microorganismos que est observando a travs del microscopio. Para estas
mediciones pueden utilizarse varios mtodos.

Mtodo de los micrmetros. Se utiliza para esto un micrmetro de platina o de


objetivo, que consiste en un portaobjetos en cuyo centro se halla una escala
graduada (de 2 mm de longitud), con separaciones, entre cada divisin, de una
centsima de milmetro.

Adems se utiliza un micrmetro ocular que lleva una escala graduada en


dcimas de milmetros. Se coloca el micrmetro objetivo sobre la platina y se
enfoca el microscopio hasta que las lneas de la escala graduada aparezcan
ntidas. Luego se hace superponer la escala del ocular y se toma como referencia
las primeras divisiones en que una lnea del micrmetro objetivo y una lnea del
micrmetro ocular coincidan o se superpongan exactamente.

Luego, por simple regla de tres, se calcula el valor en mieras de cada divisin
ocular. Veamos un ejemplo. Si 9 divisiones del micrmetro objetivo (0,09 mm)
equivalen a 30 divisiones del micrmetro ocular, cada divisin del ocular
equivaldr a: 0,09 mm/30 = 0,003 mm = 3 m

Quiere decir que para el objetivo calibrado y el ocular utilizado, cada divisin del
micrmetro ocular equivale a 3 m. Una vez obtenido este dato para cada
objetivo en la forma que hemos expuesto, teniendo el microscopio ocular
podran hacerse todas las mediciones que se deseen. Para medir, por ejemplo,
un Paramecium de una preparacin, procedemos as: haremos coincidir los

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extremos del microorganismo con las divisiones del micrmetro ocular. Si la


longitud del organismo es de 75 divisiones del micrmetro ocular, y cada
divisin equivale a 3 m, la longitud del Paramecium ser 75x3= 225 m.
Tambin se pueden efectuar mediciones en el microscopio con cmara clara y
utilizando una regla. En realidad, estas medidas no son tan exactas como
cuando se utilizan micrmetros por errores que se introducen superponiendo
imgenes.

MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO

El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que
pudieran daarlo. Mientras no est en uso debe guardarse en un estuche o
gabinete, o bien cubrirlo con una bolsa plstica o campana de vidrio.

Las partes mecnicas deben limpiarse con un pao suave; en algunos casos, ste
se puede humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de
cedro, parafina, etc. Que hayan cado sobre las citadas partes.

La limpieza de las partes pticas requiere precauciones especiales. Para ello


debe emplearse papel de ptico que expiden las casas distribuidoras de material
de laboratorio fotografa o utilizar un pao de algodn. Para el polvillo se
puede utilizar un perilla con pincel de pelo de camello. Nunca deben tocarse las
lentes del ocular, objetivo y condensador con los dedos; las huellas digitales
perjudican la visibilidad, y cuando se secan resulta trabajoso eliminarlas.

Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel de ptica,
envolviendo un palillo con algo de punta con una solucin de ter/alcohol (70-
30 %) y luego pasarlo por la superficie cuantas veces sea necesario. La limpieza
de la ptica ha de realizarse en espiral, desde el centro hacia el exterior. El aceite
de cedro que queda sobre la lente frontal del objetivo de inmersin debe
quitarse inmediatamente despus de finalizada la observacin. Para ello se
puede pasar el papel de ptica impregnado con una gota de xilol. En caso de
estar seco debe ponerse la zona a remojo con la solucin sealada.

Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la


platina y bajado hasta el tope; el condensador debe estar en su posicin ms
baja, para evitar que tropiece con alguno de los objetivos.

Gurdese en lugares libre de humedad.


http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_compuesto.

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.


o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs. Biolgicas. Cusco.
2001.
o http://www.youtube.com/watch?v=LXbWgRwXFPk.
o http://www.youtube.com/watch?v=zWlz7SJFQz8

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FUNDAMENTO TERICO DE LABORATORIO DE BIOLOGA 2014

COMPONENTES QUMICOS
MOLECULARES
La materia viva est constituida por complejos moleculares inorgnicos y
orgnicos.
Entre los inorgnicos consideramos al agua y sales minerales, y entre los
orgnicos, tenemos:
Carbohidratos: Monosacridos (glucosa, fructosa), disacridos (sacarosa),
polisacridos (almidn) as tambin lpidos, protenas, cidos nucleicos entre
otros.

Carbohidratos

Se clasifican como:

o Monosacridos o azucares simples, los cuales pueden tener de tres a siete


tomos de carbono en su estructura. La glucosa es el ejemplo ms conocido
de las hexosas (azcar de seis tomos de carbono).

o Disacridos o azucares dobles, los cuales estn constituido por dos


monosacridos, como por ejemplo la sacarosa que est conformada por una
glucosa unida a una fructosa.

o Polisacridos los cuales forman largas cadenas de monosacridos como es el


caso del almidn que se encuentran en los vegetales.

Lpidos

Son grupos heterogneos de compuestos que poseen una consistencia grasosa o


aceitosa, siendo ms o menos insolubles en agua y saludables en disolventes
orgnicos (como por ejemplo: ter, cloroformo, benceno, etc.).Entre los lpidos
de importancia biolgicas se encuentran las grasa neutras, fosfolipidos,
esteroides, carotinoides y ceras. Estas molculas son combustibles biolgicos
importantes, sirven de componentes estructurales de las membranas celulares y
algunas son importantes.

Los lpidos ms abundantes en los seres vivos son las grasas neutras. Ellos
producen ms doble de energa por gramo, que los carbohidratos por lo que son
una forma econmica de almacenar reservas alimenticias.

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Protenas

Molculas formadas bsicamente por los elementos carbono, hidrgeno,


oxgeno, nitrgeno y azufre. Consideradas como macromolculas que resultan
de la combinacin repetitiva de los 20 aminocidos naturales que vienen a ser
las unidades constituyentes establecindose entre estos el enlace covalente
denominado peptdico, estn formadas por una o ms cadenas polipeptdicas
unidas por puentes disulfuro que se establecen entre los aminocidos cistena, y
cistena, este puente tambin se establece en una misma cadena.

Las protenas no son molculas al azar sino son codificados por el gen, por lo
tanto presentan una composicin qumica definida, se conoce el nmero de
aminocidos, el orden secuencial en que se encuentran los aminocidos, peso
molecular.

Se caracteriza por su consistencia coloidal por lo tanto no atraviesan la


membrana celular, algunas son solubles en H2O, en soluciones salinas diluidas,
soluciones cidos bases diluidas, soluciones alcohlicas o insolubles en estos.

Desempean funciones fundamentales como la de ser constituyentes


estructurales de las membranas, antgenos, receptores de impulsos nerviosos y
de hormonas, protenas transportadoras, catalizadoras de diferentes procesos
metablicos, etc.

IDENTIFICACION DE MONOSACRIDOS

Reaccin o prueba de Benedict

Identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C


anomrico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones
alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la
solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.

El reactivo de Benedict consta de:

Sulfato cprico; Citrato de sodio; Carbonato Anhidro de Sodio.

Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion


cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del
grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa
como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O).

El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el azcar
en solucin forma un anillo de piransico o furansico.

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Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion
cprico en solucin.

En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz


de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en
un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un
intermediario enlico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico).

Los disacridos como la sacarosa (enlace (1 2)O) y la trehalosa (enlace


(11)O), no dan positivo puesto que sus OH del C anomricos estn siendo
utilizados en el enlace glucosdico.

En resumen, se habla de azcares reductores cuando tienen su OH del C


anomrico libre, y stos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.

En presencia de monosacridos (glucosa) se torna de color turquesa y en


presencia de sacarosa se torna de color naranja.

IDENTIFICACIN DEL ALMIDN


Almidn
El almidn est constituido por dos compuestos de diferente estructura:

o Amilosa: Est formada por -D-glucopiranosas unidas por centenares o


miles (normalmente de 300 a 3000 unidades de glucosa) mediante
enlaces -(1 4) en una cadena sin ramificar, o muy escasamente
ramificada mediante enlaces -(1 6) . Esta cadena adopta una
disposicin helicoidal y tiene seis monmeros por cada vuelta de hlice.
Suele constituir del 25 al 30 % del almidn.

o Amilopectina: Representa el 70-75 % restante. Tambin est formada por


-D-glucopiranosas, aunque en este caso conforma una cadena altamente
ramificada en la que hay uniones -(1 4), como se indic en el caso
anterior, y muchos enlaces -(1 6) que originan lugares de
ramificacin cada doce monmeros. Su peso molecular es muy elevado,
ya que cada molcula suele reunir de 2.000 a 200.000 unidades de
glucosa

Reaccin de Alcohol yodado

Cada 100 ml de solucin contiene:


Yodo 1 g; Yoduro de Potasio 1.1 g; Etanol Diluido c.s.

Reaccin o Prueba de Lugol

Solucin de Lugol: Es una disolucin de yodo molecular I2 y yoduro potsico KI


en agua destilada.

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Se utiliza esta disolucin como indicador en la prueba del yodo, que sirve para
identificar polisacridos como los almidones, glucgeno y ciertas dextrinas,
formando un complejo de inclusin termolbil que se caracteriza por presentar
distintos colores segn las ramificaciones que presente la molcula. El Lugol no
reacciona con azcares simples como la glucosa o la fructosa.

Estas sustancias forman complejos de adsorcin (complejos de transferencia de


carga) con el yodo.

En el caso de la amilosa, que posee conformacin helicoidal, se cree que el


intenso color azul sea resultante de la adsorcin del yodo en estas cadenas, y el
complejo yodo-amilopectina produce un color violceo.

Amilasa:
Denominada tambin sacarasa o ptialina
Es un enzima hidrolasa que tiene la funcin de catalizar la reaccin de
hidrlisis de los enlaces 1-4 del componente -amilasa al digerir el
glucgeno y el almidn para formar azcares simples. Se produce
principalmente en las glndulas salivales (sobre todo en las glndulas
partidas) y en el pncreas. Tiene actividad enzimtica a un pH de 7.

DISCRIMINACION DE LPIDOS

Reaccin Sudn III

Sudn III es un tinte diazo del tipo lisocromo (tinte soluble en grasa)

Lisoenzima que permite diferenciar las grasas neutras que se tien de color
amarillo, las grasas minerales son incoloras y las cidas adquieren una coloracin roja.

Reaccin Sudn IV

Llamado Escarlata R, se basa en que el colorante es ms soluble en lpidos que en el


propio disolvente en el que va contenido.

El Sudn IV es una coloracin progresiva, es decir, que a ms tiempo de exposicin al


colorante mayor es la intensidad de tincin.

DETERMINACION DE PROTEINAS

Reaccin Biuret
Detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o
ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida.

Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con
tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O64H2O). El reactivo, de color azul,
cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con
polipptidos de cadena corta.

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El Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio


alcalino necesario para que tenga lugar.

Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico que


permite determinar la concentracin de protenas de una muestra mediante
espectroscopa ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para
detectar el ion Cu2+).

La reaccin o prueba de Biuret es un mtodo que detecta la presencia de


compuestos con dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para todas las
protenas y pptidos cortos.

El reactivo del biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los
enlaces del pptido y cambia el color (lila)

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS

o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs. Biolgicas.


Cusco. 2001.
o http://es.wikipedia.org/wiki/Biuret
o http://es.wikipedia.org/wiki/Sud%C3%A1n_III
o http://es.wikipedia.org/wiki/Sud%C3%A1n_IV
o http://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_de_Benedict
o http://es.wikipedia.org/wiki/Lugol
o http://es.wikipedia.org/wiki/Amilasa

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DETERMINACIN DEL pH
El pH es una medida que expresa el grado de acidez o basicidad de una
solucin en una escala que vara entre 0 y 14

La acidez aumenta cuando el pH disminuye. Una solucin con un pH menor a 7


se dice que es cida, mientras que si es mayor a 7 se clasifica como bsica y una
solucin con pH 7 ser neutra.

El potencial de hidrgeno (pH) se define como el logaritmo negativo de la


concentracin molar (ms exactamente de la actividad molar) de los iones
hidrgeno.

PH=-Log [H+]
El valor de pH representa el menos logaritmo en base diez de la concentracin
(actividad) de iones hidrgeno [H+]. Como la escala es logartmica, la cada en
una unidad de pH es equivalente a un aumento de 10 veces en la concentracin
de H+.

Entonces, una muestra de agua con un pH de 5 tiene 10 veces ms H+ que una


de pH 6 y 100 veces ms que una de pH 7.

MEDICIN

El valor del pH se puede medir de forma precisa mediante un potencimetro,


tambin conocido como pH-metro

Mide la diferencia de potencial entre dos electrodos: un electrodo de referencia


(generalmente de plata/cloruro de plata) y un electrodo de vidrio que es
sensible al ion de hidrgeno.

El pH de una disolucin se puede medir tambin de manera aproximada


empleando indicadores: cidos o bases dbiles que presentan diferente color
segn el pH.

Generalmente se emplea papel indicador, que consiste en papel impregnado


con una mezcla de indicadores cualitativos para la determinacin del pH.

El indicador ms conocido es el papel de litmus o papel tornasol.

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Otros indicadores usuales son la fenolftalena y el naranja de metilo.

o A pesar de que muchos potencimetros tienen escalas con valores que van
desde 1 hasta 14, los valores de pH tambin pueden ser an menores que 1 o
an mayores que 14.
o A distintas temperaturas, el valor de pH neutro puede variar debido a la
constante de equilibrio del agua (kw).

SOLUCIN BFER

Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es


la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base
conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de
mantener estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades
relativamente pequeas de cidos o bases fuertes.

Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual depender de
la constante de equilibrio del cido o base empleado.

Sustancias Tampon: El par amonaco-catin amonio, cido actico-anin


acetato, anin carbonato-anin bicarbonato, cido ctrico-anin citrato o alguno
de los pares en la disociacin del cido fosfrico.

Sistemas tampn en el organismo

Inorgnicos:
Tampn bicarbonato:

CO2 + H2O H2CO3 HCO3 - + H+

Tampn fosfatico:

H2PO4- HPO42- + H+

Orgnicos:
Tampn hemoglobina:

HHbO2 HbO2- / HbH Hb- + H+

Aminocidos y protenas

Tampn bicarbonato

Compuesto por cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-) y el valor de su


pKa es de 6,1. Es el tampn ms importante de la sangre (pH=7,4), representa el
75 % de la capacidad buffer total de la sangre. Tambin est presente en el

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lquido intersticial. Es un tampn muy eficaz porque la relacin HCO3-/ H2CO3


es muy alta, lo que supone una alta capacidad para amortiguar los cidos.

Tampn fosfato

El tampn fosfato est compuesto por el hidrgeno fosfato (HPO42) y el


dihidrgeno fosfato (H2PO4-). Acta en el plasma y el lquido intersticial. Este
tampn tiene un pKa de 6,8, el cual est mucho ms cerca del pH plasmtico.

A pH fisiolgico de 7,4, la relacin HPO42/ H2PO4- es igual a 4. As, se trata de


un sistema eficaz para amortiguar cidos.

A nivel sanguneo, el tampn bicarbonato resulta ms til que el tampn fosfato


ya que este ltimo se encuentra en concentraciones bajas. Ahora bien, a nivel
intracelular, el tampn fosfato tiene concentraciones elevadas y es ms eficiente.

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs. Biolgicas. Cusco.


2001.
o http://www.bing.com/search?q=pH&form=CPNMHP&pc=CPDTDF&refig=f
281acbe26f94aa88a5f1e300b818542&pq=ph&sc=0-0&sp=-1&qs=n&sk=
o http://es.wikipedia.org/wiki/Buffer
o Wilson, K., and Walker, J. 2000. Principles and Techniques of practical
Biochemistry. Fifth edition. Cambridge University Press.

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ESTADO COLOIDAL
La materia viva es esencialmente un coloide

Coloide: sistema coloidal, suspensin coloidal o dispersin coloidal es un


sistema formado por dos o ms fases, principalmente: una continua,
normalmente fluida, y otra dispersa en forma de partculas; por lo general
slidas

La fase dispersa es la que se halla en menor proporcin. Normalmente la fase


continua es lquida, pero pueden encontrarse coloides cuyos componentes se
encuentran en otros estados de agregacin.

El nombre de coloide proviene de la raz griega kolas que significa que puede
pegarse. Este nombre que hace referencia a una de las principales propiedades
de los coloides: su tendencia espontnea a agregar o formar cogulos.

Los coloides se diferencian de las suspensiones qumicas, principalmente en el


tamao de las partculas de la fase dispersa. Las partculas en los coloides no
son visibles directamente, son visibles a nivel microscpico (entre 1 nm y 1 m),
y en las suspensiones qumicas s son visibles a nivel macroscpico (mayores de
1 m). Adems, al reposar, las fases de una suspensin qumica se separan,
mientras que las de un coloide no lo hacen. La suspensin qumica es filtrable,
mientras que el coloide no es filtrable.

En algunos casos las partculas son molculas muy grandes, como protenas. En
la fase acuosa, una molcula se pliega de tal manera que su parte hidroflica se
encuentra en el exterior, es decir la parte que puede formar interacciones con
molculas de agua a travs de fuerzas in-dipolo o fuerzas puente de hidrgeno
se mueven a la parte externa de la molcula. Los coloides pueden tener una
determinada viscosidad (la viscosidad es la resistencia interna que presenta un
fluido: lquido o gas, al movimiento relativo de sus molculas).

Coloides Lifobos: No posee afinidad para el medio dispersante o solvente


Coloides Lifilos: Posee afinidad para el solvente
Ejm: Hidrofilos e hidrfobos
Se presentan en dos formas:
a) Estado Sol.
b) Estado gel.

ESTADO DE SOL O SOLUCIONES COLOIDALES SOLES

El coloide es un fluido, las micelas se mueven independientemente, no es

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elstico ni viscoso; ejemplo: protoplasma celular, solucin de protenas.

PROPIEDADES DE LOS COLOIDES EN ESTADO DE SOL

Dilisis:
Proceso de purificacin de coloide, separando por smosis, de los cristaloides
mezclados.
Los cristaloides atraviesan la membrana a inversa de los coloides que no
difunden a travs de la membrana.
Movimiento Browniano:
Las micelas poseen un movimiento ms o menos rpido, completamente
catico, visible al ultramicroscopio, debido al choque de las molculas de la fase
dispersante contra los submicrones o micelas.
Efecto Tyndall.
Las micelas (sub micrones) difractan la luz; es decir; la dispersan en todas
direcciones y se iluminan como puntos brillantes, cuando un haz luminoso
atraviesa oblicuamente una solucin coloidal.
Electroforesis.
Son electronegativos: Almidn, rojo de Congo
Son electropositivas: Protaminas, histonas
Las micelas pueden absorber determinados iones conservando en su superficie
la Las micelas bajo la accin de un campo elctrico emigran hacia el electrodo de
signo opuesto. As las micelas electro negativas emigran al nodo y las
electropositivas al ctodo. Las micelas poseen una carga elctrica del mismo
signo, para un determinado coloide, encontrndose en repulsin elctrica.
carga elctrica de ellos.
La carga elctrica puede cambiar o variar de signo pasando por un punto neutro
conocido como punto isoelctrico donde el coloide es sumamente lbil o dbil.

ESTADO DE GEL O COLOIDE SLIDO

Se obtiene cuando la fase dispersa forma una masa compacta y se logra


mediante dos procesos:
a) Gelificacin.
Cuando se deja actuar temperaturas altas (mayores de 70C) aumentan de
volumen y viscosidad hasta solidificarse, son irreversibles.
b) Gelatinizacin.
Cuando se hace actuar temperaturas bajas (menores de 70C) para que se
solidifique, son reversibles.

DIVISIN DEL ESTADO DE GEL.

o Geles elsticos o Hidrfilos.Los que, cuando estn secos poseen gran


atraccin por el agua.
Se subdividen en: Reversibles (gelatina) o irreversibles (fibrina).

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o Geles no elsticos o hidrfobos. Que no absorben agua (gel de silicato).

PROPIEDADES DE LOS COLOIDES EN ESTADO DE GEL.

Imbibicin.
Propiedad por la cual los geles elsticos secos absorben agua.
Sineresis.
Algunos geles se contraen espontneamente y exudan un fluido en gotas o en
mayor cantidad, que determinan reduccin de volumen
Tixotropa.
Propiedad por la que el gel pasa a sol por accin mecnica, admitindose que
sta neutraliza la cohesin del gel.
Algunos fluidos pierden su resistencia, o disminiyen su viscosidad al
someterlos a una tensin cortante (cizalla) a medida que pasa el tiempo. La
palabra proviene del griego, "thixis" de tocar y "tropos", de convertir.

Ejm. el gel de miosina de los msculos se hace ms fluido por accin


mecnica, reasume su carcter al terminar la perturbacin.

Existen tambin fluidos que se comportan de la manera contraria, es decir,


tienden a solidificarse con la agitacin, y se denominan anti toxitrpicos o
reopcticos.

Coacervacin.
Estado intermedio entre gel y sol que resulta de la mutua accin entre
micelas de carga elctrica opuesta. Las micelas, por atraccin elctrica,
tienden a aglutinarse, pero por el agua de solvatacin, ellas slo se ponen en
contacto formndose como gotas lquidas dispersas.

En general, los coacervados se forman en grupos de solucin protenica en


agua; prcticamente pueden absorber todo lo que se encuentra en su medio;
sin embargo, no pueden aadir a su composicin otro coacervado, pues su
selectividad se los impide ya que una estructura cuaternaria absorbiendo a
otra rompera el equilibrio qumico; la gotita absorbe toda sustancia
orgnica e inclusive inorgnicas haciendo su selectividad mayor para la
continuacin de su expansin qumica; sin embargo, no tienen ninguna
estructura o modelo a seguir y el resultado es prcticamente al azar, en s, se
puede decir que entre los coacervados existen diferencias qumicas notables.

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o http://es.scribd.com/doc/223905279/Coloides-pdf
o http://es.wikipedia.org/wiki/Coloide
o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs. Biolgicas.
Cusco. 2001.

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ACCIONES DE SUPERFICIE
TENSIN SUPERFICIAL Y ADSORCIN
En la interfase de un sistema heterogneo actan las siguientes fuerzas:
Tensin Superficial y Adsorcin.

Interfase
Es la porcin en contacto entre dos fases no miscibles (lquido-gas, gas-
aceite, lquido-lquido, slido-lquido).

TENSIN SUPERFICIAL

Es la propiedad mecnica de la interfase lquido-vapor, la cual se comporta


como una membrana tensa, resistente y elstica, que se retrae constantemente,
para reducir al mnimo su rea. La causa de la tensin superficial es la atraccin
mutua de las molculas superficiales o su cohesin, soportan una atraccin
interna que no est equilibrada por una fuerza contraria. La tensin superficial
hace que los lquidos sustrados a la accin de la gravedad, adopten la forma de
una esfera (cuerpo de superficie mnima); ejemplo: una gota de aceite en agua
se aprecia la forma esfrica.

Las clulas en un medio lquido adquieren la forma esfrica u ovalada como las
clulas sanguneas. Las gotas lquidas que salen a travs de un tubo capilar,
adoptan de forma esfrica, debido a que todas las molculas de la interfase son
igualmente atradas hacia el centro. La tensin superficial es la causa de los
fenmenos capilares; ejemplo: la formacin de menisco en la superficie de un
lquido en recipiente cilndrico. La tensin existe en todo estado lquido en
cualquier punto de la superficie y purgan un papel importante en los
intercambios que se producen en el protoplasma. La membrana fundamental de
la clula es producto de la tensin superficial del protoplasma.

La significacin fundamental de las superficies estriba en que sus fuerzas


especiales, existen como energa libre y son capaces de afectar a la forma, a los
movimientos y a las reacciones qumicas delas interfases.

La existencia de la energa bajo la forma de tensin superficial, se manifiesta


por la flotacin en el agua de partculas pequeas como tierra seca o azufre en
polvo.

Clases de tensin superficial en un lquido: Se divide en:

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a) El coeficiente de tensin superficial absolutas, es el nmero de dinas


aplicadas por centmetro de longitud, rompe la pelcula de tensin superficial.
Dicho coeficiente a 20 C para el agua destilada vale 73 dinas/cm, para el
alcohol etlico 22 dinas/cm, y para el ter 16 dinas/cm. El agua es el lquido de
importancia biolgica, que tiene ms elevada tensin superficial y por eso no se
deja atravesar por la flor de azufre.

b) La tensin superficial relativa se mide por comparacin con la del agua


destilada.

La tensin superficial de un lquido disminuye con el incremento de


temperatura.

*Sustancias tensoactivas: llamadas tambin Battonas, son las que disminuyen


la tensin superficial de los lquidos. Dichas sustancias son cuerpos orgnicos de
inters biolgico: alcoholes, cidos grasos, sales biliares, protenas, jabones, etc.

Sustancias Hipstonas: son las que elevan la tensin superficial de los lquidos y
estn representados por sales inorgnicas, la ms importante es el cloruro de
sodio, su accin es de dbil intensidad solo aumenta en 2% el valor de la tensin
superficial.

MEDIDA DE LA TENSIN SUPERFICIAL DE UN LQUIDO.

Mtodos Cuantitativos.
Son:
o Mtodo del estalagmmetro de Traube.
o Mtodo capilar.
o Mtodo de la balanza torsin.
Mtodos cualitativos:
Son:
o Mtodo de la flor de azufre: se basa en la penetracin de la flor de azufre a
travs de la pelcula de tensin superficial.

Flor de azufre
Azufre en polvo, este no metal tiene un color amarillento fuerte,
amarronado o anaranjado y arde con llama de color azul, desprendiendo
dixido de azufre, insoluble en agua.

ADSORCIN

La adsorcin es un proceso mediante el cual se extrae materia de una fase y se


concentra sobre la superficie de otra fase (generalmente slida). Por ello se
considera como un fenmeno subsuperficial.
La sustancia que se concentra en la superficie o se adsorbe se llama "adsorbato"
y la fase adsorbente se llama "adsorbente".

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Por contra, la absorcin es un proceso en el cual las molculas o tomos de una


fase interpenetran casi uniformemente en los de otra fase constituyndose una
"solucin" con esta segunda.
La adsorcin est relacionada con la tensin superficial, pues segn la ley de
Gibbs, las sustancias tensoactivas son las ms concentradas en la interfase.
La adsorcin est muy desarrollada en todos los sistemas que poseen una gran
superficie especfica: soluciones coloidales y suspensiones.

CLASES DE ADSORCIN:

1. Adsorcin Mecnica; interviene como fuerza adhesiva, la tensin superficial


de la interfase.
2. Adsorcin elctrica; interviene la fuerza atractiva entre las cargas de la
interfase y de las partculas.
La adsorcin es independiente del paso del adsorbente y est en relacin con su
superficie especfica, ejemplo el carbn animal tiene gran superficie y es un
poderoso adsorbente.
o La adsorcin es un proceso reversible.
Un compuesto ya adsorbido, puede ser desplazado por una sustancia ms
tensoactiva.
o La adsorcin decrece con el aumento de temperatura.
Las sustancias ms tensoactivas son las ms adsorbidas (ley de Gibbs).
o La adsorcin se acompaa de liberacin de calor, lo cual indica la gran
atraccin que hay entre la interfase y la sustancia adsorbida.

*Adsorcin-fenmeno de superficie.

* Absorcin-fenmeno de volumen.

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o http://es.scribd.com/doc/231887951/Tension-Superficial-pdf
o http://www.bing.com/search?q=adsorcion+pdf&go=Enviar+consulta
&qs=ds&form=QBRE
o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs.
Biolgicas. Cusco. 2001.

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CLULA
Se define a la clula como la unidad gentica morfolgica y funcional de todo ser vivo.
Todas las clulas estn rodeadas de una envoltura (que puede ser una bicapa lipdica
desnuda, en clulas animales; una pared de polisacrido, en hongos y vegetales; una
membrana externa y otros elementos que definen una pared compleja, en bacterias
Gram negativas; una pared de peptidoglicano, en bacterias Gram positivas; o una pared
de variada composicin, en arqueas) que las separa y comunica con el exterior, que
controla los movimientos celulares y que mantiene el potencial de membrana.
El citosol, forma la mayor parte del volumen celular.
La estructura se automantiene activamente mediante el metabolismo, asegurndose la
coordinacin de todos los elementos celulares y su perpetuacin por replicacin a travs
de un genoma codificado por cidos nucleicos.

Existen dos grandes tipos celulares: las procariotas (que comprenden las
clulas de arqueas y bacterias) y las eucariotas (divididas tradicionalmente en
animales y vegetales, si bien se incluyen adems hongos y protistas, que
tambin tienen clulas con propiedades caractersticas).

Las clulas procariotas son pequeas y menos complejas que las eucariotas.
Contienen ribosomas pero carecen de sistemas de endomembranas (esto es,
orgnulos delimitados por membranas biolgicas, como puede ser el ncleo
celular).
La estructura de la clula vara dependiendo de la situacin taxonmica del ser
vivo: de este modo, las clulas vegetales difieren de las animales, as como de las
de los hongos. Por ejemplo, las clulas animales carecen de pared celular, son
muy variables, no tiene plastos, puede tener vacuolas pero no son muy grandes
y presentan centrolos (que son agregados de microtbulos cilndricos que
contribuyen a la formacin de los cilios y los flagelos y facilitan la divisin
celular). Las clulas de los vegetales, por su lado, presentan una pared celular
compuesta principalmente de celulosa, disponen de plastos como cloroplastos
(orgnulo capaz de realizar la fotosntesis), cromoplastos (orgnulos que
acumulan pigmentos) o leucoplastos (orgnulos que acumulan el almidn
fabricado en la fotosntesis), poseen vacuolas de gran tamao que acumulan
sustancias de reserva o de desecho producidas por la clula y finalmente
cuentan tambin con plasmodesmos, que son conexiones citoplasmticas que
permiten la circulacin directa de las sustancias del citoplasma de una clula a
otra, con continuidad de sus membranas plasmticas

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.


o http://es.wikipedia.org/wiki/C%c3%a9lula
o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs. Biolgicas.
Cusco. 2001.

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PERMEABILIDAD DE MEMBRANA
Difusin
Se denomina difusin simple al proceso por el cual se produce un flujo neto de
molculas a travs de una membrana permeable sin que exista un aporte
externo de energa debido a que su principal fuerza impulsora es el aumento de
la entropa total del sistema.
En este proceso el desplazamiento de las molculas se produce siguiendo el
gradiente de concentracin, las molculas atraviesan la membrana desde el
medio donde se encuentran en mayor concentracin, hacia el medio donde se
encuentran en menor concentracin.

El proceso de difusin simple es de vital importancia para el transporte de


molculas pequeas a travs de las membranas celulares. Es el nico
mecanismo por el cual el oxgeno ingresa a las clulas que lo utilizan como
aceptor final de electrones en la cadena respiratoria y uno de los principales
mecanismos de regulacin osmtica en las clulas.

smosis
Fenmeno fsico relacionado con el movimiento de un solvente a travs de una
membrana semipermeable. Tal comportamiento supone una difusin simple a
travs de la membrana, sin gasto de energa. La smosis del agua es un
fenmeno biolgico importante para el metabolismo celular de los seres vivos.

Membrana semipermeable
Estructura que contiene poros o agujeros, al igual que cualquier filtro, de
tamao molecular. El tamao de los poros es tan minsculo que deja pasar las
molculas pequeas pero no las grandes, normalmente del tamao de
micrmetros. Por ejemplo, deja pasar las molculas de agua, que son pequeas,
pero no las de azcar, que son ms grandes.

Si una membrana como la descrita separa un lquido en dos particiones, una de


agua pura y otra de agua con azcar, suceden varias cosas, explicadas a fines del
siglo XIX por Van 't Hoff y Gibbs empleando conceptos de potencial
electroqumico y difusin simple, entendiendo que este ltimo fenmeno
implica no slo el movimiento al azar de las partculas hasta lograr la
homognea distribucin de las mismas y esto ocurre cuando las partculas que
vienen se equiparan con las que aleatoriamente van, sino el equilibrio de los
potenciales qumicos de ambas particiones. Los potenciales qumicos de los
componentes de una solucin son menores que la suma del potencial de dichos
componentes cuando no estn ligados en la solucin. Este desequilibrio, que
est en relacin directa con la osmolaridad de la solucin, genera un flujo de
partculas solventes hacia la zona de menor potencial que se expresa como
presin osmtica mensurable en trminos de presin atmosfrica, por ejemplo:
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"existe una presin osmtica de 50 atmsferas entre agua desalinizada y agua de


mar". El solvente fluir hacia el soluto hasta equilibrar dicho potencial o hasta
que la presin hidrosttica equilibre la presin osmtica.

El resultado final es que, aunque el agua pasa de la zona de baja concentracin a


la de alta concentracin y viceversa, hay un flujo neto mayor de molculas de
agua que pasan desde la zona de baja concentracin a la de alta.

Dicho de otro modo: dado suficiente tiempo, parte del agua de la zona sin
azcar habr pasado a la de agua con azcar. El agua pasa de la zona de baja
concentracin a la de alta concentracin.

Las molculas de agua atraviesan la membrana semipermeable desde la


disolucin de menor concentracin, disolucin hipotnica, a la de mayor
concentracin, disolucin hipertnica. Cuando el trasvase de agua iguala las dos
concentraciones, las disoluciones reciben el nombre de isotnicas.

En los seres vivos, este movimiento del agua a travs de la membrana celular
puede producir que algunas clulas se arruguen por una prdida excesiva de
agua, o bien que se hinchen, posiblemente hasta reventar, por un aumento
tambin excesivo en el contenido celular de agua. Para evitar estas dos
situaciones, de consecuencias desastrosas para las clulas, estas poseen
mecanismos para expulsar el agua o los iones mediante un transporte que
requiere gasto de energa.

Transporte a travs de membrana


1. TRANSPORTE (Difusin) PASIVO
o Difusin Simple a travs de Bicapa Lipdica
o Difusin Simple a travs de Canales Proteicos
o Difusin Facilitada
2. TRANSPORTE ACTIVO
o Transporte por medio de Bombas
3. TRANSPORTE EN MASA
o Endocitosis.
o Exocitosis

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o C:\Users\BOOK\Downloads\Documents\OSMOSIS_Y_PRESION_OSMOTIC
A.pdf
o ACURIO, M. L, Guia de Prcticas de Biologa Celular. Fac. Cs. Biolgicas. Cusco.
2001.
o http://www.bing.com/search?q=osmosis&form=CPNMHP&pc=CPDTDF&refig
=b0e2abaa0bdf408a9375220bd53c5a11&pq=osmosis&sc=0-0&sp=-
1&qs=n&sk=

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ORGANELOS
Se denomina orgnulos (o tambin organelas, organelos, organoides o mejor
elementos celulares) a las diferentes estructuras contenidas en el citoplasma de
las clulas, principalmente las eucariotas, que tienen una forma determinada.
La clula procariota carece de la mayor parte de los orgnulos. El nombre de
orgnulos procede de la analoga entre la funcin de estas estructuras en las
clulas, y la funcin de los rganos en el cuerpo.
No todas las clulas eucariotas contienen todos los orgnulos al mismo tiempo,
aparecen en determinadas clulas de acuerdo a sus funciones.

Orgnulo Funcin Estructura Organismos Notas


Posee
posee doble plantas, material
Cloroplasto fotosntesis
membrana protistas gentico
(ADN)
sntesis y embalaje de
puede asociarse
Retculo protenas y ciertos
con ribosomas en eucariotas
endoplasmtico lpidos (los empaqueta
su membrana
en vesculas)
transporte y embalaje
de protenas, recibe sacos aplanados en las plantas
Aparato de vesculas del retculo rodeados por la mayora de se conocen
Golgi endoplasmtico, forma membrana eucariotas como
glucolpidos, citoplasmtica dictiosomas
glucoprotenas
Posee
compartimento
la mayora de material
Mitocondria respiracin celular de doble
eucariotas gentico
membrana
(ADN)
almacenamiento, sacos de
plantas y
Vacuolas transporte y membrana
hongos
homeostasis vesicular
mantenimiento de Contiene la
rodeado por todos los
Ncleo ADN y ARN, y mayor parte
membrana doble eucariotas
expresin gentica del ADN

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Orgnulo/componente Funcin Estructura Organismos


ayuda al espermatozoide a compartimento de muchos
Acrosoma
fusionarse con el vulo membrana simple animales
vescula que almacena
todas las
material citoplasmtico y compartimento de
Autofagosoma clulas
orgnulos para su doble membrana
eucariotas
degradacin
Estructuras
cilndricas
Intervienen en la divisin
formadas por tubos
Centriolos celular ayudando al
y rodeadas de
movimiento cromosmico
material proteico
denso
animales,
microtbulos de
Cilio movimiento protistas,
protenas
algunas plantas
transformacin de lpidos compartimento de
Glioxisoma plantas
en azcar membrana simple
algunos
produccin de energa e compartimiento de
Hidrogenosoma eucariotas
hidrgeno doble membrana
unicelulares
ruptura de grandes compartimento de la mayora de
Lisosoma
molculas membrana simple los eucariotas
compartimento de
Melanosoma almacn de pigmentos animales
membrana simple
algunos
compartimento de
Mitosoma sin caracterizar eucariotas
doble membrana
unicelulares
filamentos
Miofibrilla contraccin muscular animales
entrelazados
Parentosoma sin caracterizar sin caracterizar hongos
oxidacin de protenas / compartimento de todos los
Peroxisomas
desintoxicacion celular membrana simple eucariotas
Estructuras
montaje de protenas a
redondeadas
Ribosomas partir de la informacin
formadas por dos
transmitida por el ARN
subunidades
almacenan, transportan o
compartimento de todos los
Vescula digieren productos y
membrana simple eucariotas
residuos celulares
Cuadro n 01.

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS

o http://es.wikipedia.org/wiki/Org%C3%A1nulo

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MITOSIS
CICLO CELULAR
La vida de una clula consta de dos etapas diferentes: interfase y divisin
INTERFASE
No es un momento de reposo, pues en ella tiene lugar una gran actividad
metablica.
Periodos: G1, S y G2.

Periodo G1 sigue a la mitosis anterior, se da el desarrollo de la clula. La


cromatina asociada a histonas forma fibras nucleosmicas. Los genes se
transcriben de acuerdo con las necesidades metablicas, suceden diferentes
procesos metablicos y se da la formacin de los orgnulos

Periodo S (sntesis de ADN)

Periodo G2 antecede a la mitosis. Los cromosomas estn ya duplicados,


formados por dos cromtidas hermanas.

DIVISIN CELULAR
En seres unicelulares permite su multiplicacin y en los pluricelulares el
crecimiento, el desarrollo, la regeneracin de rganos y tejidos y las funciones
de reproduccin.
o Divisin del ncleo: cariocinesis o mitosis.
o Divisin del citoplasma: citocinesis o citodiresis.
FASES
Profase, metafase, anafase y telofase.
PROFASE

Fase ms larga (1 a 2 horas en el pice de la raz de ajo)

La envoltura nuclear empieza a fragmentarse y los nucleolos van


desapareciendo progresivamente.

Debido al superenrollamineto de la cromatina se produce una condensacin del


material gentico y los cromosmas se van haciendo cada vez ms visibles.
Puesto que el ADN se replic en el periodo S de la interfase, cada cromosoma
est formado por dos cromtidas unidas por el centromero.

En las clulas animales el par de centriolos se ha dividido en interfase y ha dado


lugar a dos pares de centriolos que constituirn los focos de unas ordenaciones
radiales de microtubulos: los steres.

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Los dos steres que al principio estn juntos se separan a polos opuestos de la
clula y los haces de microtubulos que surgen de ellos se alargan y forman un
huso mittico o huso acromtico bipolar. Las clulas vegetales no tienen
centriolos y el huso acromtico se forma a partir del centrosoma. Estos husos
sin centriolo se llaman husos anastrales y estn menos centrados en los polos.

Los tbulos del huso se forman a partir de las molculas del citoesqueleto. ste
se desorganiza y la clula adquiere una forma ms redondeada.

METAFASE
Es una fase corta (5 a 15 minutos en el pice de la raz del ajo). El huso mittico
ya est perfectamente desarrollado. Los cinetcoros de los cromosomas
interaccionan por medio de unos microtbulos con los filamentos del huso y los
cromosomas son alineados en la placa ecuatorial de la clula o placa metafsica.
Se rompe la clula, por ejemplo: mediante choque osmtico, si ello es posible, y
los cromosomas se tien, se aplasta para que se extiendan

ANAFASE
Es la fase ms corta (2 a 10 minutos en el pice de raz). Los cinetcoros se
separan y cada cromtida es arrastrada hacia un polo de la clula.

TELOFASE
Su duracin en el pice de raz de ajo es de 10 a 30 minutos. Los cromosomas
son revestidos por fragmentos del retculo endoplasmtico que terminarn
soldndose para constituir la envoltura nuclear. Poco a poco los cromosomas
van descondensndose y se desfiguran adquiriendo el ncleo un aspecto cada
vez ms interfsico, los nucleolos comienzan a reaparecer. Los microtbulos del
huso se agrupan en haces por la aparicin en la regin media de cilindros de una
sustancia densa y pierden sus conexiones con los polos. Finalmente los cilindros
se fusionan en un solo haz y la clula se divide en dos.

CITOCINESIS
Divisin del citoplasma, inicia al final de anafase y contina a lo largo de la
telofase.
o Clulas animales tiene lugar por simple estrangulacin de la clula a nivel
del ecuador del huso. La estrangulacin (protenas ligadas a la membrana
que formarn un anillo contrctil.
o Clulas vegetales aparece un sistema de fibras formado por microtbulos en
forma de barril: el fragmoplasto. En su plano ecuatorial se depositan
pequeas vescu las que provienen de los dictiosomas del aparato de Golgi.
Estas vesculas contienen sustancias pcticas que formarn la lmina
media. Todo ello crece de dentro a fuera. La divisin no es completa entre
ambas clulas hijas, mantenindose algunos poros de comunicacin: los
plasmodesmos, al quedar capturados entre las vesculas elementos del
retculo (Pared celular)

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o Hongos a la cariocinesis no le sucede la citodiresis. Se forman as masas,


llamadas plasmodios, que contienen una gran cantidad de ncleos
envueltos en una sola membrana.

Fig. 02. Mitosis

Preparacin de Orceina Acetica clorhdrica

1. Disolver dos gramos de orcena en 55 cm3 de cido actico glacial.


2. Calentar hasta ebullicin y mantener sta durante 10 minutos.
3. Dejar enfrar y aadir agua destilada hasta completar 100 cm3.
4. Trs 12 horas de reposo, filtrar.
5. La solucin de trabajo se obtiene aadiendo una parte de HCl 1N por
cada 9 partes de la solucin anterior.

BIBLIOGRAFA Y SITIOS WEB SUGERIDOS.

o http://www.bing.com/search?q=MITOSIS+PDF&go=Enviar+consulta&
qs=ds&form=QBRE
o http://img.webme.com/pic/b/biologiafleming/2.png
o http://www.bing.com/search?q=orceina+&form=CPNMHP&pc=CPDTD
F&refig=d264c023273746d9a4362b1159d01901&pq=orceina+&sc=0-
0&sp=-1&qs=n&sk=

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