FOSFORILACIN OXIDATIVA

a) Reacciones de transferencia de electrones

en las mitocondrias

b) Sntesis de ATP
LOCALIZACIN Y ESTRUCTURA DE LAS MITOCONDRIAS
LA FOSFORILACIN OXIDATIVA SE LLEVA A CABO EN LA MEMBRANA
INTERNA MITOCONDRIAL

Membrana externa
Espacio
intermembranal PERMEABLE A MOLCULAS PEQUEAS E IONES

Membrana interna

EXISTEN TRANSPORTADORES ESPECFICOS

Y ALOJA A LOS COMPONENTES DE LA CADENA
RESPIRATORIA Y LA ATP SINTASA

Matriz

CONTIENE AL COMPLEJO DE LA PIRUVATO

DESHIDROGENASA Y LOS ENZIMAS DEL CICLO DE KREBS
Y DE OTRAS RUTAS (b-OXIDACIN DE CIDOS GRASOS Y
OXIDACIN DE AMINOCIDOS)
RESPIRACIN AERBICA: INCLUYE GLUCLISIS, CICLO DEL CIDO CTRICO
Y FOSFORILACIN OXIDATIVA

CICLO DEL CIDO

CTRICO FOSFORILACIN OXIDATIVA
LA FOSFORILACIN OXIDATIVA COMIENZA CON LA
ENTRADA DE ELECTRONES EN
LA CADENA RESPIRATORIA

DE DNDE VIENEN LOS ELECTRONES?

LA MAYOR PARTE DE LOS ELECTRONES PROVIENEN

DE LA ACCIN DE DESHIDROGENASAS
QUE CAPTAN e- DE VAS CATABLICAS
LOS ELECTRONES GENERADOS DURANTE
LA GLUCLISIS Y
EL CICLO DEL CIDO CTRICO
SON CANALIZADOS HACIA

LA CADENA
TRANSPORTADORA
DE ELECTRONES
(CADENA RESPIRATORIA)
 LOS ELECTRONES SE CAPTAN A TRAVS DE
ACEPTORES UNIVERSALES DE ELECTRONES

REDUCIDO NMERO DE
TRANSPORTADORES
DE ELECTRONES
Nucletidos de
Nicotinamida:
NAD+, NADP+

Quinonas Citocromos
Nucletidos de
Flavina:
FMN, FAD
Protenas
Ferro-sulfuradas
LOS NUCLETIDOS DE NICOTINAMIDA.- Las deshidrogenasas ligadas
a NAD+ eliminan dos tomos de hidrgeno de sus sustratos

DESHIDROGENACIN

SUSTRATO REDUCIDO + NAD+

SUSTRATO OXIDADO + NADH + H+

TANTO EL NADH COMO EL NADPH SON TRANSPORTADORES

ELECTRNICOS HIDROSOLUBLES QUE SE ASOCIAN
REVERSIBLEMENTE CON DESHIDROGENASAS
LOS NUCLETIDOS DE FLAVINA.- La forma oxidada puede aceptar un
Electrn (formando un semiquinona) o dos electrones

Se encuentran fuertemente
unidos a las FLAVOPROTENAS
GRUPOS PROSTTICOS
Eo depende de su entorno
 LOS ELECTRONES SE CAPTAN A TRAVS DE
ACEPTORES UNIVERSALES DE ELECTRONES

TRANSPORTADORES UNIDOS A MEMBRANA

(INTERNA MITOCONDRIAL)

Nucletidos de
Nicotinamida:
NAD+, NADP+

Quinonas Citocromos
Nucletidos de
Flavina:
FMN, FAD
Protenas
Ferro-sulfuradas
LA UBIQUINONA, COENZIMA Q, Q
(benzoquinona liposoluble
con una larga
cadena lateral
isoprenoide)
ES HIDROFBICA

Puede actuar
como puente
entre un dador
de dos e- y un
aceptor de un
electrn
LOS CITOCROMOS SON PROTENAS QUE TIENEN COMO
COFACTORES A LOS GRUPOS HEMO (Fe)
TRES CLASES DE CITOCROMOS.- De acuerdo a diferencias en su
espectro de absorcin de la luz
a 600 nm
No covalente Eo depende de su
b 560 nm interaccin con la protena
c 550 nm Covalente (Cys)

SON HIDROFBICAS, EXCEPTO EL CITOCROMO C

MITOCONDRIAL
PROTENAS FERRO-SULFURADAS.- El hierro est presente
No como grupo hemo sino en asociacin con tomos de
Azufre de residuos de Cys

Aconitasa
LA CADENA RESPIRATORIA
(FOSFORILACIN OXIDATIVA)

CONSTA DE UNA SERIE DE TRANSPORTADORES

ELECTRNICOS QUE ACTAN SECUENCIALMENTE,

LA MAYORA DE LOS CUALES SON

PROTENAS INTEGRALES CON GRUPOS PROSTTICOS

CAPAZ DE ACEPTAR Y DONAR UNO O DOS

ELECTRONES
LA INTERACCIN DE LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
CON LAS PROTENAS MODIFICA LOS POTENCIALES DE REDUCCIN

Transportador
de
electrones
Eo
Transportador
de
electrones Eo

Eo Eo
LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES CEDEN,

A SU VEZ, LOS ELECTRONES A ACEPTORES

CON AFINIDAD POR LOS ELECTRONES

MS ELEVADA
POTENCIAL DE REDUCCIN ESTNDAR, Eo (V)

Es un parmetro que permite medir la afinidad del aceptor

por los electrones

FLUJO DE ELECTRONES:

EO BAJOS EO MS ELEVADOS

A MEDIDA QUE LA GLUCOSA SE OXIDA ENZIMTICAMENTE,

LOS ELECTRONES LIBERADOS FLUYEN A TRAVS DE UNA
SERIE DE TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
INTERMEDIOS HASTA EL O2

DONDE EL O2 TIENE UNA AFINIDAD MAYOR QUE LOS

TRANSPORTADORES INTERMEDIOS
DURANTE LA FOSFORILACIN OXIDATIVA SE LLEVAN A
CABO TRES TIPOS DE TRANSFERENCIA DE ELECTRONES:

1. Directamente como electrones.- Tal como sucede

en la reduccin de Fe3+ a Fe2+

2. En forma de tomos de hidrgeno

3. En forma de ion hidruro (:H-) portador de 2 e-

LA OXIDACIN DE GLUCOSA A DIXIDO DE CARBONO
REQUIERE DE TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
ESPECIALIZADOS

10 NADH + 2FADH2
GAL3PDH
PiruvatoDH
isicitratoDH
a-cetog DH
succDH
malDH
DG=-2840 kJ/mol
POTENCIALES DE REDUCCIN ESTNDAR DE LOS
TRANSPORTADORES DE LA CADENA RESPIRATORIA
 LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES SE
ENCUENTRAN EN COMPLEJOS MULTIENZIMTICOS

(+) Espacio
intermembranal
E

-0.4
NADH NAD+ (-0.315 V)
ADP+Pi
-0.2 Complejo I (DG= -69.5 kJ/mol)
ATP
(+0.03V)
0 Succ FADH2 Complejo II CoQ (0.045V)
ADP+Pi
Fum Complejo III (DG= -36.7 kJ/mol)
0.2 ATP
CytC (0.235V)
0.4
ADP+Pi
0.6 Complejo IV (DG= -112 kJ/mol)
ATP
0.8 2H+ + O2 H2O (0.815 V)
REACCIN GLOBAL CATALIZADA POR LA CADENA
RESPIRATORIA MITOCONDRIAL
NADH
EO (v) -0.4 Rotenona

Q
-0.2
Cyt b
Antimicina A
0
Cyt c1

0.2
Cyt c
0.4
Cyt (a + a3)
0.6 CN- o CO
O2
0.8
COMPLEJO MASA No. de Grupo(s)
ENZIMTICO/PROTENA (kDa) subunidades transportador(es) e-

I NADH deshidrogenasa 850 43 (14) FMN, Fe-S

II Succinato deshidrogenasa 140 4 FAD, Fe-S

III Ubiquinona-citocromo c 250 11 Hemos, Fe-S

oxidorreductasa

Citocromo c 13 1 Hemo

IV Citocromo oxidasa 160 13 (3-4) Hemos, CuA, CuB

COMPLEJO I: NADH a Ubiquinona
Espacio
4H+ intermembranal
43 subunidades

Membrana
FMN (4) Fe-S Q (2) QH2 interna

2H+ Matriz

NADH
 FAD: Acil graso-CoA (b-oxidacin)
Glicerol-3-fosfato (hidrlisis de TG/ Gluclisis)

COMPLEJO II: Espacio

intermembranal
Succinato a Ubiquinona
Membrana
Fe-S Q QH2 interna

FAD
2H+ Matriz

Succinato
COMPLEJO II

4 subunidades

MATRIZ
COMPLEJO III:Ubiquinona a citocromo c Complejo
Citocromo bc1

4H+
Cyt c Espacio
intermembranal
Q (2) QH2
Cyt c1 Membrana
Fe-S interna
Cyt b
QH2 .Q -

Matriz

2H+
COMPLEJO III:Ubiquinona a citocromo c Complejo
Citocromo bc1

EL UBIQUINOL (QH2) SE OXIDA A Q AL TIEMPO

QUE SE REDUCEN DOS MOLCULAS DE CITOCROMO c
COMPLEJO IV: Citocromo c al O2 Citocromo oxidasa

2H+

Cyt c Espacio
intermembranal
CuA
Cyt a
Membrana
Cyt a3 interna

CuB
Matriz

O2
2H2O
FLUJO DE ELECTRONES Y PROTONES A TRAVS DE LA
CADENA RESPIRATORIA
4H+ 4H+ 2H+ +
Espacio
Cyt c intermembranal
III IV
Q Membrana
interna
I
Matriz
II
1
O2 + 2H+ H2O
-
NADH + H+ NAD+ Succinato 2

[H+] y en carga

ENERGA ALMACENADA FUERZA PROTN-MOTRIZ

a) Energa qumica potencial pH
b) Energa elctrica potencial
FOSFORILACIN OXIDATIVA

Energa del flujo de e- sntesis ATP

transduccin de energa

Hiptesis quimiosmtica

Energa se conserva por bombeo protones al espacio

intermembranal: gradiente electroqumico.

Fuerza protn-motriz: sntesis ATP

Espacio
+ + + + + + + + + + ++ + + + + intermembranal

Membrana
Fo interna

- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - Matriz
H+
F1

ADP + Pi ATP
 HIPTESIS QUIMIOSMTICA

EXPLICA EL MECANISMO POR EL CUAL SE ACOPLA

EL FLUJO DE PROTONES CON LA FOSFORILACIN

1) LOS PROTONES GENERADOS DURANTE EL

PASO DE ELECTRONES POR LA CADENA RESPIRATORIA
(COMPLEJOS I AL IV)

2) DAN LUGAR A LA
FUERZA PROTN-MOTRIZ (pH, )

3) QUE IMPULSA LA FOSFORILACIN DEL ADP

PARA FORMAR ATP
COMPLEJO DE LA ATP SINTASA MITOCONDRIAL

Es una ATPasa tipo F (factor de acoplamiento de energa)

Complejo V
Dos componentes: F1, una protena perifrica de membrana
Fo, una protena integral de membrana

F1

Fo
F1 Fo de la ATP sintasa

9 Subunidades
F1 de cinco tipos
distintos
a3 b3

3 Subunidades
Fo a b2 c10-12
MODELO DE UNIN Y CAMBIO DE LA ATP SINTASA
La catlisis rotacional es clave en el mecanismo
de unin y cambio de la sntesis de ATP Conformacin b-ADP
impulsada por el Une ADP y Pi
bombeo de H+

Conformacin b-ATP
Une fuertemente ATP

Conformacin b-vaca
Baja afinidad por
ATP

ESPACIO
INTERMEMBRANAL
(10 H+)
En F1: tres sitios con diferente conformacin
(INTERCONVERTIBLES)

L(oose) : unin dbil a sustratos (ADP y Pi)

T(ight) : unin fuerte (sntesis ATP)

O(pen) : sin unin (abierto: salida ATP)

SNTESIS ATP:

1. Translocacin protones : Fo

2. Formacin enlace fosfoanhdrido de

ATP: F1
 Glucosa

Glucosa6P 1 glucosa: 2 ATP

2 GALD3P 10 NADH
2 NADH 2 FADH2
2 1,3BiPglicerato 1 GTP
2 piruvato 1 NADH : 3 ATP
1FADH2 : 2 ATP
2NAD+

PDH
10 NADH X 3 ATP= 30 ATP
2 FADH2 X 2 ATP = 4 ATP
Gluclisis = 2 ATP
TCA = 1 GTP
2 2
TOTAL 36 ATP
1 GTP
2
2