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ALUMNAS.

por su parte la solucin 2 sirve para tener una lisis


CEVADA SANTIAGO KAREN JAZMN alcalina de la pared as como tambin un agente
MORALES LUNA LUCA emulsionante de los lpidos de membrana, la
4QM1. SECCIN 2 siguiente solucin (3) es un amortiguador de pH
utilizado para que cuando se exponga el contenido
PRCTICA: AISLAMIENTO DE DNA PLASMDICO. interno de la bacteria los plsmidos puedan
precipitar, en la solucin 4 el isopropanol cambia la
INTRODUCCIN. constante dielctrica de la solucin precipitando
Los plsmidos son moculas de DNA las protenas y el plsmido y finalmente la quinta
extracromosomales presentes en algunas clulas solucin es un agente quelante que har que los
bacterianas, levaduras y hongos. Poseen DNA de iones magnesio y en especial el calcio sean
doble hebra, mayormente son circulares; poseen su capturados evitando as la accin de las nucleasas.
propio origen de replicacin. Los plsmidos no son Despus del proceso de aislamiento de plsmido se
esenciales para el desarrollo de la clula, pero le procedi a su caracterizacin mediante una
proveen una ventaja de competitiva a las clulas electroforesis, la cual es una tcnica de separacin
que lo poseen, dado que los plsmidos poseen y caracterizacin de molculas utilizando un campo
genes que le confieren caractersticas selectivas a elctrico en funcin del tamao y carga elctrica de
su husped tales como resistencia a antibiticos, la molcula, as pues el, ADN teniendo carga
nuevas habilidades metablicas como de negativa migr a travs de los poros de la matriz
degradacin de carbohidratos, factores de hacia el lado con carga positiva y la tincin del gel
virulencia y produccin de toxinas entre otros. En con bromuro de etidio, que es una sustancia
la ingeniera gentica poseen un inters singular, fluorescente se intercala en la molcula de ADN, y la
por se uno de los sistemas de vectores ms exposicin con luz ultravioleta, permite observar el
sencillos de utilizar. resultado de sta migracin, observndose tres
bandas muy marcadas, correspondiendo la primera
OBJETIVO. al DNA circular relajado la cual es una isoforma del
Aislar DNA plasmdico bacteriano, comprobando DNA, donde debido a una fuerza mecnica el
dicho aislaminento mediante electroforesis en gel plsmido que tiene una forma normal de dos anillos
de agarosa. unidos, se rompi una cadena de ellos, la segunda
RESULTADOS. banda muestra al DNA lineal lo cual indica que
ambas cadenas del plsmido se rompieron y por
ltimo la tercer banda indica al DNA sper enrollado
el cual es la forma correcta de separacin del
plsmido y en el cual ambas cadenas estn intactas.
Fig. 1 Resultados de la electroforesis del DNA plasmdico, se CONCLUSIONES.
aprecian 3 lneas, la primera corresponde al DNA circular Se aislaron los tres tipo de DNA plasmdico (sper
relajado, la segunda al DNA lineal y la tercera al DNA enrollado, lineal y circular relajado).
superenrrollado.
Mediante la electroforesis se pudo aislar en mayor
cantidad la isoforma del DNA plasmdico lineal y
DISCUSIN.
sper enrollado.
En la realizacin de la prctica se realiz primero un
proceso de separacin de los plsmidos
BIBLIOGRAFA.
bacterianos de cepas tipo a los cuales se les agreg
DNA plasmdico, consultado en
una solucin con GTE (tris/EDTA/GLUCOSA) la cual
https://bacteriologiaclinica.wikispaces.com
genera las condiciones ptimas para que la cepa
, el da 16 de mayo de 2017.
pueda regenerarse despus de su criogenizacin,