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Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Prctica: Efecto de la concentracin de enzima y del pH sobre la velocidad de


reaccin.
Diego Vargas Gloria Paola.
Lpez Portillo Felipe de Jess.
Laboratorio de Bioqumica de Q.B.P, Seccin 3, Semestre 2/17; Grupo: 4QM1
Prolongacin Manuel Carpio y Plan de Ayala s/n, Miguel Hidalgo, Santo Toms, 11350 Ciudad de
Mxico.

Objetivos.
Demostrar que la velocidad de reaccin enzimtica es X=7.5
directamente proporcional a la concentracin de
enzima.
Analizar la importancia del pH del medio sobre la
velocidad de una reaccin enzimtica y su efecto Vo
sobre el carcter inico de la enzima y del sustrato.
= =
10
Resultados.
1.7
= 10
=0.17 as para cada tubo.
Resultados de concentracin de enzima
Tabla 1. Efecto de la concentracin de enzima sobre
Clculos:
la velocidad de reaccin.

0.0035 +
= = No. de [AR] Abs [ENZ] Vo
0.0758 tubo moles ()
0.0035 + 0.126 Testigo 0 0 0
(1) = = 1.70 1 1.70 0.126 7.5 0.17
0.0758
2 3.58 0.268 15 0.358
0.0035 + 0.268 3 5.21 0.392 22.5 0.521
(2) = = 3.58 4 6.84 0.515 30 0.684
0.0758
0.0035 + 0.392 5 8.91 0.672 37.5 0.891
(3) = = 5.21
0.0758
0.0035 + 0.515 Grafica 1. Absorbancia & moles
(4) = = 6.84
0.0758
0.0035 + 0.672
(1) = = 8.91
0.0758

[ENZ] Calculo para cada uno de los tubos.

Tubo 1.

1 75
0.1
4 5 0.328 4.37 0.437
5 5.5 0.414 5.50 0.550
6 6 0.502 6.66 0.666

Grafica 3. pH vs Vo

Grfica 2. Vo & concentracin de enzima.

Resultados de efecto del pH


Clculos:
Grafica 4. pH vs Vo reportado por los profesores de
academia.
0.0035 +
= =
0.0758
0.0035 + 0
(1 3) = = 0.046
0.0758
0.0035 + 0.328
(4) = = 4.37
0.0758
0.0035 + 0.414
(1) = = 5.50
0.0758
0.0035 + 0.502
(1) = = 6.66
0.0758

Vo


= = pH optimo reportado en la literatura: 4.5 a una
10
0.046 temperatura de entre 50-60C con actividad
= = 4.6x103 mxima. 2
10
4.37
= = 0.437 Discusin.
10
5.50
= = 0.550 La concentracion de iones hidrogeno, expresada como un
10
6.66 valor de pH, afecta a las enzimas de diversas formas. En
= = 0.666 primer lugar, la actividad catalitica esta relacionada con el
10 estado ionico del sitio activo. Los cambios en la
concentracion de iones hidrogeno pueden afectar a la
Tabla 2. Efecto del pH sobre la velocidad de reaccin.
ionizacion de los grupos del sitio activo.
Los resultados obtenidos para pH indican que: aun pH de
No. de pH Abs [AR] Vo 6, la enzima sacarasa o invertasa que es una B-
tubo moles fructouranosidasa tiene gran actividad enzimtica como se
Testigo 5 0 0.046 4.6x10-3 observa en la grfica 3, sin embargo, los valores reportados
1 3 0 0.046 4.6x10-3 por lo profesores de academia (grafica 4) y los valores
2 4 0 0.046 4.6x10-3 tericos reportados en la literatura2, indican que el pH
ptimo es de 5.5 y 4.5 respectivamente (valor de pH en el
3 4.5 0 0.046 4.6x10-3
que la actividad de una enzima es mxima), esto indica que
probablemente haya diferencias en la variacin de pH de
los diferentes tampones empleados o bien haya algn error
al momento de pipetear las soluciones, sin embargo, los
valores de pH en los que la enzima an tiene una gran
eficacia se encuentran entre 5 y 6 como se observa en la
grafica 4.

Por otra parte, La velocidad de una reaccin bioquimica se


define como el cambio de la concentracion de un reactivo
o producto por unidad de tiempo. Como observamos en la
grfica 2 al aumentar la concentracin de la enzima
aumenta la velocidad de reaccin, es decir, son
directamente proporcionales y generan una pendiente
positiva, esto se debe a que al aumentar la cantidad de
enzima hay una mayor cantidad de sitios activos que
interactan con el sustrato. La reaccin por lo tanto parece
ser de primer orden debido a que el agua se encuentra
presente en exceso y la [H2O] es en esencia constante por
lo que la velocidad depende de la primera potencia de la
concentracion de un solo reactivo (concentracin de
enzima). Estas reacciones se dice que son de seudo-primer
orden3. Las reacciones de hidrolisis en los sistemas
bioqumicos se tratan como de seudo-primer orden debido
a la sustantiva disponibilidad del segundo reactivo, el H2O,
en los ambientes acuosos.

Concluciones.

Se demostr que la velocidad de reaccin enzimtica


es directamente proporcional a la concentracin de
enzima.

Se observ la importancia del pH del medio sobre la


velocidad de una reaccin enzimtica y su efecto
sobre el carcter inico de la enzima y del sustrato.

Bibliografa.
1) Plummer, D. (1994). Introduccin a la
bioqumica prctica. Madrid: Universidad de
Barcelona. Pg(s). 120-135
2) Herrera. C., Bolaos. N. (2003). Qumica de
Alimentos: Manual de laboratorio. Costa
Rica:Universidad de Costa Rica. Pg 46.
3) McKee. T, McKee, J. (2013). Bioquimica, las
bases moleculares de la vida, Mxico: McGraw
Hill. Pg(s) 170-175.