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ESTUDIO DE IMPACTO AMBIENTAL 1

INDICE
AGRADECIMIENTO ........................................................................................................... 3

INTRODUCCION ................................................................................................................. 4

FASES DE UN PROYECTO MINERO ............................. Error! Bookmark not defined.

EXPLORACION: ........................................................ Error! Bookmark not defined.

EXPLOTACION DE LA MINA: ................................ Error! Bookmark not defined.

MINERIA A TAJO ABIERTO: ...................................... Error! Bookmark not defined.

MINERIA SUBTERRANEA: ......................................... Error! Bookmark not defined.

IMPACTOS AMBIENTALES Y SOCIALES DE LA MINERA .... Error! Bookmark not


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Impactos en los recursos hdricos .................................... Error! Bookmark not defined.

DRENAJE CIDO DE MINA Y LIXIVIADOS CONTAMINANTES ................. Error!

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IMPACTOS POR EL DESAGUADO DE LA MINA .... Error! Bookmark not defined.

IMPACTOS DE LOS PROYECTOS MINEROS EN LA CALIDAD DEL AIRE . Error!

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LIBERACIN ACCIDENTAL DE MERCURIO .......... Error! Bookmark not defined.

IMPACTOS DE LOS PROYECTOS MINEROS EN LA CALIDAD DEL SUELO

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IMPACTOS SOCIALES DE LOS PROYECTOS MINEROS...... Error! Bookmark not

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CUL ES EL PROPSITO DEL PROCESO DE EIA? ... Error! Bookmark not defined.

QUIN PREPARA UN EIA? ............................................ Error! Bookmark not defined.

ETAPAS DEL PROCESO DE EIA .................................... Error! Bookmark not defined.

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EVALUACIN DE UN EIA TPICO DE UN PROYECTO MINERO ..Error! Bookmark


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EVALUANDO EL RESUMEN EJECUTIVO.................... Error! Bookmark not defined.

EVALUANDO LA DESCRIPCIN DEL PROYECTO .... Error! Bookmark not defined.

EVALUANDO LA LINEA DE BASE AMBIENTAL....... Error! Bookmark not defined.

EVALUACION DE LOS IMPACTOS AMBIENTALES POTENCIALES Y PREVISTOS


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CMO ENTENDER Y EVALUAR LAS MATRICES DE IMPACTO AMBIENTAL

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EVALUACION DEL PLAN DE MONITOREO AMBIENTAL ...... Error! Bookmark not


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EVALUACIN DE LOS PLANES DE REHABILITACIN Y CIERRE ................. Error!


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COMO SER UN PARTICIPANTE EFECTIVO EN EL PROCESO DE (IEA) ......... Error!


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ACCESO A LA INFORMACION Y A LOS EIA .......... Error! Bookmark not defined.

HACIENDO CUMPLIR LAS PROMESAS, COMPROMISOS Y CONDICIONES


RELATIVAS AL PROYECTO ............................................... Error! Bookmark not defined.

GLOSARIO ......................................................................... Error! Bookmark not defined.

CONCLUSIONES ............................................................... Error! Bookmark not defined.

BIBLIOGRAFIA ................................................................. Error! Bookmark not defined.

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AGRADECIMIENTO

La Gua para Evaluar EIAs de Proyectos Mineros refleja la investigacin hecha en textos y

web para la realizacin de este humilde trabajo de Evaluaciones de Impacto Ambiental (EIAs)

para propuestas de proyectos mineros alrededor del mundo. Esta gua de estudio impacto

ambiental servir para muchos proyectos futuristas, my profundo agradecimiento al ingeniero

arocutipa por transmitir todo su conocimiento y experiencia alo largo de su carrera como

docente.

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INTRODUCCION

La mayora de pases exigen una Evaluacin de Impacto Ambiental (EIA) antes de dar luz

verde a un proyecto minero. Los procesos de EIA ofrecen una valiosa oportunidad para que

los ciudadanos participen en las decisiones sobre las minas. El problema es que los

proponentes de proyectos mineros con frecuencia presentan documentos largos y complejos

de EIA que resultan incomprensibles para el ciudadano comn. La Gua para Evaluar EIA de

Proyectos Mineros ayudar tanto a abogados como defensores del inters pblico, a las

organizaciones de base y a los miembros de la comunidad a comprender los EIA mineros y

explorar las maneras como las compaas mineras pueden reducir los riesgos a la salud

pblica asociados con la minera.

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TECNICAS DE LA REACCION EN CADENA DE POLIMERO

DESARROLLO DE LA TECNICA DE REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA

En los aos setenta se desarrollaron los mtodos que permitieron de manera simple
y relativamente rpida para determinar la secuencia nucleotdica de cualquier
fragmento de DNA. Estos primeros intentos de secuenciar los cidos nucleicos
siguieron los pasos empleados en la secuenciacin de protenas: romper las
molculas en pequeos fragmentos, determinar su composicin de bases y deducir
la secuencia a partir de fragmentos solapantes. Este mtodo resulta mas o menos
sencillo para protenas que resultan de la combinacin de hasta veinte aminocidos
distintos, pero constituye un problema en el caso de los cidos nucleicos donde la
secuencia resulta de la combinacin de nicamente cuatro nucletidos diferentes.
REACCION EN CADENA DE POLIMERO
Para abordar de lleno el tema de la tcnica de la Reaccin en Cadena de la
Polimerasa (PCR) debemos hablar primero de Biologa Molecular, esta es
una ciencia cuyo objetivo fundamental es la comprensin de todos
aquellos procesos celulares que contribuyen a que la informacin gentica se
transmita eficientemente de uno seres a otros y se exprese en los nuevos individuos,
este conocimiento nos permite cruzar las barreras naturales que existen entre las
especies y "colocar" genes de un organismo otro llamado hospedero,
empleando tcnicas de ingeniera gentica. Gracias a este avance, se pueden
producir fragmentos de cidos nucleicos a gran escala, abriendo as las puertas a la
secuenciacin de los cidos nucleicos y por ende a nuevas disciplinas como
el diagnstico molecular, la terapia gnica o la obtencin de organismos superiores
recombinantes..
Si pudisemos regresar en el tiempo, nos encontraramos con hechos que
contribuyeron en forma decisiva en el desarrollo de la biologa molecular, por
ejemplo:
En 1866 Mendel publica sus experimentos conducentes a los principios de
segregacin y clasificacin independiente de los genes.
En 1869 Frederick Miescher, cientfico suizo descubre en el ncleo de
las clulas una sustancia de carcter cido a la que llam nuclena.
En los aos veinte el qumico alemn Robert Feulgen, utilizando una tincin
especfica descubri que el DNA estaba situado en los cromosomas.
En 1944 Avery McCleod y Mc Carty comprueban que el DNA es el portador de la
informacin gentica.
En 1953 Watson y Crick deducen la estructura del DNA Este ltimo hecho dio la
pauta para nuevos descubrimientos que conduciran a lo que se llama tecnologa
del DNA Recombinante Hablando especficamente de DNA segn el modelo de
Watson y Crick, la molcula est constituida por dos largas cadenas de nucletidos
con polaridad opuesta, unidas entre s formando una doble hlice. Cada nucletido
est formado por :
1.- Molcula de azcar (desoxirribosa) 2.- Base orgnica nitrogenada: bases
pirimdicas (Citosina, timina), bases pricas (Adenina, Guanina).
3.- Grupos fosfato.
Los nucletidos se enlazan entre s a travs del grupo fosfato formando cadenas
muy largas, quedando las bases nitrogenadas en la parte central unidas cada una
al carbono 1 del azcar formando un ngulo recto con su eje.

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Las cadenas de poli nucletido que constituyen una molcula de ADN se mantienen
unidas entre s gracias a la formacin de puentes de hidrgeno entre las bases
nitrogenadas complementarias de ambas cadenas que quedan enfrentadas.
Estructura primaria del DNA

La estructura primaria viene dada por la secuencia de nucletidos. Cuando se quiere


representar la secuencia de un oligonucletido o de un cido nucleico, se representa
mediante la terminologa de cada una de las bases. Por ejemplo:
5 -ATCCCAGCCCGATTAAAGCC-3 Esta secuencia representa un oligonucletido
con veinte bases, de las cuales seis son Adenina (A), tres son Timina (T), ocho son
Citosinas (C) y tres son Guanina (G).
El orden de la secuencia es muy importante, ya que en l reside la informacin
contenida en el cido nucleico; la orientacin viene dada en el sentido 5 3 o 3 5 ; el 5
representa el extremo terminal del fosfato y el 3 el extremo final del tomo de
carbono de la desoxirribosa.
Estructura secundaria del DNA

El DNA es una doble hlice antiparalela ya que el enfrentamiento entre las bases
nitrogenadas es constante; la Adenina siempre se enfrenta con la timina formando
dos puentes de hidrgeno y la Guanina siempre se enfrenta con la Citosina
formando tres puentes de hidrgeno. Esta caracterstica provoca que las dos
cadenas sean complementarias. Las dos cadenas de la doble hlice tienen sentidos
opuestos, mientras una va en sentido 5 3 y la otra lo hace en sentido 3 5.
Estructura terciaria y cuaternaria del DNA

Recordemos que la longitud de una hebra de DNA humano es de varios metros, por
necesidad debe adoptar otras estructuras para poder estar en el interior de las
clulas. Estas estructuras, terciaria y cuarternaria, permiten el empaquetamiento del
DNA formando los cromosomas. En las clulas eucariotas existen varios
cromosomas y en los procariotas, existe un DNA empaquetado denominado
pseudocromosoma.

Aspectos bsicos de la Biologa Molecular

La aparicin de una serie de tcnicas englobadas dentro del trmino genrico


de Ingeniera gentica y referidas indistintamente como clonacin, DNA
recombinante o manipulacin gnica han sido la causa de pocas reas de la
biologa molecular permanezcan inalteradas. Antes del desarrollo de la ingeniera
gentica no era posible aislar un gen concreto eucaritico en cantidades suficientes
para su estudio molecular o el de su producto.
Una de las sustancias mas importantes y de participacin decisiva en distintos
procesos de la Biologa Molecular son las enzimas; existen varias que podemos
destacar

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Reaccin en cadena de polimerasa (PCR)

Es una tcnica que permite duplicar un nmero ilimitado de veces un fragmento de adn en un tubo de ensayo.
Mediante esta tcnica pueden generarse millones de molculas idnticas, a partir de una molcula de adn. Esto
se puede conseguir en unas horas.
La reaccin es muy sencilla, necesita cantidades de adn muy pequeas y slo se precisa un tubo de ensayo,
algunos reactivos, una fuente de calor y unas pequeas cadena de nucletidos que actan como cebadores.
La reaccin es un proceso cclico:
La molcula de adn que va a copiarse se calienta para que se desnaturalice y se separe las dos hebras.
Cada una de las hebras es copiada por la adn-polimerasa. (se utiliza la adn-polimerasa de una bacteria que vive
en aguas termales, thermus aquaticus, as la enzima puede trabajar a altas temperaturas).
Las cadenas recin formadas son separadas de nuevo por el calor y comienza otro nuevo ciclo de copias. Estos
ciclos se repiten hasta que se obtiene el nmero de copias deseado.

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TECNICA DE SECUENCIAMIENTO DE ADN (SANGER)

En 1975, Frederick Sanger desarroll el mtodo de secuenciacin de ADN conocido


como mtodo de Sanger. Dos aos ms tarde emple esta tcnica para secuenciar el genoma
del bacterifago Phi-X174, el primer cido nucleico secuenciado totalmente en la historia.
Realiz este trabajo manualmente, sin ayuda de ningn automatismo. Este trabajo fue base
fundamental para proyectos tan ambiciosos como el Proyecto Genoma Humano, y por l se le
concedi su segundo Premio Nobel en 1980, que comparti con Walter Gilbert.
El mtodo de secuenciacin por dideoxinucletidos, ms conocido como el mtodo Sanger se
basa en el proceso biolgico de la replicacin del ADN. El mtodo de secuenciacin ideado por
Sanger se basa en el empleo de dideoxinucletidos que carecen del grupo hidroxilo del carbono
3', de manera que cuando uno de estos nucletidos se incorpora a una cadena de ADN en
crecimiento, esta cadena no puede continuar elongndose. Esto sucede porque la ADN
polimerasa necesita un grupo terminal 3 OH para aadir el siguiente nucletido y el
dideoxinucletido incorporado carece de este grupo hidroxilo.
El mtodo comienza una vez que se asla y se clona el ADN que se desea secuenciar. Este DNA
se desnaturaliza y se emplea una sola hebra para la secuenciacin. En la secuenciacin se
utiliza un cebador (denominado primer en ingls), que se encarga de suministrar el terminal
3OH que necesita la ADN polimerasa para comenzar a elongar. Se preparan cuatro tubos de
reaccin, cada uno con el ADN molde de hebra sencilla que se desea secuenciar, con ADN
polimerasa, con el primer y con los cuatro nucletidos trifosfatados.
A cada tubo se le aade una pequea proporcin de un dideoxinucletido trifosfato; un tubo con
ddATP, otro con ddTTP, el tercero con ddGTP y el cuarto con ddCTP. En cada uno de estos
tubos se producen cadenas de ADN de distintas longitudes, todas las cuales terminan en el lugar
en el que se incorpor el dideoxinucletido correspondiente aadido al tubo. Los productos de
las 4 reacciones, cada una conteniendo una pequea cantidad de uno de los cuatro
dideoxinucletidos, se cargan en un gel de agarosa y se someten a electroforesis. As
obtendremos un patrn de bandas en orden, del cual es posible deducir la secuencia del ADN
introducido.

Secuenciacin Sanger por electroforesis capilar

La secuenciacin por el mtodo de Sanger ms llevada a cabo en la actualidad, emplea la


electroforesis capilar, permitiendo su automatizacin.
Implica una previa fragmentacin del ADN a secuenciar, seguido de la amplificacin de estos
fragmentos mediante la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). A continuacin se adopta el
mtodo Sanger: cada fragmento acabado en didesoxinucletido est marcado
fluorescentemente, de manera que cada didesoxinucletido (dATP, dCTP, dGTP, dTTP) implica
un color de fluorforo diferente. De este modo, se produce una "escalera" de ADN de fragmentos
que difieren en una base de longitud.
Posteriormente, cada fragmento marcado se separar por tamao por electroforesis capilar, con
deteccin automatizada de los fragmentos de ADN marcados fluorescentemente,
proporcionando la secuencia ordenada de los fragmentos en cromatogramas.
La secuencia del ADN inicial a partir de los fragmentos de ADN secuenciados, se deduce
bioinformticamente por anlisis de secuencias solapadas de los fragmentos de ADN.

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Aplicaciones de la secuenciacin por electroforesis

capilar[editar]

La secuenciacin de ADN por electroforesis capilar incluye las siguiente aplicaciones: deteccin
de SNPs ("single nucleotide polymorphisms"), anlisis de polimorfismos de conformacin de
cadena simble (SSCP) y anlisis de las repeticiones cortas en tndem (STR).

Pasos de la secuenciacin[editar]

Amplificacin
Amplificacin por PCR de los fragmentos de ADN en un termociclador, aadiendo dNTPs
marcados con fluorforos al mix estndar.

Purificacin
Para eliminar los componentes del mix de PCR, dejando nuestro ADN amplificado puro. Puede
ser llevado a cabo por kits de purificacin comerciales.

Electroforesis capilar
Los fragmentos de ADN se inyectan en el capilar de electroforesis, y los picos de fluorescencia
correspondientes a cada nucletido, llegarn a un detector en tiempo real, y cuyos datos se
pueden transformar informticamente en un cromatograma que nos dar los datos de la
secuencia de nuestra muestra de ADN
ELECTROFORESIS DEL ADR Y ARN

Electroforesisi del ADN

La electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida es una de las metodologas ms

utilizadas en el laboratorio en todo lo relacionado con el trabajo con cidos nucleicos.

Mediante la electroforesis podemos separar fragmentos de ADN y ARN en funcin de su

tamao, visualizarlos mediante una sencilla tincin, y de esta forma determinar el contenido

de cidos nucleicos de una muestra, teniendo una estimacin de su concentracin y grado de

entereza. Podemos adems extraer del gel los fragmentos de ADN que sean de inters, para

posteriormente utilizarlos en diferentes aplicaciones. La electroforesis de ADN fue, y sigue

siendo, una herramienta de importancia primordial en el desarrollo de las tcnicas del ADN

recombinante o ingeniera gentica. La idea de utilizar la tcnica de electroforesis a travs de

una matriz para analizar muestras de ADN corresponde a Vin Thorne, un bioqumico del

Instituto de Virologa de Glasgow, quien a mediados de los aos 60 del pasado siglo estaba

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interesado en caracterizar las distintas formas de ADN que se obtenan de partculas

purificadas de polyomavirus. Su razonamiento era que una combinacin de fuerzas elctricas

y de friccin permitira el desplazamiento y separacin en funcin del tamao o topologa de

diferentes molculas de ADN. ste es exactamente el principio en que se basa la

electroforesis de cidos nucleicos. Sometidos a un campo elctrico, la carga neta negativa del

ADN y el ARN har que estos se muevan en direccin al nodo (Figura 1A). Si se fuerza a los

cidos nucleicos a moverse a travs de un gel formado por una malla tridimensional de un

polmero como la agarosa, la friccin har que las molculas de mayor tamao migren con

ms lentitud, mientras las de menor tamao avanzan ms en el gel, permitiendo que las

diferentes molculas se separen en funcin de su tamao. Del mismo modo, molculas de

ADN o ARN con topologas o estructuras tridimensionales diferentes tambin se comportarn

de forma diferente ante la friccin con la malla del polmero, permitiendo su separacin.

Mediante la electroforesis en gel de agarosa, Thorne logr separar y visualizar tres formas

topolgicas diferentes del ADN del polyomavirus: superenrrollada, relajada y lineal, tras

haber marcado el ADN con [3H] timidina (Thorne 1966, 1967). El trabajo de Thorne recibi

poca atencin hasta principios de los aos 70, cuando el empleo de enzimas de restriccin

permiti el anlisis de molculas de ADN mucho ms grandes que los genomas virales.

Tambin result de gran importancia el desarrollo de mtodos no radiactivos de tincin del

ADN con suficiente sensibilidad para detectar cantidades de ADN del orden de nanogramos e

inferiores. La utilizacin de bromuro de etidio para la deteccin de ADN en geles se

desarroll independientemente por dos grupos (Aaij y Borst 1972, Sharp et al. 1973), cuyos

mtodos siguen utilizndose hasta hoy sin apenas variaciones. La electroforesis de ADN

puede realizarse en geles de agarosa o de poliacrilamida. Ambos tienen caractersticas

diferentes en cuanto a sus propiedades y modo de preparacin, por lo que se utilizar uno u

otro en funcin de la aplicacin y objetivos que persigamos. La electroforesis en geles de

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agarosa es el mtodo estndar para separar y purificar fragmentos de ADN cuando no

requerimos un alto poder de resolucin. Por su parte, la electroforesis en geles de

poliacrilamida, aunque tiene una mayor limitacin en cuanto al tamao de los fragmentos que

podemos separar (5-600 pb), posee un poder de resolucin mucho mayor, permitiendo la

separacin de molculas que difieren en un slo par de bases. Los geles de poliacrilamida se

corren de forma vertical y tienen la desventaja de ser ms complicados en su elaboracin y

manipulacin. Electroforesis de ADN 29 Los geles de agarosa tienen un poder de resolucin

mucho menor que los de poliacrilamida, porque no permiten separar molculas de ADN que

difieren en tamao menos de unas 50 pb. Sin embargo, el rango de tamaos que pueden

separarse es mucho mayor en un gel de agarosa (molculas desde 50 pb hasta unas 40 kb)

dependiendo de la concentracin del mismo (0.3-2% p/v); cuanto ms baja es la

concentracin de agarosa mayor es el tamao de las molculas que pueden separarse, y

viceversa. Este rango de tamaos hace a los geles de agarosa ideales para analizar el producto

de digestiones con enzimas de restriccin, lo que puede combinarse con otras tcnicas como

el Southern blot, as como para analizar los productos de una reaccin de PCR. Los geles de

agarosa convencionales se corren en una cmara de electroforesis horizontal, con un campo

elctrico uniforme y constante. La electroforesis en gel de agarosa tiene un lmite superior de

unas 40-50 kb en el tamao de las molculas de ADN que puede separar. Por lo tanto, no es

posible separar el producto de digestiones con enzimas de restriccin de corte infrecuente,

como NotI o SfiI, y menos an separar cromosomas enteros (los cromosomas de eucariotas

inferiores tienen tamaos de entre 0.2 y 12 Mb). Reducir la concentracin de agarosa hasta un

0.1 o 0.2% puede incrementar el lmite de separacin hasta los 750 pb, sin embargo estos

geles son extremadamente frgiles y muy difciles de manipular. Esta limitacin de tamaos

se super con el desarrollo de una tcnica denominada electroforesis en gel de campo pulsado

Esta tcnica fue descrita inicialmente por Schwartz y Cantor (1984), quienes construyeron un

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aparato de electroforesis ortogonal en el cual dos campos elctricos en ngulo sobre el gel

funcionaban de forma alterna. El fundamento de esta tcnica es la reorientacin de las

molculas cuando cambia la direccin del campo elctrico; en la electroforesis convencional

las molculas de ADN de gran tamao quedan atrapadas en la malla que forma la agarosa

en su avance a travs del gel, pero la aplicacin de dos campos elctricos alternantes en

ngulo permite una reorientacin de las molculas que de esta forma avanzarn un tramo ms,

antes de quedar de nuevo atrapadas. Cuanto ms grandes son las molculas mayor debe ser la

duracin de los campos elctricos alternos para permitir la reorientacin y en ltima instancia

la separacin de las mismas.

a) Obtencin de las muestras de ADN

b) Preparacin del gel de agarosa

c) Preparacin de las muestras con el buffer de carga

d) Carga de las muestras

e) Corrida del gel

g) Visualizacin del gel con luz ultravioleta y anlisis de resultado

f) Teido del gel* Etapas de la tcnica * Slo en caso de no utilizarse bromuro de etidio en el

gel

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