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Milieu Chapman

Le milieu de Chapman est un milieu slectif, surtout utilis en microbiologie mdicale, permettant la croissance des germes halophiles. Parmi ces germes figurent au
premier rang les bactries du genre Staphylococcus, mais aussi les Micrococcus, les Enterococcus, les Bacillus, et de rares bactries Gram ngatif.

Aspect du milieu avant utilisation Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats

L'ensemencement doit tre massif, en Ce milieu contient un inhibiteur : fortes On peut tudier la fermentation Les colonies mannitol +
stries serres ou par inondation concentrations en chlorure de sodium (75 g.L- du mannitol par virage au sont entoures dune
1
), ce qui permet un isolement slectif de jaune de lindicateur color, le aurole jaune.
Staphylococcus tolrant les fortes concentrations rouge de phnol, autour des
en NaCl colonies. Ne pas confondre la
pigmentation des
colonies et le virage de
lindicateur color.

Ainsi des colonies


Aspect du milieu aprs utilisation
pigmentes en jaunes et
mannitol + : forte
suspicion de S. aureus
Milieu Hektoen

La glose Hektoen est un milieu d'isolement des Salmonelles et des Shigelles, bien que de nombreuses bactries Gram ngatif puissent se dvelopper sur ce milieu.
L'identification d'entrobactries pathognes repose sur la non utilisation des glucides prsents dans le milieu.

Aspect du milieu avant utilisation Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats

L'ensemencement se fait par Deux indicateurs sont trois types de glucides : la Colonies saumon : Escherichia, Levinea,
les techniques habituelles. prsents dans le milieu : salicine (qui est un Citrobacter diversus, Klebsiella, Enterobacter,
htroside), le saccharose et Serratia, Yersinia
- le bleu de bromothymol le lactose.
(indicateur de pH) Colonies saumon centre noir : Citrobacter
La production d'H2S partir freundii, Proteus vulgaris,
- la fuschine acide (qui se de thiosulfate
colore en prsence Colonies bleu-vert centre noir : Suspicion de
d'aldhyde. Salmonella, diffrencier de Proteus mirabilis

Colonies bleu-vert ou vertes : Suspicion de


Aspect du milieu aprs utilisation Shigella ou de Salmonella
Glose SS

Glose Salmonella-Shigella.

Milieu slectif permettant lisolement d'entrobactries pathognes.

Il est trs utilis pour la recherche de Salmonella dans les selles et les denres alimentaires peu pour les Shigella car trop slectif.

Aspect du milieu avant utilisation Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
Isolement par la mthode des Le milieu contient 3 Le milieu contient du colonies rouges : lactose +
cadrans. inhibiteurs : lactose pouvant tre
ferment. colonies incolores : lactose
Incuber 18 24 h 37C. - sels biliaires,
Le milieu contient du colonies centre noir : H2S +
- vert brillant thiosulfate pouvant donner
du H2S.
- forte concentration en
citrate de sodium.
Aspect du milieu aprs utilisation
Ceux-ci empchent la
pousse de toutes bactries
Gram+, et rendent difficile la
croissance des bactries
Gram- autres que
Salmonella et Shigella.
- Milieu EMB

Milieu Eosine Bleu de Mthylne.

Milieu d'isolement des bacilles Gram-.

Il est trs utilis pour lisolement des coliformes.

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Isolement par la mthode Ce milieu contient deux colorants, Le milieu contient un colonies violettes : semi-bombes de 2 3mm
des cadrans. losine et le bleu de mthylne critre de diffrenciation, le de diamtre avec clat mtallique, centre
qui inhibent la majeure partie de la lactose sombre : E. coli trs bombes muqueuses de
flore Gram+ (sauf Streptocoques diamtre 5 mm centra gris marron sans reflet
D). Bien que les Entrobactries Klebsiella
lactose - puissent sy dvelopper,
la culture des Entrobactries colonies gristres :
lactose + y est favorise. - 1 2 mm de diamtre transparentes, grises
ambres : Salmonella, Shigella.
Aspect du milieu aprs
utilisation - 2 mm de diamtre, gristres avec une pellicule
autour de la colonie : Proteus morganii

punctiformes et gristres : Enterococcus.


- Milieu Mac Conkey

Milieu slectif pour l'isolement des bacilles Gram- Salmonella et Shigella ainsi que des bactries coliformes dans les eaux, les produits alimentaires, les produits
pharmaceutiques et biologiques .

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Mode Slectivit / Caractres


Rsultats
utilisation utilisation densemencement composition recherchs

Isolement par la Ce milieu contient le lactose dont colonies rouges entoures dun hlo
mthode des deux inhibiteurs de lutilisation est opaque de la mme couleur du la
cadrans. la flore Gram+ : rvle par prcipitation des sels biliaires:
lindicateur color lactose+
Incuber 18 24 h - les sels biliaires du milieu, le rouge
37 C. neutre. colonies jaunes ou incolores : lactose-
- le cristal violet
- Milieu CLED

Le milieu CLED (Cystine Lactose Electrolyte Dficient) est un milieu non slectif, trs utilis dans l'tude des bactries contenues dans l'urine. Etant un milieu non slectif
de nombreuses bactries, tant Gram + que Gram -, pourront se dvelopper.

Labsence dlectrolytes (pas de NaCl) limite le phnomne denvahissement par les Proteus.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Mode Slectivit / Caractres


Rsultats
utilisation utilisation densemencement composition recherchs
La lecture s'effectue Lactose lactose + apparaissent jaunes
aprs 18 24 heures
d'incubation 37C. lactose apparaissent bleues vertes
- Milieu BCP

Cest un milieu utilis pour la dtection et lisolement des entrobacteriaces dans leau, les produits alimentaires, lurine et les selles

Ce milieu facilite la diffrenciation des colonies par le caractre lactose. Il inhibe lenvahissement de la surface de la boite par des nappes de Proteus car il ne contient pas
d'lectrolytes.

Cest un milieu non slectif qui est utilis pour lisolement de nombreuses espces nappartenant pas aux entrobactries.

Cest un milieu contenant une base nutritive ordinaire permettant la pousse des bactries non exigeantes.

Il contient un critre de diffrenciation : la fermentation du lactose rvle par le virage en milieu acide de lindicateur color de pH, le bromocrsol pourpre.

Il est dficient en lectrolytes : absence d'ions minraux.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Slectivit / Caractres


Mode densemencement Rsultats
utilisation utilisation composition recherchs
Isolement - Non selectif - Espces Colonies bleues : bactries
nappartenant pas lactose
18 24 h 37C - Dpourvu en aux entrobactries
lectrolyte Colonies jaunes : bactries
- Fermentation du lactose +
- Bromocrsol lactose
pourpre
- Milieu Baird Parker

Recherche et dnombrement de Staphylococcus aureus

Ce milieu contient une base nutritive riche.

Il contient des acclrateurs de la croissance : le pyruvate de sodium et le glycocolle

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Mode Slectivit / Caractres


Rsultats
utilisation utilisation densemencement composition recherchs
Isolement Il contient 2 Contient 3 critres
inhibiteurs : de diffrenciation :
18 24 h 37C
le chlorure de rduction du tellurite
lithium
en tellure noir
protolyse des
le tellurite de protines du jaune
potassium. d'uf halo clair autour de la colonie

hydrolyse par une liser blanc opaque autour de la


lcithinase des colonie
lcithines du jaune
d'uf
- Milieu BEA

Milieu d'isolement slectif des Streptocoques D (entrocoques et non entrocoques).

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Mode Slectivit / Caractres


Rsultats
utilisation utilisation densemencement composition recherchs
Le milieu prsent Cest un milieu lesculine rvle
en boite de Ptri est slectif des par le citrate de fer
destin un streptocoques peu ammoniacal Pousse de petites colonies sur le
isolement. exigeants.
milieu Streptocoques D

Le milieu prsent Il contient 2


Colonies entoures d'un halo noir :
en tube est beurrer inhibiteurs :
esculine +
avec une culture
pure car il entre dans - la bile de buf
la galerie
didentification des
- lazide de sodium
coques gram + de
culture facile.
- Glose au sang

Cest un milieu disolement enrichi sur lequel les Streptocoques se dveloppent bien. Il permet, la lecture du caractre hmolytique.

Cest un milieu riche dautant plus par la prsence de sang.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Mode Caractres


Rsultats
utilisation utilisation densemencement recherchs
Isolement Hmolyse Hmolyse : zone claire dhmolyse
totale de diamtre 3-4 mm entourant
18 24 h 37C les colonies.

Hmolyse : zone floue et granuleuse,


verdtre de 1 2 mm de diamtre
- Milieu Slanetz

Milieu de dnombrement des entrocoques en microbiologie alimentaire. Son emploi est surtout rserv aux eaux, aprs filtration.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs Mode Slectivit / Caractres


Rsultats
utilisation utilisation densemencement composition recherchs
Isolement Il contient un le TTC qui lors de sa Les Entrocoques donnent des
inhibiteur des gram - rduction donne une colonies de taille moyenne, roses ou
Filtration , qui slectionne les coloration des rouges.
Streptocoques : bactries en rouge.
lazide de sodium. Les Bacillus peuvent pousser et
donner le mme aspect de colonies,
mais de taille plus importante.
- Milieu Ctrimide

La glose au ctrimide est un milieu slectif, qui permet l'isolement des Pseudomonas et notamment de P.aeruginosa. Ce milieu glos est relativement pauvre, et contient
un antiseptique: le ctrimide (bromure de N-ctyl-N, N, N-trimthylammonium). Ce milieu, proche du milieu King A, favorise aussi la production de pigments par
P.aeruginosa.

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Ensemencer la surface du Sur ce milieu de trs -pyoverdine Milieu bleu : pyocyanine
milieu au moyen de l'anse. nombreuses bactries sont
inhibes de par la prsence -pyocyanine Milieu jaune- vert : pyoverdine
Incuber durant 24 heures de l'antiseptique
37C, voire mme de ctrimide(bromure de N-
prfrence 42C ctyl-N, N, N-
(l'incubation 42C permet trimthylammonium)., ainsi
un isolement spcifique de que par la prsence de
P.aeruginosa). l'antibiotique acide
Aspect du milieu aprs nalidixique (inhibiteur de
utilisation nombreuses bactries
Gram ngatif).
- Glose Sabouraud

La glose de Sabouraud constitue un milieu classique pour la culture, l'isolement et l'identification des levures et des moisissures saprophytes ou pathognes.

Elle est recommande essentiellement pour l'isolement des moisissures dans les prlvements peu chargs en bactries, les contrles de strilit des produits pharmaceutiques,
cosmtiques ou alimentaires, la culture des moisissures en vue de raliser leur identification.

Dans le cas de prlvements fortement contamins, il est prfrable d'utiliser la glose Sabouraud + chloramphnicol .

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition
utilisation
- Transfrer l'chantillon analyser sur le milieu. L'ajout de triphnylttrazolium raison de 100
mg par litre en fait un milieu de diffrenciation
- Etaler l'inoculum en surface l'aide d'un taleur en verre strile. pour les Candida.

- Incuber 20 - 25C de 3 5 jours.

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose Sabouraud plus chloramphnicol

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs
utilisation
- Transfrer l'chantillon analyser sur le milieu. Chloramphnicol Recherche des champignons

- Etaler l'inoculum en surface l'aide d'un taleur en


verre strile.

- Incuber 20-25C de 3 5 jours.

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose CIN

Milieu d'isolement slectif des Streptocoques D (entrocoques et non entrocoques).

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Isolement. 2 inhibiteurs permet de lesculine rvle par le Pousse de petites colonies sur le milieu
slectionner la culture des citrate de fer ammoniacal Streptocoques D
streptocoques du groupe D.:
Colonies entoures d'un halo noir : esculine +
- la bile de buf

lazide de sodium

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose au lait

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Faire une strie centrale la hydrolyse de la Lhydrolyse de la casine se traduit par
surface du milieu. casine lapparition dune zone claire autour de la culture.

Incuber 24H 7jours la


temprature dsire.

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose lamidon

Aspect du milieu avant Slectivit /


Mode densemencement Caractres recherchs Rsultats
utilisation composition
Ensemencer par une strie lhydrolyse de lamidon. Hydrolyse mise en vidence par lajout dune
la surface du milieu. solution iode :

Incuber un huit jours la - une coloration bleu-rouge due lamidon,


temprature dsire. montre quil na pas t hydrolys

Aspect du milieu aprs - la disparition de cette coloration montre


utilisation son hydrolyse.
Glose loeuf

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Faire une strie la surface La lcithinase l'action de la lcithinase libre de la choline soluble et
du milieu, ou ventuellement un diglycride peu soluble qui prcipite dans le
des touches. milieu provoquant un hlo autour de la culture

Incuber pendant 24 h ou plus


37C.

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose Drigalski

Milieu slectif permettant lisolement des bactries Gram- non exigeantes. Il est utilis pour lisolement des germes urinaires et pour la coproculture

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Isolement par la mthode des Contient deux inhibiteurs de Fermentation du lactose Les colonies de bactries lactose + sont jaunes.
cadrans. la flore Gram+ :
Celles de bactries lactose sont bleues.
- le dsoxycholate de sodium

- le cristal violet

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose TSN

Milieu de dnombrement des anarobies sulfito-rducteurs (spores de Clostridium sulfito-rducteurs et Clostridium perfringens) dans les produits alimentaires.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation utilisation
Isolement La temprature Rduction par le fer du - les anarobies sulfito-rducteurs : 37C
dincubation permet de sulfite de sodium
Lincubation se fait en slectionner les difrents - Clostridium perfringens 46C
anarobiose. types bactrien.
Colonies rouges colonies sulfito
rductrices

Glose TCBS

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Ensemencer partir de la La forte concentration en Recherche et l'isolement des - Colonies jaunes (Vibrions saccharose +)
selle. Incuber 24 heures bile et en citrate, associe vibrions pathognes prsents
37C. un pH lev (pH = 8,6) dans les prlvements poly - Colonies vertes (Vibrions saccharose -)
permet l'limination de microbiens
nombreuses bactries
- Petites colonies jaunes

- Petites colonies vertes

Colonies centre noir : colonies H2S +.


Aspect du milieu aprs
utilisation
- Glose lADN

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Percer la glose de trous. la DNase thermo rsistante de halo rose signant la DNase autour des trous percs
Staphylococcus sur le fond bleu de la glose
Inoculer avec quelques
gouttes d'un bouillon creur-
cervelle ensemenc
auparavant et bouilli 10
minutes.

Aspect du milieu aprs Incuber 4 heures 37 oC.


utilisation
- Glose lactose au dsoxycholate 0.1%

Milieu de dnombrement des coliformes en microbiologie alimentaire (analyse des eaux et des aliments).

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
- Isolement 2 inhibiteurs des bactries Gram+ le lactose Colonies rouges bactries lactose+ , coliformes
faible concentration :
Colonies incolores bactries lactose-
- le dsoxycholate (sels biliaires)

- le citrate de sodium.

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Milieu Muller Hinton

Aspect du milieu avant Aspect du milieu Mode Slectivit /


Caractres recherchs Rsultats
utilisation aprs utilisation densemencement composition
selon le cas : Lamidon neutralise les Sensibilit au
inhibiteurs apports par antibiotiques et au
- isolement la glose compos O 129

- ensemencement en
nappe avec inoculum
- Glose nutritive ordinaire

Aspect du milieu avant utilisation Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
Ensemencement par Ces milieux permettent la - Certaines colonies peuvent avoir des couleurs
isolement. culture des bactries peu caractristique.
exigeantes

Aspect du milieu aprs utilisation


- Milieu Todd Hewit

Ce milieu glucos tamponn convient bien la culture des bactries exigeantes supportant mal les variations de pH, il est bien adapt la culture des Streptocoques.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation utilisation
Ensemencement par systme tampon
isolement. (phosphates,
bicarbonates) permet
dempcher que lacide
form par le mtabolisme
du glucose nexerce une
action nuisible sur les
bactries
- Milieu TTC tergitol

Milieu de recherche et de dnombrement des coliformes. Il est surtout utilis pour la colimtrie des eaux par la mthode de filtration.

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
Filtration le Tergitol 7 permettant de - le TTC qui montre le - colonie rose-rouge : rduction du TTC
slectionner les coliformes et pouvoir rducteur des
inhibe aussi lenvahissement bactries - colonie jaune : absence de rduction du TTC
par Proteus
- le lactose dont lutilisation - halo bleu-vert : lactose
est rvle par le virage du
bleu de bromothymol - halo jaune : lactose +

E. coli et Enterobacter aerogenes donnent des


Aspect du milieu aprs
colonies jaunes
utilisation

Les autres coliformes donnent des colonies


rouges.
- Glose au sang cuit

Cest un milieu disolement enrichi prconis pour ltude des Neisseria notamment le mningocoque. Il est aussi utilis pour la culture de Haemophilus influenza.

Aspect du milieu avant


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation
- Isolement Lamidon de mas neutralise
les substances toxiques
libres par les cultures.

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Glose Mossel

Milieu utilis en alimentaire pour lisolement de Bacillus cereus.

Aspect du milieu avant Caractres


Mode densemencement Slectivit / composition Rsultats
utilisation recherchs
Etaler une goutte de produit udier et Assur par la polymyxine qui inhibe Croissance ou Si il y a croissance alors prsence
au rateau, avec des billes ou par ou retarde la croissance dautre absence de la souche Bacillus cereus :
inodation espces. colonie
croissance de colonie
mannitol lcthinase - roses rouges (mannitol -)
+
- halo blanchtre au centre de la
colonie (lcithinase +)

Aspect du milieu aprs


utilisation
- Milieu Hajna-Kligler

Le milieu de Hajna-Kligler est un milieu complexe, qui permet la recherche de plusieurs caractres biochimiques. Il est trs utilis dans l'identification des
Enterobacteriaceae.

Aspect du
Slectivit /
milieu avant Aspect du milieu aprs utilisation Mode densemencement Caractres recherchs Rsultats
composition
utilisation
Ensemencer abondamment la surface par Utilisation du glucose a) Bactrie de type fermentatif du
stries serres ou par inondation, puis le glucose et lactose + : culot jaune et
culot par simple piqre, l'aide de la Utilisation du lactose pente jaune.
mme pipette boutonne. Il est
important de ne pas oublier de dvisser Production H2S b) Bactrie de type fermentatif du
partiellement la capsule afin de glucose et lactose - : culot jaune et
permettre les changes gazeux. pente rouge.
Production de gaz
Mettre l'tuve 24h 37C. c) Bactrie de type oxydatif du
Recherche de la LDC
glucose ou glucose - et lactose - :
culot rouge et pente rouge.

d) Bactrie de type oxydatif du


glucose et lactose + : culot rouge et
pente jaune. Ces bactries sont
arobies strictes : le culot ne doit pas
prsenter de culture et sera donc
rouge. La pente peut prsenter une
culture et sera jaune si l'acidification
est suffisante et rouge dans le cas
contraire. Le milieu de Kligler n'est
gnralement pas utilis pour de
telles bactries, qui sont souvent
lactose -, et des expriences
complmentaires sont faites pour
prciser le rsultat.

- Milieu Lysine Fer

Ce milieu peut tre utilis en routine mais il est gnralement utilis pour lidentification des souche de Salmonella.

Aspect du
Aspect du milieu aprs Slectivit /
milieu avant Mode densemencement Caractres recherchs Rsultats
utilisation composition
utilisation
Pratiquer lensemencement la pente La lysine dsaminase Pente violette, culot jaune : bactrie LDA -,
ave des stries et le culot par piqure (LDA) LDA -, H2S
centrale
La lysine dcarboxylase Pente violette, culot violet : bactrie LDA
(LDC) LDC +, H2S - , K. pneumoniae, K. oxytoca,
Enterobacter (sauf cloacae), Serratia, E.
La production dH2S coli, S. typhi.

Pente violette, culot jaune : bactries LDA


-, LDC H2S ou + Escherichia, Shigella,
E. cloacae, K. rhinoscleromatis, Citrobacter,
S. parathyphi A, Yersinia, Levinea, E. coli
(biotype LDC -)
Pente violette, culot violet avec
noircissement : bactrie LDA LDC +, H2S
+ , Salmonella H2S + y compris S. arizonae,
Edwardsiella

Pente rouge vineux, culot jaune : bactries


LDA +, LDC H2S ou + Proteus
Providencia
- Milieu citrate de Simmons

Ce milieu est un exemple de milieu synthtique, c'est dire de milieu dont la composition, qui est complexe, est connue exactement tant qualitativement que
quantitativement

Aspect du milieu Aspect du milieu aprs


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
avant utilisation utilisation
La pente est ensemence Utilisation du citrate - Virage de l'indicateur de pH au bleu : il y
par une strie longitudinale, comme seule source de a eu alcalinisation du milieu et la souche
ralise l'anse, partir carbone est citrate de Simmons +.
d'une suspension de la
culture solide en eau - Pas de virage de l'indicateur de pH : il n'y
distille strile. a pas eu alcalinisation et le milieu ne
prsente pas de culture. La souche est
Il est important de ne pas citrate de Simmons -.
apporter de substrats
carbons. Ainsi
l'ensemencement partir
d'une souche pure
fournie en bouillon
nutritif ou en eau
peptone est impossible.

Ne pas visser le bouchon


fond, afin de permettre les
changes gazeux (en
particulier limination du
dioxyde de carbone).

Mettre l'tuve 24 heures


37C.
- Milieu phnylalanine

Milieu utilis pour la recherche de la phnylalanine dsaminase. Le phnylpyruvate donne une teinte verte en prsence de fer III.

Aspect du milieu Aspect du milieu aprs


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
avant utilisation utilisation
La pente par puissement La PDA : phnylalanine Pente verte aprs ajout de perchlorure de
dsaminase fer : PDA +

Pente inchange aprs ajout de perchlorure


de fer : PDA -
- Milieu Clark et Lubs

Ce milieu permet ltude de la voie de fermentation du glucose.

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation utilisation
Ensemencer largement. soit de nombreux Test VP :
acides par la voie des
Incuber 24 h tC fermentations acides - rouge : VP+
optimale. mixtes qui sont mis en
vidence par le test RM - jaune : VP-
* test VP : (au rouge de mthyl),
Test RM
- ajouter 10 gouttes soit dactone produit
dalpha naphtol et le par fermentation
butanediolique qui est - rouge : RM+
mme volume de soude
concentre (ou de mise en vidence par le
test VP (Voges- - jaune : RM-
potasse).
Proskauer)
- incliner le tube pour
permettre une bonne
oxygnation.

- attendre quelques min


1 heure.

* test RM :

- ajouter 2 3 gouttes de
rouge de mthyl,

- la lecture est immdiate.


- Milieu viande-foie

L'tude du type respiratoire d'une bactrie (c'est dire ses rapports avec l'O 2) ncessite un milieu de culture riche contenant un gradient de pression partielle en di-oxygne.

Le principal milieu utilis cette fin est la glose viande-foie (glose VF).

Aspect du milieu avant Aspect du milieu aprs


Mode densemencement Slectivit / composition Caractres recherchs Rsultats
utilisation utilisation

- rgnre la glose VF Type arobie strict : culture seulement en


par bullition au bain- prsence de di-oxygne.
marie bouillant pendant
environ 30 minutes. Type aro-anarobie : culture en prsence
et en absence de di-xoygne. La technique
- ensemencer lorsque le utilise ne permet pas de diffrencier entre
milieu est encore liquide, les bactries aro-anarobies facultatives
vers 45C. et les bactries anarobies aro-tolrantes.
L'ensemencement se fait On conclut type aro-anarobie.
la pipette Pasteur
scelle (ou boutonne) et Type anarobie strict : culture
charge. On introduit la uniquement en l'absence de di-oxygne.
pipette Pasteur au fond
du tube et on remonte en
Type micro-arophile : culture seulement
spirale.
dans une zone de pression faible en di-
oxygne.
Ne pas visser le
bouchon fond, sinon
on empche la
formation du gradient
de O2.

- refroidir leau
courante,

- on place ensuite le tube


l'tuve ( 37C) pendant
24 heures.