CONSTRUINDO
FLORES
PESQUISA
A uniformidade estrutural
das plantas
Uma idia unificadora em biologia
vegetal que a variedade de formas dos
vegetais reflete simplesmente variaes
de um plano de desenvolvimento co-
mum. Diferentes permutaes de umas
poucas caractersticas-chave do desen-
volvimento vegetal podem gerar um uni-
verso de formas distintas. Provavelmente
no h ilustrao melhor deste princpio
do que a comparao entre uma flor e um
ramo. A noo de que estas duas estrutu-
ras poderiam ser fundamental-
mente equivalentes foi exem-
plificada pela primeira vez pelo
famoso naturalista e poeta Go-
ethe (o mesmo que escreveu
Fausto), em um tratado sobre
a metamorfose, h mais de 300
anos. Goethe concluiu que As
flores que se desenvolvem das
gemas devem ser vistas como
ramos ou plantas inteiras, inse-
ridas na planta-me, como esta
est inserida na terra (Goethe,
1790). Comparando-se flores e
ramos, quatro detalhes preci-
sam ser esclarecidos. Primeiro,
as diferentes partes de uma flor
(spalas, ptalas, estames e car-
pelos) so os equivalentes de
folhas em um ramo. Segundo, os rgos
de ramos e flores so separados por
entrens, mas no caso das flores, estes
so to curtos que raramente so visveis.
Terceiro, os rgos dos ramos e das flores
podem ter uma filotaxia distinta, ou seja,
so diferencialmente arranjados ao redor
de um eixo. Finalmente, o crescimento
indeterminado que caracteriza um ramo
suprimido, no caso de uma flor, tanto
apicalmente, porque uma flor, em geral,
pra de produzir rgos ao redor do eixo
central, quanto lateralmente, pois novos
brotos no surgem nas axilas dos rgos
44 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento
phD pela Universit de Paris XI (France)
Pesquisador do Departamento de Cincias
O controle molecular da arquitetura floral
florais, como pode acontecer nas axilas
das folhas dos ramos.
Portanto, a comparao entre flores e
ramos aponta quatro variveis importan-
tes: a identidade dos rgos produzidos,
o tamanho do entren, a filotaxia e a
determinao do crescimento. Desse
modo, as inmeras formas e hbitos
visveis das plantas simplesmente refle-
tem variaes e permutaes desses qua-
tro aspectos fundamentais do desenvol-
vimento. Quais os princpios criadores e
reguladores desses parmetros? Eles po-
deriam ser manipulados pelo Homem?
Figura 1: A flor de arabidpsis
(Arabidopsis thaliana) do tipo
selvagem possui 4 spalas (no
visveis nesta foto), 4 ptalas bran-
cas, 6 estames e um gineceu com-
posto por 2 carpelos unidos
O desenvolvimento de ramos e flores
depende do comportamento das regies
de proliferao celular na planta, os me-
ristemas apicais. Na periferia dos meriste-
mas, grupos de clulas so arregimenta-
dos para formar meristemas secundrios
Marcelo Carnier Dornelas
Florestais da Escola Superior de
Agricultura Luiz de Queiroz - USP
mcdornel@carpa.ciagri.usp.br
Fotos cedidas pelo autor
ou primrdios de rgos. A filotaxia
depende do padro preciso em que ocor-
re essa repartio. A determinao tam-
bm reflexo desta partio, principal-
mente se ela favorece a continuidade do
meristema ou a formao de primrdios.
A identidade dos rgos formados de-
pende das caractsticas do desenvolvi-
mento dos primrdios (principalmente
de seu padro de divises celulares).
Finalmente, o crescimento da regio en-
tre os mesmos determina o tamanho dos
entrens.
Dessa forma, a grande questo :
como as clulas ainda indiferen-
ciadas aprendem suas posies
relativas de tal forma a se dife-
renciarem de maneira correta?
Esta pergunta tem preocupado,
h muito tempo, pesquisadores
que estudam a formao de pa-
dres de desenvolvimento em
diferentes organismos, na tenta-
tiva de compreender como o
comportamento de um grupo
de clulas coordenado. A for-
mao de padres durante o
desenvolvimento tem sido mais
intensamente estudada em ani-
mais, particularmente a mosca-
das-frutas, do gnero Drosophi-
la. Recentemente, entretanto,
vrios grupos trabalhando com
plantas modelo como a boca-de-leo
(Antirrhinum majus) e arabidpsis (Ara-
bidopsis thaliana, Figura 1) usaram da-
dos genticos e moleculares para formu-
lar um modelo de um processo formador
de padro de desenvolvimento nico de
plantas: a especificao dos rgos flo-
rais.
O modelo ABC do
desenvolvimento floral
Embora uma vasta gama de mutaes
genticas possa alterar o processo de
formao de uma flor, relativamente pou-
cos genes foram encontrados que este-
jam envolvidos com a especificao dos
rgos florais per se. Mutaes em tais mutantes duplos. Por exemplo, o
genes causam transformaes hometi-
cas em dois verticilos adjacentes da flor.
Os dois verticilos mais externos de mu-
tantes apetala2 (ap2) de arabidpsis, por
exemplo, contm carpelos e estames no
lugar de spalas e ptalas, respectiva-
mente. Mutaes nos genes APETALA3
(AP3) ou PISTILLATA (PI) de arabidpsis
causam a substituio de ptalas por
spalas e de estames por carpelos. Final-
mente, no mutante agamous (ag; Figura
2) de arabidpsis, os dois verticilos mais
internos so alterados: estames so trans-
formados em ptalas e carpelos em spa-
las. (Coen & Meyerowitz, 1991; Meyero-
witz et al., 1991; Ma, 1998). Em adio ao
controle da identidade dos rgos florais,
o gene AG deve suprimir o crescimento
do meristema floral uma vez que os
carpelos esto formados, pois a mutao
ag tem o efeito adicional de causar a
proliferao indeterminada do meriste-
ma. Desta forma, o quarto verticilo de
uma flor ag constitui o primeiro verticilo
de uma nova flor mutante, que contm
outras em seu interior. Portanto, o gene
AG tambm responsvel pelo hbito tante, pois nenhum destes estados ocorre
determinado do meristema floral.
As modificaes das caractersticas
dos rgos florais dos mutantes descritos
acima sugerem um modelo combinatori-
al simples para a determinao da iden-
tidade destes rgos (Coen & Meyerwitz,
1991; Figura 3). Segundo este modelo, os
genes responsveis pela identidade esto
ativos em trs regies sobrepostas, cada
uma compreendendo dois verticilos ad-
jacentes. Devido sobreposio das regi-
es de expresso de cada gene, uma
combinao nica de genes especifica a
identidade de cada verticilo (Figura 3a).
Se a regio de atividade B (que requer a
expresso dos genes AP3 e PI em arabi-
dpsis) est ausente, ambos os verticilos
1 e 2 sero especificados apenas pela
regio de atividade A (AP2 em arabidp-
sis) e contero spalas (Figura 3b). De
maneira similar, nesse caso, os verticilos
3 e 4 sero ambos especificados pela
regio de atividade C (AG em arabidp-
sis) e contero carpelos. Para explicar os
fentipos dos mutantes ap2 e ag, neces-
srio adicionar ao modelo a previso de
que as atividades A e C so mutuamente
antagonistas. Ou seja, em um mutante
para genes do tipo A, a ao de C se
expande para os quatro verticilos e em
um mutante do tipo C, dessa vez, a
atividade de A que expressa nos quatro
verticilos (Figuras 3c, d).
Esse modelo, criado para explicar os
fentipos de mutantes simples,
passa por uma prova final: ele
fielmente prev o fentipo de
modelo prev que, se as funes B
e C fossem removidas, C deveria
definir a identidade dos quatro
verticilos, que se desenvolveriam
em carpelos. De fato, todos os
verticilos do mutante duplo ap2ap3
contm carpelos (Meyerowitz et
al., 1991). Similarmente, se as ati-
vidades B e C estivessem ausentes,
A deveria definir a identidade de
todos os rgos da flor. Como
previsto pelo modelo, spalas se
desenvolvem em todos os verticilos de
mutantes duplos agpi. O fentipo deste
duplo mutante apresenta ainda vrios
verticilos concntricos adicionais (todos
compostos de spalas), devido ao efeito
da mutao ag de suprimir a determina-
o do meristema floral.
O que aconteceria se ambas as fun-
es A e C fossem removidas? A atividade
B sozinha definiria a identidade dos ver-
ticilos 2 e 3, porm nenhuma das ativida-
des identificadas estaria presente nos
verticilos 1 e 4. O modelo no faz nenhu-
ma previso bvia sobre o fentipo resul-
em nenhum verticilo da flor do tipo
selvagem. A funo B associada dos rgos florais, ele no explica como
formao de ptalas e estames; assim,
espera-se que, na ausncia de A e C, B
cause a produo de rgos intermedi- tes hometicos do desenvolvimento flo-
rios entre ptalas e estames. De fato, os
verticilos 2 e 3 das flores do mutante
duplo ap2ag so ocupados por ptalas
estaminoidais. Os verticilos 1 e 4 deste
duplo mutante contm folhas. Igualmen-
te, no triplo mutante ap2ap3ag, no qual
as funes A, B e C foram desativadas, as
flores so formadas por folhas organiza-
das em vrios verticilos concntricos.
Estas observaes indicam que a folha
seria o estado basal a partir do qual a
identidade de cada rgo floral seria
determinada.
Por meio destes resultados, a equiva-
lncia de flores e ramos (e portanto de
rgos florais e folhas), clamada por
Goethe h mais de 300 anos, foi final-
mente demonstrada.
O ABC no suficiente
Durante a dcada passada, todos os
genes descritos acima foram clonados e
seqenciados. A localizao dos respec-
tivos RNA mensageiros foi determinada
por hibridizao in situ e corresponde,
de fato, s regies descritas pelo modelo
ABC (veja a reviso de Ma, 1998). Todos
os genes do modelo ABC codificam fato-
Figura 2: A flor do mutante
agamous de arabidpsis
composta por uma srie de
verticilos contendo apenas
spalas e ptalas
res de transcrio, sugerindo que seus
respectivos produtos ativam ou repri-
mem a transcrio de outros genes reque-
ridos para a diferenciao de tipos celu-
lares rgo-especficos. Embora o mode-
lo ABC explique com sucesso como a
combinao de genes hometicos pode
especificar a identidade dos primrdios
os domnios de expresso de cada gene
hometico so definidos. Outros mutan-
ral de arabidpsis, como superman (sup;
Figura 4) e leafy (lfy), foram caracteriza-
dos e os genes correspondentes, clona-
dos. O estudo do fentipo destes mutan-
tes e dos mutantes duplos entre esses e os
do modelo ABC, permitiu o aprimora-
mento do modelo (Ma, 1998). Assim,
SUP, cujo mutante apresenta o desenvol-
vimento de anteras no lugar de carpelos,
embora possua os verticilos 1, 2 e 3
normais (Figura 4), estaria envolvido na
reteno da expresso dos genes de
funo B. O gene LFY faria o papel
contrrio, ativando os genes de funo B.
Tanto LFY quanto SUP tambm codificam
reguladores de transcrio. Outros fato-
res de transcrio, como o codificado
pelo gene PERIANTHIA (PAN, Figura 5),
controlam o nmero de rgos florais
sem alterar suas identidades (veja a revi-
so de Baum, 1998). Assim, as flores do
mutante pan possuem mais spalas e
ptalas que as do tipo selvagem (Figura
5).
Em animais, a atividade e a extenso
do domnio de expresso de fatores de
transcrio envolvidos no desenvolvi-
mento so geralmente controladas por
cascatas de sinalizao. O exemplo de
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 45
 estudo mais detalhado deste mecanismo
o da cascata iniciada pelo gene WIN-
GLESS (WG) de Drosophila. O produto do
gene WG utilizado como um sinal na
comunicao entre as clulas. Como re-
sultado desta comunicao, decises re-
lativas ao destino celular so tomadas,
tais como a expresso de genes home-
ticos. Um elemento chave da cascata de
sinalizao de WG o gene SHAGGY
(SGG) que codifica uma protena-kinase.
Homlogos de SGG foram recentemente
clonados em arabidpsis e denominados
ASK (Dornelas et al., 1998; 1999). Os
genes ASK formam uma famlia multig-
nica, cujos produtos parecem fazer parte
de uma cascata de sinalizao semelhan-
te quela em que SGG est envolvido. Os
produtos dos genes ASK controlam o
domnio de expresso de AG e AP3 e,
portanto, a arquitetura floral (Dornelas et
al., in press). Assim, aparentemente, me-
canismos controladores de alguns aspec-
tos do desenvolvimento podem ter sido
conservados entre animais e plantas.
Evoluo e biotecnologia
Como tanto os genes hometicos do
modelo ABC quanto os genes regulado-
res ASK so conservados durante a evo-
luo, espera-se que os mecanismos de
desenvolvimento dos rgos florais se-
jam semelhantes entre as diferentes esp-
cies de plantas. De fato, vrios homlo-
gos dos genes envolvidos na diferencia-
o floral foram clonados em vrios g-
neros e famlias, tanto de mono- como de
dicotiledneas, e o princpio de funcio-
namento dos mesmos parece conservado
pela evoluo (Baum, 1998).
A obteno de plantas transgnicas,
onde se modifica a expresso dos genes
envolvidos no florescimento, tem de-
Figura 3: Modelo ABC para a espe-
cificao da identidade dos rgos
florais. O modelo prev os casos em
que todos os fatores esto presentes,
como no tipo selvagem (a); quando
o fator B est ausente, como no
mutante apetala3, de arabidpsis;
quando o fator A est ausente, como
no mutante apetala2 e quando o
fator C est ausente, como no mu-
tante agamous. Se: spala; Pe: pta-
la; Es: estame; Ca: carpelo
monstrado que possvel a manipulao
da arquitetura floral pelo Homem (Ma,
1998; Dornelas et al. in press). As conse-
qncias biotecnolgicas so bvias. A molecular model for flower development
capacidade de modelar a arquitetura flo-
ral artificialmente, eliminando ou adicio-
nando verticilos e/ou modificando a iden-
tidade e a posio de cada rgo floral,
abre um invejvel universo de possibili-
dades agronmicas.
Assim, com a possibilidade atu-
al de construir flores por meio da mani-
pulao gentica molecular, a expresso
engenharia gentica ganhou um aspec-
to arquitetnico renovado.
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Figura 4: A flor do mutante superman de arabidopsis Figura 5: As flores do mutante perianthia de arabidopsis
possui estames (rgos masculinos) no lugar dos carpe- apresentam um nmero superior de spalas e ptalas (5 ou
los (rgos femininos) no verticilo central mais) que as do tipo selvagem (sempre 4)
46 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento