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HEMOGLOBINA
PRINCPIO DE AO
Metodologia: Cianometahemoglobina.
O mtodo baseia-se na oxidao do tomo de Ferro (ferro II) da molcula de Hemoglobina pelo
Ferricianeto de potssio em pH fracamente alcalino, formando a metahemoglobina que convertida
em cianometahemoglobina aps a reao com o Cianeto de potssio. A colorao avermelhada
proporcional concentrao de Hemoglobina presente na amostra.
AMOSTRA
Preparo do Paciente
Colher sangue pela manh aps jejum de 8 horas, salvo orientaes mdicas.
Amostras utilizadas
Sangue total obtido livre de hemlise, colhido com EDTA, citrato ou oxalato.
Estabilidade e armazenamento da amostra
A amostra estvel por 24 Horas entre 2 e 8 C.
Volume ideal utilizado para anlise
(Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise).
Volume mnimo utilizado para anlise
(Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise).
Critrios para rejeio da amostra
No usar amostras com fortes sinais de hemolise e nem com presena de contaminao bacteriana.
Fazer referncia ao manual ou POP de coleta, separao e distribuio de material.
REAGENTE UTILIZADO
HEMOGLOBINA CATLOGO: K023 ANVISA: 10269360097
Componentes do kit
Nmero 1 - Reagente de Cor Estoque - conservar entre 15 e 30 C. Contm:
Tampo Fosfato 200 mmol/L, Ferricianeto de potssio 120 mmol/L, Cianeto de potssio 150 mmol/L e
surfactante. Manusear este reagente com muito cuidado, reagente txico.
Estabilidade
Os reagentes so estveis at a da data de validade impressa no rtulo quando conservados de
acordo com a temperatura recomendada. Evitar a contaminao do produto durante o uso para no
afetar a sua estabilidade.
EQUIPAMENTOS
Tcnica Manual
Condies de Reao
Equipamento: Espectrofotmetro ou colormetro
Leitura: Comprimento de onda 540 nm (520-550)
Kit de padro de Hemoglobina BIOCLIN
Pipetas para medir amostras e reagentes
Cronmetro
PROCEDIMENTO
Procedimento Manual
Marcar o tubo A (Amostra) e proceder como a seguir:
Amostra
Reagente de Trabalho 2,5 mL
Sangue total 10 L
CLCULOS
Para calcular o valor em g/dL ver as instrues contidas no conjunto Padro de Hemoglobina Bioclin.
RESULTADOS
Unidade de Medida: g/dL
Fator de Converso de Unidades (g/dL para SI): g/dL de Hemoglobina X 1,61 = mmol/L de
Hemoglobina
CONTROLE DA QUALIDADE
Materiais
Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e nmero de
catlogo.
Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados.
Controle Interno
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Nome do Laboratrio Procedimento Operacional Padro
POP xxx
HEMOGLOBINA
Reviso: 00
VALORES DE REFERNCIA
Os valores de referncia em g/dL, para o presente mtodo, foram obtidos atravs da determinao da
Hemoglobina em populaes sadias do sexo masculino e feminino.
Estes valores devem ser usados como orientao, sendo que cada laboratrio dever criar sua faixa
de valores de referncia, de acordo com a populao atendida.
LINEARIDADE
Linearidade
A reao linear at 20 g/dL.
LIMITAES DO MTODO
O Reagente de Cor contm cianeto. Manusear com muito cuidado. Txico
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1 - HENRY, R. J., Clinical Chemistry Principles and Techinics Hoeber Division, Haper and Row, New
York.
2 - TONKS, D. B., Clin. Chem., 9:217, 1983.
3 - DRABKIN, D. L., Austin, J. H., J. Biol. Chem. , 112:51, 1935.
4 - BARON, D. N., Bioqumica de la Patologia Mdica Ediciones Toray S/A Barcelona.
5 - Internacional Committe for Standartization in Haematology: Recommendations for Haemoglobino-
metry in Human Blood: Brit., J. Haemat., 13 (suppl.) 71, 1967.
6 - Word Health Organization, International Biological Reference Preparations 1968. W. H. O. Techn.
Rep. Ser. 384, 85, 1968.
Nmero Destino
Cpias