I.

INTRODUCCION

La fotosntesis (proceso que permite a los vegetales a adquirir la

materia y la energa que necesitan para desarrollar sus funciones
vitales) se lleva a cabo por el aspecto en las hojas y en los tallos
jvenes de pigmentos, capaces de captar la energa lumnica.
Entre los distintos mtodos que existen para separar y adquirir esos
pigmentos se encuentra el de la cromatografa; una tcnica que
accede a la separacin delas sustancias de una mezcla, teniendo una
afinidad diferente por el disolvente en el que se encuentran; al
introducir una tira de papel en esa mezcla, el disolvente arrastra con
distinta velocidad a los pigmentos segn la solubilidad que tengan y
los separa, permitiendo identificarlos perfectamente segn su color.
Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes
tonalidades: clorofila A (verde intenso), clorofila B (verde claro),
caroteno (naranja) y xantofila (amarillo).La extraccin y
reconocimiento de estos pigmentos es interesante para estudio y
conocimiento de sus propiedades.

II. OBJETIVOS
El presente experimento tiene por finalidad demostrar:
Que los pigmentos fotosintetizantes pueden ser extrados
fcilmente con solventes orgnicos.
Separar por diversos mtodos los pigmentos fotosintetizantes.
Estudiar algunas propiedades fsicas y qumicas.
 III. MARCO TEORICO

Entre todos los caracteres ms externos de los vegetales, el ms notable y

caracterstico es probablemente el color. El color no es nicamente un carcter
llamativo de la vegetacin, sino que, adems, algunos de los pigmentos que lo
condicionan estn estrechamente ligados a las actividades fisiolgicas del propio
vegetal. Por consiguiente, el estudio de cmo las plantas viven y se desarrollan
requiere el previo conocimiento de los pigmentos vegetales.
Qu son los pigmentos?
Si es posible encontrar en el reino vegetal todos los matices y combinaciones de
colores del espectro, existe un predominio general de los colores primarios:
verde, amarillo, rojo y azul. Estos colores son conferidos a los vegetales por
determinados compuestos qumicos denominados pigmentos. El color particular
que presenta un determinado rgano vegetal

Depende generalmente del predominio de uno u otro o la combinacin de ellos.

Se debe tener claro que cuando un vegetal presenta un color blanco, es debido
a la falta de pigmentos. La luz solar que incide sobre ellas no es absorbida
selectivamente como ocurre en las partes coloreadas, sino que es transmitida o
reflejada prcticamente sin sufrir modificacin.
Dnde estn los pigmentos?
Estos pigmentos se encuentran en el interior de las clulas vegetales
especficamente en una organelo llamada cloroplasto. Los cloroplastos son
simplemente plstidos que contienen pigmentos cloroflicos. Los compuestos
cloroflicos estn ligados qumicamente con las estructuras internas del
cloroplasto (membrana tilacoide) y se hallan retenidos en estado coloidal.
Asociados con las clorofilas, existen tambin en los cloroplastos dos clases de
pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados que son las xantofilas y
carotenoides.

Las Clorofilas. El color verde tan uniformemente presente en los vegetales es

debido a la presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados
clorofila "A" y clorofila "B". Se encuentran prcticamente en todas las plantas con
semilla, helechos, musgos y algas. Pueden formarse en las races, tallos, hojas
y frutos a condicin de que estos rganos estn situados por encima del suelo y
queden expuestos a la luz. Tambin aunque aparentemente falten en algunas
hojas de color rojo o amarillo, cuando se extraen las otras sustancias colorantes
de estas, puede comprobarse incluso all la presencia de las clorofilas, que
estaban enmascaradas por los dems pigmentos.
Cmo se dividen los solventes?
Los pigmentos cloroflicos son insolubles en el solvente universal llamado agua.
Pero s son solubles en solventes orgnicos (afinidad qumica) como por ejemplo
alcohol etlico y acetona. A los solventes que extraen simultneamente todos los
pigmentos de la hoja se los suele llamar extractantes. Existen otros solventes
que presentan afinidad con algunos pigmentos y se llaman separadores, como
por ejemplo el Tetracloruro de carbono y el ter de petrleo.

Las distintas tcnicas cromatografas se pueden dividir segn cmo est

dispuesta la fase estacionaria:

Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o

sobre un papel. Las principales tcnicas son: o Cromatografa en papel o
Cromatografa en capa fina Cromatografa en columna. La fase estacionaria se
sita dentro de una columna. Segn el fluido empleado como fase mvil se
distinguen: o Cromatografa de lquidos o Cromatografa de gases o
Cromatografa de fluidos supercrticos

La cromatografa de gases es til para gases o para compuestos relativamente

voltiles, lo que incluye a numerosos compuestos orgnicos. En el caso de
compuestos no voltiles se recurre a procesos denominados de "derivatizacin",
a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilicen en las condiciones
de anlisis.
Dentro de la cromatografa lquida destaca la cromatografa lquida de alta
resolucin (HPLC, del ingls High Performance Liquid Chromatography), que es
la tcnica cromatografca ms empleada en la actualidad, normalmente en su
modalidad de fase reversa, en la que la fase estacionaria tiene carcter no polar,
y la fase mvil posee carcter polar (generalmente agua o mezclas con elevada
proporcin de la misma, o de otros disolvente polares, como por ejemplo
metanol). El nombre de "reversa" viene dado porque tradicionalmente la fase
estacionaria estaba compuesta de slice o almina, de carcter polar, y por tanto
la fase mvil era un disolvente orgnico poco polar.
IV. MATERIALES Y REACCTIVOS
a) MATERIALES
Planta: hojas de caf
mortero de porcelana
pera de decantacin
vasos precipitados
jarra elctrica
probeta
soporte de madera
balanza
matraz de Erlenmeyer
b) RECCTIVOS
Acetona 80 por ciento
ter de petrleo
Metanol 90 por ciento
ter etlico
KOH al 20 por ciento en metanol
Agua destilada

V. PROCEDIMIENTO
Extraer la muestra a usar de la planta y separar la hoja de la
nervadura desechar las nervaduras
Pesar 20 g de material vegetal a usar
Hacer hervir los 20 g por 2 minutos en la jarra elctrica
Triturar la hoja con el mortero agregando de apoco 50 ml de
acetona.
filtrar la hoja machacada agregando 50 ml ms de acetona
agregar 50 ml de ter de petrleo
reposar
lavar con agua 2 a 4 veces
agregar 40 ml de etanol, agitar y reposar
separar la clorofila A de la B en otra pera de decantacin
CLOROFIAL A:
agregar 20 ml de KOH al 20 % de metanol y agitar
agregar 20 ml de agua y reposar
observar el resultado
CLOROFILA B:
Agregar 40 ml de ter etlico
Agregar 20 ml de KOH al 20 % en metanol, agitar y reposar
Observar los resultados
VI. RESULTADOS

En esta muestra de clorofila A se puede distinguir a los carotenos en la

parte superior y la clorofila A en la parte inferior

En esta muestra se puede observar que solamente hay la presencia de

xantofila
VII. DISCISIONES
En esta prctica pudimos observar los distintos pigmentos
fotosintticos que se encuentran dentro de las hojas de caf a
travs de la cromatografa , en primer lugar al romper las clulas
en el mortero los pigmentos se hallan encerrados en los
cloroplastos dentro de ellas pasan al metanol . en numerosas
ocasiones uno de los pigmentos es mas abundante y
enmascara a los dems que no se pueden observar como
vimos en nuestro experimento, el pigmento ms soluble en el
metanol es el forma una banda coloreada en la parte superior.

VIII. CONCLUSIONES

Al finalizar la prctica se pudo observar los pigmentos halla

dos en la planta de caf concluyendo la existencia de clorofila
A, carotenos y xantofila. Deduciendo la ausencia de la clorofila
B.
En la prctica se observ como cambian las tonalidades de
estos pigmentos fotosintticos que componen a las plantas y
se encuentran en los cloroplastos de la clula vegetal.

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

GRAHAM SOLOMONS, T.W. 1,990. Fundamentos de
Qumica Orgnica. Editorial Limusa. Mxico, D.F. 903 p.
Raymond, CHANG. Qumica. 10a Edicin. Editorial Mc. Graw
Hill. Mxico D.F 2010.856 pgs.
CATALAN R. 1999. Manual de prcticas de laboratorio de
Qumica Orgnica. Facultad de Agronoma
X. ANEXOS

Jarra elctrica utilizada Balanza para pesar las

para hervir las hojas hojas

Se puede observar la Se machaca la

muestra despus de haber muestra en el mortero
puesto a hervir

Se puede observar los pigmentos Se observa en la imagen a los

fotosintticos despus de haber pigmentos despus de haber
sido mesclado con el ter de hecho reposar con el ter de
petrleo petrleo
Se lava la mescla de Separamos la clorofila
pigmentos con agua de A de la clorofila B
2 a 4 veces

Se observa que en esta En la imagen se muestra la

muestra la presencia de presencia de clorofila A y
xantofila carotenos