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PLACAS PARA EL RECUENTO DE COLIFORMES

DESCRIPCION
Las Placas Petrifilm de 3M para Recuento de Coliformes (CC) es un medio de cultivo
listo cuyo sistema contiene nutrientes Rojo Bilis Violeta (VRB), un agente gelificante
soluble en agua fría, y un indicador tetrazolium que facilita la enumeración de las
colonias. Las Placas Petrifilm para Recuento de Coliformes (CC) son utilizadas para la
enumeración de coliformes en la industria de alimentos y bebidas. Los componentes de
las Placas Petrifilm para el Recuento de CC no son esterilizados pero si son
descontaminados. El departamento de Microbiología 3M se encuentra certificado por
las normas ISO 9001 (Organización de Estándares Internacionales).
La AOAC Internacional y el Manual de Análisis Bacteriológico (BAM) de la FDA de los
Estados Unidos definen los Coliformes como bacilos Gram-negativos que producen
ácido y gas durante la fermentación de la lactosa. Mientras las colonias Coliformes
crecen en la Placa Petrifilm RCC y producen ácido, el nivel de pH en la placa cambia lo
que hace el viraje del color del gel de naranja-rojizo a amarillo, dando una señal
presuntiva de Coliformes. El gas atrapado alrededor de las colonias Coliformes
confirma su presencia.
La ISO define los Coliformes por su capacidad para crecer en un método específico, en
un medio selectivo. El método ISO 4832, enumera Coliformes por la técnica de conteo
de colonias, define los Coliformes por el tamaño de la colonia y por la producción de
ácido en Agar VBR con lactosa (VBRL). En las Placas Petrifilm RCC, estos Coliformes
productores de ácido son identificados por zonas ácidas amarillas o colonias rojas con o
sin gas. El método ISO 4831 enumera Coliformes por el método del Número Más
Probable (NMP), define los Coliformes por su capacidad para crecer y producir gas de
la lactosa en un caldo selectivo. En las Placas Petrifilm RCC estos Coliformes están
identificados por las colonias rojas asociadas con gas. La AFNOR ha validado las
Placas de Petrifilm RCC como un método comparable a ISO 4831 y el ISO 4832 para
enumeración total de colifomes. La AFNOR ha validado las Placas de PetrifilmCC como
un método comparable a la norma NF V08-017, para la Enumeración de Coliformes
Termotolerantes.
PRECAUCIONES
3M no ha documentado el uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de CC para
otras industrias que no sean de alimentos o bebidas. Por ejemplo, no ha documentado
el uso de las Placas Petrifilm de 3M para e! Recuento de CC para realizar análisis de
aguas, cosméticos u otros productos farmacéuticos.
Las Placas Petrifilm CC no han sido probadas en todos los tipos de productos
alimenticios, procesos de alimentos, análisis de protocolos ó todas las posibles cepas
de bacterias.
Las Placas Petrifilm para el Recuento de CC han sido evaluadas mediante los
lincamientos de la AOAC/AFNOR/NordVal y criterios de validación de muestras
representativas de las siguientes categorías de alimentos: vegetales, carnes, aves,
mariscos, lácteos, y alimentos procesados.
No utilice las Placas Petrifilm para el Recuento de CC para diagnósticos en humanos o
animales.
Para más información o documentos adicionales sobre este producto contáctese con su
representante de Microbiología de 3M.
RESPONSIBILIDADES DE USO
Ningún medio de cultivo podrá siempre recuperar las mismas cepas exactamente o
enumerar exactamente una cepa en particular. Adicionalmente factores externos tales
como los métodos de muestreo, protocolos de análisis, tiempo de preparación y
manipulación de la muestra influyen en la enumeración y recuperación de las bacterias.
La misma muestra de alimento puede influir en los resultados. Por ejemplo, alimentos
con alto contenido de azúcar puede incrementar la alta producción de gas lo cual
interferirá con los resultados de las bacterias no coliformes - Enterobacteriaceae.
Por lo que es responsabilidad del usuario la correcta utilización del método aplicado
para el análisis así como la suficiente cantidad de muestras de un alimento en particular
para poder obtener resultados confiables.
Por lo tanto el usuario será el responsable de determinar su método de análisis y
satisfacer sus necesidades y las del cliente además determinar los requerimientos con
los proveedores.
Ningún medio de cultivo, o las Placas Petrifilm para el Recuento de CC constituyen una
garantía de calidad en los productos o procesos de alimentos o bebidas.
Para el uso deberá capacitarse y entrenarse al personal acerca de las técnicas de
análisis: Por ejemplo. El Manual de Buenas Prácticas de Laboratorio (E.E.U.U.
Administración de Drogas y Alimentos, Titulo 21, Parte 58 del Código de Regulaciones
Federales) o ISO 17025

USO: Si alguna Placa Petrifilm ha sido defectuosa, 3M o su distribuidor autorizado la


reemplazara o reembolsar el dinero de acuerdo al precio del producto. Estos son
rectificaciones exclusivas. Por lo que deberá dirigirse rápidamente y notificar a 3M
dentro de los 60 días de descubrir algún defecto del producto y entregarlo a 3M.
Contáctese con Servicio al Cliente (1- 800-328-1671 en EEUU) o con su representante
de Microbiología de 3M para obtener Autorización de Devolución.
LIMITACION DE 3M
AL MENOS QUE LO PROHIBA LA LEY, 3M NO TENDRA NINGUNA
RESPONSABILIDAD POR PERDIDAS, DAÑOS DIRECTOS O INDIRECTOS,
ESPECIALES, INCIDENTALES O CONSECUENCIALES. Excepto donde lo prohíba la
ley, la responsabilidad de 3M no excederá ninguna teoría legal acerca de precios por la
compra de sus placas. Defectuosas. Los clientes tendrán además derechos adicionales
deberán acercarse a los locales específicos de cada ciudad donde realizaron la compra.
DISPOSICION DE ALMACENAMIENTO
El almacenamiento de las fundas selladas con Placas Petrifilm deberán ser refrigeradas
o congeladas, ó almacenadas a temperaturas <8°C (46°F). Antes de su utilización, las
fundas sin abrir deberán permanecer a temperatura del área donde serán abiertas.
Retorne las placas sin utilizar a las fundas. Selle la funda por el doblez y coloque un
adhesivo. Para evitar el ingreso de la humedad las fundas abiertas ya no serán
refrigeradas. Las fundas reselladas serán colocadas en un lugar seco por no más de un
mes. Esto se recomienda en fundas reselladas las placas Petrifilm deberán
almacenarse en un congelador (refiérase abajo) si la temperatura del laboratorio excede
los 25°C (77°F) y/o el laboratorio se localiza en una región con humedad relativa que
excede al 50% (con excepción del aire acondicionado.)
Las fundas abiertas pueden almacenarse en un congelador, dentro de un contenedor.
Para remover las placas de congelador para su uso, abra el contenedor, remueva las
placas que necesita e inmediatamente retorne las placas al congelador en el
contenedor sellado. Las placas que presenten fecha de expiración no deberán ser
utilizadas. El congelador utilizado para almacenar las placas deberá contener un
sistema de ciclo automático defrost para evitar la exposición de las placas a la humedad
y de modo que no se dañaran las placas.
No utilice placas que presente decoloración. Ni placas que no presentan la fecha de
expiración o un número claro de lote. Él número de lote es colocado individualmente
sobre cada placa
Luego de utilizar las Placas Petrifilm para el Recuento de CC estas pueden contener
microorganismos que pueden ser un riesgo bio - potencial. Siga los estándares
industriales para desechar las placas.
INSTRUCCIONES DE USO
Preparación de la muestra
1. Uso apropiado de diluyentes estériles:
Bufferu fosfato Butterfield, Agua de peptona 0.1%, Agua' Peptonada Salada, Agua'
Peptonada Bufferada, Solución Salina (0.85 -0.90%), Caldo Letheen libre de bisulfito
o Agua Destilada.
No utilice diluyentes que contengan citrato, bisulfito ó tiosulfato en placas
Petrifilm; ya que ellos pueden inhibir el crecimiento microbiológico. El bufer
citrato es un indicativo en el procedimiento estándar, el cual es sustituido con uno o
más buferes de la lista mencionada, caliente a una temperatura de 40-45°C.
AFNOR método validado:
Solo los diluentes de la lista ISO antes mencionados podran ser utilizados como
referencia y posterior validación.
2. Homogenice la muestra.
3. Para un óptimo crecimiento y recuperación de microorganismo, ajuste el pH de la
muestra diluida de 6.6 - 7.2. Para productos ácidos, ajuste el pH con una solución 1
Normal (liV) de Hidróxido de Sodio (NaOH.) Para productos alcalinos, ajuste el pH
con una solución Normal (1N) de Ácido Clorhídrico (HC1.)
Inoculación
1. Coloque las Placas Petrifilm para el Recuento de CC una superficie plana y lisa
2. Levante la lámina superior y con la pipeta perpendicular dispense 1 mL de la
muestra en el centro del botón de la lámina
3. Deje caer la lámina hacia abajo sobre la muestra, evite la formación de burbujas
de aire
4. Coloque el esparcidor plástico con el lado plano hacia abajo sobre el centro de la
lámina. Presione cuidadosamente sobre el centro y distribuya cuidadosamente la
muestra. Distribuya el inoculo en la Placa Petrifilm sobre el área de crecimiento
antes de que se forme el gel. No deslice el esparcidor a través de la lámina.
5. Remueva el esparcidor de la placa y espere que se gelatinice la placa.
Incubación
Incube las placas horizontalmente con el área limpia hacia arriba y no más de 20 placas
una sobre otra. Tiempos severos de incubación y temperaturas pueden utilizarse
dependiendo de la localidad y los métodos referenciales. Por ejemplo:
Métodos Oficiales AOAC (986.33 Método de lámina Rehidratable para Recuento de
Bacterias y Coliformes en Leche, y 989.10 Método de lámina Rehidratable para
Recuento de Bacterias y Coliformes en Productos Lácteos).
Incube las placas Petrifilm CC por 24 h ± 2 h a 32°C ± 1°C.
AOAC Métodos™ Oficiales (Método de Lámina Rehidratable 991.14 para Recuento de
Coliformes y Escherichia coli en Alimentos)
Incube las placas Petrifilm CC por 24 h ± 2 h a 35°C ± 1°C. AFNOR método validado
Coliformes Totales: en comparación con la norma ISO 4832 (3M-01/2-09/89 A) y la
norma ISO 4831 (3M-01/2-09/89 B)
Todos los alimentos excepto los mariscos crudos.
 Incube las Placas Petrifilm CC por 24 h ± 2 h a 30°C ± 1°C, 35°C ± 1°C ó 37°C ±
1°C.
 Como recomienda la norma ISO 4831 y la ISO 4832, estas temperaturas
deberán ser utilizadas y acordadas según el certificado de análisis.
Coliformes Termotolerantes: Comparados con NF V-08-060, VRBL incubado a 44.5°C ±
1°C (3M-
01/2-09/89 C).
Para todos los alimentos.
Incube las placas Petrifilm CC por 24 h ± 2 h a 44°C ± 1°C.
Sistema Nórdico para Validación de Métodos microbiológicos alternativos, Validación
NordVal
Refiérase a la validación NordVal para Placas Petrifilm CC detalle del análisis.
Interpretación
1. Las Placas Petrifilm para el Recuento de CC pueden utilizarse para el Conteo
estándar de colonias u otras magníficamente iluminas. El gas producido por las
coliformes puede afectar la colonia ya que la colonia podría quedar "fuera" de la
burbuja. Esta será enumerada como una sola coliforme. No cuente las colonias con
burbujas ya que estas pueden ser removidas del medio selectivo. No cuente las
burbujas que puedan están presentes.
La interpretación de colonias de Coliformes sobre las placas Pctrifilm CC varía según el
método. Por ejemplo:
O AFNOR método validado
Método comparado con ISO 4831 (método del NMP), las colonias coliformes son de
color rojo muy asociadas (dentro de un diamtero de la colonia) con la formación de
burbujas de gas (observe la figura e). Nota: un gran radio donde no hay producción de
gas es presencia de bacterias gram - negativas por lo que se necesitara de mayor
cantidad de diluciones para poder enumerar Coliformes productoras de gas dentro del
rango recomendado.
Método comparado con ISO 4832 y NF V08-060 (método VRBL), en donde la
enumeración se realiza a todas las colonias de color rojo con o sin gas.
Si la placa no puede contarse en I hora remueva la del incubador y almacénela en el
congelador en un contenedor sellado para una enumeración posterior.
Para más información acerca de las placas Petrifilm refiérase a la "Guía de
Interpretación" Si tiene alguna pregunta específica sobre la aplicación o los
Procedimientos de análisis contáctese con el representante de Microbiología de 3M

MÉTODOS OFICIALES
Colonias Coliformes son de color rojo y muy asociadas (una colonia por diámetro)
atrapadas con burbujas de gas. Colonias no asociadas con gas ( con una distancia más
grande que un diámetro entre colonias y burbujas de gas) no serán enumeradas como
coliformes

PLACAS PARA EL RECUENTO DE E.COLI / COLIFORMES


DESCRIPCION
Las Placas Petrifilm™ para Rccucnto de E.eoli/ Coliformes (EC) es un medio de cultivo
listo cuyo sistema contiene nutrientes, Rojo Bilis Violeta (VRB) un agente gelificante
soluble en agua tría, un indicador de la actividad glucoronidasa, 5 bromo-4-cloro-3-
indolyl-b-D- glucuronido (BCIG) y el indicador tretazolium que facilita la enumeración de
las colonias. Las Placas Petrifilm para el Recuento de EC son utilizadas para la
enumeración de E.coli y coliformes en la industria de alimentos y bebidas. Los
componentes de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC no son esterilizados pero
si son descontaminados. El departamento de Microbiología 3M se encuentra certificado
por las normas ISO "001 (Organización de Estándares Internacionales).
ADVERTENCIA
No use las placas para determinar E. coli 0157. Tales como otros medios para E.
coli/coliformes, ya que estas placas no contienen un indicador específico para detectar
alguna cepa de E. coli OI 57 que pudiera desarrollarse. Por lo que las cepas E. coli OI
57 son atípicas, y ellas pudieran aparecer como Coliformes y no como E. coli (colonias
de color rojo con producción de gas).
PRECAUCIONES
VI™ no ha documentado el uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC para
otras industrias que no sean de alimentos o bebidas. Por ejemplo, 3M no ha
documentado el uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC para realizar
análisis de aguas, cosméticos u otros productos farmacéuticos.
EI uso de las Placas Petrifilm para el Recuento de EC no han sido evaluadas para
analizar todos los alimentos, productos alimenticios, procesamiento alimenticios,
análisis protocolares o para todas las posibles cepas de E.coli u otras bacterias.
Las Placas Petrifilm para el Recuento de EC han sido evaluadas mediante los
lincamientos de la AOAC/AFNOR/NordVal y criterios de validación de muestras
representativas de las siguientes categorías de alimentos: Vegetales, cárnicos, lácteos
y alimentos procesados.
Las placas Petrifilm EC no son diferenciadoras para ninguna cepa de Coliformes o de
alguna cepa de E. coli. No utilice las Placas Petrifilm para el Recuento de EC para
diagnósticos en humanos o animales.
RESPONSIBILIDADES DE USO
Ningún medio de cultivo podrá siempre recuperar las mismas cepas exactamente o
enumerar exactamente una cepa en particular. Adicionalmente factores externos tales
como los métodos de muestreo, protocolos de análisis, tiempo de preparación y
manipulación de la muestra influyen en la enumeración y recuperación de las bacterias.
Por lo que es responsabilidad del usuario la correcta utilización del método aplicado
para el análisis así < como la suficiente cantidad de muestras de un alimento en
particular para poder obtener resultados confiables.
Por lo tanto el usuario será el responsable de determinar su método de análisis y
satisfacer sus necesidades y las del cliente además determinar los requerimientos con
los proveedores.
Ningún medio de cultivo, o las Placas Petrifilm para el Recuento de EC constituyen una
garantía de calidad en los productos o procesos de alimentos o bebidas.
Para el uso deberá capacitarse y entrenarse al personal acerca de las técnicas de
análisis: Por ejemplo. El Manual de Buenas Prácticas de Laboratorio (E.E.U.U.
Administración de Drogas y Alimentos, Titulo 21, Parte 58 del Código de Regulaciones
Federales) o ISO 17025.
RECHAZO DE GARANTIAS / LIMITES
AL MENOS QUE SE PROHIBA POR LA LEY, 3M RECHAZA TODA GARANTIA
INCLUIDA, IMPLICADA Y EXPRESA, PERO NO LIMITADA, ALGUNA GARANTIA DE
COMERCIALIZACION O INADECUADO USO. Si alguna Placa Petrifilm Ha sido
defectuosa, 3M o su distribuidor autorizado la reemplazara o reembolsar el dinero de
acuerdo al precio del producto. Estos son rectificaciones exclusivas. Por lo que deberá
dirigirse rápidamente y notificar a 3M dentro de los 60 días de descubrir algún defecto
del producto y entregarlo a 3M. Contáctese con Servicio al Cliente (1-800-328-1671 en
EEUU) o con su representante de Microbiología de 3M para obtener Autorización de
Devolución.
LIMITACION DE 3M
AL MENOS QUE LO PROHIBA LA LEY, 3M NO TENDRA NINGUNA
RESPONSABILIDAD POR PERDIDAS, DAÑOS DIRECTOS O INDIRECTOS,
ESPECIALES, INCIDENTALES O CONSECUENCIALES. Excepto donde lo prohíba la
ley, la responsabilidad de 3M no excederá ninguna teoría legal acerca de precios por la
compra de sus placas. Defectuosas. Los clientes tendrán además derechos adicionales
deberán acercarse a los locales específicos de cada ciudad donde realizaron la compra.
DISPOSICION DE ALMACENAMIENTO
Las Placas Petrifilm Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus sin abrir
deben ser colocadas en fundas y ser almacenadas a temperaturas de refrigeración o
congelación <8° C (46°F). Antes de su utilización, las fundas sin abrir deberán
permanecer a temperatura del área donde serán abiertas. Retorne las placas sin utilizar
a las fundas. Selle la funda por el doblez y coloque un adhesivo. Para evitar el ingreso
de la humedad las fundas abiertas ya no serán refrigeradas. Las fundas reselladas
serán colocadas en un lugar seco por no más de un mes. Esto se recomienda en
fundas reselladas las placas Petrifílm deberán almacenarse en un congelador (refiérase
abajo) si la temperatura del laboratorio excede los 25°C (77°F) y/o el laboratorio se
localiza en una región con humedad relativa que excede al ?0% (con excepción del aire
acondicionado.)
Las fundas abiertas pueden almacenarse en un congelador, dentro de un contenedor.
Para remover las placas de congelador para su uso, abra el contenedor, remueva las
placas que necesita e inmediatamente retorne las placas al congelador en el
contenedor sellado. Las placas que presenten fecha de expiración no deberán ser
utilizadas. El congelador utilizado para almacenar las placas deberá contener un
sistema de ciclo automático defrost para evitar la exposición de las placas a la humedad
y de modo que no se dañaran las placas.
No utilice placas que presente decoloración. Ni placas que no presentan la fecha de
expiración o un número claro de lote. El número de lote es colocado individualmente
sobre cada placa.
Luego de utilizar las Placas Petrifilm para el Recuento de EC estas pueden contener
microorganismos que pueden ser un riesgo biológico potencial. Siga los estándares
industriales para desechar las placas.
INSTRUCCIONES DE USO
Preparación de la muestra
1. Uso apropiado de diluyentes estériles:
Butfer fosfato Butterfield, Agua de peptona 0.1 %, Agua' Peptonada Salada, Solución
Ringer con un cuarto de concentración, Solución Salina (0.85 - 0.90%), Caldo Lctheen
libre de bisulfito o Agua Destilada.
No utilice diluyentes que contengan citrato, bisulfito ó tiosulfato en placas
Petrifilm; ya que ellos pueden inhibir el crecimiento microbiológico. El bufer citrato
es un indicativo en el procedimiento estándar, el cual es sustituido con uno o más
buferes de la lista mencionada, caliente a una temperatura de 40-45°C.
2. Homogenice la muestra
3. Para un óptimo crecimiento y recuperación de microorganismo, ajuste el pH de la
muestra diluida de 6.6 - 7.2. Para productos ácidos, ajuste el pH con una solución 1
Normal (\N) de Hidróxido de Sodio (NaOH.) Para productos alcalinos, ajuste el pH con
una solución Normal (IN) de Ácido Clorhídrico (HC1.)
Inoculación
a) Coloque las Placas Petrifdm para el Recuento de EC sobre una superficie plana
y lisa
b) Levante la lámina superior y con la pipeta perpendicular dispense 1 mL de la
muestra en el centro del botón de la lámina
c) Deje caer la lámina hacia abajo sobre la muestra, evite la formación de burbujas
de aire
Coloque el esparcidor plástico con el lado plano hacia abajo sobre el centro de la
lámina Presione cuidadosamente sobre el centro y distribuya cuidadosamente la
muestra. Distribuya el inoculo en la Placa Petrifilm sobre el área de crecimiento antes
de que se forme el gel. No deslice el esparcidor a través de la lámina.
Remueva el esparcidor de la placa y espere que se gelatinice la placa. Incubación
Incube las placas horizontalmente con el área limpia hacia arriba y no más de 20 placas
una sobre otra. Tiempos severos de incubación y temperaturas pueden utilizarse
dependiendo de la localidad y los métodos referenciales.
Por ejemplo:
Método™ Oficial AOAC® (Método de lámina Rehidratablc 998.08 para Recuento y
Confirmación de Escherichia coli en Aves, Cárnicos, y Mariscos).
Incube las placas Petrifilm EC por 24 h ± 2 h a 35°C ± 1°C.
AOAC Métodos SM Oficiales (Método de Lámina Rehidratablc 991.14 para Recuento
de Coliformes y Escherichia coli en Alimentos)
Para obtener los resultados de las Placas Petrifilm para Recuento de Coliformes (EC)
incubar a 24 h ±
2 h at 35°C ± 1°C.
Para obtener los resultados de las Placas Petrifilm para Recuento de E.coli (EC)
incubar a 24 h ± 2 h (48 h ± 4 h) a 35°C ± l°C.
Interpretación
1. Las Placas Pctrifilm para el Recuento de EC pueden utilizarse para el Conteo
estándar de colonias ú otras magníficamente iluminas. No cuente las colonias con
burbujas ya que estas pueden ser removidas del medio selectivo. No cuente las
burbujas que puedan están presentes.
La interpretación de las colonias de E.coli sobre las placas Petrifilm EC varía
dependiendo del método utilizado. Por ejemplo:
Métodos Oficiales AOAC (998.08 y 991.14) Enumeración de colonias de color azul a
rojo - azulado asociados con formación de burbujas de gas sin tomar en cuenta la
intensidad del color y el tamaño de la colonia, como confirmación de E.coli. Colonias
azules sin gas no serán enumeradas como E.coli.
Otras colonias de coliformes son de color rojo asociadas (dentro de un diámetro de la
colonia) con burbujas de gas. Colonias no asociadas con gas (con una distancia más
grande que un diámetro entre colonias y burbujas de gas) no serán enumeradas como
coliformes. El recuento total de coliformes consiste en enumerar las colonias rojas y
azules asociadas con gas en 24 horas. En cualquier momento dentro del periodo de
incubación de método de validación todas las colonias de color azul asociadas con gas,
se confirmaran como E.coli. (Observe la figura e.).
Advertencia: No use las placas para determinar E.coli OI57. Porque la mayoría de las
variedades de E.coli 0157 son atípicas, por ejemplo son glucuronidasa negativa, ya que
estas no producirán un color azul, y no serán detectadas sobre las Placas Petrifilm para
Recuento de EC.
2. El área de crecimiento circular es de aproximadamente 20 eral La cual puede ser
estimada sobre las placas que contengan un crecimiento de 150 colonias en dos o
más cuadrados representativos determinándose además un número promedio por
centímetro cuadrado. Multiplique el numero promedio por 20 y determine el Conteo
estimado para cada placa
3. Cuando existan una gran cantidad de colonias, las Placas Petrifilm para Recuento
EC afectaran el color del gel presentando las siguientes características: se
presentan como colonias pequeñas, indistintas del color y / o algunas burbujas de
gas. Altas concentraciones de E.coli, causaran oscurecimiento en el área de
crecimiento tornándose de color azul, mientras que altas concentraciones de
coliformes, (no E.coli) causaran un oscurecimiento del área de crecimiento
tornándose de color rojo oscuro. Cuando esto ocurre el Conteo es muy alto (TNTC.)
Por lo tanto se deberán realizar mayor número de diluciones.
4. Cuando sea necesario las colonias deberán serán aisladas para una mejor
identificación. Levante la lámina superior y tome una colonia del gel (observe la
figura h.) Realice el análisis según los Procedimientos estándares
5. Si la placa no puede contarse en 1 llora remueva la del intubador y almacénela en el
congelador en una contenedor sellado para una enumeración posterior.
Para más información acerca de las placas Petrifilm refiérase a la "Guía de
Interpretación" Si tiene alguna pregunta específica sobre la aplicación o los
Procedimientos de análisis contáctese con el representante de Microbiología de 3M.

PLACA PARA RECUENTO DE LEVADURAS Y MOHOS


DESCRIPCIÓN
La placa 3M™ Petrifilm™ para recuento selectivo de Levaduras y Mohos (YM) es un
medio de cultivo listo para usar que contiene nutrientes con suplemento de antibióticos,
un agente gelificante soluble en agua fría y un indicador que facilita el recuento de
levaduras y mohos Las placas Petrifilm YM se utilizan para el recuento de levaduras y
mohos en la industria alimentaria y de bebidas. Los componentes de las placas Petrifilm
YM están descontaminados pero no son estériles. Las placas 3M Petrifilm se fabrican
en una planta certificada ISO (International Standards Organization) 9002.
PRECAUCIONES
3M no ha documentado el uso de las placas Petrifilm YM en industrias que no sean
alimentarias o de bebidas. Por ejemplo, 3M no ha documentado el uso de las placas
Petrifilm YM para el análisis de agua, productos farmacéuticos o cosméticos.
Las placas Petrifilm YM. No han sido probadas con todos los productos alimenticios,
procesos de fabricación de alimentos, protocolos de ensayo ni con todas las cepas
posibles de levaduras y mohos.
Las placas Petrifilm YM se han evaluado de conformidad con las guías AOAC"
INTERNATIONAL y con muestras representativas de los siguientes tipos de alimentos:
vegetales, cárnicos, lácteos y alimentos procesados.
No usar las placas Petrifilm YM para el diagnóstico de enfermedades humanas o
animales.
Para más información y documentación sobre el rendimiento del producto, contacte con
el representante oficial de 3M Productos de Microbiología.
RESPONSABILIDAD DEL USUARIO
Ningún medio de cultivo recuperará siempre las mismas cepas exactas o enumerará
una cepa en particular exactamente de la misma manera que otro medio. Además,
factores externos tales como métodos para toma de muestras, protocolos de ensayo,
tiempo de preparación y manipulación pueden afectar el tiempo de recuperación y
enumeración.
Es responsabilidad del usuario al seleccionar cualquier método de análisis, evaluar un
número suficiente de muestras con alimentos y retos microbiológicos específicos que
indiquen al usuario que el método elegido cumple con sus criterios.
Asimismo, es responsabilidad del usuario que toda metodología y resultado cumpla con
las necesidades de sus clientes o suministradores.
Como con cualquier medio de cultivo los resultados obtenidos con las placas Petrifilm
YM no constituyen una garantía de calidad de los alimentos, bebidas, o alimentos
procesados ensayados con estas placas.

RENUNCIA DE GARANTÍAS / COMPENSACIONES LIMITADAS


A MENOS QUE ESTÉ PROHIBIDO POR LA LEY, 3M RENUNCIA A TODAS LAS
GARANTÍAS EXPRESAS E IMPLÍCITAS, INCLUYENDO. PERO SIN LIMITARSE A
CUALQUIER GARANTÍA DE COMERCIAB1LIDAD O ADECUACIÓN PARA UN FIN
ESPECÍFICO. Si una placa Petrifilm se comprueba defectuosa, 3M o su distribuidor
autorizado reemplazará u, opcionalmente, reembolsará el precio de compra de la placa.
Estas son sus únicas compensaciones. Se debe notificar rápidamente a 3M, en el plazo
de 60 días desde el descubrimiento de cualquier posible defecto en la placa, y devolver
dicho producto a 3M. Rogamos contactar con 3M Departamento de Atención al Cliente
(I -800-328-1671 en los EE.UU.) o con su representante oficial de 3M Productos de
Microbiología para obtener una autorización para la devolución del producto.
LIMITACION DE LA RESPONSABILIDAD DE 3M
A MENOS QUE ESTÉ PROHIBIDO POR LA LEY, 3M NO SERÁ RESPONSABLE
ANTE EL USUARIO U OTROS POR CUALQUIER PÉRDIDA O DAÑO, YA SEA
DIRECTO, INDIRECTO, ESPECIAL, INCIDENTAL, O SECUNDARIO, INCLUYENDO,
PERO SIN LIMITARSE A BENEFICIOS PERDIDOS. Excepto en los casos en que esté
prohibido por la ley, en ningún caso la responsabilidad de 3M bajo cualquier teoría legal
excederá el precio de compra de las placas que supuestamente estén defectuosas. El
cliente podría tener derechos adicionales y debería conseguir asesoramiento en el país
de compra.
ALMACENAMIENTO Y ELIMINACIÓN
Conservar las bolsas de placas Petrifilm sin abrir refrigeradas o congeladas a
temperatura inferior o igual a 8°C. Antes de usar, dejar que las bolsas cerradas
alcancen la temperatura ambiente. Devolver las placas sin usar a las bolsas. Cerrar de
nuevo la bolsa doblando y sellando el extremo de ésta con cinta adhesiva. Para evitar
exposición a la humedad, no refrigerar las bolsas abiertas. Guardar las bolsas vueltas a
cerrar en un lugar fresco y seco como máximo un mes. Se recomienda que las bolsas
de placas Petrifilm vueltas a cerrar se guarden en un congelador si la temperatura del
laboratorio excede los 25°C y/o si el laboratorio se halla en una zona donde la humedad
relativa excede el 50% (exceptuando los locales con aire acondicionado).
Para guardar bolsas abiertas en un congelador, colocar las placas Petrifilm en un
recipiente sellado. Para utilizar las placas Petrifilm congeladas, abrir el recipiente, sacar
las placas que se necesiten y devolver rápidamente el resto de placas al congelador en
el recipiente sellado. No usar las placas caducadas. El congelador donde se guarden
las bolsas abiertas no debe tener un ciclo automático de descongelación, puesto que se
expondrían las placas regularmente a humedad, lo que podría dañarlas.
No usar las placas que presenten una decoloración. La fecha de caducidad y el número
de lote están indicados en cada caja de placas Petrifilm y en cada placa.
Después de utilizadas las placas Petrililm YM pueden contener microorganismos
potencialmente peligrosos. Seguir las normas habituales de la industria para su
eliminación.
INSTRUCCIONES DE USO
Preparación de la muestra
1. Usar diluyentes estériles adecuados: Tampón fosfato de Butterfield1 (ISO 5541-1),2
agua de peptona al 0.1%, agua de peptona tamponada. solución salina (0.85-
0.90%), caldo letheen sin bisulfito o agua destilada.
No utilizar diluyentes que contengan citrato, bisulfito o tiosulfato con las placas Petrifilm
ya que pueden inhibir el crecimiento. Si es necesario usar el tampón citrato con la
técnica, sustituirlo por uno de los tampones arriba indicados, calentados a 40-45 ° C.
2. Mezclar u homogeneizar la muestra. Inoculación de las placas
3. Colocar la placa Petrifilm YM en una superficie lisa y plana Levantar el film superior
y colocar 1 ml. de la muestra o su dilución en el centro del film inferior
4. Dejar caer el film superior sobre la muestra (ver figura c).
5. Colocar el aplicador de plástico Petrifilm YM en el centro de la placa.
Presionar ligeramente el centro del aplicador para distribuir la muestra
uniformemente. Distribuir el inoculo por toda el área de crecimiento de la placa
Petrifilm antes de que se forme el gel. No deslizar el aplicador por la lámina.
6. Retirar el aplicador y dejar la placa en reposo durante al menos un minuto para que
solidifique el gel.
Incubación
Incubar las placas en posición horizontal con la lámina transparente hacia arriba y
apilándolas hasta un máximo de 20 placas. Incubar las placas Petrifilm siguiendo los
métodos habituales de referencia.
Por ejemplo el método AOAC Official MethodSM 997.02 para recuento levaduras y
mohos en alimentos, Método del film seco rehidratable (método Petrifilm): Incubar las
placas Petrifilm YM durante 5 días a 20-25°C.
Interpretación
1. Las placas Petrifilm YM se pueden leer con un contador de colonias standard o un
lector luminoso de aumento.
2. Para diferenciar las colonias de levaduras y mohos en la placa Petrifilm YM ,
observe una o más de las siguientes características :
LEVADURAS MOHOS
Colonias pequeñas Colonias grandes
Colonias de bordes definidos Colonias de bordes difusos
Color rosa tostado a azul verdoso Color variable
Colonias aparecen abultadas ("3D") Colonias de apariencia plana
Colonias de color uniforme Colonias con núcleo oscuro

3. Leer los resultados de levaduras y mohos al 5 ° día. El elevado o rápido crecimiento


de colonias de mohos puede oscurecer los resultados de la placa Petrifilm YM al 5o día.
Verificar las placas al 3er día y registrar los resultados de las placas con un alto número
de colonias (se pueden anotar directamente sobre la placa).Si la placa presenta un
crecimiento desmesurado al 5° día considerar el recuento de resultados registrados al
3er día como un recuento estimado.
4. Las colonias de mohos pueden extenderse haciendo que toda el área de crecimiento
se vuelva de color azul, negro, amarillo etc. En ese caso registrar el recuento del 3er
día como un recuento estimado de mohos
5. Un elevado número de colonias de levaduras pueden hacer que toda el área de
crecimiento se vuelva azul o que aparezca un crecimiento azul alrededor del borde de
la zona inoculada. Si las placas Petrifilm YM no muestran crecimiento levantar el film
superior y examinar el gel adherido al film. Si hay presentes numerosas levaduras se
verán colonias de color blanco en el gel. Se anotará como recuento incontable de
levaduras (TNTC).
6. El área de crecimiento circular es de aproximadamente 30 cm'. Pueden realizarse
estimaciones en placas que contengan más de 150 colonias contando el número de
colonias en uno o más cuadrados representativos y determinando el número promedio
por cuadrado. Multiplicar dicho número por 30 para obtener el recuento estimado por
placa (ver figura e).
7. Si se requiere un recuento más preciso ensayar de nuevo la muestra a mayores
diluciones.
8. Las placas Petrifilm YM incorporan un indicador de enzima fosfatasa para detectar
las levaduras y mohos. Todas las células vivas contienen fosfatasa; por tanto la
fosfatasa natural presente en las muestras puede provocar que el indicador reaccione
de alguna de estas dos maneras:
a) Fondo azul uniforme (se aprecia a menudo con organismos utilizados en
productos cultivados).
b) Intensos puntos azules (se aprecia a menudo con especias o productos
granulados).
9. Para distinguir entre la coloración causada por la fosfatasa natural del producto y la
procedente de las colonias de levaduras y mohos se puede seguir alguna o más de las
siguientes técnicas:
a) Hacer mayores diluciones de la muestra
b) Dejar sedimentar las partículas de alimento al preparar la muestra y sembrar el
sobrenadante
c) Verificar la placa a las 24-48 hr de incubación y anotar cualquier coloración
presente, si la intensidad del color no cambia al 5° día de incubación, el color
puede proceder de una reacción de la fosfatasa
10. Si es necesario, las colonias pueden aislarse para una posterior identificación.
Levantar el film superior y seleccionar la colonia del gel. Realizar las pruebas mediante
procedimientos estándar.
11. Si no fuera posible hacer el recuento de las placas al cabo de los 5 días del período
de incubación, conservarlas en el congelador a temperatura <-15°C y dentro de un
recipiente sellado hasta el momento de efectuar la lectura, que debe realizarse en el
plazo máximo de una semana.

SISTEMA DE RECUENTO STAPH EXPRESS


DESCRIPCION
Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus
consiste en un Placa Petrifilm1™ de Recuento Staph Express y un Disco de 3M Staph
Express los cuales están empacados individualmente. La Placa Petrifilm de 3M Staph
Express consiste en un medio de cultivo listo para utilizarse el cual contiene un agente
gelificante soluble en agua. El medio de cultivo modificado de Baird Parker, contiene un
cromogeno en la placa el cual es selectivo y permite diferenciar al Staphylococcus
aureus. El Disco de 3M Staph Express contiene Azul de O - Toludina el cual facilita la
visualización de la reacción desoxirribonucleasa (Dnasa). Los organismos Dnasa -
positivos detectados sobre la Placa Petrifilm de 3M Staph Express son el
Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus y Staphylococcus intermedius. Estos
tres organismos comprenden la mayoría del grupo de organismos comúnmente
conocidos como staphylococcus coagulasa - positivo. Las Placas Petrifilm de 3M Staph
Express para Recuento de Staphylococcus aureus y los Discos de 3M Staph Express
son utilizados para la enumeración de S. aureus en la industria de bebidas y alimentos.
Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus y
los componentes de los Discos de 3M Staph Express son descontaminados pero no por
esterilización. El departamento de Microbiología 3M se encuentra certificado por las
normas ISO 9001 (Organización de Estándares Internacionales).
PRECAUCIONES
Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus y
los Discos de 3M Staph Express no han sido documentadas para ser utilizadas en otro
tipo de industrias diferentes a la industria de bebidas y alimentos. Por ejemplo, 3M no
ha documentado las Placas Petrifilm Staph Express para Recuento de Staphylococcus
aureus y los Discos de 3M Staph Express para realizar análisis de agua, fármacos o
cosméticos.
Las Placas Petrifilm Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus y los
Discos de 3M Staph Express no han sido probadas en todos los tipos de productos
alimenticios, procesos de alimentos, análisis de protocolos ó todas las posibles cepas
de bacterias.
Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus y
los Discos de 3M Staph Express han sido evaluados bajo las normas de la AOAC,
AFNOR, y los lincamientos de NordVal así como criterios de validación en muestras
representativas de las siguientes categorías de alimentos: vegetales, carnes, aves,
mariscos, lácteos, y alimentos procesados.
No utilice las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus
aureus y los Discos de 3M Staph Express para diagnósticos en humanos o animales.
RESPONSIBILIDADES DE USO
Ningún medio de cultivo podrá siempre recuperar las mismas cepas exactamente o
enumerar exactamente una cepa en particular. Adicionalmente factores externos tales
como los métodos de muestreo, protocolos de análisis, tiempo de preparación y
manipulación de la muestra influyen en la enumeración y recuperación de las bacterias.
Por lo que es responsabilidad del usuario la correcta utilización del método aplicado
para el análisis así como la suficiente cantidad de muestras de un alimento en particular
para poder obtener resultados confiables.
Por lo tanto el usuario será el responsable de determinar su método de análisis y
satisfacer sus necesidades y las del cliente además determinar los requerimientos con
los proveedores.
Ningún medio de cultivo, ó las Placas Petrifilm de 3M Staph Express y los Discos de 3M
Staph Express, constituyen una garantía de calidad en los productos ó procesos de
alimentos o bebidas.
Para el uso deberá capacitarse y entrenarse al personal acerca de las técnicas de
análisis: Por ejemplo. El Manual de Buenas Prácticas de Laboratorio (E.E.U.U.
Administración de Drogas y Alimentos, Titulo 21. Parte 58 del Código de Regulaciones
Federales) o ISO 17025.
RECHAZO DE GARANTIAS / LIMITES
AL MENOS QUE SE PROHIBA POR LA LEY, 3M RECHAZA TODA GARANTIA
INCLUIDA, IMPLICADA Y EXPRESA, PERO NO LIMITADA, ALGUNA GARANTIA DE
(COMERCIALIZACION O INADECUADO USO. Si alguna Placa Petrifilm 3M ha sido
defectuosa, 3 VI o su distribuidor autorizado la reemplazara o reembolsar el dinero de
acuerdo al precio del producto. Estos son rectificaciones exclusivas. Por lo que deberá
dirigirse rápidamente y notificar a 3M dentro de los 60 días de descubrir algún defecto
del producto y entregarlo a 3M. Contáctese con Servicio al Cliente (1-800-328-1671 en
EEUU) o con su representante de Microbiología de 3M™ para obtener Autorización de
Devolución.
LIMITACION DE 3M
AL MENOS QUE LO PROHIBA LA LEY, 3M NO TENDRA NINGUNA
RESPONSABILIDAD POR PERDIDAS, DAÑOS DIRECTOS O INDIRECTOS,
ESPECIALES, INCIDENTALES O CONSECUENCIALES. Excepto donde lo prohíba la
ley, la responsabilidad de 3M no excederá ninguna leoría legal acerca de precios por la
compra de sus placas. Defectuosas. Los clientes tendrán además derechos adicionales
deberán acercarse a los locales específicos de cada ciudad donde realizaron la compra.

DISPOSICION DE ALMACENAMIENTO Almacenamiento de la Placas


Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus sin
abrir deben ser colocadas en fundas y ser almacenadas a temperaturas de refrigeración
o congelación 8° C (46"F). Antes de su utilización, las fundas sin abrir deberán
permanecer a temperatura del área donde serán abiertas. Retorne las placas sin utilizar
a las fundas. Selle la funda por el doblez y coloque un adhesivo. Para evitar el ingreso
de la humedad las fundas abiertas ya no serán refrigeradas. Las fundas reselladas
serán colocadas en un lugar seco por no más de un mes. Esto se recomienda en
fundas reselladas las placas Petrifilm deberán almacenarse en un congelador (refiérase
abajo) si la temperatura del laboratorio excede los 25"C (77°F) y/o el laboratorio se
localiza en una región con humedad relativa que excede al 50% (con excepción del aire
acondicionado.)
Almacenamiento de Discos
Los Discos de 3M Staph Express Petrifilm Staph Express de 3M se encuentran
individualmente empacas dentro de una funda de aluminio. Estas son sensibles tanto a
la humedad como a la luz. Los Discos de 3M™ Staph Express deben almacenarse a
temperaturas de refrigeración o congelación 8" C (46°F). Remueva únicamente el
empaque individual de los Discos de 3M Staph Express que utilizará inmediatamente,
almacene el resto de discos en sus respectivas fundas de sellando el borde final de la
funda. Para evitar el ingreso de la humedad las fundas abiertas ya no serán
refrigeradas. Almacene las fundas reselladas en un lugar fresco, seco por no más de
seis meses. Se recomienda que reselle las fundas de los Discos de 3M Staph Express
en una nevera (observe abajo) si el laboratorio excede de 25°C (77°F) y / o si el
laboratorio está localizado en una región donde la humedad relativa es de 50% (con
excepción de las instalaciones de aire acondicionado).
Almacenamiento en Congelación
Las fundas abiertas de las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus y los Discos de 3M Staph Express deben almacenarse en un
congelador. Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus o los Discos de 3M Staph Express deberán ser colocados
dentro de un recipiente cerrado. Para remover las Placas Petrifilm de 3M Staph Express
para Recuento de Staphylococcus aureus y los Discos de 3M Staph Express
refrigerados, abra el recipiente, remueva las Placas Petrifilm o los Discos de 3M Staph
Express que necesita e inmediatamente retorne las Placas o discos al refrigerador en
su recipiente cerrado, respectivamente. Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para
Recuento de Staphylococcus aureus y los Discos de 3M Staph Express no deben ser
utilizados si ya paso la fecha de expiración. El congelador utilizado para almacenar las
placas deberá contener un sistema de ciclo automático defrost para evitar la exposición
de las placas a la humedad y de modo que no se dañaran las placas.
No utilice placas que presente decoloración. La fecha y el número de lote es colocado
individualmente sobre cada Placa Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus y los Discos de 3M Staph Express. El número de lote es
colocado individualmente sobre cada Placa Petrifilm de 3M Staph Express para
Recuento de Staphylococcus aureus y cada Disco de 3M Siaph Express

Luego de utilizar las Placas Petrifilm de 3M Staph Express y los Discos de 3M Staph
Express estas pueden contener microorganismos que pueden ser un riesgo bio -
potencial. Siga los estándares industriales para desechar las placas.
INSTRUCCIONES DE USO Preparación de la muestra
1. Uso apropiado de diluyentes estériles:
Dilución de agua "Buffer fosfato Bulterfield, diluente" agua peptonada salada, 0.1%,
Agua-1 peptonada buferada, Agua Peptonada Bufferada Solución Ringers, solución
Salina (0.85-0.90%), Caldo Letheen libre de bisulfito ó agua destilada.
No utilice diluentes que contengan citrato, bisulfito ó tiosulfato con las Placas Petrifilm™
de 3M™ Sistema Staph Express, ya que pueden inhibir el crecimiento. No utilice
Hidrogeno di Potásico Fosfato ya que podría inhibir la reacción Dnasa. El buffer citrato
es indicado en el procedimiento estándar, calentado a (40-45°C) sustituyendo al buffer
Butterfield's fosfato o al diluyente de agua peptonada salada.
2. Homogenice la muestra.
Para un óptimo crecimiento y recuperación de los microorganismos, ajuste el pH de la
suspensión de la muestra de 6 - 8. Para productos ácidos, ajuste el pH con una
solución 1 Normal (1N) de Hidróxido de Sodio (NaOH.) Para productos alcalinos, ajuste
el pH con una solución Normal (N) de Ácido Clorhídrico (HCI.)
Inoculación
1. Coloque las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para recuento de
Staphylococcus aureus sobre una superficie plana
2. Levante la lámina superior y dispense 1 mL de la suspensión de la muestra
en el centro de la lámina
3. Deje caer la lámina hacia abajo sobre la muestra, evite la formación de
burbujas de aire
4. Inmediatamente coloque el Esparcidor Plano Petrifilm sobre el centro de la
superficie de la placa
Presione cuidadosamente sobre el centro y distribuya cuidadosamente la
Muestra. Distribuya el inoculo en la Placa Petrifilm de 3M Staph Express para
Recuento de Staphylococcus aureus sobre el área de crecimiento antes de
que se forme el gel. No deslice el esparcidor a través de la lámina.
5. Remueva el esparcidor de la placa y espere que se gelatinice la placa.
Incubación
Incube las placas horizontalmente con el área limpia hacia arriba y no más de 20 placas
una sobre otra. Incube las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus por 24 h ± 2 h a 35°C ± 1°C ó 37°C ± l"C (temperatura basada
en la referencia de la validación).
Interpretación
1. El Recuento de las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus se realiza con un contador estándar de colonia u otro iluminador
magnifícente. No recuente las colonias que se desarrollen sobre la espuma porque ellas
están alejadas de la influencia selecta del H- Retire las placas del incubador, medio de
cultivo.
2. Observe las colonias de color.
a) Si no existen colonias ó se encuentran presentes únicamente colonias de color
rojo - violeta después de las 24 h ± 2 h, recuente todas las colonias rojo - violeta
como S. aureus (observe la figura e), la prueba estará completa. Utilice el Disco
de 3M Staph Express si es necesario.
b) Si existen colonias diferentes al color rojo -violeta por ejemplo, negras - ó azul -
verdosas - utilice el disco de 3M Staph Express (observe el paso 3-11). Colonias
negras pueden causar tensión a las colonias de S. aureus. Las colonias azul -
verdosas no son S. aureus.
NOTA: Altos niveles de fosfatasa, una enzima presente naturalmente en algunos
alimentos, tales como productos de leche cruda, pueden causar dentro de la placa
alteración en el color de las colonias tornándolas de color rosado y pueden oscurecer
las colonias de color rojo - violeta. Si esto ocurre, realice mayor cantidad de dilución de
las muestras.
3. Remueva del empaque individual los Discos de 3M Staph Express de la funda y
permita que se I adquieran la temperatura del área. Remueva el disco de su
empaque individual retírelo del paquete y exponga el disco, sosteniéndolo del
fabulador, y halar hacia fuera el disco
4. Levante la lámina superior de la placa y coloque el disco sobre la placa quedando
hacia fuera el fabulador.
NOTA: Ocasionalmente el gel puede dividirse cuando la lámina se encuentra levantada.
El rendimiento de la Placa Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus no se ve afectado por el gel dividido por el disco ya que se
encuentra cubriendo ambos lados.
5. Baje la lámina superior.
6. Presione con los dedos firmemente toda el área del disco (incluyendo los bordes)
asegure un uniforme contacto del disco con el gel para eliminar cualquier burbuja de
aire.
 Si aplica demasiada presión en el gel, este puede deteriorarse, y las zonas no
podrán ser distinguidas.
 Si aplica poca presión en el gel, el gel puede secarse y no habrá formación de
las zonas.
7. Coloque las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de
Staphylococcus aureus en columnas de no más de 20 placas e incúbelas a 35°C
±1°C o a 37°C ± l°C por al menos de 60 minutos y no más de 3 horas. Revise las
placas periódicamente - la reacción DNasa se dará como resultado final en menos
de 3 horas. Si todas las colonias presentan zonas rosadas, la prueba estará
terminada y se podrá realizar el recuento de las colonias. Si algunas colonias no
presentan zonas, la placa deberá ser incubada por 3 horas adicionales.
8. Realice el recuento de todas las zonas rosada si se encuentran o no colonias
presentes. (Observe la figura h). Las zonas rosadas usualmente se encuentran
asociadas con el S. aureus pueden indicar además presencia de S. hyieus ó S.
intermedius. Las colonias no asociadas con zonas de color rosado no son S. aureus
y no deben ser contadas. Si todo el área del disco presenta color rosado sin
diferenciación de zonas, existirán por lo tanto gran cantidad de S. aureus. Almacene
los resultados de recuento numeroso y realice mayor cantidad de diluciones para
obtener un fácil recuento.
9. Cuando sea necesario, las colonias deberán ser aisladas para realizar una
identificación. Levante la lámina superior y tome una colonia del gel. Si el disco
Petrifilm de 3M Staph Express está cubriendo el gel, descubra el disco utilizando
unas pinzas y tome la colonia del gel. Deseche los Discos de 3M Staph Express
siguiendo los estándares industriales así como la esterilización de las pinzas.
10. Si las placas pueden ser contadas dentro de 1 hora retírelas del incubador, ellas
pueden ser almacenadas en un congelador dentro de un contenedor cerrado a
temperaturas bajas o iguales a- 15°C para que se realice un recuento posterior pero
por no más de una semana.
Para más información refiérase a la "Guía de Interpretación" para Placas Petrifilm™ de
3M. Si tiene alguna pregunta específica sobre la aplicación o los Procedimientos de
análisis contáctese con el representante de Microbiología de 3M.
Método Oficial AOAC 2003.07
Las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para Recuento de Staphylococcus aureus es
selectivo para varios Tipos de Procesos y alimentos preparados
Método Oficial AOAC 2003.08
El Método de las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para el Recuento de
Staphylococcus aureus es Selectivo para Alimentos Lácteos
Método Oficial AOAC 2003.11
El Método de las Placas Petrifilm de 3M Staph Express para el Recuento de
Staphylococcus aureus es Selectivo para Carnes, Mariscos y Aves
Para más detalles específicos, refiérase los Métodos Oficiales AOAC
Sistema Nórdico para Validación de Métodos microbiológicos alternativos, Validación
NordVal Ref. No Detalle del Método de Placas Petrifilm de 3M Staph Express para
todos los alimentos según la referencia de Validación NordVal 2003-20-5408-00019.
Método de Validación AFNOR 3M - 01/9 - 04 / 03)
Utilice los siguientes los detalles de la parte superior cuando realice las instrucciones de
uso.
Preparación de la muestra
Utilice solamente el listado de diluentes ISO
Incubación
Incubación de la prueba: 37°C ± 1°C por 24 h ± 2 h
Incubación de los Discos de 3M™ Staph Express: 37"C ± 1°C por 3 horas
Interpretación
El Rango de recuento es:
<150 colonias de color rojo -violeta y / ó <300 colonias totales si50 zonas rosadas
Lectura de placas dentro de 3 horas después de completar el período de incubación.
Referencias
1. FDA. 1998. Manual de Análisis Bacteriológico, 8 ava. Edición. , (Revisión A),
Apéndice 3.64.
2. Organización de Estándares Internacionales, ISO 6887 -1:1999, Lincamientos
Generales de Microbiología para la preparación de diluciones para análisis
microbiológicos.
3. Organización de Estándares Internacionales, ISO 8261:2001, Preparación de
muestras de análisis para
Leche y Productos a base de Leche y preparación de diluciones para análisis
microbiológicos.