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MURRAY

ROSENTHAL
PFALLER

Microbiología médica
edición

ERRNVPHGLFRVRUJ
Página deliberadamente en blanco
Microbiología médica
Patrick R. Murray, PhD
W o rid w id e Director, Scientific Affairs
BD Diagnostics System s
Sparks, Maryland;
A djunct Professor, Departm ent of Pathology
U n iv e rsityo f M aryland School o f M edicine
Baltimore, M aryland

Ken S. Rosenthal, PhD


Professor, Departm ent o f Integrated M edical Sciences
Northeast Ohio M edical University
R ootstown, Ohio;
A djunct Professor, H erbert W ertheim College o f M edicine
Florida International University

< ~ ^ ur ’ Miam i, Florida

«s
Michael A. Pfaller, MD
JM I Laboratories
North Liberty, lowa;
Professor Emeritus, P a tho lo gy and Epidem iology
University of low a College of M edicine and College of Public Health
lowa City, lowa

7.^edición

Amsterdam Barcelona Beijing Boston Filadelfia Londres M adrid


E L S E V IE R M éxico M ilán M unich Orlando París Rom a Sídney Tokio Toronto
ELSEVIER
Edición en español de la 7.* edición de la obra original en inglés
M e d ic a l M ic r o b io lo g y

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R evisión cien tífica:


Dr. Alberto Delgado-Iribarren García-Campos
Je fe de Sección de Microbiología. Fundación Hospital Alcorcón
Profesor Asociado de Microbiología. Universidad Rey Juan Carlos, Madrid

© 2 0 1 4 Elsevier España, S.L.


Travessera de Gracia, 17-21 - 0 8 021 Barcelona, España

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D epósito legal edición electrónica: B. 2 2 0 9 2 - 2013
Servicios editoriales: D R K Edición

Advertencia
La medicina es un área en constante evolución. Aunque deben seguirse unas precauciones de seguridad
estándar, a medida que aumenten nuestros conocimientos gracias a la investigación básica y clínica habrá
que introducir cambios en los tratam ientos y en los fármacos. En consecuencia, se recom ienda a los
lectores que analicen los últimos datos aportados por los fabricantes sobre cada fármaco para comprobar
la dosis recomendada, la vía y duración de la administración y las contraindicaciones. Es responsabilidad
ineludible del médico determinar la dosis y el tratam iento más indicado para cada paciente en función
de su experiencia y del conocim iento de cada caso concreto. Ni los editores ni los directores asumen
responsabilidad alguna por los daños que pudieran generarse a personas o propiedades como consecuencia
del contenido de esta obra.
El editor
A t o d o s a q u e llo s q u e u t ilic e n e s te lib r o ,
p a r a q u e s e b e n e ñ c ie n d e s u le c tu r a
t a n t o c o m o n o s o tr o s l o h ic im o s a l p r e p a r a r lo .
Página deliberadamente en blanco
Prefacio

a m icrobiología m édica puede ser un campo descon­ microbiólogos y los inmunólogos y, a continuación, se emplaza
L certan te para el inexperto. D urante el aprendizaje de
la m icrobiología nos enfrentam os a numerosas preguntas:
la sección de inmunología. Esta ha sido actualizada y reor­
ganizada extensam ente. Se exponen las células y los tejidos
¿Cómo consigo memorizar todos los nombres? ¿Qué agentes que componen el sistema inmunitario, y a continuación ca­
infecciosos producen cada enfermedad? ¿Por qué? ¿Cuándo? pítulos actualizados sobre la inmunidad innata, la inmunidad
¿Quién presenta riesgo? ¿Existe tratamiento? Sin embargo, específica de antígeno, la inmunidad antim icrobiana y las
todas estas dudas pueden englobarse en una pregunta funda­ vacunas. También se han reorganizado las secciones acerca de
mental: ¿qué información necesito conocer para diagnosticar las bacterias, los virus, los hongos y los parásitos. Cada sección
y tratar a un paciente infectado? se introduce con los capítulos relevantes de ciencias básicas y
Es cierto que existen diversas teorías acerca de lo que el a continuación el resumen de la enfermedad microbiana es­
estudiante necesita saber y cómo enseñárselo, lo que supues­ pecífica del capítulo antes de profundizar en la descripción de
tam ente justifica la gran cantidad de libros de microbiología los microorganismos individuales, el «desfile de microbios». Al
que han inundado las librerías en los últimos años. Aunque igual que en ediciones anteriores, existen numerosos cuadros
no reclam am os la posesión del m étodo adecuado para la con resúmenes, tablas, fotografías clínicas y casos clínicos
enseñanza de la microbiología médica (en realidad no existe originales. Los casos clínicos han sido incluidos porque cree­
el m étodo p erfecto), hemos basado las revisiones de esta mos que los estudiantes los encontrarán especialmente inte­
obra en nuestra experiencia adquirida a lo largo de años de resantes e instructivos y porque son una forma muy eficaz de
enseñanza a estudiantes de medicina, residentes y médicos presentar esta materia compleja. Cada capítulo del «desfile de
que se están subespecializando en enfermedades infecciosas, microbios» comienza con preguntas relevantes para estimular
así como en el trabajo invertido en las seis ediciones ante­ y orientar a los estudiantes a medida que exploran el capítulo.
riores. Hemos intentado presentar con claridad y concisión Por último, los estudiantes pueden acceder a la página web
los conceptos básicos de la microbiología médica, de modo www.studentconsult.com, en inglés, que proporciona enlaces
que sea de utilidad para diferentes tipos de lectores. El texto a lecturas adicionales, fotografías clínicas, los resúmenes de
está redactado de un modo sencillo, con la esperanza de cada capítulo y el acceso a más de 2 0 0 preguntas prácticas de
proporcionar explicaciones simples de conceptos difíciles. examen que ayudarán a los estudiantes a valorar sus conoci­
Los detalles se resumen en forma de tablas, en lugar de in­ mientos en la materia y a prepararse el curso y los exámenes
tercalarse a lo largo del texto, e ilustraciones en color para el de licenciatura. En la página web www.studentconsult.es, en
lector que prefiere la información visual. Los casos clínicos español, los estudiantes encontrarán las respuestas a los casos
ponen de manifiesto la importancia de asociar la realidad y clínicos y a las preguntas de la introducción de los capítulos. En
las ciencias básicas. Los aspectos más relevantes se destacan resumen, esta edición proporciona un texto comprensible, deta­
en cuadros para ayudar a los estudiantes en su revisión; y las lles, preguntas, ejemplos y una revisión, todo en la misma obra.
preguntas y los casos clínicos abordan aspectos importantes
de cada capítulo. Cada sección comienza con un capítulo que
resume las enfermedades microbianas y también proporciona A NUESTROS FUTUROS COLEGAS:
material de repaso. LOS ESTUDIANTES
Nuestros conocimientos microbiológicos e inmunológicos
están aumentando con rapidez, gracias a los nuevos y fas­ A primera vista, podría parecer que el éxito en la microbio­
cinantes descubrimientos en todas las áreas. La expansión de logía m édica depende de la memorización. Puede parecer
los conocimientos también podría dar lugar a la ampliación que la microbiología consiste únicamente en datos innume­
del libro. Nos hemos servido de nuestra experiencia como rables, pero en la microbiología e inmunología existe una
autores y docentes para incluir en esta obra la información lógica. Com o un detective médico, el primer paso consiste
y las explicaciones que creemos más relevantes. Todos los en conocer al villano. Los microbios establecen sus nichos en
capítulos han sido cuidadosamente actualizados y ampliados nuestros organismos y dicha capacidad y las enfermedades
para incluir nuevos descubrimientos im portantes desde el que pueden resultar dependen de cómo interaccionen con
punto de vista médico. En cada uno de estos capítulos hemos el hospedador y de las respuestas protectoras inmunitarias e
intentado presentar el material que creemos que puede ayu­ innatas que tengan lugar.
dar a que el estudiante obtenga un conocimiento claro acerca Existen muchas formas de iniciarse en el aprendizaje de
de la importancia de cada microorganismo y las enfermedades la microbiología y la inmunología, pero en último térm ino,
que provoca. cuanto más interactúe con el material por medio de múltiples
Con cada edición de M icrobiología m édica perfeccionamos sentidos, más aprenderá y mejorará su capacidad de retenti­
y actualizamos nuestra presentación. En la séptima edición va. Un método divertido y efectivo de enfocar el aprendizaje
se recogen m uchos cam bios, incluyendo una reorganiza­ es pensar com o un m édico y tra ta r cada m icrobio y sus
ción de los capítulos. El libro comienza con una introducción enferm edades com o si se tratase de una infección en un
general a la microbiología y las técnicas empleadas por los paciente suyo. Invéntese un paciente para cada infección

vií
v iíí PREFACIO

m icrobiana y compare y contraste los diferentes pacientes. toxinas) o en un tipo de enfermedad (p. ej., meningitis) y
Realice representaciones y hágase las siete preguntas bási­ enum ere los microorganismos que com parten dichas pro­
cas cuando se en frente a este m aterial: ¿Quién? ¿Dónde? piedades. Imagine que un enferm o ficticio está infectado
¿Cuándo? ¿Por qué? ¿Cuál? ¿Qué? y ¿Cómo? Por ejemplo: por un microorganismo específico y elabore un caso clínico.
¿Quién presenta riesgo de sufrir la enferm edad? ¿Dónde Explique el diagnóstico a su enfermo imaginario y también
causa in feccion es este m icroorganism o (región corporal a sus futuros compañeros de profesión. En otras palabras, no
y área geográfica)? ¿Cuándo es im portante el aislamiento intente simplemente memorizar página tras página de datos;
de este microorganismo? ¿Por qué puede causar enfermedades sino que es m ejor utilizar técnicas que estimulen su m ente
este microorganismo? ¿Cuáles son las especies y los géneros y su comprensión de los datos presentados a lo largo de la
importantes desde el punto de vista médico? ¿Qué pruebas obra. U tilice el capítulo resumen presente al inicio de cada
diagnósticas deberían realizarse? ¿Cómo se trata esta infec­ sección de microorganismos para ayudar a perfeccionar su
ción? Cada microorganismo encontrado puede examinarse «diagnóstico diferencial» y a clasificar los microorganismos
de un m odo sistem ático. La inform ación esencial puede en «cuadros» lógicos.
resum irse en el acrónimo V IR ID E P T : se deben conocer Nuestros conocimientos microbiológicos están aumentan­
las propiedades de V irulencia del microorganismo; cómo do constantemente; si desde el inicio se construye una buena
Id en tificar la etiología m icrobiana de la enferm edad; las base de conocimientos, será mucho más sencillo conocer los
condiciones específicas o los m ecanismos de Replicación avances futuros.
del m icrobio; los aspectos útiles y perjudiciales de la res­ Ningún libro de esta magnitud tendría éxito sin la con­
puesta Inmunitaria e Innata a la infección; los signos y las tribución de numerosos profesionales. Queremos agradecer
consecuencias de la enfermedad (del inglés, Disease); la Epi­ la valiosa ayuda profesional y el apoyo proporcionado por el
demiología de las infecciones; cómo Prevenir la enfermedad equipo de Elsevier, especialm ente a Jim M erritt, W illiam
y su Tratamiento. Aprenda de tres a cinco palabras asociadas Schm itt, Katie D ePrancesco y Kristine Feeherty. También
con el microbio, las cuales estimularán su memoria (palabras querem os dar las gracias a los numerosos estudiantes y a
clave), y organice los conocim ientos en un cuadro lógico. los colegas de profesión que han proporcionado consejos y
Desarrolle asociaciones alternativas. Por ejem plo, este li­ críticas constructivas a lo largo de la elaboración de esta sexta
bro presenta los microorganismos siguiendo una estructura edición de M icrob iolog ía m éd ica.
taxonómica sistemática (denominada con frecuencia «desfile
de microbios», aunque los autores pensamos que es la forma P a tñ ck R. M urray, PhD
más sencilla de explicar los microorganismos). Piense en una K en S. Kosenthal, PhD
propiedad de virulencia determinada (p. ej., producción de M ich a elA . Pfaller, M D
índice de capítulos

SECCIÓN 1 15 Papel de las bacterias en la enferm edad 147

Introducción 16 Diagnóstico de laboratorio


de las enferm edades bacterianas 157
1 Introducción a la m icrobiología m édica 3
17 Agentes antibacterianos 165
2 Flora m icrobiana com ensal y patógena
en el ser hum ano 6 18 S ta p h y lo c o c c u s y cocos gram positivos
relacionados 174
3 Esterilización, desinfección y antisepsia 11
19 S tre p to c o c c u s 188

SECCIÓN 2 20 E n te ro c o c c u s y otros cocos gram positivos 205

Principios generales 21 B a d il US 209


del diagnóstico de laboratorio
22 U s te r ia y E r y s ip e h th rix 216
4 M icroscopía y cultivo in v itr o 19
23 C o ry n e b a c te riu m y otros bacilos
5 Diagnóstico m olecular 25 gram positivos 222

6 Diagnóstico serológico 29 24 N o c a rd ia y bacterias relacionadas 228

25 M y c o b a c te ríu m 235
SECCIÓN 3
26 N eisseria y géneros relacionados 248
Conceptos básicos
de la respuesta inmunitaria 27 Enterobacteriaceae 258

7 Elem entos de las respuestas protectoras 28 V ib r io y A e ro m o n a s 273


del hospedador 37
29 C a m p y lo b a c te r y H e lic o b a c te r 280
8 Respuestas innatas del hospedador 47
30 Pseudom onas y bacterias relacionadas 288
9 Respuestas inm unitarias específicas
frente a antígenos 61 31 Haemop/7//u5 y bacterias relacionadas 296

10 Respuestas inm unitarias a los m icroorganism os 32 B o rd e te lla 304


infecciosos 79
33 F ra n d s e lla y B rucella 310
11 Vacunas antim icrobianas 99
34 L e g io n e lla 317

SECCIÓN 4 35 Otros bacilos g ram negativos 322

Bacteriología 36 C lo s tríd iu m 327

12 Clasificación, estructura y replicación 37 Bacterias gram positivas anaerobias


de las bacterias 109 no form adoras de esporas 339

13 M etabolism o y genética de las bacterias 122 38 Bacterias gram negativas anaerobias 345

14 M ecanism os de patogenicidad bacteriana 138 39 T re p o n e m a , B o rre lla y L e p to s p ira 350


In d ic e d e c a p ít u l o s

40 M y c o p la s m a y U rea p la s m a 364 SECCIÓN 6


41 R ickettsia y O rie n tia 368 Mitología
42 E h rlic h ia ,A n a p la s m a y C o x ie lla 375 65 Clasificación, estructura y replicación
de los hongos 605
43 C h ia m y d ia y C h ia m y d o p h ila 381
66 Patogenia de las micosis 611

67 Im portancia de los hongos en la enferm edad 619


SECCIÓN 5
Virología 68 Diagnóstico de laboratorio de las micosis 621

69 Fárm acos antifúngicos 631


44 Clasificación, estructura y replicación vírica 393

70 Micosis superficiales y cutáneas 643


45 M ecanism os de patogenia vírica 410

71 Micosis subcutáneas 652


46 Papel de los virus en las enferm edades 421
72 Micosis sistémicas causadas por hongos
47 Diagnóstico de laboratorio dim órficos 661
de las enferm edades víricas 429
73 Micosis oportunistas 675
48 Fárm acos antivirales y control
de las infecciones 437 74 Micosis e infecciones seudom icóticas de etiología
atípica o desconocida 697
49 Pap ilo m aviru syp o lio m aviru s 445
75 M icotox in asy micotoxicosis 706
50 Adenovirus 454

51 Virus herpes hum anos 461 SECCIÓN 7


52 Poxvirus 484 Parasitología
53 Parvovirus 490 76 Clasificación, estructura y replicación
de los parásitos 715
54 Picornavirus 495
77 Patogenia de las parasitosis 722
55 Coronavirus y norovirus 506
78 Papel de los parásitos en la enferm edad 726
56 Param ixovirus 512
79 Diagnóstico de laboratorio de las parasitosis 728
57 Ortom ixovirus 524
80 Fárm acos antiparasitarios 737

58 Rhabdovirus, filovirus y bornavirus 533


81 Protozoos intestinales y urogenitales 745

59 Reovirus 541
82 Protozoos sanguíneos y tisulares 759

60 T o g aviru syfla viviru s 549 83 Nem atodos 778

61 B u n ya virid a eyA ren avirid a e 561 84 Trem átodos 796

62 Retrovirus 567 85 Cestodos 806

63 Virus de las hepatitis 583 86 Artrópodos 817

64 Virus lentos no convencionales: priones 598 Indice alfabético 835


SECCIÓN 1
FW SF¡

Introducción
Página deliberadamente en blanco
Introducción a la microbiología
médica

s fácil imaginarse la em oción que sintió en 1 6 7 4 el bió­


E logo holandés Antón van Leeuwenhoek cuando examinó
con sus lentes de microscopio, cuidadosamente pulimenta­
V ir u s

Los virus son las partículas infecciosas de m enor tamaño,


das, una gota de agua y descubrió un mundo formado por con un diámetro que oscila desde los 18 hasta los 6 0 0 nm (la
mayor parte de los virus tiene un tamaño inferior a 2 0 0 nm
m illones de diminutos «animálculos». Casi 100 años des­
y no puede visualizarse m ediante el m icroscopio óptico)
pués el biólogo danés O tto M üller amplió los estudios de
(v. cap. 4 4 ). Los virus contienen típicam ente ácido desoxi-
Van Leeuwenhoek y, siguiendo los m étodos de clasificación
rribonucleico (ADN) o ácido ribonucleico (A RN ), pero no
de Carlos Linneo, organizó las bacterias en géneros y es­
ambos; sin embargo, algunas partículas similares a los virus
pecies. Se trataba del inicio de la clasificación taxonóm ica no contienen ningún ácido nucleico detectable (p. ej., priones;
de los microorganismos. En 1840 el anatomopatólogo ale­ V . cap. 64), mientras que los recientemente descritos Mimivirus
mán Friedrich H enle propuso unos criterios para demostrar contienen AD N y ARN al mismo tiempo. Los ácidos nucleicos
que los microorganismos eran responsables de la aparición víricos necesarios para la replicación están envueltos en una
de enferm edades en el ser humano (la denominada «teoría cubierta de proteínas, con o sin una cubierta de membrana
de los gérmenes» de las enferm edades). En las décadas de lipídica. Los virus son parásitos verdaderos, que necesitan de
1 8 7 0 y 1 8 8 0 Robert Koch y Louis Pasteur confirm aron las células del huésped para su replicación. Las células a las
esta teoría m ediante una serie de elegantes experim entos que infectan y la respuesta del hospedador ante la infección
en los que demostraron que los microorganismos eran res­ condicionan la naturaleza de las manifestaciones clínicas. Se
ponsables de la aparición del carbunco, la rabia, la peste, han descrito más de 2 .0 0 0 especies de virus, de las que unas
el cólera y la tuberculosis. Más adelante, otros brillantes 650 infectan a las personas y los animales. La infección puede
científicos confirm aron que una amplia variedad de m i­ ocasionar una replicación rápida y la destrucción celular,
croorganism os producían otras enferm edades humanas. o dar lugar a una relación crónica latente en la que puede
La era de la quim ioterapia com enzó en 1 9 1 0 , cuando el ocurrir que la información genética del virus se integre en el
químico alemán Paul Ehrlich descubrió el primer compues­ genoma del hospedador. Se conocen tan sólo parcialmente los
to antibacteriano, un compuesto que resultó efectivo contra factores que determinan estas posibles opciones. Por ejemplo,
la in fección por el virus de la inm unodeficiencia hum a­
la espiroqueta causante de la sífilis. En los años posteriores
na (VIH), agente etiológico del síndrome de inmunodeficiencia
se asistió al descubrim iento de la penicilina por Alexander
adquirida (SID A ), puede provocar una infección latente de
Fleming en 1928, de la sulfanilamida por Gerhard Domagk
los linfocitos C D 4 o una replicación activa con destrucción de
en 1 935 y de la estreptom icina por Selm an Waksman en
estas células de gran importancia para el sistema inmunitario.
1 9 4 3 . En 1 9 4 6 el microbiólogo estadounidense Joh n En-
Asimismo, la infección puede propagarse a otras células sus­
ders fue el primero en cultivar virus en cultivos celulares, ceptibles (p. ej., las células microgliales del cerebro), lo que
proporcionando así un m edio para la producción a gran ocasiona la aparición de las manifestaciones neurológicas del
escala de cultivos víricos para el desarrollo de vacunas. SIDA. El virus determina la enfermedad, que puede variar
Los primeros pasos de estos innovadores investigadores se desde un resfriado común y episodios de gastroenteritis hasta
han seguido por miles de científicos que, trabajando con cuadros clínicos m ortales como la rabia, la enfermedad de
los fundam entos establecidos por sus predecesores, han Ébola, la viruela y el SIDA.
añadido cada vez más datos para ampliar los conocim ientos
sobre los m icroorganism os y el papel que e jerc en en la
B a c t e r ia s
aparición de las enfermedades.
El mundo descubierto por Van Leeuwenhoek era com ­ Las bacterias poseen una estructura relativam ente simple.
plejo y estaba formado por protozoos y bacterias de todas las Son microorganismos procariotas, es decir, unos microorga­
formas y tamaños. Sin embargo, la complejidad de la micro­ nismos unicelulares sencillos, sin membrana nuclear, m ito-
biología médica actual desafía los límites de la imaginación. condrias, aparato de Golgi ni retículo endoplasmático que se
Así, en la actualidad se sabe que existen miles de diferentes reproducen por división asexual. La pared celular que rodea
tipos de microorganismos que viven en el interior, en la su­ a las bacterias es compleja, y existen dos formas básicas: una
perficie o alrededor del ser humano y, asimismo, pueden pared celular grampositiva con una gruesa capa de peptido-
contarse por centenares los que son capaces de provocar en glucano y una pared celular gramnegativa con una delgada
él enfermedades graves. Para entender esta información y or­ capa de peptidoglucano, así com o una m embrana externa
ganizaría de una forma útil, es importante conocer algunos (en el cap. 12 se describe en mayor medida esta estructura).
de los aspectos básicos de la microbiología médica. En principio, Algunas bacterias carecen de pared celular y compensan su
los microorganismos pueden subdividirse en cuatro grupos: ausencia sobreviviendo tan sólo en el interior de células del
virus, bacterias, hongos y parásitos (dotado cada uno de ellos hospedador o en un ambiente hipertónico. Para realizar una
de su propia complejidad). clasificación preliminar de las bacterias se utiliza su tamaño

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M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

(de 1 a 2 0 (Jim o más), forma (esferas, bastoncillos, espirales) y los invasores microbianos contribuye o puede ser la causa
y disposición espacial (células aisladas, en cadenas, formando de los síntomas de la enferm edad. En últim o térm ino, las
cúmulos), mientras que su clasificación definitiva se refiere respuestas innatas e inmunitarias son la m ejor prevención y
a sus propiedades fenotípicas y genotípicas. El organismo la m ejor curación para las enfermedades microbianas.
humano está habitado por miles de especies bacterianas dis­
tintas; mientras algunas m antienen una relación parasitaria
En ferm ed a d es m ic r o b ia n a s
temporal, otras habitan en el ser humano de manera perma­
nente. También se encuentran bacterias en el ambiente, como Uno de los motivos más importantes para el estudio de los
el aire que se respira, el agua que se bebe y los alimentos microorganismos es conocer las enfermedades que provocan
que se comen; aunque muchas de ellas son relativam ente y el modo de controlarlas. Por desgracia, la relación entre
avirulentas, otras son capaces de provocar enferm edades muchos microorganismos y las enfermedades que producen
potencialmente mortales. La enfermedad puede deberse a no es sencilla. Concretam ente, aunque los microorganismos
los efectos tóxicos de los productos bacterianos (toxinas) o rara vez provocan una enfermedad bien definida, existen al­
bien a la invasión de regiones corporales que acostumbran a gunos que sí lo hacen (p. ej., C lostridium tetani, agente causal
ser estériles. del tétanos; virus Ebola, agente causal de la enfermedad de
Ebola; género Plasm odiutn, agente causal del paludismo).
En cambio, es más frecuente que un microorganismo dado
Hongos origine la aparición de numerosas manifestaciones clínicas de
A diferencia de las bacterias, la estructura celular de los enfermedad (p. ej., Staphylococcus aureus, agente causal de
hongos es más com pleja. Son microorganismos eucariotas endocarditis, neumonía, infecciones de heridas e intoxica­
que poseen un núcleo bien definido, mitocondrias, aparato ciones alimentarias) o bien que varios microorganismos pro­
de Golgi y retículo endoplasmático (v. cap. 6 5 ). Los hongos duzcan una misma enfermedad (p. ej., meningitis por virus,
pueden existir en una forma unicelular (levadura) capaz de bacterias, hongos o parásitos). Asimismo, son relativamente
replicarse de manera asexual, o en una form a filamentosa pocos los microorganismos de los que puede decirse que
(m oho), capaz de replicarse de manera tanto asexual como siempre son patógenos (p. ej., virus de la rabia, E acillus anth-
sexual. La mayor parte de los hongos existen en forma de racis, Sporothrix schenckii, género P lasm odium ). D e hecho, la
levadura o bien en form a de m oho. Sin embargo, algunos mayoría de los microorganismos tan sólo provoca enfermedad
de ellos pueden adoptar ambas morfologías; se trata de los en unas condiciones bien definidas (p. ej., introducción de
llamados hongos dimórficos, como H istop h sm a, Blastom yces un microorganismo potencialmente patógeno en una locali­
y C occid ioides. zación normalmente estéril como el cerebro, el pulmón y la
cavidad peritoneal). Algunas enfermedades aparecen cuando
un individuo se expone a los microorganismos a través de
P a r á s it o s fuentes externas. Se denominan infecciones exógenas, y
engloban ejemplos como las enfermedades causadas por el
Los parásitos son los microorganismos con mayor grado de virus de la gripe, C lostridium tetani, N eisseria gonorrhoeae,
complejidad. Aunque todos los parásitos se clasifican como C occid ioid es im m itis y E n tam oeba histolytica. Sin embargo,
eucariotas, algunos son unicelulares y otros son pluricelulares
la mayor parte de las enfermedades del ser humano se deben
(v. cap. 76). Su tamaño oscila desde protozoos diminutos de
a la infección por microorganismos presentes en su microflora
tan sólo 1-2 (jim de diámetro (el tamaño de muchas bacte­ que se diseminan a localizaciones del organismo en las que
rias) hasta platelm intos que pueden llegar a los 10 metros pueden producir enfermedad (infecciones endógenas).
de longitud y artrópodos (pulgas). D e hecho, resulta difícil
La interacción entre un microorganismo y el ser humano
imaginar cómo pudieron clasificarse estos organismos como
es compleja. Puede producir una colonización transitoria, una
«microbios» teniendo en cuenta el tamaño de algunos de ellos. relación simbiótica crónica o bien la aparición de una enfer­
Su ciclo vital es, igualmente, complejo, de forma que algunos medad. El resultado final de esta interacción se encuentra
establecen una relación perm anente con el ser humano y determinado por la virulencia del microorganismo, el lugar de
otros atraviesan un conjunto de etapas de desarrollo en una la exposición y la capacidad de respuesta del hospedador. Por
serie de huéspedes animales. Una de las dificultades a que tanto, las manifestaciones clínicas de la enfermedad pueden
deben enfrentarse los estudiantes es no sólo comprender el variar desde síntomas leves hasta el fracaso multiorgánico
conjunto de enfermedades causadas por los parásitos, sino y la m uerte. El papel de la virulencia microbiana y la res­
también conocer la epidemiología de estas infestaciones (la
puesta inmunitaria del hospedador se estudia con detalle en
cual es fundamental para entender el modo de controlarlas capítulos posteriores.
y prevenirlas). El organismo humano está muy adaptado a controlar la
exposición a microorganismos patógenos. Distintas barreras
físicas impiden la invasión por los microorganismos; las res­
In m u n o l o g í a
puestas innatas reconocen patrones moleculares caracterís­
Es difícil analizar la microbiología humana sin discutir tam ­ ticos de los componentes microbianos y activan los mecanis­
bién las respuestas innatas e inmunitarias frente a los m i­ mos de defensa local y las respuestas inmunitarias específicas
croorganismos. Nuestras respuestas innatas e inmunitarias que actúan contra el microorganismo con el propósito de
evolucionaron para protegernos de las infecciones. Al mismo eliminarlo. Lam entablem ente, la respuesta inmunitaria es,
tiempo, los microorganismos que viven en nuestros cuerpos con frecuencia, excesivamente tardía o lenta. Para mejorar
como flora normal o como microorganismos productores de la capacidad de prevención de la infección del organismo
enfermedades deben ser capaces de soportar o escapar a esas humano, se puede potenciar el sistema inmunitario mediante
protecciones del huésped durante el tiempo suficiente como la transferencia pasiva de anticuerpos incluidos en prepara­
para poder establecer su nicho dentro de nuestros cuerpos ciones de inmunoglobulinas o m ediante la vacunación con
o diseminarse a nuevos huéspedes. El daño periférico que se componentes microbianos (vacunas). Las infecciones también
produce durante la guerra entre las protecciones del huésped se pueden controlar mediante compuestos quimioterápicos
INTRODUCCIÓN A LA M ICRO BIOLO GÍA M ÉDICA

diversos. No obstante, los microorganismos pueden mutar Aunque el valor de estas pruebas es limitado, el laboratorio
y compartir información genética, y los que no puedan ser tam bién puede determ inar la actividad antimicrobiana de
reconocidos por la respuesta inmunitaria debido a la variación los fármacos quimioterápicos. El laboratorio tan sólo debe
antigénica o que sean resistentes a los antibióticos se selec­ estudiar los microorganismos capaces de producir enfermeda­
cionarán y perdurarán. En consecuencia, persiste la batalla des y los fármacos antimicrobianos médicamente más signifi­
por el control entre el microorganismo y el hospedador sin cativos. La evaluación de todos los microorganismos aislados
que ninguno de ellos haya podido proclamar aún la victoria o una selección indiscriminada de fármacos puede dar lugar
(aunque los microorganismos han demostrado ser bastante a resultados equívocos y a consecuencias potencialm ente
más ingeniosos que los seres humanos). Es evidente que no peligrosas. Por ello, puede ocurrir que un paciente reciba un
hay ninguna «bala mágica» que haya erradicado las enferm e­ tratamiento inapropiado basado en antibióticos innecesarios
dades infecciosas. y, además, que no se identifique al verdadero microorganismo
patógeno en el amplio abanico de microorganismos aislados y
estudiados. Finalmente, la determinación in vitro de la sus­
D ia g n ó s t ic o m ic r o b io l ó g ic o
ceptibilidad de un microorganismo a diversos antibióticos tan
El laboratorio de microbiología clínica desempeña un impor­ sólo representa un aspecto más de una compleja situación.
tante papel en el diagnóstico y el control de las enfermedades En la planificación del tratam iento de un paciente también
infecciosas. Sin embargo, la capacidad del laboratorio para re­ se deben tener en cuenta la interacción huésped-parásito y
alizar estas funciones se encuentra limitada por factores como aspectos como la virulencia del microorganismo, la zona de
la cahdad de la muestra recogida en el paciente, el medio de la infección y la capacidad de respuesta del paciente frente
transporte de la muestra al laboratorio y las técnicas utilizadas a los efectos de la infección.
para demostrar la presencia del microorganismo. Puesto que
la mayoría de las pruebas diagnósticas se basa en la capacidad
Resu m en
de crecimiento del microorganismo, las condiciones del trans­
porte han de asegurar su viabilidad. Asimismo, incluso los Es importante entender que los conocimientos sobre el mun­
protocolos de recogida de muestras más sofisticados carecen do microbiano experim entan una evolución continua. D el
de valor cuando la m uestra recogida no es representativa mismo modo que los primeros microbiólogos basaron sus
del foco de la infección. Aunque esto parece obvio, m u­ descubrimientos en los principios establecidos por sus prede­
chas muestras remitidas a los laboratorios para su análisis se cesores, nosotros (y las futuras generaciones] continuaremos
contaminan durante el proceso de recogida con microorganis­ descubriendo nuevos microorganismos, nuevas enfermedades
mos que colonizan las mucosas. Dado que la mayor parte y nuevos tratamientos. Los capítulos que siguen pretenden
de las infecciones se deben a microorganismos endógenos, proporcionar los fundamentos básicos para ampliar los co­
es prácticamente imposible interpretar los resultados de las nocimientos sobre los microorganismos y las enfermedades
pruebas realizadas con muestras contaminadas. que provocan.
Flora microbiana comensal
y patógena en el ser humano 2
a microbiología médica se centra en el estudio de las inter­ a la infección (p. ej., la alteración anatomopatológica de las
L acciones existentes entre los animales [principalmente el
ser humano) y los microorganismos como las bacterias, los virus,
infecciones por el coronavirus responsable del síndrome res­
piratorio agudo grave [SRAG] se debe fundamentalmente a
los hongos y los parásitos. Aunque su principal interés radica la respuesta inmunitaria del paciente contra el virus).
en las enfermedades causadas por estas interacciones, también La comprensión de la microbiología médica exige conocer
no sólo las diferentes clases de microorganismos existentes,
debe tenerse en cuenta que los microorganismos desempeñan
sino también su predisposición a causar enfermedades. Unas
un papel significativo en la supervivencia del ser humano. La
pocas infecciones se deben a patógenos estrictos (es decir,
población comensal normal de microorganismos participa en
microorganismos que se asocian siempre a enfermedad en el
la metabolización de los productos alimentarios, proporciona
ser humano). Algunos ejemplos de patógenos estrictos y la
factores esenciales para el crecimiento, protege frente a las in­ enfermedad que provocan son M y cobacteriu m tuberculosis
fecciones provocadas por gérmenes de alta virulencia y estimula (tuberculosis), N eisseria gon orrhoeae (gonorrea), Francisella
la respuesta inmunitaria. En ausencia de estos microorganismos, tu laren sis (tularem ia), género P lasm od iu m (paludismo) y
la vida tal como la conocemos sería del todo imposible. el virus de la rabia (rabia). Sin embargo, la mayoría de las
La flora microbiana presente tanto en la superficie como en infecciones se deben a patógenos oportunistas, es decir, unos
el interior del organismo humano se encuentra en un continuo microorganismos que forman parte de la microflora normal del
estado de flujo determinado por factores diversos como la paciente (p. ej., Staphylococcus aureus, E sch eñ ch ia coli, C an ­
edad, la dieta, el estado hormonal, el estado de salud y la d id a a lb ic a n s ). En condiciones normales estos microorganis­
higiene personal. Mientras que el feto humano se desarrolla mos no producen enfermedad, pero sí la provocan cuando son
en un am biente estéril y protegido, el recién nacido se ve introducidos en localizaciones no protegidas (p. ej., el torrente
expuesto a microorganismos procedentes tanto de la madre sanguíneo o los tejidos). Los factores específicos responsables
como del medio ambiente. Lo primero que colonizan los mi­ de la virulencia de los patógenos estrictos y oportunistas se es­
croorganismos es la piel del lactante, seguida de la bucofaringe, tudian en capítulos posteriores. Cuando el sistema inmunitario
el aparato digestivo y otras mucosas. Asimismo, esta población del paciente es defectuoso, el sujeto es más vulnerable a la
de microorganismos experimenta cambios continuos durante enfermedad producida por patógenos oportunistas.
toda la vida de una persona. Los cambios del estado de salud La población microbiana que coloniza el ser humano es
tam bién pueden alterar de forma espectacular el delicado numerosa y diversa. Nuestros conocimientos actuales sobre la
equilibrio que existe entre el ser humano y los microorganis­ composición de esta población se basan en métodos de cultivo
mos heterogéneos que subsisten en su interior. Por ejemplo, la exhaustivos; sin embargo, se estima que sólo un pequeño por­
hospitalización de un paciente puede hacer que microorganis­ centaje de los microbios se pueden cultivar. Para comprender
mos normalmente no virulentos de la bucofaringe sean sus­ mejor la población microbiana se ha iniciado un proyecto a
tituidos por bacilos gramnegativos (p. ej., K lebsiella, Pseudo- gran escala, llamado H um an M icrobiom e P roject (HMP,
m onas) que invaden los pulmones y producen la aparición de proyecto microbioma humano), para caracterizar de forma
una neumonía. De igual modo, la proliferación de Clostridium exhaustiva los microbios humanos y analizar su implicación en
d ifficile en el aparato digestivo se encuentra controlada por las la salud y la enfermedad humana. Actualmente se están ana­
bacterias presentes en el intestino. Sin embargo, en presencia lizando de forma sistemática con técnicas genómicas la piel
de antibióticos se elimina esta microflora indígena y C. difficile y todas las mucosas corporales. La fase inicial de este estudio
es capaz de proliferar y producir diarrea y colitis. finalizó en 2 0 1 2 , y es evidente que el microbioma humano es
La exposición de una persona a un microorganismo puede complejo, está formado por muchos microorganismos que no
ocasionar uno de estos tres resultados. El microorganismo se reconocían previamente, y experimenta cambios dinámicos
puede: 1) colonizar a la persona de forma transitoria; 2) coloni­ en la enfermedad. Si se desea la información más actual sobre
zarla de forma permanente, o 3] provocar una enfermedad. Es este estudio, se debería consultar la página de internet del
im portante diferenciar entre colonización y enferm edad. proyecto H M P en http://nihroadmap.nih.gov/hmp/. Para
(Nota: Muchas personas utilizan de manera inapropiada el esta edición de M icro b io lo g ía m éd ic a , la inform ación que
término in fección como sinónimo de ambos.) Los microor­ se incluye en este capítulo se basa en los datos obtenidos
ganismos que colonizan al ser humano (sea durante un breve de cultivos sistemáticos, pero asumimos que gran parte de
período de tiempo, como horas o días [transitorio], o de forma nuestros conocimientos actuales pueden ser muy distintos
permanente) no alteran las funciones normales del organis­ de lo que podemos llegar a conocer en los próximos 5 años.
mo. En cambio, la enfermedad aparece cuando la interacción
entre el microorganismo y el ser humano ocasiona un proceso
anatomopatológico que provoca daños en el huésped humano. Ca b ez a y a p a r a t o r e s p ir a t o r io
Este proceso puede tener su origen en factores microbianos
(p. e j., daño orgánico causado por la proliferación del microor­ Boca, orofaringe y nasofaringe
ganismo o la producción de toxinas o enzimas citotóxicas) o Las vías respiratorias superiores están colonizadas por
bien en la respuesta inmunitaria del organismo huésped frente numerosos microorganismos y existen entre 10 y 100 bacterias
© 2014. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos
FLORA M ICRO BIAN A CO M EN SA L Y PATÓ GENA EN EL SER HUM ANO

Oído
Microorganismos que colonizan con más frecuencia El microorganismo que coloniza más a menudo el oído exter­
el aparato respiratorio superior no es Staphylococcus coagulasa-negativo. En esta localización
se han aislado también otros microorganismos que colonizan
Bacterias la piel, así como patógenos potenciales como S. pneum oniae,
A cinetobacter Pseudomoncis aeruginosa y especies de la familia Enterobac­
Actinobacilliis teriaceae.
Actinomyces
Cardiobacterium Ojo
Corynebacterium La superficie ocular está colonizada por estafilococos nega­
Eikenella tivos para coagulasa, así como por microorganismos poco
E n te ro b a c te r ia c e a e frecuentes que se asocian a la nasofaringe (p. ej., géneros H a e ­
Eubacterium mophilus y N eisseria, Streptococcus v irid an s]. La enfermedad
Fusobacterium se relaciona habitualm ente con S. p n eu m on iae, S. aureus,
Haemophiliis H. influenzae, N . gonorrhoeae, C h la m y d ia trachom atis, P. a e ­
Kingella ruginosa y Bacillu s cereus.
M oraxella
M ycoplasma Vías respiratorias inferiores
N eisseria
Peptostreptococcus La laringe, la tráquea, los bronquiolos y las vías respiratorias
Porphyromonas inferiores suelen ser estériles, aunque puede tener lugar una
Prevotella colonización transitoria por secreciones de las vías respira­
Propionibacterium torias superiores. Por regla general la enfermedad aguda de
Staphylococcus las vías respiratorias inferiores se debe a bacterias orales más
Streptococcus virulentas (como S. pn eu m on iae, S. au reu s y especies de la
Stomatococcus familia Enterobacteriaceae como K le b sielld ]. La aspiración
Treponema crónica puede ocasionar una enferm edad polim icrobiana
Veillonella en la que predominan los microorganismos anaerobios, en
Hongos especial Peptostreptococcus, cocos anaerobios relacionados
C an dida y bacilos anaerobios gramnegativos. Algunos hongos como
C. a lb ic a n s son una causa infrecuente de enferm edad en
Parásitos
las vías respiratorias inferiores, aunque se debe demostrar
Entam oeba la invasión tisular por estos microorganismos para excluir
Trichomonas una colonización simple. Por el contrario, la presencia de
hongos dimórficos (p. ej., H istoplasm a, C occid ioid es y género
B lastom y ces] tiene capacidad diagnóstica debido a que en
esta localización nunca se registra una colonización por estos
anaerobias por cada bacteria aerobia (cuadro 2 -1 ). Las bacte­ microorganismos.
rias anaerobias más frecuentes pertenecen al género Peptos­
trep tococcu s y a otros cocos anaerobios relacionados, Vei­ T ubo d ig e s t iv o
llonella, A ctinom yces y Fusobacterium . Las bacterias aerobias
más frecuen tes se incluyen en los géneros S treptococcu s, El tubo digestivo se encuentra colonizado por microorganis­
H a em op h ilu s y N e is s er ia . La proporción relativa de estos mos ya desde el nacimiento, y sigue albergando una variada
microorganismos varía según las diferentes localizaciones población de microbios durante toda la existencia del organis­
anatómicas; por ejem plo, la flora microbiana presente en mo huésped (cuadro 2 -2 ). Aunque la ingestión de alimentos
la superficie de un diente es muy distinta de la flora salival y agua supone cada día una oportunidad de colonización por
o de la existen te en los espacios subgingivales. La mayor nuevos microorganismos, la población microbiana permanece
parte de los microorganismos comunes en las vías respira­ relativamente estable a no ser que se altere el equilibrio de
torias superiores son relativam ente avirulentos y, a no ser la microfiora como consecuencia de factores exógenos, como
que sean introducidos en localizaciones norm alm ente es­ un tratamiento antibiótico.
tériles (p. ej., senos paranasales, oído medio, cerebro), pocas
Esófago
veces se asocian a enfermedad. Sin embargo, también pueden
aparecer microorganismos potencialmente patógenos en las Se pueden aislar levaduras y bacterias orofaríngeas, así como
vías respiratorias superiores, como Streptococcus pyogenes, bacterias que colonizan el estómago, a partir de muestras del
Streptococcus pneum oniae, S. aureus, N eisseria m eningitidis, esófago. Sin embargo, aparentem ente la mayoría de estos
H a em op h ilu s in fluen zae, M o ra x e lla c a ta r r h a lis y Entero­ microorganismos son colonizadores tem porales que no se
bacteriaceae. El aislamiento de estos microorganismos en establecen de form a perm anente en esta localización. Las
muestras de las vías respiratorias superiores no define su bacterias rara vez causan enferm edad en el esófago (eso-
patogenicidad [recuérdese el concepto de colonización frente fagitis); la m ayor parte de las infecciones son debidas al
al de enfermedad). Su participación en un proceso patológico género C a n d id a y a virus como el virus del herpes simple o
se debe dem ostrar por exclusión de otros patógenos. Por el citomegalovirus.
ejemplo, a excepción de S. pyogenes, estos microorganismos
rara vez ocasionan faringitis (aunque pueden ser aislados de Estómago
pacientes aquejados de esta entidad). Algunos microorga­ Puesto que el estómago contiene ácido clorhídrico y pepsi-
nismos asociados con frecuencia a infecciones sinusales son nógeno (secretados por las células parietales y principa­
S. pneum oniae, S. aureus, H . influenzae y M . catarrhalis. les que tapizan la mucosa gástrica), los únicos microorga-
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

los microorganismos que se encuentran normalmente en el


intestino grueso, con la consiguiente aparición de un síndrome
Microorganismos que colonizan con más frecuencia de malabsorción.
el tub o digestivo
Intestino grueso
Bacterias
El intestino grueso contiene un número más elevado de m i­
A cinetobacter
croorganismos que cualquier otra localización corporal en el
Actinomyces
ser humano. Se estima que en las heces pueden existir más
Bacteroides
de 10^* bacterias por gramo y las bacterias anaerobias serían
Bifidobacterium
1.000 veces más frecuentes que las aerobias. Asimismo, en
Cam pylobacter
Clostridium el intestino grueso también pueden residir diversas levaduras
Corynebacterium y parásitos no patógenos. Las bacterias más frecuentes per­
E n te ro b a c te r ia c e a e tenecen a B ifidobacteriu m , Eubacterium , B acteroid es, Ente­
Enterococcus rococcus y la familia Enterobacteriaceae. E. coli se halla en
Eubacterium prácticamente todos los seres humanos desde su nacimiento
Fusobacterium hasta su muerte. Aunque este microorganismo representa una
Haemophilus proporción inferior al 1% de la población microbiana intes­
H elicohacter tinal, se considera la bacteria aerobia responsable con mayor
Lactohacillus frecuencia de las enfermedades intraabdominales. D e modo
Mobilunciis semejante, aunque B acteroid es frag ilis es un miembro poco
Peptostreptococcus destacado de la microflora intestinal, constituye el principal
Porphyromonas microorganismo anaerobio responsable de la aparición de
Prevotella enfermedades intraabdominales. Por el contrario, E u b acte­
Propionibacterium rium y B ifid obacteriu m son las bacterias que se encuentran
Pseudomonas más a menudo en el intestino grueso, pero rara vez causan
Staphylococcus enfermedad. Estos microorganismos carecen de los distintos
Streptococcus factores de virulencia presentes en B. frag ilis.
Veillonella
El tratam iento con antibióticos puede modificar rápida­
Hongos m ente la población microbiana y provocar la prohferación
C an dida de m icroorganism os resisten tes a estos fárm acos, com o
Parásitos E n terococcus, P seudom on as y hongos. C. d iffic ile tam bién
Blastocystis prolifera con rapidez en esta situación y origina una patología
Chilomastix que comprende desde la diarrea hasta la colitis seudomem-
Endolimax branosa. Igualmente, la exposición a otros microorganismos
Entam oeba patógenos intestinales, como Shigella, E. coli enterohem o-
lodam oeba rrágica y E n tam oeba histolytica, puede alterar la microflora
Trichomonas del colon y ocasionar la aparición de enferm edades intes­
tinales significativas.

A p a r a t o g e n it o u r in a r io
nismos presentes son un pequeño número de bacterias con
tolerancia a los ácidos, como las bacterias productoras de En general, la porción anterior de la uretra y la vagina son
ácido lá ctico [géneros L a c t o b a c illu s y S trep toc oc c u s] y las únicas localizaciones del aparato genitourinario que están
colonizadas por microorganismos de manera perm anente
H elicobacter pylori. H. pylori es un agente etiológico de gastri­
(cuadro 2 -3 ]. Aunque la vejiga urinaria puede ser colonizada
tis y enfermedad ulcerosa. La población microbiana puede
sufrir unas notables m odificaciones tanto en núm ero co­ de forma transitoria por bacterias que migran desde la uretra
mo en diversidad en los pacientes tratados con fárm acos en dirección ascendente, estos microorganismos deben ser
eliminados con rapidez por la actividad bactericida de las
que neutralizan o disminuyen la producción de ácidos gás­
células uroepiteliales y la acción de arrastre de la orina ex­
tricos.
pulsada. Las restantes estructuras del aparato urinario han de
Intestino delgado ser asimismo estériles (excepto en presencia de enfermedad
o de una anomalía anatómica). D e igual modo, el útero debe
En contraste con la porción anterior del aparato digestivo, el
permanecer libre de microorganismos.
intestino delgado está colonizado por numerosas bacterias,
hongos y parásitos. La mayoría de estos microorganismos
son anaerobios, como Peptostreptococcus, Porphyrom onas y Uretra anterior
P revotella. Aunque algunos microorganismos que causan a La población m icrobiana com ensal de la uretra está fo r­
menudo gastroenteritis [como Salm onella y género C am p y ­ mada por diversos m icroorganism os; los más num erosos
lo b a c te r ) pueden subsistir como residentes asintomáticos de los cuales son los lactobacilos, los estreptococos y los
a bajas concentraciones, su identificación en el laboratorio estafilococos negativos para coagulasa. Estos microorganis­
habitualm ente se asocia a enferm edad. En casos de obs­ mos son relativam ente avirulentos y rara vez se asocian
trucción intestinal, como tras una intervención quirúrgica a enferm edad en el ser hum ano. Por el contarlo, la u re­
abdominal, puede aparecer un trastorno denominado sín­ tra puede verse colonizada de form a transitoria por m i­
drome del asa ciega. En estos pacientes, la ectasia del con­ croorganismos fecales, como En terococcus, miembros de la
tenido intestinal origina la colonización y la proliferación de familia Enterobacteriaceae y C a n d id a , todos los cuales son
FLORA M ICRO BIAN A CO M EN SA L Y PATÓ GENA E N E L S E R H U M A N O

CUADRO 2-4
Microorganismos que colonizan con más frecuencia Microorganismos que colonizan con más frecuencia
el aparato genitourinario la piel

Bacterias Bacterias
Actinomyces A cinetobacter
Bacteroides Aerococciis
Bifidobacterium Bacillus
Clostridium Clostridium
Corynebacterium Corynebacterium
E n te ro b a c te r ia c e a e Micrococcus
Enterococcus Peptostreptococcus
Eubacterium Propionibacterium
Fusohacterium Staphylococcus
G ardnerella Streptococcus
Haemophiliis Hongos
Lactobacillus
C an dida
Mobiluncus
M alassezia
M ycoplasma
Peptostreptococcus
Porphyromonas
Prevotella
Propionibacterium
Staphylococcus del núm ero de lactobacilos y un aum ento de M obilu n cu s
Streptococcus
y G a rd n erella . Trichom onas vaginalis, C. a lb ic a n s y C a n ­
Treponema
d id a g la b r a ta constituyen, igualmente, agentes etiológicos
Ureaplasma
destacados de vaginitis. Aunque se considera que el virus
Hongos herpes simple y el virus del papiloma no form an parte de
C an dida la flora normal del aparato genitourinario, pueden provocar
infecciones persistentes.

Cuello uterino
capaces de invadir el aparato genitourinario, m ultiplicarse A pesar de que el cuello uterino no suele estar colonizado
en la orina y ocasionar enferm edades significativas. Los por bacterias, N . gonorrhoeae y C. trachom atis son causas im­
m icroo rg an ism o s p ató g en os, co m o N . g o n o r r h o e a e y portantes de cervicitis. A ctinom yces también puede provocar
C. t r a c h o m a t is , son una causa fre cu e n te de u retritis y enfermedad en esta localización.
pueden persistir com o colonizadores asintom áticos de la
uretra. In d ep en d ien tem en te de la presencia o ausencia
de m anifestaciones clínicas, el aislam iento de estos dos
m icroorganism os en las m uestras del p acie n te se debe
considerar significativo.
P ie l
Aunque un gran núm ero de m icroorganism os están en
co n tacto con la superficie cutánea, este am biente relati­
Vagina vam ente hostil no es favorable para la supervivencia de
La población microbiana de la vagina es muy heterogénea y se la mayoría de ellos (v. cuadro 2 -4 ). Los microorganismos
ve influida en gran medida por diversos factores hormonales. que se encuentran con mayor frecuencia en la superficie
Las recién nacidas están colonizadas ya por lactobacilos desde cutánea son bacterias grampositivas (p. ej., Staphylococcu s
su nacimiento, los cuales predominan durante aproximada­ coagulasa-negativo y, con menos frecuencia, S. aureus, cori-
m ente 6 semanas. Después de ese período, los valores de nebacterias y propionibacterias]. C lostridium p erfrin gen s se
estrógenos m aternos han disminuido y la flora vaginal se aísla en la piel de aproximadamente el 2 0 % de las personas
modifica e incluye estafilococos, estreptococos y miembros sanas, y los hongos C a n d id a y M a la s s ez ia tam bién pueden
de la familia Enterobacteriaceae. Cuando en la pubertad se localizarse sobre las superficies cutáneas, en especial en
inicia la producción de estrógenos, se produce otro cambio las localizaciones húmedas. Los estreptococos son capaces
de la flora m icrobiana. Los lactobacilos reaparecen como de colonizar la piel de form a transitoria, si bien los ácidos
microorganismos predominantes y se aíslan tam bién mu­ grasos volátiles producidos por las propionibacterias anae­
chas otras bacterias, como estafilococos (S. au reu s con una robias resultan tó xicos para estos m icroorganism os. Los
frecuencia menor que las especies coagulasa-negativas), es­ bacilos gramnegativos, con la excepción d e A c in eto b a c ter y
treptococos (incluido el estreptococo del grupo B), Entero- algunos otros géneros menos frecuentes, generalm ente no
coccus, G ardnerella, M ycoplasm a, U reaplasm a, miembros de se cultivan de la piel humana. Se pensaba que el entorno
la familia Enterobacteriaceae y diversas bacterias anaerobias. era demasiado hostil para permitir la supervivencia de estos
N . gon orrhoeae constituye una causa frecuente de vaginitis. microorganismos; sin embargo, en el proyecto HM P se ha
En ausencia de este microorganismo, se registra un número visto que los bacilos gramnegativos no cultivables pueden
significativo de casos cuando se altera el equilibrio de la ser los m icroorganism os más frecu en tes de la superficie
flora bacteriana vaginal, lo que ocasiona una disminución cutánea.
% 10 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

PREGUNTAS BIBLIOGRAFÍA
Balows A, Truper H: T he prok ary otes, ed 2, New York, 1992, Springer-
Verlag.
/. ¿Cuál es ¡a diferencia entre colonización y enfermedad?
Murray P: Human m icrobiota. In Balows A, et al, editor: Topley a n d
2. Enumere ejem plos de patógenos estrictos y patógenos W ilson's m icrobiology a n d m icro b ial infections, ed 10, London, 2005,
oportunistas. Edward Arnold.
Murray Shea Y: Pocket gu ide to clin ical m icrobiology, ed 3, Washington,
3. ¿Qué factores regulan las poblaciones m icrobianas D C , 20 0 4 , American Society for Microbiology Press.
de los m icroorganism os que colonizan el ser hum ano?

Las resp u estas a estas p re g u n ta s e s tán d is p o n ib le s en


w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s
FLORA M ICRO BIAN A CO M EN SA L Y PATÓ GEN A EN EL SER H UM AN O e-1

RESPUESTAS 2. Los patógenos estrictos son microorganismos que casi


siempre se encuentran en una enfermedad. Algunos ejemplos
1. El cuerpo humano tiene muchos microorganismos de patógenos estrictos son M ycobacterium tuberculosis,
(bacterias, hongos, algunos parásitos) que forman la población C lostridium tetani, Neisseria gonorrhoeae, Francisella tularensis,
comensal normal. Estos microorganismos viven en la superficie Plasm odium falciparum y los virus de la rabia. La mayoría
de la piel y de todas las membranas mucosas (desde la boca de las infecciones en seres humanos están producidas por
hasta el ano y el aparato genitourinario). Estas bacterias patógenos oportunistas, es decir, microorganismos que pueden
viven en las superficies y protegen a los seres humanos colonizar a los seres humanos sin datos de enfermedad, o que
de la colonización por microorganismos muy virulentos. producen enfermedad cuando se introducen en tejidos que
Estos microorganismos también estimulan una respuesta normalmente son estériles o en un paciente con un defecto de
protectora y pueden ayudar a aportar factores de crecimiento la inmunidad. Algunos ejemplos de patógenos oportunistas
esenciales. Si estos microorganismos se introducen en partes son Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas
del cuerpo que normalmente son estériles, o si una persona está aeruginosa y Candida albicans.
expuesta a microorganismos muy virulentos, entonces puede 3. Los factores que determinan la población
producirse una enfermedad. Por tanto, es importante distinguir de microorganismos que colonizan a los seres humanos
entre colonización, que es un proceso natural e importante, son complejos e incluyen la edad, la dieta, el estado hormonal,
y enfermedad. el estado de salud y la higiene personal.
Esterilización, desinfección
3 y antisepsia

n aspecto importante del control de las infecciones es los térm inos d esin fección y esterilización habitualmente se
U el conocimiento de los principios de la esterilización, la
desinfección y la antisepsia (cuadro 3-1).
utilizan de manera indistinta, lo que puede generar cierta
confusión. Esto se debe a que los procesos de desinfección se
han categorizado como de alto nivel, nivel intermedio y bajo
nivel. La desinfección de alto nivel generalmente puede tener
E s t e r il iz a c ió n una eficacia próxima a la de la esterilización, mientras que
La esterilización es la destrucción total de todos los microor­ formas de esporas pueden sobrevivir a la desinfección de nivel
ganismos, incluyendo las formas más resistentes, como las es­ intermedio, y muchos microorganismos pueden seguir siendo
poras bacterianas, las micobacterias, los virus sin envoltura (no viables cuando se los expone a una desinfección de bajo nivel.
lipídicos] y los hongos. Esto se puede conseguir utilizando esteri­ Incluso la clasificación de los desinfectantes (tabla 3-2)
lizantes físicos, vapor de gas o esterilizantes químicos (tabla 3-1). por su nivel de actividad es confusa. La eficacia de estos
Los esterilizantes físicos, como el vapor húmedo y seco, procedim ientos depende de la naturaleza del objeto que
son los métodos de esterilización más utilizados en los hos­ hay que desinfectar, del número y de la resistencia de los
pitales y están indicados para la mayoría de los materiales, microorganismos contaminantes, de la cantidad de material
excepto aquellos que son sensibles al calor o están formados orgánico presente (se puede inactivar el desinfectante), del
por productos químicos tóxicos volátiles. La filtración es útil tipo y la concentración del desinfectante, y de la duración y
para eliminar bacterias y hongos del aire (con filtros de aire para la temperatura de la exposición.
partículas de alta eficiencia [HEPA]) o de diversas soluciones. Los desinfectantes de alto nivel se utilizan para objetos
Sin embargo, estos filtros no pueden eliminar los virus y algunas que se utilizan en procedimientos invasivos y que no pueden
bacterias pequeñas. También se utiliza con frecuencia la radia­ soportar procedimientos de esterilización (p. ej., determ i­
ción ultravioleta, las radiaciones ionizantes (p. ej., radiación nados tipos de endoscopios e instrumentos quirúrgicos con
gamma) y las microondas. La limitación de la radiación ul­ plástico u otros componentes que no se pueden esterilizar en
travioleta es que es necesaria una exposición directa. autoclave). La desinfección de estos objetos y de otros simi­
El óxido de etileno es un esterilizante mediante vapor de lares es más eficaz cuando, antes del tratam iento, se limpia
gas de uso habitual. Aunque es muy eficiente, hay regulacio­ la superficie para eliminar m ateria orgánica. Los ejemplos
nes estrictas que limitan su uso porque el óxido de etileno desinfectantes de alto nivel incluyen el tratamiento con calor
es inflamable, explosivo y carcinógeno para los animales de húmedo y el uso de líquidos como glutaraldehído, peróxido
laboratorio. La esterilización con gas formaldehído también de hidrógeno, ácido peracético y compuestos de cloro.
está limitada porque el producto químico es carcinógeno. Los desinfectantes de nivel intermedio (p. ej., alcoholes,
Su uso está restringido principalm ente a la esterilización compuestos con yodóforos, compuestos fenólicos) se utilizan
de los filtros HEPA. Los vapores de peróxido de hidrógeno para limpiar superficies e instrumentos en los que es poco
son esterilizantes eficaces debido a la naturaleza oxidante probable la contaminación por esporas bacterianas y otros
del gas. Este esterilizante se utiliza para la esterilización de microorganismos muy resistentes. Se considera que son instru­
instrumentos. Una variación es la esterilización con gas de mentos y dispositivos semicríticos, entre los que están los en­
plasma, en la que se vaporiza peróxido de hidrógeno y des­ doscopios flexibles de fibra óptica, los laringoscopios, los espécu­
pués se producen radicales libres reactivos con energía de los vaginales, los circuitos para respiradores para anestesia y
frecuencia de microondas o de radiofrecuencia. Como es un otros objetos.
m étodo de esterilización eficiente que no produce derivados Los desinfectantes de bajo nivel (p. ej., compuestos de
tóxicos, la esterilización con gas de plasma ha reemplazado amonio cuaternario) se utilizan para tratar instrum entos
al óxido de etileno en muchas aplicaciones. Sin embargo, no y dispositivos no críticos, com o los manguitos de presión
se puede utilizar con materiales que absorben peróxido de arterial, los electrodos de electrocardiograma y los estetos­
hidrógeno o que reaccionan con el mismo. copios. Aunque estos instrumentos entran en contacto con
También se han utilizado dos esterilizantes químicos: ácido los pacientes, no penetran en las superficies mucosas ni en
peracético y glutaraldehído. El ácido peracético, un oxidante, tejidos estériles.
tiene una actividad excelente, y los productos finales (es decir, El nivel de los desinfectantes utilizados para las superficies
ácido acético y oxígeno) no son tóxicos. Por el contrario, la ambientales está determinado por el riesgo relativo que plan­
seguridad es un problema con el glutaraldehído, y se debe tean estas superficies como reservorio de microorganismos
tener cuidado cuando se manipule este producto qumiico. patógenos. Por ejemplo, debe utilizarse un nivel desinfectante
mayor para limpiar la superficie de instrumentos contamina­
dos con sangre que para limpiar superficies que están «sucias»,
D e s in f e c c ió n
com o suelos, fregaderos y encimeras. La excepción a esta
Los microorganismos también se destruyen mediante pro­ regla es si una superficie particular ha estado implicada en una
cedim ientos de desinfección , aunque pueden sobrevivir infección nosocomial, como un cuarto de baño contaminado
los microorganismos más resistentes. Lam entablem ente, por C lostrid iu m d iffic ile (bacteria anaerobia formadora de

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12 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Tabla 3-2 M étodos de desinfección


Concentración (nivel de actividad)
Definiciones
Calor
Calor húmedo 75 "C a 100 “C durante 30 minutos (elevada)
Antisepsia: uso de productos químicos sobre la piel u otro
tejido vivo para inhibir o eliminar los microorganismos; Líquido

no está implicada ninguna acción esporicida Glutaraldehído 2-3,5% (elevada)

Desinfección: uso de procedimientos físicos o Peróxido de hidrógeno 3-25% (elevada)


productos químicos para destruir la mayoría de Fcrmaldehídc 3-8% (elevada/intermedia)
los microorganismos; las esporas bacterianas y otros Dióxido de cloro Variable (elevada)
microorganismos relativamente resistentes [p. ej., Ácido peracético Variable (elevada)
micobacterias, virus y hongos) pueden mantener su
Compuestos de cloro 10 0 -1.0 0 0 ppm de cloro libre (elevada)
viabilidad; los desinfectantes se dividen en productos
Alcohol (etílico, isopropílico) 70-95% (intermedia)
de nivel alto, intermedio y bajo
Compuestos fenólicos 0,4-5,0% (intermedia/baja)
Germicida: producto químico capaz de destruir
microorganismos; pueden sobrevivir las esporas Compuestos yodóforos 30-50 ppm de yodo libre/l (intermedia)

Desinfectante de alto nivel: germicida que destruye todos Compuestos de amonio 0,4-1,6% (baja)
cuaternario
los patógenos microbianos excepto grandes números de
esporas bacterianas
Desinfectante de nivel intermedio: germicida que la tabla 3-4 se presenta un resumen de sus propiedades ger­
destruye todos los patógenos microbianos excepto las micidas. Los alcoholes tienen una actividad excelente frente
endosporas bacterianas a todos los grupos de microorganismos excepto las esporas, y
Desinfectante de bajo nivel: germicida que destruye no son tóxicos, aunque tienden a resecar la superficie cutánea
la mayoría de las bacterias vegetativas y los virus con porque eliminan lípidos. Tampoco tienen actividad residual
cubierta lipídica o de tamaño medio y son inactivados por la materia orgánica. Por tanto, se debe
Esporicida: germicida capaz de destruir esporas limpiar la superficie de la piel antes de aplicar un alcohol. Los
bacterianas yodóforos también son antisépticos cutáneos excelentes, y
Esterilización: uso de procedimientos físicos o productos tienen un espectro de actividad similar al de los alcoholes.
químicos para destruir todas las formas microbianas, Son ligeramente más tóxicos para la piel que el alcohol, tienen
incluidas las esporas bacterianas una actividad residual escasa y son inactivados por la materia
orgánica. Los yodóforos y los compuestos de yodo se utilizan
con frecuencia con alcoholes para desinfectar la superficie
esporas) o un fregadero contaminado por Pseudom onas aeru- cutánea. La clorhexidina tiene una actividad antimicrobiana
ginosa. En estos casos se debe seleccionar un desinfectante extensa, aunque destruye microorganismos a una velocidad
con una actividad adecuada frente al patógeno implicado. mucho menor que el alcohol. Su actividad persiste, aunque
la materia orgánica y los niveles de pH elevados reducen su
eficacia. La actividad del paraclorometaxilenol (P C M X ) se
A n t is e p s ia limita principalmente a bacterias grampositivas. Como no es
Los antisépticos (tabla 3-3) se utilizan para reducir el número tóxico y tiene actividad residual, se ha utilizado en produc­
de microorganismos en las superficies cutáneas. Estos com­ tos para el lavado de manos. El triclosán es activo frente a
puestos se seleccionan en base a su seguridad y su eficacia. En bacterias pero no frente a otros muchos microorganismos.
Es un antiséptico de uso habitual en jabones desodorantes y
algunos dentífricos.
Tabla 3-1 M étodos de esterilización
M é to d o Concentración o nivel
M e c a n is m o s d e a c c ió n
Esterilizantes físicos
Vapor a presión 121 “C o 132 "C durante intervalos La siguiente sección revisa brevemente los mecanismos m e­
de tiempo variables diante los cuales actúan los esterilizantes, desinfectantes y
Filtración Tamaño de poro de 0,22 a 0,45 ¡im ; antisépticos más habituales.
filtros HEPA
Radiación ultravioleta Exposición variable a luz de 254 nm Calor húmedo
de longitud de onda
Los intentos de esterilizar objetos con agua hirviendo son
Radiación ionizante Exposición variable a radiación gamma ineficaces porque sólo se puede mantener una temperatura
Radiación de Exposición variable a microondas relativamente baja (1 0 0 °C). D e hecho, habitualmente se de­
radiofrecuencia
muestra la formación de esporas por una bacteria si se hierve
Esterilizantes por vapor de gas
Óxido de etileno 450-1.200 mg/l a 29 “C a 65 *C durante 2-5
Vapor de formaldehído 2-5% a 60 °C a 80 “C Tabla 3-3 Antisépticos
Vapor de peróxido 30% a 55 *C a 60 “C
de hidrógeno
Alcohol (etílico, isopropílico)
Gas de plasma Gas peróxido de hidrógeno muy ionizado
Yodóforos 1 -2 mg de yodo libre/l; 1 -2 %
Esterilizantes químicos de yodo disponible
Ácido peracético 0,2% Clorhexidina 0,5-4,0%
Glutaraldehído 2% Paraclorometaxilenol 0,50-3,75%
Triclosán 0,3-2,0%
HEPA, filtro de aire para partículas de elevada eficiencia.
ESTERILIZACIÓN, DESINFECCIÓN Y ANTISEPSIA 13

Tabla 3-4 Propiedades esperm icidas de desinfectantes y antisépticos


Esporas bacterianas
Desinfectantes
Alcohol + +
Peróxido de hidrógeno + +
Formaldehído + +
Fenólicos + +
Cloro + +
Yodóforos + +/-
Glutaraldehído + +
Compuestos de amonio cuaternario +/- -
Antisépticos
Alcohol + +
Yodóforos + +
Clorhexidina + +
Paraclorometaxilenol +/- +/-
Triclosán + +/-

una solución de microorganismos y después se subcultiva la tejidos viables, se debe disipar el gas antes de que se pueda
solución. El hervido de los microorganismos vegetativos los utilizar el objeto. Este período de aireación es generalmente
destruye, aunque las esporas siguen siendo viables. Por el de 16 horas o mayor. La eficacia de la esterilización se moni-
contrario, el vapor a presión en un autoclave es una forma toriza con el anáhsis de las esporas de B acillu s subtilis.
muy eficaz de esterilización; la mayor temperatura produce
desnaturalización de las proteínas microbianas. La velocidad Aldehidos
de destrucción de los microorganismos durante el proceso de Igual que el óxido de etileno, los aldehidos ejercen su efecto
la esterilización en autoclave es rápida, aunque depende de la m ediante alquilación. Los dos aldehidos m ejor conocidos
tem peratura y la duración del proceso, del tamaño del au­ son el form aldehído y el glutaraldehído, productos ambos
toclave, del flujo de vapor, de la densidad y el tamaño de que se pueden utilizar como esterilizantes o como desinfec­
la carga, y de la colocación de la carga en la cámara. Se debe tantes de alto nivel. El gas formaldehído se puede disolver
tener cuidado de evitar crear bolsas de aire, que impiden la en agua (creándose una solución denominada fo rm alin d ) a
penetración del vapor en la carga. En general la mayoría de los una concentración final del 37%. A la formalina se le añaden
autoclaves funcionan a 121 °C a 132 °C durante 15 minutos estabilizadores como el metanol. Las concentraciones bajas
o más. La inclusión de preparados comerciales de esporas de de formalina son bacteriostáticas (es decir, inhiben los m i­
B acillu s stearotherm ophilu s puede ayudar a monitorizar la croorganismos pero no los destruyen), mientras que concen­
eficacia de la esterilización. Se coloca una ampolla de estas traciones mayores (p. ej., del 2 0 %) pueden destruir todos
esporas en el centro de la carga, se extrae al final del proceso los microorganismos. La combinación de formaldehído con
de la desinfección en el autoclave, y se incuba a 37 °C. Si el alcohol (p. ej., formahna al 20% en alcohol al 70% ) puede
procedimiento de esterilización ha sido eficaz, las esporas se increm entar esta actividad m icrobicida. La exposición de
destruyen y los microorganismos no crecen. la piel o de las membranas mucosas al formaldehído puede
ser tóxica. El glutaraldehído es menos tóxico para los tejidos
óxido de etileno viables, aunque puede producir quemaduras en la piel o en
El Óxido de etileno es un gas incoloro (soluble en agua y las membranas mucosas. El glutaraldehído es más activo a
en disolventes orgánicos habituales) que se utiliza para es­ niveles de pH alcalinos [es «activado» por el hidróxido de
terilizar objetos termosensibles. El proceso de esterilización sodio), aunque es menos estable. El glutaraldehído también es
es relativam ente lento y depende de la concentración del inactivado por la materia orgánica; por tanto, se deben limpiar
gas, de la humedad relativa y del contenido de humedad del primero los objetos que se van a tratar.
objeto que se va a esterilizar, del tiempo de exposición y de
la temperatura. El tiempo de exposición se reduce un 50%
Oxidantes
por cada aumento al doble de la concentración de óxido de Los ejemplos de oxidantes incluyen ozono, ácido peracético
etileno. D e igual manera, la actividad del óxido de etileno y peróxido de hidrógeno, que es el más utilizado de estos
aumenta aproximadamente el doble con cada aumento de la productos. El peróxido de hidrógeno destruye de manera
temperatura de 10 °C. La esterilización con óxido de etileno eficaz la mayoría de las bacterias a una concentración del
es óptima en una humedad relativa de aproximadamente el 3% al 6 % y destruye todos los organismos, incluyendo las
30% , con una reducción de la actividad con una humedad esporas, a concentraciones mayores (del 10% al 25% ). La
mayor o menor. Esto es particularm ente problem ático si forma oxidante activa no es el peróxido de hidrógeno, sino el
los microorganismos contam inados se han secado en una radical hidroxilo libre que se forma por la descomposición del
superficie o se han liofilizado. El óxido de etileno ejerce su peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno se utiliza
actividad esporicida mediante la alquilación de los grupos para desinfectar implantes de plástico, lentes de contacto y
hidroxilo, carboxilo, amino y sulfhidrilo terminales. Este pro­ prótesis quirúrgicas.
ceso bloquea los grupos reactivos necesarios para muchos
procesos metabóhcos esenciales. Los ejemplos de otros gases Halógenos
alquilantes utilizados como esterilizantes son el formaldehído Los halógenos, como los compuestos que tienen cloro o yodo,
y la (3-propiolactona. Como el óxido de etileno puede lesionar se utilizan mucho como desinfectantes. Los compuestos de
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

yodo son los halógenos más eficaces de que se dispone para la se cree que el fenol actúa desorganizando las membranas que
desinfección. El yodo es un elemento muy reactivo que preci­ contienen lípidos, lo que da lugar a la salida del contenido
pita las proteínas y oxida enzimas esenciales. Es microbicida celular. Los compuestos fenólicos son eficaces frente a las
frente a prácticamente todos los microorganismos, incluyendo micobacterias, que normalmente son resistentes, porque la
las bacterias formadoras de esporas y las micobacterias. Ni la pared celular de estos microorganismos tiene una concentra­
concentración ni el pH de la solución de yodo afectan a la ac­ ción muy elevada de lípidos. La exposición de los productos
tividad microbicida, aunque la eficiencia de las soluciones de fenólicos a compuestos alcalinos reduce significativamente
yodo aumenta en soluciones ácidas porque se libera más yodo su actividad, mientras que la halogenación de los compues­
libre. El yodo actúa más rápidamente que otros compuestos tos fenólicos increm enta su actividad. La introducción de
halógenos y que los compuestos de amonio cuaternario. Sin grupos alifáticos o aromáticos en el núcleo de los fenoles ha­
embargo, la actividad del yodo puede estar reducida cuando lógenos tam bién increm enta su actividad. Los bis-fenoles
hay algunos compuestos orgánicos e inorgánicos, como sue­ son dos compuestos fenólicos unidos entre sí. La actividad
ro, heces, líquido ascítico, esputo, orina, tiosulfato sódico y de estos compuestos también se puede potenciar mediante
amoniaco. El yodo elem ental se puede disolver en yoduro halogenación. Un ejemplo de un bis-fenol halogenado es el
potásico acuoso o en alcohol, o puede formar complejos con hexaclorofeno, un antiséptico con actividad frente a bacterias
un vehículo. Este último compuesto se denomina y od ó foro grampositivas.
(yodo, «yodo»; foro, «portador»). La povidona yodada (yodo
formando complejos con polivinilpirrolidona) es el producto Compuestos de amonio cuaternario
que más se utiliza, y es relativamente estable y no tóxica para Los compuestos de amonio cuaternario están formados por
los tejidos y las superficies metálicas, aunque es más cara que cuatro grupos orgánicos unidos covalentemente al nitrógeno.
otras soluciones de yodo. La actividad germicida de estos compuestos catiónicos está
Las soluciones de cloro tam bién se utilizan mucho como determ inada por la naturaleza de los grupos orgánicos, de
desinfectantes. Las soluciones acuosas de cloro tienen una modo que la mayor actividad se observa con compuestos que
actividad bactericid a rápida, aunque no se han definido tienen grupos de 8 a 18 átomos de carbono de longitud. Entre
sus m ecanism os de acción. En el agua puede haber tres los ejemplos de los compuestos de amonio cuaternario están
formas de cloro: cloro elem ental (CI2), que es un oxidante el cloruro de benzalconio y el cloruro de cetilpiridinio. Estos
muy potente; ácido hipocloroso (H O C l); e ion hipoclori- compuestos actúan desnaturalizando las membranas celulares
to ( O C y . El cloro tam bién se combina con amoniaco y con para liberar los componentes intracelulares. Los compuestos
otros compuestos nitrogenados para formar cloroaminas, o de amonio cuaternario son bacteriostáticos a concentraciones
com puestos de N -cloro. El cloro puede ejercer su efecto bajas y bactericidas a concentraciones elevadas; sin embargo,
m ediante la oxidación irreversible de los grupos sulfhidri- bacterias como P seudom on as y M y cob acteriu m y el hongo
lo (SH ) de enzimas esenciales. Se cree que los hipocloritos Trichophyton son resistentes a estos compuestos. D e hecho,
interactúan con com ponentes citoplásm icos para form ar algunas cepas de Pseudom onas pueden crecer en soluciones
co m puestos de N -clo ro tó x ico s, que in terfieren con el de amonios cuaternarios. Muchos virus y todas las esporas
m etabolismo celular. La eficacia del cloro es inversamente bacterianas también son resistentes. Los detergentes iónicos,
proporcional al pH , y se observa mayor actividad con nive­ la materia orgánica y la dilución neutralizan los compuestos
les de pH ácidos. Esto es compatible con la mayor actividad de amonio cuaternario.
asociada al ácido hipocloroso que a la concentración del
ion hipoclorito. La actividad de los com puestos de cloro Alcoholes
tam bién aumenta con la concentración (p. ej., un aumento La actividad germicida de los alcoholes aumenta al aumentar
al doble de la concentración da lugar a una dism inución la longitud de la cadena (máximo de cinco a ocho átomos de
del 30% del tiem p o necesario para la d estru cció n) y la carbono). Los dos alcoholes más utilizados son el etanol y
tem peratura (p. ej., una reducción del tiem po necesario el isopropanoL Estos alcoholes tienen actividad bactericida
para la destrucción del 50% a 65% por un aumento de la rápida frente a bacterias vegetativas, micobacterias, algunos
tem peratura de 10 °C ]. La materia orgánica y los detergen­ hongos y virus que contienen lípidos. Lamentablemente, los
tes alcalinos pueden reducir la eficacia de los compuestos alcoholes no tienen actividad frente a las esporas bacterianas y
de cloro. Estos com puestos tien en una buena actividad tienen una actividad escasa frente a algunos hongos y algunos
germicida, aunque los microorganismos formadores de es­ virus que no contienen lípidos. La actividad es mayor en
poras son de 10 a 1 .0 0 0 veces más resistentes al cloro que presencia de agua. Por tanto, el alcohol al 70% es más activo
las bacterias vegetativas. que el alcohol al 95%. El alcohol es un desinfectante habitual
de las superficies cutáneas y, cuando se sigue por tratam ien­
Compuestos fenólicos
to con un yodóforo, es muy eficaz para esta finalidad. Los
Los compuestos fenólicos (germicidas) se utilizan raras veces alcoholes también se utilizan para desinfectar objetos como
como desinfectantes. Sin embargo, tienen interés histórico termómetros.
porque se utilizaron como método de referencia para evaluar
la actividad de otros germicidas. El cociente de actividad PREGUNTAS
germicida de un compuesto problema respecto a la de una
concentración especificada de fenol perm itía obtener el
/. Defina los térm inos siguientes y presente tres ejemplos
coeficiente de fenol. U n valor de 1 indicaba una actividad
de cada uno: esterilización, desinfección y antisepsia.
equivalente, mayor de 1 indicaba una actividad menor que la
del fenol y menor de 1 indicaba una actividad mayor que 2. Defina los tres niveles de desinfección y presente ejemplos
la del fenol. Estas pruebas están limitadas porque el fenol de cada uno de ellos. ¿Cuándo se utilizaría cada uno de los
no es esporicida a tem peratura ambiente (aunque sí lo es a tipos de desinfectante?
temperaturas próximas a 100 °C) y es poco activo frente a 3. ¿Qué factores influyen en la eficacia de la esterilización
virus que no contienen lípidos. Esto es comprensible porque con calor húm edo, calor seco y óxido de etiieno?
ESTERILIZACIÓN, DESINFECCIÓN Y ANTISEPSIA

4. Dé ejem plos de cada uno de los siguientes desinfectantes BIBLIOGRAFÍA


y de su m ecanismo de acción: com puestos de yodo, Block SS : D isinfection, sterílizañon, an dpreservation , ed 2, Philadelphia,
com puestos de cloro, com puestos fenólicos y com puestos 1977, L ea& Febiger.
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to clin ical, ed 3, S t Louis, 1998, Mosby.
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w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s Murray P, et al, editor: M a n u a l o f clin ica l m icrobiology, ed 9, Was­
hington, D C , 2 0 0 7 , American Society for Microbiology.
Página deliberadamente en blanco
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

RESPUESTAS de nivel intermedio se utilizan para limpiar superficies e


instrumentos en los que es poco probable la contaminación
1. No hay una definición uniforme de esterilización y por microorganismos muy resistentes. Los desinfectantes de
desinfección. En general, la esteriU za dón representa la bajo nivel se utilizan para limpiar instrumentos y dispositivos
destrucción total de todos los microorganismos, incluyendo no críticos (p. ej., manguitos de presión arterial, electrodos y
las formas más resistentes, como esporas bacterianas, estetoscopios).
micobacterias, virus sin envoltura y hongos. Los ejemplos de 3. La eficacia del calor húmedo es máxima cuando se
productos utilizados para la esterilización son óxido de etileno, aplica a presión. Esto permite que se eleve la temperatura.
gas formaldehído, peróxido de hidrógeno, ácido peracético Otros factores que determinan la eficacia del calor húmedo
y glutaraldehído. La desin fe cció n destruye la mayoría de los son la duración de la exposición y la penetración del vapor
microorganismos, aunque los más resistentes pueden sobrevivir en el material contaminado (determinada por el tamaño de la
a algunos procedimientos de desinfección. Los ejemplos de carga y la velocidad del flujo del vapor). El calor seco tiene la
desinfectantes incluyen calor húmedo, peróxido de hidrógeno misma eficacia si se aplica a una temperatura elevada durante
y compuestos fenólicos. La antise p s ia se utiliza para reducir un período prolongado. La esterilización con óxido de etileno
el número de microorganismos en las superficies cutáneas. es un proceso lento que depende de la concentración del gas,
Los ejemplos de antisépticos incluyen alcoholes, yodóforos, la humedad relativa, el tiempo de exposición y la temperatura.
clorhexidina, paraclorometaxilenol y triclosán. La eficacia mejora con una mayor concentración de óxido
2. La desinfección se divide en los niveles alto, intermedio de etileno, temperaturas elevadas y una humedad relativa
y bajo. Los desinfectantes de alto nivel incluyen calor húmedo, del 30%.
glutaraldehído, peróxido de hidrógeno, ácido peracético y 4. Los compuestos de yodo precipitan proteínas y oxidan
compuestos de cloro. La desinfección de nivel intermedio enzimas esenciales. Los ejemplos incluyen tintura de yodo
incluye alcoholes, compuestos yodóforos y compuestos y povidona yodada (yodo formando un complejo con
fenólicos. Los desinfectantes de bajo nivel incluyen los polivinilpirrolidona). Los compuestos de cloro son oxidantes
compuestos de amonio cuaternario. Aunque algunos productos potentes, aunque no se ha definido bien su mecanismo de
se utilizan para esterilización y desinfección, la diferencia es la acción preciso. Los ejemplos incluyen cloro elemental, ácido
concentración del producto y la duración del tratamiento. Los hipocloroso e ion hipoclorito. El compuesto de cloro comercial
tipos de desinfectantes que se utilizan están determinados por más habitual es la lejía. Los compuestos fenólicos actúan
la naturaleza del material que hay que desinfectar y cómo se va desorganizando las membranas que contienen lípidos, lo que
a utilizar. Si el material se va a utilizar para un procedimiento produce la salida del contenido celular. Los ejemplos incluyen
invasivo pero no puede soportar los procedimientos de fenol (ácido carbólico), o-fenilfenol, o-bencil-p-clorofenol y
esterilización (p. ej., endoscopios, instrumentos quirúrgicos p-tert-amil-fenol. Los compuestos de amonio cuaternario
que no se pueden esterilizar en autoclave), entonces se también desnaturalizan membranas, e incluyen cloruro de
utilizaría un desinfectante de alto nivel. Los desinfectantes benzalconio y cloruro de cetilpiridinio.
SECCIÓN 2

Principios generales
del diagnóstico
de laboratorio
A
Microscopía y cultivo in vitro

T a base de la microbiología se creó en 1676 cuando Antón muestra. En la microscopía de campo claro la muestra se ve
i —/van Leeuwenhoek observó bacterias en el agua utilizando mediante transiluminación, de manera que la luz procedente
uno de los primeros microscopios. No fue hasta casi 2 0 0 años del condensador atraviesa la muestra. Después se amplía la
después cuando Pasteur consiguió cultivar bacterias en labo­ imagen, primero por la lente del objetivo y después por la len­
te del ocular. La ampliación total de la imagen es el producto
ratorio en un medio de cultivo compuesto de extractos de
de las ampliaciones de las lentes del objetivo y del ocular.
levaduras, azúcar y sales de amonio. En 1881 H esse utilizó
Habitualmente se utilizan tres lentes del objetivo diferentes:
agar que consiguió en la cocina de su mujer para solidificar
bajo aumento (aumento de 10 veces), que se puede utilizar
este medio, lo que permitió cultivar colonias macroscópicas
para explorar una muestra; alto aumento en seco (40 veces),
de bacterias. A lo largo de los años los microbiólogos han
que se utiliza para buscar microorganismos grandes como
vuelto a la cocina para crear cientos de medios de cultivo que parásitos y hongos filamentosos; e inmersión en aceite (100 ve­
actualmente se emplean en los laboratorios de microbiología ces), que se utiliza para observar bacterias, levaduras (fase
clínica. Aunque las pruebas que permiten la detección rápida unicelular de los hongos) y los detalles morfológicos de los
de los antígenos microbianos y las pruebas moleculares basa­ microorganismos y las células de mayor tamaño. Las lentes
das en los ácidos nucleicos han sustituido a la microscopía y del ocular pueden ampliar aún más la imagen (generalmente
los medios de cultivo en la detección de muchos gérmenes, de 10 a 15 veces).
la capacidad de observar los microorganismos mediante mi­ La lim itación de la m icroscopía de cam po claro es la
croscopía y de cultivarlos en el laboratorio sigue teniendo resolución de la imagen (es decir, la capacidad de distinguir
una gran im portancia en los laboratorios clínicos. En mu­ que dos objetos están separados y que no son uno solo).
chas enfermedades estas técnicas siguen siendo los métodos La capacidad de resolu ción de un m icroscopio está d e­
definitivos para identificar la causa de una infección. Este terminada por la longitud de onda de la luz utilizada para
capítulo ofrecerá una visión de conjunto de las técnicas más iluminar el objeto y el ángulo de la luz que entra en la lente
utilizadas para la microscopía y el cultivo, y se presentarán del objetivo (al que se denomina abertu ra num érica). La
detalles más específicos en los capítulos dedicados al diagnós­ capacidad de resolución es m áxim a cuando se interpone
tico de laboratorio en las secciones sobre los microorganismos aceite en tre la lente del objetivo (habitualm ente la lente
individuales. de 100 X ) y la m uestra, porque el aceite reduce la dis­
persión de la luz. Los m ejores microscopios de campo claro
tienen una capacidad de resolución de aproxim adam ente
M ic r o s c o p ía 0 ,2 fxm, lo que p erm ite ver la m ayoría de las bacterias,
pero no los virus. Aunque la m ayoría de las b acterias y
En general la m icroscopía se utiliza en microbiología para
los m icroorgan ism os de m ayor tam añ o se pueden ver
dos fines básicos: la detección inicial de microorganismos
m ed ian te m icro sco p ía de cam po claro, los ín d ices de
y la identificación preliminar o definitiva de los mismos. El
re fracció n de los m icroorganism os y el fondo son sim i­
estudio microscópico de las muestras clínicas se utiliza para
lares. Por tan to, los microorganism os se deben teñir con
detectar células bacterianas, elem entos fúngicos, parásitos
un colorante para poder observarlos, o se debe utilizar un
(huevos, larvas o formas adultas) e inclusiones víricas pre­
método m icroscópico alternativo.
sentes en las células infectadas. Las propiedades m orfoló­
gicas características se pueden utilizar para la identificación Microscopía de campo oscuro
preliminar de la mayoría de las bacterias, y se utilizan para
la identificación definitiva de muchos hongos y parásitos. En los microscopios de campo oscuro se utilizan las mismas
La detección microscópica de microorganismos teñidos con lentes del objetivo y del ocular que en los microscopios de
anticuerpos marcados con colorantes fluorescentes u otros campo claro; sin embargo, se utiliza un condensador especial
marcadores ha sido muy útil para la identificación específica que impide que la luz transmitida ilumine directamente la
de muchos microorganismos. Se utilizan cinco métodos m i­ muestra. Sólo la luz oblicua y dispersa llega a la muestra y
croscópicos generales (cuadro 4-1). atraviesa los sistemas de las lentes, lo que hace que la muestra
esté muy iluminada sobre un fondo negro. La ventaja de este
método es que la capacidad de resolución de la microscopía
m é t o d o s m ic r o s c ó p ic o s de campo oscuro es significativamente mayor que la de la m i­
croscopía de campo claro (es decir, 0 ,0 2 ¡im en comparación
Microscopía de campo claro (óptica) con 0 ,2 jtxm), lo que posibilita la detección de bacterias muy
Los componentes básicos de los microscopios ópticos son delgadas, como Treponema p allid u m (microorganismo causal
una fuen te de luz que se utiliza para iluminar la muestra de la sífilis) y el género L ep to sp ira (leptospirosis). La des­
colocada en una platina, un condensador para enfocar la luz ventaja de este m étodo es que la luz pasa alrededor de los
en la muestra y dos sistemas de lentes (lente del objetivo y microorganismos y no los atraviesa, lo que dificulta el estudio
lente del ocular) que se utilizan para ampliar la imagen de la de su estructura interna.

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20 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

los electrones rebotan en la superficie de la muestra con un


determinado ángulo y se genera una imagen tridimensional.
M étodos microscópicos

Microscopía de campo claro (óptica)


m é t o d o s d e e s t u d io
Microscopía de campo oscuro
Microscopía de contraste de fases Las muestras clínicas y las suspensiones de microorganismos
Microscopía fluorescente se pueden colocar sobre un portaobjetos de vidrio y se pueden
Microscopía electrónica explorar con el microscopio (es decir, estudio directo de una
preparación en fresco). Aunque con este método se pueden
ver microorganismos grandes (p. ej., elem entos fúngicos y
Microscopía de contraste de fases parásitos) y material celular, a menudo es difícil el análisis
La microscopía de contraste de fases perm ite examinar los de estructuras internas. La m icroscopía con contraste de
detalles internos de los microorganismos. En esta forma de fases puede superar algunos de estos problemas; de manera
m icroscopía, como se hacen pasar haces de luz paralelos a alternativa, una muestra o un microorganismo se pueden teñir
través de objetos de densidades diferentes, la longitud de con diferentes métodos (tabla 4-1).
onda de un haz se «desfasa» en relación con el otro haz de
luz (es decir, el haz que atraviesa el material más denso se Estudio directo
retrasa más que el otro ). Mediante el uso de anillos anulares Los métodos de estudio directo son los más sencillos para pre­
en el condensador y en las lentes del objetivo se amplifican parar muestras para el estudio microscópico. La muestra se
las diferencias de fases, de modo que la luz en fase parece puede suspender en agua o suero salino [preparación en fres­
más brillante que la luz fuera de fase. Esto crea una imagen co), mezclada con un álcali para disolver el material de fondo
tridimensional del microorganismo o de la muestra y permite (método de hidróxido potásico [K O H ]) o mezclada con una
un análisis más detallado de las estructuras internas. combinación de un álcali y un colorante para generar contras­
te (p. ej. azul de algodón lactofenol, yodo). El colorante tiñe
Microscopía fluorescente de manera inespecífica el material celular, lo que aumenta el
Algunos compuestos, denominados fluorocromos, pueden contraste con el fondo y permite el estudio de las estructuras
absorber la luz ultravioleta o ultraazul de longitud de onda detalladas. Una variación es el m étodo de tinta china, en el
corta y em itir energía con una longitud de onda visible y que la tinta oscurece el fondo y no la célula. Este m étodo se
mayor. Aunque algunos microorganismos tienen fluorescen­ utiliza para detectar cápsulas alrededor de microorganismos,
cia natural (autofluorescencia), la microscopía fluorescente como la levadura C ryptococcus (el colorante queda excluido
habitualmente supone la tinción de los microorganismos con por la cápsula, lo que crea un halo claro alrededor de la célula)
colorantes fluorescentes, y después su estudio con un micros­ y la bacteria encapsulada Bacilliis an thracis.
copio fluorescente de diseño especial. El microscopio utiliza
una lámpara de vapor de mercurio, de un halógeno o de xenón Tinciones diferenciales
a presión elevada que em ite una longitud de onda de luz más Se utilizan diversas tinciones diferenciales para teñir m i­
corta que la que emiten los microscopios de campo claro tra­ croorganismos específicos o com ponentes del m aterial ce ­
dicionales. Se utiliza una serie de filtros para bloquear el calor lular. La tin ción de G ram es la tinción m ejor conocida y
que genera la lámpara, eliminar la luz infrarroja y seleccionar más utilizada, y forma la base de la clasificación fenotípica
la longitud de onda adecuada para excitar el fluorocromo. de las bacterias. Las levaduras también se pueden teñir con
Posteriormente la luz que emite el fluorocromo se amplifica este método (las levaduras son grampositivas). Las tinciones
con las lentes del objetivo y del ocular tradicionales. Los de hematoxilina férrica y tricróm ica son sumamente útiles
microorganismos y las muestras teñidos con fluorocromos para la identificación de parásitos protozoarios, y la tinción
aparecen brillantes sobre un fondo oscuro, aunque los colores de W right-Giemsa se utiliza para identificar parásitos sanguí­
varían dependiendo del fluorocromo seleccionado. El con­ neos y otros microorganismos seleccionados. Las tinciones
traste entre el microorganismo y el fondo es suficientemente como la metenamina de plata y el azul de toluídína O han
grande como para que se pueda realizar una búsqueda rápida sido sustituidas en gran medida por tinciones diferenciales
del microorganismo con bajo aumento y después el material más sensibles o técnicam ente más fáciles de realizar, o por
se explora con mayor aumento, una vez que se ha detectado tinciones fluorescentes.
fluorescencia.
Tinciones acidorresistentes
Microscopía electrónica Se utilizan al menos tres tinciones acidorresistentes diferen­
Al contrario que otras formas de microscopía, en los micros­ tes, cada una de las cuales aprovecha el hecho de que algunos
copios electrónicos se utilizan bobinas m agnéticas (y no microorganismos conservan una tinción principal incluso des­
lentes) para dirigir un haz de electrones desde un filamento pués de exponerlos a agentes decolorantes potentes, como
de tungsteno a través de una muestra y hacia una pantalla. mezclas de ácidos y alcoholes. El método de Ziehl-Neelsen es
Dado que la longitud de onda en este caso es m ucho más el más antiguo que se utiliza, aunque precisa el calentamiento
corta que la de la luz, la resolución y la ampliación mejoran de la muestra durante el procedimiento de tinción. Muchos
drásticamente. Con microscopía electrónica se pueden ver laboratorios han sustituido este método por el de la tinción aci-
partículas %áricas individuales (en contraposición con los cuer­ dorresistente en frío (método de Kinyoun) o por la tinción fluo-
pos de inclusión vú-icos). Las muestras habitualmente se tiñen rocróm ica (m étodo de auram ina-rod am ina). El m étodo
o se recubren con iones metálicos para crear contraste. Hay del fluorocromo es la tinción de elección porque se puede
dos tipos de microscopios electrónicos: microscopios elec­ estudiar rápidamente una gran superficie de la muestra sim­
trónicos de transmisión, en los cuales los electrones, igual que plemente buscando microorganismos fluorescentes sobre un
la luz en los microscopios ópticos, atraviesan directamente la fondo negro. Algunos microorganismos son «parcialmente aci­
muestra, y microscopios electrónicos de barrido, en los que dorresistentes», de manera que conservan la tinción principal
M ICRO SCO PIA Y CULTIVO IN VITRO

Tabla 4-1 Preparaciones m icroscópicas y tinciones utilizadas en el laboratorio de m icrobiología clínica


M étod o de tinción Principio y aplicaciones
Estudio directo
Preparación en fresco La preparación no teñida se estudia mediante microscopia de campo claro, de campo oscuro o de contraste de fases.
KOHal 10% Se utiliza KOH para disolver el material proteináceo y facilitar la detección de elementos fúngicos que no se ven afectados
por la solución alcalina fuerte. Se pueden añadir colorantes como azul de algodón lactofenol para aumentar el contraste
entre los elementos fúngicos y el fondo.
Modificación del procedimiento de KOH en el que se añade tinta china como material de contraste. El colorante se utiliza
principalmente para detectar el género Cryptococcus en el líquido cefalorraquídeo y en otros líquidos corporales. La
cápsula polisacárida del género Cryptococcus excluye la tinta, lo que crea un halo alrededor de la célula de la levadura.
Yodo de Lugol Se añade yodo a preparaciones en fresco de muestras de parasitología para mejorar el contraste de las estructuras
internas. Esto facilita la diferenciación entre las amebas y los leucocitos del huésped.
Tinciones diferenciales
Tinción de Gram La tinción más utilizada en el laboratorio de microbiología, constituye la base para separar los principales grupos de
bacterias (es decir, grampositivas y gramnegativas). Después de la fijación de la muestra a un portaobjetos de vidrio
(mediante calentamiento o tratamiento con alcohol), se expone la muestra a violeta de cristal y después se añade yodo
para formar el complejo con el colorante principal. Durante la descoloración con alcohol o acetona el complejo queda
retenido en las bacterias grampositivas, aunque se pierde en los microorganismos gramnegativos; los microorganismos
gramnegativos retienen el colorante safranina (de aquí su color rojo). El grado en el que un microorganismo consen/a el
colorante depende del microorganismo, de las condiciones del cultivo y de las habilidades tintoriales del microscopista.
Tinción de hematoxilina Se utiliza para la detección e identiñcación de protozoos fecales. Los huevos y las larvas de helmintos retienen demasiado
férrica colorante, por lo que se identifican con más facilidad en preparaciones en fresco.
Metenamina de plata En general se realiza en laboratorios de histología, no de microbiología. Se utiliza principalmente para la detección tintorial
de elementos fúngicos en los tejidos, aunque también se pueden detectar otros microorganismos, como bacterias.
La tinción de plata precisa habilidad, porque la tinción inespecífica puede hacer que no se puedan interpretar los
portaobjetos.
Tinción de azul de toluidina 0 Se utiliza principalmente para la detección de microorganismos del género Pneum ocystis en muestras respiratorias.
Los quistes se tiñen de color rojo-azul a morado oscuro sobre un fondo de color azul claro. La tinción del fondo se
elimina con un reactivo de sulfatación. Las células levaduriformes se tiñen, y es difícil distinguirlas de las células de
Pneumocystis. Los trofozoítos no se tiñen. Muchos laboratorios han sustituido esta tinción por tinciones fluorescentes
específicas.
Tinción tricrómica Alternativa a la hematoxilina férrica para teñir protozoos. Los protozoos tienen citoplasmas de color azulado-verde a
morado con núcleos rojos o morados-rojos y cuerpos de inclusión; el fondo de la muestra es verde.
Tinción de Wright-Giemsa Se utiliza para detectar parásitos sanguíneos, cuerpos de inclusión víricos y por clamidias, y los géneros Borrelia,
Toxo/^asma, Pneumocystis y Rickettsia. Se trata de una tinción policromática que contiene una mezcla de azul de
metileno, azur B y eosina Y. La tinción de Giemsa combina azul de metileno y eosina. Los iones de eosina tienen carga
negativa y tiñen componentes básicos de las células, de color naranja a rosa, mientras que otros colorantes tiñen las
estructuras ácidas de la célula con diversos tonos de azul a morado. Los trofozoítos de protozoos tienen el núcleo rojo
y un citoplasma grisáceo-azul; las levaduras intracelulares y los cuerpos de inclusión habitualmente se tiñen de azul;
las rickettsias, las clamidias y el género Pneum ocystis se tiñen de morado.
Tinciones acidorresistentes
Tinción de ZiehI-Neelsen Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acidorresistentes. Los microorganismos se tiñen con
carbolfucsina básica y resisten a la descoloración con soluciones de ácido-alcohol. Se realiza contratinción del fondo con
azul de metileno. Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro. La captación de carbolfucsina
precisa el calentamiento de la muestra (tinción acidorresistente caliente).
Tinción de Kinyoun Tinción acidorresistente en frío (no precisa calentamiento). Mismo principio que la tinción de ZiehI-Neelsen.
Auramina-rodamina Mismo principio que otras tinciones acidorresistentes, excepto que se utilizan colorantes fluorescentes (auramina y
rodamina) como tinción principal, y el permanganato potásico (oxidante fuerte) actúa como contratinción e inactiva
los colorantes de fluorocromo no unidos. Los microorganismos tienen fluorescencia amarillenta-verde sobre un fondo
negro.
Tinción acidorresistente Se utiliza un decolorante débil con cualquiera de las tres tinciones acidorresistentes señaladas. Mientras las micobacterias
modificada son muy acidorresistentes, otros microorganismos se tiñen más débilmente (p. e'¡.,Nocardia,Rhodococcus,
Tsul<amurella, Gordonia, Cryptosporidium ,lsospora,Sarcocystis y Cydospora). Estos microorganismos se pueden teñir
con más eficiencia usando un decolorante débil. Los microorganismos que retienen este colorante se denominan
parcialmente acidorresistentes.
Tinciones fluorescentes
B Tinción de naranja Se utiliza para detectar bacterias y hongos en muestras clínicas. El colorante se intercala en el ácido nucleico (natural y
deacridina desnaturalizado). A pH neutro las bacterias, los hongos y el material celular se tiñen de color rojizo-naranja.
A pH ácido (4,0) las bacterias y los hongos siguen siendo de color rojizo-naranja, aunque el material de fondo se tiñe
de color verdoso-amarillo.
Tinción de Igual que las tinciones acidorresistentes.
auramina-rodamina
Tinción de blanco Se utiliza para detectar elementos fúngicos y el género Pneumocystis. El colorante se une a la celulosa y la quitina de las
de calcoflúor paredes celulares; el microscopista puede mezclar el colorante con KOH. (Muchos laboratorios han sustituido la tinción
tradicional de KOH por esta otra tinción.)
Tinción directa con Los anticuerpos (monoclonales o policlonales) forman complejos con moléculas fluorescentes. La unión específica a un
anticuerpos fluorescentes microorganismo se detecta por la presencia de fluorescencia del microorganismo. La técnica ha sido útil para detectar
muchos microorganismos (como Streptococcuspyogenes, Bordeteila, Frandsella, Legionelia, Chiam ydia, Pneumocystis,
C ryptosporidium , Giardia, virus gripal, virus del herpes simple). La sensibilidad y la especificidad de la prueba dependen
del número de microorganismos presentes en la muestra que se va a estudiar y la calidad de los anticuerpos utilizados
en los reactivos.

KOi-i, hidróxido potásico.


22 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

sólo cuando se descoloran con una solución ácida débil. Esta condicionar la recuperación de algunos gérmenes de cre­
propiedad es característica de tan sólo algunos microorganis­ cim iento difícil (p. ej., B o rd etella pertu ssis). Por tanto, los
mos (v. tabla 4-1), lo que hace que sea bastante útil para su laboratorios que realizan pruebas sofisticadas con frecuencia
identificación preliminar. disponen de la capacidad de fabricar una cantidad limitada de
medios de cultivo especializados. Se comercializan fórmulas
Tinciones fluorescentes deshidratadas de la mayor parte de estos medios de cultivo,
La tin ción acidorresistente de auramina-rodamina es un lo que perm ite esta fabricación con mínimas dificultades.
ejem plo específico de una tinción fluorescente. También se Consúltense las referencias del apartado «Bibliografía» si se
han utilizado otros muchos colorantes fluorescentes para desea más información acerca de la elaboración y el control
teñir muestras. Por ejemplo, se puede utilizar la tinción de de cahdad de los medios de cultivo.
naranja de acridina para teñir bacterias y hongos, y el blanco Tipos de medios de cultivo
de calcoflúor tiñ e la quitina de las paredes de las células
fúngicas. Aunque la tinción de naranja de acridina tiene unas Los medios de cultivo se pueden clasificar en cuatro grupos
aplicaciones bastante escasas, la tinción de blanco de calco- generales: 1) medios no selectivos enriquecidos, 2) medios
flúor ha sustituido a las tinciones de hidróxido potásico. Otro selectivos, 3) medios diferenciales y 4) medios especializados
procedim iento es el estudio de muestras con anticuerpos (v. tabla 4 -2 ). A continuación se resumen algunos ejemplos
específicos marcados con colorantes fluorescentes (tinciones de estos medios.
con anticuerpos fluorescentes). La presencia de m icroor­
ganismos fluorescentes es un método rápido tanto para la
detección como para la identificación del microorganismo. Tabla 4-2 Tipos de medios de cultivo
Tipo M edios de cultivo O bjetivo
(ejemplos)
C u lt iv o i n v it r o No selectivos Agar sangre Recuperación de bacterias
y hongos
El éxito de los métodos de cultivo depende de la biología del Agar chocolate Recuperación de bacterias,
microorganismo, del lugar de la infección, de la respuesta incluidas Haem ophilus
inmunitaria del paciente frente a la misma y de la calidad y Neissería gonorrhoeae
del medio de cultivo. La bacteria L egion ella es un patógeno Agar Mueller-Hinton Medio para estudio de la
respiratorio im portante; sin embargo, nunca se consiguió susceptibilidad bacteriana

cultivar hasta que se reconoció que su recuperación dependía Caldo tioglicolato Caldo enriquecido para las
bacterias anaerobias
de disponer de un medio enriquecido con hierro y L-cis-
teína. C am pylobacter, un importante patógeno entérico, no Agar dextrosa Recuperación de hongos
de Sabouraud
se consiguió recuperar de las muestras de heces hasta que
se incubó en m edios altam ente selectivos a 42 °C en una Selectivos, Agar MacConkey Selectivo para las bacterias
diferenciales gramnegativas;
atmósfera microaerófila. C hlam ydia, una importante bacteria diferencial para las
responsable de enfermedades de transmisión sexual, es un especies que fermentan
patógeno intracelular obligado que debe cultivarse en células la lactosa
vivas. Staphylococcus aureus, que es la causa del síndrome del Agar sal manitol Selectivo para los
shock tóxico estafilocócico, produce la enfermedad mediante estafilococos; diferencial
para Staphylococcus
la liberación de una toxina hacia el sistema circulatorio. El
aureus
hemocultivo siempre será negativo, mientras que el cultivo
Agarxilosa-lisina- Agar diferencial selectivo
de la lesión en la que crece el germen sí permite detectarlo.
desoxicolato para Salm onella y Shigella
En muchas infecciones (p. ej., gastroenteritis, uretritis, farin­ en cultivos entéricos
gitis), el germen responsable de la infección se asocia a otros Medio de Selectivo para rriicobacterias
muchos gérmenes que son parte de la flora microbiana normal Lowenstein-Jensen
de la región infectada. Se han desarrollado muchos medios AgarMiddIebrook Selectivo para rriicobacterias
de cultivo que permiten suprimir estos gérmenes existentes CHROMagar Selectivo, diferencial para las
en condiciones normales y facilitan la detección de los que levaduras
tienen importancia clínica. La inmunidad innata y adaptativa Agar inhibidor Selectivo para los hongos
del paciente pueden suprimir el patógeno, de forma que con de hongos filamentosos
frecuencia se necesitan técnicas de cultivo muy sensibles. filamentosos
D el mismo modo, algunas infecciones se caracterizan por la Especializados Agar extracto de Recuperación de Legionella
existencia de relativamente pocos gérmenes. Por ejemplo, la levadura con y Nocardia
carbón vegetal
mayoría de los pacientes sépticos tienen menos de un germen
tamponado (BCYE)
por mililitro de sangre; por tanto, la recuperación de estos
Agar cistina-telurito Recuperación de
microorganismos en un hem ocultivo tradicional precisa la Corynebacterium
inoculación de un gran volumen de sangre en caldos enrique­ diphtheríae
cidos. Por último, se debe controlar con cuidado la calidad Caldo de cultivo Lim Recuperación de
de los medios de cultivo para garantizar que su rendimiento Streptococcus agalactiae
se corresponde con el exigido. Agar sorbitol de Recuperación de
Relativamente pocos laboratorios preparan en la actualidad MacConkey Escheríchia col! 0 ^ 57
sus propios medios de cultivo. La mayor parte son producidos Agar Regan Lowe Recuperación de
por empresas con experiencia en la fabricación de los mis­ Bordetella pertussis
mos. Aunque esto aporta evidentes ventajas, también implica Agar sacarosa, sales Recuperación del género
que la mayoría de los medios de cultivo no sean «recientes». biliares, tiosulfato Vibrio
y citrato (TCBS)
Aunque en general esto no representa un problema, puede
M ICRO SCO PIA Y CULTIVO IN VITRO

M e d io s d e c u ltiv o n o se le ctiv o s e n riq u e c id o s ferm entar el manitol, lo que produce colonias de color
amarillo en este agar.
Estos medios están diseñados para permitir el crecimiento
de la mayor parte de los gérmenes que no necesitan unas Agar xilosa-lisina-desoxicolato (X L D ). Se trata de un
agar selectivo utilizado en la detección de S alm on ella
condiciones exigentes. Los siguientes medios son algunos de
y Shigella en cultivos entéricos. Es un ejem plo de un
los más empleados:
abordaje muy inteligente para la detección de bacte­
Agar sangre. Los laboratorios clínicos utilizan muchos tipos
de medios de cultivo agar sangre. Los medios contienen rias importantes en una mezcla compleja de bacterias
insignificantes. El medio corresponde a un extracto de
dos componentes fundamentales: un medio basal [p. ej.,
levaduras con xilosa, lisina, lactosa, sacarosa, desoxico-
soja tripticasa, infusión de cerebro-corazón, base de Bruce-
lato sódico, tiosulfato sódico, citrato amónico férrico y
lid) y sangre [de oveja, caballo, conejo]. Se pueden añadir
varios suplementos más para ampliar el número de gér­ rojo fenol. El desoxicolato sódico inhibe el crecimiento
de la mayor parte de las bacterias no patógenas. Las
menes que se pueden cultivar en estos medios de cultivo.
bacterias que crecen típicam ente fermentan la lactosa,
Agar chocolate. Se trata de un agar modificado. Cuando se
la sacarosa o la xilosa y dan lugar a colonias amarillas.
añade sangre o hemoglobina al medio de base calentado,
se vuelve marrón (de ahí su nombre). Este medio permi­ S h ig ella no ferm enta estos carbohidratos, de form a
que sus colonias serán rojas. S alm on ella ferm enta la
te el crecimiento de la mayor parte de las bacterias, in­
xilosa, pero tam bién descarboxila la lisina y genera el
cluidas algunas que no crecen en el agar sangre (es decir,
producto alcalino diamino cadaverina. Este producto
H aem ophilus, algunas cepas de N eisseria patógenas).
Agar Mueller-Hinton. Se trata de un medio recomendado neutraliza los productos de fermentación de los ácidos,
de manera que las colonias serán rojas. Dado que la
para estudios convencionales de sensibilidad bacteriana.
mayor parte de S alm on ella produce ácido sulfhídrico
Su composición está bien definida e incluye extractos de
a partir del tiosulfato sódico, las colonias se vuelven
ternera y caseína, sales, cationes divalentes y almidón so­
luble necesario para que los resultados sean reproducibles. negras en presencia de citrato amónico férrico, lo que
permite diferenciar Salm onella de Shigella.
C ald o tio glico lato . S e trata de uno de los m edios de
M edio de Low enstein-Jensen (L J ) . Este medio, utiliza­
cultivo de enriquecimiento empleados para recuperar
do para aislar m icobacterias, contiene glicerol, harina
cantidades pequeñas de bacterias aerobias y anaerobias.
Se emplean diversos compuestos, pero la mayor parte de patata, sales y huevos coagulados [para solidificar
el m edio). Se añade verde malaquita para inhibir las
incluyen caseína, glucosa, extracto de levadura, cisteína y
bacterias grampositivas.
tioglicolato sódico. El suplemento de hemina y vitami­
Agar M iddlebrook. Este medio de cultivo de agar se em ­
na K mejora la recuperación de las bacterias anaerobias.
Agar dextrosa de Sabouraud. Se trata de un medio de plea tam bién para aislar m icobacterias. C ontiene nu­
trientes necesarios para el crecimiento de las micobac­
cultivo enriquecido que contiene caseína y tejido animal
terias [es decir, sales, vitaminas, ácido oleico, albúmina,
digeridos suplementados con glucosa que se emplea para
catalasa, glicerol, glucosa) y verde malaquita para inhibir
aislar hongos. Se han desarrollado diversas fórmulas, aun­
que la mayor parte de los micólogos utilizan la que tiene las bacterias grampositivas. A diferencia del medio U ,
se solidifica con agar.
baja concentración de glucosa y un pH neutro. Al reducir
C H R O M ag ar. Se trata de un agar selectivo diferencial
el pH y añadir antibióticos para inhibir las bacterias, este
utilizado para aislar e identificar algunas especies dis­
medio de cultivo puede ser selectivo de hongos.
tintas de la levadura C a n d id a . Este medio contiene
cloranfenicol para inhibir las bacterias y una mezcla
M e d io s d e c u ltiv o s e le ctivo s y d ife re n c ia le s
de sustratos cromogénicos especiales. Las distintas es­
Los medios de cultivo selectivos se diseñan para poder re­ pecies de C a n d id a cuentan con enzimas que perm i­
cuperar gérmenes específicos que pueden estar presentes en ten em plear uno o más de los sustratos liberando el
una mezcla de otros gérmenes (p. ej., un patógeno entérico compuesto coloreado y generando colonias de colores.
en las heces). Los medios se enriquecen con inhibidores que Por ejemplo, C a n d id a alb ica n s genera colonias verdes,
suprimen el crecimiento de los gérmenes no deseados. Estos C a n d id a tropicalis genera colonias moradas y C a n d id a
medios se hacen diferenciales añadiendo ingredientes especí­ kru sei las genera rosadas.
ficos que permiten la identificación del germen en una mezcla Agar con inhibidor de hongos ñlamentosos. Este medio
(p. ej., añadiendo lactosa y un indicador de pH para identificar de cultivo es un compuesto selectivo enriquecido que
los gérmenes que fermentan la lactosa). Los siguientes son se emplea para el aislamiento de hongos patógenos dis­
ejemplos de medios de cultivo selectivos y diferenciales: tintos de los dermatofitos. Se añade cloranfenicol para
Agar M acConkey. Se trata de un agar selectivo para las suprimir el crecimiento de las bacterias contaminantes.
bacterias gramnegativas y diferencial para distinguir
las bacterias que ferm entan la lactosa y las que no.
M e d io s e s p e c ia liz a d o s
Este medio incluye peptonas digeridas, sales biliares,
lactosa, rojo neutro y cristal violeta. Las sales biliares y Se han creado muchos medios de cultivo especializados dis­
el cristal violeta inhiben las bacterias grampositivas. Las tintos para detectar gérmenes específicos, que pueden ser
bacterias que fermentan la lactosa producen ácidos, que exigentes o que se presentan mezclados con muchos otros.
precipitan las sales biliares y provocan un color rojo del Los más empleados se describen en los capítulos relativos a
indicador rojo neutro. cada germen concreto de esta obra.
Agar sal manitol. Se trata de un medio de cultivo selec­
Cultivo celular
tivo empleado para el aislamiento de estafilococos. El
medio incluye extractos de caseína y tejidos animales Algunas bacterias y todos los virus son gérm enes intrace*
digeridos, ex tracto de ternera, m anitol, sales y rojo lulares estrictos, de form a que sólo se pueden cultivar en
fenol. Los estafilococos pueden crecer en presencia células vivas. En 1 9 4 9 John Franklin Enders describió una
de una elevada concentración de sal y S. aureus puede técn ica para cultivar células de m am ífero y aislar el virus
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

de la poliomielitis. Esta técnica se ha ampliado para poder 2. Enumere ejem plos de exploración m icroscópica directa,
cultivar la mayor parte de los gérmenes intracelulares es­ tinciones diferenciales, tinciones acidorresistentes
trictos. Los cultivos celulares pueden ser células que crecen y tinciones fluorescentes.
y se dividen sobre una superficie (es decir, una monocapa 3. Enumere tres factores que influyen en el éxito d el cultivo.
de célu las) o células suspendidas en un m edio de cu lti­
4. Cite tres ejemplos de m edios de cultivo no selectivos
vo. Algunos cultivos celulares están bien establecidos y se
enriquecidos.
pueden m antener de form a indefinida. Estos m edios se
comercializan en general. Otros cultivos celulares se deben 5. Cite tres ejemplos de m edios de cultivo selectivos
preparar inmediatamente antes de infectarlos con bacterias diferenciales.
o virus y no se pueden m antener en el laboratorio más de
Las respuestas a estas p re g u n ta s e stán disp o n ib les en
unos pocos ciclos de división (cultivos celulares prim arios).
w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s
La entrada a las células se suele regular por la existencia de
receptores específicos, de forma que se puede emplear la
capacidad diferencial de infectar líneas celulares específicas BIBLIOGRAFÍA
para predecir la identidad de una bacteria o virus. En los Chapín K: Principies o f stains and media. In Murray et al, editor: M anucd
próximos capítulos se aporta más información sobre el uso ofc lin ic al m icrobiology, ed 9, Washington, D C , 2007, American Society
de cultivos celulares. for Microbiology Press.
M urray P, Shea Y: A SM p o c k e t g u id e to c lin ic a l m icro b iolog y , ed 3,
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PREGUNTAS Boca Ratón, Fia, 20 0 6 , C R C Press.
Wiedbrauk D : Microscopy. In Murray et al, editor: M a n u al o fc lin ic a l
m icro biolog y , ed 9, Washington, D C , 2 0 0 7 , A m erican Society for
/. Explique los principios que subyacen a la microscopía
Microbiology.
de cam po claro, de cam po oscuro, de contraste de fases Z im bro M , Power D : D ifeo and B B L manual: manual o f m icrobio-
y microscopía electrónica. Dé un ejem plo en el que se logical cu ltu re m edia, Sparks, M d, 2 0 0 3 , B e cto n D ickinson and
podría utilizar cada uno de los m étodos. Company.
M IC ROSCO PIA Y CULTIVO IN VITRO

RESPUESTAS (p. ej., Legionella) y para microorganismos que se tiñen


con colorantes fluorescentes específicos (p. ej., M ycobacterium ).
1. En la microscopía de campo claro, la luz visible atraviesa 2. Los métodos de estudio microscópico directo incluyen la
un condensador, después el objeto que se va a observar suspensión de la muestra en agua (p. ej., preparación en fresco
y, finalmente, una serie de lentes para ampliar la imagen. para hongos) o en un medio de contraste (p. ej., azul de algodón
Este método es la técnica microscópica más utilizada para lactofenol para hongos o yodo para parásitos). Las tinciones
analizar muestras colocadas sobre portaobjetos de vidrio. La diferenciales se utilizan con frecuencia para detectar bacterias
microscopía de campo oscuro utiliza la misma serie de lentes (p. ej., tinción de Gram, tinción acidorresistente), parásitos (p. ej.,
que la microscopía de campo claro; sin embargo, se utiliza tinciones de hematoxilina férrica y tricrómicas) y patógenos
un condensador especial para iluminar el material que se va transportados por la sangre (p. ej., tinción de Giemsa para Borrelia
a observar desde un ángulo oblicuo. Por tanto, el objeto está y Plasmodium). Se han desarrollado diversos métodos de tinción
iluminado brillantemente sobre un fondo negro. Este método acidorresistente (p. ej., ZiehI-Neelsen, Kinyoun, fluorocromo) que
se utiliza para detectar microorganismos que son demasiado detectan bacterias (Mycobacterium, Nocardia,Rhodococcus)
finos para observarlos mediante microscopio de campo claro y parásitos (Cryptosporidium, Cydospora, Isospora). Las
(p. ej., Treponema, el microorganismo causal de la sífilis). La tinciones fluorescentes habituales se han utilizado para detectar
microscopía de contraste de fases ilumina los sujetos con hongos (tinción de blanco de calcoflúor) o microorganismos
haces de luz paralelos que se desfasan uno respecto al otro. acidorresistentes (tinción de auramina-rodamina).
Esto permite que los objetos aparezcan como estructuras 3. Biología del microorganismo (el microorganismo
tridimensionales y es útil para observar las estructuras internas. necesita condiciones especiales para el crecimiento o precisa el
La microscopía fluorescente utiliza lámparas de mercurio, suplemento de! medio con factores de crecimiento), localización
halógeno o xenón a presión elevada que emiten una luz de de la infección (el material enviado procede de la zona de la
longitud de onda corta para iluminar el objeto. Una serie de infección), respuesta inmunitaria del paciente a la infección
filtros bloquean el calor y la luz infrarroja, y seleccionan una (el organismo es inactivado o destruido por la respuesta
longitud de onda de luz específica emitida por el objeto. inmunitaria del paciente), calidad del medio de cultivo.
Esta «fluorescencia» se observa como un objeto iluminado 4. Agar sangre, agar chocolate, caldo de tioglicolato.
brillantemente sobre un fondo oscuro. Esta técnica es muy 5. Agar MacConkey, agar manitol sal, agar
útil para microorganismos con fluorescencia natural xilosa-lisina-desoxicolato.
5 Diagnóstico molecular

l igual que las pruebas que quedan en la escena del microorganismo específico producidas por la escisión con una
A crimen, el ácido desoxirribonucleico (A D N ), el ácido
ribonucleico [ARN) o las proteínas de un agente infeccio­
o más endonucleasas de restricción se denomina polimorfismo
de longitud de fragmentos de restricción (R FLP ).
so de una muestra clínica se pueden utilizar para ayudar a Los fragmentos de AD N o ARN de diferentes tamaños o
identificarlo. En muchos casos el agente se puede detectar estructuras se pueden distinguir por su movilidad electrofo-
rética en un gel de agarosa o poliacrilamida. Las diferentes
e identificar de este modo, aunque no se haya podido aislar o
formas de la misma secuencia de ADN y las diferentes longi­
detectar por medios inmunológicos. Se están desarrollando
tudes de AD N se mueven a través de la estructura laberíntica
nuevas técnicas y aplicaciones de las ya existentes para el
de un gel de agarosa a distintas velocidades, lo que permite su
análisis de los agentes infecciosos.
separación. El ADN se puede visualizar mediante su tinción
Las ventajas de las técnicas m oleculares radican en su
con bromuro de etidio. Los fragmentos más pequeños (con
sensibihdad, su especificidad y su seguridad. Desde el punto
menos de 2 0 .0 0 0 pares de bases), como los de los plásmidos
de vista de la seguridad, estas técnicas no requieren el ais­
bacterianos o los virus, se pueden separar y distinguir m e­
lamiento del agente infeccioso y se pueden llevar a cabo en
diante m étodos electroforéticos normales. Los fragmentos
m uestras o extractos fijados quím icam ente (inactivados).
más grandes, como los de bacterias enteras, únicamente se
Debido a su sensibilidad, permiten detectar muestras muy
pueden separar utilizando una técnica electroforética especial
diluidas de ADN microbiano en un tejido, aunque el agente
denominada electroforesis d e gel en cam po pulsado.
no se esté replicando ni produciendo otros indicios de infec­
El RPLP es útil, por ejemplo, para distinguir las distintas
ción. Estas técnicas permiten distinguir cepas basándose en
cepas del virus del herpes simple (V H S ). La comparación
las diferencias de sus genotipos [es decir, mutantes), lo cual
de los patrones de restricción del A D N de las endonucleasas
resulta especialmente útil para distinguir cepas resistentes a
de restricción de diferentes virus aislados puede identificar
los agentes antivíricos, las cuales pueden diferir en un único
un patrón de transmisión vírica de una persona a otra o bien
nucleótido.
permitir diferenciar el V H S-1 del V H S-2. El RFLP también
se ha utilizado para demostrar la diseminación de una cepa
D e t e c c ió n d e m a t e r ia l de Streptococcus productora de fascitis necrosante de un pa­
ciente a otro paciente, un técnico de urgencias y los médicos
GENÉTICO M ICROBIANO del departamento de urgencias [fig. 5-1). Am enudo se utiliza
la com paración del ARN ribosóm ico 16S para identificar
Análisis electroforético del ADN y polimorfismo
diferentes bacterias.
de longitud de fragmentos de restricción
La estructura del genoma y la secuencia genética constituyen Detección, amplificación y secuenciado
dos características fundamentales para la distinción de la de ácidos nucleicos
familia, el tipo y la cepa de un microorganismo. Se pueden
distinguir cepas específicas de microorganismos a partir de Las sondas de A D N se pueden utilizar de manera semejante
su A D N o ARN, o por los fragmentos de A D N obtenidos a los anticuerpos, como herramientas sensibles y específicas
cuando esta molécula es atacada por endonucleasas de res­ para detectar, localizar y cuantificar secuencias de ácidos
tricción específicas [enzimas de restricción ). Las enzimas nucleicos específicos en muestras clínicas [fig. 5 -2). La es­
de restricción reconocen secuencias concretas de AD N que pecificidad y la sensibihdad de las técnicas basadas en sondas
tienen una estructura palindrómica, com o en el ejem plo de A D N perm iten detectar especies o cepas de un agente
siguiente: infeccioso, incluso en ausencia de proliferación o replicación.
Las sondas de A D N se sintetizan m ed iante m étodos
químicos o bien se obtienen por clonación de fragmentos
GAATTC Secuencia de reconocim iento genómicos específicos o de un genoma vírico com pleto en
CTTAAjG y escisión E co R l vectores bacterianos [plásmidos, cósm idos). Las copias de
A D N de los virus de ARN se fabrican por m edio de una
transcriptasa inversa retrovírica y luego se clonan en estos
Las regiones de ADN reconocidas por las distintas endonu­ vectores. Tras llevar a cabo tratamientos químicos o térmicos
cleasas de restricción difieren en su secuencia, longitud y para «fundir» (separar) las cadenas de A D N de la m ues­
frecuencia de aparición. Como resultado de ello, las diferentes tra, se agrega la sonda de AD N y se perm ite su hibridación
endonucleasas de restricción escinden el AD N de una muestra (unión) a la secuencia idéntica o casi idéntica de la muestra.
en diferentes sitios y dan lugar a fragmentos de diferentes Es posible modificar la exactitud [la necesidad de una co­
longitudes. La escisión de diferentes muestras de AD N con rrespondencia exacta de la secuencia) de la interacción con
una endonucleasa de restricción también puede generar frag­ el fin de detectar secuencias relacionadas o distinguir cepas
mentos de longitudes diferentes. Las diferencias en la longitud diferentes (m utantes). Las sondas de AD N se marcan con
de los fragmentos de AD N entre las diferentes cepas de un nucleótidos radiactivos o modificados por métodos químicos
© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos
26 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

5 6

Célula infectada p i de< virus en e( corte de lefido

TCQCQTAGC
Sonda de AON mafcada
con Molina

— Oesnaturalízan el ADN

Avidina marcada con poroxídasa do rábano picanle

F ig u ra 5 -1 Polim orfismo d e longitud d e fragmentos de restricción de


ADN de cepas bacterianas separadas por electroforesis en gel en cam po
pulsado. Las calles 1 a 3 muestran AD N digerido por la endonucleasa de
restricción Sm a 1 aislado d e dos m iem bros d e una fam ilia con fascitis
necrosante y de su m édico (faringitis). Las calles 4 a 6 son de cepas de
S tre p to c o c c u s p y o g e n e s no relacionadas. (Cortesía del Dr. Jo e DiPersio,
Akron, Ohio.)

(p. ej., uridina biotinilada] con el objeto de detectarlas y


cuantificarlas. La aplicación de una sonda de AD N marcada
F ig u ra 5 -2 Análisis con sonda de AD N de células infectadas por virus.
con biotina perm ite emplear un nucleótido fluorescente o Estas células se pueden localizar en secciones de tejidos preparados con
una molécula de avidina o estreptavidina (una proteína que m étodos histológicos utilizando sondas de ADN de tan sólo nueve nu-
se une fuertem ente a la biotina] marcada enzimáticamente cleótidos o plásmidos bacterianos que contengan el gen vírico. Se agrega a
para detectar ácidos nucleicos %áricos en una célula de manera la muestra una sonda de ADN marcada. En este caso, la sonda de ADN está
similar a la localización de un antígeno por inmunofluores- m arcada con timidina modificada con biotina, pero tam bién se pueden
usar agen tes radiactivos. La m uestra se calienta para desnaturalizar el
cencia indirecta o enzimoinmunoanálisis.
AD N y se enfría para perm itir q ue la sonda se hibride con la secuencia
Las sondas de A D N son capaces de detectar mediante com plem entaria. Se agrega avidina m arcada con peroxidasa de rábano
hibridación in s itu secuencias genéticas específicas en mues­ p icante para q ue se una a la biotina de la sonda. Se agrega el sustrato
tras tisulares de biopsia fijadas y permeabilizadas. Cuando se adecuad o para colorear los núcleos de las células infectadas por virus.
utiliza detección fluorescente se denomina F IS H : hibridación A , adenina; b , biotina; C, citosina; G, guanina; T, timina.
flu o re scen te in s it u . La localización m ed iante h ibrida­
ción in situ de células infectadas por el citomegalovirus [CMV)
(fig. 5 -3 } o por el virus del papilom a es una opción más característica. Se puede detectar de forma semejante el ARN
conveniente que los medios inmunológicos de detección y separado mediante electroforesis (Northern blot: hibridación
representa el tínico sistema comercializado de detección del de sonda de ARN:ADN) y fijado a un filtro de nitrocelulosa.
virus del papiloma. Actualmente se dispone en los comercios La reacción en cadena de la polim erasa (P C R ) ampli­
de muchas sondas para microorganismos y de equipos de re­ fica copias simples de AD N vírico varios millones de veces
activos para detectar virus, bacterias y otros microorganismos. y constituye una de las técnicas más modernas de análisis
Se pueden detectar secuencias de ácidos nucleicos es­ genético (fig. 5-4). Se incuba la muestra con dos oligómeros
pecíficos en extractos de una muestra clínica aplicando un pe­ cortos de ADN, denominados prim ers, los cuales contienen
queño volumen del extracto en un filtro de nitrocelulosa (dot unas secuencias complementarias a las de los extrem os de
blot) y después aplicando una sonda de ADN vírico específico una secuencia genética conocida del A D N com pleto, una
marcado sobre el filtro. O tra posibilidad es la transferencia polimerasa de A D N dotada de estabilidad térm ica (Taq u
del patrón de restricción por endonucleasas de restricción otra polimerasa obtenida a partir de bacterias termofñicas),
separado electroforéticam ente a un filtro de nitrocelulosa nucleótidos y tampones. Los oligómeros se hibridan con la
(Southern blot: hibridación de sonda de AD N :AD N ] para secuencia apropiada de AD N y actiian como prim ers para la
después identificar la secuencia específica por hibridación con polimerasa, la cual copia ese segmento de AD N . Posterior­
una sonda genética específica y su movilidad electroforética mente se calienta la muestra con el propósito de desnaturalizar
DIAGNÓSTICO M OLECU LAR 27

■t PCR: primer y segundo ciclos PCR; tercer cido


% U ^ S Q - <copia
■ CEKjenas separacias

& A
^ Primers do fusión

■M .. .
(= 1
■ Pnmers de extensión
^ i £ 9 ■ .« *'• • - con pclimera&a

-2 copias

J ■ Cadenas separadas
Pnmers de fusión
PCR: cuarto cido
F ig u r a 5 - 3 Localización in s it u d e una in fecció n p or citom egalovi-
rus (CMV) utilizando una sonda genética. La infección por CM V de los túbulos
renales d e un riñón se localiza con una sonda d e AD N específica para
CM V marcada con biotina y se visualiza por la conversión del sustrato con
avidina conjugada con peroxidasa de rábano picante d e manera similar al
enzim oinmunoanálisis. (Cortesía de Donna Zabel, Akron, Ohio.)

Prim&rs de extensión
^ con polimerasa
el A D N (separar las cadenas de la doble hélice) y se enfría
para permitir la hibridación de los prim ers con el nuevo ADN
formado en el ciclo anterior. Cada copia de ADN se convierte
en una nueva plantilla para la síntesis de nuevas moléculas.
- 4 copias
El proceso se repite un gran número de veces (de 20 a 40)
con el fin de amplificar la secuencia del A D N original de
manera exponencial. Una secuencia diana se puede amplificar
1.000.000 de veces en unas pocas horas con este método. Esta
técnica es especialmente útil para detectar secuencias de virus
latentes e integrados, como es el caso de los retrovirus, los
virus del herpes, los virus del papiloma y otros virus de ADN.
La técnica de RT PC R (reacción en cadena de la polime-
rasa-retrotranscriptasa o transcriptasa inversa) representa una
variación de la PC R convencional, se utiliza la transcriptasa
inversa de los retrovirus para convertir el ARN vírico o el
ARN mensajero en ADN con anterioridad a su amplificación
por PC R. En 1993 se emplearon secuencias de hantavirus
como prim ers para la RT PC R con el propósito de identificar
el agente causante de un brote de enfermedad pulmonar he-
morrágica en la zona de Four Corners de Nuevo México. Esta
técnica demostró que el agente infeccioso era un hantavirus. F ig u ra 5 -4 Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Esta técnica es un
La P C R en tiempo real se concibió con el fin de cuantificar m edio rápido de amplificar una secuencia conocida de ADN. Se mezcla una
la cantidad de A D N o ARN presente en una muestra tras muestra con una polimerasa de ADN estable térmicamente, un exceso de
su conversión a A D N por la transcriptasa inversa. D e forma trifosfatos de desoxirribonucleótidos y dos oligómeros d e ADN (prim ers)
qu e com plem entan los extremos de la secuencia diana q ue debe ser am­
sencilla, cuanto mayor sea la cantidad de ADN presente en
plificada. La mezcla se calienta para desnaturalizar el AD N y después se
una muestra, mayor será la velocidad de síntesis de nuevo enfría para permitir la unión de los p rim e rs al ADN diana y la extensión de
AD N en la reacción de PCR, ya que la cinética de la reacción los p rim e rs por la polimerasa. El ciclo se repite de 20 a 40 veces. Después
es proporcional a la cantidad de A D N . La producción de del prim er ciclo sólo se amplifica la secuencia enm arcada por los p rim e rs.
A D N bicatenario se determina en función del increm ento En la técnica RT PCR tam bién se puede amplificar el ARN después de su
de la fluorescencia de una molécula unida a la molécula de conversión en ADN por la transcriptasa inversa.>1 y B , oligómeros de ADN
utilizados com o primers-, + y cadenas d e ADN. (Modificado de Blair GE,
AD N bicatenario amplificado o mediante algún otro método.
Blair Zajdel ME: B iochem Educ 20:87-90,1992.)
Este procedimiento resulta útil para cuantificar el número de
genomas del virus de la inmunodeficiencia humana (V IH )
presente en la sangre de un paciente para evaluar el desarrollo una cadena de ADN ramificada artificialmente. Cada rama
de la enfermedad y la eficacia de los fármacos antivíricos. es capaz de iniciar una señal detectable durante la prueba,
El análisis con A D N de cadena ram ificada (h ra n ch ed de forma que se amplifica la señal de la muestra inicial. El
D N A ) es una nueva alternativa a la P C R y la RT P C R y se análisis m ediante hibridación para captura de anticuerpos
emplea en la detección de pequeñas cantidades de secuencias en solución detecta y cuantifica los híbridos de ARN:ADN
específicas de ARN o A D N . Esta técnica resulta especial­ usando un anticuerpo específico para el com plejo con una
m ente útil para cuantificar las concentraciones plasmáticas técnica similar a un ELISA (enzimoinmunoanálisis) (v. cap. 6).
de ARN del V IH (viremia plasmática). En este caso, el plas­ Se han comercializado equipos de reactivos que usan varia­
ma se incuba en un tubo especial que está revestido de una ciones de las técnicas descritas en los párrafos precedentes pa­
secuencia corta de ADN complementario (ADNc) capaz de ra detectar, identificar y cuantificar distintos microorganismos.
capturar el ARN vírico. Se agrega otra secuencia de ADN c La secuenciación de A D N ha llegado a ser suficientemente
para que se una a la muestra, pero este A D N está unido a rápida y económica como para permitir la determinación de
28 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 5-1 Técnicas m oleculares


Ejemplos clínicos
RFLP Comparación de ADN Epidemiología molecular, cepas de VHS-1
Electroforesis del ADN Comparación de ADN Diferencias en las cepas del virus
(hasta 20.000 bases)
Electroforesis en gel en campo pulsado Comparación de ADN (fragmentos grandes de ADN) Comparaciones entre cepas de estreptococos
Hibridación/n5/fu Detección y localización de secuencias de ADN en tejidos Detección del virus ADN que no se están
replicando (p. ej., citomegalovirus, virus
del papiloma humano)
Dot blot Detección de secuencias de ADN en solución Detección de ADN vírico
Southern blot Detección y caracterización de secuencias de ADN por su tamaño Identificación de cepas víricas específicas
Northern blot Detección y caracterización de secuencias de ARN por su tamaño Identificación de cepas víricas específicas
PCR Amplificación de muestras muy diluidas de ADN Detección del virus ADN
RTPCR Amplificación de muestras muy diluidas de ARN Detección del virus ARN
PCR en tiempo real Cuantificación de muestras muy diluidas de ADN y ARN Cuantificación del genoma del VIH: viremia
ADN de cadena ramificada Amplificación de muestras muy diluidas de ADN o ARN Cuantificación de virus ADN y ARN
Análisis de ADN mediante hibridación para Amplificación de muestras muy diluidas de ADN o ARN Cuantificación de virus ADN y ARN
captura de anticuerpos en solución
SDS-PAGE Separación de proteínas por su peso molecular Epidemiología molecular del VHS

ADN, ácido desoxirribonucleico; ARN, ácido ribonucleico; PCR, reacción en cadena de la polimerasa; RFLP, polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción;
RTPCR, reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa; SDS-PAGE, electroforesis con dodecil sulfato sódico en gel de poliacrilamida; VHS-1, virus
del herpes simple-1; WW, virus de la inmunodeficiencia humana.

laboratorio de secuencias microbianas para la identificación 3. Un hom bre de 37 años de edad tiene síntom as
de microorganismos. Puede utilizarse el secuenciado de la su- seudogripales. Se sospecha una infección vírica.
bunidad ribosómica 16S para identificar bacterias específicas. Se debe id entificar el m icroorganism o en una muestra
Se puede usar el secuenciado de los virus para identificar los de un lavado nasal.
virus y distinguir cepas diferentes (p. ej., cepas específicas 4. La eficacia d e l tratam iento antirretrovfrico en una paciente
del virus gripal). infectada p o r el VIH se puede evaluar cuantificando
el núm ero de genomas víricos en su sangre.
D e t e c c ió n d e p r o t e ín a s 5. Se sospecha que un fro tis de Papanicolaou contiene
una infección p o r el virus d e l papilom a hum ano (VPH).
En algunos casos, los virus y otros agentes infecciosos se pue­ ¿Cómo se puede detectar el VPH en la muestra?
den detectar por el hallazgo de ciertas enzimas caracterís­
ticas o proteínas específicas. Por ejemplo, la detección de 6. Un niño nace con microcefalia, y se sospecha infección
una actividad enzimática de transcriptasa inversa en el suero p o r el CMV. La orina contiene células con la m orfología
o en un cultivo celular indica la presencia de un retrovirus. característica de las células infectadas p o r el C!\AV.
¿Cómo se puede verificarla infección p o r el CMV?
El patrón proteico de un virus u otro agente que se forma
tras la electroforesis con dodecil sulfato sódico en gel de 7. La resistencia a los antivíricos y la gravedad de la
poliacrilamida (SD S-PA G E) también se puede utilizar para enferm edad se analizan en aislados d e l virus de la hep atitis C
identificar y distinguir diferentes cepas víricas o bacterianas. procedentes de adictos a drogas intravenosas.
En la técnica de SD S-PA GE, el SD S se une al esqueleto de
Las respuestas a estas p re g u n ta s e stán disp o n ib les en
la proteína para generar una estructura peptídica uniforme
w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s
y una relación entre la longitud y la carga del péptido, de
forma que la movilidad de la proteína en el gel presenta una
relación inversamente proporcional al logaritmo de su peso B IB L IO G R A F ÍA
molecular. Por ejemplo, los patrones de proteínas del V H S DiPersio JR , et al: Spread o f serious disease-producing M 3 clones o f
separadas por técnicas electroforéticas se pueden utilizar para group A Streptococcus among family members and health care workers,
distinguir diferentes tipos y cepas de V H S-1 y V H S-2. Se a tn / n / e c fD tí 2 2 :4 9 0 -4 9 5 , 1996.
pueden emplear anticuerpos con el fin de identificar proteínas Forbes BA, Sahm DF, Weissfeld A S: B a ile y a n d Scott's diagn ostic m i-
crobiology, ed 12, S t Louis, 2 0 0 7 , Mosby.
específicas separadas por SDS-PAGE utilizando una técnica de
Fredericks DN , Relman DA: Application o f polymerase chain reaction
Western blot [v. cap. 47). Las técnicas moleculares empleadas to the diagnosis o f infectious diseases, C lin In fect D is 2 9 :4 7 5 -4 8 6 ,
para identificar agentes infecciosos se resumen en la tabla 5-1. 1999.
Millar BC, X u J , Moore JE : Molecular diagnostics o f medically ünportant
PREGUNTAS bacterial infections, C u r r Issues M o lB io l 9 :2 1 -4 0 , 20 0 7 .
Murray A S M p o ck et g^ ide to clin ic a l m icrobiology, e d 3 , Washington,
D C , 20 0 4 , American Society for Microbiology Press.
¿Qué procedimientos se pueden utilizar para los siguientes
Murray PR, e t al: M a n u a l o f clin ica l m icrobiology, ed 9, Washington,
análisis, y por qué se utilizarían esos procedimientos? D C , 20 0 7 , American Society for Microbiology Press.
/. Comparación de las principales especies bacterianas PersingDS, etú.\M olecular microbiology, diagnostic principies a n d practice,
presentes en la flora norm al de una persona delgada y de ed 2, Washington, D C , 2011, American Society for Microbiology Press.
Sp ecter S, H odinka RL, Young SA: C lin ic a l v irolog y m an u a l, ed 3,
otra obesa.
Washington, D C , 20 0 0 , American Society for Microbiology Press.
2. Comparación de la flora bacteriana norm al que se asocia Strauss JM , Strauss E G : Viruses a n d hu m an d isease, ed 2, San Diego,
a los abscesos bucales crónicos. 2 0 0 7 , Academic.
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

RESPUESTAS 4. Puede utilizarse RT PCR cuantitativa para determinar


el número de copias del genoma. Si la paciente cumple el
1. El gen del ARN ribosómico 16S se amplifica mediante PCR tratamiento, entonces se pueden secuenciar los genes víricos
utilizando prim ers universales que reconocen grandes grupos correspondientes para determinar la naturaleza de una mutante
de bacterias, y después se amplifican y determinan secuencias resistente.
específicas para identificar las bacterias y cepas individuales. 5. La hibridación in situ se puede utilizar para demostrar la
2. El gen del ARN ribosómico 16S se amplifica mediante PCR presencia de secuencias del ADN del VPH dentro de las células
utilizando prim ers universales que reconocen grandes grupos del frotis de Papanicolaou.
de bacterias, y después se amplifican secuencias específicas 6. Se puede utilizar la hibridación in situ para demostrar la
del gen y se secuencian para determinar las bacterias y cepas presencia de secuencias de ADN del CIVIV dentro de las células
individuales. de la orina. También puede utilizarse la PCR para detectar
3. Puede aislarse ARN de las muestras, se convierte en secuencias víricas en la orina o la sangre del lactante.
ADN con transcriptasa inversa y después se amplifica con una 7. Las secuencias del genoma vírico se pueden detectar
mezcla de prim ers de ADN definidos mediante PCR (RT PCR). mediante análisis por RT PCR del ARN aislado de la sangre.
Posteriormente puede detectarse la presencia de secuencias Posteriormente se pueden amplificar genes específicos,
víricas específicas mediante PCR utilizando pr/mers específicos que se secuencian después para determinar la base de la
de virus. resistencia.
6 Diagnóstico serológico

as técnicas inmunológicas se utilizan para detectar, iden­


L tificar y cuantificar antígenos en muestras clínicas, así
como para evaluar la respuesta humoral frente a la infección
m é t o d o s d e d e t e c c ió n

Los complejos antígeno-anticuerpo se pueden detectar di­


y los antecedentes de exposición a agentes infecciosos de rectam ente por técnicas de precipitación o marcando el anti­
cuerpo con una sonda radiactiva, fluorescente o enzimática, o
un individuo. La especificidad de la interacción antígeno-
indirectamente por la medición de una reacción dirigida por el
anticuerpo y la sensibilidad de muchas de las técnicas in­
anticuerpo, como la fijación del complemento.
munológicas las convierten en unas poderosas herramientas
de laboratorio (tabla 6 -1 ). En la m a y o r ía d e los c a s o s se Técnicas de precipitación e inmunodifusión
p u ed e a d a p ta r la m ism a téc n ica p a r a e v a lu a r e l an tígen o
Se pueden distinguir los complejos antígeno-anticuerpo es­
y e l an ticu erpo. Dado que el diseño de un gran número de
pecíficos y las reacciones cruzadas mediante técnicas de inmu-
pruebas serológicas pretende obtener un resultado positivo noprecipitación. Dentro de un intervalo limitado de concen­
o negativo, la cuantificación de la potencia de un anticuerpo tración tanto de antígenos como de anticuerpos, denominado
se obtiene en forma de título. El título de un anticuerpo se zona de equivalencia, el anticuerpo reticula el antígeno para
define como la mayor dilución de una muestra que mantiene formar un complejo que es excesivamente grande para perma­
una actividad detectable. necer en solución y termina por precipitar. Esta técnica se basa
en la naturaleza multivalente de las moléculas de anticuerpo
A n t ic u e r p o s
(p. e j., la inmunoglobulina [Ig] G posee dos dominios de unión
al antígeno). Los complejos antígeno-anticuerpo son solubles
Los anticuerpos se pueden utilizar como herramientas sen­ a unas relaciones de concentración de antígeno con respecto
sibles y específicas para detectar, identificar y cuantificar a anticuerpo situadas por encima y por debajo de la concen­
los antígenos de un virus, una bacteria o un parásito. Los tración de equivalencia.
anticuerpos específicos se pueden o btener del suero de Varias técnicas de inmunodifusión incorporan el concepto
pacientes convalecientes (p. ej., anticuerpos antivíricos) o de equivalencia para determinar la identidad de un antígeno
bien se pueden preparar en animales. Estos anticuerpos son o la presencia de un anticuerpo. La inmunodifusión radial
policlonales; es decir, son preparaciones heterogéneas de simple se puede utilizar para detectar y cuantificar un antí­
anticuerpos que pueden reconocer numerosos epítopos en geno. En esta técnica, el antígeno se coloca en un pocilio y
un único antígeno. Los anticuerpos monoclonales reconocen se permite que difunda en un agar que contenga anticuerpo.
epítopos individuales en un antígeno. Se han comercializado Cuanto mayor sea la concentración del antígeno, más lejos
anticuerpos m onoclonales fren te a algunos antígenos, es­ difundirá hasta alcanzar la equivalencia con el anticuerpo en
pecialmente para antígenos de superficie de linfocitos. el agar y precipitará en forma de anillo alrededor del pocilio.
El desarrollo de la tecnología de los anticuerpos monoclo­ La técnica de inmunodifusión doble de Ouchterlony se
nales revolucionó la ciencia de la inmunología. Por ejemplo, aplica para determinar las relaciones existentes entre diferen­
la especificidad de estos anticuerpos ha permitido identificar tes antígenos, como se muestra en la figura 6-1. En esta técni­
subpoblaciones de linfocitos (p. ej., linfocitos T C D 4 y C D 8) ca se colocan soluciones de antígeno y anticuerpo en pocilios
y antígenos de superficie de células linfocíticas. Los anti­ separados abiertos en agar y se perm ite que difundan uno
cuerpos monoclonales son los productos de células híbridas hacia el otro para establecer los gradientes de concentración
generadas por la fusión y clonación de células esplénicas de de cada sustancia. En la zona en la que las concentraciones
ratón inmunizado y células mielomatosas, como consecuencia alcanzan la equivalencia se forma una línea de precipitación vi­
de lo cual se produce un hibridoma. El mieloma inmortaliza a sible. Basándose en este patrón de líneas de precipitación,
los linfocitos B esplénicos productores de anticuerpos. C a d a esta técnica también se emplea para determinar si las mues­
clon de h ibridom a es una fá b r ic a d e una m olécula d e anticuer­ tras son idénticas, si comparten algún epítopo, pero no todos
po, y g en era un an ticu erpo m onoclon al qu e reconoce sólo un (identidad parcial), o bien si se trata de muestras diferentes.
epítopo. Los anticuerpos monoclonales también se preparan Esta técnica se usa para detectar anticuerpos de antígenos
mediante técnicas de ingeniería genética y se «humanizan» micóticos (p. ej., género H istoplasm a, género Blastom yces,
para uso terapéutico. coccidioidomicosis).
Las ventajas de los anticuerpos monoclonales radican en la En otras técnicas de inmunodifusión, el antígeno se puede
posibilidad de restringir su especificidad a un único epítopo separar por electroforesis en agar para después reaccionar
antigénico y de la preparación en cultivos tisulares a «escala con el anticuerpo (inm unoelectroforesis), se puede trans­
industrial». Una im portante desventaja de los anticuerpos ferir por medio de electroforesis a agar que contenga anti­
monoclonales es que muchas veces son demasiado específicos, cuerpos (electroforesis «en cohete») o bien el antígeno y el
de manera que es posible que un anticuerpo monoclonal es­ anticuerpo se pueden colocar en pocilios separados y permitir
pecífico para un epítopo de un antígeno -\árico de una cepa no que se desplacen electroforéticam ente el uno hacia el otro
sea capaz de detectar cepas diferentes de ese mismo virus. (contrainmunoelectroforesis).

© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos


30 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 6-1 Técnicas inm unológicas seleccionadas


Ejemplos clínicos
Inmunodifusión doble de Ouchterlony Detectar y comparar antígenos y anticuerpos Antígenos y anticuerpos fúngicos
Inmunofluorescencia Detección y localización de antígenos Antígenos víricos en biopsia (rabia, virus herpes
simple)
Enzimoinmunoanálisis (EIA) Igual que para la inmunofluorescencia Igual que para la inmunofluorescencia
Citometría de flujo con Análisis de la población de células positivas para antígenos Inmunofenotipificación
inmunofluorescencia
ELISA Cuantificación de antígenos y anticuerpos Antígenos víricos (rotavirus); anticuerpos víricos
(anti-VIH)
Western blot Detección de anticuerpos específicos de antígeno Confirmación de seropositividad anti-VIH
Radioinmunoanálisis (RIA) Igual que ELISA Igual que ELISA
Fijación del complemento Cuantificación del título de anticuerpos específicos Anticuerpos fúngicos, víricos
Inhibición de la hemaglutinación Título de anticuerpos antivíricos; serotipo de cepa vírica Seroconversión de la cepa actual de gripe;
identificación de gripe
Aglutinación con látex Cuantificación y detección de antígenos y anticuerpos Factor reumatoide; antígenos fúngicos; antígenos
estreptocócicos

ELISA, enzimoinmunoanálisis por adsorción; VIH, virus de la inmunodeficiencia humana.

Inm unodifuskin doble Electroforesis nen cohete»

Antígeno Gol qiio contiene anticuerpo


a+b_ ^ a
© ® O -
Anticuerpo®
(rente a: antí-a anba -f anti-b anti*a anti-b G ---------►

Idénticos No idóntícos Parcialmenle idéntíoos

Inm unoelectroloresis

Contrainm unoelectroforesis Surco quo conüerve anticuerpo

- 0 ------- 1 --------O +
Antígeno Anticuerpo

Inm unodifusión radial simple

Gei que contief>e anticuerpo

O O O

F ig u ra 6 -1 Análisis d e antígenos y anticuerpos por inm unoprecípitación. La precipitación de la proteína se produce en el punto de equivalencia,
en el cual el anticuerpo m ultivalente forma grandes complejos con el antígeno. A , Inmunodifusión doble d e O uchterlony. El antígeno y el anticuerpo
difunden desde pocilios, se encuentran y forman una línea de precipitación. Si se colocan antígenos idénticos en pocilios adyacentes, la concentración
de antígenos entre ellos se duplica y no se produce precipitación en esta región. Si se utilizan diferentes antígenos, se producen dos líneas diferentes de
precipitación. Si una muestra com parte antígeno pero no es idéntico, se producirá una única línea para la totalidad del antígeno. B, Contrainmunoelec-
troforesis. Esta técnica es similar al m étodo de Ouchterlony, pero el m ovim iento del antígeno es facilitado por electroforesis. C, Inmunodifusión radial
simple. Esta técnica implica la difusión del antígeno en un gel que contiene anticuerpos. Los anillos de precipitación indican reacción inmunitaria y el área
del anillo es proporcional a la concentración del antígeno. D, Electroforesis «en cohete». Los antígenos se separan por electroforesis en un gel de agar
que contiene anticuerpos. La longitud del «cohete» indica la concentración del antígeno. E, Inmunoelectroforesis. Se coloca el antígeno en un pocilio
y se separa por electroforesis. Después se coloca anticuerpo en un surco y se forman líneas de precipitación a medida q ue el antígeno y el anticuerpo
difunden el uno hacia el otro.

ÍNMUNOANÁLISIS PARA ANTÍGENOS una molécula fluorescente se une de forma covalente al anti­
cuerpo (p. ej., anticuerpo antivírico de conejo marcado con
ASOCIADOS A CÉLULAS (INMUNOHISTOLOGÍA) isotiocianato de fluoresceína [F IT C ]). En la inmunofluores*
cencia indirecta se utiliza un segundo anticuerpo fluorescente
Los antígenos existentes en la superficie o el interior de la
específico para el anticuerpo primario (p. ej., anticuerpo de
célula se pueden detectar por inmunofluorescencia o enzi*
cabra anticonejo marcado con F IT C ) con el fin de detectar el
moinmunoanálisis ( E I A ) . En la inmunofluorescencia directa
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO 31

Inmuoofiuorescerxáa
Anticuerpo antivírico

A Ar^tiinmunoglobulina

Enzima; iosfatasa aicallr^a.


E beta-^laclosidasa, peroxkjasa
del rábano picante
Sonda fluorescente (fluoresceina,
O rodamina. ftcoerítrina)
Sustrato convertido en cromófero.
precipitado o luz

Antígeno vírico

Inmunofluorescencia e inmunoanálisis enzimático para la localización de antígenos en células. El antígeno se puede detectar por análisis
F ig u ra 6 - 2
directo con anticuerpos antivíricos modificados de forma covalente con una enzima o una sonda fluorescente, o por análisis indirecto utilizando un
anticuerpo antivírico y una antiinm unoglobulina modificada quím icam ente. La enzima convierte el sustrato en un precipitado, cromóforo o luz.

anticuerpo antivírico primario y localizar el antígeno (figs. 6-2 Los datos obtenidos del citóm etro de flujo habitualmente
y 6-3). En el EIA, una enzima, como la peroxidasa del rábano se presentan en form a de histograma con la intensidad de
picante o la fosfatasa alcalina, se conjuga con el anticuerpo fluorescencia en el eje % y el número de células en el eje y,
y convierte un sustrato en un cromóforo si hay unión con el o en forma de un diagrama de puntos en el cual se compara
antígeno. Otra posibilidad es la localización de un anticuerpo más de un parámetro para cada célula. El citóm etro de flujo
modificado por la unión de una molécula de biotina (la vita­ puede efectu ar un análisis diferencial de los leucocitos y
mina) por su gran afinidad de unión a moléculas de avidina
o estreptavidina. Una m olécula fluorescente o una enzima
pueden modificar la molécula de avidina o estreptavidina con
el fin de facilitar su detección. Estas técnicas son útiles para el
análisis de muestras de biopsias tisulares, células sanguíneas
y células de cultivo.
El citóm etro de flujo se puede utilizar para analizar la
inmunofluorescencia de células en suspensión y es especial­
m ente útil para identificar y cuantificar linfocitos (inmu-
nofenotipificación). La citom etría de flujo emplea un láser
para excitar el anticuerpo fluorescente unido a la célula y
determinar el tamaño de ésta por medio de determinaciones
de la dispersión de luz. Las células fluyen a través del láser a
velocidades de más de 5 .0 0 0 células por segundo y el análisis
se efectúa por métodos electrónicos. El separador de célu­
las activadas por fluorescencia (SC A F ) es un citóm etro de
F ig u ra 6 -3 Localización por inmunofluorescencia de células nerviosas
flujo que también puede aislar subpoblaciones específicas de infectadas por el virus del herpes sim ple en un corte d e cerebro de un
células para su crecim iento en cultivo tisular basándose en paciente con encefalitis herpética. (De Emond RT, Rowíand HAK:/4 co lo r
su tamaño e inmunofluorescencia. atlas o fin fe c tio u s diseases, 2? ed., Londres, 1987, Wolfe.)
32 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

comparar poblaciones de linfocitos T C D 4 y C D 8 de m a­


nera simultánea (íig. 6 -4 ). La citometría de flujo también es
útil para analizar el crecim iento celular con posterioridad al
marcado fluorescente del ácido desoxirribonucleico [ADN)
y otras aplicaciones de la fluorescencia.

In m u n o a n á l i s i s p a r a a n t ic u e r p o s

Y ANTÍGENO S SO LU BLES
La técnica de enzimoinmunoanálisis por adsorción (ELISA )
utiliza un antígeno inmovilizado en una superficie, una bolita
o un filtro de plástico con el objeto de capturar y separar
un anticuerpo específico de otros anticuerpos presentes
en el suero de un pacien te (fig. 6 -5 ). El an ticuerpo del
paciente así fijado se detecta posteriorm ente por medio de
un anticuerpo antihumano unido por un enlace covalente a
una enzima (p. ej., peroxidasa del rábano picante, fosfatasa
alcalina, (3-galactosidasa). Se cu antifica por esp ectrofo -
tom etría en función de la intensidad del color producido
como respuesta a la conversión de un sustrato adecuado por
la enzima. Se puede determ inar la concentración real del
anticuerpo específico por comparación con la reactividad de
soluciones estándar de anticuerpos humanos. Las diversas
modalidades de los anáhsis de ELISA difieren en la forma en
la que capturan o detectan los anticuerpos o los antígenos.
Las pruebas de E L ISA tam bién se pueden aplicar a la
cuantiflcación de un antígeno soluble en una muestra de un
paciente. En estos anáhsis, el antígeno soluble es capturado
y concentrado por un anticuerpo inmovilizado y después
se d etecta con un anticuerpo diferente marcado con una
enzima. Un ejemplo de un anáhsis de ELISA que se utiliza
com únm ente es la prueba dom éstica de embarazo con la
hormona gonadotropina coriónica humana.
El Western blot es una variante del análisis de ELISA. Esta
técnica transfiere a un papel de filtro (p. ej., nitrocelulosa,
nailon) proteínas víricas separadas por electroforesis según
su peso molecular o su carga. Cuando se exponen al suero del
paciente, las proteínas inmovilizadas capturan los anticuer­
pos antivú-icos específicos y se visualizan mediante anticuerpos
antihumanos conjugados con enzimas. Esta técnica muestra
PluorM»ncia d» C04
las proteínas reconocidas por el suero del paciente. El Western
blot se usa para confirmar los resultados del análisis de ELISA F ig u ra 6 -4 Citometría de flujo. A, El citóm etro de flujo evalúa parám e­
en sujetos con sospecha de infección por el virus de la inmu- tros de las células individuales a m edida q ue las células fluyen a través
nodeficiencia humana (VIH ) [fig. 6-6; v. también fig. 47-7). d e un rayo láser a flujos de más de 5.000 por segundo. El tam añ o y la
granularidad de las células se determinan por la dispersión de la luz (D L),y
En el radioinmunoanálisis (RIA ) se emplean anticuerpos
la expresión del antígeno se evalúa por inmunofluorescencia (F), utilizando
o antígenos marcados con sondas radiactivas (p. ej., yodo 125) anticu erp os m arcados con d iferentes sondas fluorescentes. Los gráfi­
para cuantificar complejos antígeno-anticuerpo. El radioin­ cos B a D representan el análisis d e linfocitos I d e un paciente normal.
munoanálisis se puede efectuar como un análisis de captura, B, El análisis de dispersión de la luz se utilizó para definir los linfocitos (L¡),
como se describió anteriormente para el anáhsis de ELISA, los monocitos í'Mo^y los leucocitos polimorfonucleares (PMN) (neutrófilos).
o también como un análisis de com petencia. En un anáhsis C, Los linfocitos se analizaron para determ inar la expresión de CD3 para
identificar linfocitos T (presentados en un histograma). D, Se identificaron
de competencia, los anticuerpos presentes en el suero de un
linfocitos T C D 4 yC D 8 . Cada punto representa un linfocitoT. (Datos cortesía
paciente se cuantifican en función de su capacidad de competir del Dr. Tom Alexander, Akron, Chic.)
con un anticuerpo marcado radiactivamente en el laboratorio y
reemplazarlo en los complejos antígeno-anticuerpo. Los com­
plejos antígeno-anticuerpo se precipitan y se separan de los an­ del paciente reacciona con el antígeno del laboratorio y com ­
ticuerpos Ubres y se mide la radiactividad de las dos fracciones. plemento adicional. Los com plejos antígeno-anticuerpo se
La cantidad de anticuerpos del paciente se cuantifica posterior­ unen, activan y fijan al complemento (consumen). A conti­
mente a partir de curvas de referencia ya preparadas utilizando nuación se analiza el complemento residual por medio de la
cantidades conocidas del anticuerpo competidor. El ensayo lisis de eritrocitos recubiertos de anticuerpos. Los anticuerpos
radioalergoadsorbente es una variante del RIA de captura en medidos con este sistema generalmente se desarrollan en una
el cual se usan anticuerpos anti-IgE marcados radiactivamente fase ligeramente posterior de la evolución de una enfermedad
para detectar respuestas específicas a un alérgeno. que los determinados mediante otras técnicas.
La fijación del complemento representa una prueba sero- En los análisis de inhibición de anticuerpos se aprovecha
lógica estándar, aunque entraña diversas dificultades a nivel la especificidad de un anticuerpo para evitar una infección
técn ico (cuadro 6 -1 ). En esta prueba, la muestra de suero (neutralización) u otra actividad (inhibición de la hemaglu*
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO 33

A B Western Mol
Delección de anticuerpo Captura y deleociór de antígeno
_ Inmuno-
tiansie- _ _
1*Ac r Ac __^
© l _ 5 g ____ iS ____ Í S _ l ® jm L X z: jLjL rr U'*
+ M ussira / IS .®
SDS-PA6E
deNC
F ig u ra 6 - 6 Análisis d e W estern blot. Las proteínas se separan por elec-

®L III
, Enz.™ a,«,lnmunog.oíx.(nl„ *
troforesis con dodecil sulfato sódico en gel de poliacrilamida (5DS-PAGE),
se transfieren a un filtro de nitrocelulosa (NC) y se incuban con antisue­
ro específico del antígeno o el paciente (1°A c) y posteriormente con suero
antihum ano conjugado con enzimas (2°A c). La conversión enzimática del
sustrato identifica el antígeno.

fffí
A
® i _ 5?___ ¥
A A
^ I @ lJL
Y,
antígeno soluble. Los anticuerpos específicos de un virus
hacen que las partículas de látex recubiertas de antígenos
víricos se agrupen. A la inversa, las partículas de látex recu­
biertas de anticuerpos se emplean para detectar antígenos
+ Enzima antinmunoglobulmica
+ dusvaio « víricos solubles. En la hemaglutinación pasiva se utilizan como
indicadores eritrocitos modificados antigénicamente en lugar
de partículas de látex.

^ u s lr a lo ^
flif
S? S? S f
S e r o l o g ía
La respuesta inmunitaria humoral de un paciente proporciona
un historial de sus infecciones. La serología se emplea con el
fin de identificar el agente responsable de la infección, evaluar
la evolución de una infección o determinar la naturaleza de
la infección: infección primaria frente a reinfección, aguda
frente a crónica. Los datos serológicos de una infección se
obtienen a partir del tipo y el título de los anticuerpos y la
identidad de las dianas antigénicas. Estas pruebas se usan para
identificar virus y otros agentes difíciles de aislar y cultivar en
el laboratorio o que causan enfermedades de evolución más
lenta (cuadro 6 -2].
La concentración relativa de anticuerpos se considera
como un título. Un título es el inverso de la mayor dilución,
o menor concentración (p. ej., dilución de 1:64 = título de
64), del suero de un paciente que conserva actividad en uno
O O O de los análisis antes descritos. Se puede evaluar la cantidad

ooD de inmunoglobulinas reactivas IgM, IgG, IgA o IgE por medio


del uso de un segundo anticuerpo antihumano marcado que
sea específico para el isotipo de anticuerpo.
F ig u ra 6 - 5 Enzimoinmunoanálisis para la cuantificación de anticuerpos
o antígenos. A, Detección d e anticuerpos. 1, un antígeno vírico obtenido La serología se utiliza para determinar el estado de evolu­
d e céfulas infectadas, viriones o ingeniería genética se fija a la superficie; ción de una infección. La seroconversión tiene lugar cuando se
2, se agrega suero del pacientey se permite que se una al antígeno. Los anti­ producen anticuerpos como respuesta a una infección primaria.
cuerpos no fijados se eliminan a través de un lavado;^, se agrega anticuer­ El anticuerpo IgM específico, fa b r ic a d o du rante las prim eras
po antihumano conjugado con una enzima y se elimina lavando el anticuerpo
2 o 3 sem an as d e una infección p rim aria, constituye un buen
no fijado; 4 , se agrega un sustrato que se convierte (5) en cromóforo, pre­
cipitado o luz. B, Captura y detección del antígeno. 7, se fija a la superficie
un anticuerpo antivírico; 2, se agrega una muestra que contiene antígeno
y se elimina por lavado el antígeno no fijado; 3 , se agrega un segundo an­
ticuerpo antivírico para detectar el antígeno capturado; 4 , se agrega un
antígeno hum ano conjugado con una enzima, se efectúa un lavado y se Análisis serológicos
añade un sustrato (5) el cual se convierte (6) en cromóforo, precipitado o luz.
Fijación del complemento
Inhibición de la hemaglutinación*
tinación) para identificar la cepa del agente responsable de la Neutralización*
infección, habitualmente un virus, o bien para cuantificar las Inmunofluorescencia (directa e indirecta)
respuestas de anticuerpos a una cepa específica de un virus. Aglutinación con látex
Por ejemplo, la inhibición de la hemaglutinación se emplea Enzimoinmunoanálisis in situ (EIA)
para distinguir diferentes cepas de virus de la gripe A. Estos Enzimoinmunoanálisis por adsorción (ELISA)
análisis se tratan con más detalle en el capítulo 57. Radioinmunoanálisis (RIA)
La aglutinación con látex es una prueba rápida y té c ­
nicam ente simple para la detección de un anticuerpo o un T a r a la detección de anticuerpos o determinación del serotipo del virus.
34 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

PREGUNTAS
Virus diagnosticados por serología*
Describa el procedimiento o procedimientos diagnósticos
V iru s d e E p s te in -B a rr (moleculares o inmunológlcos) que serían más apropiados para
V iru s d e la ru b éo la cada una de las siguientes aplicaciones:
V iru s d e las h e p a titis A , B , C , D y E /. Determ inación de los pesos m oleculares aparentes de las
V iru s d e la in m u n o d e íic ie n cia h u m an a proteínas d el VIH
V iru s d e la le u c e m ia h u m an a d e lin fo c ito s T
2. Detección d e l virus d el papilom a hum ano 16 (un virus
A rb ov iru s (viru s d e la e n c e fa litis)
no replicante) en un fro tis de Papanlcolaou
’ Las pruebas serológicas tam bién se utilizan para determinar el estado 3. Detección d e l virus d el herpes sim ple (VHS) (un virus
inmunitario de una persona respecto a otros virus. replicante) en un frotis de Papanicolaou
4. Presencia de antígenos m icóticos de Histoplasma en el
suero de un paciente
in d ica d or de una infección p r im a ria reciente. Una posterior
5. Concentraciones de linfocitos T CD4 y CD8 en la sangre de
reinfección o recurrencia originan una respuesta de memoria
un paciente con VIH
(secundaria o de refuerzo). No obstante, los títulos de anti­
cuerpos pueden mantenerse elevados en aquellos pacientes 6. La presencia de anticuerpos y el títu lo de los anticuerpos
afectados por una infección que recurre con frecuencia (p. ej., antl-VIH
virus del herpes). La seroconversión o la reinfección vienen 7. Diferencias genéticas entre dos VHS (virus de ADN)
indicadas por el hallazgo de un aumento de a l menos cuatro veces 8. Diferencias genéticas entre dos virus paragripales (virus de
del título d e anticuerpos entre el suero obtenido en la fa s e aguda ácido ribonucleico)
de la enferm edad y el obtenido 2 o 3 sem anas m ás tarde durante
la fa se d e convalecencia. Una dilución seriada doble no distingue 9. Cantidad de antígeno de rotavirus en heces
entre las muestras con 512 y 1.023 unidades de anticuerpo, 10. Detección de estreptococos d el grupo A y su diferenciación
ya que ambas reaccionarían en una dilución de 512, pero no d e otros grupos de estreptococos
en una de 1.024, y ambos resultados serían considerados co­
Las respuestas a estas p re g u n ta s e stán disp o n ib les en
mo títulos de 512. Por otra parte, unas muestras con 1.020 y
1.030 unidades no son significativamente diferentes, pero serían w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s

consideradas como títulos de 512 y 1.024, respectivamente.


La serología también se puede utilizar para determinar el BIBLIOGRAFÍA
estadio de una infección más lenta o crónica (p. ej., hepati­
Forbes BA, Sahm DF, W eissfeld A S: B a ile y a n d Scott's d ia g n o s tic
tis B o mononucleosis infecciosa causada por el virus de Eps-
m icrobiology, ed 12, S t Louis, 2 0 0 7 , Mosby.
tein-Barr) en función de la presencia de anticuerpos frente a Murray ?R: A S M p o ck et gu ide to clin ic a l m icrobiology, e d 3 , Washington,
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accesibles al sistema inmunitario (p. ej., en el virión, en la D C , 20 0 7 , American Society for Microbiology Press.
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responsable de la infección o la respuesta inmunitaria celular Washington, D C , 20 0 0 , American Society for Microbiology Press.
han Usado las células, se detectan anticuerpos dirigidos contra Strauss JM , Strauss E G : Viruses a n d hu m an d isease, ed 2, San Diego,
las proteínas intracelulares. 2 0 0 7 , Academic.
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO

RESPUESTAS 6. Se utiliza ELISA para detectar la presencia y el título de


anticuerpos anti-VIH como técnica de cribado para el aporte de
1. Son adecuados la electroforesis en gel de sangre. El Western blot con el suero del paciente se utiliza como
SDS-poliacrilamida para separar las proteínas, y el Western blot método cualitativo para confirmar los resultados del método de
para identificar las proteínas del VIH. ELISA.
2. Se pueden utilizar métodos para la detección del 7. Se puede utilizar el polimorfismo de longitud de
genonna, como hibridación in situ del frotis de Papanicolaou fragmentos de restricción o la PCR para detectar diferencias
o reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de las células genéticas entre cepas o tipos de VHS.
obtenidas durante el procedimiento, porque las proteínas del 8. Se puede utilizar PCR con transcriptasa inversa para
virus serían indetectables. distinguir dos virus paragripales.
3. Se pueden ver efectos citopatológicos, como sincitios 9. El rotavirus en las heces se puede cuantificar mediante
y cuerpos de inclusión de Cow/dry de tipo A, en los frotis de ELISA. La microscopía electrónica inmunitaria es un método
Papanicolaou. Pueden utilizarse métodos para la detección del cualitativo.
genoma, como hibridación in situ del frotis de Papanicolaou o PCR 10.Puede detectarse Streptococcus del grupo A mediante
del ADN obtenido de las células, o métodos inmunológicos para técnicas de ELISA, entre ellas métodos rápidos (similares a
detectar los antígenos del virus, para detectar la presencia del virus. las pruebas de embarazo de venta sin receta) para detectar
4. Se puede utilizar un método de difusión de anticuerpos estreptolisina A y S. Se pueden utilizar técnicas más sofisticadas,
de Ouchterlony o un método de ELISA para detectar antígenos como electroforesis de los fragmentos de restricción del
fúngicos. cromosoma en gel con campo pulsado y PCR, para distinguir
5. Probablemente la citometría de flujo con diferentes cepas. También se dispone de tecnología para
inmunofluorescencia sea el mejor método para identificar y secuenciar porciones del genoma de las diferentes cepas, para
cuantificar los linfocitos T CD4 y CD8. la comparación.
SECCIÓN 3

Conceptos básicos
de la respuesta
inmunitaría
7 Elementos de las respuestas
protectoras del hospedador

ivimos en un mundo microbiano y nuestros cuerpos están Las quimiocinas son proteínas pequeñas (aproximadamente
V expuestos constantemente a las bacterias, los hongos, los
parásitos y los virus. Las defensas de nuestros cuerpos contra
8.0 0 0 Da) que atraen a las células específicas a los sitios de
inflamación y a otros sitios importantes desde el punto de vis­
este ataque son similares a una defensa militar. Los mecanis­ ta inmunitario. Los neutrófilos, los basófilos, los linfocitos
mos iniciales de defensa son las barreras, como la piel, el citolíticos naturales (espontáneos), los monocitos y los linfo­
ácido y la bilis del tubo digestivo y el moco que inactivan y citos T expresan receptores y pueden activarse mediante qui­
miocinas específicas. Las quimiocinas y otras proteínas (p. ej.,
evitan la entrada de sustancias extrañas. Si estas barreras es­
los productos C 3a y C 5a de la cascada del com plem ento)
tán deterioradas o el microbio consigue entrar de otra forma,
son factores quimiotácticos que establecen una vía química
la milicia local de las respuestas innatas tiene que congre­
para atraer células fagocíticas e inflamatorias al sitio de la
garse rápidamente para el ataque y evitar la expansión de la
infección. Los desencadenantes que estimulan la producción
invasión. Al principio se lanzan moléculas tóxicas (defensinas de estas moléculas y las consecuencias de las interacciones
y otros péptidos, el complemento) contras los microbios y con sus receptores en las células específicas determinan la
después se ingieren y destruyen (neutrófilos y macrófagos) naturaleza de las respuestas innata e inmunitaria.
mientras otras moléculas facilitan su ingestión haciéndolas
adherentes (complemento, lectinas y anticuerpos). Una vez
activadas, estas respuestas envían una alarma (complemento, Célu la s d e l a r e s p u e s t a in m u n it a r ia
citocinas y quimiocinas] a otras células y abren el sistema En las respuestas inmunitarias intervienen células específicas
vascular (complemento, citocinas) para proporcionar acceso con funciones definidas. Las características de las células más
a la zona. Por último, si estos pasos no son eficaces, las res­ importantes del sistema inmunitario y su aspecto se muestran
puestas innatas activan una campaña im portante dirigida en la figura 7-1 y en las tablas 7-2 y 7-3.
específicamente contra el invasor mediante las respuestas in* Los leucocitos pueden distinguirse según su 1) forma,
munitarias específicas del antígeno (linfocitos B, anticuerpo 2) tinción histológica, 3) funciones inmunitarias y 4) marcado­
y linfocitos T ) al coste que sea preciso (inmunopatogenia). res intracelulares y de la superficie celular. Los linfocitos B
D e igual forma, el conocim iento de las características del y T pueden distinguirse porque expresan receptores para
enemigo (antígenos) mediante la inmunización hace posible el antígeno en su superficie, la inmunoglobulina en los linfoci­
que el cuerpo organice una respuestas más rápida y eficaz tos B y el receptor del linfocito T en los linfocitos T. Se emplean
[activación de linfocitos B y T mem oria) contra el nuevo anticuerpos monoclonales para distinguir subgrupos de los di­
ataque. ferentes tipos de células según sus marcadores de la superficie
Los diferentes elem entos del sistema inmunitario inte- celular. Estos marcadores se han definido dentro de grupos
raccionan y se com unican empleando m oléculas solubles de diferenciación y los marcadores indicados por números
e interacciones intercelulares directas. Estas interacciones «CD » (grupo de diferenciación) (tabla 7-4). Además, todas
proporcionan los mecanismos para activar y controlar las res­ las células nucleadas expresan antígenos del M H C de la
puestas protectoras. Por desgracia, las respuestas protectoras clase I (M H C I) [seres humanos: HLA-A, HLA-B, H LA-C).
a algunas sustancias infecciosas son insuficientes; en otros Una clase especial de células que son las células presen­
casos, la respuesta al ataque es excesiva. En ambos casos, se tadoras de antígenos (A P C , del inglés an tigen -presen ting
produce la enfermedad. cells) expresan los antígenos del complejo principal de his*
tocompatibilidad (M H C , del inglés m a jor histocom patibility
com plex] de la clase II (H LA-DR, HLA-DP, H LA -D Q ). Las
A c t iv a d o r e s s o l u b l e s y e s t im u l a d o r e s células que presentan péptidos antigénicos a los linfocitos T
son las células dendríticas, las células de la familia de los
DE LAS f u n c io n e s INNATAS E INMUNITARIAS macrófagos, los linfocitos B y un número limitado de otros
Las células innatas e inmunitarias se comunican mediante tipos de células.
interacciones de receptores específicos de la superficie ce­
lular con moléculas solubles, entre ellas los productos de Diferenciación celular hematopoyética
escisión del complem ento, las citocinas, los interferones y La diferenciación de una célula progenitora común, deno­
las quimiocinas. Las citocinas son proteínas parecidas a las minada célula progenitora pluripotente, produce todas las
hormonas que estimulan y regulan las células para activar células sanguíneas. La diferenciación de estas células empieza
y regular las respuestas innata e inmunitaria (tabla 7-1 y durante el desarrollo del feto y continúa a lo largo de toda
cuadro 7-1 ). Los interferones son proteínas producidas en la vida. La célula progenitora pluripotente se diferencia en
respuesta a infecciones víricas y de otro tipo (interferón a e células progenitoras [denominadas algunas veces unidades
interferón p) o en la activación de la respuesta inmunitaria formadoras de colonias) para los diferentes linajes de células
(interferón 7 ); promueven las respuestas antivíricas y anti- sanguíneas, entre ellos los linajes linfocítico (linfocitos T y
tumorales y estimulan las respuestas inmunitarias (v. cap. 8). linfocitos B ), m ielocítico, eritrocítico y megacarioblástico

© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos


M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Tabla 7-1 CItocinas y qulm loclnas


Objetivo principal
Respuestas innatas y de fase aguda
IFN-a, IFN-p Leucocitos, pDC, fibroblastos Células infectadas por virus, Inducción del estado antivírico; activación
y otras células células tumorales, de los linfocitos NK, aumento de la
linfocitos NK inmunidad celular
IL-1a,IL-ip Macrófagos, DC, fibroblastos, LinfocitosT, linfocitos B, PMN, Muchas acciones: promoción de las
células epiteliales, células tejido, sistema nervioso respuestas inflamatorias y de fase
endoteliales central, hígado, etc. aguda, fiebre, activación de linfocitos T
y macrófagos
TNF-a (caquectina) Macrófagos, linfocitos T, Similar a IL-1 y además antitumoral,
linfocitos NK, células deterioro progresivo {caquexia, pérdida
epiteliales y muchas otras de peso), septicemia, activación
endotelial
DC, macrófagos, linfocitosT LinfocitosT y linfocitos B, Estimulación de las respuestas
y linfocitos B, fibroblastos, hepatocitos inflamatorias y de fase aguda,
células epiteliales, células crecimiento y desarrollo de linfocitos T
endoteliales y linfocitos B
IL-12,IL-23 DC, macrófago Linfocitos NK, linfocitos THl, Activación de respuestas inflamatorias
T H l7, CD4 y mediadas por los linfocitos T,
producción de IFN-7
Crecimiento y diferenciación
Factores estimuladores de colonias Linfocitos T, células estromales Células progenitoras Crecimiento y diferenciación de tipos
(p. ej„ GM-CSF) de célula específicos, hematopoyesis
IL-3 Linfocitos T CD4, queratinocitos Células progenitoras Hematopoyesis
IL-7 Médula ósea, estroma Células precursoras y Crecimiento de los prelinfocitos B,
células progenitoras timocitos, linfocitos T y linfocitos
citotóxicos
Respuestas TH1 yTH17
IL-2 Linfocitos TCD4 (THO, TH1) LinfocitosT, linfocitos B, Crecimiento de linfocitos T y linfocitos B,
linfocitos NK activación de NK
IFN-7 LinfocitosTHl CD4, linfocitos NK Macrófagos*, CD, linfocitos T, Activación del macrófago, promoción
linfocitos B del cambio de clase a IgG, inflamación
y respuestas THl pero inhibición de
respuestas TH2
TNF-p Linfocitos TH1 CD4 Linfotoxina: muerte tumoral, activación de
PMN, activación endotelial
IL-17 Linfocitos THl 7 CD4 Células epiteliales, endoteliales Activación del tejido para promover la
y fibroblásticas, neutrófilos inflamación, incluso en presencia de
TGF-p
Respuestas TH2
IL-4 Linfocitos TCD4 (THO, TH2) Linfocitos B y linfocitos T Crecimiento de linfocitos T y linfocitos B;
producción de IgG, IgA, IgE; respuestas
TH2
Linfocitos TH2 CD4 Linfocitos B, eosinófilos Crecimiento y diferenciación de
linfocitos B, producción de IgG, IgA e
IgE, producción de eosinófilos,
respuestas alérgicas
Linfocitos TH2 CD4 Linfocitos B, linfocitos THl CD4 Crecimiento de linfocitos B, inhibición de
y linfocitos Treg la respuesta THl
Respuesta reguladora
TGF-P Linfocitos Treg CD4 Linfocitos B, linfocitos T, Inmunosupresión de linfocitos B,
macrófagos linfocitosT, linfocitos NK y macrófagos;
promoción de tolerancia oral, curación
de heridas, producción de IgA
Quimiocinas
Quimiocinas a: quimiocinas CXC; Muchas células Neutrófilos, linfocitos T, Quimiotaxis, activación
dos cisteínas separadas por un macrófagos
aminoácido (IL-8; IP-10; GRO-a,
GR0-p,GR0-7)
Quimiocinas p: quimiocinas CC; Muchas células LinfocitosT, macrófagos, Quimiotaxis, activación
dos cisteínas adyacentes (MCP-1; basófilos
MIP-a;MIP-p; RANTES)

CD, grupo de diferenciación; ZXT, células dendríticas;GM-CSf,factorestimuladorde colonias de granulocitosymacrófagos;G/?0 -7,oncogén 7 relacionado con el crecimiento;
IFN-a, /3, y, interferón a, p, 7; Ig, inmunoglobulina; IL, interleucina; IP, proteína del interferón a; MCP, proteína quimiotáaica del monocito; MIP, proteína inflamatoria
del macrófago; W/C, linfocitos citolíticos (espontáneos); pDC, células dendríticas plasmacitoides;PM/V, leucocito polimorfonucleariff/^WTFS, citocina expresada y secretada
por el linfocito T normal en función de su grado de activación; TGF-^, factor de crecimiento transformador P; TH, (linfocito) T cooperador; TNF-a, factor de necrosis
tumoral a.
*Se aplica a una o más células del linaje monocito macrofágico.
ELEM ENTO S DE LAS RESPUESTA S PROTECTORAS DEL H O SPEDADO R

(origen de las plaquetas) (v. fig. 7 -1). Las células progenitoras


residen principalm ente en la médula ósea, pero tam bién
Principales células productoras de citocinas pueden aislarse de la sangre fetal en los cordones umbilicales
y de forma muy infrecuente en la sangre de los adultos. La di­
Innatas (respuestas de fase aguda)
ferenciación de las células progenitoras en células sanguíneas
Células dendríticas, macrófagos, otras: IL-1, TNF-a, IL-6, funcionales está desencadenada por interacciones específicas
IL-12, IL-18, IL-23, GM-CSF, quimiocinas, IFN-a, en la superficie celular con células estromales de la médula y
IFN-p citocinas específicas producidas por éstas y otras células. El
Inm unitarlas: linfocitos T {CD4 y CD8) tim o y el «equivalente bursal» en la médula ósea promueven
Linfocitos T H l: IL-2, IL-3, GM-CSF, IFN-7 , TNF-a, el desarrollo de los linfocitos T y los linfocitos B, respectiva­
TNF-p mente. Los linfocitos T cooperadores, las células dendríticas,
los macrófagos y otras células liberan las citocinas específicas
Linfocitos TH2: IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-3, IL-9, IL-13,
que promueven el crecim iento de las células hematopoyéti-
GM-CSF, TNF-a
cas y su diferenciación terminal, en respuesta a las infeccio­
Linfocitos T H l 7: IL-17, TNF-a
nes y en la activación.
Linfocitos Treg: TGF-(3 e IL-10 La médula ósea y el tim o se consideran órganos linfáticos
primarios (fig. 7-2). Estos sitios de diferenciación linfocítica
GM -CSF, factor estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos;
IF N -a , y, interferón a , (3, 7 ; IL , interleucina; TGF-/3, factor de inicial son esenciales para el desarrollo del sistem a inmu-
crecim iento transformador (3; T N F -a, factor de necrosis tumoral a . nitario. El tim o es esencial durante el nacim iento para el
desarrollo de los linfocitos T, pero con la edad se reduce y a

Célula progenitora
autorrefx>vable

g CFUentroides Megacaríocito CFU de basófilos CFU de eosinófilos CFU de granutocítos y monocrtos

Célula derdrít>ca

B
Eritroatos Plaquetas Basófilos Eosnótilos NeutróMos Monodtos Macrótagos
F ig u ra 7-1 Morfología y linaje de las células implicadas en la respuesta inmunitaria. Las células progenitoras plurípotentes y las unidades formadoras
d e colonias (CFU) son células de vida larga capaces de reabastecer más células diferenciadas funcionales y diferenciadas en fase terminal. (De Abbas K y
cois.: C e llu la ra n d m o le c u la r im m u n o lo g y , 5.® ed., Filadelfia, 2003, W B Saunders.)
• 40 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Tabla 7>2 Células de la respuesta inm unitaria


Características y funciones
Células línfocíticas innatas
Linfocitos NK Linfocitos granulares grandes
Marcadores; receptores para el Fe de anticuerpos, KIR
M atan células decoradas con anticuerpos e infectadas por virus o células tum orales (sin restricción
por elIVIHQ
Células fagocíticas
Neutrófilos Granulocitos con una vida corta, núcleo muítilobulado y gránulos, formas en banda segmentadas
(más inmaduros)
Fagocitan y m atan bacterias (leucocitos polimorfonucleares)
Núcleo bilobulado, citoplasma muy granulado
Marcador: tinción con eosina
Implicados en la defensa frente a los parásitos y la respuesta alérgica
Células fagocíticas presentadoras Marcador: células que expresan el MHC de la clase II
d e an tíg en o s (APC) Procesa y presenta el antígeno a los linfocitos T CD4
Monocitos* Núcleo con forma de herradura, lisosomas, gránulos
Precursores d e l lin a je d e l m acrófago y células dendríticas,\\be.'ta,c\ón decitocinas
Células dendríticas inmaduras Sangre y tejido
Citocinas en respuesta a la infección, procesan el antígeno
Células dendríticas* Ganglios linfáticos, tejido
Las APC más potentes, inician y determ inan la n aturaleza de la respuesta de los linfocitos T
Células de Langerhans* Presencia en la piel
Como las células predendríticas
Macrófagos* Posible permanencia en el tejido, el bazo, los ganglios linfáticos y otros órganos; activados por IFN-7
yTNF
Marcadores; células granulares grandes; receptores para Fe y C3b
Las células activadas inician la respuesta inflamatoria y de fase aguda; las células activadas son
antibacterlanas, APC
Células de la microglía* Presencia en SNC y encéfalo
Producen citocinas
Células de Kupffer* Presencia en el hígado
Filtran partículas de la sangre (p. ej., virus)
Células que responden al antígeno
Linfocitos T (todos) Maduran en el timo; núcleo grande, citoplasma pequeño
Marcadores; CD2, CD3, receptor del linfocito T (TCR)
LinfocitosTTCRa/p CD4 Linfocitos cooperadores/HRT; activación mediante las APC a través de la presentación del antígeno
en MHC de la clase II
Producen citocinas; estimulan el crecimiento de linfocitos T y linfocitos B; promueven la diferenciación
de linfocitos B {cambio de clase, producción de anticuerpos)
Subtipo TH1 (IL-2, IFN-7 , producción de LT): promueve defensas mediadas por anticuerpos y celulares
(locales), HRT, linfocitos citolíticos T y anticuerpos
Subtipo TH2 (producción de IL-4, IL-5, IL-6, IL-10): promueve respuestas humorales (sistémicas)
Subtipo TH 17 (IL-17, TNF-a, IL-6): estimula la inflamación en presencia de TGF-p
Linfocitos T reguladores (Treg) (TGF-p, IL-10): controlan la activación de linfocitos T CD4 y CD8,
importantes para la tolerancia inmunitaria
Linfocitos citolíticosTTCR a/p CD8 Reconocimiento del antígeno presentado por MHC de la clase I
Matan células infectadas por virus, tumorales y ajenas (trasplantadas); secretan citocinas TH1
Linfocitos TT C R a/p CD8 Reconocimiento del antígeno presentado por MHC de la clase I
(linfocitos supresores) Supresión de la respuesta de ios linfocitos T y ios linfocitos B
Linfocitos T T C R 7 /S Marcadores; CD2, CD3, receptores del linfocito T y S
Detector temprano de algunas infecciones bacterianas en tejidos y sangre
Linfocitos T N K Expresan receptores de linfocitos NK, TCR y CD3
Respuesta rápida a la infección, liberación de citocinas
Células que producen anticuerpos
Linfocitos B Maduran en la médula ósea (el equivalente de la bolsa), placas de Peyer
Núcleo grande, citoplasma pequeño; activación mediante antígenos y factores de linfocitos T
Marcadores; anticuerpo de superficie, antígenos del M HC de la clase II
Producen anticuerpos y presentan antígenos
Células plasmáticas Núcleo pequeño, citoplasma grande
Diferenciación terminal, fábricas de anticuerpos
Otras células
Basófilos/mastocitos Granulocíticos
Marcador: receptores para Fe de IgE
Liberan histamina, proporcionan la respuesta alérgica, son antiparasitarios

HRT, hipersensibilidad de tipo retardado; IFN-y, interferón 7; Ig, inmunoglobulina;//., interleucina;/<7/?, receptores inmunoglobulínicos de linfocito citolítico;¿7', linfotoxina;
MHC, complejo principal de histocompatibilidad; NK, linfocito citolítico espontáneo; SNC, sistema nervioso central; TCR, receptor del linfocito T; TGF-^, factor de
crecimiento transformador P; TH, (linfocito) T cooperador; TNF-a, factor de necrosis tumoral a.
*Linaje monocito/macrófago.
ELEM ENTO S DE LAS RESPUESTA S PROTECTORAS DEL H O SPEDADO R

Tabla 7-3 Cifras norm ales de células sanguíneas en estos tejidos (p. ej., «glándulas tumefactas»]. Las células
Núm ero m ed io por m icrolitro Lím ites normales de los órganos linfáticos primarios y secundarios expresan
Leucocitos 7.400 4.500-11.000 moléculas de adhesión de la superficie celular (adhesinas)
Neutrófilos 4.400 1.800-7.700 que interactúan con los receptores de migración dirigida
Eosinófilos 200 0-450
(m oléculas de adhesión celular) expresados en los linfoci­
tos B y los linfocitos T.
Basófilos 40 0-200
El bazo y los ganglios linfáticos son órganos encapsula-
Linfocitcs 2.500 1.000-4.800
dos en los que residen los macrófagos, los linfocitos B y los
Monocitcs 300 0-800
linfocitos T en zonas definidas. Su localización facilita las
De Abbas AK, Lichtman AH, Pober JS: Cellular and molecular im m unology, 4.^ ed., interacciones que promueven las respuestas inmunitarias
Filadelfia, 2000, W B Saunders. frente al antígeno (fig. 7-3).
Los ganglios linfáticos son órganos con forma de riñón,
lo largo de la vida otros tejidos pueden adoptar su función si con un diám etro de 2 a 10 m m , que filtran el líquido que
este se elimina. Los órganos linfáticos secundarios son los viene de los espacios intercelulares al sistema linfático, casi
ganglios linfáticos, el bazo y el tejido linfático asociado a como plantas depuradoras. El ganglio linfático se construye
mucosas (M ALT); este último incluye además el tejido linfá­ para optimizar el encuentro de la respuestas innata [células
tico asociado al intestino (GALT) (p. ej., las placas de Peyer) dendríticas y macrófagos) e inmunitaria de los linfocitos (B y T)
y el tejido linfático asociado al bronquio (BALT] (p. ej., las con el fin de iniciar y expandir las respuestas inm unita­
amígdalas, el apéndice). Estos sitios es donde residen las célu­ rias específicas. Un ganglio linfático consta de las tres capas
las dendríticas, los linfocitos B y los linfocitos T y responden siguientes:
a los ataques antigénicos. La proliferación de los linfocitos 1. La corteza, la capa extema que contiene principalmente
en respuesta al ataque infeccioso provoca una tumefacción linfocitos B, células dendríticas foliculares y macrófagos

Tabla 7-4 Selección de m arcadores CD im portantes


M arcadores CD identidad y función Céiuia
CD Id Similar al MHC 1, presentación de antígeno DC, macrófago
no peptídico
CD2 (LFA-3R) Receptor de eritrocitos T
CD3 Subunidad del TCR (-y, S, e, i , t |); activación T
CD4 Receptor del MHC de la clase II Subgrupo de linfocitos T, monocitos, algunas DC
CD8 Receptor del MHC de la clase 1 Subgrupo de linfocitos T
CD11b(CR3) Receptor para el C3b del complemento {cadena a) NK, células mielocíticas
CD14 Receptor para LPS Células mielocíticas (monocitos, macrófagos)
CD16(F c-7 RUI) Fagocitosis y CCDA Marcador de los linfocitos NK, macrófagos, neutrófilos
CD21 (CR2) Receptor del C3d del complemento, receptor para VEB, Linfocitos B
activación del linfocito B
CD25 Receptor para IL-2 (cadena a), marcador temprano Linfocitos T y linfocitos B activados, linfocitos T reguladores
de activación, marcador de células reguladoras
CD28 Receptor para coestimulación B7: activación Linfocitos T
CD40 Estimulación de linfocitos B, DC y macrófagos Linfocito B, macrófago
CD40L Ligando de CD40 Linfocito T
CD45RO Isoforma (en células memoria) Linfocito T, linfocito B
CD56 (NKH1) Molécula de adhesión Linfocito NK
CD69 Marcador de la activación celular Linfocitos T, linfocitos B, linfocitos NK activados y macrófagos
CD80 (B7-1) Coestimulación de linfocitos T DC, macrófagos, linfocito B
CD86 (B7-2) Coestimulación de linfocitos T DC, macrófagos, linfocito B
CD95 (Fas) Inductor de apoptosis Muchas células
CD152 (CTLA-4) Receptor para B7; tolerancia Linfocito T
CD178 (FasL) Ligando de Fas: inductor de apoptosis Linfocitos NK, linfocitos Tcitotóxicos
Moléculas de adhesión
C D IIa LFA-1 (cadena a)
CD29 VLA (cadena p)
VLA-1,VLA-2,VLA-3 Integrinasa Linfocitos T
VLA-4 Receptor de migración dirigida, integrina a 4 Linfocito T, linfocito B, monocito
CD50 ICAM-3 Linfocitos y leucocitos
CD54 ICAM-1
CD58 LFA-3

APC, células presentadoras de antígenos; CCDA, citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos; CD. grupo de diferenciación; CRA-4, proteína asociada al linfocito T
citotóxico 4; DC, célula dendrítica; ICAM-1,3, moléculas de adhesión intercelular 1 y 3; Ig, inmunoglobulina; IL, interleucina;¿M-7, J/?, antígenos asociados a la función
del leucocito 1 y 3R; LP5, lipopolisacárido; MHC, complejo principal de histocompatibilidad; NK, citolítico espontáneo; TCR, receptor del linfocito T para el antígeno;
VEB, virus de Epstein-Barr; VLA, activación muy tardía (antígeno).
Modificada de Male D y cois.: Advanced Im m unology, 3.^ ed., St. Louis, 1996, Mosby.
42 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Of9anoftimttiÍÓM~ Organos y («jKlos linfáticos


secúndanos

Anillo de Waldeyer (ganglios


linfáticos. OTtfQdaiaB y adenoictes)

TejÑlo línlátx» asociado


a tos bronquios
"Ganglios linfáticos

-Médula ósea

-Bazo

-jpiacas de Rayé r|

-Ganglios linfáticos
mesenléricos
'‘Lámina propia Trabécula

F ig u ra 7 -3 O rganización del ganglio linfático. Debajo d e la cápsula de


colágeno está el seno subcapsular, que está revestido de células fagocíti-
Ganglios linfáticos cas. Los linfocitos y los antígenos de los espacios tisulares circundantes o
de los ganglios adyacentes pasan al interior del seno mediante el sistema
linfático aferente. La corteza contiene linfocitos B agrupados en folículos
F ig u ra 7 -2 Órganos del sistema inmunítario. El tim o y la médula ósea
primarios y linfocitos B estimulados en los folículos secundarios (centros
son órganos linfáticos prim arios. En ellos m aduran los linfocitos T y los
germinales). La paracorteza contiene principalmente linfocitos T y células
linfocltos B, respectivam en te. Las respuestas inm unitarias celulares y
d en dríticas (células p resentadoras d e an tígen o s). Tod os los ganglios
humorales se desarrollan en los órganos linfáticos secundarios (periféricos)
linfáticos tienen sus aportes arteriales y venosos. Los linfocitos entran en
y en los tejidos; en estos órganos se generan las células efectoras y me­
el ganglio desde la circulación a través de vénulas d e endotelio alto muy
moria. El bazo responde predom inantem ente a los antígenos vehiculados
especializadas existentes en la paracorteza. La médula contiene linfoci­
por la sangre. Los ganglios linfáticos m ontan respuestas inm unitarias
tos T y linfocitos B, así com o la m ayoría de las células plasmáticas del gan­
frente a antígenos del líquido intercelular y en la linfa, que se absorben a
glio linfático organizadas en cordones de tejido linfático. Los linfocitos pue­
través de la piel (ganglios superficiales) o de las visceras internas (ganglios
den abandonar el ganglio sólo a través de los vasos linfáticos eferentes.
profundos). Las amígdalas, las placas de Peyer y otros tejidos linfáticos
(De Roitt I y cois,: Im m u n o lo g y , A } ed., St. Louis, 1996, Mosby.)
asociados a las m ucosas (re c u a d ro s azules) responden a los antígenos
que han atravesado las barreras mucosas. (De Roitt I y cois.: Im m u n o lo g y,
4.® ed-, S t Louis, 1996, Mosby.) número de linfocitos B memoria y maduros (del 50% al 90%
de los linfocitos] que emplean sus anticuerpos para detectar
organizados en estructuras llamadas folícu los y, si están microorganism os patógenos específicos y, con las células
activados, centros germinales dendríticas y los linfocitos T, pueden iniciar las respuestas
2. La paracorteza, que contiene células dendríticas que inmunitarias. Una infección o una respuesta a la infección
llevan los antígenos desde los tejidos y los presentan a pueden provocar la tumefacción de las amígdalas.
los linfocitos T para iniciar las respuestas inmunitarias
3. La médula, que contiene linfocitos B, linfocitos T y Leucocitos polimorfonucleares
células plasmáticas que producen los anticuerpos, así Los leucocitos polimorfonucleares (neutrófilos) son células
como canales para el líquido linfático con una vida corta que constituyen del 50% al 70% de los
El bazo es un órgano grande que actúa como un ganglio leucocitos circulantes (v. fig. 7-1) y son una defensa fagocíti-
linfático y tam bién filtra antígenos, bacterias encapsuladas ca elemental contra la infección bacteriana y el componente
y virus de la sangre y elim ina las células sanguíneas y las principal de la respuesta inflamatoria. Los neutrófilos tienen
plaquetas envejecidas (fig. 7-4). El bazo está formado por dos un diámetro de 9 a 14 )xm, carecen de mitocondrias, tienen un
tipos de tejido, la pulpa blanca y la pulpa roja. La pulpa blanca citoplasm a granulado en el que los gránulos se tiñen con
consiste en arteriolas rodeadas por células linfáticas (vainas tinciones ácidas y básicas y tienen un núcleo multilobulado.
linfáticas periarteriales) en las que los linfocitos T rodean a Los neutrófilos dejan la sangre y se concentran en el sitio
la arteriola central. Los linfocitos B se organizan en folículos de la infección en respuesta a los factores quim iotácticos.
primarios sin estimular o secundarios estimulados que tienen Durante una infección aumenta el número de neutrófilos en la
un centro germinal. El centro germinal contiene células m e­ sangre y se incorporan formas precursoras. Estas precursoras
moria, macrófagos y células dendríticas foliculares. La pulpa se denominan cayados, en contraposición a los neutrófilos
roja es una zona de almacenamiento de células sanguíneas y segmentados y diferenciados de forma terminal. Este cambio
el sitio de recambio de plaquetas y eritrocitos envejecidos. en los neutrófilos en el hemograma se denomina desviación
El M A LT contiene conjuntos m enos estructurados de a la iz q u ierd a con increm ento d e los ca y a d o s respecto a los
células linfáticas (fig. 7-5). Por ejemplo, las placas de Peyer seg m en tad o s. Los neutrófilos ingieren bacterias m ediante
a lo largo de la pared intestinal tienen células especiales en fagocitosis y exponen las bacterias a sustancias antibacterianas
el epitelio (células M) que llevan los antígenos a los linfoci­ y enzimas presentes en los gránulos primarios (azurófilos) y
tos que están en regiones definidas (T [interfoliculares] y B secundarios (específicos). Los gránulos azurófilos son reser-
[germinales]}. Aunque se ha creído que son prescindibles, vorios para enzimas como la mieloperoxidasa, la glucuronida-
las am ígdalas son una parte im portante del MALT. Estos sa p, la elastasa y la catepsina G . Los gránulos específicos sirven
órganos linfoepiteliales tom an muestras de los microbios de reservorios para la lisozima y la lactoferrina. Los neu­
en las zonas oral y nasal. Las amígdalas contienen un gran trófilos muertos son el componente principal del pus.
ELEM ENTO S DE LAS RESPUESTA S PROTECTORAS DEL HO SPEDA DO R 43

Placas de Peyer. piernones


Cenlrogem iinal Cordones Lámina propia
^ espíemeos y otras zonas mucosas
B. T y macFúlago
(de pulpa roja) Célula M
Cápsula IgA IgA IgA
Antígeno
Seno v©fX)SO

Zona marginal

Ganglio
knfático
teácioo|4 |Tonw«8wnoiin»^

O ©

F ig u ra 7 -5 Las células linfáticas estim uladas con un a n tígen o en las


placas de P eyer (o los pulm ones u otras zonas d e la m ucosa) m igran a
Artería central través de los ganglios linfáticos regionales y el conducto torácico hacia
el torrente sanguíneo, y después a la lámina propia del intestino y proba­
k Arteria trabecular
blem ente otras superficies mucosas. Así los linfocitos estimulados en una
superficie m ucosa pueden distribuirse a través del sistema M ALT (tejido
F ig u r a 7 - 4 O rg a n iz a ció n del te jid o lin fá tico en el bazo. La pulpa
linfático asociado a mucosas). Ig A , inm unoglobulina A. (De Roitt I y cois.:
blanca contiene centros germinales y está rodeada por la zona marginal,
Im m u n o lo g y , 4.a ed., St. Louis, 1996, Mosby.)
que contiene numerosos macrófagos, células presentadoras de antígeno,
linfocitos B que recirculan lentam ente y linfocitos citolíticos espontáneos.
Los linfocitos T residen en la vaina linfática periarteriolar (PALS). La pulpa las progenitoras o los monocitos. Estas formas maduras tienen
roja contiene senos venosos separados por cordones esplénicos. La sangre diferentes formas que se corresponden con su última loca­
entra en los tejidos por las arterias trabeculares, que originan arterias cen­
lización tisular y función y pueden expresar un subgrupo de
trales m uy ramificadas. Algunas acaban en la pulpa blanca, donde irrigan
los centros germ inales y las zonas del manto, pero la mayoría se vacía en actividades de los macrófagos o marcadores de la superficie
las zonas marginales o cerca de ellas. (De Roitt I y cois.: Im m u n o lo g yA -^ ed., de la célula.
S t Louis, 1996, Mosby.) Los m onocitos tienen un diám etro de 10 a 18 |xm con
un núcleo único lobulado en form a de judía. Representan
del 3% al 8 % de los leucocitos de la sangre periférica. Los
Los eosinófilos son células muy granuladas (con un diáme­ monocitos siguen a los neutrófilos dentro del tejido como un
tro de 11 a 15 |xm) con núcleos bilobulados que se tiñen con componente celular temprano de la inflamación.
el colorante ácido eosina Y. También son fagocíticos, móviles y Los m acrófagos son células con una vida larga que son
granulados. Los gránulos contienen fosfatasa ácida, peroxidasa fagocíticas, contienen lisosomas y, a diferencia de los neutrófi­
y proteínas eosinofílicas básicas. Los eosinófilos intervienen los, tienen mitocondrias. Los macrófagos tienen las siguientes
en la defensa contra las infecciones parasitarias. Las proteínas funciones básicas: 1} la fagocitosis, 2 ) la presentación del
eosinofílicas básicas son tóxicas para muchos parásitos. Los antígeno a los linfocitos T para aumentar las respuestas inmu-
basófilos, otro tipo de granulocito, no son fagocíticos pero nitarias específicas y 3) la secreción de citocinas para activar
liberan el contenido de sus gránulos durante las respuestas y promover las respuestas innatas e inmunitarias (fig. 7-6).
alérgicas [hipersensibilidad del tipo 1). Los macrófagos expresan receptores en la superficie celular
para la porción Fe de la inmunoglobulina (Ig) G (F c-7 R I,
Sistema mononuclearfagocítico Fc-'y R II, Fc-'y R U I) y para el producto C 3b de la cascada
El sistema m ononuclear fagocítico tiene células m ielocíti- del com plem ento ( C R l , C R 3 ). Estos receptores facilitan
cas y consta de células dendríticas, m onocitos sanguíneos la fagocitosis del antígeno, las bacterias o los virus cubiertos
(v. fig. 7-1] y células derivadas de los monocitos. Diferentes con estas proteínas. Los receptores del tipo t o ll y otros de
citocinas o medios tisulares favorecen la diferenciación de las reconocimiento del patrón reconocen los patrones m olecu­
células progenitoras mielocíticas y los monocitos en diversos lares asociados a microorganismos patógenos y activan las
macrófagos y células dendríticas. Estas células son los m a ­ respuestas protectoras. Los macrófagos tam bién expresan
crófagos, los m acrófagos alveolares en los pulmones, las células el antígeno del M H C de la clase II , que perm ite a estas
K u pffer en el hígado, las células m esangiales intraglomerulares células presentar el antígeno a los linfocitos T C D 4 coo­
en e l riñón, los histiocitos en el tejid o conjuntivo, los osteo- peradores para que expandan la respuesta inmunitaria. Los
clastos, la s célu las sin ov ia les y la s célu las d e la m icro g lía macrófagos secretan interleucina 1, interleucina 6 , factor
en e l en céfa lo. Los macrófagos alveolares y serosos (p. ej., de necrosis tumoral, interleucina 12 y otras moléculas tras
peritoneales] son ejem plos de macrófagos «errantes». La detectar bacterias, lo que estimula las respuestas inmunitarias
microglía encefálica la constituyen células que entran en el e inflamatorias, entre ellas la fiebre. Una citocina derivada de
encéfalo aproximadamente en el m omento del nacimiento los linfocitos T, el interferón 7 , activa los macrófagos. Los
y se diferencias en células fijas. La mayoría de las células macrófagos activados aumentan sus capacidades fagocítica,
dendríticas son células m ielocíticas derivadas de las célu- destructora y presentadora de antígenos.
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Activación celular
'Reoeplorpara Receptores
; el TNF-a del^tipo toü
•Receptor
! para el
•¡nierferón Adhesión bacteriana
Presentación del antígeno
Receptor para
el L P S (C O I4)
CD40 Receptor para la mañosa

Coestimuladores
Receptor depurador

Receptor para glucano

Receptores para
Receptor para Fe de la IgG
el C3b del complemento
(CR1)
Captación facilitada

F ig u ra 7 - 6 Las estructuras presentes en la superficie del macrófago intervienen en la función celular. Los receptores para los com ponentes bacterianos,
el anticuerpo y el com plem ento (para la opsonización) prom ueven la activación y la fagocitosis del antígeno; otros receptores prom ueven la presentación
y la activación del antígeno de los linfocitos T. La célula dendrítica com parte muchas de estas características. ICAM -1, molécula de adhesión intracelular 1;
/g,inm unoglobulina;/.f^-5, antígeno leucocítico funcional 3 ;¿P S,lip o p o lisa cá rid o ;M H C antígeno del com plejo principal de histocompatibilidad I o II;
TNF-a, factor de necrosis tum oral a.

Células dendrítícas grande y un citoplasma agranular más pequeño. Aunque los


linfocitos B y los linfocitos T no pueden distinguirse por
Las células dendríticas de origen m ielocítico y linfocítico
sus rasgos morfológicos, pueden distinguirse por su función
tien en tentáculos parecidos a los del pulpo y son células
y por sus marcadores de superficie (tabla 7-5). Las células
presentadoras de antígenos (APC) profesionales que tam ­
linfocíticas que no son linfocitos B ni linfocitos T (linfoci­
bién pueden producir citocinas. En los tejidos y la sangre se
tos no B ni T, o linfocitos nulos) son linfocitos granulares gran­
encuentran diferentes tipos de células dendríticas inmaduras
des, también conocidos como linfocitos citolíticos espontá­
y maduras; entre ellas están las células de Langerhans en la
neos (N K , del inglés n a t u r a l k ille r } .
piel, las células dérmicas intersticiales, las células dendríticas
La función principal de los linfocitos B es producir anti­
esplénicas marginales y las células dendríticas en el hígado,
cuerpos, pero también interiorizan el antígeno, lo procesan
el tim o, los centros germ inales de los ganglios linfáticos
y lo presentan a los linfocitos T para extender la respues­
y la sangre. Las células dendríticas plasmacitoides están en
ta inmunitaria. Los linfocitos B pueden identificarse por
la sangre y producen grandes cantidades de interferón a y
la presencia de inmunoglobulinas, moléculas del M H C de
citocinas en respuesta a infecciones \áricas y de otro tipo. Las
la clase II y receptores para los productos C 3b y C 3d de la
células dendríticas inmaduras capturan y fagocitan al antí­
cascada del com plem ento (C R I, C R 2) en sus superficies
geno de forma eficaz, liberan citocinas para activar y dirigir
celulares (fig. 7 -7 ). El nombre linfocitos B se deriva de su
la respuesta inmunitaria subsiguiente y entonces maduran a
sitio de diferenciación en las aves, la b olsa de Fabricio, y la
células dendríticas. Estas células se mueven hacia las regiones
médula ósea (en inglés, bon e m arrow ) en los mamíferos. La
de los ganglios linfáticos ricas en linfocitos T para presentar
diferenciación de los linfocitos B también se produce en el
el antígeno a los antígenos del M H C de las clases I y II. L as
hígado y el bazo fetales. Los linfocitos B activados evolucionan
c élu las d en d rític a s son la s ú nicas célu las p resen ta d o ra s d e
a linfocitos memoria, que expresan el marcador de superficie
antígenos que pu eden in ic ia r una respuesta in m u n itaria con
celular C D 45R O y circulan hasta que el antígeno específico
un lin focito T virgen y tam bién determinan el tipo de res­
los activa, o se diferencian hacia una fase terminal en células
puesta (T H I, T H 2, Treg). Las células dendríticas foliculares
plasmáticas. Las células plasmáticas tienen núcleos pequeños
presentes en las regiones de los linfocitos B de los ganglios
y un citoplasma grande para su trabajo como productores de
linfáticos y del bazo no tienen un origen hematopoyético y no
anticuerpos.
procesan antígenos, pero tienen tentáculos (dendritas] y una
Los linfocitos T adquieren su nombre porque se desarro­
superficie «pegajosa» para concentrar y presentar antígenos
llan en el fimo. Los linfocitos T tienen dos funciones princi­
a los linfocitos B.
pales en respuesta a un antígeno extraño:
1. Controlar, suprimir (cuando sea necesario) y activar
Linfocitos las respuestas inmunitarias e inflamatorias mediante
Los linfocitos tienen un diámetro de 6 a 10 |xm, por lo que son interacciones intercelulares y la liberación de citocinas
más pequeños que los leucocitos. Las dos clases principales de 2. Destruir directamente las células infectadas por virus, las
linfocitos, los linfocitos B y los linfocitos T, tienen un núcleo células extrañas (p. ej., los injertos tisulares) y los tumores
ELEM ENTO S DE LAS RESPUESTA S PROTECTORAS DEL H O SPEDADO R

Tabla 7-5 Com paración de los Imfocitos B y los llnfodtos T

Origen Médula ósea Médula ósea


Maduración Timo Equivalente bursal: médula ósea, placas de Peyer
Funciones CD4: producción de citocina restringida por MHC de la clase II Producción de anticuerpo
para iniciar y promover la respuesta inmunitaria Presentación del antígeno a los linfocitos T
CD8 : citólisis restringida por MHC de la clase I
NKTy y S T: respuesta rápida a la infección
Treg: control y supresión del linfocito T y otras respuestas
Respuesta protectora Resolución de infecciones intracelulares y micóticas, aumento El anticuerpo protege frente al nuevo ataque, bloquea la
y control de las respuestas innata e inmunitaria propagación de la sustancia en la sangre, opsoniza, etc.
Productos* Citocinas, interferón 7 , factores de crecimiento, sustancias IgM, IgD, IgG, IgA o IgE
citolíticas (perforina, granzimas)
Diferenciación por CD2 (receptor para eritrocitos de carnero), TCR, CD3, CD4 o CD8 Anticuerpos de superficie, receptores para el complemento,
marcadores de antígenos del MHC de la clase II
superficie
Subgrupos CD4TH0: precursor de cooperador Linfocitos B (IgM, IgD): anticuerpo, presentación del
CD4TH1: activa el crecimiento de linfocitos B, linfocitosT antígeno
y linfocitos NK, activa macrófagos, CTL y respuestas HRT Linfocitos B (IgG o IgE o IgA): anticuerpo, presentación del
y producción de IgG antígeno
CD4TH2: activa el crecimiento de linfocitos B y linfocitos T; Célula plasmática: fábricas de anticuerpos en última fase
promueve la producción de IgG, IgE e IgA de diferenciación
CD4TH17: inflamación Células memoria: vida larga, respuesta anamnésica
CD4 CD25 Treg: supresión
CD8 : linfocitosT citotóxicos (CTL)
CD8 : células supresoras
NKT, 7/8 T: respuesta rápida a la infección
Células memoria: vida larga, respuesta anamnésica

CD, grupo de diferenciación; CTL, linfocito T citotóxico; HRT, hipersensibilidad de tipo retardado; !g, inmunoglobulina; MHC, complejo principal de histocompatibilidad;
NKT, (linfocito) T citolítico espontáneo: TCR, receptor del linfocito T; TH, (linfocito) T cooperador,
•Dependiendo del subgrupo.

Los linfocitos T constituyen más del 60% al 80% de los son sobre todo células que producen citocinas que ayudan a
linfocitos de la sangre periférica. iniciar y madurar las respuestas inmunitarias y que activan los
Los linfocitos T se distinguían al principio de los linfocitos B macrófagos para inducir las respuestas de hipersensibilidad del
por su capacidad de unirse y rodearse a sí mismos [formando tipo retardado (H TR); un subgrupo de estas células suprime
rosetas] de eritrocitos de camero a través de la molécula CD 2. las respuestas. Los linfocitos T C D 4 pueden dividirse a su vez
Todos los linfocitos T expresan un receptor del linfocito T en THO, T H l, T H 2, T H 17, Treg y otros subgrupos según el
(T C R , del inglés T -cell r ec e p to r ) que se une al antígeno, que espectro de las citocinas que secretan y el tipo de respuesta
se asemeja al anticuerpo pero difiere del mismo, y las protemas inmunitaria que promueven. Los linfocitos T H l promueven
asociadas C D 2 y C D 3 en su superficie celular [v. fig. 7-7). las respuestas locales, de anticuerpos e inflamatorias celulares
Los linfocitos T se dividen en tres grupos principales según el y las de HRT, mientras que los linfocitos T H 2 promueven la
tipo de T C R y también por la expresión de la superficie celular producción de anticuerpos. Los linfocitos T H l 7 activan los
de dos proteínas, C D 4 y C D 8 . La mayoría de los linfocitos neutrófilos y otras respuestas y los linfocitos Treg promueven
expresa el T C R a/p. Los linfocitos T que expresan C D 4 la tolerancia de los linfocitos T. Los linfocitos T C D 8 también
liberan citocinas pero destacan sobre todo por su capacidad
para reconocer y destruir las células infectadas por virus, los
C04 0 CD8 _______ A ° ’ ® C D 2 0 / W ,^ trasplantes de tejido extraño (no autoinjertos) y las células
tumorales como los linfocitos T citotóxicos. Los linfocitos T
C D 8 también son responsables de la supresión de las respues­
tas inmunitarias. Los linfocitos T también producen células
memoria que expresan CD 45RO. Un número variable de linfo­
yo ccM o
citos T expresa el T C R *y/S P^ro no C D 4 ni C D 8 . Estas células
002/ residen generalmente en la piel y la mucosa y son importantes
Y ^ M H C II
para la inmunidad innata. Los linfocitos N KT son linfocitos T
/ que comparten características con los linfocitos NK.
0028^1 □ CD22 Los linfocitos linfáticos innatos (IL C , del inglés in n a te
ÍC TU -4 )T1 Linfocito T Unfodto B ly tn p h oid c e lls ) son linfocitos no T ni B que tienen algunas
U C Rl características parecidas a los linfocitos T e incluyen los lin­
CD5 V /

/ /^C R2
(C035) focitos NK. Los ILC productores de citocinas se encuentran
asociados a las células epiteliales en el tim o y en el intestino.
/ X (C021) En el intestino, estas células producen citocinas que regulan la
CD^ respuesta de la célula epitelial y del linfocito T a la microbiota
y ^ / ^ B 7 (c r> fio )
intestinal y facilitan la protección fren te a los helm intos.
CD40L CD5
Los errores en sus funciones se asocian a trastornos inmu-
nopatológicos, incluidas las enfermedades autoinmunitarias.
FC7R II (CD32)
Los IL C tam bién están implicados en la regulación de las
F ig u ra 7 - 7 Marcadores de la superficie de los linfocitos B y T humanos. respuestas inmunitarias durante la gestación. Los linfocitos
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

N K linfocíticos granulares grandes se parecen a los linfoci- BIBLIOGRAFÍA


tos T C D 8 en su función citolítica sobre las células tumorales Abbas AK, et al: C ellu lar a n d m olecu lar immunology, ed 7, Philadelphia,
o infectadas por virus, pero difieren en el mecanismo con el que 2 0 1 1 , W B Saunders.
identifican a la célula diana. Los linfocitos N K también tienen DeFranco AL, Locksley RM , Robertson M: Im m unity: the im m une res-
receptores para el Fe, que usan en la lisis dependiente de pon se in infectiotis an d inflam m atory disease, Sunderland, Mass, 2007,
Sinauer Associates.
anticuerpos, y por ello también se les conoce como células de
Janeway C A , et al: Im m u n obiology: the im m u n e system in h ealth a n d
citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (C C D A o d isease, ed 6 , New York, 2 0 0 4 , Gadand Science.
K ). Los gránulos citoplásmicos contienen proteínas citolíticas K in d tT J, Goldsby RA, Osbome BA: K u b y immunoloQ/, ed 7, New York,
que intervienen en la destrucción. 2 0 1 1 , W H Freeman.
Kumar V, Abbas AK, Fausto N: R obbin s a n d C otra n path olog ic hasis o f
d isease, ed 7, Philadelphia, 20 0 5 , Elsevier.
PREGUNTAS Rosenthal KS: Are microbial symptoms “self-inflicted"? The consequen-
ces o f immunopathology. In fe cí D is C lin P rac t 13:3 0 6 -3 1 0 , 2005.
Un profesor estaba impartiendo un curso de introducción y Rosenthal K S: Vaccines make good immune theater: immunization as
described in a three-act play, In fect D is C lin P ract 1 4 :3 5 -4 5 , 2006.
describió las diferentes células inmunitarias con los siguientes
Rosenthal KS, Wilkinson JG : Flow cytom etry and immunospeak, In fecí
sobrenombres. Explique por qué son apropiados o no los D is C lin P ra c í 1 5 :1 8 3 -1 9 1 , 2007.
siguientes sobrenombres. Sompayrac L: H ow the im mune sysíem w orks, ed 2, Malden, Mass, 2003,
/. M acrófago: Pac-Man (un personaje de videojuego que suele Blackwell Scientific.
Spits H, D iSanto JP : T he expanding family o f innate lymphoid cells:
com er pun tos pero que se come a los malos cuando se activa)
regulators and effecto rs o f im m unity and tissue rem odeling, N a í
2. Ganglio linfático: comisaría Im m u n ol\ 2 -l\ -2 7 , 2011.
Trends Im m unol: Issues contain understandable reviews on current topics
3. Linfocitos T CD4: oficial de recepción
in immunology.
4. Linfocitos TCD8: «policía de patrulla»
5. Linfocito B: compañía de productos de diseño y de construcción
6. Célula plasmática: factoría
7. M astocito: unidad de guerra quím ica activadle
8. Neutrófilo: recolector de residuos y desinfectante
9. Célula dendrítica: valla publicitaria

Las resp u estas a estas p re g u n ta s e s tán disp o n ib les en


w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

RESPUESTAS 5. Los prelinfocitos B y los linfocitos B alteran el ADN


de sus genes de inmunoglobulinas para producir planes
1. El macrófago es un fagocito que se activa con el génicos para una inmunoglobulina específica, que esa célula
interferón y y entonces puede destruir los microbios produce con ligeras modificaciones (mutación somática) y
fagocitados y producir citocinas. un cambio de modelo (cambio de clase) cuando el mercado
2. El ganglio linfático es un depósito de linfocitos B y (citocinas derivadas de los linfocitos T) le dice que es
linfocitos T. Las células dendríticas o linfáticas y otras células necesario, pero sin cambiar el tema general del producto
presentadoras de antígenos llevan pruebas de infección para (región variable).
activar los linfocitos T con el fin de que se comuniquen con 6 . La célula plasmática es una factoría productora de
otras células a través de citocinas (como una radio) que envían inmunoglobulinas con una oficina pequeña (núcleo) y muchas
para que se ocupen del problema. cadenas de ensamblaje (ribosomas) para hacer anticuerpos.
3. A los linfocitos T CD4 les presentan el problema microbiano 7. Los mastocitos tienen receptores para el Fe de la IgE que
las células presentadoras de antígenos, y les dicen a otras células desencadenarán la liberación de histamina y otras sustancias al
que se ocupen de los problemas produciendo citocinas. unirse a una señal alergénica.
4. Los linfocitos T CD 8 consiguen activarse en el ganglio 8. Los neutrófilos fagocitan y destruyen muy bien las
linfático y pasan a la periferia para patrullaren busca de células bacterias.
tumorales o infectadas por virus; entonces agarran a los 9. Las células dendríticas fagocitan el antígeno y lo llevan al
forajidos y los inactivan con un abrazo apoptósico. ganglio linfático para presentarlo a los linfocitos T CD4 y CDB.
8 Respuestas innatas del hospedador

l cuerpo se protege de la infección microbiana de diversas defensinas pueden romper las membranas de bacterias, virus
E formas que son similares a las usadas por un país que se
protege de una invasión. Barreras como la piel, las mucosas y
y hongos. La lisozima induce la lisis de las bacterias al es­
cindir el esqueleto polisacárido del peptidoglucano de las
el ácido del estómago impiden la invasión llevada a cabo por la bacterias grampositivas. La lactoferrina, una proteína ligadora
mayoría de los microbios. Los microbios capaces de atravesar de hierro, priva a los microbios del hierro libre que necesitan
para crecer [tabla 8 - 1).
estar barreras son bombardeados con moléculas antimicrobia­
El am biente ácido del estómago, la vejiga y los riñones y
nas solubles, como las defensinas, los componentes del comple­
la bilis de los intestinos inactivan a muchos virus y bacterias.
mento y los interferones del tipo 1. A medida que la infección
El flu jo de orina tam bién lim ita el establecim iento de la
se expande, participan tropas de células de la respuesta innata,
infección.
incluidos los neutrófilos, las células del linaje monocito-ma- La temperatura corporal y en especial la fiebre limitan o
crofágico, las células dendríticas inmaduras [CD i), las células impiden el crecimiento de muchos microbios, especialmente
de Langerhans y las células dendríticas [C D ) y los linfocitos de virus. Además, la respuesta inmunitaria es más eficien­
citolíticos espontáneos (NK, de natural killer]. Estas respues­ te a temperaturas altas.
tas innatas a menudo son suficientes para controlar la infección.
Las respuestas específicas frente al antígeno apoyan, potencian
y controlan las respuestas inmunitarias celulares (cuadro 8- 1). Co m po n en tes so lu bles
Las protecciones innatas se activan por el contacto direc­
DE LAS RESPUESTA S INNATAS
to con estructuras repetitivas de la superficie microbiana o
su genoma, denominadas patrones moleculares asociados a Péptidos antimicrobianos
m icroorganism os patógenos (PAMP, del inglés p ath og en -
associated m olecular p a tte m s ). Por el contrario, las respuestas Las defensinas y las catelicidinas son péptidos producidos por
específicas frente al antígeno detectan pequeñas estructuras los neutrófilos, las células epiteliales y otras células que son
denominadas epítopos que las activan. tóxicas para muchos microbios. Las defensinas son péptidos
catiónicos pequeños (aproxim adam ente 3 0 aminoácidos)
que pueden rom per las membranas, m atar a las bacterias
y los hongos e inactivar a los virus. Cuando las secretan las
Barreras a l a i n f e c c ió n
células de Paneth del intestino, limitan y regulan la vida de
La piel y las mucosas sirven de barrera a la mayoría de los las bacterias en la luz. La producción de defensinas puede ser
microorganismos infecciosos (fig. 8- 1), con pocas excepciones constitutiva o verse estimulada por productos microbianos o
(p. ej., virus del papiloma, dermatofitos [hongos «a los que citocinas, como la interleucina (IL) 17. Las catelicidinas se
les gusta la piel»]). Los ácidos grasos libres producidos en las escinden para producir péptidos microbicidas.
glándulas sebáceas y por los microorganismos de la superficie
cutánea, el ácido láctico de la sudoración y el pH bajo y Complemento
el am biente relativam ente seco de la piel son condiciones El sistema del com plem ento es una alarma y un arma con­
desfavorables para la supervivencia de la mayoría de los m i­ tra la in fecció n , esp ecialm en te la in fección bacteriana.
croorganismos. Al sistem a del com plem ento lo activan directam ente las
El epitelio de la mucosa que cubre los orificios del cuerpo bacterias y los productos bacterianos (vía alternativa o de
está protegido por secreciones de moco y cilios. Por ejemplo, la properdina), la unión de la lectina a azúcares situados
las vías respiratorias pulmonares están cubiertas de moco, en la superficie de la célula bacteriana (proteína ligadora
que es transportado continuam ente hacia la boca por las de m añosa) o los complejos de anticuerpo y antígeno (vía
células epiteliales ciliadas. G randes partículas aerotrans­ clásica) (fig. 8 -2 ). La activación por cualquier vía inicia una
portadas quedan atrapadas en el m oco, m ientras que las cascada de acontecim ientos proteolíticos que escinde a las
partículas pequeñas [0,05 a 3 micrómetros [/u.m], el tamaño proteín as en las subunidades «a» y «b». Las subunida-
de los virus o las bacterias) que alcanzan los alvéolos son des «a» (C3a, C5a) atraen (factores quimiotácticos) a células
fagocitadas por los macrófagos y transportadas fuera de los fagocíticas e inflamatorias hacia la zona, perm iten el acceso
espacios aéreos. Algunas bacterias y virus [p. ej.. B órdete- de moléculas solubles y células al aumentar la permeabilidad
lia pertussis, virus de la gripe), el humo del tabaco u otros vascular (C3a, C4a y C 5a anafilácticos) y activan las respues­
contam inantes pueden interferir con este m ecanism o de tas. Las subunidades «b» son más grandes [bigger, en inglés)
limpieza al dañar las células epiteliales ciliadas, lo que hace y se unen {M nd, en inglés) a la sustancia que promueve
a los pacientes proclives a la neumonía bacteriana secun­ su fagocitosis (opsonización) y elim inación y construyen
daria. Las sustancias antimicrobianas (péptidos catiónicos [b u ild , en inglés) un agujero m olecular que puede matar
[defen sin as], lisozima, lactoferrina e IgA secretoria) que directam ente al microorganismo infeccioso. Las tres vías de
se encuentran en las superficies mucosas [p. ej., lágrimas, activación del com plem ento se unen en un punto de unión
moco y saliva) también proporcionan protección. Diferentes común, la activación del com ponente C 3 .
© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos
48 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Respuestas innatas del hospedador


OÍM --
Constitutivas • Lavado de las lágrimas
Lisozima
Barreras: piel, ácido del estómago, moco Piel
Temperatura corporal • Barrera anatómica
Via respiratona
Péptidos antimicrobianos: defensinas, catelicidinas • Secreciones
•Moco
Enzimas: lisozima aniimicrobiands
• Epitelio cibado
Lactoferrina, transferrina • Macrófagos
Complemento alveolares
Respuestas de células epiteliales
Reclutam iento
Complemento C3a, C5a
Quimiocinas del epitelio y los macrófagos
Respuestas desencadenadas por m icroorganism os
patógenos
Neutrófilos
Macrófagos
Células de Langerhans/dendríticas
Linfocitos T 7/8
Linfocitos NK, NKT
Citocinas de fase aguda
IL -1: fiebre, diapédesis, inflamación
Factor de necrosis tumoral a: fiebre, diapédesis,
inflamación, permeabilidad vascular, reestructuración Tubo digestivo
tisular, metabolismo, mantenimiento de la activación Vía genrtourínana •Aodoz del estómago
del macrófago, caquexia • Lavado de la orina • Microblota normal
IL-6 : síntesis de proteínas de fase aguda por el hígado, • Acidez de la orina • Bilis
• üsozíma
activación del linfocito
• Ácido ládKX> vaginal
Proteínas de fase aguda en el liígado
Proteína C-reactiva, proteína ligadora de mañosa,
fibrinógeno, complemento
Otras citocinas
IL-12: promueve respuestas TH l y activa a los linfocitos NK
IL-23: promueve respuestas T H l 7 de las células memoria
Interferones del tipo 1: efecto antivírico, fiebre,
promueven respuesta del linfocito T CD 8
Interferón 7 (de linfocitos NK, NKT): activación de
macrófagos y células dendríticas
Inflam ación

IL, interleucina; NK, citolítico espontáneo.

F ig u ra 8-1 Defensas de barrera del cuerpo humano.


Vía a lte rn a tiv a
La vía alternativa se activa directamente por las superficies
bacterianas y sus com ponentes (p. ej., endotoxina, polisa- reducir, la fucosa y la glucosamina situadas en las superficies
cáridos microbianos], así como por otros factores. Esta vía bacterianas, micóticas y de otras células. La proteína ligadora
puede activarse antes del establecimiento de una respuesta de mañosa se parece y sustituye al componente C l q de la vía
inmunitaria frente a la bacteria infecciosa porque no depen­ clásica y, al unirse a las superficies bacterianas, activa la es­
de de anticuerpos ni im plica a los primeros com ponentes cisión de la serina-proteasa asociada a la proteína ligadora de
del com plem ento ( C l , C 2 y C 4 ). La activación de la vía mañosa. La serina-proteasa asociada a la proteína ligadora
alternativa está mediada por la unión de la properdina fa c to r B de mañosa escinde los componentes C 4 y C 2 para producir
al C 3b y después con la properdin a fa c to r D, que escinde al la C3-convertasa, el punto de unión de la cascada del com ­
fa c t o r B en el complejo para dar lugar a\fragm en to activo B b plemento.
que perm anece unido al C 3 b (u n id a d d e a c t iv a c ió n ). El
C 3b se pega a la superficie celular y ancla al com plejo. La Vía clásica
cascada del complemento continúa entonces de una manera La cascada del complemento clásica la inicia la unión d el prim er
análoga a la vía clásica. componente, C l , a la porción F e d el anticuerpo (Ig G o IgM ,
no IgA ni IgE) qu e se une a antígenos de la superficie celu lar o
Vía de la lectina a un inmunocomplejo con antígenos solubles. El C l consta de un
La vía de la lectina tam bién es un m ecanismo de defensa complejo de tres proteínas separadas denominadas C lq , C l r
frente a bacterias y hongos. La proteína ligadora de mañosa y C l s (v. fig. 8-2]. Una molécula de C l q y una de C ls con
es una proteína sérica grande que se une a la mañosa sin dos moléculas de C l r constituyen el complejo C l o unidad
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

de reconocimiento. El C lq facilita la unión de la unidad de Tabla 8-1 M ediadores solubles de la defensa Innata
reconocim iento a los com plejos antígeno-anticuerpo de la
superficie celular. La unión del C 1q activa al C 1r (denominado Cataliza la hidrólisis Lágrimas, saliva,
ahora como C lr * ) y a su vez a C ls [C ls * ]. El C ls * escinde del peptidoglucano secreciones nasales,
entonces el C 4 en C 4a y C 4b y el C 2 en C 2a y C 2b . La bacteriano líquidos corporales,
gránulos lisosómicos
capacidad de una sola unidad de reconocimiento de escindir
Lactoferrina, Se une al hierro y Granulos específicos
numerosas moléculas de C 2 y C 4 constituye un mecanismo
transferrina compite con los de PMN
de amplificación en la cascada del complemento. La unión del microorganismos
C 4 b y del C 2 b produce C 4b2b , que se conoce como C3*con* por él
vertasa. Este complejo se une a la membrana celular y escinde Lactoperoxidasa Puede inhibir a muchos Leche y saliva
el C3 en los fragmentos C 3 a y C 3 b . La proteína C 3b tiene un microorganismos
enlace tioéster único que unirá de forma covalente el C 3b a p-Lisina Es eficaz sobre todo Trombocitos,
la superficie de la célula o será hidrolizado. La C3-convertasa contra bacterias suero normal
amplifica la respuesta al escindir muchas moléculas de C 3. grampositivas

La interacción del C 3b con el C 4b2b unido a la membrana Factores Induce migración Complemento y
quimiotácticos dirigida de PMN, quimiocinas
celular produce C 4b 3b 2b , que se denomina C5*convertasa.
monocitosyotras
Esta unidad de activación escinde el C 5 en los fragmentos C 5 a células
y C 5 b y constituye otro paso de amplificación. Properdina Activa el complemento
en ausencia
Actividades biológicas de ios componentes dei com plem ento del complejo
anticuerpo-antígeno
La escisión de los componentes C 3 y C5 produce importantes
Seuneaglúcidos
factores que potencian la eliminación del microorganismo microbianos
infeccioso al promover el acceso a la zona de infección y atraer para promover
a las células que median las reacciones inflamatorias protec­ la fagocitosis
toras. El C 3 b es una opsonina que promueve la eliminación Péptidos Rompe membranas, Gránulos
de bacterias al unirse directam ente a la membrana celular catiónicos bloquea actividades polimorfonucleares,
de transporte celular células epiteliales, etc.
para hacer a la célula más atractiva para las células fagocíticas,
(defensinas, etc.)
como los neutrófilos y los macrófagos, que tienen receptores
para el C3b. El C 3b puede sufrir una escisión adicional para PMN, neutrófilos polimorfonucleares (leucocitos).
generar C 3 d , que es un activador de los linfocitos B. Los

Via d* la lectina

Superficie microbiana
M BP
AntígerK>‘anlicuerpo
i
C1qr2$2
i Activado
-► C lqrl^ --------1
M ASP
|^C 4+C 2
(C l) C2 C2 b \f

0 4 ^ C4b ^ * ^ >C4b2b
(C3-convertasa)
C4a

C5

C Sa 'l C6 C7 C8 C9
C3a B to

C3b6b- -*► C3b0b3b


(C3-convertasa)‘ (C5-convertasa)
/
Superficies Factor D
microbianas

Vía alternativa

'Estabilizada por la properdina


F ig u ra 8 - 2 Las vías clásica, de la lectina y alternativa del com plem ento. A pesar de los diferentes activadores, las tres vías convergen en la escisión del
C3 y el C5 para proporcionar sustancias quimiotácticas y anafilotoxinas (C3a, C5a), una opsonina (C3b) que se adhiere a las membranas, un activador el
linfocito B (C 3d) y que inicia el com plejo de ataque de la m embrana (M AC) para matar a fas células. serina-proteasa asociada a MBP;/WSP, proteína
ligadora de mañosa. (Reproducidode Roserithal KS,Tan M :R a p íd re v íe w m ic ro b io lo g y a n d im m u n o lo g y ,3 .^ ed., S t Louis, 2010, Mosby.)
50 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

fragmentos del complemento C 3a, C 4 a y C 5 a actúan como


poderosas anañiotoxínas que estimulan a los mastocitos pa­
ra que liberen histamina y factor de necrosis tumoral a (TNF-a),
que aumenta la permeabilidad vascular y la contracción del
músculo liso. El C 3a y el C 5a también actúan como sustancias
que atraen (factores quimiotácticos) a neutrófilos y macró-
fagos al aumentar la expresión de proteínas de adhesión en el
recubrimiento capilar cercano a la infección. Estas proteínas
son promotores poderosos de las reacciones inflamatorias. Para
muchas infecciones, estas respuestas constituyen la principal
función antimicrobiana del sistema del complemento.
El sistema del com plem ento tam bién interactúa con la
cascada de la coagulación. Los factores de la coagulación
activados pueden escindir al C 5a y una proteasa de la vía de
la lectina puede escindir la protrombina para producir fibrina
y activar la cascada de la coagulación.

Com plejo de a ta q u e de la m e m b ra n a
En la última fase de la vía clásica se crea el com plejo de ata­
que de la membrana (M A C ), que también se llama unidad
lítica (fig. 8-3). Las cinco últimas proteínas del complemen­
to (C 5 a C 9] se ensamblan en un MAC en las membranas
celulares diana para mediar la lesión. El M AC comienza a
ensamblarse con la escisión del C 5 en los fragmentos C5a y
C 5b. Se forma un complejo [C 5b ,6,7,8)i(C 9)n que perfora
un agujero en la membrana, lo que conduce a la apoptosis o
la Usis hipotónica de las células. Las bacterias N eisseria son
muy sensibles a esta forma de m uerte celular, mientras que
las bacterias grampositivas son relativamente insensibles. El
com ponente C 9 es similar a la perforina que producen los
linfocitos T citolíticos y los linfocitos NK.

R egulación de la activación d el com plem ento


F ig u ra 8 -3 Lísis celular por el complemento. La activación del C5 inicia la
Los seres humanos tienen varios mecanismos para impedir construcción molecular de un complejo de ataque de la m embrana (MAC)
la generación de la C3-convertasa con el fin de protegerse similar a un pozo de petróleo. El C9 se parece a la perforina (linfocitos NK
frente a una activación inadecuada del complemento. Entre y linfocitos T citotóxicos) para prom over la apoptosis en la célula diana.
ellos están el inhibidor del C l , la proteína ligadora del C 4, el
factor H, el factor I y proteínas de la superficie celular, que
son el factor acelerador de la degradación (DAF, del inglés del tipo I se expondrán con mayor profundidad al abordar la
d ec a y -a c c elera tin g fa c to r ) y la proteína cofactor de m em ­ respuesta a las infecciones víricas.
brana. Además, el C D 59 (protectina) evita la formación del El IFN--^ es un interferón del tipo II que difiere en sus
MAC. La mayoría de los microorganismos infecciosos carece propiedades bioquímicas y biológicas de los interferones del
de estos mecanismos protectores y perm anece sensible al tipo I. El IFN-'y es sobre todo una citocina producida por los
com plem ento. La deficiencia génica de estos sistem as de linfocitos N K y T como parte de las respuestas inmunita-
protección puede dar lugar a enfermedad. rias T H l y activa a los macrófagos y las células mielocíticas.
El IFN-7 se expondrá con mayor detalle al abordar las respues­
Interferones tas del linfocito T.
Los interferones son pequeñas proteínas análogas a las citoci-
nas que pueden interferir con la replicación vírica pero tienen Co m po n en tes c elu la res
efectos sistémicos (descritos con mayor detalle en el cap. 10).
Los interferones del tipo I son el a y el (3 pero no el y, que es DE LAS RESPUESTA S INNATAS
un interferón del tipo IL Los interferones del tipo I son sobre
todo una respuesta antivírica muy temprana desencadenada Fagocitos
por ARN bicatenarios intermediarios de la replicación vírica Los neutrófilos desempeñan una función importante en las
y de otras estructuras que se unen a los receptores de tipo toll protecciones antibacterianas y antim icóticas y una m enor
(TLR, del inglés toll-like receptors), RIG -1 (gen inducible por en las protecciones antivíricas. La superficie del neutrófilo
el ácido retinoico 1) y otros receptores PAMP (PAMPR). Las está decorada con receptores que se unen a los microbios,
C D plasmacitoides producen grandes cantidades de IFN -a en como la lectina del tipo C y los receptores depuradores y los
respuesta a la infección vírica, especialmente durante la vire- receptores de opsoninas para la porción Fe de las inmunoglo-
mia, pero otras células también producen IF N -a. El IFN-(3 bulinas, el C3b o las lectinas unidas a la superficie microbiana.
lo producen sobre todo los fibroblastos. Los interferones del Estos receptores promueven la fagocitosis del m icrobio y
tipo I promueven la transcripción de proteínas antivíricas su posterior lisis, como se describe más adelante. Los neu­
en las células que se activan después de la infección vírica. trófilos tienen m uchos gránulos que contienen proteínas
También activan las respuestas sistémicas, incluida la fiebre, y sustancias antim icrobianas. Estas células se diferencian
y potencian la activación del linfocito T. Los interferones de forma term inal, emplean menos de 3 días en la sangre.
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

IFN.^
0 :

Activacióo del lInfocitoTHI

ProcosamKKiJo del
Prosontación dol antfQono
Producción do dtodnaft:
L -1.TN F -U . IL-6. IL-12

Inflamación y fiebre

Citocinas ptógortas y do faso aguda: IL-6. TNF-u. IL-1

Mediadores ProstagiafKfnas
y proteínas Factores del complemenlo
secretadas A ctores de la coagulaciún
Quimtodnas

Citocinas puonto IL-23, IL-12

Actividad antimicrDbtana

Fagocitosis Reparación tisular


Dependiente del oxígeno;
Fagocitosts
H^Oj. P í ,NO, OH, Factores ar>giógenos
hipohaluro
Factores estimuladores del fibrotjiasto
lr>dopondk>nto doi oxítono:
02
ll» im a. Acido, hidrolasas Acktos.
Elastasa. coiagenasa. hialuronidasa,

póplidos catiónico». protoasas


Ouimiocir\as
Actividad antitumoral Promoción do( tumor
FactorM tóxico». HaO;. 9
Factores ar>gió onos
protoasas, argiruisa. NO. Factores ostirTMjIadoros del fibroblasto
T N F -«. acción ototóxica Melaloproteinasas

M acrófagos M2

F ig u ra 8 - 4 Las m uchas funciones de los m acrófagos y de los m iem bros d e la familia del macrófago. peróxido d e hidrógeno; IF N -y, interfe-
rón y ; IL, interleucina; N O , óxido nítrico; 0 ~ , radical de oxígeno; -OH, radical hidroxilo; TH, (linfocito) T cooperador; TNF-a, factor d e necrosis tumoral a.
(De Roitt I y cois,: Im m u n o lo g y , 4.a ed. St., Louis, 1996, Mosby.)

mueren rápidamente en el tejido y se convierten en pus en tumorales. Los macrófagos activados de form a alternativa
la zona de infección. (macrófagos M 2 ) se activan gracias a las citocinas relaciona­
das con los T H 2, IL-4 e IL -I3 , y apoyan las respuestas anti­
Células del linaje monocíto-nnacrofágíco parasitarias, promueven la reestructuración de los tejidos y
Los macrófagos maduran a partir de los monocitos sanguí­ fomentan la reparación de la herida. La estimulación continua
neos y, como los neutrófilos, están decorados con receptores (crónica) de los macrófagos por los linfocitos T, como en el
para opsoninas con el fin de promover la fagocitosis de los caso de una infección micobacteriana no resuelta, promueve
microbios, receptores para los PAMP [v. más adelante] para la fusión de los macrófagos en células multinucleadas gigan­
iniciar la activación y la respuesta, receptores para citocinas tes y grandes macrófagos llamados células epitelioides que
para promover la activación de los macrófagos y proteínas del rodean la infección y forman un granuloma.
M H C II para presentar el antígeno a los linfocitos T C D 4
Células dendríticas inmaduras y células
(fig. 8 -4 ). Al contrario que los neutrófilos, los macrófagos
viven más, deben activarse para matar a los microbios fagoci- dendríticas
tados, pueden dividirse y permanecen en la zona de infección Las C D constituyen un puente entre las respuestas inmuni-
o inflamación. tarias innatas y las adaptativas. Las citocinas que producen
Los macrófagos pueden activarse con IFN -7 (activación determinan la naturaleza de la respuesta del linfocito T. Los
clásica) producido por los linfocitos N K y los linfocitos T monocitos y los precursores de las C D mielocíticas circulan
C D 4 y C D 8 com o parte de la respuesta T H I y entonces en la sangre y después se diferencian en C D i en el tejido y los
son capaces de matar a las bacterias fagocitadas. A éstos se órganos linfáticos. Las C D i son fagocíticas y tras activarse con
les llama m a cr ó fa g o s M I . Los m acrófagos M I activados las señales de peligro liberan un sistema de alarma temprano
producen citocinas, enzimas y otras moléculas para promover mediado por citocinas y después maduran en C D . Las C D
la función antimicrobiana (cuadro 8-2). También refuerzan las maduras son la última célula presentadora de antígeno, la
reacciones inflamatorias locales al producir varias quimiocinas última célula de este tipo que puede iniciar una respuesta de
que atraigan a los neutrófilos, las C D i, los linfocitos N K y linfocitos T específica frente al antígeno (cuadro 8-3). Estas
los linfocitos T activados. La activación de los macrófagos células expresan diferentes combinaciones de detectores de
les convierte en los destructores más eficaces de los micro­ peligro que pueden percibir el traumatismo tisular (trifosfato
bios fagocitados, las células infectadas por virus y las células de adenosina [ATP], adenosina, especies reactivas del oxíge-
52 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Productos secretados de los macrófagos Células dendrítícas (CD)


con un efecto protector sobre el cuerpo
M ielocítícas y linfocíticas
Citocinas de fase aguda: IL-6, TN F-a e IL-1 (pirógenos Forma: de pulpo con tentáculos
endógenos) Actividades
Otras citocinas: IL-12, GM-CSF, G-CSF, M-CSF, IFN-a C D inmadura
Factores citotóxicos En sangre y tejido
Metabolitos del oxígeno Detectores de peligro, fagocitosis y producción
Peróxido de hidrógeno de citocinas, procesamiento del antígeno
Anión superóxido C D madura
Óxido nítrico En tejidos linfocíticos (aumento de MHC II
y moléculas B7-1 y B7-2)
Enzimas hidrolíticas
En zonas de linfocitos T del ganglio linfático, procesa
Colagenasa
y presenta el antígeno para iniciar la respuesta del
Lipasa linfocito T
Fosfatasa MHC I-péptido: linfocitos T C D 8
Componentes del complemento CDl-glucolípidos: linfocitos T C D 8
C1 a C 5 MHC Il-péptido: linfocitos T CD4
Properdina Activa linfocitos T vírgenes y determina la respuesta
Factores B, D, H e I a través de citocinas específicas
Factores de la coagulación La producción de citocinas dirige la respuesta T
Proteínas plasmáticas cooperadora
Metabolitos del ácido araquidónico I CD foliculares
Prostaglandina En zonas de linfocitos B de los tejidos linfoides (Fe y
Tromboxano receptores para el complemento C R l, CR2 y CR3,
Leucotrienos falta de MHC II)
Presentación del antígeno pegado a la membrana de los
G-C Sf- factor estimulante de colonias de granulocitos; linfocitos B
GM -CSF, factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos;
IF N -a , interferón a ; IL , interleucina; M-CSF, factor estimulante M H C , complejo principal de histocompatibilidad.
de colonias de macrófagos; T N F -a, factor de necrosis tumoral a .

receptores para el complemento para la CCD A y receptores


no [ROS], protemas del choque térmico) y la infección, incluidos inhibidores y activadores específicos N K (incluidos recepto­
los receptores del tipo toü y otros receptores (v. más adelante). res NK inmunoglobulínicos [KIR]). Los linfocitos NK activados
producen IFN -7 , IL -I y factor estim ulante de colonias de
Línfocitos citolíticos espontáneos, línfocítos T 7/3
granulocitos y macrófagos (G M -C S F ). Los gránulos en el
ylinfocItosNKT linfocito N K contienen perforina, una proteína formadora de
Los linfocitos N K son células linfocíticas innatas (IL C ) que poros, y granzimas (esterasas), que son similares al contenido
proporcionan una respuesta celular temprana a la infección de los gránulos de un linfocito T citotóxico (CTL) C D 8 . Estas
vírica, tienen actividad antitum oral y amplifican las reac­ moléculas promueven la m uerte de la célula diana.
ciones inflamatorias después de la infección bacteriana. Los El linfocito N K ve a todas las células como posibles víc­
hnfocitos N K también son responsables de la citotoxicidad timas, especialmente aquellas que parecen estresadas, a no
celular dependiente de anticuerpos (C C D A ) en la que se ser que reciba una señal inhibidora de ella. Los linfocitos NK
unen a células cubiertas de anticuerpos y las matan. Los interactúan estrechamente con la célula diana uniéndose a los
linfocitos N K son linfocitos granulares grandes (LG L) que glúcidos y las proteínas situadas en la superficie celular. La
comparten muchas características con los linfocitos T, excep­ interacción de una molécula de la clase I del M H C situada
to el mecanismo de reconocimiento de la célula diana. Los en la célula diana con un receptor inhibidor K IR es como
linfocitos N K no expresan un receptor del linfocito T (TCR, la comunicación de una clave secreta, que le indica que es
del inglés T-cell receptor) ni C D 3 y no pueden producir IL-2. normal y le proporciona una señal inhibidora para impedir su
Tampoco reconocen ningún antígeno específico ni requieren efecto citolítico. Las células infectadas por virus y las células
la presentación del antígeno por las moléculas del M H C. El tumorales expresan «receptores relacionados con el estrés» y
sistem a N K no genera m em oria ni precisa sensibilización a menudo carecen de moléculas del M H C I y se convierten
y tampoco puede potenciarse mediante una inmunización es­ en dianas de los linfocitos NK. La unión del linfocito N K a
pecífica. las células diana cubiertas de anticuerpos (C CD A ) también
Los linfocitos NK se activan con 1) IF N -a e IFN-(3 (pro­ inicia su proceso mortal, pero esto no está controlado por
ducidos pronto en respuesta a las infecciones víricas y de otro una señal inhibidora. Los m ecanismos citolíticos son simi­
tipo), 2) T N F -a, 3) IL -12, IL -I5 e I L - I 8 (producidos por lares a los de los C T L. Se forma una sinapsis (hueco) entre
pre-CD y macrófagos activados) y 4) IL-2 (producida por lin­ el lin focito N K y la célula diana y se liberan perforina y
focitos T H I C D 4 ). Los linfocitos N K expresan muchos de granzimas que rompen la célula diana e inducen la apoptosis.
los marcadores de superficie celular de los linfocitos T (p. ej., Además, la interacción de FasL situado en el linfocito NK
C D 2, C D 7, receptor para la IL-2 [IL-2R] y FasL [ligando de con la proteína Fas situada en la célula diana también puede
Fas]) pero también el receptor para el Fe de la IgG (C D 1 6 ), inducir la apoptosis.
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

Otras IL C se parecen a los linfocitos T C D 4 y producen CUADRO 8-4


citocinas para regular las respuestas epiteliales y linfocíticas.
Las ILC recubren el interior del epitelio intestinal y producen Receptores para el patrón de m icroorganismos
citocinas para regular su producción de defensinas así como patógenos (PPR)
las respuestas del linfocito T frente a la microbiota intestinal y
Los PPR son receptores para estructuras microbianas.
facilitar las protecciones frente a los parásitos helmintos. Los
Los PPR activan la defensa contra infecciones
errores en su función se asocian a enfermedades inflamatorias
extracelulares e intracelulares.
intestinales.
1. Receptores del tipo toll (TLR): proteínas
Los linfocitos NICT y los linfocitos T 7/8 residen en los
transmembranarias en membrana celular o endosomas
tejidos y en la sangre y difieren de los otros linfocitos T en
que se unen a estructuras o ácidos nucleicos de
que tienen un repertorio limitado de receptores del linfoci­
diferentes microbios
to T. Al contrario que otros linfocitos X los linfocitos NKT y
TLR que se unen a lípidos*: 1, 2, 4, 6 , 10
T 7/8 detectan antígenos no peptídicos, como los glucolípidos
bacterianos (micobacterias) y los metabolitos amino fosfori- TLR que se unen a ácidos nucleicos: 3, 7, 8 , 9
lados procedentes de algunas bacterias [E scherichia coli, m i­ TLR que se une a proteínas: 5
cobacterias} pero no de otras (estreptococos, estafilococos). 2. Receptores del tipo NOD (NLR): receptores
Estos linfocitos T y los linfocitos N K producen IFN -7 , que citoplásmicos que se unen a peptidoglucano
activa a los macrófagos y las C D para reforzar un ciclo T H l 3. Receptores de lectina del tipo C (CLR): receptores
p rotector de citocinas y reacciones inflamatorias celulares transmembrana para glúcidos
locales. Los linfocitos N KT tam bién expresan receptores 4. Receptores similares a RIG-1 (RLR): receptores
del linfocito NK. citoplásmicos para ácido nucleico
5. Receptores NALP3: receptores citoplásmicos que se
unen a ADN, ARN y peptidoglucano
A c t i v a c ió n de r espu est a s c elu la res
6. AIM2: receptores citoplásmicos para ADN microbiano
INNATAS
A IM 2, falta en melanoma 2; N A L P 3, proteína que contiene Nacht,
Las células de la respuesta innata se activan por la interacción repetición rica en leucina y dominio pirina 3; N O D , dominio
directa con estructuras repetitivas externas y el ácido desoxi- de oligomerización Hgador de nucleótidos; R IG -1 , gen inducible
rribonucleico [ADN] y el ácido ribonucleico (ARN) de los por ácido retinoico 1.
microbios. Más tarde, sus funciones son potenciadas, supri­ *También puede unirse a proteínas.
midas y reguladas por los linfocitos T y las citocinas generadas
por ellos. Estas células expresan diferentes combinaciones
de detectores de peligro para la infección microbiana y el y los lisosomas pueden activar también la formación del in­
traumatismo celular, incluidas la familia de proteínas T L R , flamasoma. El inflamasoma activa la caspasa 1 -proteasa, que
así como otros receptores. Los TLR comprenden al menos 10 después escinde, activa y promueve la liberación de IL-1(3
proteínas de superficie celular e intracelular diferentes que e IL-18. Estas citocinas activadas promueven la inflamación
detectan la presencia de la infección microbiana al unirse a local. El inflamasoma activado tam bién puede iniciar una
patrones característicos situados dentro de moléculas pre­ muerte celular similar a la apoptosis de las células que sufren
sentes en el exterior de las bacterias, los hongos y los virus, infecciones bacterianas intracelulares.
e incluso a formas de A D N y ARN de estos m icrobios; a
éstos se les suele denominar patrones moleculares asociados Quimiotaxis y migración del leucocito
a m icroorganism os patógenos (PA M P ) (cuadro 8 -4 ; ta ­ Los factores quim iotácticos producidos en respuesta a la
bla 8-2; fig. 8-5). Estos patrones están presentes dentro del infección y las respuestas inflamatorias, como los componen­
com ponente endotoxina del lipopolisacárido (LPS) y en el tes del complemento (C3a, C 5a), los productos bacterianos
ácido teicoico, los glucanos micóticos, las unidades citosina- (p. ej., formil-metionil-leucil-fenilalanina [f-m et-leu-fe]) y
guanosina sin metilar del ADN (oligodesoxinucleótidos CpG las quim iocinas, son sustancias quim iotácticas poderosas
[O D N ]) que se encuentran con frecuencia en las bacterias, el para los neutrófilos, los macrófagos y, en fases posteriores
ARN bicatenario producido durante la replicación de algunos de la respuesta, los linfocitos. Las quimiocinas son proteí­
virus y otras moléculas. Los d etectores citoplásm icos del nas pequeñas similares a citocinas que dirigen la migración
peptidoglucano bacteriano son la proteína de dominios de de los leucocitos. La mayoría de las quim iocinas son C C
oligomerización ligadora de nucleótidos 1 (N O D l), N O D 2 (cisteínas adyacentes) o C X C (cisteínas separadas por un
y la criopirina y, para los ácidos nucleicos, R IG -1 , el gen aminoácido). Las quimiocinas se unen a receptores acoplados
asociado a la diferenciación del melanoma 5 (M D A 5), etc. a la proteína G específicos fren te a citocinas con una es­
La unión de los PAMP a los T L R y otros PA M P R activa tructura similar. Las quimiocinas pueden reclutar linfocitos
proteínas adaptadoras que desencadenan cascadas de cinasas y leucocitos en las zonas de infección o inflamación o en
de proteínas y otras respuestas que dan lugar a la activación diferentes lugares del ganglio linfático. Las quimiocinas es­
de la célula y a la producción de citocinas específicas. Es­ tablecen una «pista de aterrizaje» con luces químicas para
tas citocinas pueden incluir la IL-1 y el T N F -a, la IL-6 , los guiar a estas células hasta la zona de una infección y también
interferones a y (3 y varias quimiocinas. activarlas. Las quimiocinas, la IL-1 y el TNF-cx hacen que
La inflamación local también la promueve el inflamasoma las células endoteliales que recubren los capilares (cerca
(fig. 8-6). El inflamasoma es un complejo multiproteínico pre­ de la inflamación) y los leucocitos que pasan por ellas ex ­
sente en las células epiteliales, las C D , los macrófagos y otras presen moléculas de adhesión com plem entarias («velero»
células y se activa a través de varias proteínas adaptadoras molecular). Los leucocitos se desaceleran, ruedan, se unen
en respuesta a los PAMPR, el daño tisular o indicaciones de al recubrim iento y se extravasan a través (es decir, pasan a
infección intracelular. Las proteasas liberadas por la punción través) de la pared capilar hasta la zona de inflamación, un
con cristales de ácido úrico (gota) o amianto de los fagosomas proceso llamado d ia p éd esis (fig. 8-7).
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Tabla 8-2 Receptores para patrones de m icroorganism os patógenos


Activadores microbianos
Superficie celular
TLR1 Bacterias, micobacterias Lipopéptidos
Neissería m enin g itid is Factores solubles
TLR2 Bacterias LTA, LPS, PG, etc.
Hongos Zimosán
Células Células necrosadas
TLR4 Bacterias, parásitos, proteínas del hospedador LPS, mananos micóticos, glucoproteínas víricas, fosfolípidos de
Virus, parásitos, proteínas del hospedador parásitos, proteínas de choque térmico del hospedador, LDL
TLR5 Bacterias Flagelina
TLR6 Bacterias LTA, lipopéptidos, zimosán
Hongos
Lectinas Bacterias, hongos, virus Glúcidos específicos (p. ej., mañosa)
Receptor para /V-formil metionina Bacterias Proteínas bacterianas
Endosoma
TLR3 Virus ARN bicatenario
TLR7 Virus ARN monocatenario
Imidazoquinolinas
TLR8 ARN monocatenario
Imidazoquinolinas
TLR9 Bacterias ADN sinmetilar(CpG)
Virus
Citoplasma
N0D1,N0D2, NALP3 Bacterias Peptidoglucano
Criopirina Bacterias Peptidoglucano
RIG-1 Virus ARN
MDA5 Virus ARN
DAI Virus, ADN citoplásmico ADN

ActivadoresMOA/, ácido desoxirribonudeico;/4/?A/¿»c, ARN bicatenario; D/4/, activador dependiente del ADN de los factores reguladores del interferón; LDL, lipoproteína
de densidad baja con modificación mínima; LPS, lipopolisacárido; LTA, ácido lipoteicoico; MDA5, gen asociado a fa diferenciación del melanoma 5; NALP3, proteí­
na que contiene Nacht, repeticiones ricas en leucina y un dominio pirina 3;N 0D , dominios de oligomerización ligadores de nucléotidos;PG, peptidoglucano;/?/^-/, gen
inducible por el ácido retinoico 1; TLR, receptor del tipo toll.
•Información sobre los receptores deltipoío//deTakeda A, KaishoT, Akira S:Toll-like receptors,/4nnu/i’ev/mmuno/21335-376,2003;yAkira S,Takeda K:Toll-like receptor
signalling, N at Rev Im m u no l 4:499-511,2003.

GP AON ARN

im iiM nP». TIR 3, T U » ,


HALP3 7/«: NALP3
N 0 (»
NALP
T L f» .
NALP3
NOO?.
NAU>
NALP3. t/3 t<9
RIO-t.
MOAS

F ig u ra 8 - 5 Reconocim iento de los patrones m oleculares asociados a microorganism os patógenos. Las estructuras m icrobianas, el ARN y el ADN
se unen a receptores específicos situados en la superficie celular, en las vesículas o en el citoplasma para a ctiva rlas respuestas innatas. flagelina;
GP, glucoproteínas; GPI, proteínas ancladas a fosfatidilinositol;£P, lip op ro teínas;¿PS, lipopolisacárido; ¿ M , ácido lipoteicoico; AÍD/\5, gen asociado a
diferenciación del melanom a 5; N A LP 3, proteína q ue contiene Nacht, repetición rica en leucina y dom inio pirina 1/3; N 0 D 2 , proteína de dom inios de
oligomerización ligadores de nucleótidos 2;P G , peptidoglucano;/?/6 -/, proteína d e gen inducible con ácido retinoico ];T L R 9 , receptor del tipo t o ll 9.
(Modificado de MogensenTH: Pathogen recognition and inflammatorysignaling in innate ifD m une óefenses, Q in M ic ro b io !R e v 2 2 :2 4 0 -2 7 3 ,2009.)

Respuestas fagocítícas creciente de neutrófilos en la sangre, en los líquidos corporales


Los neutrófilos polimorfonucleares [PMN), los monocitos y en (p. ej., el líquido cefalorraquídeo) o en los tejidos indica una
ocasiones los eosinóíilos son las primeras células en llegar a la infección bacteriana. La movilización de neutrófilos se acompaña
zona en respuesta a la infección; son seguidos después por los ma- de una «desviación a la izquierda», un aumento del número de
crófagos. Los neutrófilos proporcionan una importante respuesta cayados inmaduros liberados de la médula ósea [ i z q u i e r d a se
frente a las bacterias y contribuyen a la inflamación. Un número refiere al comienzo de un gráfico de desarrollo del neutrófilo).
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

F ig u ra 8 - 6 Inducción de respuestas inflamatorias. Los receptores para los patrones moleculares asociados a microorganismos patógenos y las señales de
peligro (receptores para patrones moleculares asociados a la lesión) situados en la superficie celular, en las vesículas y en el citoplasma 1 ) activan cascadas
de señales que 2) producen proteínas adaptadoras qu e 3) activan las respuestas inflamatorias locales. Las proteínas adaptadoras inician el ensamblaje del
inflamasoma y tam bién desencadenan la transcripción de citocinas. Las citocinas activan las respuestas innatas y prom ueven las respuestas específicas
de antígeno. Además, los materiales cristalinos lisan a los lisosomas, lo qu e libera proteasas que escinden a los precursores para iniciar el ensamblaje y
la activación del inflamasoma y prom over la inflamación. TP, trifosfato de a d en o sina;F¿,flag elin a;H 5 P, proteína del choque t é r m ic o ;in t e r le u c in a ;
LPS, lipopolisacárido; LTA, ácido lipoteicoico; NO D , proteína d e dom inios de oligomerización ligadores de nucleótidos; RIG-1, proteína del gen inducible
por ácido retinoico 1; ROS, especies reactivas del oxígeno; TLR, receptor del tipo to ll; TN F-a, factor d e necrosis tumoral a .

La fagocitosis de bacterias por los macrófagos y los neu- mensajera im portante (como el m onofosfato de adenosina
trófilos se produce en tres pasos: unión, interiorización y diges­ cíclico [AM Pc]) que potencia las respuestas inflamatorias y
tión. La unión de las bacterias al macrófago está mediada por de otros tipos.
receptores para los glúcidos bacterianos (lectinas [proteínas El neutrófilo tam bién puede mediar la acción citolítica
ligadoras de azúcares específicos]), receptores para la fibro- independiente del oxígeno tras la fusión del fagosoma con
nectina (especialmente para Staphylococcus aureus) y recep­ los gránulos azurófilos que contienen proteínas catiónicas
tores para las opsoninas, incluidos el complemento (C 3b), (p. ej., catepsina G ) y gránulos específicos que contienen
la proteína ligadora de mañosa y la porción Fe del anticuerpo. hsozima y lactoferrina. Estas proteínas matan a las bacterias
Tras la unión, una sección de la membrana plasmática rodea a gramnegativas al romper la integridad de su membrana celu­
la partícula, que forma una vacuola fagocítica alrededor del lar, pero son con diferencia mucho menos eficaces frente a
microbio. Esta vacuola se fusiona con los lisosomas primarios las bacterias grampositivas, que mueren sobre todo a través
[macrófagos] o con los gránulos (PMN] para permitir la inac­ del mecanismo dependiente del oxígeno.
tivación y digestión del contenido de la vacuola. Los neutrófilos contribuyen a la inflamación de varias for­
La acción citolítica fagocítica puede depender del oxígeno mas. Se liberan prostaglandinas y leucotrienos, que aumentan
o no, en función de las sustancias químicas antimicrobianas la permeabilidad vascular y producen tumefacción (edema)
producidas por los gránulos [fig. 8-8). Los neutrófilos no ne­ y estim ulan los receptores del dolor. Además, durante la
cesitan ninguna activación especial para matar a los microbios fagocitosis, los gránulos pueden perder parte de su contenido
interiorizados, pero su respuesta se ve reforzada por actividades y producir lesiones. Los neutrófilos tienen vidas cortas y los
mediadas por la IL -17. La activación de los macrófagos la pro­ neutrófilos muertos producen pus.
mueven el IFN-^ (el mejor) y el GM -CSF, que son producidos Los macrófagos en reposo son fagocíticos e interioriza­
pronto en la infección por los linfocitos NK y NKT o más tarde rán los microbios pero no tienen gránulos preformados de
por los linfocitos T C D 4, y la mantienen el T N F-a y la linfo- moléculas antimicrobianas para matarlos. La activación del
toxina (TN F-p). Es necesaria la activación de los macrófagos m acrófago por el IF N -7 , que «enfada» a los macrófagos,
para que los macrófagos maten a los microbios intracelulares. promueve la producción de la óxido nítrico-sintasa inducible
La acción citolítica dependiente del oxígeno se activa (iN O S) y óxido nítrico, otras RO S y enzimas antimicrobianas
m ediante un poderoso estallido oxidativo que culmina en para matar a los microbios interiorizados. Los macrófagos
la formación de peróxido de hidrógeno y otras sustancias activados tam bién producen citocinas de fase aguda (IL-1,
antimicrobianas (RO S) [cuadro 8-5). En el neutrófilo, pero IL-6 y T N F -a) y posiblemente IL -23 o IL-12. La infección
no en el macrófago, el peróxido de hidrógeno con mieloper- intracelular puede producirse después de la infección de un
oxidasa (liberada por los gránulos primarios durante la fusión macrófago en reposo o si el microbio puede contrarrestar las
al fagolisosoma) transform a los iones cloro en iones hipo- actividades antimicrobianas de un macrófago activado.
clorosos que matan a los microorganismos. El óxido nítrico Además de los macrófagos tisulares, los macrófagos es-
producido por los neutrófilos y los macrófagos activados tiene plénicos son importantes para eliminar bacterias, en especial
actividad antimicrobiana y también es una molécula segunda bacterias encapsuladas, de la sangre. Los sujetos asplénicos (de
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

ünfodto NK
Macrólago

Neutrófik)

F ig u ra 8 - 7 A y B, Diapédesis del neutrófilo en respuesta a señales inflamatorias. El factor de necrosis tumoral a (TNF-a) y las quimiocinas activan la
expresión de selectinasy m oléculas de adhesión intercelular en el endotelio cercano a la inflamación y sus ligandos en el neutrófilo: integrinas, selectina L
y antígeno asociado a la función del leucocito 1. El neutrófilo se une progresivamente más fuerte al endotelio hasta que encuentra su cam ino a través
d e él. Las células epiteliales, las células de Langerhans y los macrófagos activados por los microbios y el interferón 7 (IFN~y) sintetizan TNF-a y otras
citocinas y quimiocinas para fom entar la diapédesis. ¡L, interleucina; NK, citolítico espontáneo. (A, de Abbas AK, Lichtman AH: Basic immunology.functions
and disorders o fth e im mune system, 3.® ed., Filadelfia, 2008, W B Saunders.)

forma congénita o quirúrgica] son muy proclives a la neumonía,


la meningitis y otras manifestaciones de Streptococcus pneumo-
niae, N eisseria meningitidis y otras bacterias encapsuladas.

Respu esta s a s o c ia d a s a l a m ic r o b io t a

NORMAL
La microbiota normal de la piel, los orificios nasales, la región
oral, urogenital y el tubo digestivo estimula constantemente
respuestas innatas. Los PAMPR de las células del intestino

Compuestos antibacterianos del fagolisosoma

Compuestos dependientes del oxígeno


Peróxido de hidrógeno: NADPH-oxidasa y NADH-oxidasa
Superóxido
Radicales hidroxilo (-OH")
Haluros activados (Cl", I", Br"): mieloperoxidasa
(neutrófilo)
Óxido nitroso
Compuestos independientes del oxígeno
Ácidos
Lisosoma (degrada peptidoglucano bacteriano)
Lactoferrina (quelante del hierro)
Defensinas y otras proteínas catiónicas (dañan las
F ig u ra 8 -8 Fagocitosis y m uerte de las bacterias. Las bacterias se unen membranas)
directam ente o son opsonizadas por la proteína ligadora de mañosa, la
inmunoglobulina G (IgG) o los receptores para el C3b, lo q ue prom ueve su
Proteasas: elastasa, catepsina G
adherencia y captación por fagocitos. Dentro del fagosoma, los m ecanis­
mos dependientes e independientes del oxígeno m atan y degradan a las N A D H , dinucleótido nicotinamida adenina reducido;
bacterias. AM£?PH,dinucleótido fosfato de nicotinamida adenina reducido. N A D PH , dinucleótido fosfato de nicotinamida adenina reducido.
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

ven continuamente LPS, ácido lipoteicoico (ALT), flagelos y comparte muchas de las actividades del TN F-a para promover
otros componentes de las bacterias dentro de la luz. Se man­ las respuestas inflamatorias locales y sistémicas. Al contrario
tiene un equilibrio entre las respuestas innatas reguladoras y que el TN F-a, la IL-1 no puede inducir la apoptosis y promo­
sus estímulos microbianos. La interrupción del equilibrio por verá, aunque de forma insuficiente, el shock séptico. La IL-6
una alteración de las especies microbianas con un tratamiento la producen muchos tipos de células, promueve la síntesis
antibiótico o la ruptura de las respuestas innatas e inmunita- hepática de proteínas de fase aguda, la producción de neu­
rias puede dar lugar a una enfermedad inflamatoria intestinal, trófilos en la médula ósea y la activación de los linfocitos T y B.
una enfermedad autoinmunitaria o una gastroenteritis. La IL-23 y la IL-12 son citocinas que establecen un puente
entre las respuestas innatas e inmunitarias. Ambas citocinas tiene
In f l a m a c ió n dos subunidades, una subunidad p40 y otra p35 en el caso de la
IL-12 y p l9 en el caso de la IL-23. La IL-23 promueve las res­
Citocinas proínflamatorias puestas T H l 7 a partir de linfocitos T memoria, lo que aumenta la
acción del neutrófilo. La IL-12 promueve la función del linfoci-
Las citocinas proinflamatorias, llamadas a veces c itocin a s
to NKy es necesaria para promover una respuesta inmunitaria T H l,
d e fa s e agu da, son la IL -1, el T N F -a y la IL-6 (tabla 8-3 ).
que potencia las funciones de los macrófagos y de otras células
Estas citocinas las producen los macrófagos activados y otras
mielocíticas. Estas citocinas se expondrán con mayor detalle al
células. La IL-1 y el T N F -a comparten propiedades. Ambas
hablar de sus acciones sobre los linfocitos T. La IL-18 la producen
citocinas son pirógenos endógenos capaces de estimular la
los macrófagos, debe ser escindida por el inflamasoma a una
fiebre; promueven reacciones inflamatorias locales y la síntesis
forma activa y promueve la función de los linfocitos N K y T.
de proteínas de fase aguda.
El T N F -a es el último mediador de la inflamación y los Inflamadón aguda
efectos sistémicos de la infección. El T N F -a estimula a las
células endoteliales para que expresen moléculas de adhesión La inflamación aguda es un mecanismo de defensa temprano
y quimiocinas para atraer leucocitos a la zona de infección, que contiene la infección, impide su propagación desde el foco
activar a los neutrófilos y los macrófagos y promover la apop- inicial y activa las respuestas inmunitarias consiguientes. Al
tosis de ciertos tipos de células. A nivel sistém ico, el TN F principio, la inflamación puede desencadenarse por la respuesta
actúa sobre el hipotálamo para inducir fiebre, puede producir a señales de peligro resultado de la infección y el daño tisular
cambios metabólicos sistémicos, pérdida de peso (caquexia) y después puede mantenerse o potenciarse con citocina y el
y pérdida de apetito y aumentar la producción de IL-1, IL-6 estímulo por el linfocito T de respuestas celulares adicionales.
y quimiocinas y promueve la síntesis hepática de proteínas Los tres principales acontecim ientos en la inflamación
de fase aguda. A elevadas concentraciones, el T N F -a desen­ aguda son 1) expansión de capilares para incrementar el flujo
cadena todas las funciones que conducen al shock séptico. sanguíneo (lo que provoca enrojecimiento o exantema y libera
Hay dos tipos de IL -1, la I L - I a y la IL-I|3. La IL -I la calor); 2 ) increm ento de la permeabilidad de la estructura
producen sobre todo los macrófagos activados y también los microvascular para permitir que escape líquido, protemas plas­
neutrófilos, las células epiteliales y las endoteliales. La IL-1 (3 máticas y leucocitos de la circulación (tumefacción o edema);
debe ser escindida por el inflamasoma para activarse. La IL-1 y 3) reclutamiento de neutrófilos y su acumulación y respuesta

Tabla 8-3 Citocinas de la Inm unidad Innata (FDAD)*


Desencadenante Acción
Macrófagos, linfocitos T PAMP, inflamación Respuestas de fase aguda, promueve Células endoteliales,
inflamación, fiebre, síntomas de neutrófilos, macrófagos,
septicemia, caquexia, alteración del hipotálamo, hígado,
tono muscular, apoptosis (algunas músculo, otras células
células)
IL-1 {a, p escindida) Macrófagos, células endoteliales PAMP, inflamación Respuestas de fase aguda, promueve Células endoteliales,
y algunas epiteliales/ inflamación, fiebre, apoya síntomas hipotálamo, hígado y
inflamasoma (IL-1p) de septicemia, síntesis de proteínas otras células
de fase aguda
Macrófagos, células PAMP, inflamación Respuestas de fase aguda, refuerza Macrófagos, células
endoteliales, linfocitos T respuestas de fase aguda, endoteliales, linfocitos T
estimulación de linfocitosTyB
IFN del tipo 1 (a, p) La mayoría de las células, células Infección vírica Inhibe replicación del virus, activa Células infectadas por virus,
dendríticas plasmacitoides (especialmente linfocitos NK, potencia respuesta linfocitos NK, linfocitos T
virus ARN) inmunitaria
Macrófagos, células dendríticas, PAMP, inflamación, Quimiotaxis, dirección de células a Leucocitos, linfocitos,
otras muchas células C5a, TNF-a infección/inflamación células endoteliales y
otras células
IL-12 (p70) Células dendríticas, macrófagos PAMP Promueve respuesta inmunitaria THl, Linfocito NK, linfocito T
activa linfocito NK
IL-23 Células dendríticas, macrófagos PAMP Promueve respuesta TH17 Linfocito T
IL-18 (escindida) Macrófagos/inflamasoma PAMP, inflamación Promueve producción de IFN-7 Linfocitos NK, linfocitos T
IFN del tipo II (7 ) Linfocitos NK, linfocitos T IL-18, IL-12 Potencia actividad antimicrobiana, Macrófagos, células
(respuestas T H l) producción de óxido dendríticas, linfocitos B, etc.
nítrico-sintetasa inducible, otros

IFN, interferón; IL, interleucina; NK, citolítico espontáneo; PAMP, patrón molecular asociado a microorganismos patógenos; TH, (linfocito) T cooperador: TNF, factor de
necrosis tumoral.
*FDAD: acrónimo de la información esencial de cada citocina; fuente, Desencadenante,/Acción, Oiana.
^La tabla no incluye todas las fuentes, estímulos, actividades o dianas.
S 'i - M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 8-4 Mediadores de inflamación aguda y crónica

Proteínas de fase aguda


Inflamación aguda
Permeabilidad vascular Histamina, bradicinina, C3a, C5a, ai-Antitripsína
aumentada leucotrienos, PAF, sustancia P
ai-Glucoproteína
Vasodilatación Histamina, prostaglandinas, PAF, Amiloides A y P
óxido nítrico (NO)
Antitrombina III
Dolor Bradicinina, prostaglandinas Ceruloplasmina
Adhesión del leucocito Leucotrieno B4, IL-1, TNF-a, C5a Complemento C2, C3, C4, C5, C9
Quimiotaxis del leucocito C5a, C3a, IL-8 , quimiocinas, PAF, Fibrinógeno
leucotrieno B4 Haptoglobina
Respuesta de fase aguda IL-1,IL-6, TNF-a Inhibidor de fracción esterasa del C1
Dañotisular Proteasas, radicales libres, NO, Orosomucoide
contenido de gránulo del neutróñio Plasminógeno
Fiebre IL-1,TNF, prostaglandinas Proteína C-reactiva
Proteína ligadora de mañosa
Inflamación crónica
Proteína ligadora del lipopolisacárido
Activación de linfocitosT Citocinas del linfocito T (TNF, IL-17, IFN-7 )
Transferrina
ym acrófagosy y d e los macrófagos {IL-1, TNF-a, IL-23,
procesos de fase aguda IL-12)

IFN-y, interferón 7 ; !L, interleucina; PAF, factor activador de las plaquetas;


producción excesiva durante la septicem ia (inducida por
TNF, factor de necrosis tumoral.
De Novak R; Crash course im m unology, Filadelafia, 2006, Mosby. endotoxina) puede causar graves problemas, como el shock.

Septicemia y tormentas dtocínicas


a la infección en la zona de la lesión. Las respuestas inflamato­
Las tormentas citocínicas se generan por una liberación ma­
rias son beneficiosas pero se asocian a dolor, enrojecimiento,
siva de citocinas en respuesta a com ponentes de la pared
calor y tumefacción y también pueden provocar daño tisular.
celular bacteriana, en especial LPS, toxinas del shock tóxico y
Los mediadores de la inflamación se presentan en la tabla 8-4.
ciertas infecciones %áricas, en especial las viremias. Durante la
El daño tisular se debe hasta cierto punto al complemento
bacteriemia se producen grandes cantidades de complemen­
y los macrófagos pero sobre todo a los neutrófilos. Los neutró-
to C5a y citocinas y se distribuyen por todo el cuerpo (fig. 8-9).
filos muertos son el principal componente del pus. Las cininas
El C5a promueve la fuga vascular, la activación del neutrófilo
y los factores de la coagulación inducidos por el daño tisular
y la activación de la vía de la coagulación. Las C D plasmaci-
(p. ej., el factor X II [factor de Hageman], la bradicinina, los
toides de la sangre producen grandes cantidades de citocinas
fibrinopéptidos) también participan en la inflamación. Estos
factores aumentan la permeabilidad vascular y son quimio-
tácticos para los leucocitos. Los productos del metabolismo Bacttriat gramnvgaltvas
del ácido araquidónico también influyen en la inflamación. LPS
La ciclooxigenasa 2 (C O X -2) y la 5-lipoxigenasa convierten
el ácido araquidónico en prostaglandinas y leucotrienos,
respectivamente, que pueden mediar casi cualquier aspecto
de la inflamación aguda. El curso de la inflamación puede
seguirse de incrementos rápidos de proteínas de fase aguda,
en especial de la proteína C-reactiva (que puede aumentar
varios miles de veces en 24-48 horas) y del amiloide sérico A. SEPTICEMIA
Füga vascular on
Respuesta de fase aguda shock séptico
Fiebre
La respuesta de fase aguda la desencadenan la infección, la
Activación cM
lesión tisular, la prostaglandina E2, los interferones asociados r)eutrófik>
a la infección vírica, las citocinas de fase aguda (IL -I, IL -6 , SR IS
T N F -a) y la inflamación (cuadro 8-6). La respuesta de fase Insufidoocia
aguda promueve cambios que apoyan las defensas del hos- cardíaca
pedador y comprenden la fiebre, la anorexia, la somnolencia,
los cambios m etabólicos y la producción de proteínas. La
IL-1 y el T N F -a también son pirógenos endógenos porque
promueven la fiebre. Las proteínas de fase aguda que se pro­ F ig u ra 8 -9 Las bacterias gram positívas y gram negatívas inducen sep­
ducen y liberan al suero son la proteína C-reactiva, los com ­ ticemia por vías compartidas y separadas. Las superficies bacterianas y el
lipopolisacárido (LPS) activan el complemento, lo que produce C5a y facilita
ponentes del complemento, las proteínas de la coagulación,
la inflamación, activa la coagulación y produce el factor inhibidor d e la
las proteínas ligadoras del LPS, las proteínas de transporte, migración del macrófago (MIF) y la proteína del cuadro de alta m ovilidad 1
los inhibidores de proteasas y las proteínas de adherencia. La (H M G B 1), citocinas q ue p oten cian la inflam ación. El LPS, el ácido lipo-
proteína C-reactiva se une a los polisacáridos de numerosas teicoico (LTA) y otros patrones m oleculares asociados a microorganismos
bacterias y hongos y activa la vía del complemento, facilitan­ patógenos interactúan con receptores del tipo toUCTLR) y otros receptores
do la retirada de estos microorganismos del cuerpo por un para el patrón para activar la inflamación y la producción de citocinas proin-
flamatorias. Esto acom paña a la septicemia. O D , coagulación intravascular
aumento de la fagocitosis. La hepcidina inhibe la captación
disem inada; IL , interleucina; SRIS, síndrome de la respuesta inflamatoria
de hierro en el intestino y los macrófagos, y esto reduce su sistémica; TNF-a, factor de necrosis tumoral a . (Modificado de Rirtirsch D,
disponibilidad para los microbios. Las proteínas de fase aguda FlierI (VIA, Ward PA: Harmful molecular mechanisms in sep$\s,N atR evlm rrunol
refuerzan las defensas innatas contra la infección, pero su 8:776-787, 2008.)
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

infamatorias e IL -12 en respuesta a los PAMP bacterianos. después las C D transportan el antígeno e inician la respuesta
La endotoxina es un activador especialm ente po ten te de del linfocito T en el ganglio linfático. Las C D son clave para
las células e inductor de la producción de citocinas y de la la transición y determinan la naturaleza de la consiguiente
septicemia [v. íig. 14-4). Las tormentas citocínicas también respuesta (fig. 8 - 10).
pueden producirse tras un estímulo anómalo de los linfocitos T Las C D i están adquiriendo co n stantem en te m aterial
y de las células presentadoras de antígeno (C D , macrófagos antigénico mediante la macropinocitosis, la pinocitosis o la
y linfocitos B) por superantígenos producidos por S. aureus fagocitosis de células apoptósicas, restos y proteínas de tejidos
o Streptococcus pyogen es [v. íig. 14-3). Durante la viremia, normales y en la zona de infección o tumor. Tras la activación
las C D plasmacitoides y los linfocitos T producen grandes de las C D i m ediante los PAM PR en respuesta a la in fec­
cantidades de IF N -a y otras citocinas. ción se liberan citocinas de fase aguda (IL -1, IL-6 y TNF-ot), la
El exceso de citocinas en la sangre puede inducir un es­ CD i madura en una C D y su función cambia. La C D pierde
tímulo inflamatorio por todo el cuerpo. Y lo que es más re­ su capacidad de fagocitar, lo que impide que adquiera material
levante, los aumentos de la permeabilidad vascular pueden antigénico irrelevante diferente a restos microbianos y pro­
dar lugar a una fuga de líquido desde el torrente sanguíneo gresa hasta el ganglio linfático. Por analogía, la C D i es como
hacia los tejidos y provocar un shock. El shock séptico es una una almeja, que sobrevive constantemente en su ambiente fil­
forma de torm enta citocínica y puede atribuirse a la acción trando alimento de restos celulares y microbianos [si los hay),
sistémica de grandes cantidades de T N F-a. pero cuando se activa por una señal de un TLR, que indica
que hay microbios, libera una alarma citocínica local, cierra su
concha y se mueve hacia el ganglio linfático para desencadenar
P u en te h a sta las r espu est a s una respuesta al desafío. La C D madura se mueve a las zonas
del linfocito T de los ganglios linfáticos y aumenta la expresión
INMUNITARIAS ESPECÍFICAS FRENTE ANTÍGENOS
de moléculas de superficie para presentar el antígeno [MHC
La respuesta innata a menudo es suficiente para controlar de la clase II y moléculas B 7 -I y B7-2 [coestimuladoras]}. Las
una infección pero tam bién inicia la inmunidad específica C D maduras activadas por el microbio liberan citocinas (p. ej.,
del antígeno. Primero, los componentes del complemento, IL -12), que activan las respuestas para reforzar las defensas
las citocinas, las quimiocinas y los interferones producidos locales del hospedador (respuestas T H I). Las C D presentan
durante la respuesta de fase aguda preparan a los linfocitos, el material antigénico unido a moléculas del M H C de la clase I

Captación Actrvadón

LintociloT
C04 CD25
F ig u ra 8 - 1 0 Las células dendríticas (CD) inician las respuestas inmunitarias. Las CD inmaduras interiorizan y procesan constantem ente proteínas,
restos y microbios, cuando están presentes. La unión de los com ponentes microbianos a los receptores del tipo toH (TLR) activa la maduración de las CD
de m odo que deja de interiorizar cualquier material nuevo; se desplaza al ganglio linfático, expresa el complejo principal de histocompatibilidad (MHC) II
y las m oléculas correceptoras B7 y B7-1 para presentar el an tígen o y produce citocinas para activar a los linfocitos T. La liberación d e la interleuci-
na (IL) 6 in hibe la liberación del factor de crecim iento transform ador |3 (TG F-^) y de la IL-10 por los linfocitos T reguladores. Las citocinas producidas
por las C D y s u interacción con los linfocitosTHO inician las respuestas inmunitarias. La IL-12 prom ueve las respuestasTHI, mientras que la IL-4 prom ueve
las respuestas TH2. La mayoría de los linfocitos T se divide para aum entar la respuesta pero algunos perm anecen com o células memoria. A las células
memoria puede activarlas la presentación del antígeno por parte de una CD, un macrófago o un linfocito B para una respuesta secundaria. IFN, interferón;
LPS, lipopolisacárido.
60 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

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sangre un bacilo gram negativo que no expresa oxidasa. sepsis, N a t R ev Im m unol 8 :7 7 6 -7 8 7 , 2008.
¿Qué desencadenó y está causando sus síntomas? Sompayrac L: H ow the im mune system w orks, ed 2, Malden, Mass, 2003,
4. Un hom bre de 45 años tiene un forúnculo en la mano. Se Blacicwell Scientific.
Takeda K, Kaisho T, Akira S: Toll-like receptors, A nnu R ev Im m un ol
aisló un coco gram positivo que expresa catalasa y coagulasa
2 1 :3 3 5 -3 7 6 , 20 0 3 .
d e l pus de la lesión. ¿Qué respuestas innatas se han activado Trends Im m unol: Issues contain understandable reviews on current topics
en esta infección? in immunology.

Las resp u estas a estas p re g u n ta s e s tán disp o n ib les en


w w w .S tu d e n tC o n s u it.e s
RESPUESTA S INNATAS DEL HO SPEDADO R

RESPUESTAS y activar la ayuda del linfocito T. Los macrófagos M2 se


desarrollan en presencia de IL-4, son también fagocíticos y
1. Vea la siguiente tabla: promueven la cicatrización y la angiogenia. Los macrófagos
pueden progresar de M I a M2, cambiando así su contribución a
Factor Acción
la resolución de la infección y el daño.
Péptidos antimicrobianos Muerte del microbio
Las CD son las únicas células que pueden iniciar una
Complemento: MAC Mata bacterias gramnegativas
respuesta inmunitaria al activara los linfocitos! vírgenes.
Complemento: C3b Opsonización
Las CDi también son un sistema de alarma temprano que
Complemento: C3d Activa a linfocitos B
libera citocinas y quimiocinas apropiadas al desencadenante
Complemento: fragmentos «a» Atracción, anafilaxis
microbiano, que facilitará otras protecciones del hospedador.
C3a,C4a,C5a________________
Las células de Langerhans son CD que residen en la piel que
Opsonización
también se mueven al ganglio linfático para activar a los
Proteína C-reactiva Opsonización
linfocitos T vírgenes. Las CD constituyen un puente entre la
Citocinas Activación de respuestas respuesta innata y la inmunitaria.
Quimiocinas Atracción de leucocitos 3. El lípido A (endotoxina) del LPS procedente de la
membrana externa de las bacterias entéricas (probablemente
2. Los neutrófilos abandonan la médula ósea prestos E. coli) en la sangre se une al TLR4 de los macrófagos y otras
para atacar. Los neutrófilos son fagocíticosy la principal células para activar la producción de citocinas de fase aguda
respuesta antibacteriana. Sus gránulos están llenos de sustancias (TNF-a, IL-1 e IL-6). El TNF-a y la IL-1 son pirógenos endógenos
antimicrobianas y enzimas que se liberan en los endosomas que promueven la producción de fiebre. Estas citocinas también
y salen de la célula tras la fagocitosis de un microbio. Son los inducen otros efectos sistémicos. Las bacterias también
primeros atraídos a la infección y tienen una semivida muy activarán las vías alternativa y de la lectina del complemento y
corta. Los macrófagos entran más tarde que los neutrófilos. los componentes «a» (C3a, C4a y C5a) también desencadenarán
Pueden ser residentes, o pueden madurar a partir de los respuestas inflamatorias sistémicas.
monocitos que entran en la zona de infección. Los macrófagos 4. La infección porS-aurei/s desencadena la liberación de
deben activarse con el IFN-7 y el TNF-a producidos por los péptidos bactericidas en las células epiteliales y otras células,
linfocitos NK o los linfocitos T para mantener su actividad la activación del complemento y la liberación de C3a y C5a
inflamatoria antimicrobiana (M I). Los macrófagos tienen una que actúan como sustancias quimiotácticas y anafilácticas
vida larga. Los macrófagos M I producen citocinas de fase para atraer neutrófilos y, después, macrófagos hacia la zona.
aguda, IL-12 y sustancias antibacterianas, como moléculas El LTA activará al TLR2 para promover la producción de TNF-a
reactivas del oxígeno, óxido nítrico y enzimas. Los macrófagos e IL-1 por los macrófagos que promoverán la inflamación. Los
también son células presentadoras de antígeno y utilizan neutrófilos muertos producen pus.
péptidos presentados en moléculas del MHCII para reclutar
Respuestas ¡nmunítarias específicas
9 frente a antígenos

T as respuestas inmunitarias específicas frente a antígenos humano y pueden inducir una respuesta inmunitaria. A una
i —íproporcionadas por los linfocitos T y los anticuerpos proteína o un glúcido que es suficiente para iniciar una res­
expanden las protecciones del hospedador ofrecidas por las puesta inmunitaria se le llama ¡nmunógeno (cuadro 9 -1). Los
respuestas innatas. El sistema inmunitario específico frente inmunógenos pueden contener más de un antígeno [p. ej.,
al antígeno es un sistema que se genera de manera aleatoria, bacterias). Un antígeno es una molécula reconocida por un
se regula de forma coordinada y es inducible y activable e anticuerpo específico o por el T C R de los hnfocitos T. Un
epítopo (determinante antigénico) es la estructura molecular
ignora las proteínas propias pero responde de forma especí­
real que interactúa con una sola molécula de anticuerpo o
fica a la infección y protege frente a ella. Cuando no actúa
un T C R . D entro de una proteína, un epítopo puede estar
adecuadamente, la respuesta inmunitaria puede quedarse sin
formado por una secuencia específica (epítopo lineal) o una
regulación, estimularse en exceso, descontrolarse, reaccionar estructura tridimensional (epítopo tridimensional). El T C R
frente a proteínas propias, no responder o responder de modo puede reconocer sólo epítopos lineales. Los antígenos y los
insuficiente a las infecciones y llegar a convertirse en causa inmunógenos suelen contener varios epítopos, cada uno capaz
de patogenia y enfermedad. Casi cualquier molécula puede de unirse a una molécula de anticuerpos o T C R distinta. C o­
iniciar una respuesta inmunitaria. Una vez que se ha activado mo se describirá más adelante en este capítulo, un anticuerpo
de forma específica mediante la exposición a un antígeno monoclonal reconoce un solo epítopo.
nuevo, la respuesta inmunitaria se expande con rapidez en No todas las m oléculas son inmunógenas. En general,
cuanto a fuerza, número de células y especificidad. En el caso la s proteín as son los m ejores inmunógenos, los glú cidos son
de las proteínas se produce una memoria inmunitaria que inmunógenos m ás d ébiles y los líp id os y los á c id o s nucleicos
perm ite recordar con mayor rapidez ante un nuevo desafío. son m alos inmunógenos. Los haptenos (inmunógenos incom­
Las moléculas del anticuerpo y del receptor del linfoci- pletos) a menudo son demasiado pequeños para inmunizar (es
to T (T C R , del inglés T-cell receptor) análogas al anticuerpo decir, iniciar una respuesta) a una persona, pero pueden ser
reconocen antígenos y actúan como receptores para activar reconocidos por un anticuerpo. Los haptenos pueden hacerse
el crecimiento y las funciones de las células que expresan esa inmunógenos uniéndose a una m olécula transportad ora,
molécula. Las formas solubles de anticuerpo en la sangre y los como una proteína. Por ejemplo, el dinitrofenol conjugado
líquidos corporales o la forma secretada en las mucosas pueden con albúmina sérica bovina es un inmunógeno respecto al
inactivar y promover la eliminación de toxinas y microbios, hapteno dinitrofenol.
en especial cuando están en la sangre [bacteriemia, viremia). D urante la inmunización artificial (p. ej., vacunas), se
Los linfocitos T son importantes para activar y regular las res­ utiliza un adyuvante para potenciar la respuesta al antígeno.
puestas innatas e inmunitarias y para provocar directamente Los adyuvantes suelen prolongar la presencia del antígeno en
la muerte de las células que expresan antígenos inapropiados. el tejido, promover la captación del inmunógeno o activar a
Aunque algunas moléculas desencadenan sólo una respuesta las C D , los macrófagos y los linfocitos. Algunos adyuvantes
de anticuerpos limitada (glúcidos), las proteínas y las moléculas simulan ser activadores (p. ej., ligandos microbianos para re­
conjugadas con proteínas [incluidos los glúcidos) desencadenan ceptores del tipo toll) presentes en una inmunización natural.
una respuesta inmunitaria más completa que incluye a los lin­ Algunas moléculas no desencadenarán ninguna respuesta
focitos T. La activación de una respuesta inmunitaria completa inmunitaria en un sujeto. Durante el crecim iento del feto,
está muy bien controlada porque utiliza una gran cantidad de el cuerpo desarrolla una tolerancia inmunitaria central hacia
energía y, una vez iniciada, produce memoria y permanece los antígenos propios y cualquier antígeno extraño que pueda
durante la mayor parte de la vida. El desarrollo de una respuesta introducirse antes de la maduración del sistema inmunitario.
inmunitaria específica frente a un antígeno progresa desde las En fases posteriores de la vida se desarrolla una tolerancia
respuestas innatas a través de las células dendríticas (C D ), que periférica frente a otras proteínas con el fin de impedir res­
dirigen a los linfocitos T para que digan a otros linfocitos T, puestas inmunitarias descontroladas o autoinmunitarias. Por
linfocitos B y otras células que crezcan y activen las respuestas ejem plo, nuestra respuesta inmunitaria es tolerante a los
necesarias (fig. 9-1). Las interacciones receptor-célula y recep- alimentos que com em os; de otro modo el consumo de un
tor-citocina proporcionan las señales necesarias para activar el filete induciría una respuesta antimuscular.
crecimiento celular y responder al desafío. Los linfocitos T le El tipo de respuesta inmunitaria iniciado por un inmunó­
dicen a los linfocitos B qué tipo de anticuerpo producir (IgG, geno depende de su estructura molecular. Puede iniciarse
IgE, IgA) y promueven el desarrollo de células memoria. una respuesta de anticuerpos primitiva pero rápida contra
los p o lisa c á rid o s (cáp su la), el pep tid og lu can o o la flag elin a
b acterian os. Estas moléculas, denominadas antígenos inde­
In m u n ó g e n o s , a n t íg e n o s y e p ít o p o s
pendientes de X tienen una estructura grande repetitiva que
Casi todas las proteínas y los glúcidos asociados a un m i­ es suficiente para activar directamente a los linfocitos B para
croorganism o in feccioso, ya sea una bacteria, un hongo, que produzcan anticuerpos sin la colaboración de los linfo­
un virus o un parásito, se consideran ajenos al hospedador citos T. En estos casos, la respuesta se limita a la producción

© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos


62 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Anligeno
Aniígeno Señales
\_ /, Señales coactivadoras
i_ ^ J / coactivadoras

Ciasen _
Ctasel T'
APC (célula LinlociloTH
APC deIM HC 8 unlocitoTc^
dendrílica)
(célula dondrilica) (CD 8 )

Crtodnas de fase
aguda elL-12

Unfodto Tr Apoptosis
efector (CTL)
Respuestas IgG. IgE, Respuestas
inflamatorias IgA celulares y
en un ambiente mediadas por IgG
mmunotoleranle
F ig u ra 9-1 Activación (de las respuestas del linfocito I . La interacción de las células dendríticas con los linfocltos I C D 4 o CD8 inicia diferentes respuestas
inmunitarias, dependiendo de las citocinas producidas por la célula dendrítica. Los linfocltos T CD4 m aduran para proporcionar ayuda a otras células
con instrucciones mediadas por citocinas. Los linfocltos T CD8 pueden m adurar en linfocltos T citolíticos (CTL). APC, célula presentadora de antígeno;
/ ¿,ln terleu cin a ;M H C com plejo principal de histocompatibilidad; FGF-/3, factor de crecimiento transformador 3- {De Rosenthal KS,Tan M: R apidreview s
in m ic ro b io lo g y a n d im m u n o lo g y , 3.® ed., Filadelfia, 2010, Elsevier.)

de anticuerpos IgM y no estimula una respuesta anamnésica Además de la estructura del antígeno, la cantidad, la vía
(de recuerdo). La transición de una respuesta IgM a una IgG, de adm inistración y otros factores influyen en el tipo de
IgE o IgA es el resultado de un gran cambio en el linfocito B respuesta inm unitaria, incluidos los tipos de anticuerpos
y es equivalente a la diferenciación de la célula. Esto exige la producidos. Por ejem plo, la administración oral o nasal de
ayuda proporcionada por interacciones con el linfocito T y una vacuna a través de las mucosas promueve la producción
las citocinas. El antígeno, por tanto, debe ser reconocido y es­ de una forma secretoria de IgA (sIgA) que no se produciría
timular a los linfocitos T y B. Los antígenos dependientes de T en una administración intramuscular.
son proteínas; generan las cinco clases de inmunoglobulinas
y pueden desencadenar respuestas memoria y anamnésicas L in f o c i t o s T
(secundarias de recuerdo).
Los linfocitos T se distinguieron en un principio de los linfo­
citos B por su capacidad de unirse a hematíes de cordero a
través de la molécula C D 2 y formar rosetas. Estas células se
comunican a través de interacciones intercelulares directas
Definiciones y con citocinas. Los linfocitos T se definen por el uso de
anticuerpos que distinguen las moléculas de su superficie
Adyuvante: sustancia que promueve la respuesta celular. Las proteínas de la superficie del linfocito T son
inmunitaria al inmunógeno I) el T C R , 2) los correceptores C D 4 y C D 8 , 3) las proteínas
Antígeno: sustancia reconocida por la respuesta accesorias que promueven el reconocimiento y la activación,
inmunitaria 4) los receptores para citocinas y 5) las proteínas de adhesión.
Portador: proteína modificada por el hapteno para Todas estas proteínas determinan los tipos de interacciones
desencadenar la respuesta intercelulares en el linfocito T y, por tanto, sus funciones.
Epítopo: estructura molecular reconocida por la respuesta
inmunitaria
D esa rro llo d e l o s l in f o c it o s T
Hapteno: inmunógeno incompleto que no puede iniciar la
respuesta pero puede ser reconocida por el anticuerpo Los precursores del linfocito T dan lugar continuam ente a
Inmunógeno: sustancia capaz de desencadenar una linfocitos T en el tim o (fig. 9 -2 ). El contacto con el epitelio
respuesta inmunitaria y las hormonas del tim o, como la timosina, la timulina y la
Antígenos dependientes de T: antígenos que deben timopoyetina II, promueve una proliferación y diferenciación
presentarse a los linfocitos T y B para la producción de extensas de la población de linfocitos T del sujeto durante
anticuerpos el desarrollo fetal. Mientras los precursores del linfocito T
Antígenos independientes de T: antígenos con estructuras están en el tim o las secuencias de sus genes del T C R sufren
grandes y repetitivas (p. ej., bacterias, flagelina, recombinaciones que generan un T C R único en cada célula.
lipopolisacárido, polisacárido) Las células epiteliales del tim o tienen una capacidad única
de expresar la mayoría de las proteínas del genoma humano
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECÍFICAS FRENTE A ANTÍGENOS

Corteza Médula ünfocilos T


límíca timica periféricos Linfocitos T
PreNmicos

Marcadoras Estadio I Estadio II Estadio MI Linfocitos T 7/8


TCR 7/8 reactivo frente a metabolitos microbianos
TdT Respuestas locales: residente en sangre y tejidos
Respuestas más rápidas que linfocitos T a/b
CD l O Producen interferón 7 ; activan células dendríticas y
macrófagos
CD7 Linfocitos T a/p

CD5 C C D 4: TCR a/(3 reactivo frente a péptidos en el MHC II


en la célula presentadora de antígeno
CD2 Activados en ganglios linfáticos después se hacen móviles
Las citocinas activan y dirigen la respuesta inmunitaria
CD3 [T H 1,T H 2, T H I7)
Además, citotóxicos mediante interacciones Fas-ligando
TCR-2 de Fas
Linfocitos Treg C D 4 C D 25: controlan y limitan la
CD4 expansión de la respuesta inmunitaria; promueven
la tolerancia y el desarrollo de linfocitos memoria
CD 8 C D 8 : TCR a/(3 reactivo frente a péptidos presentados
en MHC I
F ig u ra 9 -2 Desarrollo del linfodto T humano. Los marcadores del linfocí- Activados en ganglios linfáticos por la célula dendrítica,
to T son útiles para identificar los estadios de diferenciación del linfocitoT
después progresan al tejido
y para caracterizar las leucemias y los linfomas de linfocitos T. TCR, receptor
del linfocitoT;Tt/T",transferasacitoplásmica dedesoxinucleotidilo terminal. Citotóxico a través de perforina y granzimas e inducción
de la apoptosis mediante Fas-ligando de Fas
de modo que los linfocitos T en desarrollo pueden exponerse Además producen citocinas análogas a los linfocitos CD4
al repertorio norm al de proteínas humanas. Los lin foci­ Linfocitos NKT: TC R a/p reactivo frente a glucolípidos
tos T portadores de T C R que no son funcionales, T C R que no (micobacterias) en moléculas CD I
pueden interaccionar con moléculas del complejo principal Matan células tumorales e infectadas por virus similar
de histocompatibilidad (M H C ) o aquellas que reaccionan a linfocitos NK
con demasiada fuerza frente a péptidos de proteínas propias Proporcionan apoyo temprano a las respuestas
(autorreactivos) se ven forzados al suicidio [apoptosis]. Los antibacterianas
linfocitos T que sobreviven se diferencian en subpoblaciones
de linfocitos T (cuadro 9 -2 ). Los linfocitos T pueden dis­ M H C , complejo principal de histocompatibilidad; N K , citolítico
tinguirse por el tipo de receptor para el antígeno del linfoci- espontáneo; TCR, receptor del linfocito T.
to X que consta de cadenas 7 y 8 o a y p y, en el caso de los
linfocitos T a/p, por la presencia de los correceptores C D 4
o C D 8 . Los linfocitos T pueden distinguirse por las citocinas para promover la expansión de la respuesta celular y después
que producen. pueden convertirse en linfocitos T productores de otras res­
Los linfocitos T que expresan el T C R 7/8 están en la san­ puestas. Los linfocitos T H l producen interferón 7 [IFN -7 )
gre, el epitelio de las mucosas y otras localizaciones tisulares y para activar a los m acrófagos y las C D y promueven res­
son importantes para estimular la inmunidad innata y mucosa. puestas que son especialm ente importantes para controlar
Estas células suponen el 5% de los linfocitos circulantes pero las infecciones intracelulares (m icobacterianas y víricas) y
se expanden hasta entre el 20% y el 60% de los linfocitos T micóticas y promover la producción de ciertos subtipos de
durante ciertas infecciones bacterianas o de otros tipos. El anticuerpos IgG. Los linfocitos T H 2 promueven las respues­
T C R 7/8 detecta metabolitos microbianos inusuales e inicia tas de anticuerpos. Los linfocitos T H 1 7 secretan interleuci-
respuestas inmunitarias mediadas por citocinas. na (IL) 17 para activar a los neutrófilos y promover las respuestas
El T C R a/p se expresa en la mayoría de los linfocitos T y antibacterianas y antimicóticas y la inflamación. Los linfoci­
estas células son las principales responsables de las respuestas tos T reguladores (Treg) expresan C D 4 y C D 25, impiden la
inmunitarias activadas por el antígeno. Los linfocitos T con activación espuria de los linfocitos T y controlan la respuesta
el T C R a/(3 se distinguen además por la expresión de las inmunitaria. Las citocinas producidas por cada una de es­
moléculas C D 4 o C D 8 . tas respuestas de linfocitos T se refuerzan a sí mismas pero
Los linfocitos T cooperadores (C D 4 ) activan y controlan pueden antagonizar otras respuestas. Los linfocitos T C D 4
las respuestas inmunitarias e inflamatorias m ediante in te­ también pueden matar a las células diana con la proteína de
racciones intercelulares específicas y mediante la liberación la superficie ligando de Fas.
de citocinas [m ensajeros solubles). Los linfocitos T coo­ Los linfocitos T C D 8 se clasifican como linfocitos T cito-
peradores interactúan con antígenos peptídicos presentados líticos y supresores pero también pueden producir citocinas
en moléculas de la clase II del M H C expresadas en células similares a los linfocitos C D 4. Los linfocitos T C D 8 activados
presentadoras de antígeno (APC, del inglés antigen-presenting «patrullan» por el cuerpo en busca de células infectadas por
cells] (CD , macrófagos y linfocitos B) (v. fig. 9-1). El reperto­ virus o tumorales, a las que identifican por los péptidos anti-
rio de citocinas secretadas por un linfocito T C D 4 específico génicos que presentan las moléculas de la clase I del M H C.
en respuesta al desafío antigénico define el tipo de linfocito T Se encuentran moléculas de la clase I del M H C en todas las
C D 4. En un principio, los linfocitos THO producen citocinas células nucleadas.
: 64 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

F ig u ra 9 -4 Estructura del gen embrionario del receptor del linfocito T.


Obsérvese la similitud en la estructura de los genes de las inmunoglobuli-
ñas. La recombinación de estos segmentos tam bién genera un repertorio
de reconocim iento diverso. C secuencias de con ex ión ;^ y D, segmentos;
V, segmentos variables.

de esta diversidad también son similares a los del anticuerpo


(fig. 9-4). El gen del T C R se compone de múltiples segmen­
tos V (V1V 2V 3 ... Vn), D y J. En los primeros estadios del desa­
rrollo del linfocito T, un segmento génico V particular se re-
combina con uno o más segmentos D , borrando los segmen­
tos V y D intermedios, y después se recombina con un seg­
mento J para formar un gen del T C R único. Como el anticuerpo,
la inserción aleatoria de nucleótidos en las uniones de la recom­
binación aumenta la posible diversidad y la posibilidad de
producir T C R inactivos. Al contrario que el anticuerpo, no
se produce ninguna mutación somática en los genes del TCR.
Sólo las células con T C R funcionales sobrevivirán. Cada clon
de linfocitos T expresa un T C R único.
A l contrario que las m oléculas de anticuerpo, el T C R
reconoce un epítopo lineal de un péptido contenido den­
tro de una hendidura de la superficie de las moléculas del
M H C I o II. La presentación del péptido antigénico exige
un procesamiento proteolítico especializado de la proteína
(v. más adelante) y la unión a moléculas del M H C II en la
célula presentadora de antígeno o a moléculas del M H C I por
todas las células nucleadas.
El complejo C D 3 se encuentra en todos los linfocitos T
F ig u r a 9 - 3 Restricción por el com plejo principal de histocompatibi- y consta de las cadenas polipeptídicas 7 , 8 , e y El com ­
lidad (M H C ) y presentación del antígeno a los linfocitos T. A , Iz q u ie rd a , plejo C D 3 es la unidad de transducción de la señal para el
los péptidos antigénicos unidos a las moléculas de la clase I del IV1HC se T C R . Las cinasas de tirosinas de proteínas (ZAP-70, Lck)
presentan al receptor para el linfocito T (TCR) situado en los linfocitos T
se asocian al com plejo C D 3 cuando el antígeno está unido
CD 8 citolíticos o supresores. D ere c h a , los péptidos antigénicos unidos
a las moléculas de la clase II del M HC situadas en la célula presentadora al complejo T C R , promueven una cascada de fosforilaciones
d e an tíg en o (APC) (linfocito B, célula dendrítica [C D ] o m acrófago) se de proteínas, la activación de la fosfolipasa C (PLC) y otros
presentan a los linfocitos T cooperadores CD4. B, Receptor del linfocito T. acontecimientos. Los productos de escisión del trifosfato de
El TCR consta de diferentes subunidades. El reconocim iento del antígeno inositol generados por la PLC dan lugar a la liberación de
se produce por m edio de las subunidades a/p o 7 /8. El complejo CD3 de calcio y activan a la cinasa de proteína C y a la calcineurina,
las subunidades 7 , 8 , e y ^ prom ueve la activación del linfocito T. C, región
una fosfatasa de proteínas. La calcineurina es una diana para
constante; V, región variable.
los fármacos inmunodepresores ciclosporina y tacrolimús. La
activación de las proteínas G de la membrana, como Ras, y
las consecuencias de las cascadas descritas antes dan lugar a
Recepto res d e s u p e r f ic ie la activación de factores de transcripción específicos en el nú­
cleo, la activación del linfocito T y la producción de IL-2 y de
DE l o s l in f o c it o s T
su receptor, IL-2R. Estos pasos se muestran en la figura 9-5.
El com plejo T C R es una combinación de la estructura que Las proteínas C D 4 y C D 8 son correceptores para el T C R
reconoce el antígeno (TCR) y la maquinaria de activación de la porque facilitan la interacción del T C R con la molécula de
célula (C D 3 ) [fig. 9 -3 ). La especificidad del T C R determina M H C presentadora del antígeno y pueden aumentar la res­
la respuesta antigénica del linfocito T Cada molécula de T C R puesta. El C D 4 se une a las moléculas de la clase II del M H C
se compone de dos cadenas polipeptídicas diferentes. Como situadas en la superficie de las A PC. El C D 8 se une a las
en los anticuerpos, cada cadena del T C R tiene una región moléculas de la clase I del M H C situadas en la superficie
constante y una región variable. El repertorio de T C R es muy de las APC y las células diana. Las moléculas de la clase I
grande y puede identificar un número enorme de especifici­ del M H C se expresan en todas las células nucleadas (v. más
dades antigénicas (se calcula que es capaz de reconocer 10^^ información sobre el M H C más adelante en este capítulo).
epítopos distintos). Los mecanismos génicos para el desarrollo Las colas citoplásmicas del C D 4 y el C D 8 se asocian a una
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECÍFICAS FRENTE A ANTÍGENOS 65

El TCR ínteractúa
con el comptejo
MHC-póptkk)
antigénico

E i onirecruzainionlo de
receptores activa a las dnasas
de la familia Src y ZAP'70

Núcleo Núcteo

’La cidosporina y el tacrolimús inhiben este paso.

F ig u ra 9 - 5 Vías de activación de los linfocitos T. La unión del com plejo principal de histocom patibilidad (M H C) ll-péptido al CD4 y al receptor del
linfocItoT (TCR) activa cascadas d e cin a sasya lafosfolipasa C para activar a su vez al factor nuclear d e los linfocitos T activados í7Vf-,477, el factor nuclear
kappa BfW f-xjSAIa proteína de activación 1 y otros factores de tran scrip ción ./IPC célula presentadora de antígeno;D/\G,diacilglicerol;G7’P, tri­
fosfato de guanosina;/£-2, interleucina 2 ;/P3, 1,4,5-trifosfato d e inosltol;¿c/f, cinasa de tirosina de proteínas específica del linfocito; d n a s a M A P , cmasa
de proteína activada por el m itógeno; PIP 2, 4,5-bifosfato d e fosfatidilinositol; PKC, cinasa de proteínas C; PLC-y, fosfolipasa C y .Z A P , proteína asociada a
zeta. (Modificado de Nairn R, Helbert M :Im m u n o lo g y fo rm e d ic a ls tu d e n ts ,!.^ ed., Filadelfia, 2007, Mosby.)

cinasa de tirosinas de proteínas [Lck), que potencia la acti­ 4. FasL, que inicia la apoptosis en una célula diana que
vación inducida por el T C R de la célula al unirse a la APC expresa Fas en su superficie celular.
o a la célula diana. El C D 4 o el C D 8 se encuentran en los Las moléculas de adhesión estrechan la interacción del
linfocitos T a/(3 pero no en los linfocitos T 7/8. linfocito T con la APC o la célula diana y tam bién pueden
Las m oléculas accesorias expresadas en el linfocito T promover la activación. Las moléculas de adhesión son el
incluyen varios receptores para proteínas situados en la su­ antígeno asociado a la función del leucocito 1 (LFA -1), que
perficie que interaccionan con proteínas de las APC y las interacciona con las m oléculas de adhesión intercelulares
células diana, lo que conduce a la activación del linfocito X (IC A M -1, IC A M -2 e IC A M -3) situadas en la célula diana.
la promoción de interacciones estrechas entre las células o la El C D 2 se identificó originalmente por su capacidad para
facilitación de la m uerte de la célula diana. Estas moléculas unir hematíes de carnero (receptores para el eritrocito). El
accesorias son las siguientes: C D 2 se une al LFA-3 situado en la célula diana y promueve
1. C D 45R A (linfocitos T vírgenes) o C D 4 5 R O {linfoci­ la adhesión intercelular y la activación del linfocito T. Los
tos T memoria), una proteína transmembrana tirosina- antígenos muy tardíos (V L A -4 y V L A -5) se expresan en
fosfatasa (PTP) las células activadas de form a más tardía en la respuesta y
2. C D 2 8 o proteína asociada al linfocito T citotóxico 4 se unen a la fibronectina en las células diana para potenciar
(C T LA -4] que se une a la proteína B7 situada en las la interacción.
APC para producir una señal coestimuladora o inhibi­ Los linfocitos T expresan receptores para muchas citocinas
toria al linfocito T que activan y regulan al linfocito T (tabla 9-1). Los receptores
3. G D I 54 (C D 4 0 L ), que está presente en los linfocitos T para citocinas activan cascadas de proteína-cinasas al unirse
activados y se une al C D 40 situado en las C D , los ma- a la citocina, para transportar la señal al núcleo. El receptor
crófagos y los linfocitos B para promover su activación para la IL -2 (IL -2 R ) está compuesto de tres subunidades.
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 9-1 Citocinas que modulan la fundón del linfoclto T Tabla 9-2 Respuestas de llnfocitos T específicos
frente al antígeno___________________________________
Activación de APC de linfocítos T vírgenes
IL-5 + TGF-P La activación d e l lin fo c ito T exige las interacciones d e l antígeno,
IL-23 el co rreceptor y las citocinas

Mediadores IL-1 IL-2 IL-17 IL-4 1-10 L infocito TCD4 Fundón


TNF-a LT IL-5 TGF-p Complejo TCR/CD4 Especificidad por el antígeno
MHCII-péptido
IL-6 IFN-7 IL-10
B7 CD28 o a i_A 4 Activación o supresión
IFN-a
IFN-B IL-1 IL-1R Activación

IL-12JL-23 IL-6 IL-6 R Supera la tolerancia inducida


por el Treg
/ñV,interferón;/¿,interleucina;¿7',linfotoxina;P/lMP, patrones moleculares asocia­ Activación del linfocito T por la APC
dos a microorganismos patógenos;Sup, supresor; 7(j F-/3, factor de crecimiento
transformador P; TH, (linfocito) T cooperador. La presentación aum entada d e l antíg e n o p o r las APC, la actividad
antim icrobiana aum entada d é lo s m acrófagos y e l cam bio d e clase
en la producción de in m unoglobulinas p o r el lin fo c ito B requiere las
interacciones d e l a ntígeno, el correceptor y las citocinas
Las subunidades p/'y están en la mayoría de los linfocítos T
CD,macrófago
(también en los Hnfocitos citolíticos espontáneos [NK]) y tienen
o lin fo d to B L in fo ríto T CD4 Fundón
una afinidad intermedia por la IL-2. La subiinidad a (C D 2 5 ) la
Complejo Linfocito T CD4: Especificidad por el antígeno
induce la activación celular para formar IL-2R a/p/^ de afinidad MHCII-péptido TCR/CD4
alta. La unión de la IL-2 al IL-2R inicia una señal estimuladora
B7-1,B7-2 CD28 Activación del linfocito T
del crecim iento en el linfocito T, y tam bién promueve la
CD40 CD40L Activación de otras funciones
producción de más IL-2 e IL-2R. El C D 25 se expresa en las
de la APC
células en crecimiento activadas, incluido el subgrupo de Treg
IL-12 Activación o refuerzo de
de los linfocítos T C D 4 (CD4'^CD25'^}. Los receptores para respuestas TH1
quimiodnas distinguen diferentes linfocitos T y guían a la célula
IFN-7 Activación de macrófagos y
allí donde residirán en el cuerpo. cambio de clase en linfocito B
IL-4 Funciones TH2: crecimiento y
cambio de clase en linfocito B
I n ic io d e l a s r e s p u e s t a s d e l l in f o c it o T
IL-5 Funciones TH2: cambio de clase
Presentación del antígeno a los linfocítos T en linfocito B

Las C D constituyen un puente entre las respuestas innatas APC, célula presentadora de antígeno; CD, célula dendrítica; CTL, linfocito cito-
e inmunitarias y las citocinas que producen determinan la tóxico;/W-y, interferón y;IL, interleucina; MWC //, complejo principal de his-
tocompatibilidad II; TCR, receptor del linfocito T; TH, (linfocito) T cooperador.
naturaleza de la respuesta del linfocito T. L a s C D son la s
ú nicas células presen tadoras d e antígeno que pu eden in iciar
una respu esta d el lin focito T específica fren te a un antígeno [diferen cias alotíp icas) desencadenan la respuesta del linfo­
(v. cuadro 9-2]. Las C D tienen brazos como de pulpo con una cito T que impiden el trasplante de injertos (tejidos). Hay
gran superficie (dendritas), producen citocinas y tienen M HC tres genes principales del HLA: HLA-A, H LA -B y H LA-C
para presentar el antígeno a los linfocitos T. Los macrófagos y otros genes del H LA secundarios. Cada célula expresa
y los linfocitos B pueden presentar antígenos a los linfoci­ un par de proteínas HLA-A, H LA-B y H LA -C diferentes,
tos T pero no pueden activar a un linfocito T virgen para iniciar una de cada progenitor, lo que proporciona seis hendiduras
una nueva respuesta inmunitaria. diferentes para capturar los péptidos antigénicos. L a cad en a
La activación de una respuesta de linfocito T específica p e s a d a d e la m o léc u la d e la c la s e I d e l M H C fo r m a u na
fren te a un antígeno requiere una com binación de cito ci­ hen didu ra con los extrem os cerrados, com o el hueco d e un p an
nas e interacciones intercelulares por medio de receptores d e pita , qu e m antiene un pép tid o d e ocho a n ueve a m in oáci­
(tabla 9-2) iniciada por la interacción del T C R con los pép- dos. La molécula de la clase I del M H C presenta péptidos
tidos antigénicos situados en el M H C. Las moléculas de la antigénicos procedentes del interior de la célula (endógenos)
clase I y II del M H C proporcionan una cuna molecular al a los linfocitos T que expresan el C D 8 . El aum ento de la
péptido. La molécula C D 8 situada en los linfocitos T cito­ expresión de las moléculas de la clase I del M H C convierte
líticos o supresores se une a las moléculas de la clase I del a la célula en una m ejor diana para la acción del linfocito T.
M H C situadas en las células diana y promueve su interacción Algunas células (encéfalo) y algunas infecciones víricas (virus
(v. fig. 9-3A ). La molécula C D 4 situada en los linfocitos T del herpes simple, citomegalovirus) reducen la expresión de
cooperadores o de la hipersensibilidad de tip o retard a­ antígenos del M H C I para reducir su potencial como dianas
do (HTR) se une a las moléculas de la clase II del M H C situadas de los linfocitos T.
en las A PC y promueve su interacción. Las moléculas del Las moléculas de la clase II del M H C se expresan nor­
M H C están codificadas dentro del locus génico del M H C m almente en las células presentadoras de antígeno, células
(fig. 9 -6 ). El M H C contiene un grupo de genes importantes que interactúan con los linfocitos T C D 4 (p. ej., macrófagos,
para la respuesta inmunitaria. C D , linfocitos B ). Las moléculas de la clase II del M H C están
Las moléculas de la clase I del M H C se encuentran en codificadas por los locus DP, D Q y D R y, como el M H C I,
todas las células nucleadas y son el principal determinante de también se expresan de forma codominante para producir
lo «propio». La molécula de la clase I del M H C, también co­ seis moléculas diferentes. Las moléculas de la clase II del
nocida como H LA en los seres humanos y H -2 en el ratón, M H C son un dímero de subunidades a y p (v. fig. 9 -7). L as
consta de dos cadenas, una cadena pesada variable y una cad en as d e la m olécula d e la clase I I d el M H C fo rm an una
cadena ligera (p2'inicroglobulina) (fig. 9 -7 ). Las diferencias hen didu ra d e unión a l pép tid o con los extrem os ab iertos que
en la cadena pesada de la molécula de HLA entre los sujetos e a u n p errito calien te y m antiene un p ép tid o d e 11 a
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECIFICAS FRENTE A ANTiGENOS 67

Genes de la dase II hidrofóbico que se una a la base de la hendidura molecular


de la molécula de las clases I o II del M H C y exponga un
DP DO DR epítopo de linfocito T al T C R . Debido a estas limitaciones,
puede haber sólo un péptido antigénico para el lin fo ci­
--- ' to T en una proteína. Todas las células nucleadas procesan
mediante proteólisis un grupo de proteínas intracelulares
y m uestran los péptidos a los lin focitos T C D 8 (vía en ­
Compooenies del complomenlo dógena de presentación del antígeno) para distinguir lo
r ^^ 1_ «propio», lo «ajeno», la expresión inadecuada de proteínas
-^ C 4 B }{C 4 a |- ( b R I C 2 ~ H t NF-<i | Í TNF-g N » " (célula tumoral] o la presencia de infecciones intracelulares,
m ientras que las A PC procesan y presentan péptidos de
proteínas fagocitadas a los linfocitos T C D 4 (vía exógena
de presentación del antígeno) (íig. 9 -8 ). Las C D pueden
cambiar estas vías (presentación cruzada) para presentar
antígeno exógeno a los linfocitos T C D 8 e iniciar respuestas
.. - = c i:- antivíricas y antitumorales.
Geoes de la dase I Las moléculas de la clase I del M H C ligan y presentan
péptidos obtenidos a partir de proteínas celulares en el pro-
F ig u ra 9 - 6 M apa génico del com plejo principal de histocompatibíli-
teosom a (una máquina proteasa) en el citoplasm a. Estos
dad (M HC). Los genes d e las m oléculas de las clases I y II, así com o de
com ponentes del com p lem ento y del factor d e necrosis tum oral (TNF), péptidos pasan al retículo endoplásm ico (RE) por m edio
están dentro del com plejo génico del MHC. del transportador asociado al procesam iento del antíge­
no (TAP). La mayoría de estos péptidos procede de proteínas
mal plegadas o en exceso (basura) marcadas por la unión de la
12 am in oácidos. La molécula de la clase II del M H C presenta proteína ubicuitina. El péptido antigénico se une a la cadena
péptidos antigénicos ingeridos (exógenos) a los linfocitos T
pesada de la m olécula de la clase I del M H C . Después la
que expresan el C D 4. cadena pesada del M H C puede ensamblarse adecuadamente
Las moléculas C D l del M H C se parecen a las m olécu­ con la P2-microglobulina, salir del RE y proceder a la m em ­
las M H C I, tienen una cadena pesada y una cadena ligera
brana celular.
(P 2-m icroglobulina), pero ligan glucolípidos en lugar de
Durante una infección vírica se producen grandes can­
péptidos. Las moléculas C D I se expresan sobre todo en las tidades de proteínas víricas que se degradan en péptidos y
C D y presentan el antígeno al T C R situado en los linfoci­
se convierten en la fuente predom inante de péptidos que
tos NCT [C D 4“C D 8"). Las moléculas C D I son especialmente
ocupan las moléculas de la clase I del M H C para ser pre­
importantes para la defensa frente a infecciones por m ico-
sentados a los linfocitos T C D 8 . Las células trasplantadas
bacterias. (in jertos) expresan péptidos en sus moléculas del M H C ,
Presentación del péptido por moléculas que difieren de las del hospedador, y que por tanto pueden
reconocerse como extrañas. Las células tumorales expresan
de las clas e sIylld e iM H C
a menudo péptidos derivados de proteínas anómalas o em ­
Al contrario que los anticuerpos que pueden reconocer epí- brionarias, que pueden desencadenar respuestas en el hos­
topos tridimensionales, los péptidos antigénicos del linfoci- pedador porque éste no se hizo tolerante a ellas. La expresión
to T deben ser epítopos lineales. Un antígeno de linfocito T de estos péptidos «extraños» en el M H C I en la superficie
debe ser un péptido de 8 a 12 aminoácidos con un esqueleto de la célula perm ite al linfocito T «ver» lo que está pasando
dentro de la célula.
Lugares de uñón al péptido Las moléculas de la clase II presentan péptidos proce­
dentes de proteínas exógenas que se adquirieron mediante
macropinocitosis, pinocitosis o fagocitosis y después se de­
gradaron en los lisosomas de las APC. La proteína de la cla­
se II del M H C también se sintetiza en el RE, pero al contrario
que el M H C I, la cadena invariante se asocia al M H C II para
impedir la adquisición de un péptido. El M H C II adquiere
su péptido antigénico como resultado de la convergencia de
la vía de transporte vesicular (que lleva las moléculas de la
clase II del M H C recién sintetizadas) y la vía de degradación
lisosóm ica (que lleva proteínas fagocitadas y sometidas a
proteólisis). Los péptidos antigénicos desplazan un péptido
de la cadena invariable y se asocian a la hendidura formada
en la proteína de la clase II del M H C; el complejo se traslada
después a la superficie celular.
La presentación cruzada del antígeno la utilizan las células
dendríticas para presentar antígenos a los linfocitos T C D 8
aasel Clase II vírgenes con el fin de comenzar la respuesta a los virus y las
células tumorales. Tras captar el antígeno (incluidos restos
F ig u ra 9 -7 Estructura de las moléculas del complejo de histocompatibi-
de células apoptósicas) en la periferia, la proteína se degrada,
lidad de las clases I y II (MHC). Las m oléculas de la clase I del M HC constan
de dos subunidades, la cadena pesada y la p^-rnicroglobulina. El hueco de
sus péptidos entran en el citoplasma y pasan a través de las TAP
un ión está cerra d o en sus extrem os y sólo p u ed e a lbergar p éptid os al RE para unirse a las moléculas del M H C I.
de 8 a 9 am inoácidos. Las m oléculas d e la clase II del M HC constan de La siguiente analogía podría ayudar a com prender la
dos subunidades, a y p, y albergan péptidos de 1 1 o más aminoácidos. presentación del antígeno: Todas las células degradan sus
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

F ig u ra 9 - 8 Presentación del antígeno. A , E n dó gena: El antígeno endógeno (producido por la célula y análogo a la basura celular) es enviado mediante
su unión a la ubicuitina (u) al proteosoma para su digestión. Los péptidos de ocho a nueve am inoácidos se transportan por m edio del transportador
asociado al procesam iento del antígeno (TAP) en el retículo endoplásm ico (RE). El péptido se une a un surco situado en la cadena pesada de la molécula
del complejo principal de histocom patibilidad (MHC) de la clase I y la Pj-microglobulina (^ - /n ) se une a la cadena pesada. El complejo se procesa a través
del aparato de GolgI y se lleva a la superficie celular para presentarlo a los linfocitosT CD8 . B, Exógena: Las moléculas de la clase II del MHC se ensamblan
en el RE con una cadena proteínica invariable para evitar qu e adquieran un péptido en el RE. Son transportadas en una vesícula a través del aparato de
Golgi. El antígeno exógeno (fagocitado) se degrada en los lisosomas, q ue después se fusionan con una vesícula que contiene las moléculas de la cla­
se II del MHC. La cadena invariable se degrada y es desplazada por péptidos d e 11 a 13 aminoácidos, que se unen a la molécula de la clase II del MHC.
El com plejo se lleva después a la superficie celular para presentarlo a los linfocitos T CD4. C, P resentación cruzada: El antígeno exógeno entra en el RE
de las células dendríticas y se presenta en moléculas M HC I a los linfocitos T CD8 .

proteínas «basura» y después las presentan en la superficie en A c t i v a c ió n d e l o s l in f o c it o s T CD4


cubos de basura de la clase I del M H C. Los linfocitos T C D 8
que «patrullan» por el barrio no se alarman si ven en la basura Y s u RESPUESTA A L ANTÍGENO
los péptidos normales diarios. Un intruso vírico produciría
La activación de las respuestas de linfocitos T vírgenes la
grandes cantidades de basura de péptidos víricos (p. ej., latas
inician las C D y después las expanden otras APC. Los linfo­
de cerveza, cajas de pizza) que se mostrarían en los cubos de
citos T cooperadores C D 4 se activan por la interacción del
basura moleculares de la clase I del M H C, lo que alertaría
T C R con el péptido antigénico presentado por las moléculas
a los linfocitos T C D 8 que realizan la vigilancia. Las APC
de la clase II del M H C en la APC [fig. 9-9A ). La interacción
(C D , macrófagos y linfocitos B) son parecidos a basureros o
se ve fortalecida por la unión del C D 4 a la molécula de la
trabajadores del alcantarillado; recogen la basura del vecin­
clase II del M H C y la unión de las proteínas de adhesión del
dario o el alcantarillado linfático, lo degradan, se lo enseñan
linfocito T y la APC. Es necesaria una señal coestimuladora
a las moléculas de la clase II del M H C y después pasan al
mediada por la unión de las moléculas B7 del macrófago,
ganglio linfático para presentar los péptidos antigénicos a los
la célula dendrítica o el linfocito B a las moléculas C D 2 8
linfocitos T C D 4 en la «comisaría». Los antígenos extraños
del linfocito T para inducir el crecim iento del linfocito T
alertarán a los linfocitos T C D 4 para que liberen citocinas y
como un mecanismo de seguridad que asegure la activación
activen una respuesta inmunitaria.
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECIFICAS FRENTE A ANTiGENOS 69
l

ACTIVACIÓN D EL UNFOCITO T CD4

Actiosión Roconocimienlo Inhibición/


del antígeno coactivación
UnfocitoTH —
CD2 LFA-l TCR CD4 CD28/CTLA4

LFA-3 ICAM -1 Ciasen B7-1/B7-2


A PC — delM HC

ACTIVACIÓN DE LINFOCITO B O APC PO R EL LINFOCITO T

Attiestón Reconodmienlo Coactivaci6n


LinfocItoTH — de( antígeno
CD2 LFA-1 TCR CD4 C040L CD28

Receptor

Cítodrtas

LFA-3 ICAM-1 Clase II CD40 87-1/


A PC — MHC B7-2

RECONOCIM IENTO DE LA S CÉLU LA DIANA PO R EL CTL

Reconocimiento Inido de
Adhesión del antígeno apoptosis
CTL CD8 —
CD2 LFA-1

Receptor
para Fas

F ig u ra 9 - 9 Las moléculas im plicadas en la interacción entre los linfocitos T y las células presentadoras de antígeno (APC). A , Inicio d e una respuesta
del linfocito T CD4. El inicio de una respuesta del linfocito T CD8 es similar, pero el CD8 y el receptor del linfocito T (TCR) interaccionan con el com plejo
principal de histocompatibilidad (MHC) I y el péptido que alberga. B, La unión del linfocito T CD4 cooperador a un linfocito B, célula dendrítica o ma-
crófago. C, Unión del linfocito T CD8 a la célula diana. La interacción Fas-FasL prom ueve la apoptosis. Las interacciones entre el receptor de superficie
celular y el ligando y las d e las citocinas están indicadas con la dirección de su acción. antígeno; CTLA4, linfocito T citotóxico M -.IC A M -1 , m olécula
de adhesión intercelular y-, LFA-1, antígeno asociado a la función del leucocito 1. (De Rosenthal KS,Tan i^\R a p id review s in m ic ro b io lo g y a n d im m u n o lo g y,
3.® ed., Filadelfla, 2010, Elsevier.)
70 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

legítim a. El B7 tam bién interacciona con el C T L A 4, que y la IL -10, que producen los linfocitos T H 2. Los linfocitos
produce una señal inhibidora. Las APC activadas expresan T H I activados también expresan el ligando FasL, que puede
suficiente B7 para llenar todos los CTLA 4 y unirse después interactuar con la proteína Fas situada en las células diana
al C D 2 8 . También son necesarias señales de las citocinas para promover la apoptosis (m uerte) de la célula diana, y
(p. ej., IL-1, IL-2, IL-6} para iniciar el crecimiento y superar la del receptor para quimiocinas C C R 5 que promueve la
la supresión reguladora de la célula. La activación adecuada relocalización en las zonas de infección.
del linfocito T cooperador promueve la producción de IL-2 La respuesta T H I (1 significa te m p r a n a ) suele producirse
y aumenta la expresión de IL -2R en la superficie celular, lo pronto en la respuesta a u na infección y a ctiv a las respuestas
que potencia la capacidad de la propia célula de unirse a la c elu lares y d e an ticu erp os. Las respuestas T H I amplifican
IL-2 y de mantener la activación por IL-2. Una vez activada, las reacciones inflamatorias locales y las reacciones de H TR
la IL-2 mantiene el crecimiento de la célula y otras citocinas al activar a los macrófagos, los linfocitos N K y los linfoci­
influyen en si el linfocito T cooperador madura en un linfocito tos T C D 8 citotóxicos, y tam bién expanden la respuesta
cooperador T H I, T H I 7 o T H 2 (v. siguiente apartado). inmunitaria al estimular el crecimiento de los linfocitos B y T
La activación parcial (interacción del T C R con péptido en con la IL -2. Las respuestas inflamatorias y de anticuerpos
el M H C ) sin coestimulación lleva a la anergia [falta de res­ estimuladas por las respuestas T H I son im portantes para
puesta) o a la muerte apoptósica (suicido celular) del linfoci­ eliminar las infecciones intracelulares [p. ej., virus, bacterias
to T. Este es un mecanismo para 1) eliminar linfocitos T auto- y parásitos) y por hongos, pero también se asocian a enfer­
rreactivos en el timo y 2) promover el desarrollo de tolerancia medades inflam atorias autoinmunitarias celulares (p. ej.,
frente a proteínas propias. Además, la unión del CTLA -4, en esclerosis múltiple, enfermedad de Crohn).
lugar del C D 28, en los linfocitos T con el B7 situado en las Las respuestas antibacterianas y ^tim icóticas iniciales están
células APC puede dar lugar a la anergia hacia el antígeno. mediadas por los linfocitos T H I 7. Estos son linfocitos T CD 4
Una vez activados, los linfocitos T C D 4 salen del ganglio cooperadores estimulados por la IL-6 más el factor de crecimien­
linfático y entran en la sangre o se desplazan a las zonas de lin­ to transformador (TG F) (3 o la IL-23 en lugar de la IL-12. La
focitos B de los ganglios linfáticos y del bazo. La presen­ IL-23 pertenece a la familia de citocinas de la IL-12. Los linfoci­
tación del antígeno inicia interacciones estrechas entre el tos T H I 7 producen citocinas, como la IL-17, la IL-22, la IL-6 y
linfocito T y la APC que permiten a las moléculas C D 40L y el TN F-a, y quimiocinas proinflamatorias, que activan a los neu­
C D 28 del linfocito T unirse a las moléculas C D 40 y B7 de trófilos y promueven las respuestas inflamatorias. Las respues­
las APC. Estas interacciones estimulan la activación mutua tas T H I 7 también proporcionarían protección en lugares con
del linfocito T y de la APC [fig. 9 -9 B ). Esta interacción y privilegio inmunitario, como el ojo, donde hay mucho TGF-p.
las citocinas producidas por el linfocito T determinarán la Las respuestas T H I 7 se asocian a enfermedades inflamatorias
función de los macrófagos y las C D y qué inmunoglobulina celulares autoinmunitarias como la artritis reumatoide.
producirá el linfocito B. Las respuestas T H 2 (2 significa s e c u n d a r ia ) se producen
m ás tarde en respuesta a la infección y actúan a nivel sistém ico
Fundones del linfocito T CD4 cooperador m ediante respuestas m e d ia d a s p o r anticuerpos. La respuesta
Los linfocitos T C D 4 promueven la expansión de la respuesta T H 2 se produce sin la señal I L - I 2/IFN-7 de las respues­
inmunitaria con citocinas promotoras del crecimiento celular tas innatas y después la IL-4 refuerza la continuación de las
y definen la naturaleza de la respuesta con otras citocinas. Los respuestas T H 2. El IFN -7 inhibe el desarrollo del linfocito
linfocitos T C D 4 empiezan como un linfocito THO que puede T H 2. La respuesta T H 2 puede estimularse más tarde en una
evolucionar a linfocitos T H I, T H 2, T H 17 y otros linfocitos infección, cuando el antígeno alcanza los ganglios linfáticos y
TH con diferentes funciones, determinado por la C D inicial es presentado por las C D , los macrófagos y los linfocitos B.
y las interacciones con las citocinas. Los diferentes tipos Los linfocitos B que expresan anticuerpos específicos en su
de linfocitos T H se definen por las citocinas que secretan y superficie pueden capturar, procesar y presentar el antígeno a
así por las respuestas que inducen (fig. 9 -1 0 y tabla 9-3; los linfocitos T H 2 con el fin de establecer un circuito específi­
V . también fig. 9-1 y tabla 9-1). co del antígeno, lo que estimula el crecimiento y la expansión
La principal función de los linfocitos THO es expandir la clonal de los linfocitos T cooperadores y de los linfocitos B
respuesta inmunitaria mediante la producción de citocinas que reconocen el mismo antígeno. Los linfocitos T H 2 liberan
que promuevan el crecim iento del hnfocito y activar a las las citocinas IL-4, IL-5, IL-6 e IL-IO que promueven las res­
C D , incluidos la IL-2, el IFN -7 y la IL-4. Una vez activados, puestas humorales (sistém icas). Estas citocinas estimulan al
los linfocitos T H I y T H 2 producen citocinas que expanden linfocito B para que produzca recombinaciones dentro del gen
las respuestas innatas e inmunitarias (factor estimulante de de las inmunoglobulinas para cambiar de la producción de IgM
colonias de granulocitos y macrófagos [G M -C SF ], factor de e IgD a la de subtipos específicos de IgG, IgE o IgA. Las res­
necrosis tumoral oí [TN F-a] e IL-3) y citocinas que definen puestas T H 2 se asocian a la producción de IgE, que es útil en
la respuesta (autocrina), pero inhiben el desarrollo de otros las respuestas contra los helmintos pero que media la alergia.
tipos de linfocitos T C D 4. Las respuestas T H 2 pueden exacerbar una infección intra-
La activación de las respuestas T H I exige IL -12 producida celular (p. ej., M y cobacteriu m leprae, L eish m an id ) por una
por las C D y los macrófagos y la presentación del antígeno a disminución prematura de las respuestas T H I protectoras.
los linfocitos T CD 4. Los linfocitos T H I se caracterizan por la Los linfocitos Treg que expresan 0 0 4 ^ 0 0 2 5 " ^ son linfo­
secreción de IL -2, IF N -7 y T N F -p (linfotoxina [LT ]). Estas citos supresores específicos frente a un antígeno. Estas células
citocinas estimulan respuestas inflamatorias y la producción impiden el desarrollo de respuestas autoinmunitarias al pro­
de una subclase específica de IgG que se une a receptores ducir TG F-p e IL-10, ayudan a mantener las respuestas de los
para el Fe situados en los neutrófilos y los linfocitos N K y linfocitos T controladas y promueven el desarrollo de linfocitos
que puede fijar el complemento. El IFN -7 , también conocido memoria. Se han descrito otras respuestas TH , como TH 9,
como factor activador del macrófago, refuerza las respuestas T H 22 y T FH (T cooperador folicular), y sus nombres se refie­
T H I al favorecer la producción de más IL -12, lo que crea un ren a la principal citocina que producen o a las funciones que
ciclo que se mantiene a sí mismo. El TN F-p puede activar a la citocina promueve. Los linfocitos TFH proporcionan ayuda
los neutrófilos. Los linfocitos T H I son inhibidos por la IL-4 a los linfocitos B dentro de los folículos del ganglio linfático.
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECIFICAS FRENTE A ANTiGENOS 71 m i

F ig u ra 9 - 1 0 Las respuestas del linfocito I están determ inadas por citocinas. Las células dendríticas inician y determ inan el tipo de respuestas de
linfocítos T CD4 mediante las citocinas que producen. De manera análoga, los linfocitos T les dicen a otras células qué hacer con otras citocinas. Se indican
las citocinas definidoras d e las respuestas. T, aum ento; -I, reducción; CTL, linfocito T citotóxico; IF N -y, interferón 7 ; Ig G /lg E /lg A , inm unoglobulina G/E/A;
/¿,interleucina;7Gf-/3, factor de crecim iento transformador P; W , (linfocito) T cooperador. (De Rosenthal KS,Tan M: R apid review s in m ic ro b io lo g y a n d
im m u n o lo g y , 3.® ed., Filadelfia, 2010, Elsevier.)

L in f o c i t o s T CD8 La respuesta C T L se inicia cuando los linfocitos T C D 8


vírgenes en el ganglio linfático son activados por las C D pre­
Los lin focito s T C D 8 incluyen los lin focitos T cito tó x i- sentadoras de antígeno y por citocinas producidas por los lin­
cos (C T L ) y los linfocitos supresores. Los C TL forman parte focitos T C D 4 T H l, incluida la IL-2 (similar a la activación de
de la respuesta T H 1 y son importantes para eliminar células los linfocitos T C D 4 como en la íig. 9 -9). La presentación del
infectadas por virus y células tumorales. Los linfocitos T antígeno en el M H C I puede ser el resultado de una infección
C D 8 tam bién pueden secretar citocinas del tipo T H l. Se vírica o de una presentación cruzada de un antígeno adquiri­
sabe menos sobre los linfocitos supresores. do en el lugar de infección o tumor por una C D . Los linfoci-

d Tabla 9-3 Citocinas producidas por los linfocitos T H l, TH2 y TH 17*

Descripción Temprana 1 = primera = temprana = local 2 = segunda = tardía = sistémica


Inductor IL-6 + TGF-P IL-12 IL-4
o IL-23
Citocinas definidoras IL-17, TNF-a, quimiocinas IFN-7 , IL-2, LT, quimiocinas, etc.* IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, quimiocinas, etc*
de ta respuesta
Respuesta Neutrófilos, respuesta Celular, célula mielocítica, anticuerpo, Humoral (anticuerpo)
tisular, inflamación reacciones inflamatorias, p. ej., HTR
Dianas Bacterias, hongos Infecciones intracelulares víricas, bacterianas, Microbios vehiculados por la sangre, algunos virus,
micóticas y parasitarias, antitumoral algunos parásitos, la mayoría de las bacterias
Inhibido porlL-12 Inhibe TH2 Inhibe THl

GM-CSF, factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos; HTR, hipersensibilidad de tipo retardado; ¡FN-y, interferón 7; ¡L, interleucina; LT. linfotoxina;
TGF-^, factor de crecimiento transformador p; TH, (linfocito) T cooperador; TNF-a, factor de necrosis tumoral a.
*Citocinas comunes THl y TH2: GM-CSF, IL-3 (crecimiento del leucocito).
72 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

tos T C D 8 activados se dividen y diferencian en C TL maduros.


Durante una provocación con un virus en un ratón, el número
de C T L específicos aumentará hasta 1 0 0.000 veces. Cuando Acciones antím ícrobíanas de los anticuerpos
los C T L activados encuentran una célula diana, se unen fuer­
tem ente a través de interacciones del T C R con proteínas de Son opsoninas: promueven la ingestión y acción lítica de
la clase I del M H C portadoras del antígeno y moléculas de las células fagocíticas (IgG)
adhesión en ambas células (similar al cierre de una cremalle­ Neutralizan (bloquean la unión de) bacterias, toxinas y virus
ra] . Los gránalos que contienen moléculas tóxicas, granzimas Aglutinan bacterias: pueden ayudar a su eliminación
(esterasas) y una proteína formadora de poros (perforina) se Inmovilizan a los microorganismos móviles
mueven hacia la zona de la interacción y liberan su contenido Se combinan con antígenos en la superficie microbiana
en el hueco (sinapsis inmunitaria) formado entre el linfoci- y activan la cascada del complemento, lo que induce
to T y la célula diana. La perforina genera agujeros en la m em­ una respuesta inflamatoria y lleva fagocitos frescos y
brana celular diana que perm iten la entrada del contenido anticuerpos séricos a la zona
e inducen la apoptosis (m uerte celular program ada) en la Se combinan con antígenos en la superficie microbiana,
célula diana. Los linfocitos T C D 8 pueden iniciar también la activan la cascada del complemento y anclan el
apoptosis en las células diana a través de la interacción del complejo de ataque de la membrana en el que
FasL situado en el linfocito T con la proteína Fas situada intervienen C5b a C9
en la superficie de la célula diana. FasL es un miembro de
la familia de proteínas del TN F y Fas es un miembro de la
familia de proteínas del receptor para el TNF. La apoptosis células del hospedador (p. ej., com plem ento, macrófagos]
se caracteriza por la degradación del ADN de la célula diana para promover la eliminación del antígeno y la activación de
en fragm entos separados de unos 2 0 0 pares de bases y la las consiguientes respuestas inmunitarias [cuadro 9 -3 ). Las
ruptura de las membranas internas. Las células se encogen en moléculas de anticuerpo tam bién sirven de receptores de
cuerpos apoptósicos, que son fagocitados fácilmente por los superficie celular que estimulan a las factorías apropiadas de
macrófagos y las C D . La apoptosis es un método limpio de anticuerpos para que crezcan y produzcan más anticuerpos
muerte celular, al contrario que la necrosis, que lanza señales en respuesta al desafío antigénico.
al neutrófilo que provoca mayor lesión tisular. Los linfoci­
tos T C D 4 T H l y los linfocitos N K también expresan el FasL
y pueden iniciar la apoptosis en las células diana. T i p o s Y ESTRUCTURAS
Los linfocitos T supresores proporcionan una regulación DE LAS IN M UN O GLO BULINAS
específica del antígeno de los linfocitos T cooperadores por
m edio de citocinas inhibidoras y otros medios. Com o los Las inmunoglobulinas están compuestas por al menos dos ca­
CTL, los linfocitos T supresores interactúan con las moléculas denas pesadas y dos cadenas ligeras, un dímero de dímeros. Se
de la clase I del M H C. subdividen en clases y subclases en función de la estructura
y distinción del antígeno de sus cadenas pesadas. La IgG, la
IgM y la IgA son las principales formas de anticuerpos, mien­
L in f o c i t o s NKT tras que la IgD y la IgE suponen menos del 1% de todas las
inmunoglobulinas. Las clases IgA e IgG de inmunoglobulinas
Los lin focitos N K T son com o un híbrido en tre los linfo­
se dividen a su vez en subclases en función de diferencias en
citos N K y los linfocitos T. Expresan un marcador del linfoci­
la porción Fe. Hay cuatro subclases de IgG, designadas IgG l
to NK, N K l.l y un T C R a/p. Al contrario que otros linfo­
a IgG 4, y dos subclases de IgA (IgAl e IgA2) (fig. 9-1 1 ].
citos X el repertorio de T C R es muy limitado. Pueden expresar
Las moléculas de anticuerpo son moléculas en forma de
C D 4 , pero la m ayoría carece de m oléculas C D 4 y C D 8
Y con dos regiones estructurales im portantes que median
(C D 4 "C D 8 "). El T C R de la mayoría de los linfocitos NKT
las dos principales funciones de la m olécula (v. fig. 9 -1 1 ;
reacciona con moléculas C D l, que presentan glucolípidos y
tabla 9-4). La región variable o lugar de combinación con el
glucopéptidos microbianos. Tras su activación, los linfoci­
antígeno debe ser capaz de identificar e interactuar de forma
tos NKT liberan grandes cantidades de IL-4 e IFN-7 . Los linfo­
específica con un epítopo situado en un antígeno. Cada sujeto
citos N KT ayudan en las respuestas iniciales a la infección
produce un gran número de diferentes moléculas de anticuer­
y son muy importantes para la defensa frente a infecciones
po, cada una con una región variable diferente, para reconocer
micobacterianas.
el número aparentemente infinito de diversos antígenos que
hay en la naturaleza. La porción Fe [tallo del anticuerpo Y)
interacciona con los sistemas del hospedador y las células
L in f o c i t o s B e in m u n id a d h u m o r a l
para promover la elim inación del antígeno y la activación
El componente molecular primario de la respuesta inmuni­ de las consiguientes respuestas inmunitarias. La porción Fe
taria humoral es el anticuerpo. Los linfocitos B y las células es responsable de la fijación del complemento y de la unión
plasmáticas sintetizan moléculas de anticuerpo en respuesta a de la m olécula a los recep tores para las inm unoglobuli­
la provocación con el antígeno. Los anticuerpos proporcionan nas (F cR ) de la superficie celular situados en los macrófagos,
protección ante una nueva provocación de un microorganismo los linfocitos NK, los linfocitos T y otras células. Para la
infeccioso, bloquean la propagación del microorganismo en IgG y la IgA, la porción Fe interacciona con otras proteínas
la sangre y facilitan la eliminación del microorganismo in­ para promover la transferencia a través de la placenta y la
feccioso. Para conseguir estas tareas debe disponerse de un mucosa, respectivamente (tabla 9 -5 ). Además, cada uno de
repertorio increíblemente grande de moléculas de anticuerpo los diferentes tipos de anticuerpo puede sintetizarse con una
que reconozcan el enorme número de microorganismos infec­ porción que atraviesa la m embrana con el fin de convertirse
ciosos y moléculas que desafían nuestro cuerpo. Además de la en un receptor de superficie para el antígeno.
interacción específica con estructuras extrañas, las moléculas La IgG y la IgA tienen una región bisagra rica en prolina que
de anticuerpo también deben interaccionar con sistemas y tiende a ser escindida por enzimas proteolíticas. La digestión
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECIFICAS FRENTE A ANTiGENOS 73

YYYYYY
IgM monoméñoa IgD IgG I lgG2 igG3 lgG4

Y Y í í 'Y
F ig u ra 9 -1 1
IgAl lgA2 IgA secretoria

en multímeros mediante la cadena J. La IgA puede adquirir el com ponente secretorio para atravesar las células epiteliales.
IgE
Com paración d e las estructuras de las clases y subclases de inmunoglobulinas en los seres humanos. La IgA y la IgM se m antienen juntas

de las moléculas de IgG con papaína da lugar a dos fragmen­ inmunoglobulinas se unen entre sí mediante enlaces disulfuro
tos Fab y un fragmento Fe [fig. 9-12). Cada fragmento Fab tiene intercatenarios. Hay dos tipos de cadenas ligeras ( k y X) en
una zona de unión al antígeno. La pepsina escinde la molécula las cinco clases de inmunoglobulinas, aunque sólo hay un tipo
y produce un fragmento F (a b ')2 con dos lugares de unión al en una molécula individual. Alrededor del 60% de las molécu­
antígeno y un fragmento pFc'. las de inmunoglobulinas humanas tiene cadenas ligeras k y el
Los diferentes tipos y partes de la inmunoglobulina pue­ 40% cadenas ligeras \. Hay cinco tipos de cadenas pesadas,
den distinguirse también usando anticuerpos dirigidos contra una para cada isotipo de anticuerpo (IgM , |j l ; IgG , y , IgD , 8;
diferentes porciones de la molécula. Los isotipos (IgM , IgD , IgA , a ; e Ig E , e ). Los enlaces disulfuros intracatenarios
IgG , IgA, IgE) se determinan con anticuerpos dirigidos contra definen dominios moleculares dentro de cada cadena. Las
la porción Fe de la molécula (íío significa los mismo para todo cadenas ligeras tienen un dominio variable y uno constante.
el m undo). Las diferencias alotípicas se producen en m olé­ Las cadenas pesadas tienen un dominio variable y tres (IgG,
culas de anticuerpo con el mismo isotipo pero que contienen IgA) o cuatro (IgM, IgE) constantes. Los dominios variables
secuencias de proteína que difieren entre una persona y otra de las cadenas pesadas y ligeras interactúan para formar la
[además de la región que se une al antígeno). El idiotipo se zona de unión al antígeno. Los dominios constantes de cada
refiere a la secuencia de proteínas en la región variable que cadena form an la porción Fe, proporcionan la estructura
genera el gran número de regiones que se unen al antígeno. molecular de la inmunoglobulina y definen la interacción de
A nivel molecular, cada molécula de anticuerpo está for­ la molécula de anticuerpo con los sistemas del hospedador,
mada por cadenas pesadas y ligeras codificadas por genes de ahí su función última. La cadena pesada de las diferentes
separados. La unidad básica de la inmunoglobulina consiste moléculas de anticuerpo también puede sintetizarse con una
en dos cadenas pesadas (H , del inglés h e a v y ) y dos ligeras región transmembranaria que convierte el anticuerpo en un
(L , del inglés lig h t ). La IgM y la IgA tien en m ultím eros receptor de superficie específico frente al antígeno para el
de esta estructura básica. Las cadenas pesadas y ligeras de linfocito B.

Tabla 9-4 Propiedades y funciones de las inm unoglobulinas


IgM IgD IgG IgE IgA
Cadena pesada S 7 e a
Subclases 7 1 , 7 2 , 7 3 ,7 4 a 1 ,a 2
Masa molecular (kDa) 900 185 154 190 160
% Ig sérica 5-10 <1 75-85 <1 5-15
Semivida (días) 5 2-3 23 2-3 6
Necesidad de linfocito T Independiente Independiente Dependiente Dependiente Dependiente
Tiempo/memoria Temprana, primaria Temprana, primaria Tardía, memoria Tardía, memoria Tardía, memoria
Complemento ++ - ++ - -
Opsonización ++ - ++ - -
CCDA ++ - ++ - -
Atraviesa placenta - - ++ - -
Protege mucosa + - - ?? - ++-I-
Activa mastocito - - - +++ -
CCDA, citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos.
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 9-5 Interacciones del Fe con com ponentes La IgM es la inmunoglobulina más eficiente para fijar (unir)
inm unitarios el complemento. Un solo pentámero de IgM puede activar la
C om ponente vía clásica del complemento. La IgM monomérica se encuen­
in m u n itario Interacción tra con la IgD en la superficie del linfocito B, donde sirve
Receptor Macrófagos Opsonización de receptor para el antígeno. Como la IgM es relativamente
para el Fe Neutrófilos Opsonización grande, permanece en la sangre y pasa difícilmente de la san­
polimorfonucleares gre a los tejidos. La IgM es particularmente importante para
LinfocitosT Activación la inmunidad frente a antígenos polisacáridos situados en el
Linfocitos citolíticos Muerte exterior de los microorganismos patógenos. También promueve
espontáneos la fagocitosis y la bacteriólisis al activar el com plem ento a
{citotoxicidad través de su porción Fe. La IgM también es un componente
celular dependiente
de anticuerpos)
importante de los factores reumatoides [autoanticuerpos).
Mastocitos para Reacciones alérgicas, Inmunoglobulina G
inmunoglobulina E antiparasitarias
Complemento Sistema del Opsonización, muerte La IgG supone alrededor del 85% de las inmunoglobulinas
complemento (especialmente de en los adultos. Tiene una masa m olecular de 1 5 4 kD a en
bacterias), activación función de sus dos cadenas L de 2 2 .0 0 0 Da cada una y sus
de inflamación
dos cadenas H de 5 5 .0 0 0 D a cada una. Las cuatro subclases
de IgG difieren en su estructura [v. fig. 9 -1 1 ), concentración
relativa y función. La producción de IgG requiere la ayuda del
Inmunoglobulina D linfocito T La IgG, como una clase de molécula de anticuer­
La IgD, que tiene una masa molecular de 185 kDa, supone po, tiene la semivida más larga (23 días) de las cinco clases
menos del 1% de las inmunoglobulinas séricas. La IgD existe de inmunoglobulinas, atraviesa la placenta y es el principal
sobre todo como IgD de membrana, que sirve con la IgM de anticuerpo en la respuesta anam nésica (de recuerd o). La
receptor para el antígeno en los primeros estadios del linfoci- IgG muestra una alta avidez (capacidad de unión) por los
to B para ayudar a iniciar las respuestas de anticuerpo mediante antígenos, fija el com plem ento, estim ula la quimiotaxis y
la activación del crecimiento del linfocito B. La IgD y la IgM actúa como opsonina para facilitar la fagocitosis.
son los únicos isotipos que pueden expresarse juntos en la
misma célula. Inmunoglobulina A
La IgA supone entre el 5 y el 15% de las inmunoglobuli­
Inmunoglobulina M nas séricas y tiene una semivida de 6 días. Tiene una masa
La IgM es el primer anticuerpo producido en respuesta a la molecular de 160 kDa y una estructura monomérica básica
provocación antigénica y puede producirse con independencia de cuatro cadenas. Sin embargo, puede darse en forma de
de la ayuda del linfocito T. La IgM supone hasta entre el 5% monómeros, dímeros, trím eros y m ultím eros combinados
y el 10% de todas las inmunoglobulinas en los adultos y tiene por la cadena J (com o la IgM ). Además de la IgA sérica,
una semivida de 5 días. Es una molécula pentamérica con cinco aparece una Ig A secretoria en las secreciones corporales que
unidades de inmunoglobulina unidas por enlaces disulfuro y la proporciona una inmunidad localizada. La producción de IgA
cadena J , con una masa molecular total de 900 kDa. En teoría, requiere la ayuda especializada del linfocito T y un estímulo
esta inmunoglobulina tiene 10 lugares de unión al antígeno. mucoso. Los adyuvantes, como la toxina del cólera o bacterias

-Q O C COO”
Anticuerpo IgG

F ig u ra 9 -1 2 Digestión proteolítica de la IgG. El tratam iento con pepsina produce un fragm ento dimérico F(ab ')2. El tratam iento con papaína produce
fragmentos Fab m onovalentes y un fragm ento Fe. Los fragmentos F(ab')2 y Fab se unen al a ntígeno pero carecen de una reglón Fe funcional. La cadena
pesada se muestra en azul; la cadena ligera en naranja, m . m o l., masa molecular.
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECÍFICAS FRENTE A ANTÍGENOS

Salm onella atenuadas, pueden promover una respuesta IgA. de inmunoglobulinas. Estas reacciones de recombinación son
La IgA se une al receptor para poli-Ig situado en las células análogas al emparejamiento y cosido de patrones similares pro­
epiteliales para el transporte a través de la célula. El receptor cedentes de una gran tela que luego se cortan dejando fuera las
para poli-Ig permanece unido a la IgA y éste se escinde para asas de tela extra intermedias. También puede tener lugar más
convertirse en el componente secretorio cuando se secreta la tarde la mutación somática del gen de inmunoglobulinas en
IgA secretoria desde la célula. Un adulto secreta alrededor de los linfocitos B activados en crecimiento que añade un número
2 g de IgA al día. La IgA secretoria aparece en el calostro, las enorme de secuencias codificadoras para la región variable y
secreciones intestinales y respiratorias, la saliva, las lágrimas ajusta la especificidad de la respuesta inmunitaria. Las secuen­
y otras secreciones. Los sujetos con deficiencias de IgA tienen cias de la región variable (V D J) se unen por recombinación a
una mayor incidencia de infecciones respiratorias. las secuencias |x, 8, 73, 71, 72 y 74, e, o y a 2 de los segmento
génicos C para producir un gen de cadena pesada. En los lin­
Inmunoglobulina E focitos pre-B y B inmaduros se produce ARNm que contiene
La IgE supone menos del I % de todas las inmunoglobulinas y los segmentos génicos de la región variable conectados con las
tiene una semivida de aproximadamente 2,5 días. La mayor secuencias génicas C para |x y 8 . El procesamiento del ARNm
parte de la IgE está unida a receptores para el Fe situados en elimina (jl o 8, como si fuera un intrón, para producir la inmuno-
los m astocitos, sobre los cuales sirve de receptor para alér­ globulina final. El linfocito pre-B expresa IgM citoplásmica,
genos y antígenos de parásitos. Cuando suficiente antígeno mientras que el linfocito B expresa IgM citoplásmica, IgM de
se une a la IgE situada en el mastocito, éste libera histamina, superficie e IgD de superficie. La IgM y la IgD son la única
prostaglandinas, factor activador de las plaquetas y citocinas. pareja de isotipos que puede expresarse en la misma célula.
La IgE es importante en la protección frente a la infección por El cambio de clase (IgM a IgG, IgE o IgA) se produce en
parásitos y es responsable de la hipersensibilidad anafiláctica los linfocitos B maduros en respuesta a diferentes citocinas
(tipo I ) (reacciones alérgicas rápidas). sintetizadas por los linfocitos T cooperadores C D 4 T H I o
T H 2 (v. fig. 9 -1 3 ). Cada uno de los segmentos génicos C,
excepto 8, está precedido de una secuencia de AD N llamada
In m u n o g e n é t ic a
lugar de cambio. Después de la señal adecuada de las cito­
La respuesta de anticuerpos puede reconocer hasta 10^ es­ cinas, el cambio por delante de la secuencia |x se recombina
tructuras pero toda%áa puede amplificar y centrar de forma con el cambio delante de las secuencias 73, 71, 72, o 74, e, o a i
específica una respuesta dirigida contra un desafío específico. o « 2, lo que crea un asa de A D N que después se elimina. El
Los mecanismos para generar este repertorio de anticuerpos procesamiento del transcripto de ARN da lugar al ARNm final
y las diferentes subclases de inmunoglobulinas están ligados para la proteína de cadena pesada de la inmunoglobulina. Por
a acontecimientos génicos aleatorios que acompañan el desa­ ejemplo, la producción de IgG I daría lugar a la escisión del
rrollo (diferenciación) dellinfocito B (fig. 9-13). ADN que contiene los segmentos génicos C C^, C§ y C 73 para
Los cromosomas humanos 2, 22 y 14 contienen los genes unir la región variable al segmento génico C 71. El cam bio
de las inmunoglobulinas para las cadenas k , \ y H, respectiva­ de clase cambia la función de la molécula de anticuerpo (re­
mente. Las formas en línea germinal de estos genes constan gión Fe) pero no cam bia su especificidad (región variable).
de grupos diferentes y separados de bloques de construcción Los últimos pasos en la diferenciación del linfocito B a linfo­
génica para las cadenas ligeras (segmentos génicos V y J ) y citos memoria no cambian el gen del anticuerpo. Los linfocitos
pesadas (segm entos génicos y D y J ) , que se recombinan memoria son linfocitos B reactivos frente al antígeno y de vida
para producir las regiones variables de las inmunoglobulinas. larga que expresan el marcador de superficie C D 45R O . Los
Estas regiones variables se recombinan entonces con los seg­ linfocitos memoria pueden activarse en respuesta al antígeno
mentos génicos de la región constante C. Para la cadena lige­ en fases posteriores para dividirse y producir entonces su an­
ra K hay 3 0 0 segmentos génicos y 5 segmentos génicos J y 1 ticuerpo específico. Las células plasmáticas son la última fase
segmento génico C. El número de segmentos génicos X para de diferenciación de los linfocitos B con un núcleo pequeño
V y J es más limitado. Para la cadena pesada hay de 3 0 0 a pero un citoplasma grande lleno de retículo endoplásmico. Las
1 .000 genes y 12 genes D y 6 genes J (cadena pesada) pero células plasmáticas son factorías de anticuerpos.
sólo 9 genes C (uno para cada clase y subclase de anticuerpo
[ | jl; 8; 73, 71, 72 y 74; £; oti y a 2] ) . Además, los segmentos Respu esta d e a n t ic u e r p o s
génicos para los péptidos transmembranarios pueden unirse
a los genes de la cadena pesada con el fin de perm itir que En los linfocitos pre-B se genera un repertorio inicial de in­
la m olécula de anticuerpo se inserte en la m embrana del munoglobulinas IgM e IgD m ediante los acontecim ientos
linfocito B como un receptor para el antígeno de activación. génicos descritos antes. La expresión de la IgM y la IgD en la
La producción de la molécula final de anticuerpo en el superficie celular acompaña a la diferenciación del linfocito
linfocito pre-B y B requiere la recombinación génica a nivel pre-B en linfocito B. El anticuerpo de superficie actúa como
del ácido desoxirribonucleico (ADN) y el procesamiento pos­ un receptor para el antígeno que desencadena la activación del
terior a la traducción a nivel del ácido ribonucleico (ARN) linfocito B por medio de sus receptores asociados de trans-
para ensamblar el gen de inmunoglobulina y producir el ARN ducción de la señal, Ig-a (C D 79a) e Ig-(3 (C D 79b). Una cas­
mensajero funcional (ARNm) (v. fig. 9 -13). Cada segmento cada de cinasas de tirosinas de proteínas, fosfolipasa C y flujos
y D y J está rodeado de secuencias de AD N que promueven de calcio activa la transcripción y el crecimiento celular para
la recombinación direccional y la pérdida de las secuencias mediar la señal activadora. Otras moléculas de superficie,
de A D N intermedias. Cada lugar de recombinación se une como el receptor C R2 (C D 21) para el complemento (C 3d),
entonces mediante nucleótidos insertados de forma aleatoria, amplifican la señal de activación. La combinación de estas
lo que puede aumentar la diversidad de la secuencia o romper señales desencadena el crecimiento y aumenta el número de
el gen dependiendo del número de nucleótidos insertados. células que producen anticuerpos frente a ese antígeno. De
La yuxtaposición de segmentos génicos V y J elegidos al azar esta forma se seleccionan los linfocitos B que mejor reconocen
de las cadenas ligeras y de los segmentos génicos y D y J de los diferentes epítopos de ese antígeno para que aumente su
las cadenas pesadas produce la región variable de las cadenas número en un proceso llamado expansión clonal.
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

K Cadena ligera
LV1 LVn 0 1-23 J 1-6 C* LV1 LV2 LVn J 1-5 C,
ADN en línea -0 0 0 {H H » « -3 '
germinal

Recombinación somática
(reordenamienlo del ADN):
unión D-J
D2 j Recombinación somática
LV1 LVn D1\J1 C„ Cj ' (reordenamiento del
AON): unión V-J
ADN
reordenado Recombinación somática

i <reordenamlenlo de< ADN):


unión V-D-J
D2
LV 1 /J1 C, Cj
V
l ''2 j i c<
> 3' 3'

I^TranscnpcIón I Transcripción
02 ^ V2
LV1/J1 Cs L Y J1 Ck
Transcripto de S ' 3' 5 '_t¿n H H H l---3'
ARN primario
I Procesamiento del
ARN (empalme)
Procesamiento del
ARN (empalme)

ARN mensajero -AAA


(ARNm)
I Traducción
L V ▼ C
Polipéptido 31

I
naciente Procesamiento, Procesamiento,
ducosilación de llucosilación de
la protefna i proteina
C
Polipéptido
maduro

Molécula de Ig
ensamtilada

F ig u ra 9 - 1 3 El reor(denamíento del gen (de inm unoglobulína para pro<ducir IgM. El gen (de inm unoglobulína en línea germ inal contiene múltiples
genes V, D y J q ue se recom binan y eliminan las secuencias intermedias y yuxtaponen las secuencias de la región variable a las secuencias de las cadenas
pesadas durante el desarrollo del linfocito B en la médula ósea. La ayuda del línfocito T induce la diferenciación de los linfocitos B y prom ueve la
recom binación génica y el cam bio de clase de Ig. Las regiones d e cam bio q ue están delante de los genes de la región constante (incluidas las subclases
IgG) perm iten la unión de la región V D J preformada con otros genes de la región constante de la cadena pesada, elim inando los genes |i-, 8 y otros
intermedios. Esto produce un gen de inm unoglobulína con la misma región V D J (excepto por la mutación somática) pero diferentes genes d e cadena
pesada. El em palm e del ARN mensajero (ARNm) produce el ARNm final de la IgM y la IgD.
RESPUESTA S INM UNITARIAS ESPECÍFICAS FRENTE A ANTÍGENOS 77

La expansión clonal de los linfocitos B específicos frente al del componente C 3d del complemento a su receptor [CR2,
antígeno aumenta el número de factorías de anticuerpos que C D 21] facilita la activación de la respuesta de anticuerpo. Por
producen el relevante y así aumenta la fuerza de la respuesta el contrario, la producción del anticuerpo frente a antígenos
del anticuerpo. La activación de los linfocitos B tam bién dependientes de T requiere las interacciones del linfocito B
promueve la m u ta c ió n s o m á t ic a d e la región v a r ia b le , lo con el linfocito T cooperador por medio del C D 4 0 [situado
q u e increm enta la d iv ersid a d de la s m oléculas d e anticuerpo en el linfocito B), el C D 4 0 L ^infocito T ) y la acción de las
dirigidas contra el antígeno específico. Se estimulan preferen­ citocinas. Diferentes combinaciones de citocinas producidas
tem ente los clones de linfocitos B que expresan el anticuerpo por linfocitos T cooperadores inducen el cambio de clase.
con la mayor fuerza de unión con el antígeno. Esto selecciona L a s respu estas d e los lin focitos T H l c oop erad ores (IF N -y )
una m ejor respuesta de anticuerpos. prom u even la prod u cción d e IgG . L a s respuestas d e los lin ­
Los antígenos independientes de T tienen estructuras fo c ito s T c o o p era d o res T H 2 (IL -4 , IL -5 , IL -6 ) p rom u ev en
repetitivas que pueden entrecruzar un número suficiente la p rod u cción d e Ig G , IgE e IgA. L a p rod u cción d e IgA la
de anticuerpos de superficie para estimular el crecimiento prom ueven especialm en te la IL -5 y el TG F-P (fig. 9 -1 4 }. Los
de los linfocitos B específicos frente al antígeno. La unión linfocitos memoria se desarrollan con la ayuda del linfoci-

Aumenlo de clase II
en linfocitos B. CD
y macrólagos

tCCDA
t Fagocitosis
tMuerte iniraceluiar

T
Antígeno
p. ej.. infecaon
por micobacterías
constante

Granuk>nr»a do
célula ep«lelioide

F ig u ra 9 - 1 4 La ayuda del linfocito T determ ina la naturaleza de la respuesta inmunitaria humoral. Las interacciones entre el receptor y el ligando entre
los linfocitos T y los linfocitos B y las citocinas asociadas a T H l o TH2 determ inan la consiguiente respuesta. Las respuestas T H l las inicia la interleuci-
na (IL) 12 y las conduce el interferón y f/FAZ-yA y prom ueven las respuestas celulares y la producción de la \gQ (líneas c o n tin u a s azules) e inhiben las res­
puestas TH2 (líne as d is c o n tin u a s azules). La IL-4y la IL-5 de los linfocitos TH2 prom ueven las respuestas humorales (líneas co n tin u a s ro ja s) e 'm hlhen
las respuestas T H l (líne as d is c o n tin u a s rojas). El epitelio de la mucosa prom ueve la producción de IgA secretoria. Los recuadros coloreados denotan
resultados finales. T, aum ento; i , re d u c c ió n M P C célula presentadora d e antígeno; CCDA, citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos; CD, células
dendríticas; CTL, linfocito T citotóxico; GM-CSF, factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos; HTR, hipersensibilidad de tipo retardado;
TNF, factor de necrosis tumoral.
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to T. La diferenciación terminal produce la última factoría Provocación primaria Provocación secundaria


de anticuerpos, la célula plasmática. con el antígeno con el antígeno
Durante una respuesta inmunitaria se producen anticuer­
pos contra diferentes epítopos del objeto extraño, proteína Respuesta Respuesta
.000 '
o microorganismo infeccioso. E l an ticu erpo específico es una pnnw ia secundarj^ff^
m ezcla d e m uchas m oléculas d e inm unoglohulinas diferentes
p r o d u c id a s p o r m uchos lin focitos B d iferen tes (anticuerpo tituk)de
policlonal), y cada molécula de inmunoglobulina difiere en anticuerpos Lag
‘ 10
el epítopo que reconoce y en la fuerza de la interacción. Las
moléculas de anticuerpo que reconocen al mismo antígeno
pueden unirse con diferente fuerza (afinidad, unión monova­ 0-
lente a un epítopo; avidez, unión multivalente del anticuerpo 21
al antígeno}. Días
Los anticuerpos monoclonales son anticuerpos idénticos F ig u r a 9 - 1 5 Evo lu ción tem po ral de las respuestas Inm unitarias. La
producidos por un solo clon de células o por mielomas (cánce­ respuesta prim aria se produce después de un período d e espera. La res­
res de células plasm áticas) o hibridomas. Los hibridomas puesta IgIVI es la primera respuesta. La respuesta Inmunitaria secundaría
son células clonadas en el laboratorio obtenidas de la fusión de (respuesta anam nésica) alcanza un título elevado, dura más y consiste
sobre todo en IgG.
células esplénicas productoras de anticuerpos y una célula
de mieloma. En 1975, Kohler y Millstein idearon la técnica de
producción de anticuerpos monoclonales a partir de hibrido- 2. Un investigador in te n tó utilizar fragm entos F(ab ')2 marcados
mas de linfocitos B. El hibridoma es inmortal y produce un con fluorescencia para localizar m oléculas de la clase II d el
solo anticuerpo (monoclonal). Esta técnica ha revolucionado M HC en la superficie celular de las células presentadoras
el estudio de la inmunología porque perm ite seleccionar de antígeno sin entrecruzarlas (unión de dos m oléculas a la
(clonar) las células individuales productoras de anticuerpo vez).
y su desarrollo en factorías celulares para la producción de 3. A un paciente se le diagnostica una infección p o r una
grandes cantidades de ese anticuerpo. Se han comercializado cepa específica de la gripe A (A/Bangkok/1/79/H3N2) p o r
anticuerpos monoclonales como reactivos diagnósticos y con la presencia de IgG frente a virus de la gripe en el suero
un propósito terapéutico. tom ado en la prim era visita (a los 2 días del in icio de los
síntomas).
Evolución temporal de la respuesta
de anticuerpos 4. Se considera que un paciente es incapaz de utilizar el sistema
d el com plem ento de b id o a una deficiencia de linfocitos T,
La respuesta primaria de anticuerpos se caracteriza por la
porque esto im p id e p rom over el cam bio de clase de los
producción inicial de IgM. Los anticuerpos IgM aparecen
linfocitos B.
en la sangre a los 3 días a 2 semanas de la exposición a un
nuevo inm unógeno. E ste es el único tip o de anticuerpo 5. El análisis de ¡os genes de inm unoglobulinas de los linfocitos B
desencadenado contra los glúcidos (cápsula bacteriana). tom ados d e l paciente descrito en la frase 4 no contenía
La producción de IgG, IgA o IgE requiere el desarrollo de secuencias génicas de regiones variables VDJ recombinadas.
una respuesta suficiente de linfocitos T cooperadores para 6. Se considera que un paciente tiene una deficiencia de
prom over el cam bio de clase y requiere unos 8 días. El linfocitos B porque las concentraciones séricas de IgE e IgD
anticuerpo sérico predom inante será IgG (fig. 9 -1 5 ). Los eran indetectables a pesar de concentraciones adecuadas de
prim eros anticuerpos que se producen reaccionan con el IgG e IgM.
antígeno residual y por tanto son eliminados con rapidez.
Sin embargo, después de un lapso de tiem po, el título de Las respuestas a estas p re g u n ta s e stán disp o n ib les en

anticuerpos aumenta de forma logarítmica hasta alcanzar w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s

una fase estable.


Una nueva exposición a un inmunógeno, una respuesta BIBLIO G R A FÍA
secundaria, induce una respuesta de anticuerpos reforzada Abbas AK, et al: C ellu lar a n d m olecu lar im munology, ed 6 , Philadelphia,
(también denominada respuesta anam nésica). La activación 2 0 0 7 , Saunders.
DeFranco AL, Locksley RM, Robertson M: Im m unity: the im m une res-
de Unfocitos memoria preformados da lugar a una produc­
pon se in infectious an d in flam m atory disease, Sunderland, Mass, 2007,
ción mucho más rápida de anticuerpos, que dura más y alcanza un Sinauer Associates.
título más alto. Los anticuerpos en una respuesta secundaria Janeway C A , e t al: Im m u n obiology: the im m u n e system in h ealth a n d
son sobre todo de la clase IgG. d isease, ed 6 , New York, 2 0 0 4 , Garland Science.
Kindt T J, Goldsby RA, Osbome BA: K u b y immunology, ed 6, New York,
2 0 0 7 , W H Freeman.
PREGUNTAS Kumar V, Abbas AK, Fausto N: R obbin s a n d C otra n path olog ic h asis o f
d isease, ed 7, Philadelphia, 20 0 5 , Saunders.
¿Qué afirmación de las siguientes es incorrecta y por qué? Sompayrac L: H ow the im mune system w orks, ed 2, Malden, Mass, 2003,
Blacicwell Scientific.
/. El laboratorio estudió la presencia en un lactante de Trends Im m unol: Issues contain understandable reviews on current topics
anticuerpos IgM maternos. in immunology.
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

RESPUESTAS 4. Aunque la perforína la producen los linfocitos T y se


parece al C9, el hígado y otras células, pero no los linfocitos T,
1. Las moléculas de IgM son demasiado grandes para sintetizan componentes del complemento, de modo que una
abandonar el plasma y no pueden atravesar la placenta. deficiencia de linfocitos T no afectará a las concentraciones del
2. Las moléculas de inmunoglobulinas nativas y de complemento. Además, la IgM fija muy bien el complemento y
F(ab ')2 son divalentes o multivalentes y pueden unirse a se producirá sin la presencia de los linfocitos!.
más de una molécula de la superficie celular, lo que las 5. La diferenciación en un linfocito B requiere la
entrecruzará. recombinación de la región variable VDJ, pero esto ocurre sin la
3. La IgG sólo se produce unos 6 días después de una ayuda del linfocitoT.
primera infección y requiere la ayuda del linfocitoT. Podría 6 . La porción Fe del gen de la inmunoglobulina produce
haber IgG de una infección anterior. La IgM que se produce inmunoglobulinas en el orden de IgM, IgD, IgG, ¡gE e IgA. Sería
pronto en una infección como parte de una respuesta primaria improbable que no se expresara IgD y se expresaran el resto de
es una buena indicación de una primoinfección. los genes.
o Respuestas inmunítarias
a los microorganismos infecciosos

os capítulos anteriores de esta sección introdujeron los y después a respuestas solubles de anticuerpos. La respues­
L diferentes actores inmunitarios y sus características. Este
capítulo describe las diferentes funciones que desempeñan
ta antibacteriana del hospedador más importante es la des­
trucción fagocítica mediante los neutrófilos y los macrófagos.
en la protección del hospedador fren te a la infección, sus El com plem ento y el anticuerpo facilitan que los fagocitos
interacciones y las consecuencias inmunopatogénicas que absorban a los microbios y las respuestas del linfocito T C D 4
pueden surgir como resultado de la respuesta (cuadro 10- 1}. T H l 7 y T H l aumentan y regulan su función. En el cuadro 10-2
se presenta un resumen de las respuestas antibacterianas.
La mayoría de las infecciones se controlan con respuestas
innatas antes de que com iencen las respuestas inmunita-
rias, pero las respuestas inmunitarias son necesarias para Inicio de la respuesta
resolver las infecciones más problemáticas. La importancia Una vez que pasan las barreras, las superficies de las células
de cada componente de la respuesta del hospedador difiere bacterianas activan las vías alternativas o de la lectina del
en los distintos microorganismos infecciosos [tabla 10- 1), y complemento presentes en el líquido intersticial y en el suero.
su importancia resulta obvia cuando faltan por problemas El sistema del complemento (v. cap. 8} es una defensa anti­
génicos o están inhibidos por la quimioterapia, la enfermedad bacteriana importante y muy temprana. La vía alternativa del
o la infección (p. ej., el síndrome de la inmunodeficiencia complemento (properdina) puede activarse con ácido teicoi-
adquirida [SID A ]}. co, peptidoglucano y lipopolisacáridos (LPS} sin anticuerpos
Los seres humanos tienen tres líneas básicas de protección y, con la proteína ligadora de mañosa, puede activar la vía
contra la infección por los microbios que bloquean su entrada, de la lectina del com plem ento. Más adelante, cuando esté
propagación en el cuerpo y colonización inapropiada. presente la inmunoglobulina (Ig} M o IgG, se activará la vía
1. Barreras naturales, como la piel, las mucosas, el epi­ clásica del complemento. Las tres \áas convergen para generar
telio ciliado, el ácido gástrico y la bilis, restringen la una C3-convertasa que escinde el C3 en C3a, C 3b y C 3d y la
entrada del microorganismo. C5-convertasa que produce C5a. Los fragmentos «a» activan,
2. D efensas inmunitarias innatas que no son específi­ atraen y promueven la anafilaxia incorporando neutrófilos y
cas frente al antígeno, como la fiebre, el interferón, macrófagos en el sitio de la infección. El C 3b promueve su
el com plem ento, los neutrófilos, los macrófagos, las fagocitosis como una opsonina. El complejo de ataque de la
células dendríticas [C D } y los linfocitos citolíticos es­ membrana (MAC} puede destruir directamente las bacterias
pontáneos (NK, n atu ral killer], proporcionan respues­ gramnegativas y, en una extensión mucho menor, las bacte­
tas locales rápidas que actúan en el sitio de la infección rias grampositivas (el peptidoglucano grueso de la bacteria
y pueden restringir el crecimiento y la propagación del grampositiva la protege de los com ponentes}. N eisseria son
microorganismo. especialm ente sensibles a la acción lítica del complemento
3. Respuestas inmunitarias adaptatívas específicas frente debido a la estructura truncada del lipooligosacárido en la
al antígeno, tales como los anticuerpos y los linfoci­ parte exterior de la membrana. El com plem ento facilita la
tos X refuerzan las protecciones innatas y se dirigen, eliminación de todas las bacterias mediante la producción de:
atacan y eliminan de forma específica a los invasores 1. Factores quimiotácticos (C 5 a ) para atraer neutrófilos
que consiguen atravesar las primeras dos defensas. y macrófagos al sitio de la infección.
Las funciones de la barrera y las respuestas innatas son 2. A nafilotoxinas (C 3 a , C 4 a y C 5 a ) para estimular al
generalm ente suficientes para controlar la mayoría de las m astocito a liberar histamina y así aumentar la per­
infecciones antes de que se produzcan los síntomas o la en­ meabilidad vascular, permitiendo el acceso al sitio de
fermedad. El inicio de una respuesta inmunitaria específica la infección.
nueva frente al antígeno tarda tiempo y las infecciones pue­ 3. Opsoninas (C 3 b ), que se unen a la bacteria y promue­
den crecer y propagarse durante este período. La inmunidad ven su fagocitosis.
y la memoria inmunitaria desencadenadas previamente por 4. U n activador del linfocito B (C 3 d ) que aumenta la
la infección o la vacunación puedan activarse con la suficiente producción de anticuerpos.
rapidez como para controlar la mayoría de las infecciones. Las moléculas de la pared celular bacteriana (ácido teicoico
y fragmentos de peptiglucanos de las bacterias grampositivas
y lípidos A de los LPS de las bacterias gramnegativas) también
activan los receptores para el patrón molecular asociado a mi­
Respu esta s a n t ib a c t e r ia n a s
croorganismos patógenos (PAMP), que incluyen los receptores
La figura 10-1 ilustra la progresión de las respuestas protectoras del tipo to ll (T L R ) de la superficie celular y los receptores
a los ataques bacterianos. La protección se inicia con la activa­ citoplásmicos de los peptidoglucanos: proteína del dominio de
ción local de las respuestas innatas e inflamatorias y progresa oligomerización ligador de nucleótidos (NOD} 1, N 0 D 2 y la
hacia las respuestas de fase aguda y específicas del antígeno a criopirina (cuadro 10-3}. El lípido A (endotoxina) se une al
escala sistémica. La respuesta progresa de factores antibacteria­ TLR4 y a otros receptores PAMP y es un fuerte activador de las
nos solubles [péptidos y complemento} a respuestas celulares CD, los macrófagos, los linfocitos B y otras células seleccionadas
© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos
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(p. ej., células epiteliales y endoteliales]. La fijación de estos


PAMP a los receptores en las células epiteliales, los macrófagos,
las células de Langerhans y las C D activa las cascadas de la Resumen de la respuesta inm unítaría
cinasa que activan al inflamasoma y también promueven la pro­
El drama de la respuesta del hospedador a la infección se
ducción de citocinas (incluidas las citocinas de la fase aguda,
despliega en varios actos tras un desafío infeccioso, con
la interleucina (IL )1 , la IL -6 y el factor de necrosis tumo-
ciertas diferencias que dependen del villano microbiano.
ral [TN F]), las respuestas protectoras y la maduración de las CD. Los actores son las células de la respuesta innata, incluidos
El inflamasoma promueve la escisión de la IL-1 (3 y la IL-18 para los neutrófilos; las células del linaje monocito-macrofágico,
reforzar la inflamación local. Los linfocitos NK, los linfoci- las células dendríticas inmaduras (CDi) y las células
tos NKT y los linfocitos T 7/8 que residen en el tejido también res­ dendríticas (CD); los linfocitos citolíticos espontáneos (N ^ ;
ponden, producen citocinas y refuerzan las respuestas celulares. los linfocitos T y B de la respuesta específica frente
La IL-1 y el TNF-ot aumentan la respuesta inflamatoria al antígeno; y otras células. Estas células se distinguen
estimulando de forma local los cambios en el tejido, promo­ por sus estructuras externas, sus trajes, que también
viendo la diapédesis de los neutrófilos y los macrófagos hacia definen sus papeles en la respuesta inmunitaria. El Acto 1
la zona y activando a estas células y las respuestas sistémicas. empieza en el lugar de la infección y en él participan
La IL-1 y el T N F -a son pirógenos endógenos, que inducen la las respuestas innatas. La activación del complemento
fiebre y también inducen la respuesta de la fase aguda. La libera los fragmentos «a», C3a, C4a y C5a, que atraen
inflamación, la lesión tisular, la prostaglandina E2 y los interfe- a los actores al lugar de la infección. Los neutrófilos y,
rones asociados a la infección también pueden desencadenar la después, los macrófagos activados, actúan directamente
respuesta de fase aguda. La respuesta de fase aguda promueve sobre las bacterias y la infección. Los interferones del tipo 1
cambios que refuerzan las defensas del hospedador, y entre limitan la replicación del virus, activan a los linfocitos NK
ellos están la fiebre, la anorexia, la somnolencia, los cambios y también facilitan el desarrollo de las posteriores
metabólicos y la producción de proteínas. Las proteínas de fase respuestas de linfocitos T. Los linfocitos NK proporcionan
respuestas rápidas a la infección y matan a las células
aguda producidas y liberadas dentro del suero son la proteí­
infectadas por virus y a las tumorales. Los linfocitos NK
na C-reactiva, los componentes del complemento, las proteínas
vuelven en el Acto 2 para matar a las células decoradas
de la coagulación, las proteínas ligadoras de LPS, las proteí­
con anticuerpos (citotoxicidad celular dependiente de
nas de transporte, los inhibidores de proteasas y las proteínas de anticuerpos [CCDA]). Las CD establecen un puente
adherencia. La proteína C-reactiva forma complejos con los entre las respuestas protectoras innata y específica del
polisacáridos de numerosas bacterias y hongos y activa la vía antígeno al producir en primer lugar citocinas para
del complemento, lo que facilita la eliminación de estos mi­ aumentar la acción y tomar después la carga adquirida
croorganismos a través de una mayor fagocitosis. Las proteínas por fagocitosis y pinocitosis para llevarla hasta el ganglio
de fase aguda refuerzan las defensas innatas contra la infección. linfático como la única célula presentadora de antígeno
Las C D inmaduras (CD i), los macrófagos y otras células del (APC) que puede iniciar una respuesta inmunitaria. El
linaje del macrófago producirán IL-23 e IL -I2, además de las Acto 2 comienza en el ganglio linfático, donde las CD
citocinas de fase aguda. La IL -I2 activa los linfocitos NK en el maduras presentan el antígeno a los linfocitos T. La trama
sitio de la infección, que pueden producir interferón 7 [IFN-7} de esta historia puede reforzar las respuestas inflamatorias
para activar más a los macrófagos y las CD . La IL-12 y la IL-23 locales (T H l7, T H l) o iniciar respuestas humorales
activan las respuestas inmunitarias T H l y T H I7, respectivamen­ sistémicas (TH 2), dependiendo del diálogo de citocinas
te, para reforzar la función de los macrófagos y los neutrófilos. entre la CD y el linfocito T. Los linfocitos T desempeñan
Las células epiteliales también responden a los PAMP y liberan un papel central en la activación y el control (ayuda)
citocinas para promover las protecciones naturales. de las respuestas inmunitarias e inflamatorias mediante
Estas acciones inician la inflamación aguda local. La ex­ la liberación de citocinas. En el Acto 3, el reparto de
pansión de los capilares y el incremento del flujo sanguíneo linfocitos T y de linfocitos B aumenta en número y
se diferencia en células efectoras y plasmáticas para
llevan más sustancias antibacterianas a la zona. El aumento de
proporcionar respuestas inmunitarias específicas celulares
la permeabilidad y la alteración de las moléculas superficiales
y de anticuerpos frente al antígeno. Los macrófagos y
de la estructura microvascular permiten el acceso de líquido
los linfocitos B refinan y fortalecen la dirección de la
y proteínas del plasma y atraen y facilitan la entrada de los
respuesta como APC. Ciertos miembros del reparto de
leucocitos al sitio de la infección. Las cininas y los factores de linfocitos B y T mantienen un perfil bajo y se convierten
la coagulación inducidos por el daño tisular (p. ej., factor X II en células memoria capaces de repetir el drama con mayor
[factor de Hageman], bradicinina, fibrinopéptidos) también rapidez y eficiencia en el futuro. Los actores celulares
participan en la inflamación. Estos factores aumentan la per­ específicos, las interacciones entre receptores y ligandos
meabilidad vascular y son quimiotácticos para los leucocitos. que tienen lugar entre los actores y el diálogo de citocinas
Los productos del metabolismo del ácido araquidónico tam ­ determinan el drama que se desplegará durante la
bién influyen en la inflamación. La ciclooxigenasa 2 (C O X-2) respuesta inmunitaria.
y la 5-lipooxigenasa convierten el ácido araquidónico en pros-
taglandinas y leucotrienos, respectivam ente, que median
básicamente en todos los aspectos de la inflamación aguda. A pueden originar un shock séptico, debido en gran medida
la evolución de la inflamación le pueden seguir incrementos a la filtración de grandes cantidades de líquido en el tejido.
rápidos de las concentraciones séricas de las proteínas de fase
aguda, especialmente de la proteína C-reactiva [que puede Respuestas fagocíticas
multiplicarse por mil en 24 o 48 horas) y del amiloide sérico A. El C 3a, el C 5a, los productos bacterianos (p. ej., form il-
Aunque estos procesos son beneficiosos, también provocan metionil-leucil-fenilalanina [f-m et-leu-fe]) y las quimiocinas
dolor, eritem a, calor y edema y promueven el daño tisular. producidas por las células epitehales, las células de Langer­
El daño tisular se debe en cierta medida al complemento y hans y otras células en la piel y el epitelio de la mucosa son
los macrófagos pero sobre todo a los neutrófilos. Cuando poderosos factores quimiotácticos para los neutrófilos, los ma­
se desencadena a nivel sistém ico, estas mismas funciones crófagos y, más adelante en la respuesta, para los linfocitos. Las
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

Tabla 10-1 Im portancia de las defensas antim icroblanas en cada m icroorganism o Infeccioso
Bacterias íntracelulares
Complemento +++ -
Intetferóna/p - -
Neutrófilos ++++ -
Macrófagos +++ +++*
Linfocitos citolíticos espontáneos - - +++
TH1 CD4 + ++ +++
TH17 ++ ++
Linfocitos T citotóxicos CD8 - ++
Anticuerpos +++ + ++{igE)'

*Por aaivación de los macrófagos.


^La inmunoglobulina E y los mastocitos son especialmente importantes en las infecciones por iielmintos.

quimiocinas y el factor de necrosis tumoral a (TN F*a) hacen para la fibronectina (específicamente para Staphylococcus au-
que las células endoteliales que recubren los capilares (cerca de reus] y receptores para opsoninas, incluidos el complemento
la inflamación) se separen y que pasen los leucocitos mediante (C 3b), la proteína C-reactiva, la proteína ligadora de mañosa
la expresión de moléculas complementarias de adhesión [«vel­ y la porción Fe del anticuerpo. Los microbios se interiorizan
ero» molecular) para promover la diapédesis (v. fig. 8-7). Los en una vacuola fagocítica que se fusiona con los lisosomas
neutrófilos polimorfonucleares (PM N ), los monocitos y en primarios (macrófagos) o gránulos (PM N) para permitir la
ocasiones los eosinófilos son las primeras células que llegan a inactivación y la digestión del contenido de la vacuola. La des­
la zona en respuesta a la infección; a continuación les siguen los trucción fagocítica puede ser dependiente o independiente
macrófagos. El reclutamiento de cayados inmaduros de neu­ del oxígeno, según las sustancias químicas antimicrobianas
trófilos procedentes de la médula ósea durante la infección está producidas por los gránulos (v. fig. 8-8 y cuadro 8-5).
indicado por una «desviación a la izquierda» en el hemograma En el neutrófilo, el peróxido de hidrógeno y el ión supe-
completo. Los macrófagos y la respuesta T H 17 incorporan y róxido producidos por la oxidasa del fosfato del dinucleótido
activan a los neutrófilos, y el IFN-7 producido por los linfoci­ nicotinamida adenina reducido (NADPH ) y los iones hipo-
tos NK y los linfocitos T C D 4 T H l activa a las CD . clorito generados por la mieloperoxidasa destruyen a los m i­
Las bacterias se unen a los neutrófilos y los macrófagos croorganismos. El óxido nítrico producido por los neutrófilos
mediante receptores para los glúcidos bacterianos [lectinas y los macrófagos activados tiene actividad antimicrobiana y
[proteínas que se unen a azúcares específicos]), receptores es además la segunda m olécula m ensajera más importante

0-4 h 4 -9 6 h

Respuestas innatas

■ Inhibidor
Activador
^ Elector

Ganglio Infático O Me. CD


O Linlocito B
O LnfcxátoT
¿ F ig u ra 1 0 -1 Respuestas antibacterianas. Primero, las respuestas innatas no específicas del antfgeno atraen y prom ueven las respuestas del neutrófilo
ú polimorfonuclear (PM N) y el m acrófago (MQ). Las células dendríticas (CD) y el antígeno llegan al ganglio linfático para activar las respuestas inmunitarias
tem pranas (TH17, TH1 e IgM). Más adelante, se desarrollan las respuestas TH2 sistémicas de anticuerpos y las células memoria. La d u ra c ió n d e estos
g e p is o d io s se in d ic a e n la p a r t e s u p e rio r d e la fig u r a . APC, células p resentadoras d e antígenos; CTL, linfocito T citotóxico; IF N -y , interferón -y;
@ IL, interleucina; TG F-^, factor de crecim iento transformador (5; TH, (linfocito) T cooperador; TNF-a, factor de necrosis tum oral a.
82 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

CUADRO 10-2

Resumen de respuestas antíbacterianas Com ponentes bacterianos que activan respuestas


protectoras
Com plem ento
Vías alternativa y de la lectina activadas por superficies Activación directa a través de receptores del patrón
bacterianas asociados a m icroorganism os patógenos
Vía clásica activada más tarde por complejos Upopolisacárido (endotoxina)
anticuerpo-antígeno Acido lipoteicoico
Producción de proteínas quimiotácticas y Lipoarabinomanán
anafilotóxicas (C3a, C5a) Glucolípidos y glucopéptidos
Opsonización de bacterias (C3b) Polianiones
Promoción de la muerte de las bacterias gramnegativas N-Formil péptidos (formil-metionil-leucil-fenilalanina)
Activación de linfocitos B (C3d) Fragmentos de peptidoglucano
Neutrófílos Quim iotaxis a través de C3a, C5a y otros m ecanismos
Importante célula fagocítica antibacteriana Fragmentos de peptidoglucano
Muerte mediante mecanismos dependientes e Activación en la superficie celular de la vía alternativa del
independientes del oxígeno complemento
Células dendríticas
Producción de citocinas de fase aguda (TNF-a, IL-6, IL-1);
IL-23, IL-12; IFN-a
Presentación del antígeno a linfocitos T CD4 y C D 8 estimulan los receptores del dolor. Además, durante la fago­
Inicio de respuestas inmunitarias en linfocitos T vírgenes citosis, los gránulos pueden derramar su contenido y dañar
Macrófagos el tejido. Los neutrófilos tienen vidas cortas y los neutrófilos
muertos producen pus.
Importante célula fagocítica antibacteriana
Muerte mediante mecanismos dependientes e Al contrario que los neutrófilos, los macrófagos tienen
independientes del oxígeno vidas largas, pero las células tienen que activarse (enfadarse)
Producción de TNF-a, IL-1, IL-6, IL-23, IL-12 con IFN -7 (el mejor) para destruir los microbios fagocitados.
Activación de respuestas de fase aguda e inflamatorias El factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos
Presentación del antígeno a linfocito T CD4 (G M -C SF ), el TNF-ot y la linfotoxina [TN F-p] mantienen la
acción antimicrobiana. Al inicio de la infección, los linfoci­
Linfocitos T
tos NK y NKT producen el IFN-'y y más adelante lo producen
Respuesta de linfocito T 7/8 frente a metabolitos bacterianos
los linfocitos T C D 4 . Además de los macrófagos tisulares,
Respuesta de linfocito T citolítico espontáneo I a la
los m acrófagos esplénicos son im portantes para eliminar
presentación en C D I de glucolípidos micobacterianos
bacterias, especialmente bacterias encapsuladas, de la sangre.
Respuestas TH I CD 4 importantes para las bacterias,
en especial las infecciones intracelulares Los sujetos asplénicos (por motivos congénitos o quirúrgicos)
Respuesta TH2 CD 4 importante para protecciones con son muy proclives a la neumonía, la meningitis y otras ma­
anticuerpos nifestaciones de la infección por Streptococcus pneum oniae,
La respuesta TH 17 CD 4 activa a los neutrófílos N eisseria m eningitidis y otras bacterias encapsuladas.
Anticuerpo Respuesta específica frente al antígeno
Unión a estructuras de la superficie de las bacterias a la exposición bacteriana
(fimbrias, ácido lipoteicoico, cápsula)
Bloqueo de unión Al ingerir las bacterias y después de que los componentes
Opsonización de bacterias para fagocitosis bacterianos estim ulen los TLR , las células de Langerhans
Promoción de acción del complemento y las C D i maduran, dejan de fagocitar y se mueven hacia
Promoción de eliminación de bacterias los ganglios linfáticos para procesar y liberar sus antígenos
Neutralización de toxinas y enzimas tóxicas interiorizados y presentarlos a los linfocitos T (fig. 10-2). Los
péptidos antigénicos (de más de 11 aminoácidos) produci­
IF N -a , interferón a ; IL , interleucina; T N F -a, factor de necrosis dos por las proteínas fagocitadas (vía exógena) están unidos a
tumoral a . las moléculas del complejo principal de histocompatibilidad
de la clase II (M H C) y las células presentadoras de antígenos
(APC) las presentan a los linfocitos T C D 4 THO vírgenes.
(com o el m onofosfato de adenosina cíclico [A M Pc]) que Los linfocitos T C D 4 se activan mediante una combinación
aumenta las respuestas inflamatorias y de otro tipo. La des­ de 1) péptido antigénico en la hendidura de la m olécula
trucción independiente del oxígeno en los neutrófilos tiene del M H C II con el receptor del linfocito T para el antígeno
lugar en el momento de la fusión del fagosoma con los grá- (TC R ) y con el C D 4, 2) señales coestimuladoras proporcio­
nulos azurófilos que contienen proteínas catiónicas (p. ej., nadas por la interacción de las moléculas B7 de la C D con las
catepsina G ) y los gránalos específicos que contienen lisozi- moléculas C D 28 de los linfocitos T y 3) IL-6 y otras citocinas
ma y lactoferrina. Estas proteínas destruyen a las bacterias producidas por la C D . Los linfocitos THO producen IL -2,
gramnegativas interrumpiendo la integridad de su membrana IFN-'Y ^ IL-4. D e forma simultánea, las moléculas bacterianas
celular, pero son bastante menos eficaces frente a las bacterias con estructuras repetitivas (p. ej., polisacáridos capsulares)
grampositivas, a las que se destruye sobre todo a través de interaccionan con los linfocitos B y expresan IgM e IgD en la
mecanismos dependientes del oxígeno. superficie específicas frente al antígeno y activan el crecimien­
Los neutrófilos contribuyen a la inflamación de diferentes to de la célula y la producción de IgM. Los polisacáridos m i­
formas. Liberan prostaglandinas y leucotrienos y aumentan crobianos de la pared celular, especialmente el LPS y también
la permeabilidad vascular, provocan tumefacción (edema) y el componente C 3d del complemento, activan a los linfoci-
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS 83

F ig u ra 1 0 -2 Inicio y expansión d e las respuestas inmunitarias específicas. Las células dendríticas inmaduras (CDi) en el sitio de la infección adquieren
bacterias y restos, los com ponentes bacterianos activan a la célula a través de los receptores del tipo t o ll (TLR) y entonces las células dendríticas (CD)
maduran, se m ueven hacia el ganglio linfático y presentan el antígeno a los ¡infocitos T vírgenes para iniciar la respuesta específica frente al antíge-
no. D urante una respuesta secundaria o memoria, los linfocitos B, los m acrófagos y las CD pueden presentar el an tígen o para iniciar la respuesta.
IF N -y, interferón y ; IL, interleucina; /W9, macrófago; TH, (linfocito) T cooperador.

tos B y promueven respuestas específicas de anticuerpos IgM. para extender la respuesta inmunitaria y 2) estimulan a los
Los ganglios linfáticos tumefactos indican la activación del linfocitos B para que produzcan anticuerpos que liguen el
linfocito como respuesta a la exposición antigénica. complemento (IgM, IgG en el momento del cambio de clase).
Los lin focito s T 7 /8, los lin focito s N KT y las células Estas respuestas son importantes en las fases iniciales de una
linfocíticas innatas [entre ellas los linfocitos NK) también defensa antibacteriana. Las respuestas T H l también son esen­
proporcionan respuestas tempranas. Los linfocitos T 7/8 en ciales para combatir las infecciones bacterianas intracelulares
el tejido y en la sangre detectan los metabolitos amina fos- y las micobacterias, que se esconden del anticuerpo. El IFN -7
forilados de algunas bacterias [E scherichia coli, m icobacte- activa los macrófagos para destruir el microbio fagocitado.
rias} pero no de otras [estreptococos, estafilococos). Las C D La estimulación crónica de los linfocitos T C D 4 T H l m e­
pueden presentar glucolípidos bacterianos para activar a los diante los macrófagos que expresan un antígeno microbiano
linfocitos N KT. Estos linfocitos T y las células linfocíticas (micobacteriano o histoplásmico) y la producción de IFN -7
innatas producen IFN -7 , que activa a los macrófagos y a las pueden transformar otros macrófagos en células epitelioides
C D para reforzar las reacciones inflamatorias celulares locales. y células gigantes, que pueden rodear la infección y producir
La conversión de los linfocitos THO en linfocitos T H 17 un granuloma. L os linfocitos T C D 8 no son m uy im portantes
y T H l inicia la expansión de la respuesta del hospedador. p a r a la in m u n idad an tib acterian a.
Las citocinas de fase aguda IL-1 y T N F -a junto al T G F -P Las respuestas de los linfocitos T C D 4 T H 2 se producen
promueven el desarrollo de los lin focitos T C D 4 T H 1 7 . sin IL-12 en los ganglios linfáticos más distantes. Las C D tam­
Los linfocitos T H l 7 producen IL -17 y TNF-cx para activar bién inician estas respuestas y la presentación del linfocito B
las células epiteliales y los neutrófilos y promueven además al antígeno las mantiene. La fijación del antígeno al anticuerpo
la producción de péptidos antim icrobianos. Las respues­ de la superficie de la célula en los linfocitos B activa a los
tas TH 17 son importantes para las respuestas antibacterianas linfocitos B y también promueve la absorción del antígeno,
tempranas y las respuestas antimicobacterianas. También es su preparación y la presentación de los péptidos antigénicos
importante un equilibrio entre las respuestas T H l 7 y Treg en las m oléculas del M H C de la clase II al linfocito C D 4
para regular las poblaciones de la flora intestinal. TH 2. El linfocito TH 2 produce IL-4, IL-5, IL-6 , IL-10 e lL-13,
Las C D que producen lL -1 2 promueven las respuestas lo que aum enta la producción de IgG y, dependiendo de
T H l. Los linfocitos T C D 4 T H l 1} promueven y refuerzan otros factores, la producción de IgE o IgA. La respuesta TH 2
las respuestas inflamatorias (p. ej., activación por el IFN -7 también promueve la diferenciación terminal de los linfoci­
del macrófago) y el crecimiento de los linfocitos T y B (IL-2) tos B en fábricas de anticuerpos: las células plasmáticas.
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Los linfocitos T C D 4^ C D 25^ reguladores (Treg) evitan del intestino. Las alteraciones de la flora m icrobiana o su
la activación falsa de los linfocitos T vírgenes, reducen las interacción con las células innatas e Ínmunitarias pueden
respuestas T H l y T H 2 y promueven el desarrollo de algunos desorganizar el sistema y dar lugar a enfermedades inflama­
linfocitos específicos frente al antígeno en linfocitos T m e­ torias intestinales. Por ejemplo, la ausencia o una mutación
moria. Sólo las C D pueden invalidar el bloqueo de los Treg en el receptor N 0 D 2 para los peptidoglucanos aumenta las
a la activación de los linfocitos T vírgenes. posibilidades de ciertos tipos de enfermedad de Crohn.
Los anticuerpos son la protección principal contra las
bacterias extracelulares y la reinfección, y promueven su Inmunopatogenia bacteriana
eliminación y evitan que las bacterias se propaguen en la san­ La activación de las respuestas inflamatorias y de fase aguda
gre. El anticuerpo promueve la activación del complemento, puede provocar daños tisulares y sistémicos significativos. La
opsoniza las bacterias para la fagocitosis, bloquea la adhesión activación de los macrófagos y las C D en el hígado, el bazo y
bacteriana y neutraliza (inactiva) las exotoxinas [p. ej., teta- la sangre mediante la endotoxina puede promover la libera­
noespasmina, toxina botulínica] y otras proteínas citotóxicas ción del T N F -a a la sangre, lo que provocará muchos síntomas
producidas por las bacterias (p. ej., enzimas degradativas]. de septicemia, entre ellos el fracaso hemodinámico, el shock
La inmunización con una vacuna con exotoxinas inactivas y la m uerte [v. apartado Tormenta de citocinas y cap. 14).
(toxoides) es el medio de protección principal contra los Aunque la IL-1, la IL-6 y el T N F -a estimulan respuestas pro­
efectos posiblemente mortales de las exotoxinas. tecto ras en una in fección local, estas m ismas respuestas
Los anticuerpos IgM se producen al inicio de la respues­ pueden suponer una amenaza para la vida cuando se activan
ta antibacteriana. La fijación de IgM a la bacteria activa la por una infección sistémica. El aumento del flujo sanguíneo
cascada clásica del complemento, lo que promueve la des­ y la filtración del líquido pueden ocasionar un shock cuando
trucción directa de las bacterias gramnegativas y las respues­ ocurren en todo el cuerpo. Los anticuerpos producidos contra
tas inflamatorias. La IgM suele ser el único anticuerpo que antígenos bacterianos que comparten determinantes con las
se produce contra los glúcidos capsulares. El gran tamaño proteínas humanas pueden iniciar la destrucción autoinmuni-
de la IgM lim ita su capacidad de propagación dentro del taria del tejido (p. ej., los anticuerpos producidos en la glome-
tejido. Más adelante en la respuesta inmunitaria, el linfoci- rulonefritis postestreptocócica y en la fiebre reum ática). La
to T cooperador promueve la diferenciación del linfocito B y el activación inespecífica de los linfocitos T C D 4 mediante los
cambio de clase de la inmunoglobulina para producir IgG. Los superantígenos [p. ej., toxina del síndrome del shock séptico
anticuerpos Ig G son el anticuerpo predominante, especial­ de S. aureus) promueve la producción de grandes cantidades de
m ente en la reexposición. Los anticuerpos IgG fijan el com­ citocinas y, finalm ente, la m uerte de grandes cantidades
plemento y promueven la absorción fagocítica de las bacterias de linfocitos T. La liberación repentina y masiva de citocinas
a través de los receptores para el Fe de los macrófagos. La («tormenta de citocinas») puede provocar un shock y un daño
producción de IgA requiere citocinas T H 2 y otros factores. tisular grave (p. ej., síndrome del shock tóxico) (v. apartado
La IgA es el principal anticuerpo secretor y es im portante Tormenta de citocinas y cap. 14).
para la protección de las mucosas. La IgA secretora adquiere
el componente secretor que promueve la interacción y el paso Evasión bacteriana de las respuestas protectoras
de la IgA a través de las células epiteliales de la mucosa. La Los m ecanism os usados por las bacterias para evadir las
IgA neutraliza la fijación de las bacterias y sus toxinas en las respuestas protectoras del hospedador se explican en el
superficies de las células epiteliales. capítulo 14 como factores de virulencia. Estos mecanismos son
Una respuesta primaria específica frente al antígeno en I) la inhibición de la fagocitosis y la destrucción intracelular en
la infección bacteriana tarda de 5 a 7 días. El movimiento el fagocito, 2) la inactivación de la función del complemento,
de la C D al ganglio linfático puede tardar de 1 a 3 días, a 3) la escisión de la IgA, 4) el crecimiento intracelular (evitando
lo que le sigue la activación, la expansión y la maduración el anticuerpo) y 5} el cambio en el aspecto antigénico bacte­
de la respuesta. En la reexposición a la infección, las células riano. Algunos microorganismos, entre ellos las micobacterias
plasmáticas de vida larga todavía pueden estar produciendo (tam bién los géneros L is te r ia y B ru cella], sobreviven y se
anticuerpos. Los linfocitos T m emoria pueden responder multiplican dentro de los macrófagos y usan a los macrófagos
rápidam ente a la presentación del antígeno con la C D , el como una reserva protectora o un sistema de transporte que
macrófago o el linfocito B, no sólo la C D ; hay linfocitos B ayuda a propagar los microorganismos a través del cuerpo. Sin
m emoria que responden rápidamente al antígeno; y la res­ embargo, los macrófagos activados por citocinas pueden des­
puesta de anticuerpos secundaria ocurre en 2 o 3 días. truir los microorganismos patógenos intracelulares.
Respuestas ínmunitarias intestinales
La flora intestinal interactúa constantemente y está regulada Respu esta s a n t iv ír ic a s
por los sistemas innato e inmunitario del tejido linfático aso­
Defensas del hospedador frente
ciado al intestino. D e igual forma, la respuesta inmunitaria
está determinada por sus interacciones con la flora intestinal a la infección vírica
ya que las células reguladoras lim itan el desarrollo de las La respuesta inm unitaria es la m ejor y, en la m ayoría de
respuestas autoinmunitarias y de la inflamación. Las C D , las los casos, la única form a de controlar una infección vírica
células linfocíticas innatas, los Treg, los linfocitos T H 1 7, T H I (fig. 10-3; cuadro 10-4). Lamentablemente, también es origen
y otros linfocitos T y los linfocitos B de las placas de Peyer y de la patogenia de muchas enferm edades víricas. Las res­
los folículos linfáticos intestinales vigilan las bacterias que es­ puestas Ínmunitarias humorales y celulares son importantes
tán dentro del intestino. Estas células y las epiteliales y otras para la inmunidad antivírica. El objetivo final de la respuesta
células que recubren el intestino producen péptidos antimi­ inm unitaria en una infección vírica es elim inar el virus y
crobianos y las células plasmáticas secretan IgA en el intestino las células del hospedador que lo albergan o replican. Los
para mantener una mezcla saludable de bacterias. Al mismo interferones, los linfocitos NK, las respuestas C D 4 T H I y
tiempo, las células reguladoras evitan que se produzcan res­ los linfocitos T citotóxicos C D 8 son más importantes para
puestas Ínmunitarias nocivas o excesivas contra el contenido las infecciones víricas que para las infecciones bacterianas. Si
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

no se resuelve la infección puede producirse una infección facilitan su absorción y depuración mediante los macrófagos
persistente o crónica o la muerte. (opsonización). Las C D y los macrófagos también presentan
el antígeno a los linfocitos T y liberan IL-1, IL -12 e IFN-ot
Defensas innatas para propagar las respuestas inmunitarias innatas e iniciar las
La temperatura corporal, la fiebre, los interferones, otras cito- específicas del antígeno. Las C D plasmacitoides en la sangre
cinas, el sistema mononuclear de los fagocitos y los linfoci- producen grandes cantidades de IF N -a en respuesta a la
tos N K proporcionan una respuesta local rápida a la infección viremia. Los macrófagos activados también pueden distinguir
vírica y también activan las defensas inmunitarias específicas. y destruir células diana infectadas.
A menudo las defensas inespecíficas son suficientes para Los IF N -a y (3 y la IL -12 activan a los linfocitos N K para
controlar una infección vírica, lo que evita que aparezcan destruir las células infectadas por virus. La infección vírica
los síntomas. puede reducir la expresión de los antígenos del M H C para
La infección vírica puede inducir la liberación de citocinas eliminar las señales inhibidoras o puede alterar los glúcidos
(p. ej., TNF, IL -1) e interferón de las células infectadas, de las proteínas de la superficie celular para proporcionar
las C D i y los macrófagos. El ARN vírico (especialmente el señales citolíticas al linfocito NK.
A RN bc), el A D N y algunas glucoproteínas víricas son po­
tentes activadores de los T LR, y los ácidos nucleicos víri­
Interferón
cos también pueden activar a los receptores para el patrón
del microorganismo patógeno vesiculares y citoplásmicos Isaacs y Lindemann describieron por primera vez el inter­
e iniciar estas respuestas del interferón y las citocinas. Los ferón como un factor muy potente que «interfiere con» la
interferones y otras citocinas desencadenan las respuestas rephcación de muchos virus diferentes. El interferón es la
tem pranas locales y sistém icas. La inducción de la fiebre primera defensa activa del cuerpo contra una infección vírica,
y la estimulación del sistema inmunitario son dos de estos un «sistema de alerta temprano». Además de activar la de­
efectos sistémicos. fensa antivírica de la célula diana para bloquear la replicación
La temperatura corporal y la fiebre pueden limitar la re- del virus, los interferones activan la respuesta inmunitaria y
plicación o desestabilizar a algunos virus. Muchos virus son aumentan el reconocimiento por los linfocitos T de la célula
menos estables [p. e j., el virus del herpes simple) o no pueden infectada. El interferón es una defensa muy importante con­
multiplicarse (rinovirus) a 37 °C o a más temperatura. tra la infección, pero también es una causa de los síntomas
Las células del sistema fagocítico dendrítico y mononu­ sistémicos asociados a muchas infecciones víricas, como el
clear fagocitan las partículas víricas y celulares de las células malestar general, el dolor muscular, los escalofríos y la fiebre
infectadas con virus. Los macrófagos del hígado (células de (síntomas inespecíficos parecidos a los de la gripe), especial­
Kupffer) y del bazo filtran rápidamente muchos virus de la m ente durante la viremia. El interferón de tipo 1 interviene
sangre. El anticuerpo y el com plem ento fijados a un virus además en la aparición del lupus eritematoso sistémico.

(M h 4-96 h
-h
Respuestas innatas Respuestas espedf>cas dei antígeno
Temprana ) Retardada

a ^ Inhibidor
^ Activador
Efeclor

# MO. CD
O Linfocito T
Pulmón Ganglio linfático
O Linfocito B
Figura 10-3 Respuestas antivíricas. La respuesta frente a un virus (p. ej., el virus de la gripe) empieza con la producción y la acción del interferón y los
linfocitos citolíticos espontáneos (NK). La activación d e la inmunidad específica del antígeno se parece a la respuesta antibacteriana, excepto porque
los linfocitos T citotóxicos CD8 (CTL) constituyen respuestas antivíricas importantes. La duración de los episodios se indica en la parte superior de la
figura. IFN, interferón; IL, interleucina; MQ, m acrófago; TH, (linfocito) T cooperador; TNF, factor de necrosis tumoral.
if'i - M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Los interferones comprenden una familia de proteínas


que pueden subdividirse según diversas propiedades, entre
ellas el tamaño, la estabilidad, la célula de origen y el modo Resumen de respuestas antívíricas
de acción (tabla 10-2). El IF N -a y el IFN -p son interferones
Interferón
del tipo I que comparten muchas propiedades, entre ellas la
homología estructural y el modo de acción. Los linfocitos B, El interferón lo inducen el ARN bicatenario, la inhibición
las células epiteliales, los monocitos, los macrófagos y las CD i de la síntesis de proteínas celulares o de virus con
envoltura
producen IF N -a. Las C D plasmocíticas en la sangre producen
El interferón inicia un estado antivírico en las célula que le
grandes cantidades en respuesta a la viremia. Los fibroblastos
rodean
y otras células producen IFN *p en respuesta a la infección
El interferón bloquea la replicación local de virus
vírica y a otros estímulos. El IFN -X (interferón lambda] es un El interferón activa respuestas antivíricas sistémicas
interferón del tipo III con una actividad similar al IF N *a y es
Linfocitos NK
importante en las respuestas contra la gripe. El IF N -7 es un
interferón del tipo II, una citocina producida por los linfoci­ Los linfocitos NK se activan por el IFN-a y la interleucina 12
tos T y los linfocitos NK activados que se produce al final de y activan a los macrófagos con IFN-7
la infección. Aunque el IFN -7 inhibe la replicación vírica, Los linfocitos NK se dirigen contra las células infectadas
su estructura y modo de acción difieren de los de los otros por virus y las matan (en especial los virus con envoltura)
interferones. Al IFN -7 también se le conoce como factor de Macrófagos y CD
activación del macrófago y es el componente decisivo de la Los macrófagos filtran las partículas víricas de la sangre
respuesta T H I. Los macrófagos inactivan a las partículas de virus
El m ejor inductor de la produ cción d e IF N -a e IF N -^ es el opsonizadas
A RN bc, q u e se produ ce com o in term ediario en la replicación Las CD inmaduras producen IFN-a y otras citocinas
d e los viru s A R N o por la interacción de ARN mensajeros Las CD inician y determinan la naturaleza de la respuesta
sentido/antisentido (ARNm) para algunos virus AD N (cua­ de linfocitos T CD 4 y CD 8
dro 10-5 ). Es suficiente una molécula de ARNbc por célula Las CD y los macrófagos presentan el antígeno a los
para inducir la producción del interferón. La interacción de linfocitos T CD4
algunos virus encapsulados (p. ej., el virus del herpes simple Linfocitos T
y el virus de la inmunodeficiencia adquirida [V IH ]) con las Los linfocitos T son esenciales para controlar las infecciones
C D i puede promover la producción del IFN-cx. También la por virus con envoltura y no citolíticos
inhibición de la síntesis de proteínas en una célula infectada Los linfocitos T reconocen péptidos víricos presentados por
por virus puede disminuir la producción de una proteína re­ moléculas del MHC en las superficies celulares
presora del gen del interferón, lo que perm ite la producción Los péptidos víricos antigénicos (epítopos lineales)
del interferón. Los inductores no víricos del interferón son pueden proceder de cualquier proteína del virus (p. ej.,
los siguientes: glucoproteínas, nucleoproteínas)
1. Microorganismos intracelulares (p. ej., micobacterias, Las respuestas T H l CD 4 son más importantes que las
hongos, protozoos). respuestas TH2
2. Activadores de ciertos T LR o mitógenos (p. ej., endo- Los linfocitos T CD 8 citotóxicos responden a los complejos
péptido vírico:MHC de la clase I en las superficies de la
toxinas, fitohemaglutinina).
célula infectada
3. Polinucleótidos bicatenarios (p. e j., poli I:C , poli
Las respuestas TH2 CD 4 son importantes para la
dA:dT).
maduración de la respuesta de anticuerpos
4. Polímeros de polianiones sintéticos (p. ej., polisulfatos, Las respuestas TH2 CD 4 pueden ser perjudiciales si
pohfosfatos, pirano). limitan de forma prematura las respuestas inflamatorias y
5. Antibióticos (p. ej., kanamicina, ciclohexim ida). citolíticas T H l
6 . Componentes sintéticos de masa molecular baja (p. e j.,
Anticuerpo
tilorona, tintes de acridina).
El IFN -a, el IFN-(3 y el IFN-X. pueden inducirse y liberarse El anticuerpo neutraliza virus extracelulares:
a las pocas horas de la infección (fig. 10-4). El interferón se Bloquea las proteínas de inserción del virus
(p. ej., glucoproteínas, proteínas de la cápside)
fija a receptores específicos situados en las células vecinas e
Desestabiliza la estructura del virus
induce la producción de proteínas antivíricas: el estado anti*
vírico. Sin embargo, estas proteínas antivíricas no se activan El anticuerpo opsoniza el virus para la fagocitosis
hasta que ligan ARNbc. Los principales efectos anti%áricos del El anticuerpo promueve la muerte de la célula diana
mediante la cascada del complemento y la citotoxicidad
interferón los producen dos enzimas, la 2',5'*oligoadenilato*
celular dependiente de anticuerpos
sintetasa (una polimerasa inusual) y la proteína-cinasa R
El anticuerpo resuelve las infecciones víricas líticas
(P K R ) (fig. 10-5), y para la gripe también es importante la
El anticuerpo bloquea la propagación virémica a l tejido
proteína m x. La infección vírica de la célula y la producción diana
de ARN bc activan estas enzimas y desencadenan una cas­ La IgM es un indicador de una infección reciente o actual
cada de episodios bioquímicos que llevan a I ) la inhibición La IgG es un arma antivírica más eficaz que la IgM
de la síntesis de proteínas m ediante la fosforilación por la La IgA secretoria es importante para proteger las
PKR de un factor de inicio ribosómico im portante (factor superficies mucosas
de inicio de la elongación 2 -a [eIF -2a]) y 2) la degradación La resolución requiere la eliminación del virus libre
del ARNm (de modo preferente, el A l ^ m vírico) mediante (anticuerpo) y de la célula productora de virus (lisis
la ribonucleasa L, activada por la 2',5'-oligoadenosina. Este mediada p or virus o célula inmunitaria).
proceso pone básicam ente a la factoría de síntesis celular
de proteínas «en huelga» y evita la replicación vírica. Hay C D , célula dendrítica; IF N , interferón; Ig, inmunoglobulina;
que señalar que el interferón no bloquea directam ente la M H C , com plejo principal de histocompatibilidad; N K , citolítico
replicación vírica. El estado antivírico dura de 2 a 3 días, lo espontáneo.
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

Tabla 1 0-2 Propiedades básicas de los interferones hum anos (IFN)

Designaciones anteriores IFN del tipo I del leucocito IFN del tipo I del fibroblasto IFN del tipo II inmunitario
Genes > 20 1 1
Masa molecular (Da)* 16.000-23.000 23.000 20.000-25.000
Clonado^ 19.000 19.000 16.000
Glucosilación No* Sí Sí
Estabilidad frente a pH Estable* Estable Lábil
Activador primario Virus Virus Respuesta inmunitaria
Fuente principal Epitelio, leucocitos Fibroblasto NKolinfocitoT
Intrones en genes No No Sí
Homología con IFN-a humano 100% 30-50% < 10 %

Datos de White ÜO: Antiviral chemotherapy, interferons and vacdnes, Basilea, Suiza, 1984, Karger;y Samuel CE: Antiviral actions of interferon. Interferon regulated cellular
proteinsand theirsurprisinglyselective antiviral activities, l/Zro/ogy 183:1-11,1991.
*Masa molecular de la forma monomérica.
^Forma sin glucosilar, como la producida en bacterias por la técnica del ADN recombinante.
*La mayoría de los subtipos pero no todos.

que puede ser suficiente para que la célula degrade y elimine se II en el macrófago para ayudar a promover la presentación
al virus sin ser destruida. del antígeno a los linfocitos T. El interferón tam bién tiene
Los interferones estimulan la inmunidad celular activan­ efectos reguladores generalizados sobre el crecimiento celular,
do las células efectoras y aumentando el reconocimiento de la síntesis de proteínas y la respuesta inmunitaria. Los tres
células diana infectadas por virus. Los IFN de tipo I activan tipos de interferón bloquean la proliferación celular en las
a los linfocitos N K y estimulan la activación de los linfoci- dosis apropiadas.
to s T C D 8 . E l IF N y los linfocitos N K activados proporcionan
u na d e fe n s a n atu ral, lo c a l y tem p ran a con tra la in fección
p o r los viru s. El IF N -a y el IFN -p aumentan la expresión
de los antígenos del M H C de la clase I, lo que aumenta la
capacidad de la célula de presentar al antígeno y convierte a
la célula en un objetivo mejor para los linfocitos T citotóxicos
(C T L ]. La activación de los macrófagos mediante el IFN -7
promueve la producción de más IFN-ot e IFN-^, la secreción
de otros modificadores de la respuesta biológica, la fagocitosis,
el reclutam iento y las respuestas inflam atorias. El IFN -7
incrementa la expresión de los antígenos del M H C de la cía-

CUADR010-5
Interferones del tip o I

Inducción
Acido ribonucleico bicatenario (durante la replicación
del virus)
Inhibición vírica de síntesis de proteínas celulares
Interacción del virus con envoltura con la célula dendrítica
plasmacitoide
Mecanismo de acción
La célula infectada o la célula dendrítica plasmacitoide
liberan interferon
El interferón se une a un receptor específico de la
superficie celular en otra célula
El interferón induce el «estado antivírico»: Degradación del
Síntesis de proteína-cinasa R (PKR), ARNm, inhibición de
2',5'-oligoadenilato-sintetasa y ribonucleasa L la síntesis d e p n M m il'
La infección vírica de la célula activa estas enzimas
Síntesis proteínica inhibida para bloquear la replicación
del virus
F ig u ra 1 0 -4 Inducción del estado antivírico por el interferón (IFN) a o
Degradación de ARNm (2',5'-oligoadenilato-sintasa el IFN-(3. El interferón se produce en respuesta a la infección vírica pero
y ARNasa L) no afecta a la célula infectada inicialm ente. El interferón se fija al receptor
Iníiibición de ensamblaje del ribosoma (PKR) de la superficie celular en otras células e induce la producción de enzimas
Activación de respuestas antivíricas innatas e inmunitarias antivíricas (estado antivírico). La infección y la producción del ARN bicate­
Inducción de síntomas gripales nario activa la actividad a n tivírica.M H C I, antígeno del com plejo principal
de histocompatibilidad del tipo 1 .
M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

desencadenar una respuesta de anticuerpos). Sin embargo,


(ínierterti^ no todos los antígenos provocan inmunidad protectora.
El anticuerpo bloquea la progresión de la enfermedad a
Receptor para el Interferún través de la neutralización y la opsonización de los virus
que están fuera de las células. Las respuestas protectoras
del anticuerpo se generan hacia las proteínas de las cápsides
I Proc^cíónde Producción de la
de los virus sin cubierta y las glucoproteínas de los virus con
A^V'A^'p^'Asmlelasa pfoteina<lnasa n
envoltura que interaccionan con los receptores de la super­
Activación de enzimas ficie celular (proteínas víricas de anclaje). Estos anticuerpos
por ARNbc vírico pueden neutralizar el virus impidiendo su interacción con
las células diana o desestabilizándolo, lo que iniciará su de­
Activación de la gradación. La fijación del anticuerpo a estas proteínas también
proteina-cinasa R opsoniza el virus, lo que estimula su adsorción y depuración
m ediante los m acrófagos. El reconocim iento por el anti­
cuerpo de las células infectadas también puede promover la
citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (CC D A )
Foslorílación del tactor de inicio mediante los linfocitos NK. Los anticuerpos frente a otros
Activación de ARNasa L antígenos víricos pueden ser útiles para el análisis serológico
(subunidad olF-2a) nocosano
para la síntesis de proteínas de la infección vírica.
La principal función antivírica del anticuerpo es evitar
T la propagación del virus extracelular a otras células. El anti­
cuerpo es especialm ente im portante a la hora de limitar la
propagación del virus m ediante la viremia, al evitar que el
virus alcance el tejido diana y produzca la enfermedad. El
anticuerpo es más eficaz en la resolución de las infecciones
citolíticas. La resolución se produce porque el virus destruye
la fábrica celular y el anticuerpo elimina al virus extracelular.
El anticuerpo es la defensa principal que inicia la mayoría de
las vacunas.

Inmunidad del linfocito T


F ig u ra 1 0 - 5 Las dos vías principales de inhibición por el interferón de La inmunidad mediada por el linfocito T promueve las res­
la síntesis de proteínas víricas. En uno de los mecanismos se induce una puestas inflamatorias y de anticuerpos [linfocitos T C D 4
polimerasa inusual (2'-5'-oligoadenilato-sintetasa [2-5A]) a la que activa
cooperadores) y destruye las células infectadas (lin foci­
el ARN bicatenario (ARNbc). La enzima activada sintetiza una cadena de
adeninas inusual con un enlace 2'-5'-fosfodiéster. El oligóm ero activa a
tos T citotóxicos [principalmente linfocitos T C D 8 ]). La res­
la ARNasa L q ue degrada el ARN m ensajero (ARNm ). El otro mecanismo puesta C D 4 T H l es generalm ente más im portante que
implica la inducción de la proteína-cinasa R (PKR), que evita el ensamblaje las respuestas T H 2 para controlar una infección vírica, es­
del ribosoma al fosforilar el factor d e inicio de la elongación (elF-2a) con pecialm ente por virus no cito líticos y con envoltura. Los
el ñn d e evitar el inicio de la síntesis de proteínas por los ARNm tapados. linfocitos T C D 8 citolíticos promueven la apoptosis de las
A TP, trifosfato de adenosina.
células infectadas después de que su receptor se una a un
péptido vírico presentado por una proteína del M H C de la
clase I. Los péptidos expresados en los antígenos del M H C
Se emplea interferón biotecnológico como tratam iento de la clase I se obtienen de las proteínas víricas sintetizadas
antivírico en algunas infecciones víricas (p. ej., el virus del dentro de la célula infectada (vía endógena). L a p r o te ín a
papiloma humano y el de la hepatitis C ). U n tratam iento v ír ic a d e la q u e d eriv a n estos p é p tid o s p u ed e no p r o d u c ir
eficaz requiere el uso del subtipo correcto de interferón y a n tic u e rp o s p r o t e c t o r e s (p. e j., proteín as in tracelu lares
la pronta administración de la concentración apropiada. El o internas del virión, proteínas nucleares, proteínas mal
IFN-p se usa para el tratamiento de la esclerosis miiltiple. Los plegadas o procesadas [desechos celulares]). Por ejemplo,
interferones también se han usado en ensayos clínicos para la m atriz y las nucleoproteínas del virus de la gripe y la
tratar determinados cánceres. Sin embargo, el tratamiento proteína celular infectada 4 (IC P 4) (nuclear) del virus del
con interferón provoca efectos secundarios seudogripales, herpes simple son objetivos de los C T L pero no producen
como tiritona, fiebre y astenia. anticuerpos protectores. Una sinapsis inmunitaria formada
por las interacciones del T C R y el M H C I, los correceptores
Inmunidad específica del antígeno y las m oléculas de adhesión crea un espacio en el que se
libera p erforin a, un form ador de poros en la m em brana
Las inmunidades humoral y celular desempeñan funciones
parecido al com plem en to y las granzimas (enzim as que
diferentes en la resolución de las infecciones víricas (p. ej.,
degradan) para inducir la apoptosis de la célula diana. La
elim inando el virus del cu erpo}. La inmunidad humoral
(anticuerpo) actúa principalm ente sobre los viriones ex- in teracció n de la p roteína ligando de Fas de los lin fo ci­
tracelulares, mientras que la inmunidad celular (linfocitos T) tos T C D 4 o C D 8 con la proteína Fas del linfocito T diana
tam bién puede promover la apoptosis. L os C T L destruyen
se dirige a la célula que produce el virus.
la s célu las in fe c ta d a s y, com o resu ltado, elim in an la fu en te
d e nuevos virus.
Inmunidad humoral La respuesta del lin fo cito T C D 8 probab lem ente se
Prácticam ente todas las proteínas víricas son extrañas para produzca como una defensa frente a la infección vírica. La
el hospedador y son inmunógenas (es decir, capaces de inmunidad celular es especialmente importante para resolver
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

las infecciones por los virus que forman sincitios (p. ej., el de las infecciones por virus con envoltura y no citolíticos son
sarampión, el virus del herpes simple, el virus de la varicela necesarias respuestas mediadas por T H l que destruyan la
zóster, el V IH ), que pueden propagarse de una célula a otra factoría vírica y resuelvan la infección.
sin exponerse al anticuerpo; y por los virus no citolíticos Las infecciones víricas del encéfalo y el ojo pueden provo­
(p. ej., el virus de la hepatitis A y del sarampión). Los lin- car daños importantes porque estos tejidos no pueden reparar
focitos T C D 8 tam bién interactúan con las neuronas para el daño tisular y son lugares con privilegio inmunitario. Las
controlar, sin destruir, la recidiva de virus latentes (el virus respuestas T H 1 se suprimen para evitar la importante des­
del herpes simple, el virus de la varicela zóster y el virus del trucción tisular que acompaña a la inflamación extendida. Es­
papiloma humano JC ). tos lugares dependen del control innato, de citocinas, T H l 7
y anticuerpos para controlar la infección.
Respuesta inmunitaría al ataque vírico Las respuestas inmunitarias celulares y de IgG no apare­
cen hasta 6 u 8 días después del ataque vírico. En muchas
A taq u e vírico p rim a rio
infecciones víricas, esto es después de que las respuestas
Las respuestas innatas del hospedador son las primeras res­ innatas hayan controlado la replicación vírica. Sin embargo,
puestas al ataque vírico y suelen ser suficientes para limitar la en otras infecciones víricas, este período perm ite al virus
propagación \árica (v. fig. 10-3). Los interferones del tipo 1 propagar la infección, extenderse por todo el cuerpo e infec­
producidos en respuesta a la mayoría de las infecciones %áricas tar el tejido diana y causar la enfermedad (p. ej., encéfalo:
inician la protección de las células adyacentes, aumentan la encefalitis; hígado: hepatitis). La respuesta a la propagación
presentación del antígeno al incrementar la expresión de los de la enfermedad puede requerir una respuesta inmunitaria
antígenos del M H C e inician la depuración de las células mayor y más intensa, lo que a menudo conlleva la inmuno-
infectadas mediante la activación de los linfocitos N K y las patogenia y el daño tisular que provocan los síntomas de la
respuestas específicas del antígeno. Los virus y los compo­ enfermedad.
nentes víricos liberados de las células infectadas los fagocitan
las C D i, que se activan para producir citocinas y entonces A taq u e vírico secundario
se mueven hacia los ganglios linfáticos. Los macrófagos del En cualquier guerra, es más fácil eliminar a un enemigo si se
hígado y del bazo son especialm ente importantes para eli­ conoce su origen y su identidad y si puede evitarse que es­
minar los virus del torrente sanguíneo (filtros). Estas células tablezca su posición. D e igual forma, en el cuerpo humano, la
fagocíticas degradan y procesan los antígenos víricos. Las CD inmunidad anterior, establecida por una infección o vacuna­
presentan los fragmentos peptídicos apropiados unidos a los ción previas, hace posible una movilización rápida y específica
antígenos del M H C de la clase II a los linfocitos T C D 4 y de las defensas para evitar los síntomas de la enfermedad,
estos antígenos también pueden presentarse cruzados en las promueve la rápida eliminación del virus y bloquea la propa­
moléculas del M H C I a los linfocitos T C D 8 para iniciar la gación virémica desde el lugar primario de la infección hacia
respuesta. Las APC también liberan IL -I, IL-6 y TN F y, con la el tejido diana para evitar la enfermedad. Como resultado, la
IL-12, promueven la activación de linfocitos T cooperadores mayoría de los ataques víricos secundarios son asintomáticos.
y la producción específica de citocinas (respuesta T H l). Los El anticuerpo y los linfocitos B y los linfocitos T memoria
interferones del tipo 1 y estas citocinas inducen los síntomas están presentes en un hospedador inmunitario para generar
prodrómicos seudogripales de muchas infecciones víricas. una respuesta anamnésica (de refuerzo) más rápida y extensa
Los linfocitos T activados se mueven hacia el lugar de la fren te al virus. La IgA secretoria se produce rápidamente
infección y las zonas de linfocitos B de los ganglios linfáticos, para proporcionar una defensa importante frente a la nueva
y los macrófagos y los linfocitos B presentan el antígeno y son infección a través de los orificios naturales del cuerpo, pero
estimulados por los linfocitos T. sólo se produce de forma transitoria.
Las respuestas frente a antígenos víricos específicos son El hospedador, los factores víricos y de otro tipo deter­
similares a las específicas frente a antígenos bacterianos es­ minan el resultado de la respuesta inmunitaria a la infección
pecíficos, con la excepción de que el linfocito T C D 8 desem­ vírica. Los factores del hospedador son el trasfondo génico,
peña una función más importante. La IgM se produce apro­ el estado inmunitario, la edad y el estado de salud general del
ximadamente 3 días después de la infección. Su producción sujeto. Los factores víricos son la cepa vírica, la dosis infec­
indica una infección primaria. La Ig G y la IgA se producen ciosa y la vía de entrada. El tiempo necesario para iniciar la
2 o 3 días después de la IgM. La IgA secretora se produce en protección inmunitaria, la extensión de la respuesta, el nivel
respuesta a un ataque vírico de las superficies de la mucosa de control de la infección y el potencial inmunopatológico
en los orificios naturales del cuerpo (p. ej., los ojos, la boca y (v. cap. 45) consecuencia de la infección difieren después de
los sistemas respiratorio y digestivo). Los linfocitos T C D 4 y una infección primaria y un nuevo ataque.
C D 8 activados están presentes aproximadamente el mismo
tiem po que la IgG sérica. Durante la infección, el número Mecanismos víricos para eludir la respuesta
de linfocitos T C D 8 específicos fren te al antígeno puede inmunitaria
aumentar de 5 0 .0 0 0 a 1 0 0.000 veces. Los linfocitos T C D 8
específicos frente al antígeno se mueven hacia el lugar de la Un factor importante en la virulencia de un virus es su ca­
infección y destruyen a las células infectadas por el virus. El pacidad para eludir la resolución inmunitaria. Los virus pue­
reconocim iento y la unión a los complejos péptido-víricos den eludir la resolución inmunitaria evadiendo la detección,
M H C de la clase I promueven la destrucción apoptósica impidiendo la activación o bloqueando la ejecución de la
de las células diana, a través de la liberación de perforina y respuesta inmunitaria. En la tabla 10-3 se presentan ejem ­
granzimas (para alterar la membrana celular) o de la fijación plos específicos. Algunos virus codifican incluso proteínas
del ligando de Fas al Fas de la célula diana. La resolución de especiales que suprimen la respuesta inmunitaria.
la infección tiene lugar más adelante, cuando hay suficientes
anticuerpos para neutralizar toda la progenie vírica o cuando
Inmunopatogenia vírica
la inmunidad celular ha sido capaz de alcanzar y eliminar Los sín to m as de m uchas en ferm ed a d es v íricas son la
todas las células infectadas. Para la resolución de la mayoría consecuencia de la acción de las citocinas o de respuestas
90 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 10-3 Ejem plos de evasión vírica de las respuestas Inm unitarlas
Ejemplos de virus
Respuesta humoral
Oculto del anticuerpo Virus herpes, retrovirus Infección latente
Virus del herpes simple, virus de varicela Infección de célula a célula (formación de sincitios)
zóster, paramixovirus, virus de la
inmunodeficiencia humana
Variación antigénica Lentivirus {virus de la inmunodeficiencia Cambio génico después de infección
humana)
Virus de la gripe Cambios génicos anuales (variaciones menores)
Cambios pandémicos (cambios principales)
Secreción de antígeno bloqueante Virus de la hepatitis B Antígeno de superficie de la hepatitis B
Degradación del complemento Virus del herpes simple Glucoproteína C, que se une al C3 y promueve su degradación
Interferón
Bloqueo de producción Virus de la hepatitis B Inhibición de transcripción del IFN
Virus de Epstein-Barr Análogoa IL-10 (BCRF-1) que bloquea la producción de IFN-7
Bloqueo de acción Adenovirus Inhibe la expresión de MHC, VA1 bloquea la activación del ARN
bicatenario de la proteína-cinasa inducida por el interferón (PKR)
Virus del herpes simple Inactiva PKR y activa fosfatasa (PP1) para revertir la inactivación
del factor de inicio para la síntesis de proteínas
Función de célula inmunitaria
Afectación de la función de la CD Sarampión, hepatitis C Inducción de IFN-p, que limita la función de la CD
Afectación de la función del Virus del herpes simple Impide acción citolítica de linfocito T CD8
linfocito Virus de la inmunodeficiencia humana Mata linfocitos T CD4 y altera a los macrófagos
Virus del sarampión Supresión de linfocitos NK, T, y B
Factores inmunodepresores Virus de Epstein-Barr BCRF-1 (similar a IL-10) Supresión de respuesta de linfocitos TH1 CD4
cooperadores
Reducción de presentación del antígeno
Expresión reducida de Adenovirus 12 Inhibición de transcripción de clase I del MHC; proteína de 19 kOa
M H C d ela clase I (gen E3) se une a cadena pesada de clase I del MHC, lo que bloquea
su paso a la superficie
Citomegalovirus Proteína H301 bloquea la expresión en la superficie de
p2-microglobulina y moléculas de la clase I del MHC
Virus del herpes simple ICP47 bloquea TAP, lo que impide la entrada del péptido en el RE
y su unión a las moléculas de la clase I del MHC
Inhibición de la inflamación
Poxvirus, adenovirus Bloqueo de la acción de la IL-1 o del factor de necrosis tumoral

CD, célula dendrítica; ICP47, proteína de célula infeaada 47; IFN, interferón; IL. interleucina; MH C I, complejo principal de histocompatibilidad, antígeno del tipo 1;
NK, citolítico espontáneo; PMN, neutrófilo polimorfonuclear; RE, retículo endoplásmico; TAP, transportador asociado a producción de antígeno.

inmunitarias exageradas. Los síntomas seudogripales de la responder a sus propios antígenos y provoca las enferm e­
gripe y cualquier virus que establece una viremia [p. ej., dades autoinmunitarias.
los arbovirus] se deben al in terferó n y otras respuestas
de citocinas inducidas por el virus. Las interacciones del
anticuerpo con grandes cantidades de antígeno vírico en la Respu esta s in m u n it a r ia s e s p e c íf ic a s
sangre, como ocurre con la infección por el virus de la hepa­
CONTRA lo s h o n g o s
titis B, pueden dar lugar a enfermedades por inmunocom-
plejos. El exantem a del sarampión, el daño tisular extenso Las respuestas protectoras primarias a la infección por hongos
del encéfalo asociado a la encefalitis por el virus del herpes se inician mediante la unión de glúcidos micóticos de la pared
simple (-ifis significa «inflamación») y el daño tisular y los celular a los T LR y a la lectina dectina 1 y las llevan a cabo los
síntomas de la hepatitis son el resultado de las respuestas neutrófilos, los macrófagos y los péptidos antimicrobianos
inmunitarias celulares. Las respuestas más intensas de los producidos por los neutrófilos, las células epiteliales y otras
linfocitos N K y los linfocitos T en los adultos exacerban células. Las respuestas T H 1 7 y T H l del linfocito f C D 4
algunas enfermedades que son benignas en los niños, como estimulan las respuestas de neutrófilos y macrófagos. Los
la del virus de la varicela zóster, la mononucleosis infecciosa pacientes con deficiencias de neutrófilos o de estas respuestas
por el virus de Epstein-Barr y la infección por el virus de mediadas por los linfocitos T C D 4 (p. ej., pacientes con
la h ep atitis B. La falta de este tip o de respuesta en los SIDA) son más proclives a estas infecciones micóticas [opor­
niños les hace propensos a la infección crónica por el virus tunistas) . Las defensinas y otros péptidos catiónicos pueden
de la hepatitis B, porque la respuesta es insuficiente para ser importantes en algunas infecciones micóticas (p. ej., mu-
destruir las células infectadas y resolver la infección. Las cormicosis, aspergillus) y el óxido nítrico puede serlo frente a
infecciones víricas tam bién pueden ser el desencadenante Cryptococcus y otros hongos. El anticuerpo, como opsonina,
inicial de la activación que perm ite al sistema inmunitario puede facilitar la eliminación de los hongos.
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

capas de células inflamatorias, protege al hígado de las to ­


Respu esta s in m u n it a r ia s e s p e c íf ic a s
xinas producidas por los huevos. Sin embargo, el granuloma
CONTRA LOS PARÁSITOS tam bién provoca fibrosis, lo que interrum pe la irrigación
sanguínea venosa hacia el hígado y provoca hipertensión y
Es difícil generalizar sobre los mecanismos de la inmunidad
cirrosis.
antiparasitaria porque hay muchos parásitos diferentes que
Los neutrófilos fagocitan y destruyen los parásitos extra-
tien en form as diferentes y residen en distintas localiza­
celulares a través de mecanismos que dependen del oxígeno
ciones tisulares durante sus ciclos vitales (tabla 1 0 -4 ]. La
y de otros que no dependen de él. Los eosinófilos localizados
estimulación de los linfocitos T C D 4 T H l, T H l 7, C D 8 y las
cerca de los parásitos, se fijan a la IgG o la IgE de la superficie
respu estas d e l m acrófag o son im portan tes en las infecciones
de las larvas o los gusanos (p. ej., helm intos, S. m anson i y
in t r a c e lu la r e s y la s r es p u e sta s d e a n tic u e rp o s T H 2 son
Trichinella sp iralis), se desgranulan fundiendo sus gránulos
im portan tes en los p a rá sito s extracelu lares d e la sangre y los
intracelulares con las membranas plasmáticas y liberan la
líqu idos. La acción de la IgE, el eosinófilo y el m astocito es
proteína principal básica al espacio intercelular. La proteína
especialmente importante para eliminar las infecciones por
principal básica es tóxica para los parásitos.
helmintos [cestodos y nem atodos). La eficacia en el control
En las infecciones por helmintos, son muy importantes las
de la infección puede depender de la respuesta que se ha
citocinas producidas por las células epiteliales y los linfoci­
iniciado en el hospedador. La dominancia de una respuesta
tos T C D 4 TH 2 que estimulan la producción de IgE y activan a
T H 2 fren te a las in feccion es por L e is h m a n ia da lugar a
los mastocitos (fig. 10-6]. La IgE unida a los receptores para
la inhibición de la activación T H l de los macrófagos, a la
el Fe en los mastocitos dirige a las células hacia los antígenos
incapacidad de eliminar los parásitos intracelulares y a un
del parásito infectante. En la luz del intestino, la unión del
mal resultado. Esta observación proporcionó la base para
antígeno y el entrecruzado de la IgE en la superficie del mas­
descubrir que las respuestas T H l y T H 2 están separadas y
to cito estimulan la liberación de histamina y de sustancias
son antagonistas. Los parásitos han desarrollado mecanismos
tóxicas para el parásito y promueven la secreción de moco
sofisticados para evitar la eliminación inmunitaria y suelen
para cubrir y promover la expulsión del gusano.
crear infecciones crónicas.
El anticuerpo IgG tam bién desempeña una función im ­
Los macrófagos fagocitan a los parásitos extracelulares,
portante en la inmunidad antiparasitaria, com o opsonina
com o T rypan osom a cru zi, T oxoplasm a g on d ii y el género
y com o activador del com plem ento en la superficie del
L eishm an ia. El anticuerpo puede facilitar la absorción (opso-
parásito.
niza) de los parásitos. La destrucción de los parásitos ocurre
El paludismo supone un reto interesante para la respuesta
después de que el IFN -7 (producido por los linfocitos NK,
inmunitaria. Los anticuerpos protectores se dirigen hacia las
los linfocitos T 7/6 o los linfocitos C D 4 T H l] o el T N F -a
proteínas de anclaje y otras proteínas de la superficie, pero
(producido por otros macrófagos) activen el macrófago y se
éstas son diferentes en cada uno de los estados del desarro­
produzca la inducción de los mecanismos de destrucción que
llo del parásito. Las respuestas T H l y los C T L pueden ser
dependen del oxígeno (peróxido, superóxido, óxido nítrico].
importantes durante las fases hepáticas de la infección. En
Los parásitos pueden replicarse en el macrófago y esconderse
el eritrocito, el parásito se esconde del anticuerpo y los CTL
de la siguiente detección inmunitaria a menos que las res­
no pueden reconocerlo, pero puede estimular las respuestas
puestas T H l activen al macrófago.
de linfocitos N K y linfocitos NKT. Las citocinas, especial­
La producción de T H l del IFN -7 y la activación de los
m ente el TNF-ot, producidas por estas células promueven la
macrófagos tam bién son esenciales para la defensa contra
protección pero tam bién lesiones inmunopatogénicas. Los
los protozoos intracelulares y para el desarrollo de los gra­
inmunocomplejos que contienen componentes palúdicos y
nulomas alrededor de los huevos de S chistosom a m anson i
restos celulares liberados de la lisis del eritrocito pueden
y los helm intos en el hígado. El granuloma, formado por

Tabla 10-4 Ejem plos de respuestas inm unitarias antíparasitarías


Principal mecanismo efector dei hospedador M étod o de evitación
Trypanosoma bru c e i Torrente sanguíneo Anticuerpo + complemento Variación antigénica
Género Plasm odium Hepatocito, célula sanguínea Anticuerpo, citocinas (TH1) Intracelular, variación antigénica
Toxof^asma g o n d ii Macrófago ÍVIetabolitos del O2, NO, enzimas lisosómicas (THl) Inhibición de fusión con lisosomas
Trypanosoma cruzi Muchas células IVIetabolitos del O2, NO, enzimas lisosómicas (THl) Escape al citoplasma, con lo que
evita ser digerido en el lisosoma
Género Leishm ania Macrófago IVIetabolitos del Oj, NO, enzimas lisosómicas (THl) Afectación de estallido de O2 y
depuración de productos; evita
la digestión
Trichinella spiralis Intestino, sangre, músculo Células mielocíticas, anticuerpo + complemento (TH2) Enquistamiento en el músculo
Schistosoma m ansoni Piel, sangre, pulmones, Células mielocíticas, anticuerpo + complemento (TH2) Adquisición de antígenos del
vena portal hospedador, bloqueo por
anticuerpo; antígenos solubles e
inmunocomplejos; antioxidantes
Wucherería ba n c ro ñ i Sistema linfático Células mielocíticas, anticuerpo + complemento (TH2) Cutícula extracelular gruesa;
antioxidantes
Helmintos Intestino IgE Cutícula extracelular

Adaptada de Roitt y cois: Im m unology, 4.® ed., S t Louis, 1996, Mosby.


IgE, inmunoglobulina E; NO, óxido nítrico; TH, (linfocito) T cooperador.
*ÉI anticuerpo es el más importante para los microorganismos patógenos extracelulares. La inmunidad celular (respuesta T H l) es la más importante para los microorganismos
patógenos intracelulares.
92 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Procesos específíoos que Procesos inflamatorios las toleren. Además, el tratamiento en el laboratorio con IL-2
dependen del linfodto T ínespecí(kx>s (p. ej.. IN F. IL-1) genera linfocitos citolíticos activados por linfocina (LAK) y
hnfocitos N K que se dirigen contra las células tumorales, y
los macrófagos activados por el IFN-'y («enfadados») también
IL '3 Mastocitos
pueden distinguir y destruir las células tumorales.
Receptor El rechazo por el linfocito T de los aloinjertos empleados
paraFc» para los trasplantes tisulares está desencadenado por el reco­
Antígenos nocimiento de los péptidos extraños expresados por los antí­
del parásito genos extraños del M H C de la clase I. Además del rechazo por
el hospedador del tejido trasplantado, las células del donante
Estimula la de una transfusión sanguínea o un trasplante tisular pueden
prcrirtoraclón de reaccionar contra el nuevo hospedador en una respuesta de
células calicilormes injerto contra hospedador. Una prueba de laboratorio de la
í;* ;: I--------'------- 1 activación y crecimiento de los linfocitos T en una respuesta
de este tipo es la reacción de mezcla de linfocitos. La activa­

ra lOT ¡ : jm iM U L U J
Epitelio
ción suele medirse en forma de síntesis de ADN.

Luz
►intoslinal ; . irwjtomsnia . In m u n o p a t o g e n i a
intesti Anticuerpo
. I ; la íecrecidji Expulsión
•• . dim oco Respuestas de liipersensibilidad
' m m Una vez activada, la respuesta inmunitaria algunas veces es
Nematodo Gusano dañado difícil de controlar y provoca daño tisular. Las reacciones de
hipersensibilidad son responsables de muchos de los síntomas
m rn w n m m m n tn i asociados a las infecciones microbianas, especialm ente las
infecciones víricas. Las reacciones de hipersensibilidad les
F ig u ra 1 0 -6 Elim inación de los nem atodos del intestino. Las respues­ ocurren a las personas que ya han establecido la inmunidad
tas TH2 son im portantes para estim ular la producción de anticuerpos. El frente al antígeno. E l m e d ia d o r y la evolución tem p oral dis­
anticuerpo puede dañar al gusano. La inm unoglobuíina E (IgE) se asocia tinguen principalm ente los cuatro tipos de respuestas de
a los m astocitos, la liberación de histam ina y las sustancias tóxicas. El hipersensibilidad (tabla 10-5).
increm ento en la secreción d e m oco tam b ién p ro m u eve la expulsión.
La hipersensibilidad del tipo I está provocada por la IgE
!L, interleucina; TNF, factor de necrosis tumoral. {De Roitt ¡ y cois.: Im m unology,
4.a ed-, S t Louis, 1996, Mosby.)
y se asocia a las reacciones alérgicas, atópicas y anafilácticas
(fig. 10-7). Las reacciones alérgicas mediadas por la IgE son
reacciones de inicio rápido. La IgE se une a los receptores para
obstruir los capilares pequeños y activar las reacciones de el Fe en los mastocitos y convierte a la superficie celular en
hipersensibilidad del tipo II (v. después) y promover el daño receptora para los antígenos (alérgenos). El entrecruzamiento
tisular inflamatorio. de diversas moléculas de IgE en la superficie celular por un
alérgeno (p. ej., polen) desencadena la desgranulación, lo
que libera sustancias quimiotácticas (citocinas, leucotrienos)
Evasión de los mecanismos inmunitarios para atraer eosinófilos, neutrófilos y células mononucleares;
por ios parásitos activadores (histamina, factor activador de las plaquetas,
Los parásitos de los animales han desarrollado unos mecanis­ triptasa, cininogenasa) para promover la vasodilatación y
mos extraordinarios para establecer infecciones crónicas en el edema; y espasm ógenos (histamina, prostaglandina D 2,
leucotrienos) que afectan directamente al músculo liso bron­
el hospedador vertebrado [v. tabla 10 -4 ). Estos mecanismos
son el crecim iento intracelular, la inactivación de la acción quial y promueven la secreción de moco. La desensibilización
lítica de los fagocitos, la liberación del antígeno bloqueante (vacunas de la alergia) produce IgG que se une al alérgeno y
evita que el alérgeno se una a la IgE. Después de 8 a 12 horas
(p. ej., Trypanosom a brucei, Plasm odium fa lcip aru m ) y el de­
se produce una reacción tardía debida a la infiltración de los
sarrollo de quistes [p. ej., protozoos: E n tam oeha histolytica;
helmintos: T. spiralis) para limitar el acceso de la respuesta eosinófilos y los linfocitos T C D 4 y al refuerzo citocínico de
inmunitaria. Los tripanosomas africanos pueden reordenar la inflamación.
La hipersensibilidad del tipo II está provocada por la
los genes de su antígeno superficial (glucoproteína superficial
fijación del anticuerpo a las moléculas de la superficie celular
variable) y por tanto cambiar su apariencia antigénica. Los
esquistosomas pueden cubrirse a sí mismos con antígenos del y la siguiente activación de las respu estas citolítica s p o r la
hospedador, entre ellos las moléculas del M H C. vía clásica de la cascada del com plem ento o p o r m ecan is­
mos celu lares (fig. 10-8 ). Estas reacciones ocurren tan sólo
8 horas después de un trasplante de tejido o de sangre o como
parte de una enfermedad crónica. Algunos ejemplos de estas
O tras r e s p u e s t a s in m u n it a r ia s
reacciones son la anemia hem olítica autoinm unitaria y el
Los linfocitos T intervienen principalmente en las respuestas síndrome de Goodpasture (daño de la membrana basal del
antitumorales y en el rechazo de los trasplantes tisulares. Los pulmón y el riñón). O tro ejemplo es la enfermedad hemolí­
linfocitos T citolíticos C D 8 reconocen y destruyen tumores tica de los recién nacidos (niños azules), que está provocada
que expresan péptidos de proteínas embrionarias, proteínas por la reacción del anticuerpo materno generado durante la
mutadas u otras proteínas de moléculas del M H C de la clase I primera gestación contra los factores Rh de los eritrocitos
(vía endógena de presentación de péptidos). Las células tu- fetales de un segundo lactante (incom patibilidad Rh). La
morales pueden expresar de modo inapropiado estas proteínas activación del anticuerpo contra el receptor o la inhibición de
y puede que las respuestas inmunitarias del hospedador no las funciones efectoras también se consideran respuestas del
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

T a b la 10-5 Reacciones de hlpersensibilidad


Tipo d e reacción Tiem p o d e com ienzo Características ciave Efectos beneficiosos Efectos patológicos
Tipol Desencadenado por antígeno Respuestas antiparasitarias Alergias localizadas (p. ej., fiebre del heno,
soluble, liberación de y neutralización de asma)
mediadores vasoactivos toxina Anafilaxia sistémica
dependiente de IgE
Tipo II Anticuerpo unido a célula que Lisis directa y fagocitosis Destrucción de eritrocitos (p. ej., reacción
promueve citotoxicidad de bacterias transfusional, enfermedad Rh)
mediada por C y CCDA extracelulares y otros Daño tisular específico de órgano en
microbios sensibles algunas enfermedades autoinmunitarias
(p. ej., síndrome de Goodpasture)
Tipo II Complejos antígeno-anticuerpo Reacción inflamatoria Reacción de Arthus (localizada)
solubles activan el C aguda en lugar de Enfermedad del suero y reacciones
microorganismos a fármacos (generalizada)
extracelulares y su Enfermedades autoinmunitarias
eliminación sistémicas
Tipo IV 24-72 h (aguda) El antígeno soluble presentado Protección contra la Aguda: dermatitis de contacto, prueba
> 1 semana (crónica) a los linfocitos T CD4 por el infección por hongos, cutánea de la tuberculosis
MHC II lleva a la liberación de bacterias intracelulares Crónica: formación de granuloma,
citocinasTHI y la activación y virus rechazo de injerto
de los macrófagos y los
linfocitos T citotóxicos

CCDA, citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos; MHC, complejo principal de histocompatibilidad; 7W, (linfocito) T cooperador.

tipo II. La miastenia grave se debe a anticuerpos contra los


receptores de la acetilcolina en las neuronas, la enfermedad
de Graves se produce por la estimulación por el anticuerpo
del receptor para la tirotropina (T SH ), mientras que algunas
formas de diabetes pueden producirse porque los anticuerpos
bloquean el receptor para la insulina.
IL-4 Las respuestas de hipersensibilidad del tipo III se produ­
cen por la activación del complemento por los inmunocom*
piejos (fig. 10-9). En presencia de una abundancia de antígeno
soluble en el torrente sanguíneo, se forman complejos antíge-
no-anticuerpo grandes, que se quedan atrapados en los capila­
res [especialmente en el riñón) y entonces inician la cascada
del com plem ento por la vía clásica. La activación de la cas­
cada del complemento inicia las reacciones inflamatorias. Las
enfermedades por inmunocomplejos pueden estar provocadas

Receptor
Segurvda
para Fe Entrecruzamiento exposición
* la IgE al aniigero Anticuerpo
IgG / IgM algG

z: C lq

C3 activado
í
V lad ésica /

Vasodilataci6n
Respuesta
Dasgranulación
inflamatoria aguda
del mastodto
Daño lisutar
Contracdón det
múscuk) iso
BrorKOConsiricdón
Asma

F ig u ra 1 0 - 7 Hipersensibilidad del tipo I: reacciones ató p ica sya n afi-


lácticas m ediadas por la in m unoglobulina E (IgE). La IgE producida en
respuesta al ataque inicial se fija a los receptores para la Fe situados en los F ig u ra 1 0 - 8 Hipersensibilidad del tipo II: m ediada por anticuerpos y
mastocitos y los basófilos. El alérgeno fijado a la IgE de la superficie celular com plem ento. La activación del com plem ento prom ueve el daño celular
prom ueve la liberación de histamina y prostaglandinas de los gránulos d ire cto a través d e la cascada del com p lem en to y la a ctivación d e las
q ue producen los síntomas. Son ejem plos la fiebre del heno, el asma, la células efectoras. Son ejemplos el síndrome de Goodpasture, la respuesta
alergia a la penicilina y la reacción a las picaduras de a b e ja .in t e r le u c in a ; al factor Rh en los recién nacidos y las endocrinopatías inmunitarias. CCDA, ci-
TH, (linfocito) T cooperador. totoxicidad celular dependiente de anticuerpos; Ig , inmunoglobulina.
S 'i - M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

la alveolitis extrínseca alérgica (una reacción a la inhalación


Inmunocomplefo del antígeno micótico] y la glomerulonefritis se producen por
reacciones de hipersensibilidad del tipo III.
Las respuestas de hipersensibilidad del tipo IV son res­
puestas inflamatorias de hipersensibilidad de tipo retardado
(H T R ) mediadas por T H l (fig. 10-10 y tabla 10-6]. G en e­
ralm ente se tarda de 2 4 a 4 8 horas en presentar el antígeno
a los linfocitos T C D 4 circulantes, para entonces moverse
hasta el lugar y activar a los m acrófagos para inducir la res­
puesta. Aunque es esencial para el control de las infecciones
m icóticas y las bacterias intracelulares [p. ej., m icobacte-
rias), la H T R tam bién es responsable de la derm atitis de
contacto (p. ej., cosm éticos, níquel) y de la respuesta a la
hiedra venenosa. La inyección intradérm ica del antígeno
de la tuberculina (derivado purificado proteínico) produ­
ce com o respuesta un edem a duro que alcanza su punto
máximo a las 4 8 o 72 horas de la inyección y es indicativa
de la exp osición anterior a M y c o b a c te riu m tu b erc u lo sis
(fig. 1 0 -1 1 ). Los granulom as se form an en respuesta a la
estim ulación continua por el crecim iento intracelular de
M . tuberculosis. Estas estructuras están formadas por células
epitelioides creadas a partir de los macrófagos activados de
Microtrombos Aumento de Depósito de Liberación <te form a crónica, células epitelioides fusionadas [células gi­
la permeabilidad inmuno* enzimas frustrada
gantes m ultinucleadas) rodeadas por linfocitos y fibrosis
vascular complejos en la fagocitosis
provocada por el depósito de colágeno procedente de los
Figura 10-9 Hipersensibilidad del tip o III: d epósito d e inmunocom- fibroblastos. Los granulomas restringen la propagación de
plejos. Los ¡nmunocomplejos pueden quedar atrapados en el riñón y en
M . tu bercu losis siempre que los linfocitos T C D 4 puedan
cualquier parte del cuerpo, activar el com plem ento y provocar otras res­
puestas dañinas. Son ejemplos la enfermedad del suero, la nefritis asociada
proporcionar IF N -7 . La hipersensibilidad granulomatosa
a la infección crónica por el virus d e la hepatitis B y la reacción de Arthus. ocurre en la tuberculosis, la lepra, la esquistosom iasis, la
sarcoidosis y la enfermedad de Crohn.

por infecciones persistentes (p. ej., hepatitis B, paludismo, Tormenta de cítocínas


endocarditis infecciosa estafilocócica), autoinmunidad [p. ej., La septicem ia; el síndrome de shock mediado por toxinas
artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico) o inhalación (p. ej., inducido por la toxina del síndrome del shock tóxico
persistente del antígeno (p. ej., antígenos de mohos, plantas de S tap h y ío co ccu s]; algunas in feccion es víricas, com o el
o m am íferos). Por ejemplo, la hepatitis B produce grandes síndrom e respiratorio agudo grave (SR A G ) y la gripe; y
cantidades de antígeno de superficie de la hepatitis B, que la enferm edad de injerto contra hospedador inducen una
puede promover la formación de los inmunocomplejos que potente estimulación de las respuestas innata e inmunitaria,
dan lugar a la glomerulonefritis. Pueden inducirse reacciones lo que produce cantidades excesivas de citocinas que alteran
de hipersensibilidad del tipo III en personas sensibilizadas la fisiología corporal. Las consecuencias son una alteración
previamente mediante la inyección intradérmica de un antíge­ regulatoria multiorgánica, el exantema, la fiebre y el shock.
no para provocar la reacción de Arthus, una reacción cutánea Los superantígenos se unen a los T C R y a las m oléculas
caracterizada por eritema y edema. La enfermedad del suero. del M H C II en las células presentadoras de antígenos para

MHC de la
dase II

Pentadecacatecol

Proteína pKOpia

Figura 10-10 Hipersensibilidad del tipo IV: hipersensibilidad de tipo retardado (HTR) m ediada por linfocitos T CD4 (T H l). En este caso, las proteínas
propias modificadas por sustancias químicas se procesan y presentan a los linfocitos T CD4, q ue liberan citocinas (entre ellas el interferón 7 [IPN-yJ)
que p rom ueven la inflamación. Otros ejemplos de HTR son la respuesta a la tuberculina (prueba con derivado proteínico purificado) y la reacción a los
metales, com o el n í q u e l . c é l u l a presentadora de antígeno; TCR, receptor del linfocito T.
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS

T a b la 10-6 Características im portantes de los cuatro tipos de reacciones de liipersensibilidad retardada


Tiem po de la reacción Aspecto clínico Aspecto histológico
Jones-Mote 24 h Tumefacción cutánea Basófilos, linfocítos, células Antígeno intradérmico: ovoalbúmina
mononucleares
Contacto 48 h Eczema Células mononucleares, edema, Epidérmico: níquel, goma, hiedra
epidermis elevada venenosa
Tuberculina 48 h Induración local y Células mononucleares, linfocitosy Dérmico: tuberculina, micobacterias
tumefacción con o sin monocitos, macrófagos reducidos yleishmanias
fiebre
Granulomatosa 4 semanas Induración cutánea Granuloma de células epitelioides, Antígeno o complejos
células gigantes, macrófagos, antígeno-anticuerpo persistentes
fibrosis con o sin necrosis en macrófagos o «no inmunitario»
(p. ej., polvo de talco)

activar a más del 20% de los linfocitos T. Esto desencadena de Epstein-Barr), la producción excesiva de citocinas (p. ej.,
una liberación descontrolada de citocinas que producen interferones del tipo 1 y lupus eritematoso sistémico) o una
los macrófagos y los linfocitos T hasta que los linfocitos T predisposición génica a la expresión de péptidos autoanti-
mueren por apoptosis. Las bacterias, las endotoxinas o los génicos (asociación al M H C ) o la falta de tolerancia frente
virus en la sangre pueden promover la producción de gran­ a antígenos específicos.
des cantidades de citocinas en la fase aguda e interferones Las enfermedades autoinmunitarias se producen por la
del tipo 1 en las C D plasm acitoides, y ciertos virus son presencia de autoanticuerpos, de linfocitos T activados y
activadores muy potentes del interferón y de la produc­ de reacciones de hipersensibilidad. Las personas con ciertos
ción de citocinas. D urante las torm entas de citocinas se antígenos del M H C tienen un riesgo mayor de sufrir respues­
producen grandes cantidades de T N F -a. El T N F -a puede tas autoinmunitarias (p. ej., H LA -B27: artritis reumatoide
promover procesos inflamatorios, como el increm ento de la juvenil, espondilitis anquilosante). Una vez iniciadas, se es­
fuga vascular y la activación de los neutrófilos, que pueden tablece un ciclo entre las células presentadoras de antígenos
ser beneficiosos a nivel local pero, a nivel sistém ico, oca­ y los linfocitos T, que producen citocinas para promover la
sionarán fiebre, tiritona, dolor, estimulación de las vías de inflamación y el daño tisular y más antígenos propios. Las
la coagulación, elevación de las enzimas hepáticas, pérdida respuestas T H l 7 son responsables de la artritis reumatoide y
de apetito, aumento del m etabolism o, pérdida de peso y otras enfermedades.
posiblemente el shock.

In m u n o d e f ic ie n c ia
Respu esta s a u t o in m u n it a r ia s
La inm unodeficiencia puede producirse por deficiencias
Normalmente una persona se hace tolerante a sus propios génicas, inanición, inmunodepresión inducida por fármacos
antígenos durante el desarrollo de los lin focito s T y los (p. ej., tratam ientos con esteroides, quimioterapia oncoló­
linfocitos B y gracias a los linfocitos Treg. Sin embargo, la gica, supresión quimioterapéutica del rechazo de un injerto
desregulación de la respuesta inmunitaria puede iniciarse tisular), cáncer (especialm ente de células inmunitarias) o
por reactividad cruzada con antígenos microbianos [p. ej., la enfermedades (p. ej., SIDA) y ocurre de forma natural en los
infección por estreptococos del grupo A, la fiebre reumática), recién nacidos y en las mujeres embarazadas. Las deficiencias
la activación policlonal de los linfocitos inducida por tumores en las respuestas protectoras específicas ponen al paciente
o infecciones (p. ej., el paludismo, la infección por el virus en riesgo alto de sufrir una enfermedad grave provocada por
microorganismos infecciosos que deberían controlarse con esa
respuesta (tabla 10-7). Estos «experimentos naturales» ilus­
tran la importancia de las respuestas específicas en el control
de las infecciones específicas.

Inmunodepresión
El tratam iento inmunodepresor es importante para reducir
las respuestas inflamatorias o inmunitarias excesivas o para
evitar el rechazo de los trasplantes tisulares en los linfocitos
T. El tratam iento aborda los síntomas, el activador o el m e­
diador de la respuesta. El ácido acetilsalicílico y los fármacos
antiinflamatorios no esteroideos (AINE) se dirigen contra la
ciclooxigenasa que genera las prostaglandinas inflamatorias
(p. ej., P G D 2) y el dolor. Otros tratam ientos antiinflamatO'
ríos se dirigen contra la producción y la acción del T N F -a,
la IL -12 y la IL -L Los corticoides evitan su producción por
los macrófagos y pueden ser tóxicos para los linfocitos T. Las
formas solubles del receptor para el TNF-cx y el anticuerpo
Figura 10-11 Respuestas de hipersensibilidad d e contacto y a la tuber­
contra el T N F -a pueden usarse para bloquear la unión del
culina. Estas respuestas del tipo IV son celulares pero diñeren en el sitio de
la infiltración celular y en los síntomas. La hipersensibilidad de contacto se
T N F -a a su ligando y evitar su acción. Los anticuerpos contra
produce en la epidermis y da lugar a la formación de ampollas; la hipersen­ otras citocinas, las proteínas de adhesión en los linfocitos T
sibilidad a la tuberculina ocurre en la dermis y se caracteriza por edema. o las células presentadoras de antígenos y los antagonistas
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 10-7 Infecciones asociadas a defectos tn f^ io n es


de las respuestas inm unitarias bacienanas
Enfermedades por graves
Microorganismo patógeno inmunocomplefos (p. új.. Infecciones piógenas
Inducción por medios físicos {p. ej., Pseudom onas aeruginosa LES. mfecdones piógenas) i diseminadas,
quemaduras, traumatismos) Staphyfococcus aureus
vasculitis. nefritis
Staphylococcus epiderm idis Via dáS4ca Vía alternativa
C1.C4. C2 C3. FB. FD

±
Streptococcus pyogenes
Género Aspergillus
Género Candida
Esplenectomía Bacterias encapsuladas y hongos
Inhibidor do O Proteínas de
Defectos de granulocito y monocito 5. aureus control Fl. FH
en movimiento, fagocitosis o S. pyogenes
actividad citolítica o reducción H aem ophilus influenzae Angioedema
del número de células Bacilos gramnegativos
(neutropenia) Escheríchia coli Vía lít)ca C5, Infecctones por
Género Klebsiella
C 6 . C7. C 8 . C9 Neissena, LES
P. aeruginosa
Género Nocardia
Género Aspergiilus
Género Candida
Componentes individuales del S. aureus
ClaveActivación. Conlrol
sistema del complemento Streptococcus pneum oniae
Género Pseudomonas i= ^ > Conversión:
Género Proteus Las defictencias
Género Neisseria prodsponen a las
Citomegalovirus
enfermedades
Virus del herpes simple escfttas en cursiva
Virus del herpes zóster Figura 10-12 Consecuencias de las d eficiencias en las vías del com ­
Virus herpes humano 8 p lem ento. El factor B se une al C3b en las superficies celulares y la se-
Listeria m onocytogenes
rina-proteasa D del plasma escinde y activa a B-C3b com o parte d e la
Género M ycobacterium
vía alternativa. Los factores Fl y FH limitan la activación inapropiada del
Género Nocardia
com plem ento. El FH se une al C3b y evita su activación y es un cofactor
Género Aspergillus
para el Fl. El Fl es una serina-proteasa q u e escin d e el C3b y el C4b.
Género Candida
Cryptococcus neoform ans LES, lupus eritematoso sistémico.
Histof^asm a capsulatum
Pneum ocystis jiro v e d i
Strongyloides stercoralis
Enterovirus infecciones por estafilococos y estreptococos piógenos [que
5. aureus
producen pus) (fig. 1 0 -1 2 ). Los linfocitos T 7/8 no con­
Género Streptococcus
H. influenzae trolan a estas bacterias. Una deficiencia de C 3 da lugar a un
Neisseria m eningítidis defecto en la activación de las vías clásica y alternativa, lo que
E .coli tam bién produce una incidencia mayor de infecciones pió­
Giardia lam blia
genas. Los defectos de la properdina afectan a la activación
P .jiro v e d i
de la vía alternativa, lo que también origina un incremento
Inmunodeficiencia combinada Véanse los microorganismos
patógenos presentados en
de la predisposición a las infecciones piógenas. Finalmente,
defectos de linfocitos T y B las deficiencias de C 5 a C 9 se asocian a una destrucción
celular defectuosa, lo que incrementa la predisposición a las
infecciones diseminadas por especies de N eisseria.

del C D 2 8 pueden bloquear la activación del linfocito T de Defectos en la acción fagocítíca


las respuestas inflamatorias, contra el tejido injertado y otros Las personas con fagocitos defectuosos son más propensas
tipos de respuestas. El tratamiento inmunodepresor para los a las infecciones bacterianas pero no a las infecciones por
trasplantes inhibe generalmente la acción o provoca la lisis de virus o protozoos (fig. 1 0 -1 3 ). La relevancia clínica de la
los linfocitos T. La ciclosporina, el tacrolimús [FK -506) y la destrucción dependiente del oxígeno se demuestra en la en­
rapamicina evitan la activación de los linfocitos T (v. fig. 9-5). ferm edad granulomatosa crónica de los niños que no tienen
Los anticuerpos contra el ligando del C D 40 y la IL-2 evitan enzimas, como la NADPH-oxidasa, para producir aniones
la activación de los linfocitos T, mientras que el anti-CD 3 superóxido. Aunque la fagocitosis es normal, estos niños
promueve la lisis de los linfocitos T para suprimir las res­ tienen alterada su capacidad de oxidar el NADPH y destruir
puestas del linfocito T. Los tratam ientos contra el T N F -a las bacterias a través de la vía oxidativa. En pacientes con
incrementan el riesgo de enfermedad por M . tu berculosis y el síndrome de Chédiak-H igashi, los gránulos de los neu-
los anticuerpos contra la molécula de adhesión celular inte- trófilos se fusionan cuando las células son inmaduras en la
grina a 4 incrementan el riesgo de reactivar la enfermedad médula ósea. Así, los neutrófilos de estos pacientes pueden
por el virus JC (leucoencefalopatía multifocal progresiva). fagocitar a las bacterias pero su capacidad para destruirlas
ha disminuido en gran medida. Se form an granulomas al­
Deficiencias hereditarias del complemento
rededor del fagocito infectado para controlar la infección.
e infección microbiana Las personas asplénicas tienen riesgo de infección por m i­
Las deficiencias hereditarias de C l q , C lr , C l s , C 4 y C 2 croorganismos encapsulados porque les falta el mecanismo
se asocian a defectos en la activación de la vía clásica del de filtración de los macrófagos del bazo. En la figura 10-13
com plem ento que llevan a una mayor predisposición a las se muestran otras deficiencias.
RESPUESTA S INM UNITARIAS A LOS M IC RO ORGANISM O S INFECCIOSOS 97

Deficiencias en las respuestas inmunitarias


específicas frente a antígenos
Las personas que carecen de la fu n ció n del lin fo cito T
son propensas a las infecciones oportunistas por 1) virus,
especialm ente los virus con envoltura y no citolíticos y las
recurrencias de virus que determinan infecciones latentes;
2] bacterias extracelulares; 3] hongos; y 4) algunos parásitos.
Las deficiencias de linfocitos T tam bién pueden evitar la
maduración de las respuestas del linfocito B fren te al an­
Síndrome de ticuerpo. Las deficiencias del linfocito T pueden originarse
Chédiak-Higashi
por trastornos génicos (p. e jsín d ro m e de inmunodeficiencia
ligado al cromosoma X , enfermedad de Duncan, síndrome de
DiGeorge) (tabla 10-8], una infección [p. ej., y SIDA),
quimioterapia oncológica o tratamiento inmunosupresor para
trasplantes tisulares.
La respuesta de lin focito s T de los recién nacidos es
deficiente pero se com plem enta con la IgG m aterna. Las
respuestas T H l insuficientes y el déficit de IFN -7 hacen que
tengan un riesgo alto de infecciones por virus herpes. D e igual
J Síndrome de
forma, las respuestas inflamatorias e inmunitarias celulares
Chódíak-Higashi
menos pronunciadas de los niños disminuyen la gravedad (en
comparación con los adultos) del herpes (p. ej., mononu-
Enfermedad cleosis infecciosa, varicela] y de las infecciones por el virus
granuiomatosa crónica de la hepatitis B, pero también incrementan la posibilidad de
establecer una infección crónica por el virus de la hepati­
tis B debido a su resolución incompleta. El embarazo también
Oofx»ncias enzimáticas:
fosfatasa alcalina Q6PD
induce medidas inmunodepresoras para evitar el rechazo del
mieloperoxidasa feto (un tejido extraño).
Las deficiencias del linfocito B pueden dar lugar a que no
se produzcan anticuerpos (hipogammaglobulinemia), que
Figura 10-13 C o n s e c u e n c ia s d e la d is fu n c ió n d e los fa g o c ito s .
(j6 PD , glucosa-6-fosfato-deshidrogeansa; 7, deficiencia de adhesión no se produzca el cambio de clase o no puedan producirse
del leucocito 1. subclases específicas de anticuerpos. Las personas con defi­
ciencias en la producción de anticuerpos son muy propensas
a las infecciones b acterianas. La deficiencia de IgA, que
ocurre en 1 de 7 0 0 personas de raza blanca, da lugar a una
propensión mayor a las infecciones respiratorias.

Tabla 10-8 Inm unodeficienclas de linfocitos


Trastorno N.'^de linfocitos T Funcián de linfocitos T N.° d e iinfocitos B Anticuerpos séricos incidencia
ALX, síndrome de Bruton / / ii i Infrecuente
Deficiencia de RAG1 o RAG2 4.4. i i ii Ninguno Infrecuente
IDCG-X 4.4. i ✓ 4. Infrecuente
LPX, síndrome de Duncan / i / / o i Infrecuente
Hiper-lgM ligado al X / i ✓ IgMTT No IgG, IgEni IgA Infrecuente
(mutación de CD40L)
Síndrome de Wiskott-Aldrich / i / i Infrecuente
IDCG: deficiencia de ADA o PNP 4.4. i i i i Muy infrecuente
Deficiencia deHLA 4. i / Mala respuesta a Ag Muy infrecuente
Ataxia telangiectasia i i ✓ \gEÍ, lgA4., lgG24- Poco frecuente
Síndrome de DiGeorge i i i / lgG4-, lgE4-, lgA4- Muy infrecuente
Deficiencia de IgA / / / lgA4. Frecuente

Modificada de BrostoffJ, Male DK: Clinical im m unologyran illustrared ouTline,SX. Louis, 1994, Mosby.
/ , normal; T, aumentado; i , reducido o defectuoso;/4Ó/4, adenosina-desaminasa;/4g, antígeno;/í¿A', agammaglobulinemia ligada al X;HLA, antígeno leucocítico humano;
IDCG-X, inmunodeficiencia combinada grave ligada al X;/g, inmunoglobulina/IW, (síndrome) linfoproliferativo ligado al X;PNP, nucleósido purina-fosforilasa;
RAG, gen activador de la recombinación.
•Incidencia aproximada: muy infrecuente = < 10"®; infrecuente = 10"^ a 10"®; frecuente = 10"^ a 10"l
M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

PREGUNTAS b. Vacuna contra la polio m ie litis inactivada: inyección


intram uscular d el virus de la poliom ie litis inactivado p o r
m edios quím icos incapaz de replicarse
/. Describa los tipos de respuestas inm unitarias que generarían
c. Vacuna contra el virus d el saram pión vivo atenuado:
los diferentes tipos de vacunas. Considere la vía de
inyección intram uscular d e l virus que se replica en
procesam iento y presentación de los antígenos y las células
las células y expresa el antígeno en las células y en las
y citocinas im plicadas en cada respuesta,
superficies celulares
a. Toxoide tetánico: inyección intram uscular de la proteína
toxina tetánica inactivada con calor y fijada con fo rm o l 2. Reproduzca (p. ej., escriba en o tro papel) la siguiente tabla
y rellene las columnas adecuadas:

Enfermedad por inm unodefídenda Defecto inmunitario Propensión a infecdones espedñcas


Síndrom e de Chédiak-Hiqashi
Enferm edad granulom atosa crónica
D é ficit d e l com plem ento C5
D é ficit d e l com plem ento C3
D é ficit d e l com plem ento C1
D é ficit d e l com plem ento C6, C7, C8 o C9
Deficiencia de IgA
Agam m aglobulinem ia ligada al cromosoma X
D é ficit de linfocitos T ligado al cromosoma X
SIDA
Síndrom e de DiGeorge

Las respuestas a estas preguntas están disponibles en Kumar V, Abbas AK, Fausto N: R obbin s a n d C otra n path olog ic b a s is o f
www.StudentConsult.es d isease, ed 7, Philadelphia, 20 0 5 , Elsevier.
M ale D : Im m unology, ed 4, London, 20 0 4 , Elsevier.
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20 0 7 , W H Freeman.
RESPUESTA S IN M UNITARIAS A LOS M IC ROORGANISM O S INFECCIOSOS

RESPUESTAS de forma natural a respuestas TH2 y memoria. El virus


del sarampión activará respuestas del IFN-a, seguidas de
1 a. Se generará una respuesta TH2, que es respuestas de linfocitos N K y de linfocitos NKT. Los linfocitos
predominantemente una respuesta de anticuerpos, con la N K y los linfocitos NKT producirán pequeñas cantidades
inyección intravenosa rápida de la proteína toxoide tetánico de IFN-7 . Las CD se activarán, procesarán las proteínas del
presentada de forma «antinatural». El linfocito llevará el virus del sarampión y presentarán el antígeno a los linfocitos
antígeno a los ganglios linfáticos, donde las CD presentarán la T CD 4y CD8 mientras producen IL-12 para promover la
proteína a los linfocitosT CD4. Los linfocitosT CD4 formarán generación de más IFN -7 en esos linfocitos T. La producción
IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10 y presentarán el antígeno a los linfocitos B de IL-2 por los linfocitos T CD4 promoverá el crecimiento de
para promover el cambio de clase a la producción de anticuerpo los linfocitos T y los linfocitos B, entre ellos los linfocitos T
relacionada con TH2. La memoria no será eficiente. CD 8 . El IFN -7 también promoverá un cambio de clase en los
b. La vacuna contra la poliomielitis inactivada dará lugar linfocitos B de la producción de IgM a IgG. Más adelante, la
a una respuesta similar a la de la vacuna del toxoide tetánico. respuesta incluirá una respuesta TH2 con la maduración de
c. Al principio se generará una respuesta TH1 frente a la respuesta IgG. A largo plazo también se producirán células
las células infectadas por el virus atenuado, que progresará memoria.

Enfermedad por Defecto ínmunítarío Propensión a infecciones específicas


inmunodeficienda
Síndrome de Chédiak-Higashi Alteración en la liberación del contenido de los Infecciones piógenas {Staphylococcus y
lisosomas al fagosoma, destrucción retardada de Streptococcus)
las bacterias faqocitadas
Enfermedad granulomatosa Incapacidad para generar peróxido de hidrógeno Infecciones recidivantes por bacterias
crónica que destruya las bacterias fagocitadas gramnegativas y grampositivas,
especialmente S. aureus y P. aeruqinosa
Déficit del complemento C5 Disminución de la quimiotaxis y destrucción Infecciones bacterianas
bacteriana
Déficit del complemento C3 Inhibición de la cascada del complemento. Staphylococcus, Streptococcus y otras
C3 es el punto central de las vías clásica y de la infecciones por grampositivos
properdina
Déficit del complemento C1 Inhibición de la vía clásica Infecciones bacterianas
Déficit del complemento C6, Incapacidad para formar el complejo de ataque Infecciones por Neisseria
C7, C8 0 C9 de la membrana
Deficiencia de IgA Linfocito B defectuoso; producción insuficiente Infecciones respiratorias y digestivas
de citocinas; mutación en cadenas J 0 secretorias
Agammaglobulinemia Déficit de CD40 (trastorno del linfocito T Infecciones bacterianas y de otro tipo.
ligada al cromosoma X cooperador); maduración defectuosa del No puede realizar el cambio de clase de
prelinfocito B inmunoqlobulina
Déficit de linfocitos T ligado Receptor defectuoso compartido por las citocinas Bacterias intracelulares, virus (especialmente
al cromosoma X IL-2, IL-7, IL-4, IL-9, IL-15 0 de las señales enviadas herpes, JC), hongos. No pueden realizar el
por el receptor cambio de clase de inmunoqlobulina
SIDA El VIH destruye al linfocito T CD4 Bacterias intracelulares, virus (especialmente
herpes, JC), honqos y alqunos parásitos
Síndrome de DiGeorge Maduración del linfocito T Bacterias intracelulares, virus (especialmente
herpes, JC), hongos. No pueden realizar el
cambio de clase de inmunoqlobulina
Vacunas antímícrobianas

ndependientemente de si aparece como reacción a la va­ un inmunógeno, sea la exposición a un agente infeccioso
I cunación o a un tratamiento, la inmunidad puede prevenir
o disminuir los síntomas graves de enfermedad al inhibir la
(vacunación natural) o m ediante una exposición forzada
a microorganismos o a sus antígenos con vacunas. En una
propagación de una bacteria, una toxina bacteriana, un virus u exposición posterior al agente virulento se activa la aparición
otro microbio hacia el órgano diana o bien al actuar con rapidez de una respuesta inmunitaria secundaria más rápida y eficaz
de protección de la persona expuesta o bien se generan anti­
en el foco de infección. Las respuestas inmunitarias de memo­
cuerpos que inhiben su propagación o actuación.
ria activadas cuando se expone un individuo inmunizado son
más rápidas e intensas que en los individuos no inmunizados. Vacunación pasiva
Al igual que la inmunidad individual, la vacunación de una
La vacunación pasiva se puede utilizar con los siguientes
población disminuye el número de personas sensibles (inmu­
objetivos:
nidad de la comunidad) y detiene la propagación del agente 1. Prevención de la aparición de enfermedad tras una expo­
infeccioso. En el ámbito nacional o intemacional, los programas sición conocida (p. ej., pinchazo con una aguja con sangre
de vacunación han conseguido los siguientes objetivos: contaminada por el virus de la hepatitis B [VHB]).
1. Protección de grupos de la población de los síntomas 2. Mejora de los síntomas de una enfermedad progresiva.
de tos ferina, difteria, tétanos y rabia. 3. Protección de pacientes con inmunodeficiencias.
2. Protección y control de la propagación del sarampión, 4. Inhibición de la acción de las toxinas bacterianas y
parotiditis, rubéola e infección por el virus varicela- prevención de las enferm edades que producen (es
zóster, H aem ophilus influenzae B (Hib) y Streptococcus decir, como tratam iento).
pneum oniae. En la actualidad se dispone de preparados de inmuno-
3. Eliminación de la poliomielitis por virus de tipo salvaje globulinas séricas obtenidas a partir de seres humanos o de
en la mayor parte del mundo, así como de la viruela en animales (p. ej., el caballo) seropositivos que se utilizan como
todo el mundo. profilaxis de diversas enferm edades bacterianas y víricas
Jun to a los programas de vacunación, tam bién pueden (tabla 11-1). La globulina sérica humana se prepara a partir
tom arse medidas para prevenir la enfermedad al limitar la de mezclas de plasma y contiene el repertorio normal de
exposición de los individuos sanos a sujetos infectados (cua­ anticuerpos de un adulto. Sin embargo, tam bién existen
rentena) y eliminar el origen de la infección (p. ej., purifica­ preparaciones especiales de globulinas con un título elevado
ción del agua) o el modo de contagio del agente infeccioso de anticuerpos contra el virus de la hepatitis B (H BIg), el
(p. ej., erradicación de mosquitos). La viruela constituye un virus de la varicela-zóster (V ZIg), el virus de la rabia (RIg) y
buen ejemplo de una infección controlada a través de estos el del tétanos (T Ig ). La inmunoglobulina humana es siempre
m étodos. D esde 1 9 77, la viruela natural se ha eliminado preferible a la de origen animal, puesto que se asocia a un
gracias al éxito de un programa de la Organización Mundial menor riesgo de aparición de una reacción de hipersensibili-
de la Salud (O M S) en el que se combinaron la vacunación y dad (enfermedad del suero).
la cuarentena. La poliomielitis y el sarampión tam bién son Por otra parte, se están desarrollando preparados de an­
objetivos a eliminar. ticuerpos m onoclonales con el fin de conferir protección
Sin embargo, aún aparecen casos de enfermedades preve­ fren te a diversos patógenos y enferm edades. También se
nibles con vacunas en los países en los que los programas de están estudiando anticuerpos monoclonales capaces de inhibir
vacunación 1) no existen o son excesivamente caros (países los mecanismos patógenos asociados a la infección, como la
en vías de desarrollo y 2) no reciben una atención adecuada adhesión de los neutrófilos y el shock séptico.
(p. ej., EE .U U .). Un ejemplo es el sarampión, el cual produce
2 .0 0 0 .0 0 0 de muertes anuales en el mundo como consecuen­ Vacunación activa
cia del primer motivo y se observa con una frecuencia cada El término vacu n a procede del virus de la viruela vacuna, un
vez mayor en EE.U U . como consecuencia del segundo. miembro menos virulento de la familia de los poxvirus que se
utilizó para vacunar a las personas contra la viruela. Las vacu­
T ip o s d e v a c u n a c ió n nas clásicas se pueden dividir en dos grupos en función de la
aparición de infección en la persona receptora (vacunas ate­
La vacunación pasiva consiste en la inyección de anticuerpos nuadas, como la del virus de la vacuna bovina) o la ausencia
purificados o de suero con anticuerpos para tratar o conferir de esta infección (vacunas muertas*inactivadas*de subuni*
una protección rápida y tem poral a un sujeto. Los recién dades) (fig. 11-1). Las vacunas de ácido desoxirribonucleico
nacidos reciben inmunidad pasiva natural a partir de las (A D N ) representan un nuevo m étodo de vacunación en el
inmunoglobulinas maternas que atraviesan la placenta o se que se inyecta ADN plasmídico en el músculo o la piel, el cual
encuentran en la leche. es captado por las células dendríticas, las células musculares
La vacunación activa es la que aparece cuando se estimula o los macrófagos que expresan el gen como el inmunógeno
la aparición de una respuesta inmunitaria a la exposición a de una infección natural. La vacunación con AD N estimula

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100 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 11-1 Inm unoglobulinas disponibles Tabla 11-2 Ventajas y desventajas de las vacunas
para la profilaxis tras la exposición* de virus vivos e inactivados
Vacuna d e virus Vacuna de virus
Hepatitis A Humana Propiedad vivos inactivados

Hepatitis B Humana Vía de administración Natural* o Inyección


inyección
Sarampión Humana
Dosis de virus, coste Bajos Elevados
Rabia Humana’'
Número de dosis, carga Una’^, baja Múltiples, alta
Varicela, varicela-zóster Humana*
Necesidad de adyuvante No Sí*
Citomegalovirus Humana
Duración de la inmunidad Largo plazo Corto plazo
Tétanos Humana’’, equina
Respuesta de anticuerpos IgG, IgA* IgG
Botulismo Equina
Respuesta de inmunidad Buena Mala
Difteria Equina celular
Termoestabilidad en las Síil No
•También se dispone de inmunoglobulinas para otros microorganismos.
’'Se dispone de títulos altos de anticuerpos específicos, que constituyen el trata­ zonas tropicales
miento preferido. Interferencia’ Ocasional Ninguna
Efectos secundarios Síntomas leves En ocasiones dolor
ocasionales** en el brazo
las respuestas inmunitarias mediadas por linfocitos X que se Reversión a virulencia Muy pocas veces No
pueden reforzar con antígeno para inducir una respuesta de
anticuerpos maduros. De White DO, Fenner FJ: Medical virology, 3.^ ed., Nueva York, 1986, Academic.
Ig, inmunoglobulina.
Vacunas inactivadas *Oral o respiratoria (en ciertos casos).
’A veces es preciso administrar una sola dosis de recuerdo después de 6-10 años
Las vacunas inactivadas emplean una gran cantidad de antíge­ (fiebre amarilla, sarampión, rubéola).
no para conseguir una respuesta humoral protectora que no se *No obstante, el alumbre empleado habitualmente carece de eficacia.
asocie al riesgo de aparición de una infección por el patógeno. ^IgA, si se administra por vía oral o por vía respiratoria. La vacuna oral de ¡a polio­
mielitis puede impedir que se replique en el intestino el poliovirus tipo salvaje.
Las vacunas inactivadas se pueden obtener mediante la inacti­ “Para la conservación son útiles el cloruro magnésico y otros estabilizantes, así
vación química (p. ej., formol) o térm ica de las bacterias, las como el almacenamiento en frío.
toxinas bacterianas o los virus, o bien mediante la purificación ’ La interferencia de otros virus o enfermedades puede impedir una infección e
o síntesis de los componentes o las subunidades de los m i­ inmunidad suficientes.
••Especialmente rubéola y sarampión.
croorganismos infecciosos. Las vacunas de microorganismos

inactivados suelen generar respuestas de anticuerpos [res­


puestas T H 2) y respuestas de inmunidad celular limitadas.
Humana Estas vacunas se suelen administrar con un adyuvante, que
lnmunogk>buhna sérica refuerza su inmunogenicidad al fom entar la captación por
Equina las células dendríticas (D C ) y los macrófagos o estimularlos.
Pasiva inmunogk>buhnas ospociticas
Muchos adyuvantes estimulan a los receptores del tipo toll
Anticuerpos monoclonalds para que activen a estas células presentadoras de antígenos. La
mayor parte de las vacunas se precipitan sobre alumbre para
Bactena o vims muertos inducir la liberación lenta del antígeno y su captación por las
Subunidad D C y los macrófagos. El M F59 (escualeno microfluidificado
Péptido o poksacándo
en una em ulsión de aceite y agua) y el m onofosforil lípi-
do A (MPL) son adyuvantes empleados en algunas vacunas más
Toxoide recientes. Los adyuvantes experim entales son emulsiones,
Rango do hospedador
VLP limitado partículas parecidas a virus, liposomas (complejos lipídicos
Sensibilidad a lemperaturaC definidos), componentes de la pared de la célula bacteriana,
Mulantes atenuadosi
r
hífvosm Virus híbridos
■Adaptación al trio
I ■Manipulación genética
jaulas moleculares para el antígeno, surfactantes poliméricos
y formas atenuadas de la toxina del cólera y la linfotoxina
de E sc h erich ia coli. Estas últimas moléculas son potentes
L c e p a s virulentas E adyuvantes para los anticuerpos secretores (inmunoglobuli­
na A [IgA]) tras la vacunación intranasal u oral.
Se em plean vacunas inactivadas en mayor medida que
AON atenuadas para conferir protección frente a la mayoría de las
bacterias y los virus en los que no es posible llevar a cabo el
F ig u ra 1 1 -1 Tipos de vacunación. Pueden administrarse anticuerpos
proceso de atenuación, pueden originar una infección recu­
para inhibir la acción d e un agente infeccioso (vacunación pasiva), o bien
rrente o presentan un potencial oncogénico. En general, las
pu ede aparecer una respuesta inm unitaría secundaria a una infección
natural o a la vacunación (vacunación activa). Se muestran las diferentes vacunas inactivadas son seguras, salvo en aquellas personas
formas de vacunación pasiva y activa. A , Cuando no se disponga de an­ que presentan reacciones alérgicas a los componentes de la va­
ticuerpos hum anos, se p ueden utilizar anticu erp os d e origen equino. cuna. Por ejemplo, muchas vacunas antivíricas son producidas
B, La vacuna puede estar formada por componentes purificados del agente en huevos y, por tanto, no pueden administrarse a las personas
infeccioso o bien desarrollarse a través de técnicas de ingeniería genética
alérgicas a este alimento. Los inconvenientes de las vacunas
(partículas similares a virus [VLPJ). C, Vacuna seleccionada tras el paso a
inactivadas se enumeran a continuación y se comparan con
alta o baja tem peratu ra por anim ales, huevos em brionados o cultivos
celulares. D , Eliminación, inserción, reorganización y otros m utantes de las vacunas atenuadas en la tabla 11 -2 :
laboratorio. E, Vacuna form ada por un virus d e una especie diferente, si 1. H abitualm ente no consiguen una inmunidad de por
bien com parte un antígeno com ún con el virus humano. vida.
VACUNAS ANTIM ICRO BIANAS 101

Tabla 11-3 Vacunas antibacterianas*


Bacteria (enferm edad) Componentes de la vacuna Personas qu e deben recibir las vacunaciones
C orynebacterium d ip h te ria e (difteria) Toxoide Niños y adultos
C lostrídium te ta n i (tétanos) Toxoide Niños y adultos
B ordetella pertussis (tos ferina) Acelular Niños y adolescentes
H aem ophH usinfluenzas B (Hib) Conjugado polisacárido capsular-proteína Niños
Neissería m e n in g itid is A y C Conjugado polisacárido capsular-proteína, Personas de alto riesgo (p. ej., con asplenia), viajeros a zonas
(enfermedad meningocócica) polisacárido capsular endémicas (p. ej., militares), niños
S treptococcus pneu m o n ia e Polisacáridos capsulares; conjugado Niños, personas de alto riesgo (p. ej., con asplenia), ancianos
(enfermedad neumocócica; meningitis) polisacárido capsular-proteína
V ibrio cholerae (cólera) Células muertas Viajeros con riesgo de exposición
S alm onella ty p h i (fiebre tifoidea) Células muertas, polisacárido Viajeros con riesgo de exposición, contactos domésticos,
trabajadores en contacto con aguas residuales
B acillusanthracis (carbunco) Células muertas Manipuladores de pieles importadas, militares
Yersinia p estis (peste) Células muertas Veterinarios, personas en contacto con animales
Frandsella tularensis (tularemia) Células vivas atenuadas Personas en contacto con animales residentes en zonas
endémicas
Coxiella b u rn e tii (fiebre Q) Inactivada Personas en contacto con ovejas, personal de laboratorio que
manipule C. b u rn e tii
M ycobacterium tuberculosis Bacilo de Calmette-Guérin atenuado No recomendada en EE.UU.
(tuberculosis) (M ycobacterium bovis)

•Enumeradas según la frecuencia de utilización.

2. La inmunidad puede ser solamente humoral [TH 2] sin empleadas para las vacunas del V H B y el virus del papiloma
participación del componente celular. humano (VPH ) forman partículas parecidas a los virus [VLP,
3. La vacuna no provoca una respuesta local de IgA. del inglés v iru s-like p articles), que son más inmunógenas que
4. Es preciso administrar dosis de recuerdo. las proteínas individuales.
5. Se deben utilizar dosis mayores. La vacuna de la gripe inactivada está constituida por una
Se distinguen tres tipos principales de vacunas bacterianas mezcla de cepas de virus cultivadas en huevos embrionados
inactivadas: toxoides (toxinas inactivadas], con bacterias in* y posteriormente inactivada o por sus subunidades proteicas
activadas (m u ertas) y con la cápsula o las subunidades (hemaglutinina y neuraminidasa). Se están desarrollando
proteicas de las bacterias. En la tabla 11-3 se muestran las vacunas derivadas de células en cultivo tisular y fabricadas
vacunas bacterianas disponibles en la actualidad. La mayor mediante ingeniería genética. La vacuna se prepara cada año
parte de las vacunas antibacterianas protegen frente a la ac­ para conseguir protección frente a las cepas del virus que se
ción patógena de las toxinas. espera amenacen a la población al año siguiente.
Existen vacunas víricas inactivadas de los virus de la polio­ Las vacunas contra H . influenzae B, N eisseria m eningiti­
mielitis, la hepatitis A , la gripe y la rabia. La vacuna de Salk dis, Salm onella typhi y S. p n eu m on iae (23 cepas) se preparan
frente a la poliomielitis (vacuna de la poliomielitis inactivada a partir de pohsacáridos capsulares. No obstante, habitual­
[V P I]) se prepara mediante la inactivación de los viriones con m ente los polisacáridos poseen un escaso poder inmunóge­
formol. Antiguamente, la vacuna contra la rabia se preparaba no (antígenos independientes de linfocitos T ) . La vacuna
mediante la inactivación con formol de neuronas infectadas antimeningocócica contiene los polisacáridos de los cuatro
de conejo o de embriones infectados de pato. Sin embargo, principales serotipos de la bacteria (A, C, Y y W -1 3 5 ). La
hoy en día se fabrica mediante la inactivación química de vacuna antineumocócica contiene polisacáridos procedentes
viriones en cultivos de células diploides humanas. Debido a de 23 serotipos. La inmunogenicidad de los polisacáridos se
la lenta evolución de la rabia, la vacuna se puede administrar refuerza al combinarlos con un portador proteico (vacuna
inmediatamente después de la exposición de una persona al conjugada) (p. ej., toxoide diftérico, proteína de membrana
virus y aún puede provocar una respuesta humoral protectora. externa de N . m eningitidis o proteína de C ory n ebacteriu m
Una vacuna de subunidades consta de los componentes diphteriae] (fig. 11-2 ). Se ha autorizado la administración a
bacterianos o víricos que suscitan una respuesta inmunitaria lactantes y niños del com plejo formado por el pohsacárido
protectora. Las estructuras de superficie de las bacterias y de H. influenzae B (Hib) y el complejo portador del toxoide
las proteínas de fijación de los virus (cápside o glucoproteínas] diftérico. Se ha desarrollado una vacuna conjugada «neumo­
provocan la aparición de anticuerpos protectores. Asimis­ cócica» de S. pn eu m on iae en la que un polisacárido proce­
mo, las vacunas de subunidades pueden incluir antígenos de dente de las trece cepas con mayor prevalencia en EE.U U .
linfocitos T. Es posible aislar el componente inmunógeno de la se ha unido a una forma no tóxica de la toxina diftérica. Esta
bacteria, el virus o las células infectadas por el virus por medio vacuna se puede administrar tanto a lactantes como a niños
de métodos bioquímicos, aunque también se puede preparar pequeños. Las restantes vacunas de polisacáridos tienen un
la vacuna por ingeniería genética mediante la expresión de menor poder inmunógeno y se deben administrar solamente
genes \áricos clonados en bacterias o células eucarióticas. Por a niños mayores de 2 años.
ejemplo, en un principio la vacuna de subunidades del VH B
Vacunas vivas aten u a d as
se preparó a partir del antígeno de superficie obtenido del
suero de portadores crónicos del virus. En este momento la Las vacunas vivas atenuadas se preparan con microorganismos
vacuna frente al V H B se obtiene de una levadura portadora dotados de una escasa capacidad para provocar en ferm e­
del gen de HBsAg. El antígeno se purifica, se trata por medio dad (p. ej., microorganismos avirulentos o atenuados). Las
de m étodos químicos y se absorbe en alumbre para poder vacunas atenuadas son especialm ente útiles para conferir
ser utilizado en la vacuna. Las proteínas de la subunidad protección frente a las infecciones causadas por virus con
102 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Tabla 11-4 Vacunas frente a virus*


Componentes Personas que deben
de la vacuna recibir las vacunaciones
PDlisacárida
capsular Inactivada (vacuna
de la poliomielitis
inactivada, vacuna
de Salk)
Atenuada (vacuna
oral de la
C028: poliomielitis,
vacuna de Sabin)
Sarampión Atenuada Niños
Parotiditis Atenuada Niños
Rubéola Atenuada Niños

CD 40L; CD40 Varicela-zóster Atenuada Niños


11 Anticuerpo
frente a la Rotavirus Híbridos Lactantes
cápsula bovino-humano
Atenuada
Figura 11-2 Vacunas conjugadas de polisacáridos capsulares. Los poli- Virus del papiloma VLP l\flujeres de 9-26 años
sacáridos capsulares son poco Inmunógenos, no inducen la colaboración humano (VPH)
de los linfocitos T y sólo inducen IgM sin memoria. Los polisacáridos de la
Gripe Inactivada Niños, adultos, en
cápsula conjugados con una proteína (p. ej., toxoide de la difteria) se unen
especial personal
a la IgM contra el polisacárido de la superficie del linfocito B; este complejo
médico y ancianos
se interioriza, se procesa y a continuación se presenta un péptido unido al
com plejo principal de histocompatibilidad II (M H C II) a los linfocitos T CD4. Atenuada 2-50 años
Los linfocitos T se activan, producen atocinas e inducen el cam bio de clase (pulverizador nasal)
d e las inm unoglobulinas para generar el linfocito B con el polisacárido Hepatitis B Subunidades (VLP) Recién nacidos, personal
específico. Los linfocitos B se pueden activar, sintetizar IgG y aparecerán sanitario, grupos de
linfocitos memoria. TCR, receptor del linfocito T. alto riesgo (p. ej.,
sujetos promiscuos,
adictos a drogas por
envoltura, cuya resolución requiere la participación de las res­ vía parenteral)

puestas inmunitarias de los linfocitos T. La inmunización con­ Hepatitis A Niños, educadores,


seguida mediante una vacuna atenuada remeda la infección viajeros a zonas
endémicas, indios
natural en la medida en que la respuesta inmunitaria progresa americanos nativos y
a través de la aparición de una respuesta T H l, seguida de habitantes de Alaska
una respuesta T H 2 y, finalmente, de respuestas inmunitarias Adenovirus Atenuada IVlilitares
humoral, celular y de memoria. La inmunidad así adquirida Fiebre amarilla Atenuada Viajeros con riesgo de
suele persistir de por vida y, según la vía de administración exposición, militares
utilizada, puede incluso simular la respuesta inmunitaria Cualquier persona
normal observada tras la exposición al agente infeccioso. Sin expuesta al virus
embargo, las vacunas atenuadas presentan los tres problemas Preexposición:
enumerados a continuación: veterinarios, personas
en contacto con
1. El virus vacunal puede resultar aún peligroso en per­ animales
sonas inmunodeprimidas o mujeres embarazadas que
Virus atenuado Protección frente a
carecen de los recursos inmunológicos suficientes para de la vacuna ataques bioterroristas,
resolver incluso una infección vírica «débil». militares
2. La vacuna puede convertirse en una forma vírica viru­ Encefalitis Viajeros con riesgo de
lenta. japonesa exposición
3. Es preciso mantener la viabilidad de la vacuna.
VLP, partícula similar a virus.
Entre las vacunas atenuadas bacterianas figuran la vacuna ^Enumeradas según la frecuencia de utilización.
oral contra la fieb re tifo id ea, cepa atenuada (Ty21a) de
S. typhi; la vacuna BC G de la tuberculosis, bacilo de Calmette-
Guérin (B C G ), una cepa atenuada deM ycobacteriu m bovis; y de ingeniería genética (v. fig. 11-1). Los virus de tipo salvaje
la vacuna atenuada de la tularemia. En ocasiones es necesario se atenúan al crecer en huevos embrionados o en cultivos ce­
contar con una combinación de las respuestas humoral y ce­ lulares a temperaturas no fisiológicas (2 5 -3 4 °C) y protegidos
lular provocadas por la administración de vacunas atenuadas de las presiones selectivas de la respuesta inmunitaria del
frente a las bacterias de desarrollo intracelular. En EE.U U . no organismo hospedador. En estas condiciones, se selecciona
se utiliza la vacuna BC G porque la vacunación no es siempre o permite el crecim iento de cepas víricas (mutantes) porta­
protectora y las personas vacunadas con ella muestran una doras de alguna de las siguientes características: 1) menor
falsa reacción positiva a la prueba del derivado proteico pu­ virulencia, puesto que crecen con dificultad a 37 °C (cepas
rificado [PPD, del inglés pu rified protein derivativé), la cual sensibles a la tem peratura [p. ej., vacuna del sarampión]
representa la prueba de cribado empleada en dicho país para y cepas adaptadas al frío [vacuna de la gripe]); 2 ) ausencia
controlar la tuberculosis. de replicación correcta en cualquier tipo celular humano
Las vacunas de virus atenuados están formadas por ce ­ (mutantes con rango de hospedador); 3) imposibilidad de
pas menos virulentas (atenuadas) del virus de tipo salvaje, evitar el control inmunológico, o 4) capacidad de replicación
virus pertenecientes a otras especies con las que comparten en un foco «benigno», pero no de diseminación, fijación ni
determinantes antigénicos (vacuna para la viruela, rotavirus rephcación en el tejido diana afectado normalmente por la
bovinos) o virus no virulentos obtenidos mediante técnicas enfermedad (p. ej., la vacuna de la poliomielitis se replica en
VACUNAS ANTIM ICROBIANAS

el tubo digestivo, pero no alcanza ni infecta a las neuronas). o se puede administrar una versión más potente en adultos
En la tabla 11-4 se muestran ejemplos de vacunas con virus para la prevención del zóster.
vivos atenuados. La vacuna contra la gripe trivalente se administra por vía
La primera vacuna [viruela] fue desarrollada por Edward nasal con un pulverizador y está adaptada al frío a 25 °C. A
Jenner. La idea de la vacuna le sobrevino cuando observó que diferencia de la vacuna inactivada utilizada anteriormente,
el virus de la enfermedad llamada «vacuna» (un virus virulen­ esta nueva preparación suscita respuestas celulares T y B
to de otra especie que comparte determinantes antigénicos junto a inmunidad mucosa. Esta vacuna sólo puede adminis­
con el virus de la viruela) provocaba la aparición en el ser trarse a sujetos de 2 a 4 9 años.
humano de una infección benigna, tras lo cual confería una
inmunidad protectora frente a la viruela. D e forma análoga, Futuro de la vacunación
una mezcla de rotavirus humanos y bovinos recombinados es Actualmente se están utilizando técnicas de biología molecu­
la base de una de las actuales vacunas, que se administra para lar con el propósito de desarrollar nuevas vacunas. Se pueden
proteger a los lactantes frente al rotavirus humano. crear nuevas vacunas atenuadas m ediante la introducción
En los años cincuenta, Albert Sabin desarrolló la primera por ingeniería genética de mutaciones capaces de inactivar o
vacuna oral contra la poliomielitis (V O P ) a partir de virus producir la eliminación de un gen virulento en lugar de lograr
atenuados. La vacuna formada por virus atenuados se obtiene una atenuación aleatoria del virus a través de múltiples pases
mediante múltiples pasos de los tres tipos de poliovirus en por cultivos tisulares. Los genes de agentes infecciosos no sus­
células de riñón de mono. En la cepa de la vacuna de tipo 1 ceptibles de atenuación se pueden introducir en virus seguros
se acumulan, al menos, 57 mutaciones. Cuando esta vacuna (p. ej., virus de la viruela vacuna, poxvirus del canario, ade-
se administra por vía oral, se secreta IgA en el intestino y novirus atenuados) para generar vacunas de virus híbridos.
aparece IgG en el suero, lo que confiere protección a lo largo Este m étodo ofrece resultados prometedores respecto a la
de toda la vía de infección normal del virus de tipo salvaje. Se consecución de una vacuna polivalente con actividad frente
trata de una vacuna económica, de administración sencilla y a numerosos agentes en un vector único, seguro, económico
relativamente estable y puede propagarse a los contactos de y relativamente estable. Durante la infección, la vacuna de
los sujetos vacunados. Los programas eficaces de vacunación virus híbridos no necesita finalizar un ciclo de replicación, sino
han llevado a la eliminación de la poliomielitis provocada por tan sólo promover la expresión del gen insertado con el fin de
el virus de tipo salvaje en la mayor parte del mundo. La V PI se desencadenar una respuesta inmunitaria a los antígenos. Estos
usa en la mayor parte del mundo en el programa de vacunación sistemas vectoriales del virus de la viruela vacuna, el virus
infantil habitual debido al riesgo de aparición de poliomielitis del canario y el adenovirus se han utilizado ya en diversas
inducida por la administración de la V PO (v. fig. 11-2). vacunas híbridas experimentales. Una vacuna del virus de la
Las vacunas del V H B y del V PH se fabrican mediante inmunodeficiencia humano (V IH ) seguida de dos vacunas de
técnicas genéticas y se cultivan en levaduras. Las proteínas recuerdo con la glucoproteína 120 del V IH mostró resultados
de unión del virus, el antígeno de superficie del V H B y la prometedores pero modestos. Se utiliza una vacuna basada en
proteína L del V PH forman proteínas similares al virus. Al el virus de la viruela vacuna para inmunizar a animales salvajes
limitar la propagación de estos virus, estas vacunas también contra la rabia. Se han considerado otros virus como vectores.
evitan los cánceres asociados [carcinoma de cuello uterino: Se están desarrollando vacunas de subunidades obteni­
V PH ; carcinoma hepatocelular primario: V H B). das por técnicas de ingeniería genética mediante la clonación
Por otra parte, se han desarrollado vacunas de virus atenua­ de genes que codifican proteínas inmunógenas en vectores
dos contra el sarampión, la parotiditis y la rubéola [las cuales bacterianos y eucarióticos. Las principales dificultades para el
se administran de manera conjunta en la llamada «vacuna triple desarrollo de este tipo de vacunas son 1) la identificación de la
vírica»), así como frente a la varicela-zóster y, recientemente, subunidad o del inmunógeno peptídico adecuados que propor­
contra la gripe. La protección frente a estas infecciones exige cionarán la respuesta de anticuerpos protectores y la respuesta
el despliegue de una potente respuesta inmunitaria celular, deseada de linfocitos T, y 2) lograr presentar el antígeno en su
por lo que la vacuna se administra después del año de edad, es conformación correcta. Una vez identificado, es posible aislar,
decir, en un momento lo bastante tardío para evitar la interfe­ clonar y expresar el gen en bacterias o levaduras para poder así
rencia con los anticuerpos maternos y en el que la inmunidad producir grandes cantidades de estas proteínas. Se han clonado
celular es suficientemente madura. Una vacuna del sarampión la proteína de envoltura g p l2 0 del V IH , la hemaglutinina del
elaborada a partir de virus muertos obtuvo resultados insatis­ virus de la gripe, el antígeno G del virus de la rabia y la gluco­
factorios puesto que proporcionaba una inmunidad incompleta proteína D del virus del herpes simple, y se han producido
que inducía síntomas de mayor gravedad (sarampión atípico) sus proteínas en células bacterianas o eucariotas para su apli­
con posterioridad a la exposición al virus del sarampión de tipo cación (o potencial aplicación) como vacunas de subunidades.
salvaje que los asociados a la infección natural. Las vacunas de subunidades peptídicas contienen epítopos
La primera vacuna de virus atenuados contra el sarampión específicos de proteínas microbianas que ocasionan la aparición
estaba formada por la cepa Edmonston B y fue desarrollada de anticuerpos neutralizabas o incluso una respuesta de los
por Enders y cois. Este virus se cultivó ampliamente de forma linfocitos T. Para producir este tipo de respuesta, el péptido
seriada a 35 °C en células renales humanas, células amnióticas debe contener las secuencias que se unen a las proteínas M H C I
humanas y células de embrión de pollo. Las cepas vacunales o M H C II [complejo principal de histocompatibilidad de las
utilizadas actualm ente son de M oraten (en E E .U U .) y de clases I o II) en las D C para su presentación y reconocimiento
Schwarz (en otros países), y se obtuvieron tras el paso de la por linfocitos T con el fin de suscitar una respuesta inmunita­
cepa Edmonston B por embriones de pollo a 32 °C. ria. Por otra parte, la inmunogenicidad del péptido se puede
De igual modo, los virus de la vacuna contra la parotiditis reforzar a través de su unión por un enlace covalente a una
(cepa de Jeryl Lynn) y de la vacuna contra la rubéola [cepa proteína portadora (p. ej., toxoide tetánico o hemocianina de
"Mstar RA 27/3) se atenuaron a través de múltiples pases del lapa californiana [M egathura crenulata [KLH ]), a un ligando
virus por cultivos celulares. La vacuna de la varicela-zóster para un receptor del tipo toll (p. ej., flagelina) o a un péptido
emplea la cepa Oka, un virus atenuado. La vacuna frente a inmunológico capaz de presentar de manera específica el epí-
varicela-zóster se administra junto con la vacuna triple vírica topo para obtener la respuesta inmunitaria más apropiada. Sin
104 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

duda, en el futuro se desarrollarán mejores vacunas conforme


se vayan conociendo en mayor medida los mecanismos de
presentación de antígenos y la interacción de antígenos es­ Problem as relacionados con la utilización
pecíficos con los receptores de linfocitos T. de las vacunas
Se están estudiando adyuvantes destinados a potenciar
la inmunogenicidad y orientar la respuesta de las vacunas En ocasiones, las vacunas de virus atenuados pueden
a una respuesta de tipo T H l o T H 2 . Entre ellos figuran convertirse en formas virulentas
algunos activadores de receptores del tipo toll, com o los La interferencia con otros microorganismos puede evitar la
oligodesoxinucleótidos de C pG , los derivados del lípido A infección producida por una vacuna de virus atenuados
del lipopolisacárido, citocinas y liposomas, nanopartículas, (p. ej., la rubéola impide la replicación del virus de la
etc. El uso de M E59 en una nueva vacuna frente a la gripe poliomielitis
(no disponible aún en EE .U U .} permite reducir la cantidad La administración de una vacuna de virus atenuados a un
de antígeno necesaria para inducir inmunidad protectora. individuo inmunodeprimido puede poner en riesgo su vida
Las vacunas de A D N pueden resultar ventajosas en la Pueden aparecer efectos vacunales secundarios, como
vacunación contra agentes infecciosos que requieren la parti­ reacciones alérgicas y de hipersensibilidad al antígeno,
cipación de las respuestas humoral y de los linfocitos T, pero al material no microbiano de la vacuna y a posibles
que no se pueden incluir en vacunas vivas atenuadas. Este contaminantes (p. ej., huevos)
m étodo se basa en la clonación del gen de una proteína que El desarrollo de la vacuna es muy arriesgado y muy caro
provoca respuestas protectoras en un plásmido que permita La información errónea respecto a la seguridad da lugar a
la expresión de la misma en células eucarióticas. Se inyecta un desarrollo insuficiente de vacunas importantes
el A D N desnudo en el músculo o la piel del receptor de la Es difícil controlar mediante vacunación las infecciones
vacuna, tras lo cual las células captan el A D N y se expresa producidas por microorganismos que tienen numerosos
el gen clonado para producir la proteína y presentarla al sis­ serotipos
tem a inmunitario para suscitar respuestas T H l y T H 2. Las
vacunas de A D N suelen requerir un refuerzo con proteínas
antigénicas para producir anticuerpos.
Se ha utilizado un nuevo abordaje, denominado vacúnalo- a las personas frente a una infección, no se pueden desarrollar
g ía inversa, para desarrollar una vacuna frente a N . m eningi- vacunas frente a todos los agentes infecciosos, ya que se trata
tidis B. Basándose en las propiedades proteínicas predichas a de un proceso laborioso y caro. En el cuadro 11-1 se muestran
partir de la secuencia génica se estudió la capacidad de miles las consideraciones que hay que tener en cuenta en la elección
de proteínas de conferir protección frente a la infección con de un candidato para desarrollar un programa vacunal.
el fin de identificar proteínas candidatas. Con la aparición de La viruela natural se eliminó gracias a un programa de
ésta y otras nuevas tecnologías, debería ser posible obtener vacunación eficaz, puesto que el virus era un buen candidato
vacunas contra agentes infecciosos como Streptococcus mu- para ese programa; el virus existía en forma de un solo seroti­
tans (para prevenir la caries dental), los virus del herpes, el po, las personas infectadas siempre presentaban síntomas y la
V IH y parásitos como Plasm odium fa lcip aru m (paludismo) vacuna era relativamente benigna y estable. Sin embargo, su
y L eish m an ia. De hecho, una vez identificado el inmunógeno eliminación fue el resultado de la colaboración concertada por
p rotecto r adecuado y logrado el aislam iento del gen que parte de la O M S y centros sanitarios de todo el mundo. Por
lo codifica, debería ser posible obtener una vacuna contra otra parte, el rinovirus constituye un ejemplo de un candidato
prácticamente cualquier agente infeccioso. poco adecuado para el desarrollo de una vacuna puesto que
la enfermedad vírica no es grave y el número de serotipos es
excesivamente alto para que la vacunación tenga éxito. En el
P r o g r a m a s d e v a c u n a c ió n cuadro 11-2 se presentan los problemas junto a diversos as­
Un programa de vacunación eficaz puede ahorrar millones pectos prácticos relacionados con el desarrollo de una vacuna.
de dólares en asistencia sanitaria. Un programa de este tipo Desde el punto de vista de cada sujeto, la vacuna ideal de­
no o frece tan sólo protección a cada una de las personas bería conferir una inmunidad segura y de por vida frente a la
vacunadas frente a la infección y la aparición de enfermedad, infección y no asociarse a la aparición de efectos secundarios
sino que también reduce el número de personas susceptibles graves. Los factores que influyen en el éxito de un programa
en la población general, con lo que en definitiva se previene la de vacunación engloban no sólo la composición de la vacuna,
propagación del agente infeccioso en ella. Aunque la vacuna­ sino también la cronología, el lugar y las condiciones de admi­
ción puede constituir el método más adecuado para proteger nistración. La información errónea sobre la seguridad de las
vacunas ha impedido que se vacunara a algunos sujetos, lo que
les ha colocado en situación de riesgo de sufrir enfermedades.
En la figura 11-3 se m uestran las pautas de vacunación
recomendadas en la población pediátrica. Cada año el A d -
Propiedades para considerar a un m icroorganism o visory C om m ittee on Im m unization P ractices (ACIP) de los
buen candidato para el desarrollo de una vacuna Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades
elabora tablas con los calendarios vacunales recomendados
Los microorganismos causan enfermedades significativas
para niños, adolescentes, adultos y casos especiales. Las va­
El microorganismo se encuentra en forma de un solo
cunaciones de recuerdo con vacunas inactivadas y la vacuna
serotipo
frente al sarampión con virus vivos atenuados se necesitan
Los anticuerpos bloquean la infección o la propagación
sistémica en fases posteriores de la vida. Las mujeres menores de 26
El microorganismo no posee potencial oncógeno años deberían vacunarse fren te al V PH y los estudiantes
La vacuna es termoestable, por lo que puede transportarse de secundaria deberían vacunarse frente al meningococo o
a las zonas endémicas recibir una dosis de recuerdo. Los adultos deben recibir las
vacunas contra S. p n eu m on iae (neum ococo), el virus de la
VACUNAS ANTIM ICRO BIANAS 105

Edadi O meses
1 2 4 6 12 15 18 19-23 2-3 4 -6
Vacuna ▼ mes meses meses meses meses meses meses meses años anos

Hepatitis B HepB HepB HepB

Rotavirus Rota Rola Rola

Difteria, télanos, tos (enna DTaP DTaP DTaP DTaP DTaP

Haenx>phi¡us influenzae tipo b Hib Hib

Neumooóctca PCV PCV PCV PCV PPV

Potíovirus mactivado PVI PVI PVI PVI

Gripe Gripe (anual)

Sarampión, parobdftis. rubéola SP R SP R

Varicela Varicela Varicela

Hepatitis A HepA (2 dosis) Sene de HepA

Menirtgocócica MCV4

Intervalos de edades recomendadas Algunos grupos de riesgo

F ig u ra 1 1 -3 Programa de vacunación recom endado por los Centros para el Control y la P revención de Enfermedades. Las vacunas se enum eran a las
edades a las que se recomienda habitualm ente su administración. Las barras indican el intervalo d e edades aceptables para la vacunación. DTaP, difteria,
tétanos y tos ferina acelular; H e p A , hepatitis A; H epB , hepatitis B; H ib , H a e m o p h ilu s in flu e n z a e tipo b; M C V4, m eningocócica tetravalente conjugada;
PCV, neumocócica con jug ad a;PW , poliovirus inactivado; R ota, rotavirus; SRP, sarampión, rubéola y parotiditis; VPN, polisacárido neumocócico. (Tomado
de Centersfor Disease Control and Prevention Advisory Com m itteeon Immunization ?\acX\ces\ R e com m ended im m u n iz a tio n schedule fo rp e rs o n s ag e d O
Through 6 years-UnitedStaTes,2012 (PDF), www.cdc.gov/vaccines/recs/schedules/downloads/child/0-6yrs-schedule-pr.pdf. Consultado el 25 de mayo de 2012.)

gripe, el virus de la rabia, el V H B y otras enfermedades, en


Las respuestas a estas p re g u n ta s e stán d is p o n ib le s en
función de la ocupación laboral, el tipo de viajes que deban
w w w .S tu d e n tC o n s u lt.e s
realizar y otros factores de riesgo que puedan incrementar su
susceptibilidad frente a agentes infecciosos específicos. Estas BIBLIO G R A FÍA
vacunas se comentan más en detalle en capítulos posteriores
Advisory Com m ittee en Immunization Practices: S tatem en ts (w ebsite).
al hablar de la enfermedad concreta que previenen.
www.cdc.gov/vaccines/recs/acip/default.htm. A ccessed February
28, 2 0 1 2 .
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PREGUNTAS (w ebsite). http://www.cdc.gov/vaccines/default.htm. Accessed May
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gripe, tétanos, VI-IB, HiB, difteria, poliom ie litis y tos ferina? Foundation.
2. El tétanos se trata m ediante vacunación pasiva y se previene C enters for D isease C ontrol and Prevention: M a n u a l f o r th e su rvei-
m ediante vacunación activa. Compare la naturaleza y la llan ce o f vaccin e-preven tab le d iseases, ed 4, 2 0 0 8 -2 0 0 9 ; ed 5, 2011
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inhibe? www.niaid.nih.gov/topics/vaccines/Pages/Default.aspx. A ccessed
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a gran escala para ¡as infecciones p o r rinovirus, virus del Saunders.
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Rosenthal K S, Zimmerman D H : Vaccines: all things considered, C lin
y personal que ju stifican el desarrollo de los siguientes Vaccine Im m unol 1 3 :8 2 1 -8 2 9 , 2006.
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Página deliberadamente en blanco
e-10 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

RESPUESTAS Virus del herpes simple: la protección requiere inmunidad


por anticuerpos y celular pero debe bloquear la diseminación
1. Las vacunas de virus inactivados se utilizan cuando no desde el lugar inicial de infección hasta la neurona y el virus
pueden generarse vacunas de virus atenuados con seguridad puede estar oculto al anticuerpo en ese momento (otras
o cuando una respuesta de anticuerpos es suficiente para vacunas sólo deben bloquear la propagación virémica).
aportar protección. Aunque predominan las vacunas de virus Virus sincitial respiratorio: debe desencadenar inmunidad de
inactivados, ahora se ha aprobado una vacuna de virus vivos anticuerpos y celular; el virus puede propagarse de una célula
contra la gripe. a otra y escapar del control del anticuerpo; aunque hay un
2. El tratamiento mediante inmunización pasiva con número limitado de cepas, múltiples virus pueden causar una
anticuerpos es como tratar la infección con un fármaco que enfermedad similar.
bloquee la acción de la toxina del tétanos; es inmediata pero 5. Estos microorganismos producen una morbilidad y
sólo dura unos 2 meses, hasta que se elimina el anticuerpo del mortalidad significativas en el sujeto afectado. Hay un número
sistema. La inmunización activa establece células que producen limitado de serotipos en estos microorganismos y pueden
una respuesta inmunitaria que dura más y es más fuerte pero obtenerse vacunas estables, seguras y relativamente baratas.
tarda tiempo en establecerse. El sarampión y la viruela son enfermedades mortales
3. La vacuna del virus inactivado de la poliomielitis importantes que sólo tienen un serotipo del virus. Además, la viruela
desencadena una respuesta de anticuerpos (TH2) siempre produce una enfermedad visible, lo que permite llevar a
predominante. Este anticuerpo no evita la infección pero cabo una cuarentena que facilite un programa de vacunación.
es suficiente para bloquear la progresión de un virus de la La parotiditis es problemática pero no suele poner en peligro
poliomielitis en el torrente sanguíneo desde donde alcanzará la vida, aunque hay sólo un serotipo y se ha obtenido una
su tejido diana (músculo y encéfalo) y por ello evita la vacuna eficaz de virus vivos que puede administrarse con las
enfermedad. vacunas del sarampión y de la rubéola.
La vacuna oral infecta al sujeto con mutantes atenuados de La vacuna de la rubéola se desarrolló para reducir las
los tres tipos de poliovirus para iniciar una respuesta natural enfermedades congénitas. De nuevo, sólo hay un serotipo.
frente a cada virus, incluida la respuesta IgA secretoria. El La vacuna del tétanos es un toxoide que desencadena
desarrollo de células memoria es más fuerte y permanente. anticuerpos que impiden la acción de la toxina. El tétanos es
4. No se han desarrollado vacunas frente a estos microbios una enfermedad frecuente peligrosa para la vida.
por las siguientes razones: La vacuna de la tos ferina acelular impide esta infección
Rinovirus: demasiados serotipos; otros virus causan una mortal de los niños pequeños. El aumento del inicio de
enfermedad similar; y la enfermedad no pone la vida en esta enfermedad en adolescentes y adultos ha llevado al
peligro. establecimiento de una dosis de recuerdo.
SECCIÓN 4

^ V / i ^ - __

Bacteriología
2 Clasificación, estructura
y repiicación de las bacterias

T as bacterias, que son las células más pequeñas, sólo se metabólicas características, por su antigenicidad y, por último,
i —ípueden visualizar con ayuda de un m icroscopio. Las por su genotipo.
bacterias de menor tamaño [C h la m y d ia y R ickettsid) miden
sólo 0 , 1-0,2 |xm de diámetro, mientras que las bacterias más Distinción macroscópica y microscópica
grandes pueden alcanzar varias mieras de longitud. Una es­ La distinción inicial entre las bacterias se puede realizar en
pecie recientem ente descrita es cientos de veces mayor que función de las características de crecimiento en distintos nu­
las células bacterianas promedio y se puede ver a simple vista. trientes y medios de cultivo selectivos. Las bacterias crecen
Sin embargo, la mayoría de las especies miden aproximada­ en colonias y cada una de ellas equivaldría a una ciudad con
m ente 1 (Jim de diámetro y sólo se visualizan con el micros­ un millón de organismos o más. La suma de sus características
copio óptico, cuya resolución es 0,2 ¡jLm. En comparación, las condiciona los rasgos que definen a una colonia, como su color,
células de las plantas y los animales son mucho más grandes, tamaño, forma u olor. La capacidad de resistir frente a deter­
y oscilan entre 0,7 |xm [el diámetro de un eritrocito) y varios minados antibióticos, de fermentar azúcares específicos (p. ej.,
metros (la longitud de algunas células nerviosas). la lactosa que perm ite distinguir E. coli de S alm on elld ), de
lisar los eritrocitos (capacidad hemolítica) o de hidrolizar los
lípidos (p. ej., la lipasa de los clostridios) se puede determinar
D if e r e n c ia s e n t r e e u c a r io t a s también mediante el uso de los medios de cultivo adecuados.
Y PROCARIOTAS El aspecto m icroscópico, incluido el tam año, la forma
y la configuración de los gérmenes (cocos, bacilos, curvos,
Las células de los animales, las plantas y los hongos son eucariotas espirales), y la capacidad de captar la tin ció n de G ram
(palabra de origen griego que significa «núcleo verdadero»), mien­ (grampositivos o gramnegativos) son el principal modo de
tras que las bacterias, las archaea y las algas azul-verdosas son distinguir las bacterias. Una bacteria esférica, como Staphy-
miembros de las procariotas (del griego «núcleo primitivo»). Las lococcus, es un coco, mientras que una bacteria en forma de
archaea (arqueobacterias) se asemejan a las bacterias en muchos bastón, como E. coli, es un bacilo; el treponema que adopta
aspectos pero representan un dominio único desde las bacterias una forma serpenteante es un espirilo. Además, N o ca rd ia y
y eucariotas. Además de carecer de núcleo y organelas, el cromo­ A ctinom yces tienen un aspecto filamentoso ramificado similar
soma bacteriano se distingue del humano en varios aspectos. El a estos hongos. Algunas bacterías forman agregados, como los
cromosoma de una bacteria típica, como Escherichia coli, es una cúmulos a modo de racimos de uvas de Staphylococcus aureus
molécula única circular con dos cadenas de ácido desoxirribonu- o los diplococos (dos células juntas) que se observan en las
cleico (ADN), que contiene aproximadamente unos 5 millones especies de N e is s er ia o Streptococcus.
de pares de bases (o 5.000 pares de kilobases [kb]) y tiene una La tinción de G ram es una prueba rápida, potente y senci­
longitud aproximada de 1,3 mm (es decir, casi 1.000 veces el diá­ lla que permite al clínico distinguir entre dos clases fundamen­
metro de la célula). Los cromosomas bacterianos más pequeños tales de bacterias, establecer un diagnóstico inicial e iniciar el
son los de los micoplasmas, que miden aproximadamente la cuar­ tratamiento basándose en las diferencias inherentes entre las
ta parte de este valor. En comparación, los seres humanos tienen bacterías (fig. 12-2). Las bacterias se fijan con calor o se dejan
dos copias de 23 cromosomas, lo que representa unos 2,9 X 10^ secar sobre el porta, se tiñen con violeta cristal (fig. 12-3),
pares de bases y 990 mm de longitud. Las bacterias emplean que es un colorante que se precipita con yodo, y después se
un ribosoma de menor tamaño, el ribosoma 70S, y en la mayor elimina el exceso de colorante y el no ligado lavando el porta
parte de las bacterias existe una pared celular constituida por con un decolorante cuya base es la acetona y con agua. Se
peptidoglucanos que rodea a modo de entramado las membranas añade después un contraste, la safranina, para teñir las células
para protegerlas del entomo. Las bacterias pueden sobrevivir y, en decoloradas. Este proceso se realiza en menos de 10 minutos.
algunos casos, crecer en entomos hostiles, en los que la presión Las bacterias grampositivas se tiñen de morado porque
osmótica en el exterior de la célula es tan baja que la mayor parte el colorante queda atrapado en una gruesa capa de peptido­
de las células eucariotas se lisarían, con temperaturas extremas glucanos a modo de malla entrelazada, que rodea a la célula.
(tanto cálidas como frías), en ambientes secos y en presencia Las bacterias gram negativas tienen una capa de peptido­
de fuentes de enerva muy diluidas y diversas. Las bacterias han glucanos más delgada, que no retiene el violeta cristal, de
sufrido cambios en la estructura y función para adaptarse a estas forma que las células se tiñen con la safranina empleada como
condiciones. La figura 12-1 muestra éstas y otras características contraste y se ven rojas (fig. 12-4). Se puede establecer la
distintivas, que se resumen también en la tabla 12-1. Varias de regla nemotécnica: «púrpura es positivo».
estas diferencias son la base para la acción de los antimicrobianos. Dada la degradación de los peptidoglucanos, la tinción
de Gram no se considera fiable para bacterias que están sin
nutrientes (es decir, cultivos antiguos o en fase estacionaría) o
C l a s if ic a c ió n b a c t e r ia n a
que han sido tratadas con antibióticos. Las bacterías que no se
Las bacterias se pueden clasificar según su aspecto macros­ pueden clasificar en función del resultado con el Gram inclu­
cópico y microscópico, por el crecim iento y las propiedades yen las micobacterias, que tienen una cubierta externa de tipo
© 2 0 1 4. Elsevier España, S.L. Reservados todos los derechos 109
110 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

Procariota Cromosoma único, un entorno aerobio o anaerobio, la exigencia de nutrientes


circular y muy específicos [p. ej., la capacidad de ferm entar hidratos de
enrollado carbono específicos o emplear distintos compuestos como
fuentes de carbonos para el crecim iento] y la producción
de productos metabólicos característicos [ácidos, alcoholes)
y enzimas específicas (p. ej., catalasas de los estafilococos).
Se han desarrollado técnicas automatizadas para distinguir
entre las bacterias entéricas y de otro tipo, que analizan el
Ragelo crecim iento en distintos medios de cultivo y sus productos
microbianos y adjudican un biotipo numérico a cada bacteria.
Citoplasma-I Piásmído Membrana celular
rico en ríbosomas (zona donde ocu rre
Una cepa concreta de bacterias se puede distinguir m e­
70S ta respiración celular) diante el uso de anticuerpos que detectan antígenos caracte­
rísticos en la misma (serotipado). Estas pruebas serológicas se
pueden emplear también para identificar organismos difíciles
{Treponem a pallid u m , el germen responsable de la sífilis) o
E u c rlo ta Mitocondha (zona donde
demasiado peligrosos [p. ej., Francisella, el germen responsa­
ocurre la respiración celular)
ble de la tularemia) para cultivarlos en el laboratorio, que se
asocian a un síndrome patológico específico (p. ej., el seroti-
po 0 1 57:H 7 de E. coli responsable de la colitis hemorrágica) o
que se deben identificar con gran rapidez (p. ej., Streptoco-
cciis pyogenes, responsable de la faringitis estreptocócica). El
serotipado se emplea también para subdividir a las bacterias
por debajo del nivel de la especie con fines epidemiológicos.
El método más exacto para clasificar a las bacterias es el
análisis de su m aterial genético. Los nuevos m étodos dis­
tinguen las bacterias m ediante la detección de secuencias
del A D N características específicas. Entre estas técnicas se
incluyen la hibridación del AD N , la amplificación mediante
reacción en cadena de la polimerasa (P C R ) y otras técnicas
relacionadas, que se describen en el capítulo 5. Estas técn i­
cas genéticas no necesitan gérmenes vivos o en crecimiento
y se pueden emplear para la detección e identificación rápida
de gérmenes de crecim iento lento, como m icobacterias y
hongos, o para el análisis de muestras patológicas, incluso de
Figura 12-1 Principales características de los procariotasy los eucarlotas. cepas muy virulentas. Ahora se dispone de esta tecnología
para el análisis rápido de las secuencias de ácidos nucleicos
de segmentos específicos dentro de todo el cromosoma de
céreo y que se distinguen bien con la tinción de ácido-alcohol la bacteria. La aplicación más frecuente de esta técnica es el
resistencia, y los micoplasmas, que no tienen peptidoglucanos. análisis de secuencias de AD N ribosómico para detectar las
secuencias muy conservadas que distinguen a una famiha o
Diferencia metabólica, antigéníca y genética género y las secuencias altamente variables que caracterizan
El siguiente nivel de la clasificación depende de las caracterís­ a la especie o subespecie. También se han empleado para
ticas metabólicas de las bacterias, incluidas la necesidad de definir la relación evolutiva entre los gérmenes e identificar

T a b la 12-1 Principales características de los eucariotas y los procariotas


1 Características Eucariotas Procariotas
Principales grupos Algas, hongos, protozoos, plantas, animales Bacterias
Tamaño (aproximado) >5 |xm 0,5-3 |i,m
Estructuras del núcleo I
Núcleo Membrana nuclear clásica Sin membrana nuclear
Cromosomas Cadenas de ADN. Genoma diploide ADN único y circular. Genoma haploide
Estructuras del citoplasma
Mitocondrias Presentes Ausentes
Aparato de Golgi Presente Ausente
Retículo endoplasmático Presente Ausente
Ribosomas (coeficiente de sedimentación) SOS (60S+40S) 70S (SOS + 30S)
Membrana citoplásmica Contiene esteróles No contiene esteróles
Pared celular Presente en los hongos; ausente Es una estructura compleja formada por proteínas,
en los demás eucariotas lípidos y peptidoglucanos
Reproducción Sexual y asexual Asexual {fisión binaria)
Movimiento Flagelos complejos, si existen Flagelos simples, si existen
Respiración Vía mitocondrial A través de la membrana citoplásmica

Modificada de Holt S. En Slots J.Taubman M ,ed\Xores:Contem poraryOralM icrobiologyandImm unology.SX. Louis, 1992, Mosby.
CLASIFICACIÓN, ESTRUCTURA Y REPLICACIÓN DE LAS BACTERIAS 111

^ Gram positívas Gram negativas


Staphylococcusaureus Bscheñchiacoíi

Paso 1 Chstai violeta

Membtana
otoptásoiKa Paso 2 Solución
yodada
Proteínas estructurales y enzimáticas Paso 3 Decoloranto
(alcohol o acetona)
LIpopolisacdrkIos

Paso 4 Rojo saframna

Morfología bacteriana
Formas

Coco

Espiroqueta
F ig u ra 1 2 -3 M orfología de las bacterias según la tinción de Gram.
A, En las bacterias grampositivas, el cristal violeta de la tinción de Gram es
ñjado por la solución yodada y atrapado en la gruesa capa de peptido­
Upoprotelna
glucano. El decolorante se disemina por la m embrana externa gramne-
gativa y elimina el cristal violeta de la capa delgada del peptidoglucano.
Poptidoglucano
transportadora Las bacterias gram negativas se visualizan m ediante el colo ran te de
contraste rojo. B, Morfología d e las bacterias.
F ig u ra 1 2 -2 Comparación de la pared celular de las bacterias grampo-
sitivas y gram negativas. A , Una bacteria gram positiva posee una gruesa
capa de peptidoglucano que contiene ácidos teicoico y lipoteicoico. B, Una
bacteria gram negativa posee una capa de peptidoglucanos delgada y una
membrana externa que contiene lipopolisacáridos, fosfolípidos y proteínas.
El espacio periplásmico existente entre la m embrana citoplásmica y la m em ­
brana externa contiene las proteínas de transporte, degradación y síntesis
de la pared celular. La membrana externa está unida a la m embrana citoplás­ TalMque cto draión
mica en unos puntos de adhesión; asimismo, está fija al peptidoglucano por
enlaces de lipoproteínas.
Capad»
(CApsüta) pepttdogfcicano
Cu«n>o \
aquellos que resulta difícil o imposible cultivar. Se han em­ (tenduBión.^
pleado diversos métodos adicionales, sobre todo para clasi­
ficar subespecies de microorganismos para la investigación
epidemiológica, como el análisis de plásmidos, el ribotipado
y el análisis de los fragm entos de A D N cromosómico. En
estos últimos años se han simplificado los aspectos técnicos
de estos métodos, hasta el punto de que la mayor parte de
los laboratorios clínicos emplean variaciones de los mismos
en su práctica diaria. Ribofioma
Pfoirtna#
y /f (tesupaiflcie [fíeosle»
E s t r u c t u r a b a c t e r ia n a iFlagelo)
' GRAMPOSITIVAS GRAMNEGATIVAS
Estructuras dtoplásmicas F ig u ra 1 2 -4 Bacterias gram positivas y gram negativas. Una bacteria
El citoplasma de la célula bacteriana contiene ADN cromo­ grampositiva posee una capa gruesa de peptidoglucano (que rellena el es­
sómico, ARN mensajero (ARN m ), ribosomas, proteínas y pacio de color morado) (izquierda). Una bacteria gramnegativa posee una
capa delgada de peptidoglucano (línea n e g ra se n d iia ) y una membrana
m etabolitos [v. fig. 1 2 -4 ). A diferencia del cromosoma de
externa (derecha). Las estructuras cuyo nombre aparece entre paréntesis
los eucariotas, el cromosoma bacteriano se compone de una no se encuentran en todas las bacterias. Durante el proceso d e división
única molécula circular de doble cadena que no está conte­ celular, la m em brana y el peptidoglucano crecen para form ar un tabique
nida en un núcleo, sino en una zona definida conocida como divisorio que separará a las células hijas.
112 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

T a b la 12-2 Estructuras de la m em brana bacteriana


Constituyentes químicos
Membrana plasmática Fosfolípidos, proteínas y enzimas Contención, generación de energía, potencial de
membrana y transporte
Pared celular
B acteria g ra m p o s itiv a s
Peptidoglucano Cadenas de gtucanos de GIcNAc y MurNAc entrecruzados Forma y estructura celular; protección frente al ambiente
por un puente peptídico y destrucción por el complemento
Ácido teicoico Polirribitol fosfato o glicerol fosfato unido al peptidoglucano Refuerza la pared celular; secuestro del ion calcio; activador
Ácido lipoteicoico Ácido teicoico unido a lípido de protecciones innatas del hospedador

B acterias gra m n e g a tiv a s


Peptidoglucano Versión más delgada de la que se encuentra en las bacterias Forma y estructura celulares
grampositivas
Espacio periplásmico Enzimas implicadas en el transporte, la degradación y la síntesis
Membrana externa Estructura celular; protección frente al ambiente del
hospedador
Canal de porina Penetración de pequeñas moléculas hidrófilas; restringe
algunos antibióticos
Dispositivos secretores (tipos I, II, III, IV) Penetra y libera proteínas a través de las membranas,
incluidos factores de virulencia
Lipoproteína Unión de la membrana externa al peptidoglucano
LPS Lípido A, polisacárido de la región central, antígeno O Estructura de la membrana externa; potente activador de
respuestas innatas del hospedador
Fosfolípidos Con ácidos grasos saturados
O tra s estru ctu ras
Cápsula Polisacáridos (disacáridos y trisacáridos) y polipéptidos Antifagocítica
Biopelícula Polisacáridos Protección de la colonia frente al ambiente,
antimicrobianos y respuesta del hospedador
P ili Pilina, adhesinas Adherencia, p/// sexuales
Flagelo Proteínas motoras, flagelina Movimiento, quimiotaxia
Proteínas Proteína M de estreptococos (por ejemplo) Varias

G/cA/-4c,A/-acetilglucosamina;¿PS, lipopolisacárido; MurtV/4c, ácido W-acetilmurámico.

nucleoide. Asimismo, este cromosoma carece de histonas bombas de iones (para mantener un potencial de membrana)
que mantengan la conformación del ADN y éste no forma y enzimas. La cara interna de la membrana se encuentra tapi­
nucleosomas. La célula tam bién puede poseer plásmidos, zada de filamentos proteicos tipo actina, los cuales participan
unas m oléculas extracrom osóm icas circulares más cortas en la determinación de la forma de la bacteria y el lugar de
de A D N . Los plásmidos, aunque por regla general no son formación del tabique en la división celular. Estos filamentos
esenciales para la supervivencia de la célula, le proporcionan determinan la forma helicoidal de los treponemas.
a menudo una ventaja selectiva: muchos de ellos confieren
resistencia frente a uno o más antibióticos.
Pared celular
La ausencia de membrana nuclear simplifica las necesida­ Las bacterias grampositivas se diferencian de las gramnegati­
des y los mecanismos de control de la síntesis de proteínas. vas en la estructura de la pared celular (tabla 12-2 ) y en sus
La falta de esta membrana nuclear conlleva el acoplamiento componentes y sus funciones (tabla 12-3). Los componentes
de los procesos de transcripción y de traducción; en otras de la pared celular también son exclusivos de las bacterias, y
palabras, los ribosomas se fijan al ARNm y fabrican proteínas su estructura repetitiva se une a receptores de tipo toll de las
a medida que se está sintetizando el ARN m aún unido al células humanas para desencadenar respuestas protectoras
ADN. innatas. Las diferencias im portantes en las características
El ribosom a bacteriano consta de dos subunidades de de la membrana se describen en la tabla 1 2 -4 . Las m em ­
30S y SOS que forman un ribosoma 70S. Este ribosoma es branas citoplásm icas de la mayor parte de los procariotas
distinto del ribosoma SOS (subunidades 4 0S y 6 0S ) de los están rodeadas de unas rígidas capas de peptidoglucano
eucariotas. Las proteínas y el ARN del ribosoma bacteriano (m ureína), salvo en los organism os A rc h a e a (que contienen
son muy distintos de los observados en los ribosomas de los seudoglucanos o seudomureínas relacionadas con el peptido­
eucariotas y constituyen un señalado objetivo de los fármacos glucano), los micoplasmas (que carecen de pared celular] y
antibacterianos. las clamidias (que no tienen peptidoglucano]. El peptido­
La m embrana citoplásmica posee una estructura lipídica glucano es el elem ento que proporciona rigidez, por lo que
de doble capa semejante a la observada en las membranas de también determina la forma de cada célula bacteriana. Las
los eucariotas, pero no contiene esteroides (p. ej., colesterol]; bacterias gramnegativas están envueltas además por m em ­
una excepción a esta regla son los micoplasmas. La membrana branas externas.
citoplásmica lleva a cabo muchas de las funciones atribuibles
a los orgánulos de los eucariotas. Entre estas tareas destacan Bacterias grampositivas
el transporte y la producción de energía, que normalmente Una bacteria grampositiva posee \ma p a r e d celu lar gruesa que
se realizan en las mitocondrias. Además, la membrana con­ consta de varias capas y está fo rm a d a principalm ente p or pepti­
tiene unas proteínas de transporte que permiten la captación doglucano (1 5 0 a 500 A] que rodea la membrana citoplásmica
de m etabolitos y la liberación de otras sustancias, así como (fig. 12-5). El peptidoglucano es un exoesqueleto en forma de
CLASIFICACIÓN, ESTRUCTURA Y REPLICACIÓN DE LAS BACTERIAS 113

Tabla 12-3 Funciones de la envoltura bacteriana Tabla 12-4 Características de la m em brana


de las bacterias gram positivas y gram negativas
Estructura
Rigidez Todos Membrana externa

Envoltura de las estructuras internas Todos Pared celular Delgada

Funciones bacterianas Upopolisacárido


Barrera de permeabilidad Membrana externa o membrana Endotoxina
plasmática Ácido teicoico Presente a menudo -
Captación metabólica Membranas y porinas, Esporulación En algunas cepas -
permeasas y proteínas de
transporte periplásmicas Cápsula Presente a veces Presente a veces

Producción de energía Membrana plasmática Lisozima Sensible Resistente

Motilidad Flagelos Actividad antibacteriana Más susceptible Más resistente


de la penicilina
Apareamiento Pili
Producción de exotoxina Algunas cepas Algunas cepas
Interacción en el órgano del hospedador
Adhesión a las células del hospedador Pili, proteínas, ácido teicoico
Identificación inmunológica Todas las estructuras externas
por el hospedador y peptidoglucano
Los ácidos teicoicos constituyen unos señalados factores de
Defensa contra las protecciones inmunitarias del hospedador virulencia. Los ácidos lipoteicoicos son expulsados hacia el
Anticuerpo Proteína M medio circundante y al m edio intercelular del organismo
Fagocitosis Cápsula
hospedador y, aunque débiles, son capaces de desencadenar
Complemento Peptidoglucano de
grampositivos
respuestas inmunitarias del hospedador sem ejantes a las de
las endotoxinas.
Importancia médica
Dianas antibióticas Síntesis de peptidoglucano, Bacterias gramnegativas
membrana externa
Resistencia a antibióticos Barrera de la membrana externa
Las paredes celulares gramnegativas son más com plejas
(tanto desde el punto de vista estructural como químico)
que las de las células grampositivas (v. fig. 1 2 -2 ). Desde el
punto de vista estructural, una pared celular gramnegativa
malla con una función semejante a la del exoesqueleto de los contiene dos capas situadas en el exterior de la membrana
insectos. Sin embargo, y a diferencia de esta última estructura, citoplásmica. Inmediatamente por fuera de la membrana ci­
el peptidoglucano de la célula es lo suficientemente poroso toplásmica se encuentra una d elg ad a c a p a d e peptidoglucano
como para permitir la difusión de los metabolitos a la m em ­ que representa tan sólo entre un 5% y un 10% del peso de
brana plasmática. Un nuevo modelo para los peptidoglucanos la pared celular. Además, la pared celular gramnegativa no
sugiere que el glucano se extiende desde la membrana plas­ contiene ácid o s teicoicos ni lipoteicoicos. En la parte externa
mática a modo de púas unidas entre ellas por cortas cadenas de la capa de peptidoglucano se halla la mem brana externa,
peptídicas. El peptidoglucano es un elemento clave para la la cual es exclusiva de las bacterias gramnegativas. La zona
estructura, la replicación y la supervivencia de la célula en comprendida en tre la superficie externa de la m embrana
las condiciones norm alm ente hostiles en las que prolife- citoplásmica y la superficie interna de la membrana externa
ran las bacterias. se conoce como espacio periplásm ico. Este espacio es un
El peptidoglucano puede degradarse mediante el trata­ com partim ento que contiene diversas enzimas hidrolíticas
m iento con lisozim a. La lisozima es una enzima presente importantes para la degradación y metabolización por la cé­
en la mucosidad y las lágrimas del ser humano que también lula de las macromoléculas de gran tamaño. Habitualmente,
producen las bacterias y otros microorganismos. Esta enzima estas enzimas son proteasas, fosfatasas, lipasas, nucleasas y
es capaz de desdoblar el esqueleto de glucano del peptido­ enzimas metabolizadoras de carbohidratos. En el caso de las
glucano. Sin el peptidoglucano, la bacteria sucumbe a las especies bacterianas gramnegativas patógenas, muchos de los
grandes diferencias de presión osmótica existentes a uno y factores de virulencia líticos (p. ej., colagenasas, hialuroni-
a otro lado de la membrana citoplásmica y experimenta un dasas, proteasas y p-lactamasa) se encuentran en el espacio
fenómeno de lisis. La eliminación de la pared celular produce periplásmico.
un protoplasto, el cual experimenta un proceso de lisis a no La pared celular de los gramnegativos está atravesada
ser que se estabilice osmóticamente. también por distintos sistemas de transporte, que incluyen
La célula grampositiva puede poseer también otros com ­ los dispositivos de secreción de tipos I, 11, 111, IV y V Estos
ponentes, como las proteínas, los ácidos teicoicos y lipotei- sistemas de transporte aportan mecanismos para la captación
coicos, y pohsacáridos complejos (generalmente denomina­ y liberación de distintos metabolitos y otros compuestos. La
dos polisacáridos C ). La proteína M de los estreptococos y producción de dispositivos de secreción puede ser inducida
la proteína R de los estafilococos se asocian al peptidoglu­ durante la infección y contribuir a la virulencia del microbio
cano. Los ácidos teicoicos son unos polímeros hidrosolubles al transportar moléculas que facilitan la adherencia bacteriana
de fosfatos de poliol que están unidos al peptidoglucano o la proliferación intracelular. El dispositivo de secreción 111
m ediante enlaces covalentes y son fundamentales para la es un factor de virulencia fundamental en algunas bacterias
viabilidad celular. Los ácidos lipoteicoicos poseen un ácido con una estructura compleja que cruza las membranas interna
graso y se encuentran unidos a la membrana citoplásmica. y externa y puede actuar a modo de jeringa para inyectar
Estas moléculas son antígenos de superficie frecuentes que proteínas dentro de otras células.
diferencian los serotipos bacterianos y favorecen la fijación Tal como se ha mencionado anteriormente, las membra­
a otras bacterias y a receptores específicos localizados en nas externas (v. fig. 1 2 -2) son características de las bacterias
la superficie de las células de los mamíferos (adherencia). gramnegativas. La membrana externa forma una especie de
114 M ICRO BIO LO GÍA M ÉDICA

G G Q O Q
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M^M M^M

Enlace pepticftco

F ig u r a 12-5 Estructura general del peptídoglucano de la pared celular. A , El peptídoglucano forma una especie de malla alrededor de la célula. B, La
malla de peptídoglucano está formada por un polímero de potisacárido cruzado por puentes peptídicos. C, Los péptidos están entrecruzados a través de
un puente peptídico existente entre la D-alanina (o-Ala) terminal de una cadena y una lisina (Lys) (o bien otro aminoácido de tipo diamino) de otra cadena.
En S ta p h y lo c o c c u s a ure us, un puente d e pentaglicina (glyj) se encarga de am pliar el entrecruzam iento (v. figura). D, Representación de la estructura
del p eptídoglucano de E scherichia co li. El ácido diam inopim élico (el am inoácido tipo diam ino q ue se encuentra en la tercera posición del péptido) está
u n id o d ire c ta m e n te a la alanina term inal de otra cadena (de este m odo se consigue el entrecruzam iento del peptídoglucano). La lipoproteína ancla
la m em brana externa al peptídoglucano. 6 , W-acetilglucosamina;(j/t/, ácidoD-glutámico;g/y, glicina; M , ácido A/-acetilmurámico. (A-C, Modificadas de
Talare K, Talare A: F oun da tion s in m ic ro b io lo g y, 1? ed., Dubuque, lowa, 1996, William C Brown. D, Modificada de Jokiik KJ y coh.'.Z insserm icrobiolog y, Norwaik,
Conn, 1988, Appleton & Lange.)

saco de lona rígido alrededor de la bacteria. L a m em b ran a El LPS tam bién es conocido com o endotoxina y cons­
e x te m a m an tien e la estru ctura b a c ter ia n a y constituye una titu ye un p otente estim ulador de las respuestas inm unita-
b a r r e r a im p er m e a b le a m o lécu las d e gran tam añ o (p. ej., rias. Los LPS se desprenden de la bacteria hacia el medio
proteínas como la lisozima] y m oléculas h id rófoba s (p. ej., al­ de cultivo y el hospedador. Los LPS activan los linfocitos B
gunos antimicrobianos). También ofrece protección frente e inducen la liberación de interleucina 1, interleucina 6 ,
a condiciones ambientales adversas [p. ej., el sistema diges­ facto r de necrosis tum oral y otros factores por parte de
tivo del organismo hospedador, un facto r im portante en los macrófagos, las células dendríticas y otras células. Los
los microorganismos de E n te ro b a c te r ia c e a e ). La membrana LPS ocasionan fiebre y pueden provocar shock. La reacción
externa posee una configuración asimétrica y es una bicapa de Schw artzm an (coagulación intravascular diseminada)
lipídica que difiere de cualquier otra m em brana biológi­ tien e lugar tras la liberación de grandes cantidades de en-
ca por la estructura de su zona extern a. La zona interna dotoxinas a la circulación. Las bacterias de tipo N e is s e r ia
de esta m em brana extern a con tien e los fosfolípidos que liberan grandes cantidades de una m olécula relacionada,
norm alm ente aparecen en las membranas bacterianas. Sin el lip oo lig osacárid o ( L O S ) , lo que determ in a fie b re y
embargo, la zona externa está formada fundamentalmente síntomas graves.
por lipopolisacárido (L P S ). Con excepción de las moléculas Aunque la gama de proteínas presentes en las membranas
de LPS presentes en el proceso de síntesis, la zona externa de externas de los gramnegativos es limitada, algunas de ellas se
la membrana externa es la única localización donde aparecen encuentran a una concentración elevada, con lo que el conte­
moléculas de LPS. nido proteico total es superior al que existe en la membrana
CLASIFICACIÓN, ESTRUCTURA Y REPLICACIÓN DE LAS BACTERIAS 115

citoplásmica. Muchas de estas proteínas atraviesan toda la Los flagelos son unos propulsores en forma de cuerda que
bicapa lipídica, por lo que se habla de proteínas transmem- están formados por unas subunidades proteicas enrolladas
branarias. U n grupo de ellas recibe el nombre de porinas helicoidalm ente (flagelina); asimismo, se unen a las m em ­
puesto que forman poros que perm iten la difusión a tra ­ branas de las bacterias mediante unas estructuras [gancho y
vés de la m em brana de moléculas hidrófilas de menos de cuerpo basal) y se impulsan por el potencial de membrana.
7 0 0 D a de peso. E l c a n a l d e la p o r in a p erm ite e l p a s o d e Las especies bacterianas pueden tener uno o varios flagelos
m etabolitos y an tim icrobian os hidrófilos d e pequ eñ o tam año. en su superficie, los cuales pueden anclarse en diferentes
Igualm ente, la m em brana externa contiene proteínas es­ partes de la célula. Los flagelos están com puestos de un
tructurales y moléculas receptoras para los bacteriófagos y m otor de proteínas activado por adenosina trifosfato [ATP)
otros ligandos y com ponentes del sistema de transporte y conectado con un propulsor en forma de látigo compuesto de
secreción. múltiples subunidades de ñagelina. Los flagelos proporcio­
La membrana externa se conecta a la membrana citoplás­ nan motilidad a las bacterias y permiten que la célula se dirija
m ica a través de unas zonas de adhesión y, por otra parte, hacia los nutrientes y evite las sustancias tóxicas (quimio*
se une al peptidoglucano por medio de una lipoproteína. ta x is). Las bacterias se acercan a sus nutrientes nadando en
Esta lipoproteína se une al peptidoglucano por un enlace línea recta para girar luego bruscamente y continuar en una
covalente y tam bién se ancla a la mem brana externa. Las nueva dirección. Este período de desplazamiento aumenta a
zonas de adhesión proporcionan una vía membranosa para el medida que se incrementa la concentración de la sustancia
paso de los componentes recién sintetizados de la membrana quimioatrayente. La dirección del giro flagelar determina si
externa hacia ésta. las bacterias continúan nadando o bien giran. Los flagelos
La m em brana extern a se m an tien e m ed iante enlaces portan tam bién factores antigénicos y determinantes de la
catiónicos divalentes (Mg"^^ y Ca"^^) formados entre los fos­ cepa bacteriana y constituyen un ligando para el receptor
fatos de las moléculas de LPS y por interacciones hidrófobas de tipo toll 5 para activar las protecciones innatas del hos-
entre el LPS y las proteínas existentes. Estas interacciones
producen una membrana rígida y fuerte que puede verse Las fimbrias ( p ili) («orlas» en latín) son unas estructuras
afectada por la acción de antibióticos (p. ej., polimixina) o piUformes que se localizan en la parte externa de las bacterias
m ediante la eliminación de los iones de magnesio y calcio y están formadas por unas subunidades proteicas (pilina).
[quelación con ácido etilendiam ino-tetraacético [EDTA] o Las fimbrias se diferencian morfológicamente de los flagelos
tetraciclina). La alteración de la membrana externa debilita por su menor diámetro (3-8 nm frente a 15-20 nm) y carecer
a la bacteria y favorece el paso de m oléculas hidrófobas de una estructura helicoidal. Por regla general, a lo largo
de gran tamaño. La adición de lisozima a células con una de toda la superficie de la célula bacteriana existen varios
membrana externa alterada produce unos esferoplastos que, centenares de fimbrias dispuestas de form a uniform e. Su
al igual que los protoplastos, son sensibles a los cambios tamaño puede ser de hasta 1 5 -2 0 |xm o muchas veces el ta ­
osmóticos. maño de la célula.
Las fimbrias favorecen la adhesión a otras bacterias o
Estructuras externas al organism o hospedador [sus nom bres alternativos son
Algunas bacterias (grampositivas o gramnegativas) se encuen­ a d h e s in a s , lec tin a s, e v a s in a s y a g r e s in a s ). Com o facto r
tran rodeadas por unas capas laxas de proteínas o polisacári- de adherencia (adhesina), las fimbrias constituyen un im ­
dos denominadas cápsulas. En los casos en que la adhesión portante determ inante de virulencia en la colonización e
es muy débil y el grosor o la densidad no son uniformes, se infección del aparato urinario por E. coli, al igual que en
habla de capa de limo (slim e la y er ). Las cápsulas y la capa la in fección por N e is s e r ia g o n o rrh o ea e y otras bacterias.
de limo se conocen también como glucocálix. Una excepción Los extrem o s de las fim brias pueden co n ten er tam bién
a esta regla es B acillu s an thracis, que produce una cápsula unas proteínas [lectinas) que se fijan a azúcares específicos
polipeptídica. Aunque la cápsula apenas es visible al micros­ (p. ej., mañosa). L os p i l i F ( p ili sexuales) se unen a otras
copio, puede visualizarse por la exclusión de partículas de b acterias y configuran una estru ctu ra tu bu lifo rm e para
tinta china. la transferencia horizontal de grandes segm entos de los
Aunque las cápsulas y las capas de limo son innecesarias cromosom as bacterianos. Estos p ili están codificados por
para el crecimiento de las bacterias, revisten una gran impor­ un plásmido (F).
tancia para su supervivencia en el organismo hospedador. L a
cápsu la es poco an tigén ica y es an tifagocítica; adem ás, consti­ Excepciones bacterianas
tuye un fa c to r d e viru len cia significativo (p. ej., Streptococcus Las micobacterias poseen una capa de peptidoglucano (con
p n eu m on iae). La cápsula puede actuar también como barrera una estructura ligeramente distinta), que está entrelazado
frente a moléculas hidrófobas tóxicas (p. ej., detergentes), así y unido m ediante un enlace covalente a un polím ero de
como facilitar la adherencia a otras bacterias o a las superfi­ arabinogalactano, y rodeado de una capa lipídica ceriform e
cies de los tejidos del hospedador. En el caso de S treptococ­ de ácido micólico (ácidos grasos tipo p-hidroxi con ramifica­
cus mutans, las cápsulas de dextrano y levano posibilitan su ciones a y de alto peso m olecular), factor de agregación de
fijación y adhesión al esmalte dental. Durante el cultivo in micobacterias (cord) (glucolípido de trehalosa y dos ácidos
vitro pueden aparecer cepas bacterianas que carecen de una micólicos), waxD (glucolípido de 15 a 2 0 ácidos micóhcos y
cápsula en ausencia de la presión del organismo hospedador azúcar) y sulfolípidos (v. fig. 2 5 -1 ). Estas bacterias se definen
y son, por tanto, menos virulentas. Algunas bacterias (p. ej., como ácido-alcohol resistentes. La capa lipídica es antifa­
Pseudomonas aeruginosa, S. aureus) producen una biopelícula gocítica y responsable de la virulencia de estas bacterias.
polisacárida cuando hay un número suficiente de bacterias Igualmente, los microorganismos pertenecientes a los géneros
(quórum) y en determinadas condiciones que favorece el cre­ C ory n eb acteriu m y N o c a r d ia producen ácidos m icólicos.
cimiento, con lo que se establece una comunidad bacteriana También las clam idias y los m icoplasm as carecen de una
y protege a sus miembros de la acción de los antibióticos y pared celular de peptidoglucano y los micoplasmas incorporan
las defensas del organismo hospedador. Otra biopelícula es en sus membranas moléculas de esteroides procedentes del
la placa dental causada por S. m utans. organismo hospedador.
116 M ICRO BIO LO GIA M ÉDICA

Sitio de acdón
Estructura y b io s ín t e s is
(división) de la
DE LOS PRIN CIPALES COM PONENTES iisozíma

DE LA PARED CELULAR BACTERIANA W-ac©tilgkico\^ / ic id o M acelilV ^ ^


.samina / ^ ^ A ^ rá m tc o
Los componentes de la pared celular son estructuras grandes
que están formadas por polímeros de subunidades. Este tipo
de estructura facilita su síntesis. D el mismo modo que los l -ALANINA

astronautas fabrican en el espacio una estación espacial, las


bacterias han de enfrentarse a diversos problemas durante
D-GLUTAMATO
el proceso de conexión de los com ponentes de su pared
celular. La síntesis de peptidoglucano, LPS, ácidos teicoicos
y la cápsula tiene lugar en el exterior de la bacteria en un L-LISÍNA
espacio alejado de la maquinaria de síntesis y las fuentes de ¡ para el entre-
energía del citoplasma situado en el seno de un ambiente ■cruzamiento
inhóspito. Tanto en el caso de la estación espacial como en d-AUNINA
las bacterias, las subunidades y los precursores prefabricados
que formarán la estructura final se ensamblan en el interior • Puente rolo
en un proceso «industrial», se unen a una estructura y a ¡ utilizado para 1
continuación son transportados a la superficie y conectados a • et entrecruzamiento
la estructura preexistente. En las bacterias, el transportador
Liberada durante
molecular sem ejante a una cinta es un gran fosfolípido hi­ D-ALANINA