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MÉTODO: TRICRÓMICA DE POLLACK 1

Fijador: Bouin
Cortes: Histosec a 6 mµ.

Soluciones:

Hematoxilina de Weigerth

Sol. A Hematoxilina en polvo 1 g.
Alcohol de 96% 100 ml.

Sol. B Cloruro férrico al 29% 4 ml.
Agua destilada (de calidad óptima) 95 ml.
HCl concentrado (calidad reactivo) 1 ml.

Solución de Trabajo

Unir volúmenes iguales de Solución A y B momentos antes de colorear.

Tricrómica de Pollack

Fucsina ácida 0,5 g.
Ponceau 2R 1 g.
Verde claro S.F. 0.45 g.
Orange G 0.75 g.
Ácido fosfotúngstico 1.5 g.
Ácido fosfomolíbdico 1.5 g.
Ácido acético glacial 3 ml.
Alcohol etílico al 50% 300 ml.

Preparación

Disolver el ácido acético en el alcohol, dividir el total de solución en 4 volúmenes iguales, en balones.

En el primer balón disolver la Fucsina ácida y el Ponceau 2R.
En el segundo balón disolver el Verde Luz S.F.
El el tercer balón disolver el Orange G y el Ácido fosfotúngstico
En el cuarto balón disolver el Ácido fosfomolíbdico (al calor suave)
A continuación mezclar y filtrar
Esta solución se conserva muy bien por un periodo largo de tiempo

14. en agua destilada brevemente. Controlar al microscopio. Técnica de Coloración 1. Agua destilada 99 ml. Diferenciar las estructuras histológicas con sol. 8. Diafanización o aclaramiento en: Xilol x 5 minutos Xilol x 5 minutos Xilol x 5 minutos 16. Colorear en Tricrómica de Pollack. para eliminar exceso del ácido. 12. 3. Colorear en Solución de Trabajo de Hematoxilina de Weigert. por 5 minutos. Neutralizar el xilol en alcohol de 96%. Lavar el exceso de colorante. 9. por 60 minutos a 24 horas. Controlar al microscopio la intensidad de la coloración nuclear. 11. Controlar al microscopio la intensidad de coloración de las estructuras histológicas coloreadas. 7. Deshidratar en: Alcohol de 70% x 5 minutos Alcohol de 96% x 5 minutos Alcohol de 96% x 5 minutos Alcohol de 96% x 5 minutos Etanol Absoluto x 5 minutos Etanol Absoluto x 5 minutos Etanol Absoluto x 5 minutos 15. Baño breve en agua destilada. . de ácido acético glacial. controlar al microscopio la coloración óptima y por tanto el tiempo adecuado. por 10 minutos. 2 Ácido Acético Glacial Ácido acético glacial 100% (grado reactivo) 1 ml. 10.5%. por 5 minutos. 4. Desparafinar en dos cambios de xilol. por 10 minutos. 2. Hidratar en agua destilada. Baño en agua corriente hasta que el agua sea incolora. 13. 5. Diferenciar si es necesario en alcohol ácido al 0. por breves segundos. tiempo 5 minutos c/u. Montaje en bálsamo del Canadá. 6.

Músculo: Color rojo. Queratina: Color rojo naranja. José Soldado Muro Tecnólogo Médico Histólogo . Colágena: Color Verde azulado. 3 Resultados: Núcleo: Color negro.