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PRACTICA DE LABORATORIO N° 2: MEDIOS DE CULTIVOS

I. OBJETIVOS

 reconocimiento de los materiales empleados en la siembra de


microorganismos.
 Aprender a usar el autoclave y esterilizar
 Procedimientos de medios de cultivo

II. MARCO TEORICO

Las bacterias son los organismos más abundantes del planeta. Son ubicuas, se
encuentran en todos los hábitats terrestres y acuáticos; crecen hasta en los más
extremos como en los manantiales de aguas calientes y ácidas, en desechos
radioactivos. En el cuerpo humano hay aproximadamente diez veces tantas
células bacterianas como células humanas, con una gran cantidad de bacterias
en la piel y en el tracto digestivo, algunas bacterias patógenas pueden causar
enfermedades infecciosas, incluyendo cólera,
difteria, escarlatina, lepra, sífilis, tifus, etc.
Por otra parte para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de
cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,
grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado
correcto de acidez o alcalinidad y exento de todo microorganismo
contaminante. El agar es un elemento solidificante muy empleado para la
preparación de medios de cultivo.

III. PARTE EXPERIMENTAL

3.1. MATERIALES

Autoclave: es un instrumento habitual en los laboratorios de cultivo in vitro. En


esencia, un autoclave es un recipiente en el que se consigue exponer el material
a esterilizar a temperaturas superiores a la de ebullición del agua, gracias a
aumentar la presión.

Placa Petri: Recipiente redondo, hecho de vidrio o de plástico, posee diferentes


diámetros, es de fondo bajo, con una cubierta de la misma forma que la placa,
pero un poco más grande de diámetro, ya que se puede colocar encima y cerrar
el recipiente, como una tapa. Se utiliza para el cultivo de bacterias y otras
especies relacionadas y observar diferentes tipos de muestras.
Mechero: instrumento utilizado en laboratorios para calentar o esterilizar
muestras o reactivos químicos.

Matraces Erlenmeyer: Es utilizado principalmente para la preparacion de


soluciones.

Asa bacteriológica : Se emplea para transportar o arrastrar o


trasvasar inóculos (pequeño volumen que contiene microorganismos en
suspensión) desde la solución de trabajo también llamada “solución
madre” al medio de cultivo (sólido o líquido) o de un medio a otro
(resiembra)

3.2. SUSTANCIA:

AGAR: Agar o agar-agar es una gelatina vegetal de origen marino. Esta gelatina
es un polisacárido sin ramificaciones obtenidos de la pared celular de varias
especies de algas

AGUA DESTILADA:
El agua destilada es aquella sustancia cuya composición se basa en la unidad
de moléculas de H2O. Es aquella a la que se le han eliminado los iones e impurezas
mediante destilación

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

4.1. Autoclave y esterilización

Paso 1 .- Descontaminar limpiar y secar todo objeto que se


introducirá en el autoclave para esterilizar
Paso2 .- introducir todos los objetos o medios de cultivos a
esterilizar
Paso 3.- cerrar y esperar a que la presión y temperatura la
llegue autoclave el que hasta tiempo medir empiece
Paso 4.- Se deja por 15 a 20 min. A 121°c
Paso 5.- Terminado el proceso de esterilización, deja de funcionar la
resistencia calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presión
y temperatura empieza a bajar.
Paso 6.- abrir y sacar cuidadosamente con guantes
(especialmente para agarrar cosas calientes) , una vez sacado
los objetos utensilios o medios de cultivo se lo deja enfriar y
se lo enjuaga con agua destilada. Para q termine
completamente limpio y libre de bacterias.
4.2. MEDIOS DE CULTIVO :

4.2.1. Se dejó enfriar el matraz por unos minutos ya que estaba


muy caliente, lo siguiente fue abrir con el dedo anular el
tapón para no contaminarlo después tuvimos que echar el
“Caldo Nutritivo” a la placa Petri, la placa Petri se agarra con
la mano izquierda abrir y empezar a echar cuidadosamente,
a 10 cm de el mechero para q se esterilice y no se
contamine la sustancia, cerrar la especie de tapa de la placa
Petri y poner cuidadosamente a la mesa de trabajo.

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4.2.2. El siguiente punto fue cultivar en la placa Petri una muestra


ya sea , de la lengua , la piel, el cuero cabelludo, los
oídos,encías,dientes, usando el asa de platino, y se repite y
poniendo al fuego del mechero y esperar a que se ponga al
rojo vivo y esperar a que enfrié, se esparce una muestra.
Se divide generalmente en 4 partes. Se esparce la muestra
en un sector de la placa y se esteriliza el ansa.
V. OBSERVACIONES Y RESULTADOS

 Tener más orden al momento de hacer la práctica, y un poco de


silencio ya que se necesita paciencia y concentración para no causar
ningún daño material.

 Tuvimos resultados positivos, ya que cuando pusimos en práctica, la


mayoría de estudiantes aprendió rápidamente.

 No nos alcanzó tiempo para verificar la multiplicación de


microorganismos.

VI. CONCLUSIONES

 Que todos los alumnos tengan conocimiento y familiarización con los


instrumentos de laboratorio, utensilios.

 El autoclave es esencial para la esterilización de utensilios, muestras


de laboratorio, ya que evita que el ambiente este menos contaminado
y más seguro.

 Los procedimientos que llegamos a ver y a ponerlo en práctica son


muy importantes ya que es la base para los demás temas que vienen
adelante, para ser más cuidadosos y tener precaución y mas
expectativas,

VII. RECOMENDACIONES

 Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizados


 Se deben utilizar con precaución, ya que se debe evitar el contacto
con organismos biológicos, en caso de trabajar con ellos.
 Utilizar implemento de protección antes de trabajar con organismos
biológicos.

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Placas Petri con residuos
contaminados

1. Mechero
2. Matraz
3. Asa bacteriológica
AUTOCLAVE PARA ESTERILIZAR
MEDIOS DE CULTIVO
MECHERO BUNSEN

MATRAZ ERLENMEYER

PLACA PETRI, CON MUESTRAS QUE


HICIMOS EN LABORATORIO