INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

BIOQUIMICA GENERAL
Nombres: Cove Pallares Luis Antonio Grupo: 3IV1
Sección: 3

“Efecto del pH y de la concentración de la enzima sobre la velocidad de

reacción enzimática”

OBJETIVOS:
 Demostrar que la velocidad de la reacción enzimática es directamente
proporcional a la concentración de la enzima.
 Analizar la importancia del pH del medio sobre la velocidad de la reacción así
como su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del sustrato.

RESULTADOS:

Tubo No. 1 2 3 4 5 6
Absorbencia 0.145 0.228 0.575 0.294 0.285 0.122

Azúcar 1.60 2.8 7.20 3.50 3.40 1.40

reductor
(µmoles)
Velocidad 0.16 0.28 0.72 0.350 0.340 0.140
(U.I.)
Concentración 3 4 4.5 5 5.5 6
de la enzima
(molar)
Tabla 1. Efecto del pH sobre la velocidad de reacción

Efecto de la concentración de enzima sobre la velocidad de reacción enzimática

I. De acuerdo con los resultados de la Tabla 1 (Absorbancia) y a partir de la Curva tipo de

azucares reductores se procede interpolar los valores de absorbancia obtenidos para
así conocer la concentración de azúcar reductor.

0.9
0.778
0.8
0.7 0.649

0.6
Absorbancia

0.5
0.4 0.342
0.3
0.2 0.145
0.082
0.1
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Concentración μoles/2 mL
 II. Obteniendo estos datos se calcula Vo a partir de:

[𝐴𝑅]
𝑉𝑜 =
(10)

Donde:
Vo= Velocidad enzimática
[𝐴𝑅]=Concentracion de azúcar reductor.

[1.6]
𝑉𝑜 1 = (10)
=0.16 U.I

[2.8]
𝑉𝑜 2 = (10)
=0.28 U.I

[7.2]
𝑉𝑜 3 = (10)
=0.72 U.I

[3.5]
𝑉𝑜 4 = (10)
=0.35 U.I

[3.4]
𝑉𝑜 5 = (10)
=0.34 U.I

[1.4]
𝑉𝑜 6 = (10)
=0.14 U.I

III) Obteniendo los valores de Vo, se realiza una gráfica de la Vo (U.I) vs pH.

0.8 0.72
0.7
0.6
0.5
Vo (U.I)

0.4 0.35 0.34

0.28
0.3
0.16 0.14
0.2
0.1
0
0 1 2 3 4 5 6 7
pH

Grafica 1. Velocidad (U.I) vs pH

Tubo No. 1 2 3 4 5
Absorbencia 0.164 0.348 0.379 0.690 0.589

Azúcar 1.9 4.3 4.8 8.8 7.4

reductor
(µmoles)
Velocidad
(U.I.)
Concentración
de la enzima
(molar)

Tabla 2. Efecto de la concentración de enzima sobre la velocidad de reacción enzimática

 se obtuvo la velocidad máxima de la
reacción, también es evidente que
la velocidad no va en aumento
proporcionalmente con el pH y que
al llegar al punto más alto comienza
a disminuir muy rápido la velocidad,
esto se debe a que a niveles de pH
muy ácidos o muy básicos se
modifica el estado de protonacion
de los residuos de aminoácidos de
la enzima perdiendo de esta
manera las fuerzas que le
proporcionan una estructura
terciaria.

Nuestro pH optimo experimental fue

de 5.5 mientras que el teórico va de
4.5 a 5 esta variación se puede
deber como se había mencionado
antes aun mal desarrollo de la
técnica, a la pureza de los reactivos,
el desarrollo de la enzima.

Es importante mencionar que el

regulador empleado para el
desarrollo experimental no fue el
mismo en todos los tubos, ya que
un regulador también tiene un rango
DISCUSIÓN: de pH en el que funciona
En la gráfica obtenida con los datos adecuadamente y fuera de este ya
experimentales de la velocidad de no actúa de manera apropiada.
reacción contra la concentración de
la enzima nos podemos dar cuenta Conclusión:
que la relación entre ambos factores La relación existente entre la
es proporcional, aunque el ultimo velocidad de la reacción y la
punta haya tenido una velocidad concentración de la enzima es
muy alta; lo que se podría proporcional, a mayor
interpretar como una incorrecta concentración de la enzima
medición de los reactivos o un mal aumenta la velocidad siempre que
desarrollo de la técnica. el sustrato se mantenga constante.

En la gráfica de velocidad de El pH aumenta la velocidad de

reacción contra pH podemos reacción, debido a que cada enzima
apreciar claramente que el pH tiene un pH optimo en el que
optimo obtenido para esta enzima reacciona más rápido con el
es próximo a 5.5 ya que a este pH sustrato, cuando se encuentra fuera
de este rango de pH la enzima
pierde sus fuerzas intermoleculares
debido a la protonacion o bioquímica 6ta edición, España:
desprotonacion de los residuos de
aminoácidos presentes en su
cadena, lo que cambia su estructura
y le hace perder su mecanismo de
acción contra el sustrato, cabe
mencionar que el cambio en el pH
también puede afectar a el sustrato.
BIBLIOGRAFÍA:
Lehninger D., (2015), Principios de
Ediciones Omega, pg. 212-213
Dergal B., (2008), Química de los
alimentos, México: Cengage
learning, pg. 310-314
Tabla 2. Efecto del pH sobre la velocidad de reacción de la β-fructofuranosidasa