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“Producción de semilla para el cultivo de

hongos comestibles”

PRESENTADO POR:
ING. ABDIEL ADRIÁZOLA MURIEL

1 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
QUÉ ES LA MICOLOGÍA?
La Micología es la rama de la Biología que tiene por objetivo el
estudio de los hongos.

Etimológicamente deriva del griego

Mykes= seta logos=discurso

Hongos macroscópicos....

2 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
El micelio

3 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
4 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Antecedentes

5 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Sullus Lupeus y crecen de forma natural en los
bosques de pino en el municipio Alalay.

Un productor muestra los champiñones,


luego de la cosecha en la localidad de
Yana Rumi del municipio C’uchumuela en
Villa Rivero.

6 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Generalidades de las setas

7 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Ciclo esquemático de reproducción de
las setas

8 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Diagrama resumen de técnicas
generales para el cultivo de setas

9 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Factores necesarios para el crecimiento de un
hongo

10 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Medios artificiales de cultivo en
laboratorio

11 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Técnicas para el cultivo puro
Técnicas para el aislamiento por
medio de esporas

Técnicas para el aislamiento por


medio de tejido

12 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Clases principales de micelio
Micelio
rizomórfico

Micelio
algodonoso

Micelio
lineal

13 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Multiplicación de micelio para comercializar 


Micelio compacto en frascos


de vidrio.

Instalaciones de
SYLVAN.

14 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Multiplicación de micelio para comercializar 


Instalaciones de
SYLVAN.

15 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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CAPÍTULO III

Materiales y Métodos
Esquema del método
de cultivo y sus etapas

16 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas
a) Colecta del campo
Considerando las
recomendaciones dadas por
López (2006).

17 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas
b) Identificación de la seta

Todos los hongos


son comestibles;
algunos, sólo una
vez.
Proverbio croata

18 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas
Dado que no se cuenta con
más referencia acerca del
hongo, se procede a su
identificación siguiendo los
pasos secuenciales brindados
por (Guzmán G. , 1990).
.

19 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas
Agrocybe aegerita, hongo del
sauce. Se cultiva a baja
escala en la región
mediterránea y se ha
experimentado en la India.
Parasita los sauces (Guzmán
et al., 1993).

20 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas 


e) Aislamiento por medio de esporas

• García (1998)
• Gaitan et al.
(2006)
• Estario (1999)
• SABOURAUD

21 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas 


• García (1998)

Sin crecimiento

• Gaitan et al.
(2006)

• Stamets & Chilton


(1983)

Sin crecimiento

22 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas 


• Estario (1999)

En el medio Honey LC
Tek se obtuvo un
buen crecimiento
entre los 5 a 7 días
con la apariencia de
un algodón sumergido

• SABOURAUD

Sin crecimiento

23 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas 


24 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas
d) Aislamiento por medio de tejido

Para uniformizar los


procedimientos, se hace
uso de un solo medio de
cultivo (PDA), para la
obtención de la cepa.

25 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 1 

Obtención de cepas

26 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2 

Propagación en médios de cultivo artificiales 

• POTATO
DEXTROSA
AGAR
• SABOUROUD
• EXTRACTO DE
MALTA AGAR

27 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2 

Propagación en medios de cultivo artificiales 

Crecimiento
micelial en
diferentes
sustratos

28 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2 

Crecimiento diametral (mm) del micelio en diferentes medios
de cultivo

Sustrato Día 0 Día 2 Día 3 Día 6 Día 7 Día 8 Día 11 Día 14 Día 15

EMA 5,0 10,8 16,8 37,0 46,2 54,0 70,6 77,2 85,5

PDA 5,0 11,3 17,5 36,0 44,3 50,8 64,1 77,3 84,0

SABOURAUD 5,0 8,9 13,8 28,8 34,4 38,8 50,6 60,5 66,3

29 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2 

Cuadro de ANVA

Fuente DF Suma de Cuadrado de Valor F Pr > F


Cuadrados Media

Modelo 26 95507.88076 3673.38003 1430.94 <0.0001

sustrato 2 3478.12086 1739.06043 677.44 <0.0001

tiempo 8 88613.26167 11076.65771 4314.85 <0.0001

sustrato*tiempo 16 1606.47237 100.40452 39.11 <0.0001

Error 117 300.35083 2.56710

Total corregido 143 95808.23160

30 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2 


Sustrato Diámetro LSMEAN LSMEAN NÚMEROS Mínimos


EMA 44.8296296 1 cuadrados
medios del
PDA 43.3444444 2
factor
SABOUROUD 34.1537037 3 sustrato

Parámetro Standard Estimate Error Valor t Pr > t Contraste de


medias del
EEMA-EPDA 1.48518519 0.34474233 4.31 <0.0001
factor
EPDA-
9.19074074 0.34474233 26,66 <0.0001 sustrato
ESABOUROUD
"EMA-PDA" y
"PDA-
SABOUROUD"

31 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2
MEDIO ECUACIÓN (arreglo lineal) R2
Ecuaciones
EMA y = 5,6061x + 3,7179 0,98156 de
crecimiento
PDA y = 5,4208x + 3,5922 0,99289
micelial con
SABOUROUD y = 4,2254x + 3,1674 0,99353 arreglo
lineal.

MEDIO
ECUACIÓN (arreglo
R2 Ecuaciones
exponencial)
de
EMA y = 8,9823e0,175x 0,8611 crecimiento
micelial con
PDA y = 9,0553e0,1712x 0,8686
arreglo
SABOUROUD y = 7,7734e0,1629x 0,89102 exponencial

32 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 2 

Crecimiento micelial según los medios de cultivo EMA, PDA Y
SABOUROUD. 


33 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Obtención de semilla

• TRIGO 1
• TRIGO 2
• SORGO
• CEBADA
• AVENA

34 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Análisis de humedad de granos secos de cereales
Cereal Humedad %

TRIGO1 11,31

TRIGO2 10,42

SORGO 11,52

AVENA 8,57

CEBADA 9,38

35 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Análisis de humedad de granos de cereales hidratados por inmersión
(CAPN).


Cereal Humedad %

TRIGO1 41,55

TRIGO2 39,41

SORGO 33,73

AVENA 50,20

CEBADA 39,70

Gaitan et al. (2006)


Garcia (1998) —> Humedad 40-50%

36 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Análisis de humedad de granos de cereales hidratados por inmersión
(CAPN).


Cereal Humedad %

TRIGO1 51,32

TRIGO2 47,17

SORGO 51,57

AVENA 48,40

CEBADA 51,59

Stamets & Chilton (1983) —> Humedad 49-54%

37 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Crecimiento micelial en diferentes cereales en tubos de ensayo. 


Gaitan et al. (2006)

38 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Crecimiento micelial en diferentes cereales en frascos de vidrio. 


Gaitan et al. (2006)

39 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 3

Granos de sorgo colonizados completamente 


1. SORGO
2. TRIGO 1
3. TRIGO 2
4. CEBADA
5. AVENA

40 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


41 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


42 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


43 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


44 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


45 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


46 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


47 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


48 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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ETAPA 4

Cultivo (ensayos de producción de setas comestibles)


49 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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DISCUCIÓN
• El método de aislamiento por tejido (García, 1998) fue mas eficaz
respecto al aislamiento por esporas.
• Recurrir a métodos artesanales para lograr conseguir la germinación
de esporas (honey tek) (Estario, 1999).
• Contrario a lo dicho por Suárez (2010), se observó que no existía
ninguna señal de contaminación.
• García (1998), recomienda como desinfectante al isopropanol, el uso
de una solución hidroalcohólica al 70% recomendada por Gaitan et al.
(2006), funcionó eficazmente.
• Al no disponerse de una cámara de flujo laminar recomendada por
todos los autores, se hizo uso de tres mecheros
• A pesar de que los autores citaban al PDA por encima del EMA como
mejor medio de cultivo para la propagación del micelio (Suárez, 2010)
en el presente trabajo fue el EMA.
• El micelio detiene su crecimiento al no alcanzarse las humedades
recomendadas (Stamets & Chilton, 1983), y los procedimientos
convencionales de remojo citados por Gaitan et al. (2006), no
garantizan que se alcancen los niveles de humedad necesarios

50 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
DISCUCIÓN
• Las técnica de cera fundida para evitar que los escarabajos y otros
insectos se coman el micelio (Stamets, 2005) fueron corroboradas,
  tal situación no se observa en los troncos de trinchera (Alberto,
2008).
• En el cultivo de setas imitando los procesos llevados a cabo en la
naturaleza, el riesgo de fracaso es muy grande como indica García
(1998).
• Las metodologías estandarizadas presentadas en este trabajo tienen
muchas ventajas, una de las mas importantes es el bajo índice de
contaminación por otros microorganismos. Así también son fáciles de
aplicar, reproducibles y con una alta probabilidad de éxito, lo cual
supone que el aislamiento del micelio es satisfactorio al igual que el
micelio aislado.

51 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
CONCLUSIONES
 
◆ Se concluye que el ejemplar colectado para la realización de este
trabajo es una Agrocybe aegerita.
◆ Los métodos tradicionales de aislamiento por esporas no dieron
resultados satisfactorios, recurriendo a medios artesanales (Medio
Honey LC Tek) con resultados eficaces, aunque el micelio aislado a
partir de esporas no alcanzo las expectativas deseadas. Al contrario
del micelio rizomorfo aislado por siembra directa de cuerpos
fructíferos, siendo este el mejor método para la obtención de
micelio rizomorfo, libre de contaminación y abundante.

52 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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CONCLUSIONES
 
◆ El medio de propagación más óptimo, con un mejor crecimiento del
hongo estudiados es Extracto de Malta Agar EMA, le sigue PDA y
Sabouraud. El mejor sustrato de los 5 evaluados (TRIGO1,TRIGO2,
SORGO, AVENA, CEBADA) para la producción de semilla (spawn) para
esta especie en particular fue el sorgo, seguido del TRIGO1 y 2 y la
CEBADA, no se observo crecimiento en la AVENA ya que esta no
alcanzo la humedad adecuada.
◆ Los ensayos de producción se extendieron desde el laboratorio hasta
los cultivos exteriores estacionales, en todos hubo un vigoroso
crecimiento micelial al inicio, que luego declino ante la falta de
humedad, la contaminación por bacterias y mohos, y el ataque de
insectos que devoraron el micelio.
 

53 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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CONCLUSIONES
◆ A pesar de que no se contaba con setas cultivadas para realizar los
ensayos de aceptabilidad; durante las etapas iniciales del trabajo, se
contaba con setas colectadas para el aislamiento, estas fueron
preparadas en guiso para el deguste de los miembros del laboratorio
los que dieron su aceptabilidad en un 100 % a la seta.
◆ El presente trabajo aporta un sistema de producción continuo de
micelio, para el cultivo masivo, así como la de construcción de mini
cámaras de cultivo en laboratorio, construidas con insumos locales,
de bajo costo y probadas “in situ”.

54 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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RECOMENDACIONES
➢ Es importante tener en cuenta las condiciones de
contaminación de los cultivos, ya que un alto índice de
contaminación hace que el aislamiento sea un procedimiento
más difícil de lograr.
➢ Es importante desinfectar y limpiar los sitios de trabajo para
evitar contaminaciones ambientales indeseadas.
➢ Disponer de sistemas de medición de CO2

55 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
RECOMENDACIONES
➢ El medio de cultivo recomendado para realizar todos los
procedimientos es el EMA, sin embargo, se podrían hacer
estudios posteriores con un medio “casero”, ya que no todos
los cultivadores tienen las posibilidades de comprar los medios
de cultivo comerciales.
➢ Es imprescindible en el caso de la siembra en sustratos para la
producción de cuerpos fructíferos, un cuarto de siembra que
reúna todas las condiciones necesarias para reducir el riesgo
de contaminación del sustrato. De igual manera ya que a
quedado demostrado el alto riesgo de fracaso al dejar los
sustratos expuestos a las condiciones naturales, contar con un
cuarto de cultivo que cuente con los indicadores y
controladores de ventilación, CO2, humedad, temperatura, luz
y que proporcione la protección adecuada a los medios
colonizados y por colonizar.

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Principales setas cultivadas
Agaricus
bisporus
(champiñon
común)

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Principales setas cultivadas
Pleurotus
ostreatus
(setas ostras)

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Principales setas cultivadas
Pleurotus
cornucopiae

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Principales setas cultivadas
Pleurotus
cystidiosus

60 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Principales setas cultivadas
Pleurotus
pulmonarius

61 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Principales setas cultivadas
Pleurotus
djamor

62 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Principales setas cultivadas
Pleurotus
eryngii

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Principales setas cultivadas
Flammulina
velutipes

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Principales setas cultivadas
Stropharia
rugoso-
annulata

65 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Principales setas cultivadas
Coprinus
comatus

66 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


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Principales setas cultivadas
Agrocybe
aegerita

67 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Principales setas cultivadas
Auricularia
auricula-
judae

68 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Principales setas cultivadas
Ganoderma
lucidum

69 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Principales setas cultivadas
Lentinus
edodes

70 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Principales setas cultivadas
Volvariella
volvacea

71 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Principales setas cultivadas
Agaricus
blazei

72 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Trufas

73 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Tizón de maíz

74 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Producción de quesos
Modificación de sabores
(Penicillium roqueforti)

Modificación de textura
(Penicillium camemberti)

75 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Comidas orientales fermentadas
Tempeh kederle, Indonesia
(Rhizopus olygosporus)

Idli, Sur de la India


(Trichosporium pullulan)

76 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Comidas orientales fermentadas
Ang-kak, china y Filipinas
(Monascus purpureus)

77 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Industria de bebidas alcohólicas
Vinos y Cerveza

78 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS


INDUSTRIAS ALIMENTARIAS 02/09/17
Gracias por su
atención…
79 1º ENCUENTRO DE ESTUDIANTES Y PROFESIONALES DE LAS
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