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LINEA LIQUIDA

Colestat
C enzimático AA
Método enzimático para la determinación de coleste-
rol en suero o plasma

SIGNIFICACION CLINICA Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad acuerdo a la normativa local vigente.
diagnóstica limitada. Sin embargo, su concentración varía
de manera más o menos predecible en un gran número de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno ALMACENAMIENTO
de los factores contribuyentes a la formación de ateromas Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
en individuos hipercolesterolémicos. tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar
además, que el riesgo de contraer enfermedad cardíaca INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
coronaria (ECC) para los individuos varones de más de 40 REACTIVOS
años con colesterolemia menor o igual a 2,10 g/l es 3 veces Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces deterioro de los reactivos. En tal caso desechar.
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l.
MUESTRA
FUNDAMENTOS DEL METODO Suero o plasma
La secuencia reaccional es la siguiente: a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
b)  Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
CHE
ésteres del colesterol olesterol + ácidos grasos plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
anticoagulante para su obtención.
CHOD
colesterol + O2 colesten-3-ona + H2O2 c) Sustancias interferentes conocidas:
- Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfie-
POD ren en la determinación.
H2O2 + 4-AF + aceptor quinonimina roja
- Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores
falsamente aumentados por lo que no deben ser usados.
REACTIVOS PROVISTOS
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 80 mg/l,
S. Standard*: solución de colesterol 2 g/l.
ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l,
A. Reactivo A: solución conteniendo colesterol esterasa
ni hemólisis ligera.
(CHE), colesterol oxidasa (CHOD), peroxidasa (POD), 4-ami-
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
nofenazona (4-AF) y buffer Good, conteniendo fenol y colato
drogas en el presente método.
de sodio, en las siguientes concentraciones: d)  Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
CHE........................................................................ ≥100 U/l colesterol en suero es estable por lo menos 1 semana
CHOD.................................................................... ≥ 100 U/l en refrigerador y 2 meses en congelador, sin agregado de
POD..................................................................... ≥ 1000 U/l conservantes.
4-AF..................................................................... 0,2 mmol/l
Good..................................................................... 50 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Fenol.................................................................... 15 mmol/l - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Colato de sodio................................................... 0,2 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua a 37oC.
Calibrador A plus de Wiener lab. - Reloj o timer.

INSTRUCCIONES PARA SU USO CONDICIONES DE REACCION
Reactivos Provistos: listos para usar. - Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en foto­
co­lo­rímetro con filtro verde (490-530 nm).
PRECAUCIONES - Temperatura de reacción: 37oC
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Tiempo de reacción: 5 minutos
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Volumen de muestra: 10 ul
de trabajo en el laboratorio de química clínica. - Volumen de Reactivo A: 1 ml

* No provisto en todas las presentaciones 864121022 / 01 p. 1/9

00 g/l . con cada determinación. C. se obtuvo: En tres tubos o cubetas espec­trofo­tométricas marcadas Nivel D.C.F. et al. L.Expert Panel of National Cholesterol Education Program - LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO JAMA 285/19:2486 (2001). CONVERSION DE UNIDADES .39 g/l and coronary heart disease . 2001.0063 g/l..2 x 500 ml (Cód. plicando el resultado final por 2.Trinder. HDL Colesterol FT y LDL-Colesterol Reactivo Precipitante METODO DE CONTROL DE CALIDAD (provistos separadamente por Wiener lab.00 g/l PRESENTACION colesterol (g/l) = D x f donde f = . Para la calibra- la absorbancia debe ser leída dentro de este lapso. B (Blanco). .40 g/l .4 x 100 ml (Cód. colesterol (g/l) = colesterol (mg/dl) x 0.Acta Bioq. Chem. S (Standard) y D (Desconocido). 1220222).American Health Foundation . densidad (LDL-colesterol). Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras AACC Press.: 20 ul de Muestra + 2 ml de Reactivo A).L. . sus propios intervalos o valores de referencia. 20:470 (1974). a temperatura ambiente (25oC). Clin. et al.pág.- Volumen final de reacción: 1. gram (NCEP) provee los siguientes valores de colesterol: . b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de co- lesterol a distintos sueros..C. Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado. . dada por el disolvente empleado en su preparación.01 . Se recomienda realizar una recalibración semanal o cada 864121022 / 01 p.49 % B S D 3. Deseable: < 2. por lo que Manual del Usuario del Analizador en uso.001 D. S .I. . Para una lectura de 0. 2/9 .043 g/l 3."Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests".S. Clin. 6/24 (1969). 255 (1972). PERFORMANCE a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas PROCEDIMIENTO muestras en 10 días diferentes. 1009308). los controles (Standatrol S-E 2 niveles). . No emplear el Standard en analizador automático debido a la distinta tensión superficial con respecto al suero. Biol.12 x 50 ml (Cód.90 y 4. . . No obstante. se obtuvo una recuperación entre Muestra - - 10 ul 98 y 101%. C.39 junto con HDL-Colesterol Reactivo Precipitante. Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. metales pesados y cianuros son inhibidores enzimáticos. que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los Blancos.Position statement on diet Moderadamente alto: 2. se recomienda que cada laboratorio establezca .79 g/l. Biochem.V. diluir 1:2 con el Blanco y repetir la lectura multi- llevando el aparato a cero con el Blanco.Coniglio R.Ann. Para valores a 505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm).24 g/l ± 0. CALCULO DE LOS RESULTADOS 2.Allain.01 ml vez que se obtengan valores fuera del rango aceptable de Los volúmenes de Muestra y Reactivo A pueden variarse pro.S. Latinoam.2.Clin. porcionalmente (Ej. para todo nivel de colesterol entre 1. 1009253). superiores. ción debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab. .00 . colesterol (mmol/l) = colesterol (g/l) x 2. colocar: 1.115 g/l 3. 1220114). Leer en espectrofotómetro d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l. D.31 g/l ± 0. Acta 87/3:459 F (1978). Chim. Elevado: ≥ 2.Abell. . .Clin.C. . 1009610).J. PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL Para las instrucciones de programación debe consultarse el El color de reacción final es estable 30 minutos.I.Young. el cambio mínimo de con- Incubar 5 minutos en baño de agua a 37 C o 20 minutos o centración detectable será aproximadamente de 0. 195:357 (1952).6 x 60 ml (Cód.. VALORES DE REFERENCIA BIBLIOGRAFIA El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro. Los detergentes.59 Empleando los reactivos Colestat enzimático AA líquida colesterol (g/l) = colesterol (mmol/l) x 0.48 % Standard - 10 ul . 4th ed.O. Chem.) es posible Procesar 2 niveles de un material de control de calidad determinar el colesterol ligado a las lipoproteínas de alta (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas densidad (HDL-colesterol) y a las lipoproteínas de baja de colesterol.6 x 60 ml (Cód. P.. de acuerdo a los requerimientos del analizador. XXIII/2:201 (1989).

Nº: 7795/98-44/02 2000 Rosario .N. http://www. Cétola Bioquímica Producto Autorizado A. Contenido c Control Negativo g Número de lote h Número de catálogo M Wiener Laboratorios S. 3/9 UR120830 .C.A. Riobamba 2944 2000 .wiener-lab.: Viviana E. Disp.I. Téc. Calibrador b Control F Riesgo biológico Volumen después de la reconstitución b Control Positivo Cont.Argentina Wiener lab.Símbolos Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.M. C Este producto cumple con los requerimientos previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro" M Elaborado por: P Xn Representante autorizado en la Comunidad Europea Nocivo V Uso diagnóstico "in vitro" Corrosivo / Caústico X Contenido suficiente para <n> ensayos Xi Irritante H Fecha de caducidad i Consultar instrucciones de uso l Límite de temperatura (conservar a)  No congelar Calibr.Argentina 864121022 / 01 p.ar Dir.Rosario .com.T.A.