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proceso y presentación antigénica

INMUNOLOGIA BASICA
Dra. Esthela Loyo de López

Sociedad de Lupus, Reumatología y Autoinmunidad en República Dominicana, Inc.
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Friday, September 24, 2010

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tipos diferentes de APC’s
Casi toda célula nucleada exhibe constitutivamente en la superficie moléculas MHC Clase I, que unen péptidos derivados de proteínas intracelulares.VIA DE PRESENTACION MHC Clase 1 CLASICA Supervisión de TCD8+ del contenido intracelular, identificar y eliminar células infectadas por virus o patógenos intracelulares y quizás tumores

MHC Clase II y CD1 presentan péptidos y lípidos derivados de la captura de Ag exógenos a TCD4+ y NK. MHC Clase II y CD1 se expresan principalmente en un subgrupo limitado de células llamadas APCs profesionales (pAPCs), que en diversos grados están implicadas en la presentación inicial de Ag a linfos T naîves.

pAPCs incluyen linfocitos B, macrófagos (Mø) y en especial células dendríticas (DCs)

pAPCs también pueden presentar péptidos derivados de Ag exógenos en moléculas MHC Clase 1 y activar TCD8+ naîves e impulsar una respuesta primaria por un proceso llamado de PRESENTACION CRUZADA. Difieren en nivel de expresión de moléculas co-estimulatorias y liberan citoquinas para activación de linfocitos T naíves.

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Linfos B poseen capacidad muy limitada para internalizar Ag porque no exhiben gran endocitosis (vg partículas grandes), son pobres presentadoras de microorganismos invasores. Sin embargo unen e internalizan con eficiencia Ag solubles que captan con sus BCR específicos. Expresan gran cantidad de MHC Clase II y co-estimuladoras, son muy eficientes para presentar sus Ag conocidos, generan complejos péptidos:Clase II presentados a TCD4+ Células dendríticas juegan rol principal para pulsar RI mediadas por linfocitos T. Su eficiencia deriva de localización tisular, alta capacidad endocítica, migración en respuesta a inflamación, alto nivel de superficie de MHC y co’s, y también gran capacidad de regular estas funciones a medida de su desarrollo. CDs inmaduras residen en tejidos periféricos, como centinelas, capturando amplio espectro de Ag por mecanismos diversos. Igual que Mø, tienen gran capacidad para múltiples formas de endocitosis. CDs inmaduras son pobres presentadoras, pero acumulan moléculas MHC Clase II en lisosomas junto con partículas Ag intactas internalizadas. Al recibir estúmulo inflamatorio, CDs periféricas comienzan a madurar y migrar hacia órganos linfoides secundarios, donde presentan Ag procesados a linfos T. La maduración de CD se acompaña de reorganización estructural dramática, adquieren capacidad de procesar lo capturado, cargar péptidos inmunógenos a MHC Clase II y transferir selectivamente estos complejos desde lisosomas hacia membrana plasmática junto con moléculas co’s. Pero no todas las maduras tienen equivalencia funcional. Estímulos diferentes producen CDs maduras diferentes con capacidad diferente de inducir T...
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Mø exhiben gran endocitosis y capturan espectro amplio de Ag mediante endocitosis de fase fluida, endocitosis mediada por receptores (vg FcgR, lectinas manosas) y fagocitosis de grandes partículas. Pero Mø expresan bajo nivel de MHC Clase II y co-estimuladoras. Al activarse, elevan la expresión (upregulate) de MHC Clase II y coʼes, pero no alcanza al de linfos B y DCs. Gran capacidad de digestión lisosomal, mientras que B y CDs no. Permite rápida depuración de Ag capturados pero puede limitar la generación de Ag peptídicos y afectar su presentación, por tanto su papel es subóptimo para eficiente presentación.

Actividad antimicrobiana y citoóoxica por mediadores, formas reactivas de oxígeno.

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¿EN QUE CONSISTE MHC?

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MHC es una colección de genes situados en una tira continua de DNA en el cromosoma 6 en humanos, y en el cromosoma 17 en el ratón. MHC constituye el Complejo HLA en humanos, Complejo H-2 en ratones (murino)

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La mayoría de péptidos Ag (70%) derivan de polipéptidos recién sintetizados. Consisten de productos de terminación prematura o proteínas mal ensambladas, llamados productos ribosomales defectuosos (DRIPs). La presentación en MHC Clase 1 parece depender de la tasa de translación ptroteica más que de la tasa de descomposición de la cantidad total de proteína. Esto favorece la rápida y temprana presentación de Ag virales recién sintetizados en una infección viral reciente.
28 subunidades en 4 anillos heptaméricos

2 a 25 AAs

Además de productos convencionales, otra pequeña fracción deriva de productos de translación crípticos (intrones, uniones intrón/exón, regiones no translacionadas, pedazos de lectura alterna) IFN-g incorpora subunidades catalíticas nuevas (LMP2, MECL-1 y LMP7) para generar inmunoproteosomas, cambia la especificidad de ruptura y producen residuos para unión preferente a MHC-1
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Tapasina estabiliza TAP y facilita translocación de péptidos al ER, recluta MHC 1 al complejo de carga formando un puente entre TAP:HC-b2m, facilita y optimiza carga de péptidos

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presentación MHC Clase 1, clásica
VIA MHC Clase 1 CLASICA (VIA DEL CITOSOL) Péptidos derivan de varias fuentes endógenas. Polipéptidos ubiquitinados se degradan en proteosomas del citosol, los péptidos resultantes se translocan al ER por transportadores asociados, son más definidos por aminopeptidasas ER (ERAAP). La cadena pesada de MHC -1 recién sintetizada, llevada por su chaperona calnexina, quien asiste en doblarse y unirse a b2-microglobulina en ER. Este complejo se incorpora a TAP:tapasina:calreticulina:ERp57:proteína disulfido isomerasa (PDI). El complejo de carga favorece la unión MHC 1:b2m a péptidos de alta afinidad y facilita su estabilidad. Los complejos así cargados abandonan ER y son transportados por Golgi hacia la membrana.

Trombetta ES, et al. Annu Rev Immunol 2005; 23:975

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presentación cruzada: Ag exógenos por MHC Clase 1
Linfos B pueden hacer esto. Otro mecanismo reciente sugiere que este tipo de presentación no estaría limitado a pAPCs: transferencia de péptidos en uniones gap del citosol de una célula directo al citosol de céllas vecinas, espectadoras inocentes o bien pAPCs. Cualquier forma Ag (soluble, partícula, agregada, asociada a células, bacteriana, protozoaria) puede presentarse cruzadamente. Pero en condiciones fisiológicas, es posible que la mayoría provengan de Ag asociados a células capturados por fagocitosis. Vía independiente de proteosoma y TAP Vía dependiente de proteosoma y TAP

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Vía endocítica para moléculas MHC Clase II
Moléculas MHC II típicamente se asocian a péptidos derivados de proteínas exógenas internalizadas por APCs. Linfos B internalizan Ag de un solo tipo por BCR, pero también expresan FcgR que en principio favorecen captura de complejos inmunes. Mø y DCs inmaduras son ávidas para endocitar e internalizar amplia gama de Ag: diferentes tipos de Ag se internalizan por rutas diferentes, lo que determinará a qué organelos intracelulares lleguen, y que a su vez afectará su procesamiento y carga a moléculas MHC II.

Endocitosis cae en dos categorías: fagocitosis (partículas grandes) y pinocitosis (líquidos).

MHC II también puede presentar péptidos derivados de proteínas endógenas: autofagia (macro y por chaperonas).

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moléculas MHC no clásicas
CLIP = MHC IIassociated invariant chain peptide

(li)

li:MHC II en Golgi al ER

Acidificación de endosomas/lisosomas induce activación inespecífica de muchas proteasas (catepsinas, vg), lo cual favorece remoción de la cadena li, procesamiento del Ag y carga del péptido en MHC II.

HLA-DM asociado al complejo induce cambio conformacional de la hendidura MHC II y disminuye afinidad para CLIP, lo cual produce disociación. HLA-DM cataliza disociación de cualquier péptido y favorece presentación HLA-DO en B y DCs. En B humanas inhibe actividad DM, pero luego de internalizar Ag mediante BCR, DO promueve presentación mientras inhibe de otro origen

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Vía del citosol, proteínas endógenas Vía endocítica, proteínas exógenas

Klein, J. et al. N Engl J Med 2000;343:702-709

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2.2.2.2

Klein, J. et al. N Engl J Med 2000;343:702-709

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¿y qué con lípidos?

Presentación CD1

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TRENDS in Immunology Vol.27 No.10 Mechanisms of lipid-antigen generation and presentation to T cells.
TRENDS in Immunology (2006), 27:485-492

Review

Moléculas CD1 unen y presentan Ag lipídicos. Hay cinco isoformas identificadas, dos clases: (1 grupo) CD1a y CD1c presenta Ag lipídicos bacterianos a linfos Tab convencionales.

molecules traffic inpresenta Ag de origen lipídico (2 grupo) CD1d different endosomal compartments. CD1a recycles through early endosomes (EE) and does not rea . CD1buna población especializada deendosomes (LE) and lysosomes (Ly) where they localize in the limiting membrane and i a and CD1c internalize in late T, llamada is found throughout EEs and LE–Ly compartments. Lipid-internalizing receptors, such as LDL receptor, CD91 and mannose re linfocito NKT que expresa una cadena pids and delivery to LE–Ly. Bacteria internalized into phagosomes through clathrin-dependent vesicles (symbolized by ‘x’) rele invariante TCRa. us localizing with different CD1 molecules.

CD1e permanece intracelular...¿procesar?

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MTP = microsomal triglyceride transfer protein

Plasma membrane

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ER

Golgi

TGN

Late endosome/MIIC

d

Lipid antigen

MTP

c

a

Microorganism CD1a
Plasma membrane

a
LTP

cathepsin L86, which might be involved in prosaposin Recognition of lipid antigens by T cells crucial contribution to maturation87. Furthermore, aRev Immunol (2005), 5:485-496 Nat the thymic development of iNKT cells is mediated by inhibitory receptors of the Ly49 family88,89, which reduce the development of CD1d-restricted T cells when they are engaged in the thymus. With regard to iNKT-cell development, several questions remain. Which are the lipid antigens that promote positive and negative selection? Is the lipid Es posible que Ag proteicos y lipídicos, repertoire in the thymus different from that in other REVIEWS asociados a baterias ogoverned by TCR affinity debris celular, se organs? Is thymic selection resembling the selection of la misma ruta. internalicen siguiendo peptide-specific Tccells? β m b Is TCR triggering assisted by co-receptors other than CD1b CD1c Moléculas CD1 se sintetizan en ER, donde se CD4 and CD8?
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? priming of lipid-specific T cells probably occurs in the TGN peripheral lymphoid organs, which is similar to that of REVIEWS CD1 β2m Early Lysosome ER peptide-specific T cells. The most likely candidate cells endosome Early endosome MIIC AP3 ER Figure 5 | Lipid loading on CD1 molecules. a | In the endoplasmic reticulum (ER), CD1d lipid Golgi that prime lipid responses are Late endosome cells, which dendritic β m a b c loading is assisted by the microsomal triglyceride-transfer protein (MTP). MTP facilitates the express all CD1 molecules, including CD1e. After d e CD1a CD1b CD1c plasma membrane expression of CD1d, possibly by contributing to glycosylphosphatidylinositol priming, lipid-specific T cells expand and become CD1d loading and CD1d folding. b,c | In late endosomes, different lipid-transfer proteins (LTPs) Plasma readily detectable, as shown by investigations of membrane participate in lipid editing. LTPs might pull lipids out of the membrane (b) and offer them to mycobacterial lipid-specific responses in human samARF6 hydrolases, or they might directly load or unload CD1 with lipids (c). d | A potential role in Clathrin AP2 ples20,21,90. Furthermore, the expansion of lipid-specific extracting lipids from bacterial cells is proposed. β2m, β2-microglobulin; MIIC, MHC class II coated pit ? T cells occurs in guinea pigs that are immunized with compartment; TGN, trans-Golgi network. Late TGN endosome 91,92 mycobacterial lipids or infected with M. tuberculosis Early Lysosome ER endosome Early endosome MIIC (S. Mariotti, unpublished observations), which conAP3 ER Golgi Late out in have been carriedendosome mice. As mice express only firms that the lipid-specific response is acquired after AP3 CD1e Figure 4 | Intracellular trafficking of response to synthesized CD1 molecules CD1d, iNKT cells have been investigated and no inforpriming. Therefore, a recallCD1 molecules. Newlymycobacterial are transported through the Golgi d e and trans-Golgi network (TGN) to reach the cell surface, with the exception of CD1e, which remains in the cell. Cell surface CD1 CD1d mation is available on the development of T cells that lipids molecules are after infection. The lifespan follows. a | CD1a routes to early recycling endosomes and is seen internalized in clathrin-coated pits and are sorted as and immuback to the plasma membrane in an ADP-ribosylation factor 6 (ARF6)-dependent manner. b | CD1b, after interacting with are restricted by group 1 CD1 molecules. iNKT cells nological characteristics of this endosomes and, population traffics to the lysosomes. c | CD1c, after adaptor protein 2 (AP2), is transported to the late memory after binding to AP3, early endosomes and reaching the sorting preferentially routes to ¿Cómo se procesan develop in the thymus and are subject to positive- and remain to beand thenendosomes,the plasma membrane.the| CD1dendosomes, and to a lesser extent to the late and only partially y cargan en CD1? lysosomes, investigated. recycles to d is transported mainly to the late endosomes the lysosomes. Mouse, but negative-selection processes A, . They exit the thymus Antoimportant issuenot which CD1d this molecule toAP3.latefractioncells shown). e |binds the invariant the is whether lipid-specific T of the mouse Glicosidasas lisosomales (a-galactosidasa 9,68–71b-hexosaminidasa B, a-mannosidasa)(ER),human,escorts associates withglicolípidos, pero toaccumulates inchain redefinen Ag the A endosomes (not CD1d CD1e in the endoplasmic reticulum cells. as CD4 + single-positive or double-negative Late occurGolgi stacks of immaturewherepeptide-specific soluble form.populaas frequently dendriticiscells, andand remains inlateT-cell CD1e never reaches the plasma membrane. as it cleaved routes to the a endosomes and the multivesicular body-enriched compartment los detalles no se conocen bien. in mature dendritic cells, endosome β m, β frequencies MHC class II compartment. CD4+CD8+ double-positive thymocytes express CD1d tions. The -microglobulin; MIIC, of lipid-specific T cells were found CD1 recién cargadas secomprise the cell population that is responsible for to be in the range of 1:2,000–10,000 T cells32,90,93, which por la vía transportan a la superficie de membrana, donde presentan a linfocitos T. Cd1a is and that belong to the ATP-binding cassette family funcOf de recirculación endosómica. CD1b y CD1d escapan de modo desconocido, quizás similar a populations thatbien el is the active transcomparable to those of the outer membrane leaflet port ofimmunological glycolipids out of the infected memory T-cell MHC 11, si relevance iNKT cell thymic selection72, whereas peptide-specific tion as lipid transporters in mycobacterial AP3 T cells regularse de modoCD1e molecules are transported through the Golgi or extracellularly peptide antigens. are mostly selected on stromal cells. Itenmost is DCs recognize defined BOX 2 . Some of these transporters PHAGOSOME. In mycobacteria-infected cells, compotráfico molecular parece of CD1 molecules. Newly synthesized CD1 diferente Figure 4 | Intracellular trafficking lipid cell wall and trans-Golgi network (TGN) to reach the double-positive thymocytesremainsTRANSLOCASE surface CD1 cell surface, with the exception of CD1e, which also in the cell. Cell likelyclathrin-coated pits and are sorted as follows. a | CD1a routes to early recycling endosomes and might regulate the distribution of self and foreignlipid- nents of the mycobacterialand movereach the tubular that the express is an ATPantigens in the luminal leaflet, where the CD1 endocytic compartments to late and then A lipid translocase molecules are internalized in binding subsets. The functional analysis of lipid- , where they encounter CD1 molearly endosomes dependent flippase that Functionaldomains are localized. However, the direct back to the plasma the appropriate lipid repertoire that manner. b | CD1b, after interacting with membrane in an ADP-ribosylation factor 6 (ARF6)-dependent is required for the facilitates the unidirectional ecules. Whether export from the phagosome to other adaptor after binding to AP3, CD1c, Friday, September 24, 2010 protein 2 (AP2), is transported to the late endosomes and,cells73. Many traffics to the lysosomes. c |from one after involvement of these molecules in CD1 presentation the presence movement of lipids specific T-cell lines and clones revealed molecules are positive selection of iNKT
2
2 2

b

ensamblan con b2m en un proceso que Priming, requiereexpansion and generation of MHC 1. chaperones, similar a memory. The
ARF6 Clathrin coated pit
AP2

58

59,60

Does our current understanding of the molecular basis of immune tolerance predict new therapies for autoimmune disease?
Nat Clin Pract Rheumatol (2006) 2:491-499

W
Lysosomal processing MHC class II DC TCR DEC205

/clinicalpractice/rheum

DEC205= dendritic cell receptor for endocytosis (lymphocyte Ag 75 or CD205)

Naive T cell

Specific antigen

TREG

Initial expansion Apoptosis
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Figure 1 Modification of dendritic cells by targeted antigen presentation leads to induction of T-cell

The who, how and where of antigen presentation to B cells
Nat Rev Immunol 2009; 9:15-27

WS

a

Lymph node Afferent lymph Trabecular sinus Paracortex

Spleen Red pulp

Subcapsular sinus Follicle

White pulp

HEV Medulla Efferent lymph Blood Conduit network

Marginal zone Marginal sinus PALS Central arteriole Conduit network Follicle Arteriole branch

b

Conduit network

c

SCS

Follicle

T-cell zone

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The who, how and where of antigen presentation to B cells
Nat Rev Immunol 2009; 9:15-27

a
Afferent lymph vessel C3 fragment Antibody DC-SIGN MAC1 Immune complex Antigen Subcapsular sinus

FcR BCR CR Antigen-specific B cell Primary follicle Follicular dendritic cell Small soluble antigen

SCS macrophage

b
SCS
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c
Antigen-specific B cell Paracortex HEV

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próxima:

Complejo Mayor de Histocompatibilidad

complejo mayor de histocompatibilidad

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RESUMEN

Las células que exhiben péptidos asociados a moléculas MHC se denominan células presentadoras de antígenos (APCs). Ciertas APC presentan antígenos a linfocitos T vírgenes durante la fase de reconocimiento de respuestas inmunes para iniciar dichas respuestas, mientras que otras APC presentan antígenos a linfocitos T diferenciados durante la fase efectora para iniciar mecanismos que eliminen dichos antígenos.

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MHC Clase I y II (moléculas presentadoras de Ag’s) unen péptidos derivados de proteínas intracelulares y de proteínas capturadas por APCs respectivamente Moléculas CD1 MHC-like unen Ag’s de lípidos Linfocitos T reconocen determinantes lineales, no conformacionales, porque los péptidos se unen a las hendiduras MHC linealmente (extendidos). Linfocitos T reconocen antígenos asociados a células, no solubles, porque las proteínas MHC son proteínas de membrana que exhiben péptidos unidos estabilizados en la hendidura de la molécula MHC.
Linfocitos T CD4+ y CD8+ reconocen preferentemente antígenos “muestreados” de reservorios extracelulares y citosólicos respectivos. Porque las vías de ensamble de moléculas MHC aseguran que las moléculas MHC Clase II exhiban péptidos derivados de proteínas extracelulares que se han internalizado en vesículas de APCs. Mientras que moléculas MHC Clase I presentan péptidos derivados de proteínas citosólicas. Por otra parte, los co-receptores CD4 y CD8 se unen a regiones no polimórficas de moléculas Clase II y Clase I, respectivamente.

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La mayoría de linfos T reconocen solo péptidos, mientras que linfos B pueden reconocer péptidos, proteínas, ácidos nucleicos, polisacáridos, lípidos, y químicos pequeños. Como resultado, las respuestas inmunes mediadas por linfos T están inducidas por antígenos proteicos (la fuente natural de péptidos extraños), mientras que las respuestas inmunes humorales pueden ser debidas a antígenos proteicos y no proteicos Pequeñas poblaciones de linfos T son capaces de reconocer antígenos no peptídicos; entre ellas se incluyen linfocitos NK-T y linfocitos T γδ Linfos T son específicos para secuencias de aminoácidos en péptidos. En contraste, linfos B pueden reconocer determinantes conformacionales que existen cuando los antígenos -como las proteínas globulares, por ejemplo- se encuentran en configuración nativa terciaria (doblados) ◦ Al inmunizar un animalito con una proteína nativa, linfos T específicos estimulados responderán a las formas desnaturalizadas o que han sido digeridas por proteólisis. ◦ En contraste, luego de inmunizar con una proteína nativa, linfos B producen anticuerpos que reaccionan solo con la proteína nativa.

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Los receptores antigénicos de linfos T reconocen muy pocos residuos (de aminoácidos) de un solo péptido. Linfos T diferentes pueden distinguir péptidos que difieren hasta en un solo residuo de aminoácido. Linfos T reconocen y responden a péptidos antigénicos foráneos solo cuando dichos antígenos se hallan asociados a la superficie de APCs, mientras que linfos B y Ac secretados unen antígenos solubilizados en líquidos corporales o bien expuestos en superficies celulares. Linfos T solo reconocen péptidos unidos y exhibidos por moléculas MCH, y estas moléculas son proteínas de membrana expresadas en APCs. Linfos T de un individuo reconocen Ag’s solo cuando estos péptidos se muestran por moléculas MHC del mismo individuo. Esta característica del reconocimiento antigénico por linfos T se denomina restricción por MHC propio.

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