NUCLEOLO

El nucléolo puede definirse como la expresión morfológica de la transcripción del

RNA prerribosómico por los organizadores nucleolares (o sus copias) y de la
maduración posterior de ese RNA hasta convertirse en los RNA. Por eso, el
nucléolo es mucho más visible en los momentos de mayor síntesis de ribosomas,
y cuando no hay transcripción desaparece, como durante la mitosis.

Se corresponde con una formación densa dentro del núcleo, observada en

diversos tipos celulares animales y vegetales, principalmente.

Se distinguen los siguientes componentes:

- Parte amorfa o nucleoloplasma: Corresponde a los espacios de escasa

densidad a los electrones que forman cavidades intercomunicadas en la parte
densa. Contiene gránulos de DNA.
- Parte densa o nucleolonema: Se distinguen:
Parte granular: Formada por agrupaciones de gránulos de unos 25 nm de
diámetro, que contienen ribonucleoproteínas.
Parte fibrilar: Más densa que la anterior, constituida por fibrillas de unos 8-10 nm,
también formadas por ribonucleoproteínas.
Centro fibrilar: Muy evidente en algunos nucléolos, donde puede haber varios
centros fibrilares y de densidad inferior a la de las partes granular y fibrilar.
Consiste en finas fibrillas de 7-9 nm. Contiene DNA y algo de RNA. Debido al
contenido en DNA, se ha considerado que los centros fibrilares corresponden a
organizadores nucleolares en fase activa o de transcripción. Otros autores le
atribuyen función de almacén de reservas proteícas para la síntesis ribosómica.
En muchos nucléolos se observa también una masa fibrilar densa que contiene
exclusivamente DNA. Es la heterocromatina asociada al nucléolo y corresponde a
la heterocromatina telomérica de los organizadores nucleolares.
Organizadores nucleolares
Porciones de la cromatina cuya secuencia de ADN contiene los genes de ARNr
• Es ADN de secuencia repetida
• Las copias de disponen en tándem (familia de genes en tándem).
• Cada gen tiene unas 13000 pb en humanos y esta separado del siguiente por
una secuencia de ADN que no se transcribe (ADN espaciador)
• Cada gen contiene la información para las 3 moléculas de “ARNr mayores”:
ARNr 28S, ARNr 18S y ARNr 5’8S.
• La síntesis de los “ARNr mayores” se realiza de forma coordinada

En humanos los organizadores nucleolares se localizan en los brazos cortos de

los cromosomas acrocéntricos
En total: 10 organizadores nucleolares por célula y unas 400 copias del gen del
ARNr

La proporción de RNA en el nucléolo es muy variable y depende del tipo celular

y del estado funcional. Se estima como valor medio un 10%, aunque en algunas
células puede alcanzar el 30%.

Siempre se encuentra entre un 1-3% de DNA, que corresponde al centro fibrilar y

a la heterocromatina asociada al nucléolo.
El componente mayoritario son proteínas, que constituyen prácticamente el resto
del nucléolo, se trata de fosfoproteínas (ácidas) y otras proteínas muy diversas,
algunas de las cuales son básicas. Entre las proteínas del nucléolo se encuentran
las snRNP (ribonucleoproteínas nucleares pequeñas), que intervienen en la
maduración del rRNA y ayudan a la construcción del ribosoma. También se han
detectado enzimas principalmente las necesarias para la síntesis de RNA y su
procesamiento.

Ciclo del nucléolo. Etapas

Igual que ocurre con los cromosomas, el comportamiento del nucléolo es muy
diferente según se consideren células interfásicas o mitóticas. En la interfase no
se observan grandes cambios en el nucléolo: Suele aumentar su volumen y hay
tendencia a la fusión de nucléolos, lo que ocurre cuando dos organizadores
nucleolares se sitúan próximos.

Durante la división celular, el nucléolo muestra una serie de cambios que

determinan un tipo de conducta nucleolar: el ciclo mitótico típico del nucléolo. Este
consiste fundamentalmente en tres procesos:

- Desorganización profásica: Es un proceso en el que el nucléolo presenta las

siguientes características: disminución de tamaño, forma irregular (polilobulada o
estrellada), disminución de la afinidad tintorial y aparición de pequeñas masas de
material nucleolar libres entre los cromosomas profásicos.
- Transporte metafásico y anafásico: En esta etapa el nucléolo ha perdido su
individualidad. Sus constituyentes se han dispersado por el núcleo profásico y
terminan incorporándose a los cromosomas metafásicos.

- Reorganización telofásica: En la primera mitad de la telofase aparecen cuerpos

laminares entre los cordones cromosómicos en vías de descondensación. Al
mismo tiempo, se observan cuerpos más esféricos, resultado de la aglomeración y
fusión de los más pequeños. Estos cuerpos presentan todas las características
morfológicas y reactivas propias del nucléolo interfásico, denominándose cuerpos
prenucleolares.

Avanzada la telofase, los cuerpos prenucleolares se hacen mayores y comienzan

a formar un nucléolo interfásico, por coalescencia y fusión.

El ciclo nucleolar aparece ligeramente retrasado en sus fases morfológicas

respecto al ciclo cromosómico. La desorganización profásica comienza después
de iniciada la profase y termina después de iniciada la prometafase. La
reorganización telofásica comienza después de iniciada la telofase y termina
después de iniciada la interfase.
Cromatina asociada al nucléolo. Organizador nucleolar

El organizador nucleolar es una estructura del cromosoma similar a una

constricción secundaria del cromosoma metafásico, que en la interfase formará un
nucléolo en torno a ella. Aparece como una constricción telomérica, constituyendo
una región de fibrillas poco densas, más laxas que las de la cromatina. Esta
constricción posee proteínas semejantes a las del nucléolo. Son fibras de
cromatina empaquetadas de forma diferente a las del resto del cromosoma. El
organizador nucleolar se encuentra separado del resto de la cromatina por
heterocromatina telomérica. No aparece en todos los cromosomas del cariotipo de
una especie, sólo en algunos (Cromosomas 13, 14, 15, 21 y 22 del cariotipo
humano).

Amplificación genética

En los ovocitos de muchas especies de anfibios, peces, moluscos, insectos y

gusanos, que necesitan una activa síntesis proteíca para acumular sustancias de
reserva. El DNA de los organizadores nucleolares se replica muchas veces
(amplificación genética). Estas dobles hélices emigran hacia la periferia nuclear
donde formarán nucléolos. Pudiendo fusionarse y originar otros mayores. Al final
de la ovogénesis cesa la transcripción y los nucléolos desaparecen. El DNA
organizador nucleolar amplificado es liberado al citoplasma en la metafase I,
donde se degrada.

El DNA organizador nucleolar se replica por el mecanismo de anillos rodantes.

Esta doble hélice de DNA sufre un corte en una sola hebra. Empieza a replicarse
por el punto roto y la nueva hebra en formación va dando la vuelta alrededor del
anillo y empujando la hebra rota, que se sale del anillo y forma una cola. Como la
replicación se da también en la cola, está tiene también dos hebras. De esta
forma, la replicación puede dar varias vueltas, amplificándose el DNA.

Amplificación genética

En los ovocitos de muchas especies de anfibios, peces, moluscos, insectos y

gusanos, que necesitan una activa síntesis proteíca para acumular sustancias de
reserva. El DNA de los organizadores nucleolares se replica muchas veces
(amplificación genética). Estas dobles hélices emigran hacia la periferia nuclear
donde formarán nucléolos. Pudiendo fusionarse y originar otros mayores. Al final
de la ovogénesis cesa la transcripción y los nucléolos desaparecen. El DNA
organizador nucleolar amplificado es liberado al citoplasma en la metafase I,
donde se degrada.
El DNA organizador nucleolar se replica por el mecanismo de anillos rodantes.
Esta doble hélice de DNA sufre un corte en una sola hebra. Empieza a replicarse
por el punto roto y la nueva hebra en formación va dando la vuelta alrededor del
anillo y empujando la hebra rota, que se sale del anillo y forma una cola. Como la
replicación se da también en la cola, está tiene también dos hebras. De esta
forma, la replicación puede dar varias vueltas, amplificándose el DNA.

Transcripción en el nucléolo

En los ribosomas de eucariotas se encuentran presentes 4 tipos de rRNA: un RNA

de 18S en la subunidad menor, y tres RNA de 28S, 5,8S y 5S en la subunidad
mayor.

Sin embargo, la mayoría de los RNA del nucléolo son RNA de 45S en la parte
fibrilar y 32S en la granular Los rRNA de la subunidad ribosómica mayor se
localizan en menor cantidad en la parte fibrilar, mientras que no se encuentra
apenas rRNA de la subunidad ribosómica menor dentro del nucléolo. Esto indica
que el rRNA es sintetizado a partir de un precursor que por maduración y
empalme dará lugar a los rRNA.

La unidad de transcripción del RNA precursor del rRNA corresponde a un gen de

copias múltiples, que forma el organizador nucleolar.

Cada unidad de transcripción nucleolar consiste en dos segmentos de DNA, uno

mudo (no se transcribe) y otro que se transcribe. En este último se ven unos
abultamientos en la cadena de DNA, constituidos por la RNA polimerasa I, de
cada uno de los cuales parte una cadena de RNA asociada a proteínas.

La cadena transcrita de RNA se dispone perpendicularmente a la cadena de DNA

y su longitud aumenta conforme se llega al final del DNA que se transcribe,
porque, a medida que la RNA polimerasa I va recorriendo el gen, copia la cadena
de DNA y añade al RNA los nucleótidos complementarios del DNA copiado. De
esta manera, todas las cadenas de RNA que forman son iguales, aunque hasta el
final del gen no están completas. Una vez completas constituyen el RNA
prerribosómico, que es el primer transcrito y que dará lugar a tres de los rRNA.

La parte muda del gen delimita el final de la transcripción. Al finalizar un gen

comienza otra copia idéntica del mismo gen, y así puede haber hasta 800 copias.
En cada una de ellas hay unas 100 RNA polimerasas que trabajan en cadena. Por
tanto, en un momento dado, pueden estar formándose a la vez 80.000 moléculas
idénticas de RNA. Puede decirse, por tanto, que el origen del rRNA (excepto el
rRNA de 5S) está en un único gen y repetitivo. Esta multiplicidad de copias
responde a una gran necesidad de síntesis de ribosomas en poco tiempo. Por eso,
el organizador nucleolar puede fabricar multitud de copias cuando no basta él solo
para producir el suficiente rRNA. Es más, es posible que no sea el organizador
nucleolar, sino sus copias las que se transcriban, de modo que las posibilidades
de deterioro del organizador nucleolar sean mucho menores.

ARNs ribosómicos

Todos los RNA originados en el nucléolo provienen del transcrito primario de 45S,
que debe sufrir un procesamiento.

El RNA de 45S se transcribe en unos pocos minutos en relación con los

organizadores nucleolares. Se transcribiría en el centro fibrilar, de donde pasaría
inmediatamente a formar las fibrillas ribonucleoproteícas que constituyen la parte
fibrilar del nucléolo. Este RNA de 45S se encuentra asociado a diversas proteínas,
nucleolina y snRNP, formando partículas de 80S. Estas proteínas son importadas
del citoplasma. En las partículas de 80S se encuentra también incluido otro tipo de
RNA de 5S, de origen no nucleolar; pues no se hibrida con el DNA del organizador
nucleolar. En su síntesis interviene la RNA polimerasa III, que también sintetiza el
tRNA.

Las partículas ribonucleoproteícas de RNA de 45S permanecen unos 15 minutos

en la parte fibrilar del nucléolo. A continuación, este RNA va a sufrir una serie de
cambios. Principalmente, metilación activa en las ribosas, pérdida de bases no
metiladas y ruptura de la hebra, para dar lugar a los otros tipos de RNA
mencionados. Las proteínas sufren también algunos cambios.

Lo primero que ocurre es que el RNA de 45S pierde parte de la cadena y se

transforma en RNA de 41S. Parte de este RNA de 41S va a transformarse en RNA
de 20S y, finalmente, en RNA de 18S. Este último y sus proteínas forman
partículas de 40S que constituyen las subunidades ribosómicas menores, las
cuales emigran al citoplasma. Todo este proceso es muy rápido y apenas puede
detectarse RNA de 20S y de 18S en el nucléolo.

Parte del RNA de 41S va a transformarse en RNA de 32S, que permanecerá

durante unos 40 minutos en la parte granular del nucléolo, formando partículas
ribonucleoproteícas de 65S. En estas partículas está el RNA de 5S.
Seguidamente, este RNA de 32S se transforma en un RNA de 28S y otro de 5,8S
que permanece unido a él. Ambos, junto con sus proteínas asociadas y el RNA de
5S, forman partículas ribonucleoproteícas de 60S. Estas partículas están durante
unos 30 minutos en el nucléolo y forman las subunidades mayores de los
ribosomas. Después emigran al citoplasma. En los procesos madurativos
mencionados no sólo hay cambios en el RNA: se producen también cambios en
las proteínas asociadas, pero no hay cambios fuera del núcleo.

Así, al finalizar los procesos de maduración del rRNA se obtienen las subunidades
ribosómicas de 60S y 40S terminadas y libres en nucléolo. Los diferentes tipos de
RNA (18S, 28S, 5,8S y 5S) sólo son transportados al citoplasma bajo la forma de
subunidades ribosómicas maduras. En el citoplasma se ensamblan ambas
subunidades en presencia de mRNA y los factores de iniciación, formando los
ribosomas funcionales y comenzando la síntesis de proteínas.

CROMATINA

Composición química de la cromatina

•ADN
•De secuencia única
•De secuencia moderadamente repetida
•De secuencia muy repetida
•Proteínas
•Histónas: nucleosómicas (H2A, H2B, H3, H4) no nucleosómicas (H1)
•No histónicas: Arqiutectura de la cromatina y de los cromosomas, replicación y
reparación, transcripción, maduración, regulación de la expresión
•ARN
•Transcritos primarios : ARNm, ARNt, ARNr
Componentes permanentes
 ADN
 histonas
  proteínas estructurales no histónicas

Componentes transitorios
 ARN
 Proteínas reguladoras
 Proteínas enzimáticas
ADN
Cantidad constante para cada especie
En las células humanas es = 2c = 2 (3x109 pb)
En las células humanas el nº de cromosomas es = 2n = 2 x 23
Cada molécula de ADN constituye un cromosoma
Hay tantos cromosomas como moléculas de ADN
Componente fundamental tanto desde el punto de vista estructural como funcional:
Contiene la información genética en el orden lineal de sus nucleótidos

Estructura de la cromatina
Tiene estructura fibrilar con distintos niveles de empaquetamiento (3 niveles en el
núcleo interfásico )
Fibra nucleosómica:
• Constituida por ADN e histonas
• Con aspecto de collar de perlas o de cuentas ensartadas
• Con 10nm de diámetro
• Esta formada por una unidad que se repite llamada: nucleosoma
Estructura de la cromatina
No todo el ADN de los cromosomas interfàsicos esta empaquetado de la misma
forma
• La forma en que se empaqueta una región del genoma tiene que ver con la
actividad de los genes que contiene; Mayor en regiones inactivas y menor en
regiones activas.
• Algunas regiones del ADN carecen de nucleosomas (regiones reguladoras??)
• El empaquetamiento ordenado gracias a proteínas especializadas pliega el ADN
permitiendo su accesibilidad a las proteínas responsables de la transcripción y la
replicación.
• La estructura de la cromatina es dinámica, cambios en la estructura del
nucleosoma están relacionados con la accesibilidad al ADN
• En el interior del núcleo parece que cada cromosoma ocupa una región particular
(lamina nuclear y matriz)

Bibliografías

http://www.aloj.us.es/facmed/biol/Tema%209%20Nucl%C3%A9olo.pdf

http://retina.umh.es/docencia/confsvivos/temas/nucleolo.html

http://biolmol.fcien.edu.uy/materiales/clase1_cromatina_09.pdf

http://www.aloj.us.es/facmed/biol/Tema%206%20Cromatina.pdf