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NEFELOMETRÍA Y TURBIDIMETRÍA

¿QUE ES? Nefelometría y/o Turbidimetría son métodos


analíticos basados en la dispersión de partículas
suspendidas en líquidos.

-Turbidimetría: es la medición de la luz transmitida a


través de una suspensión, tiene la ventaja de permitir la
valorización cuantitativa, sin separar el producto de la
solución. Las mediciones, pueden efectuarse con cualquier
espectrofotómetro.

-Nefelometría: mide la luz dispersada en dirección


distinta a la luz emitida (generalmente con ángulos que
oscilan entre 15 y 90º). Utiliza como instrumento el
nefelómetro (en el que el detector se ubica con un ángulo
que oscila entre 15 y 90º ej. a 90º). Se suele utilizar
para concentraciones más diluidas. Permite mayor
sensibilidad con concentraciones menores de partículas
suspendidas. Constituye un método más exacto para la medida
de la opacidad.

¿EN QUÉ SE BASA? Cuando la luz atraviesa un medio


transparente en el que existe una suspensión de partículas
sólidas, se dispersa en todas direcciones y como
consecuencia se observa turbia. La turbidez es la propiedad
óptica de una muestra que hace que la radiación sea
dispersada y absorbida más que transmitida en línea recta a
través de la muestra. Es ocasionada por la presencia de
materia suspendida en un líquido. Y para medirla utilizamos
ambos métodos. La dispersión no supone la pérdida neta de
potencia radiante, sólo es afectada la dirección de la
propagación, la intensidad de la radiación es la misma en
cualquier ángulo.
En la turbidimetría se compara la intensidad del rayo de
luz que emerge con la del que llega a la disolución. En
cambio, en la nefelometría la medida de la intensidad de
luz se hace con un ángulo de 90º con respecto a la
radiación incidente.

El instrumento usado en la nefelometría, el nefelómetro en


cambio en turbidimetría se utiliza el turbidímetro que es
un fotómetro de filtro. El procedimiento de la nefelometría
generalmente es empírico y sólo se consideran 3 factores:
1. La concentración: Mayor sea el número de partículas,
mayor es la dispersión.
2. Tamaño de la partícula: Factores como el pH, la
velocidad y orden de la mezcla, concentración de los
reactivos y la fuerza iónica.
3. Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan
con luz blanca, pero si están coloreadas, se debe escoger
una porción del espectro electromagnético en la que la
absorción del medio se reduzca al mínimo.

DIFERENCIAS TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA. La nefelometría


se basa en la medición de radiación dispersa, en cambio la
turbidimetría en la medición de la intensidad de un haz
disminuido.

Factores para la elección entre turbidimetría y


nefelometría:
-Intensidad de la radiación transmitida o dispersada con la
intensidad de la radiación procedente de la fuente. La
mejor elección cuando la muestra contiene pocas partículas
dispersantes es la nefelometría. La turbidimetría es buena
cuando las muestras contienen grandes concentraciones de
partículas dispersantes.
-Tamaño de las partículas dispersantes. En la nefelometría
la intensidad de la radiación dispersada a 90º es mayor si
las partículas son bastante pequeñas para que se produzca
una dispersión Rayleigh. Si las partículas son mayores la
intensidad de la dispersión disminuirá. En turbidimetría la
señal consiste en la disminución relativa de la radiación
transmitida, por lo que el tamaño de las partículas
dispersantes es menos importante.

¿PARA QUÉ SE UTILIZA? Se utilizan normalmente en el


análisis de la calidad química del agua, para determinar la
claridad y para el control de los procesos de tratamiento.
También para la determinación de iones sulfato.
Turbidimetría.
-Se utiliza para el análisis de fibrinógeno, triglicéridos,
complejos Ag-Ac y otras sustancias.
-Aplicable cuando la dispersión es suficientemente grande
(concentración alta de partículas).
Nefelometría.
-Preferible para concentraciones bajas de partículas, ya
que la dispersión es menor y la disminución de intensidad
del haz incidente es pequeña.
-Se suele utilizar para medir concentraciones específicas
de colonias de bacterias en algún medio de cultivo, o de
muchas proteínas utilizando el principio de dispersión
luminosa molecular.
http://quimicabasica2014.blogspot.com/2014/10/nefelometria-y-turbidimetria.html

Turbidimetría Nefelometría
Turbidimetría Nefelometría
Mide la reducción de la Mide la luz difractada por los
intensidad de la luz transmitida a inmunocomplejos a un ángulo
180º por la formación de determinado de la luz incidente
inmunocomplejos. (normalmente 90º )

Puede der realizada en la


Requiere un nefelómetro
mayoría de los
especialmente dedicado
espectrofotómetros

Sensibilidad incrementada para


inmunocomplejos pequeños con Sensible para medir
el uso de partículas de látex inmunocomplejos pequeños
sensibilizadas

Mayor precisión en la Menor precisión en la


determinación de determinación de
inmunocomplejos grandes inmunocomplejos grandes

Los autoanalizadores no poseen


Automatización: adaptable a la
módulos de nefelometría
mayoría de los autoanalizadores
estándar

Debido a las velocidades de


Las velocidades de reacción más
reacción más rápidas, por lo
lentas permiten efectuar el
general es necesario realizar
blanco de reactivo, muestra y la
blancos de reactivos y muestra
reacción en la misma cubeta
en forma separada.
http://iacinternacional.com.ar/inmunoturbidimetria/turbidimetria-vs-nefelometria/

https://es.slideshare.net/abzhamozarth/expo-turbidimetria-y-nefelometria

4.3 TURBIDIMETRÍA Y
NEFELOMETRÍA

Cuando un haz de luz golpea una partícula en suspensión, una parte de la luz es reflejada, otra
absorbida, otra desviada y el resto es transmitida. La turbidimetría mide la reducción de la
intensidad de la luz en su paso a través de una suspensión, a causa de las partículas presentes
en ésta, y cuantifica la luz residual transmitida. La nefelometría mide la luz desviada en
diversos ángulos (entre 15º y 90º) por las partículas presentes en esta suspensión. La
sensibilidad de la turbidimetría está limitada por la exactitud y sensibilidad del instrumento
utilizado para la medición, y depende de la capacidad del detector para registrar pequeños
cambios en la intensidad de la luz. Las lecturas realizadas en longitudes de onda bajas, en un
espectrofotómetro de buena calidad, permiten obtener buenos resultados. Para la
nefelometría es necesario emplear un equipo con características específicas, que recibe el
nombre de nefelómetro. Sus componentes básicos son:

1. Fuente de luz: los modelos más antiguos empleaban la lámpara de wolframio. En la


actualidad se usan lámparas de arco de mercurio (Hg), diodos emisores o láser de helio-
neón, de baja potencia
2. Sistema colimador (innecesario con la lámpara de láser), cuya función es la de concentrar
el rayo de luz en haces paralelos.
3. Selector de longitud de onda
4. Cubeta de medición.
5. Detector (fotomultiplicador)
6. Galvanómetro.
7. Los primeros equipos de este tipo efectuaban la medición de la luz en un ángulo de 90º,
pero hoy se prefiere trabajar con la detección en ángulo más pequeño, lo cual confiere
una mayor sensibilidad.

http://bibing.us.es/proyectos/abreproy/4821/fichero/MEMORIA%252FCAPITULO+4.p
df

Nefelometría y turbidimetría

Cuando la luz incide en una solución, parte de la luz se dispersa por las partículas en
suspensión, otra parte se absorbe y otra se transmite (fig. e1-7A). La luz dispersada dependerá
de distintos factores, como el tamaño y el peso molecular de la partícula en solución, la
longitud de onda de la energía incidente, la distancia entre el detector y la cubeta, y la
concentración de la muestra. Los equipos emplean longitudes de onda que evitan aquéllas a
las cuales absorben los compuestos presentes en la muestra. Las más frecuentes están entre
500 y 650 nm, y la energía de la luz transmitida o dispersada tiene la misma longitud de onda.
La nefelometría mide la luz dispersada, mientras que la turbidimetría mide el descenso de la
luz transmitida:

1. La turbidimetría mide la disminución de la luz que atraviesa la solución debido a la turbidez


(transmitancia), por lo que el detector se sitúa en línea con la luz incidente. Es una técnica muy
sencilla que se puede llevar a cabo con un equipo de espectrofotometría de absorción. Sin
embargo, no es muy sensible, por lo que se emplea para cuantificar concentraciones
relativamente elevadas.

2. La nefelometría, en cambio, mide la luz dispersada por una solución de partículas, por lo
que el detector se sitúa formando un ángulo con la luz incidente (fig. e1-7B). En casi todas las
aplicaciones del laboratorio, la mayor dispersión de la luz es hacia delante, por lo que el
detector en estos equipos se coloca formando un ángulo entre 10 y 90°. El equipo es similar a
un fluorímetro, pero con la importante diferencia de que la longitud de onda incidente y la
dispersada es la misma. La concentración del compuesto (C) es proporcional a la relación entre
la luz incidente (I0 ) y la luz dispersada

(ID): C K= × I /I D 0

http://www.studentconsult.es/ficheros/booktemplate/9788490224311/files/cap_e1.p
df

La turbidimetría

Características generales de la turbidimetría.

Cuando un rayo de luz colimado (aquel que atraviesa una suspensión homogénea de parơ
culas) atraviesa una suspensión homogénea de parơ culas, una parte de esta dicha luz se
absorbe, otra se refl eja, otra se tramite y otra úlƟ ma es dispensada en todas las direcciones.
La turbidimetría consiste en medir la canƟ dad de luz que se bloquea, es decir, canƟ dad de luz
no trasmiƟ da por suspensión y por lo tanto no capaz de emerger de ésta en misma dirección
que el rayo incidente. Cuanto más luz bloqueada, es decir cuanƟfi cada en un
espectrofotómetro (aparato uƟ lizado para cuanƟfi car muestras) en forma de absorbancia,
mayor será el numero de parơ culas presentes en suspensión y por lo tanto más alta la
concentración de la sustancia problema que da lugar a las parơ culas y que está presente en la
muestra. Por un lado cuando se combinan un anơ geno con un anƟ cuerpo en un medio
líquido, se formarán agregados de inmunocomplejos que se quedarán en suspensión dado
aspecto turbio a ese líquido. Por otro lado cuando las parơ culas detectadas por estas técnicas
las de turbidimetría sean inmunocomplejos, dichas técnicas recibirán el nombre de
inmunoturbidemetría.

7.2 La nefelometría.

7.2.1 Características generales de la nefelometría.

En el caso de la nefelometría lo que ocurre es que se mide la canƟ dad de luz que se dispara
por las parơ culas en suspensión, es decir se cuanƟfi ca la canƟ dad de luz que es desviada por
éstas, en determinado ángulo, con relación a dirección de rayo incidente. El ángulo del rayo
incidente uƟ lizado, para evaluar la canƟ dad de luz dispersada, se comprende entre los 30º y
90º C. Cuando las parơ culas en suspensión sean agregados de inmunocomplejos, dicha técnica
será conocida como inmunonefelometría.

http://www.fatedocencia.info/2019/2019.pdf
Nefelómetro

La nefelometría es un procedimiento analítico que se basa en la dispersión de


la radiación que atraviesan las partículas de materia. Cuando la luz atraviesa un
medio transparente en el que existe una suspensión de partículas sólidas, se dispersa en
todas direcciones y como consecuencia se observa turbia. La dispersión no supone la
pérdida neta de potencia radiante, solo es afectada la dirección de la propagación, porque
la intensidad de la radiación es la misma en cualquier ángulo. La intensidad depende de: el
número de partículas suspendidas, su tamaño, su forma, los índices refractivos de la
partícula y del medio dispersante, y la longitud de onda de la radiación dispersada. La
relación entre variables y es más factible un tratamiento teórico, pero debido a su
complejidad raras veces se aplica a problemas analíticos específicos. El procedimiento
generalmente es empírico y sólo se consideran 3 factores:

1. La concentración: cuanto mayor sea el número de partículas, mayor es la


dispersión.
2. Tamaño de la partícula: factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla,
concentración de los reactivos, duración del estado de reposo y la fuerza iónica.
3. Longitud de onda: generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero si
están coloreadas, se debe escoger una porción del espectro electromagnético en
la que la absorción del medio se reduzca al mínimo.
En las muestras se agregan agentes tensoactivos (como gelatina), para prevenir la
coagulación del coloide. Sólo se obtienen datos confiables si se controlan
escrupulosamente las variables que afectan el tamaño de partículas.

Aplicación[editar]
Generalmente, nefelometría y turbidimetría se utilizan en el análisis de la calidad química
del agua para determinar la claridad y para el control de los procesos de tratamiento. Estos
métodos pueden ser también apropiados para ensayos cuantitativos que usan complejos
antígeno-anticuerpo o para medir la cantidad de proteínas en fluidos. Las medidas
turbidimétricas y nefelométricas ocupan una posición destacada en los laboratorios
clínicos. Se han aplicado para la determinación de inmunoglobulinas, proteínas del
complemento, proteínas de fase aguda, proteínas de coagulación entre otras.
Diferencia con la turbidimetría
La elección entre uno de ambos métodos reside en la dispersión de luz, si es extensa, es
apropiado aplicar la turbidimetría, en cambio si es mínima es apropiada la nefelometría. De
la nefelometría se obtienen mejores resultados, porque determina concentraciones de
pocas partes por millón (ppm), con una precisión de 1 al 5%.
La nefelometría se basa en la medición de radiación dispersa, en cambio la turbidimetría
en la medición de la intensidad de un haz disminuido.
El instrumento usado en la nefelometría, el nefelómetro se asemeja al fluorómetro. En
cambio en turbidimetría se utiliza el turbidíemetro que es un fotómetro de filtro.
https://es.wikipedia.org/wiki/Nefelometr%C3%ADa

Transcripción de TURBIDIMETRÍA-NEFELOMETRÍA
3.- Detección de la luz dispersa
¿CÓMO SE PUEDE MEDIR LA LUZ DISPERDADA?
La dispersión de la luz se puede medir por turbidimetría o por nefelometría.
4.-Turbidimetría
¿QUÉ ES?
Es una técnica analítica basada en la dispersión de la luz cuando atraviesa partículas en
suspensión.
2.-PRINCIPIOS
Fenómeno de separación de las ondas de distinta frecuencia al atravesar un material.
Incluye una interacción entre el rayo luminoso incidente y la partícula con la que
choca.
5.-Nefelometría
Es un procedimiento analítico que se basa en la dispersión de la radiación que
atraviesan las partículas de la materia.
7.-Instrumental
El sistema genérico consta de:
Fuente de energía radiante.
Colimador.
Selector de longitud de onda.
Cubeta
Sistema de detención.
TURBIDIMETRÍA-NEFELOMETRÍA
INDICE
1.INTRODUCCION
2. PRINCIPIOS
3.DETECCION DE LUZ DISPERSADA
4. TURBIDIMETRIA
5.NEFELOMETRIA
6.APLICACIONES CLINICAS DE LA TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA
7. INSTRUMENTAL
8.ASPECTOS PRACTICOS
8.1 Comparación de métodos
8.2 Sensibilidad
8.3 Efecto matriz
8.4 Longitud de onda
8.5 Tipos de análisis
8.6 Ejecución de las técnicas

FACTORES DE LOS QUE DEPENDE LA DISPERSIÓN DE LA LUZ


1. Tamaño de la partícula

2. Dependencia de la longitud de onda


3. Influencia de la concentración
4. Influencia de la distancia del detector
8.-Aspectos prácticos
6.-Aplicaiones clínicas de la turbidimetría-nefelometría
¿CON QUÉ MUESTRAS NOS PERMITEN TRABAJAR ESTAS TÉCNICAS?

8.1.COMPARACIÓN DE LOS DOS MÉTODOS.


8.2.SENSIBILIDAD
8.1.COMPARACIÓN DE LOS DOS METODOS.
La elección entre turbidimetría y nefelometría depende de la aplicación que se de a la
técnica y del instrumental de que se disponga.

Hasta hace poco la nefelometría era mejor técnica, actualmente la perfección


alcanzada por los espectrofotómetros han dado a las técnicas turbidimétricas gran
auge, ya que han ganado en sensibilidad.

Además en el espectrofotómetro se pueden realizar gran cantidad de determinaciones


además de la turbidimétricas.

Factores para elección entre turbidimetría y nefelometría:


Intensidad de la radiación transmitida (Turbidimetría) o dispersada (Nefelometría) con
la intensidad de la radiación procedente de la fuente.

Tamaño de las partículas dispersantes.

8.2.SENSIBILIDAD
Nefelómetro: la sensibilidad depende de la lectura del blanco y del ángulo de
detección.

FACTORES
1. Tamaño de la partícula
La luz dispersada depende de la relación entre el tamaño de esta y la longitud de onda
de la luz incidente.
Cuando el tamaño de la partícula es intermedio, la luz aparece dispersa hacia delante
(dispersión de Rayleigh) en distintos ángulos, lo que favorece las medidas
nefelometrías.
2. Dependencia de la longitud de onda
La intensidad de la luz dispersada es inversamente proporcional a la longitud de onda
elevada a la cuarta potencia; lo que quiere decir que a menor longitud de onda de
excitación, obtendremos mayor sensibilidad en las medidas
3. Influencia de la concentración
La intensidad de la luz dispersada es directamente proporcional al peso molecular de
las partículas y a su concentración en la solución.
4. Influencia de la distancia del detector
La intensidad de la luz dispersada es inversamente proporcional a las distancia del
detector elevado al cuadrado; por lo que cuanto más cerca este el detector de la
cubeta, mayor sensibilidad obtendremos.
No existe una formula universal que permita calcular la concentración de las partículas
en suspensión a partir de la medición de la luz dispersada (similitud con fluorimetria)
Dispersión de Rayleigh
8.3.Efecto matriz.
8.4.longitud de onda.
8.5.Tipos de análisis.
8.6.Ejecución de las técnicas.
8.3.Efecto matriz.
La matriz de un espécimen, es por tanto, el conjunto de todos sus componentes
exceptuando el componente a estudiar.
Tanto en los reactivos como en el suero pueden existir partículas que produzcan una
dispersión de luz no deseada y por tanto una interferencia analítica.

Esto ocurre con las lipoproteínas y quilomicrones de los sueros lipémicos , por
ejemplo, se puede observar mediante el empleo de técnicas cinéticas. También las
partículas de suciedad pueden producir dichos efectos → (efecto matriz).

8.4.longitud de onda.
Según la ley de Rayleigh, la intensidad de la luz dispersada aumenta cuando disminuye
la longitud de onda.
Los sueros con los que trabajamos contienen proteínas, y componentes que absorben
la luz a determinadas longitudes de onda. Las proteínas tienen un pico de absorción
por debajo de 300 nm, y los cromógenos del suero tienen otro pico de absorción entre
400 y 425 nm. Los instrumentos tienden por ello a trabajar a λ de 320 a 380 nm.

Interesan λ no absorbibles y bajas. Ejemplo: I=340 nm.


Espectro de la luz solar
8.5.Técnicas de análisis.
A PUNTO FINAL
Tras procesar la muestra se deja pasar un tiempo para que se formen los agregados.
Después se mide la dispersión de la luz de la muestra y se resta a la obtenida con el
blanco (contiene solo reactivos).
Por último se mide la concentración de Ag que está presente interpolando el valor
anterior sobre una curva de calibración obtenida con los datos de una serie de
diluciones de un “Ag patrón”.

VARIABLES QUE INFLUYEN EN LA TÉCNICA

1. INTRODUCCIÓN
1.-Tecnicas analíticas
1.1.No espectroscópicas
1.1.1.Basadas en la dispersion de la luz (Light scattering)
Turbidimetría
Nefelometría
¿QUÉ SON?
La turbidimetría y la nefelometría son técnicas analíticas basadas en la dispersión de la
luz producida partículas de una sustancia en suspensión.
¿QUÉ OCURRE?
Cuando un rayo de luz monocromática, polarizada y colimada (paralelos) atraviesa una
suspensión homogénea de partículas :
Una parte de la energía es reflejada regularmente
Otra parte es difundida, es decir reflejada en todas las direcciones: DISPERSADA
Otra parte es absorbida
Otra parte es transmitida
LA DISPERSIÓN LUMINOSA
En una determinación cuantitativa de un compuesto determinado todos los factores
citados van a ser constantes excepto la concentración
TURBIDÍMETRO
NEFELOMETRO
¿QUÉ MIDE EL TURBIDÍMETRO?
El turbidímetro va a medir la disminución de la luz transmitida a través de una
suspensión de partículas utilizando para ello un espectrofotómetro (detector en la
misma dirección del haz de luz, se mide A o %T)
¿QUÉ VA A MEDIR EL NEFELOMETRO?
Mide la luz dispersada en dirección distinta a la luz emitida (generalmente
con ángulos que oscilan entre 15 y 90°)
¿QUÉ SE MIDE?
Mide la reducción de la intensidad de la luz en su paso a través de una suspensión, a
causa de las partículas presentes en ésta, y cuantifica la luz residual transmitida.
FUNCIONAMIENTO
¿CÓMO SE MIDE?
El aparato utilizado para la medida es el espectrofotómetro.
La luz transmitida se mide a 0o del haz incidente es decir en su misma dirección.
Se puede medir como tanto por ciento en transmitancia (%T) o como absorbancia (A).
¿DE QUÉ DEPENDE LA SENSIBILIDAD DEL MÉTODO?
Dependerá principalmente de la exactitud y sensibilidad del aparato.
¿PARA QUE SE UTILIZA?
Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que haya una buena disminución
de la luz transmitida). Ejemplo: determinación de proteínas totales en suero, LCR u
orina.
¿EN QUÉ SE BASA?
La turbidez es la propiedad óptica de una muestra que hace que la radiación sea
dispersada y absorbida mas que transmitida en línea recta a través de la muestra.
¿QUÉ ES?
¿CÓMO FUNCIONA?
NEFELOMETRÍA
Esta dispersión no supone la pérdida neta de potencia radiante, solo es afectada la
dirección de la propagación, porque la intensidad de la radiación es la misma en
cualquier ángulo.
¿DE QUÉ DEPENDE LA INTENSIDAD DE ESTA RADIACIÓN?
El número de partículas suspendidas
Tamaño
Forma
Índices refractivos de la partícula
Medio dispersante
Longitud de onda de la radiación dispersada.

PRINCIPALES FACTORES DE LOS QUE DEPENDE EL PROCEDIMIENTO


1.-La concentración
2.-Tamaño de la partícula
3.-Longitud de onda

CONCENTRACIÓN
LA LONGITUD DE ONDA
De la que depende también la sensibilidad del método .
Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca.Puesto que la luz detectada en
el ángulo de dispersión 0 en ausencia de partículas con un fondo negro, es nula.

¿CÓMO SE MIDE?
El aparato que se utilizan para la medición es el nefelómetro.
Es un aparato diseñados exclusivamente para esta técnica.
Tiene un sistema de detección situado un ángulo fijo de lectura. ( 90˚)

¿PARA QUÉ SE UTILIZA?


Se utilizan principalmente para medir concentraciones específicas de colonias de
bacterias en algún medio de cultivo, o de muchas proteínas utilizando el principio de
dispersión luminosa molecular.
APLICACIONES
4.-También existe la posibilidad de analizar la presencia en líquidos biológicos de
parámetros de combustión del tabaco como por ejemplo la nicotina que puede
analizarse por precipitación con ácido wolframosilícico y, en presencia de nornicotina,
por precipitación con yodo mercuriato de potasio.
6.-En hematología se utilizan también en algunos contadores de células sanguíneas
para distinguir los distintos tipos de células de la sangre.

Kits para la determinación de :


α 1- Glicoproteína ácida u orosomucoide: Se utiliza para el diagnostico de
enfermedades reumáticas . Es una proteína típica de fase aguda.

9.-Otra aplicación es el análisis de enzimas que actúan sobre determinados sustratos.


Una suspensión estable se mezcla con la muestra (suero, LC y orina) que contiene la
enzima.
La turbidez se relaciona con la concentración de la enzima.

1.-Una de las aplicaciones más extendidas de la turbidimetría al análisis de rutina es en


bacteriología
Control de crecimiento bacteriano:

2.-También se usa ampliamente en instrumentos automatizados que miden


sensibilidad de antibióticos:

3.-En análisis bioquímico


La turbidimetría se utiliza en:
La determinación de aminoácidos
La determinación de Vitaminas
La determinación de proteínas totales en suero, LCR u orina (haciendo que las
proteínas precipiten con TCA o ácido sulfosalicílico).
Para determinar la velocidad de sedimentación de partículas de distintos tamaños.
La nefelometría se utiliza en:
Análisis de proteínas
En la determinación de glucógeno, β- y γ- globulinas en suero y plasmas sanguíneos
Otros ejemplos son la determinación de ribonucleasa, sulfatos en orina.

5.-En analizadores de coagulación


Debido a que las células sanguíneas poseen un tamaño suficiente como para dispersar
la energía radiante visible, debido a ello se han construido un buen número de
instrumentos que se basan en los procesos de dispersión de la radiación.

7.-En Inmunoquímica: Inmunoturbidimetría e inmunonefelometría


Se han fabricado kits para :
IgA, IgG, IgM, complemento: C3, C4 , y factor reumatoide
La albúmina, transferrina, 2-macroglobulina, haptoglobulina

8.-La nefelometría además se usa para la determinación de algunos fármacos, los


cuales se miden utilizando esta técnica conjuntamente con Inmunoquímica.

INSTRUMENTAL
FUENTE DE ENERGÍA RADIANTE

Se emplean diferentes tipo de lámparas: de halógeno, xenón, filamento de tungsteno y


laser.
La ventaja del laser es que produce haces de luz estables, de intensidad adecuada a la
técnica, bien colimadas y ancho de bandas muy estrechos.
COLIMADOR
Su función es conseguir que el haz de luz que incide en la muestra sea paralelo. Esto es
necesario cuando la fuente de luz no es láser. Se puede usar un fluorímetro como
nefelómetro teniendo la misma longitud el 2ª monocromador.

CUBETA
Donde se coloca la muestra.
Formas : pueden ser redondas o cilíndricas y cuadradas.
Volumen : pueden ser macrocubetas, semimicrocubetas o microcubetas.
Material : pueden ser vidrio, cuarzo, plástico.

TURBIDÍMETRO SENCILLO
NEFELÓMETRO
LAMPARA DE FILAMENTOS DE TUNGSTENO

LAMPARA DE LÁSER

LAMPARA DE XENÓN

LAMPARA DE HALÓGENO

COLIMADOR

SISTEMA SELECTOR DE LONGITUD DE ONDA

Puede ser de filtros o de monocromadores pero no es necesario cuando de usa como


fuente de luz el láser.

SISTEMA DE DETECCIÓN

En el turbidímetro esta colocado en la misma dirección que el haz de luz incidente.


En el nefelómetro se con un ángulo que oscila entre los 15 y los 90o

¿PARA QUÉ ANALISIS SE


UTILIZARAN ESTAS TECNICAS?

Una de las utilidades de estas técnicas son para aquellos análisis en los que hay
reacciones antígeno-anticuerpo, donde se distinguen tres etapas:
1.-Una primera, más lenta donde no hay casi variación en la dispersión lumínica.
2.-La segunda , donde hay un gran aumento en esta dispersión.
3.-Una ultima donde la dispersión se hace lenta hasta ser casi constante.

TECNICAS QUE PUEDEN MEDIR ESTAS REACCIONES

LA SEÑAL DE DISPERSIÓN OBTENIDA VA CRECIENDO A MEDIADA QUE EL TIEMPO


AUMENTA

8.6 Ejecución de las técnicas


Trabajamos con suspensiones, con lo cual hay conseguir:
-Homogeneidad
-Reproducibilidad
-Estabilidad
Nos lleva a el uso de coloides protectores; sustancias solubles en agua de alto PM
Alcohol polivinílico y dioctil maleato son los más usado

Temperatura, que debe mantenerse constante.


Reconstitución de reactivos, ser precisos con las cantidades de cada uno.
Tiempo de reacción.
Estabilidad de las suspensiones.
Tamaño de las partículas.

SUSTANCIAS QUE SE MIDEN


POR ESTAS TÉCNICAS:

Tanto en orina, como sangre, LCR, estas técnicas son adecuadas para medir cualquier
sustancia que se encuentre en ella, para la realización de pruebas inmunológicas.

Hemoglobina
Transferrina
IgG, IgM, IgA
Albúmina
Factores de complemento
Presencia de fármacos
https://prezi.com/v1fsfwc3a8b7/turbidimetria-nefelometria/

El Turbidímetro de Laboratorio Hach Modelo 2100AN (figura 1) mide la turbidez de 0 a 10.000


NTU (unidades nefelométricas de turbidez) en el modo de gama automática, con colocación
automática de la coma decimal. Las soluciones de mayor nivel de turbidez se miden diluyendo
la muestra filtrada y calculando los resultados correspondientes.

Los accesorios suministrados con el turbidímetro incluyen seis celdas de muestras, un juego de
seis standards secundarios de Gelex (inclusive un standard de luz parásita), una ampolla con
standard primario de formazina 7500 NTU, un cable de corriente, aceite de silicona, un paño
para aplicar el aceite a la celda de muestras, una cubierta contra el polvo, 2 rollos de papel de
impresora y el manual del instrumento.