You are on page 1of 34

BIODEGRADACIÓN DE POLIETILENO UTILIZANDO

DIFERENTES GÉNEROS
DE HONGOS AISLADOS DE BOTADEROS EN TACNA.
Naysha Nina, Alexandra Mamani, Anderson Flores,Cristhian Mita | Claudia Clavijo Koc | EPIAM
INTRODUCCIÓN

• En estos tiempos el uso de polietileno ha incrementado debido a la demanda poblacional


y estos consumos excesivos conllevan a un impacto ambiental muy serio. Como futuros
profesionales es nuestro deber proponer soluciones y este problema ambiental nada
ajeno, nos motivó para la realización de este proyecto.
En el presente proyecto nuestro objetivo principal es determinar el porcentaje de
biodegradación de polietileno utilizando diferentes géneros de hongos aislados de
botaderos informales en la ciudad de Tacna.

En el capítulo uno realizamos el planteamiento del problema como ya sabemos el


problema general es la contaminación por polietileno, para no ir muy lejos, la zona
estudiada será Tacna donde obtendremos hongos degradadores de polietileno. Nuestros
objetivos específicos son aislar e identificar diferentes géneros de hongos y evaluar el
tiempo de biodegradación de polietileno estos hongos.
¿Cuál es el porcentaje de biodegradación de polietileno que
obtendremos utilizando diferentes cepas de hongos?

¿Qué géneros de hongos se logran aislar de botellas de


polietileno tomadas de botaderos en Tacna?

¿Cuál es el tiempo de biodegradación de los hongos de


botaderos en Tacna?

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA


INFORME DE INVESTIGACION

OBJETIVOS
Objetivo General: HIPOTESIS
- Determinar el porcentaje de - Se obtiene el porcentaje menos a 9
biodegradación utilizando diferentes % de biodegradación de polietileno
géneros de hongos aislados de utilizando diferentes cepas de
botaderos de Tacna. hongos.
Objetivos específicos:
- Aislar e identificar diferentes - Se aíslan tres géneros de hongos
géneros de hongos de botellas de encontrados en las botellas de
polietileno. polietileno.
- Evaluar el tiempo de
biodegradación del polietileno - Los hongos se degradan a partir de
utilizando diferentes tipos de la tercera semana.
hongos.
MATERIALES GENERALES
Bolsas ziploc
Cubre-bocas

portaobjetos y
cubreobjetos Malla cubre-cabello

Tijeras Guantes desechables

Placas petri
Cinta
Alcohol Capsulas de
cloranfenicol 500mg

Levadura Agar Czapek

Azucar Agar Papa Dextrosa

Agua destilada Agar Agar


REACTIVOS

Nitrato de sodio

Cloruro de potasio
Fosfato dipotasico

Sulfato de magnesio

Sulfato ferroso
METODOLOGÍA

• RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA :Se seleccionó del botadero municipal de Tacna


ubicado en zonas alejadas del centro, ya que en estos hay una gran cantidad de desechos
de plástico
• Se tomaron 20 muestras correspondientes a botellas de bebidas elaboradas con
polietileno de baja densidad con rasgos de deterioro luego se colocaron en bolsas
plásticas de primer uso
AISLAMIENTO DE HONGOS FILAMENTOSOS

• Las muestras se lavaron empleando un cepillo y agua destilada estéril, Luego se


fraccionaron y cada fracción fue lavada con agua destilada
• Para el aislamiento se preparo el Agar CzapeckDox pesamos los reactivos.
PREPARACION DEL AGAR CZAPECK

REACTIVO CANTIDAD
Nitrato sódico 1,00 g

Cloruro potásico 0,25 g


Sulfato magnésico 0,25 g
Sulfato ferroso 0,005 g
Fosfato dipotásico 0,5 g
Sacarosa 7,5 g
Agar agar 10,00 g

• Disolver 19.28 g en 500 mililitros de agua destilada. Calentar y agitar


hasta su completa disolución.
• Para ajustar el pH a 3’5, añadir 10 ml de solución estéril de ácido
láctico al 10% por litro de medio.
• Autoclavar a 115 ºC durante 20 minutos.
• Mezclar bien antes de verter en las placas.
• Para el aislamiento de los hongos, se volvieron a fraccionar las muestras en partículas
pequeñas para finalmente sembrar en placas Petri con el agar CzapeckDox con solución
de acido sulfúrico
• Utilizando este medio, se logro obtener un hongo
• Luego preparamos de nuevo el agar czapeck, después añadimos solución de acido
láctico al 10% para luego sembrar 10 muestras
Luego de haber sembrado las 10 muestras se obtuvo un crecimiento de diferentes
hongos. Para la identificación taxonómica se hizo el estudio macroscópico en placa
petri, Las cepas aisladas se mantuvieron en el medio agar papa dextrosa a
temperatura ambiental.
PREPARACION AGAR PAPA DEXTROSA

Solución de cloranfenicol
• Luego se purifico las 10 muestras , elegimos 17 muestras de hongos.
Como se observo que obtuvimos una contaminación de los hongos ,para obtener
cultivos puros de los hongos aislados se empleó de nuevo el medio agar papa
dextrosa
IDENTIFICACION DE HONGOS FILAMENTOSOS

• Técnica de cinta pegante


Se adhiere una cinta adhesiva transparente sobre la colonia para tomar una porción del micelio aéreo , luego se coloca una
gota de azul de metileno sobre el portaobjetos.
• Seguido se pega un extremo de la cinta adhesiva cargada con el micelio en el extremo del
portaobjeto , se presionara la cinta sobre el colorante para que el micelio se empape en la
solución y entonces con cuidado se pega el otro extremo de la cinta adhesiva al portaobjetos sin
que quede burbujas de aire
• Finalmente se observa al microscopio
Aplicación de claves taxonómicas

• Para la identificación del género y


posible especie de los hongos
aislados será de ayuda la
aplicación de claves taxonómicas,
para ello se tuvo en cuenta las
características macro y
microscópicas de los hongos
RESULTADOS

TIPO
HONGO TAMAÑO FORMA COLOR TEXTURA REVERSO
A-1* 2.5 cm circular verde jade aterciopelada blanco
A-2 2.5 cm circular verde pacay compacta blanco/ amarillo
B-3 1.3 cm circular verde pacay compacta café
B-4 1 cm circular verde pacay oscuro/borde blanco aterciopelada naranja
C-5 1.2 cm circular verde pacay compacta negro/ blanco
C-6 0.5 cm circular verde aterciopelada verde/blanco
C-7 2 cm irregular verde jade / borde amarillo aterciopelada blanco
D-8 3 cm irregular blanco/verde aterciopelada negro
D-9 1.7 cm irregular verde alfalfa aterciopelada negro/blanco
D-10 2.0 cm circular verde oscuro aterciopelada negro
E-12 2.5 cm irregular verde pacay/ borde blanco aterciopelada negro
E-14 1 cm circular verde pasto aterciopelada negro/blanco
E-14b 0.5 cm circular blanco aterciopelada blanco
F-15 1.1 cm circular café /borde verde aterciopelada blanco nueso
F-16 1 cm circular verde pacay aterciopelada blanco/negro
G-18 6 cm irregular negro algodonoso blanco

A1 3.5 cm irregular verde oscuro/borde amarrillo/contorno naranja compacta naranja ladrillo


IDENTIFICACION MICROSCOPICA
TIPO OBSERVACIONES FOTOGRAFIA

A1 Penicillun

A-1* Penicillun
TIPO OBSERVACIONES FOTOGRAFIA

D-9 Alternaria

E-14 Penicillum
D-8 Alternaria

B-3 Alternaria
D-10 Alternaria

G-18 No Identificado
F-15 No Identificado

E-14B No Identificado
B-4 Aspergillus

E-12 No Identificado
A-2 *Sclerotium

F-16 *Sclerotium