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Diagnosticadores

para
Química Clínica
Microbiología

Empresa de Producción de Biológicos “Carlos J. Finlay”

2003
La Empresa de Producción de Biológicos “Carlos J.
Finlay” produce diagnosticadores para Química Clínica y
Microbiología bajo el cumplimiento de las Buenas
Prácticas y las ISO 9001 del 2000, las que avalan la
calidad de los mismos y permite brindar un producto que
satisfaga las necesidades de nuestros clientes.

Para obtener óptimos resultados en el uso de nuestros


diagnosticadores siga cuidadosamente las instrucciones
descritas en la literatura interior correspondiente.
INDICE

Química Clínica..........................................................4-35

JUEGOS..................................................................................4 -16

ALT-test..............................................................................................4
AST-test..............................................................................................5
Calcio en suero...................................................................................6
CK......................................................................................................7
CK-MB...............................................................................................8
Colestest.............................................................................................9
FAL-test.............................................................................................10
Hierro................................................................................................11
Juego de Reactivos para la determinación de
Cloruro en suero................................................................................12
RapiGluco-Test..................................................................................13
SalicUrea-Test...................................................................................14
Triglitest............................................................................................15
URACID............................................................................................16

SOLUCIONES DE REFERENCIA............................................. 18-22

Juego de Soluciones de referencia de Calcio.....................................18


Juego de Soluciones de referencia de Creatinina...............................19
Juego de Soluciones de referencia de Fósforo...................................20
Juego de Soluciones de referencia de Glucosa..................................21
Juego de Soluciones de referencia de Urea........................................22

MONOREACTIVOS.................................................................... 24-30

Acido Sulfosalicílico 0,0786 mol/L...................................................24


Acido Sulfosalicílico 0,118 mol/L.....................................................25
Benedict Cualitativo..........................................................................26
Biuret.................................................................................................27
Erlich.................................................................................................28
Imbert................................................................................................29
Oxalato de Amonio 0,0703 mol/L.....................................................30
COLORANTES............................................................................ 33-35

Azul Brillante Cresil...................................................................33


Conteo de Eosinófilos.................................................................34
Giemsa. Solución colorante........................................................35

Microbiología.............................................................36-56

Antígeno VDRL..........................................................................36
Antisueros de Enterobacterias....................................................38
Antisueros Flagelares Salmonellas.............................................40

COLORANTES............................................................................ 42-46

Azul de Metileno 0,1 %..............................................................42


Eosina 1%...................................................................................43
Fuschina Básica..........................................................................44
Juego de Tinción de Gram..........................................................45
Lugol Concentrado.....................................................................46

Discos para Antibiograma...........................................................48


Látex FR.....................................................................................55
Látex STAF.................................................................................56
QUÍMICA
CLÍNICA
DIAGNOSTICOS

Test Enzimático (200 determinaciones)


MUESTRA: Suero
CONTENIDO DEL ESTUCHE:
Reactivo 1: ALT/Buffer (3 frascos por 122 mL ) TÉCNICA DE ANÁLISIS
Reactivo 2: ALT/NADH (3 frascos por 14 mL )
ENSAYO ENSAYO
APLICACIÓN: Blanco Muestra
Para la determinación de Alanina-aminotransferasa en suero Reactivo de trabajo - 2 mL
por método enzimático. "PARA USO IN VITRO". Agua purificada 2 mL -
Muestra - 200L
MATERIALES ADICIONALES: Mezclar e incubar a 37 ºC durante 1 min . Medir la
Espectrofotómetro UV para lecturas a 340 nm, variación de densidad óptica por minuto (DO/min)
baño termostatado, micropipetas, pipetas y durante 3 min a 37 ºC contra el blanco a 340 nm.
cronómetro
CÁLCULO DE LA ACTIVIDAD DE ALT:
Actividad (U/L) = DO/min x 1746
PRINCIPIO DEL MÉTODO: Donde:
Reacción enzimática de la Alanina-aminotransferasa Actividad (U/L): actividad de ALT de la muestra.
presente en la muestra, cuya actividad es proporcional DO/min : variación de densidad óptica obtenida en los
a la oxidación del NADH que se cuantifica por 3 min
espectrofotometría, según las reacciones que se
1746: factor de actividad enzimática.
describen a continuación:
ALT
L- alanina + -cetoglutarato Piruvato + INTERVALO DE REFERENCIA:
L-glutamato Hasta 49 U/L a 37 ºC
LDH
Piruvato + NADH + H+ Lactato + NAD+
+ H 2O CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
ALT = Alanina-aminotransferasa Suero Control para enzimas de origen humano con valores
NADH = Dihidronicotinamida-adenina-dinucleótido conocidos de actividad de Alanina-aminotransferasa.
LDH = Lactato deshidrogenasa CV 7 %
NAD+ = Nicotinamida-adenina-dinucleótido MATERIALES DE REFERENCIAS
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y UTILIZADOS:
LIMITACIONES DEL MÉTODO: Suero Control
Precipath U Boehringer Cat. No.188 006
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de Suero Control
Biorad Normal Cat. No. 310-5
actividad de ALT de 15 a 250 U/L Suero Control
Biorad Patológico Cat. No. 315-5
Suero Control
Elitrol Normal Cat. No. 104
Límite de detección: 3 U/L Suero Control
Elitrol Patológico Cat. No 203
Límite de cuantificación: 15 U/L ALMACENAMIENTO:
Densidad óptica del blanco reactivo a 340 nm: De 2 a 8 C
De 1,100 a 1,850 PRECAUCIONES: Los componentes del juego
Interferencias: Concentraciones de hemoglobina contienen azida sódica, manipúlense con cuidado.
superiores a 2g/L y de colesterol superiores a 10,4 mmol/L,
disminuyen la actividad de ALT. Concentraciones de
triglicéridos superiores a 11,4 mmol/L sobrestiman los REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
valores normales de ALT. 1. Bergmeyer,H.U., Horder, M., J. Clin Chem. Clin.
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Y Biochem., 18, (1980), 521.
ESTABILIDAD DE LOS MISMOS: 2. Siest, G. ,Schiele, F.,Galteau M.M et coll., Clin
Chem., 21, (1975), 1077.
Reactivo de trabajo: Mezclar 10 volúmenes del
3. Vassault, A. Gafmeyer, D. et coll., Ann. BIOL.
Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2. Deseche el Clin., 44 (1986),686.
resto del reactivo de trabajo preparado. 4. Wrobleskwski, F. et Ladue, J.S., Proc. Soc. Exp.
Los reactivos una vez abiertos son estables durante Biol. Med.,91 (1956),569.
3 meses conservados de 2 a 8 C

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Código 337.2.030004
EPB “Carlos J. Finlay” Infanta 1162 CP 10300 Teléfono: 870-6016 FAX (537) 8795734
Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
Web: WWW.biofinlay.sld.cu
DIAGNOSTICOS

Test Enzimático (200 determinaciones)


Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3
CONTENIDO DEL ESTUCHE: meses conservados de 2 a 8 C

Reactivo 1: AST/Buffer ( 3 frascos por 122 mL ) MUESTRA: Suero


Reactivo 2: AST/NADH ( 3 frascos por 14 mL )
TÉCNICA DE ANÁLISIS
APLICACIÓN : ENSAYO ENSAYO
Para la determinación de Aspartato-aminotransferasa Blanco Muestra
en suero por método enzimático. "PARA USO IN Reactivo de trabajo - 2 mL
VITRO". Agua purificada 2 mL -
MATERIALES ADICIONALES: Muestra - 200L
Espectrofotómetro UV para lecturas a 340 nm baño Mezclar e incubar a 37 ºC durante 1 min . Medir la
termostatado, micropipetas, pipetas y cronómetro variación de densidad óptica por minuto (DO/min)
durante 3 min a 37 ºC contra el blanco a 340 nm.
PRINCIPIO DEL MÉTODO:
Reacción enzimática de la Aspartato-aminotransferasa CÁLCULO DE LA ACTIVIDAD DE AST:
presente en la muestra, cuya actividad es proporcional Actividad (U/L) = DO/min x 1746
a la oxidación del NADH que se cuantifica por Donde:
espectrofotometría, según las reacciones que se Actividad (U/L): actividad de AST de la muestra.
describen a continuación: DO/min : variación de densidad óptica obtenida en los
AST
L- aspartato + -cetoglutarato oxalacetato +
3 min
L-glutamato 1746: factor de actividad enzimática.
MDH INTERVALO DE REFERENCIA:
oxalacetato + NADH + H+ L-malato +NAD+ Hasta 46 U/L a 37 C
+ H 2O CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
AST = Aspartato-aminotransferasa
NADH = Dihidronicotinamida-adenina-dinucleótido Suero Control para enzimas de origen humano con valores
MDH = Malato deshidrogenasa conocidos de actividad de Aspartato-aminotransferasa.
NAD+ = Nicotinamida-adenina-dinucleótido CV 7 %

CRITERIO DE DESEMPEÑO Y MATERIALES DE REFERENCIAS


LIMITACIONES DEL METODO: UTILIZADOS:
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de Suero Control Precipath U Boehringer Cat. No.188 006
actividad de AST de 5 a 250 U/L Suero Control Biorad Normal Cat. No. 310-5
Límite de detección: 3 U/L Suero Control Biorad Patológico Cat. No. 315-5
Límite de cuantificación: 5 U/L Suero Control Elitrol Normal Cat. No. 104
Suero Control Elitrol Patológico Cat. No 203
Densidad óptica del blanco reactivo a 340 nm:
De 1,10 a 1,85
Interferencias: Concentraciones de hemoglobina ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 ºC
superiores a 1 g/L y de colesterol superiores a 9 mmol/L PRECAUCIONES: Los componentes del juego
disminuyen la actividad de AST Concentraciones de contienen azida sódica, manipúlense con cuidado
triglicéridos superiores a 6,9 mmol/L sobrestiman los valores
normales de AST. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
1. IFCC/EPE Provisional recomendations.Part
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Y 2.Clin. Chim. Acta 80,(1977),F21.
ESTABILIDAD DE LOS MISMOS: 2. Siest, G. ,Schiele, F.,Galteau M.M et coll., Clin
Reactivo de trabajo: Mezclar 10 volúmenes del Chem., 21, (1975), 1077.
Vassault, A. Gafmeyer, D. et coll., Ann. Biol. Clin., 44
Reactivo 1 con 1 volumen del Reactivo 2. Deseche el (1986),686
resto del reactivo de trabajo preparado.

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Código 337.2.030005
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Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
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DIAGNOSTICOS

.120 determinaciones
PREPARACION DE LOS REACTIVOS:
CONTENIDO DEL ESTUCHE: Los reactivos están listos para usar
Reactivo 1: 2, 2 Aminometilpropanol 3,5 mol/L
(2 frascos x 120 mL) Solución Reguladora NOTA:
Reactivo 2: Solución reactivo de color Dejar que los reactivos alcancen la temperatura
(2 frascos por 120 mL) ambiente y homogeneizar perfectamente ante de usar.
Reactivo 3: Calcio 2,5 mmol/L. Solución de referencia
(1 frasco por 3 mL) MUESTRA: Suero
TECNICA DE ANALISIS
APLICACIÓN: Ensayo Ensayo Ensayo
Para la determinación de Calcio en suero por método Blanco Muestra Referencia
colorimétrico de o’cresolftaleína complexona. “PARA Reactivo 3 - - 0,05 mL
USO IN VITRO” Muestra 0,05 mL - -
Reactivo 1 2,00 mL 2,00 mL 2,00 mL
MATERIALES ADICIONALES: Reactivo 2 2,00 mL 2,00 mL 2,00 mL
Agua
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 570 nm 0,05 mL - -
Purificada
Solución de Acido clorhídrico 0,5 mol/L
Leer los valores de absorbancia contra blanco a
570 nm. El color desarrollado es estable 30 min.
PRINCIPIO DEL METODO:
CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
El Calcio forma un complejo violeta con o-
CALCIO
cresolftaleína complexona en medio alcalino que se
Am
mide por espectrofotometría a 570 nm.
Cm = ----------- x Cr
Ar
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y Donde:
LIMITACIONES DEL METODO: Cm: Concentración de Calcio en la muestra (mmol/L)
Linealidad: El reactivo es lineal de 1,98 mmol/L a Am: Absorbancia de la muestra
3,5 mmol/L Ar: Absorbancia de la referencia
Especificidad: No se reportan interferencias con los Cr: Concentración de Calcio en la referencia (mmol/L)
compuestos siguientes: INTERVALO DE REFERENCIA:
Hemoglobina Hasta 1,5 g/L De 2,02 a 2,60 mmol/L
Bilirrubina Hasta 0,2 g/L 342 mol/L
Magnesio Hasta 0,1 g/L 4,113 mmol/L CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Fosfatos Hasta 0,2 g/L 6,458 mmol/L Suero control con valores conocidos de Calcio
Proteínas Hasta 1,5 g/L CV 5%.

Los anticoagulantes quelantes de Calcio (EDTA, ADVERTENCIA:


oxalato, etc) interfieren en la determinación Tratar toda la cristalería con ácido clorhídrico
Recuperación: 99,5 % de recobro 0,5 mol/L antes de ser utilizada ya que esta reacción
Precisión: Repetibilidad CV = 1,72% puede dar interferencia con otros iones metálicos.
Reproducibilidad: CV = 2,29%
Exactitud: y= 0,924x + 0,31 ALMACENAMIENTO:
r= 0,983 De 2 a 8 ºC
Limitaciones del método: Debe emplearse una curva
de calibración con valores entre 0,1 y 0,2 g/L para
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
evitar desviaciones de la Ley Lambert-Beer al realizar
1. Barnett, R.N. etal (1973) Amer. J. Clin. Path. 59:8
los cálculos.

Código 337.5.330910
EPB “Carlos J. Finlay” Infanta 1162 CP 10300 Teléfono: 870-6016 FAX (537) 8795734
Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
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DIAGNOSTICOS

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DIAGNOSTICOS

Test Enzimático  Mezclar 4 volúmenes del Reactivo 1 con 1


volumen del Reactivo 2.
(300 determinaciones)
Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3 meses
conservados de 2 a 8 º C
CONTENIDO DEL ESTUCHE:
Reactivo 1: CK/HK (3 frascos por 80 mL) MUESTRA: Suero
Reactivo 2: CK/G6PDH (3 frascos por 20 mL) TÉCNICA DE ANÁLISIS
Ensayo
APLICACIÓN PROPUESTA: Muestra
Para la determinación de Creatina-cinasa en suero por Reactivo de trabajo 1 mL
método enzimático."PARA USO IN VITRO". Muestra 40 L
Mezclar e incubar a 37 0C durante 2 min. Leer la
MATERIALES ADICIONALES: variación de absorbancia de la muestra durante 3 min
Espectrofotómetro para lecturas a 340 nm, contra agua purificada a 340 nm a 37 °C
micropipetas, pipetas, baño termostatado y cronómetro
CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE CK
PRINCIPIO DEL MÉTODO: U/L = Abs/min x 4127
Determinación de la actividad de Creatina-cinasa (CK) Donde:
en suero, midiendo la velocidad de formación de U/L: Actividad enzimática de CK en la muestra
NADPH a 340 nm, según el siguiente esquema de Abs/min: Variación de la absorbancia de la muestra
reacciones: por minuto
Creatina-cinasa
Creatina fosfato + ADP Creatina + ATP 4127: Factor de actividad enzimática

Hexocinasa INTERVALO DE REFERENCIA:


Hombres: 24 a 195 U/L (37 oC)
ATP + Glucosa ADP + Glucosa 6 fosfato
Mujeres: 24 a 170 U/L (37 oC)
Glucosa-6-fosfato-1-deshidrogenasa
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Glucosa 6 fosfato + NADP Suero Control para enzimas de origen humano con
Gluconato 6 fosfato + NADPH + H+ valores de actividad de Creatina-cinasa comprendidos
dentro del intervalo de referencia declarado.
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y CV 10 %
LIMITACIONES DEL METODO:
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de MATERIALES DE REFENCIA UTILIZADOS
concentración de Creatina-cinasa de 10 a 1800 U/L Elitrol I Cat. No CONT - 0060
Límite de detección: 1 U/L Elitrol II Cat. No CONT - 0160
CK LINTROL SIGMA C-1773
Límite de cuantificación: 10 U/L CK ISOTROL SIGMA C-0153
Densidad óptica del blanco reactivo a 340 nm:
Menor que 0,600 ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 °C
Interferencias: Concentraciones de triglicéridos
mayores de 6,84 mmol/L y de inmunoglobulinas de PRECAUCIONES: Los componentes del juego
40 g/L o más, disminuyen la concentración de contienen azida sódica, manipúlense con cuidado.
Creatina-cinasa en el suero humano
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO 1. Muller, m., Sterz, f., Binder, m., Hirsch, m.m. et coll.
Y ESTABILIDAD DEL MISMO: Creatine kinase and creatine kinase-mb: release after
nontraumatic cardiac arrest. Am. J. Cardiol. 1996, 77, 581.
2. Lott, J. A., Heinz, J.W. et Reger, K. A. Time Changes of
 Añadir el contenido del frasco del Reactivo 2 Creatine Kinase and Creatine Kinase-MB Isoenzyme versus
al frasco del Reactivo 1 .Estabilidad 15 días de 2 Discrimation Values in the Diagnosis of Acute Myocardial
a 8 º C.
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DIAGNOSTICOS

Infarction: What is the Optimal Method for Displaying the


Data?. Eur.J.Clin.Chem. Clin. Biochem. 1995, 33/8, 491

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DIAGNOSTICOS

Test Enzimático (300 determinaciones) PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE


TRABAJO Y ESTABILIDAD DEL MISMO:
CONTENIDO DEL ESTUCHE:  Añadir el contenido del frasco del Reactivo 2
Reactivo 1: CK-MB/AB (3 frascos por 80 mL) al frasco del Reactivo1
Reactivo 2: CK-MB/G6PDH (3 frascos por 20 mL)  Mezclar 4 volúmenes del Reactivo 1
con 1 volumen del Reactivo 2.
APLICACIÓN : Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3
Para la determinación de Creatina-cinasa 2 (CK-MB) meses conservados de 2 a 8 °C
en suero por método enzimático."PARA USO IN
VITRO". MUESTRA: Suero
TÉCNICA DE ANÁLISIS
MATERIALES ADICIONALES: Ensayo
Espectrofotómetro para lecturas a 340 nm, Muestra
micropipetas, pipetas, baño termostatado y Reactivo de trabajo 1 mL
cronómetro. Muestra 40 L
PRINCIPIO DEL MÉTODO: Mezclar e incubar a 37 °C durante 2 min y leer la
La determinación de Creatina-cinasa 2 en suero se variación de absorbancia de la muestra durante
basa en la inhibición específica de las subunidades 3min a 340 nm contra agua purificada a 37 °C
CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE CK-MB.
CK-M por anticuerpos policlonales anti CK-MM. Los
U/L = Abs/min x 8254
anticuerpos inhiben tanto la isoenzima MM como las Donde:
subunidades M correspondientes a la CK-MB. La U/L: Actividad de CK-MB en la muestra
determinación de la actividad enzimática de las Abs/min: Variación de absorbancia de la muestra
subunidades B se realiza midiendo la velocidad de por minuto
formación de NADPH a 340 nm según el esquema de 8254: Factor de actividad enzimática
reacciones siguiente:
INTERVALO DE REFERENCIA:
Creatina-cinasa (CK-MB x 100)
Creatina fosfato + ADP Creatina + ATP % CK-MB =----------------------: 6-25%
Total CK
Hexocinasa
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
ATP + Glucosa ADP + Glucosa 6 fosfato
Suero Control para enzimas de origen humano con valores
de actividad de CK-MB comprendidos dentro del rango
Glucosa-6-fosfato-1-deshidrogenasa
declarado.
Glucosa 6 fosfato + NADP Glucosa 6 fosfato +
CV 10 %
NADPH + H +
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y LIMITACIONES MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
CK-MB LINTROL SIGMA C-5803
DEL METODO: CK-MB ISOTROL SIGMA C-5410
Precisión: CV ≤ 10 %
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de
concentración de CK-MB de 10 a 600 U/L
ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 0C
Límite de detección: 1 U/L PRECAUCIONES: Los componentes del juego
Densidad óptica del blanco reactivo a 340 nm: 0,600 contienen azida sódica, manipúlense con cuidado.
Interferencias: Concentraciones de triglicéridos
mayores de 6,84 mmol/L y de inmunoglobulinas de REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
40 g/L o más, disminuyen la concentración de CK-MB 1. Wong, S.S. Strategic Utilization of Cardiac Markers for
the Diagnosis of Acute Myocardial Infarction. Annals of
en el suero humano. El nivel posible de interferencia
Clinical Laboratory Science. 1996, 26/4, 301.
por presencia de la macro CK tipo 2 y la CK-BB es 2. Wu, A.H.B., Feng, Y.J., Contois, J.H. et Pervaiz, S.
menor que el 0,48 % o sea, en no más de 5 muestras Comparison of Myoglobin, CreatineKinase-MB, and Cardiac
de cada 100, que correspondan a pacientes con Troponin I for Diagnosis of Acute Myocardial Infarction.
intervenciones quirúrgicas de corazón o con Annals of Clinical and Laboratory Science. 1996, 26/4, 291.
enfermedades neoplásicas, se detecta incremento en
los niveles de estas isoenzimas.

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Test Enzimático – Colorimétrico Los reactivos están listos para usar


(360 Determinaciones)
MUESTRA: Suero
CONTENIDO DEL ESTUCHE
Reactivo 1: Reactivo de Colesterol Técnica de Análisis
(6 frascos por 120 mL)
ENSAYO ENSAYO ENSAYO
Reactivo 2: Colesterol 5,17 mmol/L
Blanco Muestra Referencia
Solución de referencia
Reactivo de trabajo 2 mL 2 mL 2 mL
(1 frasco por 5 mL) Agua purificada 20L - -
Solución de referencia - - 20L
APLICACIÓN PROPUESTA Muestra - 20L -
Para la determinación de Colesterol en suero Mezclar e incubar a 37ºC, durante 5 min. Leer los
por método enzimático. “PARA USO IN valores de absorbancia de la muestra y la referencia
VITRO” contra el blanco a 500 nm (492 a 550). El color
desarrollado es estable 60 min
MATERIALES ADICIONALES
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
500 nm (492 a 550) COLESTEROL.
Cm = Am x Cr/Ar
PRINCIPIO DEL METODO: Donde:
Reacción enzimática del Colesterol presente en Cm: Concentración de la muestra (mmol/L)
la muestra, según las reacciones que se Am: Absorbancia de la muestra
describen a continuación, formándose un Ar: Absorbancia de la referencia
complejo coloreado que se cuantifica por Cr: Concentración de la referencia (mmol/L)
espectrofotometría.
CE
Esteres de Colesterol Colesterol + ácidos grasos INTERVALO DE REFERENCIA:
CO De 3,87 a 6,71 mmol/L
Colesterol + O2 4-colesten-3-ona + H2O2
CONTROL INTERNO DE LACALIDAD:
POD
2H2O2 + Fenol + 4 aminoantipirina quinonimina
Suero Control de lípidos.
roja + 4H2O CV 5%
CE: Colesterol esterasa
CO: Colesterol oxidasa MATERIALES DE REFENCIA UTILIZADOS
POD: Peroxidasa ELICAL. Firma Elitech Cat. No Cali-0500
Elitrol I Cat. No CONT-0060
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y Elitrol II Cat. No CONT-0160
LIMITACIONES DEL METODO:
LINEALIDAD: El reactivo es lineal en rango de ALMACENAMIENTO:
concentración de Colesterol de 0,5 a 15,51 mmol/L Para el producto intacto: de 2 a 8 ºC
Limite de detección: 0,07 mmol/L
Interferencias : No hay interferencia de triglicéridos El reactivo en uso es estable al menos un mes de
hasta una concentración de 5,7 mmol/L, glucosa
2a8ºC
55 mmol/L, ácido ascórbico hasta 0,28 mmol/L y
hemoglobina hasta 5 g/L.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. Allain C. C y colaboradores., Clin.
PREPARACION DEL REACTIVO: Chem., 20, (1974), 470

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EPB “Carlos J. Finlay” Infanta 1162 CP 10300 Teléfono: 870-6016 FAX (537) 8795734
Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
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DIAGNOSTICOS

 Mezclar 4 volúmenes del Reactivo 1 con 1


Test Enzimático volumen del Reactivo 2.
(150 determinaciones) Los reactivos una vez abiertos son estables durante 3
meses conservados de 2 a 8 º C
CONTENIDO DEL ESTUCHE: MUESTRA: Suero. Evitar el uso de anticoagulantes
Reactivo 1: FAL /Dietanolamina 1,427 mol/L como el citrato, el oxalato y el EDTA.
(3 frascos por 80 mL)
Reactivo 2: FAL/p-nitrofenilfosfato 50 mmolL TÉCNICA DE ANÁLISIS
(3 frascos por 20 mL) ENSAYO ENSAYO
Blanco Muestra
APLICACIÓN : Reactivo de trabajo - 2 mL
Para la determinación de Fosfatasa alcalina en suero Agua purificada 2 mL -
por método cinético. "PARA USO IN VITRO". Muestra - 40L
Mezclar e incubar a 37 ºC durante 1 min. Medir la
MATERIALES ADICIONALES:
variación de densidad óptica por minutos (DO/min)
Espectrofotómetro UV para lecturas a 405 nm, Baño
durante 3 min a 37 ºC contra el blanco a 405 nm.
termostatado, Micropipetas, pipetas y Cronómetro
CÁLCULO DE LA ACTIVIDAD DE
PRINCIPIO DEL MÉTODO: FOSFATASA ALCALINA:
Reacción cinética de la Fosfatasa alcalina presente en Actividad (U/L) = DO/min x 2750
la muestra, cuya actividad es proporcional al p- Donde:
nitrofenol que se produce debido a la hidrólisis del Actividad (U/L): actividad de Fosfatasa alcalina en la
p-nitrofenilfosfato, que se determina muestra.
espectrofotometricamente según las reacciones que se DO/min : variación de densidad óptica obtenida en los 3
describen a continuación: min.
Fosfatasa 2750: factor de actividad enzimática.
alcalina
p-nitrofenilfosfato + H2O p- nitrofenol + INTERVALO DE REFERENCIA:
fosfato inorgánico Niños : De 180 a 1200 U/L ( 37 C)
Adultos: De 100 a 290 U/L ( 37 C)
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y
LIMITACIONES DEL METODO: CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de
Suero Control para enzimas de origen humano con
actividad de Fosfatasa alcalina de 10 a 700 U/L.
valores conocidos de actividad de Fosfatasa alcalina.
Límite de detección: 7,5 U/L
CV 5 %
Límite de cuantificación: 10 U/L
Densidad óptica del blanco reactivo a 405 nm :
MATERIALES DE REFERENCIAS
De 0,200 a 1,100
Interferencias: Concentraciones de hemoglobina UTILIZADOS:
Suero Control Precinorm U Boehringer Cat. No.188 027
superiores a 4g/L, disminuyen la actividad de Suero Control Precipath U Boehringer Cat. No.188 006
Fosfatasa alcalina en sueros normales. Suero Control Seronorm de Nycomed Cat. No.406 067
Suero Control Elitrol Normal Cat. No. 104
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Y Suero Control Elitrol Patológico Cat. No 203
ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:
 Añadir el contenido del frasco del Reactivo 2 ALMACENAMIENTO:
al frasco de Reactivo 1. De 2 a 8 C
Estabilidad 30 días de 2 a 8 º C o PRECAUCIONES: Los componentes del juego
contienen azida sódica, manipúlense con cuidado

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EPB “Carlos J. Finlay” Infanta 1162 CP 10300 Teléfono: 870-6016 FAX (537) 8795734
Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
Web: WWW.biofinlay.sld.cu
DIAGNOSTICOS
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: 2. Kuwana, T. y Rosalki,S.B.J.Clin. Pathol.44, (1991),817.
1. Bessey,O.,Lowry, O.H. y Brock, M.J. J. Biol. Chem. 164 Vassault, A. Gafmeyer, D. et coll., Ann. Biol.. Clin., 44 (1986),686
(1946),321.

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DIAGNOSTICOS

.Test Colorimétrico 480 determinaciones MUESTRA: Suero


TÉCNICA DE ANÁLISIS
CONTENIDO DEL ESTUCHE: ENSAYO ENSAYO ENSAYO
Reactivo 1: Guanidina HCl 4,5 mol/L Blanco Muestra Referencia
(4 frascos por 120 mL) Reactivo de trabajo 1 mL 1 mL 1 mL
Reactivo 2: Acido ascórbico (1 frasco por 2 g) Agua purificada 200L - -
Reactivo 3: Ferrozina 41,0 mmol/L Muestra - 200L -
(1 frasco por 26 mL) Reactivo 4 - - 200L
Reactivo 4: Hierro 17,9 mol/L Solución de referencia ( Mezclar y leer la densidad óptica de la muestra (DO2)
1 frasco por 5 mL ) y la referencia (DO1) contra blanco a 560 nm
ENSAYO ENSAYO ENSAYO
APLICACIÓN : Blanco Muestra Referencia
Para la determinación de Hierro en suero por método
colorimétrico." PARA USO IN VITRO".
Reactivo 3 50 L 50 L 50 L
MATERIALES ADICIONALES: Mezclar y leer la densidad óptica de la muestra (DO4)
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 560 nm, y la referencia (DO3) contra blanco a 560 nm El color
micropipetas, pipetas, baño termostatado y cronómetro es estable 1 hora.
PRINCIPIO DEL MÉTODO: CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE
El hierro sérico se libera de su unión con su proteína HIERRO:
transportadora específica, la transferrina; el método se basa (DO4 - DO2)
en la presencia de guanidina en el reactivo, en forma de Conc = ------------------- x n
hidrocloruro, con el objetivo de desnaturalizar las proteínas, (DO3 - DO1)
particularmente la transferrina, con la liberación de la
Donde:
cantidad máxima de Fe (III), el cual es reducido por el ácido
ascórbico a Fe (II), quien reacciona con el cromógeno n = 17,9 mol/L
Ferrozina basado en el siguiente esquema reaccionante:
INTERVALO DE REFERENCIA:
Proteínas + Guanidina HCl Proteínas + Fe 3+ Hombres y Mujeres de 8,95 a 30 mol/L
desnaturalizadas
Acido ascórbico CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Fe3+ + 1e- Fe2+ Suero Control con valores de concentración conocidos
Fe 2+ + Ferrozina Complejo coloreado de Hierro a niveles normales y patológicos.
máx = 560 nm
CV 5 %
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y LIMITACIONES MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
PN: Suero Control Precinorm U Boehringer
DEL METODO:
Cat. No 188 027
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de concentración de
PP: Suero Control Precipath U Boehringer
Hierro de 5,549 a 161,1 mol /L
Cat. No 188 006
Límite de detección: 0,150 mol /L
EN: Suero Control Normal SEPPIM Cat. No 104
Límite de cuantificación: 2,685 mol/L
EP: Suero Control Patológico SEPPIM Cat. No 203
Densidad óptica del blanco reactivo a 560 nm:
SN: Suero Control SERONORM de NYCOMED
menor que 0,050
Cat. No 406 067
Interferencias: Concentraciones de colesterol mayores de
2g/L y la presencia de hemoglobina interfieren
considerablemente en la determinación de Hierro en el suero ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 ° C
humano. PRECAUCIONES: Tratar la cristalería con solución de
PREPARACIÓN DEL REACTIVO Y HCl 1,2 mol/L y no trabajar con materiales metálicos. El
ESTABILIDAD DEL MISMO: reactivo 1 contiene guanidina por lo que debe usarse
Reactivo de trabajo: Disolver 150 mg del Reactivo 2 guantes para su manipulación. Mantener el frasco del
con 50 mL del Reactivo 1 Reactivo 2 hermeticamente cerrado.
Estabilidad del reactivo de trabajo: 15 días de 2 a 8°C REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
1. Stookey,L.L. Ferrozine-a new spectrophotometric reagent
Reactivos 3 y 4: Listos para usar for iron. Anal. Chem. 1970,42,779.
Los reactivos una vez abiertos son estables durante Yamanishi, H., Kimura, S., Yamaguchi, Y. and Yanagihara, T. Fully
3 meses conservados de 2 a 8 C automated measurement of total iron-binding capacity in serum.
Clin. Chem. 1997, 43:12,2413
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.100 determinaciones TECNICA DE ANALISIS

CONTENIDO DEL ESTUCHE: 1. Pipetear en tubos para ensayos o en frascos de


fondo plano 0,2 mL de suero y 1,8 mL de agua
Reactivo 1: Difenilcarbazona (1 frascos por 30 mg) purificada
Reactivo 2: Nitrato de Mercurio (2 frascos por 100 2. Añadir 4 gotas del reactivo de trabajo y titular
mL) con el Reactivo 2 hasta la aparición de una
Reactivo 3: Cloruro (1 frasco por 50 mL) coloración azul violeta estable.
3. Repetir los pasos 1 y 2 pero usando 2 mL del
APLICACIÓN: Reactivo 3 en lugar de suero y agua purificada.
Este paso debe efectuarse diariamente y cuando
Para la determinación de Cloruro en suero por método cambie el analista
de Schales, O. And Schales. “PARA USO IN VITRO”
CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
MATERIALES ADICIONALES: CLORURO
Cr x Vm
Pipetas, tubos para ensayos Cm = ---------------- x 10
Vr
PRINCIPIO DEL METODO:
Donde:
El Cloruro presente en el plasma o suero se titula con Cm: Concentración de la muestra (mmol/L)
una solución de nitrato de mercurio en presencia de Vm: Volumen de la solución de nitrato de mercurio
difenilcarbazona como indicador. consumido por la solución por la muestra
Vr: Volumen de la solución de nitrato de mercurio
El punto final se aprecia por la aparición de una consumido por la solución de referencia
coloración azul violeta estable. Cr: Concentración de la referencia
10: Factor de dilución

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y INTERVALO DE REFERENCIA:


ESTABILIDAD DE LOS MISMOS:
De 98 a 108 mmol/L
Reactivo de trabajo: Completar el Reactivo 1 con
30 mL de alcohol etílico clase A. Guardar en frasco CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
ámbar de 2 a 8 ºC. Estable 1 mes
Los Reactivos 2 y 3 están listos para usar Suero control de parámetros químicos.

NOTA: ALMACENAMIENTO:

Dejar que los reactivos alcancen la temperatura De 2 a 8 ºC


ambiente y homogeneizar perfectamente ante de usar.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
MUESTRA: Suero o plasma
Manual of Routine Methods in Clinical Chemestry for use in
intermediate Laboratories. Lab 78

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/Enzimático- Colorimétrico MUESTRA: Suero
100 determinaciones

CONTENIDO DEL ESTUCHE: TECNICA DE ANALISIS


4 frascos por 120 mL
Ensayo Ensayo Ensayo
APLICACIÓN: Blanco Muestra Referencia
Reactivo de
4,0 mL 4,0 mL 4,0 mL
Para la determinación de Glucosa en suero por método Trabajo
enzimático colorimétrico. “PARA USO IN VITRO” Muestra - 0,04 mL -
Solución de
MATERIALES ADICIONALES: - - 0,04 mL
referencia
Agua
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 620 nm 0,04 mL - -
purificada
Solución de referencia de Glucosa
Baño termostatado Mezclar e incubar a 37 ºC durante 10 min. Leer los
valores de absorbancia del suero y la referencia contra
PRINCIPIO DEL METODO: blanco a 505 nm. Color desarrollado estable 1 h.
Reacción enzimática de la Glucosa presente en la CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
muestra, según las reacciones que se describen a
GLUCOSA
continuación, formándose un complejo coloreado que
Am
se cuantifica por espectrofotometría.
Cm = ----------- x Cr
Ar
GOD
Glucosa + O2 Acido glucónico + H2 O2
Donde:
Cm: Concentración de la muestra (mmol/L)
Am: Absorbancia de la muestra
Ar: Absorbancia de la referencia
POD
Cr: Concentración de la referencia (mmol/L)
H2 O2 + 4 aminofenazona Quinonimina
+ H2O
INTERVALO DE REFERENCIA:
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y
De 4,20 a 6,11 mmol/L
LIMITACIONES DEL METODO:
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de 2,0 a
22,0 mmol/L
Suero control de parámetros químicos.
CV < 5
PREPARACION DE LOS REACTIVOS:
ALMACENAMIENTO:
El reactivo está listo para usar
De 2 a 8 ºC
ADVERTENCIA:
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
El reactivo puede desarrollar una ligera coloración
rosada que no afecta su funcionamiento. Se 1. Trinder, P. Ann. Biochem 6.24, (1969)

recomienda no usarlo cuando las lecturas del blanco 2. Henry, RJ,: Cannon, D.C; Winkelman, J. W.: Química
Clínica. Bases yy Técnicas. Editorial Jims. 2da Edición. Tomo
sean superiores a 0,16 II (1980)

16
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Test Enzimático – Colorimétrico de Solución Reactivo Color (Reactivo 3). Mezclar
50 determinaciones suavemente por inversión.
Reactivo 1 y 4: Listos para usar
CONTENIDO DEL ESTUCHE: ADVERTENCIA:
Al preparar el reactivo de trabajo no debe agitarse pues
Reactivo 1: Urea, solución de referencia podría causar la desnaturalización de la enzima.
( 1 frasco por 2 mL)
Reactivo 2: Ureasa, liofilizada de 4 a 10 U/mL MUESTRA: Suero o plasma
(1 bulbo)
Reactivo 3: Solución reactivo color TECNICA DE ANALISIS
(1 frasco por 100 mL)
Reactivo 4: Solución reactivo alcalino Ensayo Ensayo Ensayo
( 1 frasco por 100 mL) Blanco Muestra Referencia
Agua
APLICACIÓN: 0,02 mL - -
purificada
Muestra - 0,02 mL -
Para la determinación de Urea en suero por método Reactivo 1 - - 0,02 mL
enzimático colorimétrico. “PARA USO IN VITRO”
Reactivo de
2,0 mL 2,0 mL 2,0 mL
Trabajo
MATERIALES ADICIONALES:
Mezclar e incubar a 37 ºC durante 5 min.
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 620 nm, Reactivo 4 2,0 mL 2,0 mL 2,0 mL
baño termostatado, pipetas.
Mezclar e incubar a 37 ºC durante 5 min. Leer los
PRINCIPIO DEL METODO: valores de absorbancia de la muestra y la referencia
contra blanco a 620 nm. Color desarrollado estable 1h.
Reacción enzimática de la Urea presente en la muestra,
según las reacciones que se describen a continuación, CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
formándose un complejo coloreado que se cuantifica UREA
por espectrofotometría. Am
Cm = ----------- x Cr
Ureasa Ar
Urea + 2H2O Acido Carbónico + 2NH3 Donde:
37 ºC Cm: Concentración de la muestra (mmol/L)
Am: Absorbancia de la muestra
Ar: Absorbancia de la referencia
Na2Fe (CN)5NO Cr: Concentración de la referencia (mmol/L)
NH3 + NaCLO + Salicilato de sodio Indofenol
NaOH + H 2O INTERVALO DE REFERENCIA:
De 1,7 a 8,3 mmol/L
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y
LIMITACIONES DEL METODO: CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Suero control de parámetros químicos.
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de 1,5 a CV < 7 %
26,0 mmol/L
ALMACENAMIENTO:
PREPARACION DE LOS REACTIVOS: De 2 a 8 ºC
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Reactivo de trabajo: Tomar un bulbo de la enzima 1. Tabbacco. A, Melattini, F; Moda, E; Tarli, P: Clin.
(Reactivo 2) y restituir con el contenido de un frasco Chemn, 25, 336 a 337, (1979)

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2. Henry, RJ,: Cannon, D.C; Winkelman, J. W.: Química
Clínica. Bases yy Técnicas. Editorial Jims. 2da Edición. Tomo
II (1980)

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DIAGNOSTICOS
Test Enzimático – Colorimétrico PREPARACION DEL REACTIVO Y
(240 Determinaciones) ESTABILIDAD DEL MISMO:
Mezclar 20 volúmenes del Reactivo 1 con un
CONTENIDO DEL ESTUCHE volumen del Reactivo 2.
Reactivo 1: Triglicéridos/LPL Estabilidad: 1 mes de 2 a 8 °C
(4 frascos por 122 mL) MUESTRA: Suero
Reactivo 2: Triglicéridos/GPO TÉCNICA DE ANÁLISIS
(1 frasco por 26 mL) ENSAYO ENSAYO ENSAYO
Reactivo 3: Glicerol 2,28 mmol/L Blanco Muestra Referencia
Solución de referencia Reactivo de trabajo 2 mL 2 mL 2 mL
Agua purificada 20L - -
(1 frasco por 5 mL)
Solución de referencia - - 20L
APLICACIÓN PROPUESTA
Muestra - 20L -
Para la determinación de Triglicéridos en suero
Mezclar e incubar a 37ºC, durante 5 min. Leer los
por método enzimático. “PARA USO IN VITRO”
MATERIALES ADICIONALES valores de absorbancia de la muestra y la
referencia contra el blanco a 546 nm (520 a 570).
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 546
nm (520 a 570) El color desarrollado es estable 30 min
CALCULO DE LA CONCENTRACION DE
PRINCIPIO DEL METODO:
Reacción enzimática de los Triglicéridos presente en la TRIGLICERIDOS.
muestra, según las reacciones que se describen a Cm = Am x Cr/Ar
continuación, formándose un complejo coloreado que Donde:
se cuantifica por espectrofotometría. Cm: Concentración de la muestra (mmol/L)
LPL Am: Absorbancia de la muestra
Triglicéridos + H2O Glicerol + ácidos grasos Ar: Absorbancia de la referencia
GK Cr: Concentración de la referencia (mmol/L)
Glicerol + ATP Glicerol-3-fosfato +ADP
Mg + + INTERVALO DE REFERENCIA:
Hombres: de 0,68 a 1,88 mmol/L
GPO Mujeres: de 0,46 a 1,60 mmol/L
Glicerol-3-fosfato + O2 Fosfato Dehidroxiacetona CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
+H2O2 Suero Control de lípidos.
POD CV 5%
2H2O2 + 4 aminoantipirina +ADPS quinonimina
MATERIALES DE REFERENCIA
roja + 4H2O
ADPS=N-Ethyl-N-sulfopropyl-n-methoxyaniline UTILIZADOS
¡
LPL = lipoprotein lipasa ELICAL. Firma Elitech Cat. No Cali-0500
GK = Glicerol Kinasa Elitrol I Cat. No CONT-0060
GPO = Glicerol-3-fosfato oxidasa Elitrol II Cat. No CONT-0160
POD = Peroxidasa
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y ALMACENAMIENTO:
LIMITACIONES DEL METODO: Para el producto intacto: de 2 a 8 C
LINEALIDAD : El reactivo es lineal en un rango
de concentración de Triglicéridos de 0,7 a REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
15,10 mmol/L 1. Buccolo G., David M, Clin Chem., 19, (1973), 476
Limite de detección : 0,09 mmol/L 2. Werner M., Grabielson D. G., Eastman G., Clin.
Interferencias :Concentraciones de bilirrubina de Chem., 21, (1981)
150,5 mol/L o más y de 0,28 mmol/L de ácido Annoi G., Bottasso B.M., Ciaci D., Donato M.F., Tripoli A.,
ascórbico o más, disminuye la concentración de Lab J. J. Res. Lab Med., (1982), 11
triglicéridos en el suero humano.

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DIAGNOSTICOS
5Test Enzimático – Colorimétrico PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE
(120 Determinaciones) TRABAJO Y ESTABILIDAD DEL MISMO:
Reactivo de trabajo: Restituir el volumen de 1 bulbo
CONTENIDO DEL ESTUCHE: de Reactivo 1 con 60 mL de Reactivo 2. Mezclar
Reactivo 1: Urato-oxidasa/POD (2 bulbos liofilizados) suavemente por inversión.
Reactivo 2: Solución reguladora HEPES 50 mmol/L Estabilidad: 10 días de 2 a 8 °C
(2 frascos por 60mL) MUESTRA: Suero
Reactivo 3: Acido úrico 297mol/L TÉCNICA DE ANÁLISIS
Solución de referencia (1 frasco por 2 mL) Ensayo Ensayo Ensayo
Blanco Muestra Referencia
APLICACIÓN : Reactivo de 1 mL 1 mL 1 mL
Para la determinación de Acido úrico en suero por
Trabajo
método enzimático. "PARA USO IN VITRO".
Agua 25 L - -
Purificada
MATERIALES ADICIONALES:
Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a 505 nm, Muestra - 25 L -
Micropipetas, pipetas, tubos para ensayo y cronómetro Reactivo 3 - - 25 L

PRINCIPIO DEL MÉTODO: Mezclar y dejar en reposo durante 15 min de 20 a 25 °C Leer


Método enzimático específico para la determinación la densidad óptica de la muestra y la referencia contra
Reactivo de trabajo a 505 nm
de Acido úrico en suero, medido
El color es estable 1 h.
espectrofotometricamente a 505 nm , donde
intervienen las enzimas Urato-oxidasa y Peroxidasa.
CÁLCULO DE LA CONCENTRACIÓN
El mismo se basa en el siguiente esquema de
reacciones:
DE ACIDO URICO.
Cm = Am x Cr / Ar
Urato-oxidasa Donde:
Acido úrico + 2 H2O + O2 Alantoína + Cm: Concentración de Acido úrico en la muestra
(mol/L)
H2O2 + CO2 Am: Absorbancia de la muestra
Peroxidasa
Cr: Concentración de Acido úrico en la Solución de
H2O2 + 4 aminofenazona + DHBS referencia (mol/L)
Ar: Absorbancia de la Solución de referencia
Quinoneimina roja
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y INTERVALO DE REFERENCIA:
LIMITACIONES DEL METODO: Hombres : 202,26 - 356,93 mol/L
Mujeres: 142,77 - 339,08 mol/L
Linealidad: El reactivo es lineal en un rango de
concentración de Acido úrico de 119 a 714 mol/L CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Límite de detección: 60 mol/L Suero control con valores conocidos de Acido úrico
Densidad óptica del blanco reactivo a 505 nm: CV 7 %
Menor que 0.160
Interferencias: Sueros ictéricos o con hemólisis MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
visible o intensa producen valores falsamente Suero control Ex (EPB "Carlos J Finlay")
aumentados; el fluoruro inhibe la uricasa, y Suero control Precipath U (Boehringer Manheim
medicamentos como calmantes o analgésicos Ref 171760)
fuertemente reductores (ácido ascórbico) interfieren en ALMACENAMIENTO: De 2 a 8 °C
la reacción consumiendo el peróxido de hidrógeno, lo
que provoca la obtención de valores falsamente REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
disminuidos. En este caso debe suspenderse la 1. Trinder P., Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969)
medicación 12 h antes de la toma de muestra. 2. Triverdi R.C., Rebar L., Berka E., Strong L., Clin. Chem.,
24, (1978), 1908

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DIAGNOSTICOS
3. International Federation of Clinical Chemistry-
Clin.Chim.Acta 87/3:459 F(1978)

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SOLUCIONES
DE
REFERENCIA
CONTENIDO DEL ESTUCHE: soluciones de referencia y sus correspondientes
5 frascos de soluciones de referencia de Calcio de absorbancias, comprobando el valor de r2 sea > 0,98
concentraciones diferentes. para un rango de concentraciones de Calcio de 1,75 a
2,75 mmol/L
Calcio 1,75 mmol/L Solución de En el caso que se determine la concentración de una
R1 1x5 mL
referencia muestra realice los siguientes cálculos:
Calcio 2,00 mmol/L Solución de
R2 1x5 mL
referencia
Calcio 2,25 mmol/L Solución de
R3 1x5 mL 5
Ar
referencia i =1
Calcio 2,50 mmol/L Solución de Donde:
R4 1x5 mL Cr: Concentración de las soluciones de referencia en
referencia
Calcio 2,75 mmol/L Solución de mmol/L
R5 1x5 mL Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia
referencia

APLICACIÓN PROPUESTA: Cm= Am x cot()=mmol/L de Calcio


Para preparar curvas de calibración en la determinación
de Calcio, por el método de o–Cresolftaleína Donde:
complexona . “PARA USO IN VITRO” Cm: Concentración de Calcio
Am: Absorbancia de la muestra
MATERIALES ADICIONALES: cot()=Cotangente de la curva de calibración.
- Juego de reactivos para la determinación de
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Calcio en suero
Linealidad: el coeficiente de determinación debe ser
- Agua purificada
r2 > 0,98 para un rango de concentraciones de Calcio de
- Solución de Acido clorhídrico 0,5 mol/L
1,75 a 2,75 mmol/L
- Espectrofotómetro visible o colorímetro
fotoeléctrico MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
Se asigna el valor de la concentración de las soluciones
PRINCIPIO DEL MÉTODO
de referencia, utilizando una solución patrón de nitrato
El método se basa en que el Calcio forma un complejo
de calcio 6,09 mmol/L calidad Spectrosol, BDH; a
violeta con la o-Cresolftaleína complexona en medio
partir de la cual se prepara una curva de calibración y se
alcalino que se mide espectrofotométricamente a
evalúa por Espectrofotometría de absorción atómica.
570 nm.
Para preparar la curva de calibración, realice el ensayo
PRECAUCIONES:
de referencia con cada una de las cinco soluciones de
No introducir pipetas dentro de los frascos de
Calcio por triplicado.
soluciones de referencia.
PREPARACIÓN DE REACTIVOS: Tratar toda la cristalería con Acido clorhídrico 0,5
Dejar que las soluciones de referencia y los reactivos mol/L antes de ser utilizada, para eliminar posibles
del juego alcancen la temperatura ambiente y interferencias con otros iones metálicos.
homogeneizar antes de usar.
TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
Desarrollar el método de o-Cresolftaleína complexona, De 2 a 8 C
según la técnica descrita en la literatura interior del
Juego de reactivos para la determinación de Calcio en ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
suero, sustituyendo el suero por cada una de las El producto en uso es estable 4 meses
soluciones de referencia que componen este juego.
BIBLIOGRAFÍA:
CALCULOS DE LOS RESULTADOS 1. J. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnóstico Clínico
ANALÍTICOS: por el Laboratorio.
Verifique la linealidad de la curva de calibración 2. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman.
obtenida entre las concentraciones de cada punto de las Química Clínica. Bases y Técnicas.

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EPB “Carlos J. Finlay” Infanta 1162 CP 10300 Teléfono: 870-6016 FAX (537) 8795734
Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
Web: WWW.biofinlay.sld.cu
3. - K. Widman. Interpretación Clínica de las
Pruebas de Laboratorio.

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CONTENIDO DEL ESTUCHE: CALCULOS DE LOS RESULTADOS
5 frascos de soluciones de referencia de Creatinina de ANALÍTICOS:
concentraciones diferentes. Verifique la Linealidad de la curva de calibración
obtenida entre las concentraciones de cada punto de las
Creatinina 66,3 µmol/L soluciones de referencia y sus correspondientes
R1 1x10 mL absorbancias, comprobando el valor del coeficiente de
Solución de referencia
Creatinina 132,6 µmol/L determinación: éste debe ser r2> 0,98 para un rango de
R2 1x10 mL concentración es de Creatinina de 66,3 a 618,0 mol/L
Solución de referencia
En el caso que se determine la concentración de una
Creatinina 265,2 µmol/L
R3 1x10 mL muestra realice los siguientes cálculos:
Solución de referencia
Creatinina 442,0 µmol/L cot() =
R4 1x10 mL
Solución de referencia
 Cr
5
Creatinina 618,0 µmol/L i 1
R5 1x10 mL 5
Solución de referencia
 Ar
i 1
APLICACIÓN PROPUESTA:
Donde:
Para preparar curvas de calibración en la determinación Cr: Concentración de las soluciones de referencia en
de Creatinina, por el método de Jaffé. “PARA USO IN mol/L
VITRO” Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia
Cm= Am x cot() = mol/L de Creatinina
MATERIALES ADICIONALES: Donde:
- Juego de reactivos para la determinación de Am: Absorbancia de la muestra
Creatinina en Suero. Cm: Concentración de Creatinina
- Reactivo 1: Acido Pícrico 0,04 mol/L. cot()= Cotangente de la curva de calibración.
- Reactivo 2: Hidróxido de Sodio 2,5 mol /L.
- Agua purificada. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
- Espectrofotómetro visible o Colorímetro Linealidad: el coeficiente de determinación debe ser
fotoeléctrico r2 > 0,98 para un rango de concentración de Creatinina
de 66,3 a 618,0 mol/L
PRINCIPIO DEL MÉTODO:
El método de Jaffé se basa en que la Creatinina forma MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
con el picrato alcalino un complejo de color amarillo Se asigna el valor a la solución de referencia utilizando
rojizo, que se mide espectrofotométricamente a 500 nm. un Preciset de 66,3 a 618,0 mol/L, de la firma
Para preparar la curva de calibración, realice el ensayo Boehringer Mannheim, utilizando el método analítico
de referencia con cada una de las cinco soluciones de de Jaffé para la determinación de Creatinina.
Creatinina por triplicado.
PRECAUCIONES:
PREPARACIÓN DE REACTIVOS: No introducir pipetas dentro de los frascos de
Dejar que las Soluciones de referencia alcancen la soluciones de referencia
temperatura ambiente y homogeneizar .
Tomar 1 mL de cada una de las soluciones de referencia TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
y diluir con 10 mL de agua purificada en matraz de un De 2 a 8 C.
trazo. Homogeneizar.
Desarrollar el método de Jaffé según la técnica descrita
en la Literatura interior del Juego de reactivos para la ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
determinación de Creatinina en suero, sustituyendo el El producto en uso es estable 4 meses.
suero por cada una de las soluciones de referencia que
componen este juego. BIBLIOGRAFÍA:
1. Henry, R. J. “Química Clínica. Bases y principios” Editoria
Hims. Barcelona, 1980

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CONTENIDO DEL ESTUCHE: soluciones de referencia y sus correspondientes
5 frascos de soluciones de referencia de Fósforo absorbancias, comprobando que el valor de r 2 > 0,98,
inorgánico de concentraciones diferentes. para un rango de concentraciones de Fósforo inorgánico
de 0,8 a 4,0 mmol/L
Fósforo inorgánico 0,8 mmol/L En el caso que se determine la concentración de una
R1 1x5 mL
Solución de referencia muestra realice los siguientes cálculos:
Fósforo inorgánico 1,6 mmol/L cot() =
R2 1x5 mL

5
Solución de referencia Cr
Fósforo inorgánico 2,4 mmol/L i 1
R3 1x5 mL

5
Solución de referencia
i 1
Ar
Fósforo inorgánico 3,2 mmol/L
R4 1x5 mL Donde:
Solución de referencia
Fósforo inorgánico 4,0 mmol/L Cr: Concentración de las soluciones de referencia en
R5 1x5 mL mmol/L
Solución de referencia
Ar: Absorbancias de las soluciones de referencia
APLICACIÓN PROPUESTA: Cm= Am x cot()=mmol/L de Fósforo inorgánico
Para preparar curvas de calibración en la determinación
de Fósforo inorgánico por el método de Fiske - Donde:
Subarow. “PARA USO IN VITRO” Cm: Concentración de Fósforo inorgánico
Am: Absorbancia de la muestra
MATERIALES ADICIONALES: cot()= Cotangente de la curva de calibración.
- Juego de reactivos para la determinación de
Fosfato (Fósforo inorgánico) en suero. CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
- Agua purificada Linealidad: El coeficiente de determinación debe ser
- Espectrofotómetro visible o colorímetro r2 > 0,98, para un rango de concentraciones de Fósforo
fotoeléctrico. inorgánico de 0,8 a 4,0 mmol/L

PRINCIPIO DEL MÉTODO: MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:


El método más utilizado para la determinación de Se asigna el valor de las soluciones de referencia,
Fósforo inorgánico es la reacción de Fiske – Subarow utilizando una curva de calibración preparada a partir de
donde el Fósforo presente en el suero reacciona con el una solución de dihidrógeno fosfato de potasio 161,0
molibdato de amonio y el p– metilaminofenol sulfato mmol/L, cuya concentración es verificada por
para obtener el azul de molibdeno, que se mide valoración con solución de hidróxido de sodio, evaluada
espectrofotométricamente a 640 nm. contra un estándar primario de biftalato de potasio p.a.
Para preparar la curva de calibración, realice el ensayo
de referencia con cada una de las cinco soluciones de PRECAUCIONES:
Fósforo inorgánico por triplicado. No introducir pipetas dentro de los frascos de
soluciones de referencia.
PREPARACIÓN DE REACTIVOS:
Dejar que las Soluciones de referencia alcancen la TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
temperatura ambiente y homogeneizar perfectamente. De 2 a 8 C
Hacer dilución 1:10 a las soluciones de referencia antes
de ser utilizadas. ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
Desarrollar el método de Fiske – Subarow, según la El producto en uso es estable 4 meses.
técnica descrita en la literatura interior del Juego de
reactivos para la determinación de Fosfato (Fósforo BIBLIOGRAFÍA:
inorgánico), sustituyendo el suero por cada una de las 1. L. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnóstico Clínico
soluciones de referencia que componen este juego. por el Laboratorio.
2. K. Widman. Interpretación clínica de las
CALCULOS DE LOS RESULTADOS pruebas de laboratorio
ANALÍTICOS: 3. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman.
Verifique la linealidad de la curva de calibración Química Clínica. Bases y Técnicas
obtenida entre las concentraciones de cada punto de las
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CONTENIDO DEL ESTUCHE: para un rango de concentraciones de Glucosa de 2,77 a
5 frascos de soluciones de referencia de Glucosa de 16,65 mmol/L.
concentraciones diferentes. En el caso que se determine la concentración de
una muestra realice los siguientes cálculos:
Glucosa 2,77 mmol/L
R1 1x10 mL Cot () =
Solución de referencia.
 Cr
5
Glucosa 5,55 mmol/L
R2 1x10 mL i 1
Solución de referencia. 5

R3
Glucosa 8,32 mmol/L
Solución de referencia
1x10 mL  Ar
i 1
Glucosa 11,10 mmol/L Donde:
R4 1x10 mL
Solución de referencia. Cr: Concentración de las soluciones de referencia en
Glucosa 16,65 mmol/L mmol/L
R5 1x10 mL
Solución de referencia. Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia
Cm = Am x cot() = mmol/L de Glucosa
APLICACIÓN PROPUESTA:
Para preparar curvas de calibración en la determinación Donde:
de Glucosa, por el método de Glucosa Oxidasa. “PARA Cm: Concentración de Glucosa
USO IN VITRO”. Am: Absorbancia de la muestra
cot() = Cotangente de la curva de calibración.
MATERIALES ADICIONALES:
- RapiGluco – Test CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
- Agua purificada Linealidad: el coeficiente de determinación debe ser
- Espectrofotómetro visible o Colorímetro r2 > 0,98 para un rango de concentraciones de Glucosa
Fotoeléctrico. de 2,77 a 16,65 mmol/L.
- Baño de agua (37+1) º C
MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
PRINCIPIO DEL MÉTODO: Se asigna el valor a la solución de referencia, utilizando
El método de Glucosa Oxidasa es una reacción Preciset de 2,77 a 16,65 mmol/L de la Firma Boehringer
enzimática de la Glucosa en la que se forma un Mannheim, utilizando el método analítico de
complejo coloreado de color rosado, que se cuantifica Hexoquinasa para la determinación de Glucosa.
por espectrofotometría.
Para preparar la curva de calibración, realice el ensayo PRECAUCIONES:
de referencia con cada una de las cinco soluciones de No introducir pipetas dentro de los frascos de
Glucosa por triplicado. soluciones de referencia.

PREPARACIÓN DE REACTIVOS: TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO :


Las soluciones de referencia están listas para usarlas. De 25 a 30 C
Desarrollar el método de Glucosa Oxidasa según la
técnica descrita para el RapiGluco-Test, sustituyendo el ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
suero por cada una de las soluciones de referencia El producto en uso es estable 6 meses.

CALCULOS DE LOS RESULTADOS BIBLIOGRAFÍA:


ANALÍTICOS: 1. L. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnóstico Clínico
Verifique la Linealidad de la curva de calibración por el Laboratorio.
obtenida entre las concentraciones de cada punto de las 2. K. Widman. Interpretación clínica de las
soluciones de referencia y sus correspondientes pruebas de laboratorio
absorbancias, comprobando que el valor de r 2sea > 0,98 3. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W. Winkelman.
Química Clínica. Bases y Técnicas.

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CONTENIDO DEL ESTUCHE: TECNICA DE ANALISIS:

6 frascos de soluciones de referencia de Urea de Ensayo en Ensayo en


concentraciones diferentes por 10 mL muestra blanco
Agua purificada 1,0 mL 1,0 mL
APLICACIÓN PROPUESTA: Reactivo 3 100,0 L 100,0 L
Suero 20,0 L -
Para preparar curvas de calibración en la determinación
de Urea, por el método de Berthelot. “PARA USO IN Mezclar, tapar y dejar en reposo por 15 min. A 37 C
VITRO”. Reactivo 1 1,5 mL 1,5 mL
Reactivo 2 1,5 mL 1,5 mL
MATERIALES ADICIONALES: Mezclar y dejar en reposo por 15 min. A 37 C
Agua purificada 5,0 mL 5,0 mL
Reactivo 1: Fenol
Reactivo 2: Hipoclorito de sodio Leer la absorbancia a 620 nm contra ensayo en blanco
Reactivo 3: Ureasa 100 U
Reactivo 4: Fosfato y EDTA CALCULOS DE LOS RESULTADOS
Espectrofotómetro ANALÍTICOS:
PRINCIPIO DEL MÉTODO:
Cot () =
 Cr
6
El método de Berthelot es una reacción enzimática de la
i 1
Urea presente en la muestra en la que se forma un
6
complejo coloreado que se cuantifica por
espectrofotometría  Ar
i 1
Para preparar la curva de calibración, realice el ensayo
Donde:
de referencia con cada una de las seis soluciones de
Cr: Concentración de las soluciones de referencia en
Urea por triplicado.
mmol/L
Ar: Absorbancia de las soluciones de referencia
PREPARACIÓN DE REACTIVOS:
Cm = Am x cot() = mmol/L de Urea
Reactivo 1: Trasvasar cuantitativamente el contenido
Donde:
del reactivo 1 a un frasco volumétrico de 500 mL, diluir
Cm: Concentración de Urea
con agua purificada, enrasar y homogeneizar. La
Am: Absorbancia de la muestra
concentración del reactivo después de reconstituido es
cot() = Cotangente de la curva de calibración.
de 0,11 mol/L.
Estable durante 6 meses en frasco ámbar a un a
teperatura de 2 a 8 C Las soluciones de referencia están CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
listas para usarlas. Puede emplearse como estándar soluciones de
Reactivo 2 : Trasvasar cuantitativamente el contenido referencia controladas por el Buró Nacional de Standar
del reactivo 2 a un frasco volumétrico de 500 mL, diluir (NBS) de Estados Unidos.
con agua purificada, enrasar y homogeneizar. La
concentración del reactivo después de restituido es de PRECAUCIONES:
11 mol/L. Estable durante 6 meses en frasco plástico a No introducir pipetas dentro de los frascos de
una temperatura de 2 a 8C. soluciones de referencia.
Reactivo 3: Tomar una frasco del reactivo 3, reconstituir TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO :
con 20 mL del reactivo 4. Estable durante 6 días como
2a8C
mínimo a temperatura de 2 a 8 C
Reactivo 4: Listo para usar
BIBLIOGRAFÍA:
Nota: Dejar que los reactivos alcancen la temperatura 1. L. Davidsohn, J.B. Henry, Diagnóstico Clínico por el
Laboratorio.
de 25 a 30 C y homogeneizar perfectamente antes de 2. K. Widman. Interpretación clínica de las pruebas de
usar. laboratorio

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3. R. J. Henry, D. C. Cannon J.W.
Winkelman. Química Clínica. Bases y Técnicas.

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MONOREACTIVO
S
Solución reactivo
100 determinaciones ALMACENAMIENTO:

APLICACION: De 25 a 30 °C.

Reactivo para la determinación cualitativa BIBLIOGRAFIA:


de proteínas en orina
1. R..J. Henry. Química Clínica. Bases y
Técnicas. 1980. 2da Edición.
PRINCIPIO DE LA DETERMINACIÓN:

EL ácido sulfosalicílico reacciona con las proteínas


presentes en la orina produciendo un precipitado
blanco.

TÉCNICA DE ANALISIS:

Colocar 2 mL de orina previamente filtrada o


centrifugada en un tubo para ensayos, añadir 4 gotas
de la solución reactivo. Mezclar y dejar en reposo
durante 5 min.

Comparar el tubo que contiene la mezcla de reacción


con otro que contenga orina no tratada, contra un
fondo negro.

EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS:

Los resultados se expresaran en cruces:


Turbidez discreta (trazas) +
Precipitado moderado ++
Precipitado abundante +++

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Solución reactivo CALCULOS:
30 determinaciones
Cr
x
Am
APLICACION:  Donde :
Cm
Ar
Cm = Concentración de la
Reactivo para la determinación cuantitativa de muestra (g/L)
proteínas en líquido cefalorraquídeo Cr = Concentración de la solución de referencia
Am = Absorbancia de la muestra
PRINCIPIO DE LA DETERMINACIÓN: Ar = Absorbancia de la solución de referencia
EL ácido sulfosalicílico provoca la precipitación de las INTERVALO DE REFERENCIA:
proteínas del líquido cefalorraquídeo, determinándose
estas por turbidemetría. 0,2 - 0,4 g/L
TÉCNICA DE ANALISIS: ALMACENAMIENTO:
Tomar un 1 mL del líquido cefalorraquídeo en un tubo A temperatura ambiente.
para ensayos, adicionar 4 mL de la solución reactivo,
dejar en reposo durante 10 min, pasado este tiempo
BIBLIOGRAFIA:
agitar y leer a 420 nm contra blanco reactivo.
Procesar de igual forma una solución de referencia de
R.J. Henry. Química Clínica. Bases y Técnicas. 1980.
albúmina de 0,3 g/L
2da Edición

32
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.Solución reactivo (24 determinaciones) LECTURA Y EXPLICACION DE LOS
RESULTADOS:

APLICACIÓN PROPUESTA:
Concentración
Expresión
aproximada de
Solución reactivo cualitativa para la determinación de Reacción del
glucosa (mg
sustancias reductoras en la orina. Reactivo único para Resultado
100mL)
uso in vitro.
Azul transparente o
<100
enturbiamiento verde 0
no precipitado
MATERIALES ADICIONALES:
Verde con precipitado 250
1+
- Tubo para ensayo. amarillo
- Gotero.
Amarillo verde oliva 2+ 800
PRINCIPIO DEL METODO: Marrón 3+ 1400
Naranja rojo 4+ 2000 ó más
El reactivo cualitativo de Benedict para la Glucosa
tiene Cu2+, el cual es reducido por la Glucosa y otras
sustancias reductoras y precipitado en forma de Cu 2O LEYENDA
de color amarillo a rojo.
0 Negativo
La sensibilidad de la determinación es en condiciones 1+ Ligeros indicios
óptimas de aproximadamente 50 a 80 mg/100mL de 2+ Débilmente positivo
Glucosa. 3+ Positivo
4+ Fuertemente positivo
Sustancias existentes en la orina tales como la
fructosa, lactosa, galactosa, etc pueden interferir en la En caso de resultados inesperados repita el análisis.
reacción del cobre con la glucosa.

ACCION DE SEGUIMIENTO
TECNICAS DE ANALISIS:
Si persisten resultados positivos consulte a su médico.
Solución reactivo 5.0mL
Muestra 8 gotas
PRECAUCIONES
Hervir sobre una llamada durante 2 min o colocar en
No ingerir.
un baño de agua hirviente durante 3 min. Leer
inmediatamente después.
Almacénese a una temperatura de 25 a 30C.

BIBLIOGRAFIA

1. Henry R. J. Cannon D.C., Winkelman


J.W. Química Clínica, bases y técnicas.

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Código 337.5.661240 o
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Solución reactivo
(20 determinaciones) TECNICA DE ANALISIS:

Presentación: Estuche por 1 frasco x 120 mL Muestra Referencia

APLICACION: Suero 50L

Reactivo para la determinación de proteínas Solución de


referencia de 50L
totales en suero. Reactivo único “PARA USO IN
Albúmina
VITRO”.

Solución de reactivo
3 mL 3 mL
MATERIALES ADICIONALES: Biuret

Espectrofotómetro o fotómetro para lecturas a


530 nm. Solución de referencia de Albúmina de 4 Agite cada tubo y déjelos en reposo durante
a 8%. 30 min. Lea en espectrofotómetro a 530mn
contra blanco reactivo

PRINCIPIO DEL METODO:


CALCULOS DE LOS RESULTADOS
La reacción del Biuret se basa en que al ANALITICOS:
reaccionar un reactivo alcalino da cobre con una
Cm= Am x Cr
sustancia que contiene dos o más enlaces Ar
peptídicos, se forman un complejo entre el ión Donde:
cúprico y los enlaces peptídicos adyacentes de
color violeta. La intensidad del color es Cm: Concentración de Biuret en la muestra (g/100mL)
directamente proporcional al número de enlaces Cr: Concentración de la solución de referencia de
peptídicos. Albúmina (g/100mL)
Am: Absorbancia de la muestra
LIMITACIONES DEL METODO: Ar: Absorbancia de la referencia

No es una reacción muy sensible y por tanto, no


es adecuada para el análisis de muestras que INTERVALOS DE REFERNCIA:
contienen poca cantidad de proteínas (orina,
líquido cefalorraquídeo). De 4 a 8 g/100mL

ALMACENAMIENTO:
PREPARACION DE REACTIVOS:
De 25 a 30 C
El reactivo está listo para usar.
BIBLIOGRAFIA:
1. Henry R. J., Cannon D. C., Winkelman
J. W. Química Clínica, bases y técnicas. Edición JIMS.
Barcelona.
2. Davidsohn J., Henry J. B. Diagnóstico
Clínico por el laboratorio. Edición Revolucionaria.

34
Código 337.5.661325 o
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Semicuantitativo  Tome un tubo con crecimiento de 24 h en
(100 Determinaciones) medio de indol-motilidad del germen Gram
negativo.
CONTENIDO DEL ESTUCHE:  Añada 0.5 mL de la solución reactivo de
Erlich y espere 1 min a que se produzca la
Reactivo 1: Erlich. Solución reactivo. reacción.
(1 frasco por 120 mL)
 El resultado será positivo si se observa un
APLICACIÓN PROPUESTA: anillo de color rosado cereza en la superficie
del medio de cultivo inoculado previamente .
Para la determinación de la producción de Indol
de los microorganismos Gram negativos. “PARA ALMACENAMIENTO:
USO IN VITRO”
De 25 a 30 °C
PREPARACIÓN DEL REACTIVO:
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
El reactivo está listo para usar
1. Manual de Marchas Técnicas del
MUESTRA: Sangre fresca.
Laboratorio de Microbiología del Hospital
TÉCNICA DE ANÁLISIS “Hermanos Ameijeiras”.

35
Código 337.5.661330
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Semicuantitativo
(50 Determinaciones) TÉCNICA DE ANÁLISIS

 Tome un tubo para ensayos añada 5 mL de


CONTENIDO DEL ESTUCHE: orina y 2 mL del reactivo, lentamente por las
paredes del tubo.
Reactivo 1: Imbert. Solución reactivo.
(1 frasco por 120 mL)  Observe la superficie de contacto entre
APLICACIÓN PROPUESTA: los dos líquidos el resultado será positivo si
se observa un anillo de color violeta en la
Para la determinación de cetonas en orina. superficie de contacto.
“PARA USO IN VITRO”
ALMACENAMIENTO:

PREPARACIÓN DEL REACTIVO: De 25 a 30 °C

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
El reactivo está listo para usar
1. Manual de técnica de laboratorios

MUESTRA: Orina fresca.

36
Código 337.5.661430
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Semicuantitativo  Utilizando la pipeta de glóbulos rojos, tome
sangre hasta la marca 1.
(30 Determinaciones)  Introduzca la pipeta cargada con la sangre
en la solución muestra de oxalato de amonio
CONTENIDO DEL ESTUCHE:
0.0703 mol/L y absorba ésta hasta llegar a la
marca 101.
Reactivo 1: Oxalato de amonio 0,0703 mol/L
 Homogeneice el contenido de la pipeta.
Solución reactivo.
frotando esta con ambas manos.
(1 frasco por 120 mL)
 Déjelo en reposo durante 10 min
APLICACIÓN :
 Deseche las primeras gotas y
posteriormente cargue la cámara de Neubauer.
Para el conteo de plaquetas o eritrocitos." PARA
 Coloque la cámara cargada dentro de la
USO IN VITRO".
cápsula de Petri, sobre el soporte y el papel de
filtro humedecido.
MATERIALES ADICIONALES:
 Déjela reposar durante 10 min
Microscopio óptico, pipeta de glóbulos rojos,  Observe al microscopio que las plaquetas se
cámara de Neubauer. distingan con cierta resfringencia.

PREPARACIÓN DEL REACTIVO: ALMACENAMIENTO:


De 2 a 8 ° C
El reactivo está listo para usar
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
MUESTRA: Sangre fresca.
Manual de Técnicas de Laboratorio Clínico.
TÉCNICA DE ANÁLISIS Instituto del Libro, 1969

37
Código 337.5.661191
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Web: WWW.biofinlay.sld.cu
.

COLORANTES
Reactivo para tinción
(240 Determinaciones)  Déjelo secar.

 Con la lanceta, haga una punción rápida.


CONTENIDO DEL ESTUCHE:
 Deposite una gota de sangre sobre la lámina
Reactivo 1: Azul brillante cresil 1g/100 mL.
portaobjetos.
Solución colorante.
(1 frasco por 120 mL)
 Mezcle minuciosamente la sangre con el
colorante durante 1 min utilizando un agitador de
APLICACIÓN PROPUESTA:
vidrio.
Para la determinación de reticulocitos y siderocitos
(en Hematología). “PARA USO IN VITRO”  De la mezcla antes mencionada, realice
extensiones en 3 portaobjetos, deje que la misma se
MATERIALES ADICIONALES: seque.

 Vierta sobre la lámina 1 gota de aceite


Microscopio óptico, lámina portaobjeto,
de inmersión.
cronómetro y pipeta.
 Observe las láminas al microscopio con lente
PREPARACION DEL REACTIVO:
de inmersión
 El resultado es positivo si se observa los
El reactivo está listo para usar
hematíes reticulados en al menos 2 de las 3 láminas
preparadas.
MUESTRA: Sangre fresca
ALMACENAMIENTO:
Técnica de Análisis :
De 25a 30 ºC
 En una lámina portaobjetos, deposite una gota
de azul brillante cresil. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
 Déjela secar al aire. 1. Manual de técnicas de laboratorio clínico.
Instituto Cubano del Libro, 1969
 Con un algodón con alcohol, limpie la yema del
dedo.

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.Reactivo para tinción  Con la lanceta haga una punción en el dedo.
(240 Determinaciones)  Deseche la primera gota.
 Cargue la pipeta de glóbulos blancos hasta la
CONTENIDO DEL ESTUCHE: marca 0.5 con sangre.

Reactivo 1: Conteo de Eosinófilos.  Llénela con el diluente (solución reactivo conteo


Solución reactivo. de eosinófilos) hasta la marca 11.
(1 frasco por 120 mL)  Mezcle bien haciendo girar la pipeta entre las
dos manos y deje en reposo la mezcla durante 15 min
APLICACIÓN PROPUESTA: para que los eosinófilos queden bien coloreados.

Para la determinación de eosinófilos (en  Ponga el cubreobjetos sobre la cámara de


Neubauer.
Hematología). “PARA USO IN VITRO”
 Introduzca la muestra preparada que contiene la
MATERIALES ADICIONALES: pipeta entre los bordes de la cámara y el
cubreobjetos.
Microscopio óptico, lámina portaobjeto,
 Déjela 5 min en reposo.
cronómetro y pipeta.
.  Obsérvela al microscopio con lente de 10 y 40.
 El resultado es positivo si se observan los
PREPARACIÓN DEL REACTIVO:
eosinófilos teñidos de rojo resfringente en contraste
con el azul verdoso del resto de los demás
El reactivo está listo para usar
leucocitos
MUESTRA: Sangre fresca.
ALMACENAMIENTO: De 25 a 30°C
TÉCNICA DE ANÁLISIS:
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
 Limpie con un algodón impregnado en alcohol 1. Manual de técnicas de laboratorio clínico.
la yema del dedo. Instituto Cubano del Libro, 1969

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60 Determinaciones previamente una gota de aceite de inmersión sobre la
parte de la preparación que se ve a examinar.
CONTENIDO DEL ESTUCHE:
Contar un total de 100 leucocitos.
Reactivo 1: Giemsa. Solución colorante
(1 frasco x 120 mL)
EXPRESION DE LOS RESULTADOS:
APLICACIÓN PROPUESTA:
La proporción de cada tipo de leucocito se expresa
Reactivo para la determinación de la fracción de
como una fracción decimal. La suma de todas las
número y el examen de leucocitos. “PARA USO IN
fracciones debe ser igual a 1.
VITRO”
INTERVALO DE REFERNCIA:
PRINCIPIO DE LA DETERMINACION:
Neutrófilos 0.55-0.65
Los principales tipos de leucocitos son identificados y Eosinófilos 0.02-0.04
se calcula la proporción de cada uno de ellos, esta Basófilos 0.00-0.01
proporción se denomina fracción de números del tipo Linfocitos 0.25-0.35
de leucocitos. Monocitos 0.03-0.06

MATERIALES ADICIONALES: OBSERVACIONES:

Este reactivo también se usa para la determinación de


Microscopio óptico, lámina portaobjeto, la fracción de número de reticulocito.
cronómetro y pipeta.

TECNICA DE ANALISIS: ALMACENAMIENTO:


Colocar una gota de sangre sobre un portaobjeto,
realizar la extensión de la misma y dejar secar la De 25 a 30 C temperatura ambiente y protegido de la
preparación. Fijar la extensión con metanol durante luz.
dos o tres minutos y luego cubrirla con la solución
colorante Giemsa previamente diluida a razón de 8 mL
de agua purificada y 16 gotas de la solución Giemsa. BIBLIOGRAFIA:
Dejar en reposo la preparación por espacio de 15 a 20
min. Lavar la lámina con agua corriente y colocarla en
posición inclinada para que se seque al aire libre. 1. OPS, Publicación Científica.
No. 439.
Realizar el recuento de los diferentes tipos de
leucocitos con el objetivo x 100 depositando

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MICROBIOLOGÍA
CONTENIDO DEL ESTUCHE: las pruebas después de transcurrido este tiempo, habrá
Estuche por 10 ampolletas por 0,5 mL que repetir el calentamiento a 56 C pero durante 10
(2900 determinaciones) min .

APLICACIÓN PROPUESTA: La muestra debe desecharse si presenta hemólisis,


Para el pesquisaje y diagnóstico serológico de la sífilis. turbidez, partículas y si los sueros se encuentran
“PARA USO IN VITRO” lipémicos, ya que todo esto puede dar lugar a
aglutinaciones inespecíficas.
MATERIALES ADICIONALES: De no usar la muestra en el día, conservarla a –20 C .
 Láminas portaobjeto de serología Todas las muestras deben estar a temperatura ambiente
 Tubos para ensayo (100 x 13) cuando vayan a examinarse.
mm
 Solución reguladora de CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Cardiolipina  Suero control reactivo
 Solución cloruro de sodio 9 g/L  Suero control débilmente reactivo
 Frasco de fondo plano con tapa  Suero control no reactivo
de rosca
 Pipeta automática para medir 10 PREPARACIÓN DE REACTIVOS:
y 50 L 1. Solución cloruro de sodio 9 g/L
 Pipeta de 1 y 5 mL 2. Emulsión de antígeno:
 Rotor La solución reguladora de Cardiolipina y el antígeno
 Microscopio óptico deben estar a una temperatura de 23 a 29 C antes de
 Baño de agua hasta 100 C mezclarlos. La emulsión se prepara de la siguiente
 Jeringuillas de 2 mL manera:
 Aguja No. 18, 19 y 23 sin punta a) Deposite 0,4 mL de la solución reguladora de
 Cronómetro Cardiolipina en el fondo de un frasco de alrededor
de 20 mL de fondo plano para prevenir que el
PRINCIPIO DEL MÉTODO: líquido se localice en la periferia.
El antígeno VDRL es capaz de mostrar una reacción de b) Mida con la pipeta de 1 mL; 0,5
floculación en lámina en presencia de los anticuerpos de mL del antígeno y descárguelo gota a gota sobre la
Wassermann que se observa al microscopio óptico. solución reguladora de Cardiolipina, rotando
constantemente el frasco. La descarga de la pipeta
CRITERIO DEL DESEMPEÑO Y debe transcurrir en seis segundos, sople la pipeta al
LIMITACIONES DEL MÉTODO: final teniendo cuidado de no tocar la emulsión .
La sensibilidad del producto disminuye cuando el c) Continúe rotando el frasco diez
mismo se somete a bajas temperaturas. segundos más.
En fases tempranas y latentes de la infección pueden d) Añada 4,1 mL de solución
ocurrir falsos resultados. reguladora de Cardiolipina, tape y agite por
Pueden presentarse falsos positivos cuando el paciente inversión 30 veces en 10 s aproximadamente; con
padece de enfermedades como mononucleosis esto queda lista la emulsión del antígeno.
infecciosa, lupus eritematoso y neumonía vírica. Cada nueva emulsión que se prepare debe probarse con
Si el resultado es positivo, se debe confirmar con una suero control reactivo, débilmente reactivo y no
prueba treponémica. reactivo, que con la técnica de prueba cualitativa deben
dar su reacción típica. Solo pueden emplearse las
MUESTRA: emulsiones que proporcionen los resultados correctos
Suero: debe ser transparente e inactivarse por con los sueros de reactividad conocida.
calentamiento en baño de agua a 56 C durante 30 min .
Las pruebas deben realizarse dentro de las cuatro horas PROCEDIMIENTO:
que siguen al calentamiento . Si fuera necesario realizar
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Operaciones preliminares: Comprobación de las agujas.  Adicione 2 gotas de solución de cloruro de
Antes de efectuar la determinación compruebe las sodio 9 g/L verticalmente, con aguja No. 23 sin
agujas No. 18 y 19 de la siguiente forma. punta en los hoyuelo 2 y 5.
 Cargue la jeringuilla con 1 mL de la emulsión  Adicione 3 gotas de solución de cloruro de
de antígeno recién preparada con aguja No. 18 sin sodio 9 g/L a los hoyuelos 3 y 6.
punta.  Gire la lámina de serología manualmente de
 Cuente las gotas hasta que se consuma el mL forma suave durante 5 s para mezclar el suero y la
completo, dejando caer las mismas en el interior solución de cloruro de sodio.
del propio frasco donde se prepara la emulsión.  Homogenice la emulsión de antígeno
 Para una aguja de este calibre deben obtenerse preparada a partir de la muestra en análisis de
60 gotas por mililitro, de no cumplirse esta VDRL agitándola y vierta verticalmente una gota
condición puede repetir el conteo una vez más, con aguja No. 19 sin punta en cada uno de los 6
cambiar la jeringuilla o la aguja hasta obtenerse lo hoyuelos.
establecido.  Coloque la lámina en el rotor y accione el
 Repita estas operaciones con la aguja No. 19 equipo a 120 min-1 durante 4 min.
sin punta, en este caso deben obtenerse 75 gotas  Observe inmediatamente después de la
por mililitro, de no ser así proceda de la misma rotación en un microscopio óptico con el lente de
forma que en el punto anterior. menor aumento.
Ensayo cualitativo del suero: El título viene dado por la más alta dilución donde se
 Deposite en uno de los hoyuelos de la lámina observen flóculos de mediano y gran tamaño.
de serología 50 L del suero inactivado. La dilución de cada hoyuelo se indica en la siguiente
 Homogenice la emulsión de antígeno y tabla:
auxiliándose de la jeringuilla con aguja No. 18, Hoyuelo Dilución
cargue una porción de ésta y vierta una gota en el 1 1:1
hoyuelo que contiene el suero. 2 1:2
3 1:4
 Repita esta operación con todos los sueros. 4 1:8
 Coloque la lámina en el rotor y accione el 5 1:16
equipo a 120 min-1 durante 4 min. 6 1:32
 Observe inmediatamente después de la CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO:
rotación en un microscopio óptico con el lente de Las ampolletas de antígeno deben guardarse en un lugar
menor aumento. oscuro a una temperatura de 25 a 30 C, protegidas de la
 El suero se considera reactivo si se observan luz.
agrupaciones o flóculos pequeños, además de PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
partículas en forma de agujas pequeñas distribuidas  Una vez preparada la emulsión se utilizará en
uniformemente y no reactivo si se observan muchas el día para esta determinación
partículas en forma de agujas pequeñas  Las láminas deben lavarse cuidadosamente
uniformemente distribuidas sin formar agrupación. eliminándose todo residuo de grasa.
Ensayo cuantitativo del suero  Deposite las puntas y láminas utilizadas en un
 Prepare una dilución 1:8 del suero de recipiente con solución alcohólica 70 %, para
referencia inactivado en un tubo para ensayo evitar contaminaciones al fregar.
adicionando 0,1 mL de suero a 0,7 mL de solución  La solución reguladora de Cardiolipina para
de cloruro de sodio 9 g/L con pipeta de Kahn. preparar el antígeno, debe estar en el momento del
 Mezcle enérgicamente el suero y la solución de uso a temperatura ambiente
cloruro de sodio y deje la pipeta dentro del tubo.  El suero muestra debe ser manipulado como
 En una lámina para serología vierta 0,04; 0,02; material “potencialmente infeccioso”
y 0,01 mL de la dilución del suero 1: 8 en los  “No inyectar”
hoyuelos 4, 5 y 6 y seguidamente 0,04; 0,02 y BIBLIOGRAFÍA:
0,01 mL de suero sin diluir en los hoyuelos 1, 2 y 3 1. Diagnóstico clínico por laboratorio. 872-922, 4ta Edición
. Revolucionaria. La Habana. 1971.

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2. NC26-212. Buenas Prácticas de Laboratorio. Marzo.1992, 3. K. D .Piatkin, YU. S. Krivoshein. Microbiología. 2 da
Cuba. Edición. 417-423. Editorial “MIR” Moscú. 1981

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Antisueros monovalentes Salmonellas ( A; B; C 1 ; C2; PREPARACIÓN DEL REACTIVO:
D; E; F ).Antisuero polivalente Salmonella. Antisueros Dejar que el bulbo alcance la temperatura ambiente.
polivalentes Shigellas ( A; B; C 1 ; D ). Antisuero MUESTRAS:
polivalente Citrobacter. Antisuero “Vi” Se obtienen a partir de heces fecales, en niños menores
de 5 años por hisopo rectal, fluidos corporales (sangre,
CONTENIDO DEL ESTUCHE: orina), aguas y alimentos contaminados. Estas
Antisueros monovalentes Estuche conteniendo 4 muestras se procesan utilizando medios de cultivos
Salmonellas bulbos por 5 mL para enriquecidos, selectivos y diferenciales, se incuban a
400 determinaciones 37 °C de 18 a 24 h. Se seleccionan colonias típicas y
Antisuero polivalente Estuche conteniendo 4 se transfieren al medio kligler se incuban de 18 a 24 h
Salmonella bulbos por 10 mL para a 37 °C , identificándose el microorganismo aislado de
800 determinaciones forma presuntiva, el crecimiento bacteriano obtenido
Antisueros polivalentes Estuche conteniendo 4 es suspendido en solución de Cloruro de sodio 0,85 %
Shigellas bulbos por 5 mL para para realizar el estudio serológico con el antisuero por
400 determinaciones medio de la reacción de aglutinación en lámina que es
Antisuero polivalente Estuche conteniendo 4 la prueba confirmativa de género o grupo específico.
Citrobacter bulbos por 10 mL para
800 determinaciones Nota: En caso de cepas sospechosas de Shigellas
Antisuero “Vi” Estuche conteniendo 4 calentar la suspensión bacteriana en baño de agua a
bulbos por 5 mL para 100 °C de 15 a 30 min (para eliminar sustancias
400 determinaciones inhibitorias que puedan interferir con la aglutinación
APLICACIÓN: somática). Dejar atemperar dicha suspensión y
 Antisueros monovalentes Salmonellas: Para enfrentarla al antisuero en el estudio serológico.
el diagnóstico serológico grupo específico de PROCEDIMIENTO:
Salmonella por aglutinación en lámina. Prueba cualitativa
 Antisuero polivalente Salmonella: Para el 1. Deposite sobre una lámina portaobjeto una
diagnóstico serológico del género Salmonella por gota de antisuero.
aglutinación en lámina. 2. Coloque sobre la gota de antisuero una gota
de antígeno (suspensión del microorganismo
 Antisueros polivalentes Shigellas: Para el
aislado en solución de Cloruro de sodio 0,85 %)
diagnóstico serológico género y grupo específico
3. Mezcle ambos con el asa de platino.
de Shigella por aglutinación en lámina.
4. Aplique a la lámina un suave movimiento
 Antisueros polivalentes Citrobacter: Para el
circular para homogeneizar.
diagnóstico serológico del género Citrobacter por
5. Efectúe la lectura frente a una lámpara de
aglutinación en lámina.
iluminación tangencial durante 1 min
 Antisuero “Vi”: Para la detección del
Positivo: Aglutinación con el antígeno homólogo en
antígeno Vi en Salmonella typhi por aglutinación un tiempo no mayor de 1 min con una intensidad de 3
en lámina.
a 4 cruces.
“PARA USO IN VITRO” Negativo: No se produce aglutinación en 1 min
MATERIALES ADICIONALES :
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
- Láminas portaobjeto. Asa de platino. Lámpara
Probar con cepas de referencias de los diferentes
de iluminación tangencial. Mechero. Solución de
grupos del banco de cepas de cada entidad.
Cloruro de sodio 0,85 %
TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
PRINCIPIO DEL MÉTODO : Almacénese a una temperatura de 2 a 8 ºC
El diagnóstico serológico de estas enterobacterias por
ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
aglutinación en lámina, está basado en la reacción
El producto en uso es estable por 3 meses
entre los anticuerpos presentes en el antisuero y los
BIBLIOGRAFÍA:
antígenos propios del microorganismo en ensayo.
1. Cowan and Steel. Identification of Bacterium.
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y LIMITACIONES
2. Edwards and Wh-Ewinb. Identification of
DEL MÉTODO:
Enterobacterias, 1962.
Reacción de aglutinación en 1 min, con una 3. Jawetz E. Manual de Microbiología Médica,
intensidad de 3 a 4 cruces Tercera Edición, 1966.
La detección del antígeno somático específico o del 4. K. Piatkin, Microbiología, 1968.
antígeno “Vi” dependen del microorganismo aislado.
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5. Martín Frobisher, Microbiología, 1969.

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CODIGOS
337.2.030825 Antisuero Polivalente de Citrobacter
337.2.031401 Antisuero Polivalente de Shigella A
337.2.031402 Antisuero Polivalente de Shigella B
337.2.031403 Antisuero Polivalente de Shigella C
337.2.031404 Antisuero Polivalente de Shigella D
337.2.031405 Antisuero Polivalente de Salmonella
337.2.031406 Antisuero Monovalente de Salmonella A
337.2.031407 Antisuero Monovalente de Salmonella B
337.2.031408 Antisuero Monovalente de Salmonella C1
337.2.031409 Antisuero Monovalente de Salmonella C2
337.2.031410 Antisuero Monovalente de Salmonella D
337.2.031411 Antisuero Monovalente de Salmonella E
337.2.031412 Antisuero Monovalente de Salmonella F
337.2.031414 Antisuero Vi

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Antisueros Flagelares Salmonellas (b; i; 1,2;  En caso que la aglutinación no sea bien
1,5; c; fg; gm; eh; enx; y; lw; r; k; gms; z29; definida o esté ausente, debe estimularse el
1,7; d; lv; enz15; lz13; lz28; mt; 1,6) desarrollo de los flagelos al microorganismo,
cultivándose en medios de cultivos líquidos o
CONTENIDO DEL ESTUCHE: semilíquidos, realizándose nuevamente la
4 frascos por 2 mL para 160 determinaciones reacción, donde se observará la avidez en la
aglutinación.
APLICACIÓN PROPUESTA:
Para la serotipificación de Salmonellas por MUESTRA:
aglutinación en lámina.“PARA USO IN VITRO”. Se obtiene por heces fecales, hisopo rectal en
niños menores de 5 años, fluidos corporales, agua
MATERIALES ADICIONALES: y alimentos contaminados. Las muestras se
- Lámina portaobjeto ó de excavación procesan utilizando medios de cultivos selectivos
- Asa de platino y diferenciales, los cuales una vez sembrados son
- Lámpara de iluminación tangencial incubados a 37 C de 18 a 24 h. Colonias típicas
- Mechero son coleccionadas y cultivadas en medio Kliger y
también cuñas agarizadas incubándose a 37 C de
PRINCIPIO DEL MÉTODO: 18 a 24 h. Posteriormente se le realizan pruebas
La serotipificación de Salmonella por bioquímicas incubándose de la misma forma que
en los casos anteriores.
aglutinación en lámina está basada en la
Identifique el microorganismo aislado,
reacción antígeno – anticuerpo. confirmándose el diagnóstico específico de
género con los sueros somáticos de Salmonella.
CRITERIO DE DESEMPEÑO Y
Una vez identificado el microorganismo como
LIMITACIONES DEL MÉTODO:
Salmonella y grupo a que pertenece, se realizarán
Reacción de aglutinación en 1 min , con una
las pruebas serológicas que nos darán el tipo,
intensidad de 3 a 4 cruces.
utilizando los Antisueros Flagelares Salmonellas
Detección de antígeno específico flagelar de
tipo específicos.
Salmonella.
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
PREPARACIÓN DE REACTIVOS:
Probar con cepas de referencia de los diferentes
Dejar que el producto alcance la temperatura serotipos del banco de cepas de cada entidad.
ambiente.
MATERIALES DE REFERENCIA UTILIZADOS:
PROCEDIMIENTO: Antisueros con cepas de Salmonellas de estructura
Prueba cualitativa: antigénica homóloga a los antisueros.
 Depositar una gota de Antisuero sobre
una lámina portaobjeto o excavada. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO:
 Tomar una asada del microorganismo De 2 a 8 C.
aislado. ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
 Mezclar ambos con el asa de platino. El producto en uso es estable 30 d.
 Aplicar a la lámina un suave movimiento
circular con el objetivo de homogeneizar. BIBLIOGRAFÍA:
 Efectuar la lectura frente a una lámpara 1. Cowan and Steel. Identification of Bacteri.
de iluminación tangencial durante un minuto. 2. Edwards and Wh-Ewinb. Identification of
Enterobacterias, 1962.
Positivo: Aglutinación con el antígeno homólogo. 3. Jawetz E. Manual de Microbiología Médica, 3era Edición,
Negativo: No se produce aglutinación en un 1966.
minuto. 4. K. Piatkin, Microbiología, 1968.

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5. Martin Frobisher, Microbiología, 1969.

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CODIGOS
337.2.031420 Antisuero Flagelar Salmonella b
337.2.031421 Antisuero Flagelar Salmonella i
337.2.031422 Antisuero Flagelar Salmonella 1,2
337.2.031423 Antisuero Flagelar Salmonella 1,5
337.2.031424 Antisuero Flagelar Salmonella c
337.2.031425 Antisuero Flagelar Salmonella fg
337.2.031426 Antisuero Flagelar Salmonella gm
337.2.031427 Antisuero Flagelar Salmonella eh
337.2.031428 Antisuero Flagelar Salmonella enx
337.2.031429 Antisuero Flagelar Salmonella y
337.2.031430 Antisuero Flagelar Salmonella lw
337.2.031431 Antisuero Flagelar Salmonella r
337.2.031432 Antisuero Flagelar Salmonella k
337.2.031433 Antisuero Flagelar Salmonella gms
337.2.031434 Antisuero Flagelar Salmonella z-29
337.2.031435 Antisuero Flagelar Salmonella 1,7
307.2.001436 Antisuero Flagelar Salmonella d
337.2.031437 Antisuero Flagelar Salmonella lv
337.2.031438 Antisuero Flagelar Salmonella enz15
337.2.031439 Antisuero Flagelar Salmonella lz13
337.2.031440 Antisuero Flagelar Salmonella lz28
337.2.031441 Antisuero Flagelar Salmonella mt
337.2.031442 Antisuero Flagelar Salmonella 1,6

51
COLORANTES
Reactivo para tinción
(120 Determinaciones) TÉCNICA DE ANÁLISIS:

CONTENIDO DEL ESTUCHE  Tome un tubo con crecimiento de estafilococo


y del mismo tome una asada, utilizando un asa de
Reactivo 1: Azul de metileno 0,1%. platino.
Solución colorante.  Realice un frotis en una lámina portaobjetos y
(1 frasco por 120 mL) fíjelo al calor de la llama.
 Deje secar la lámina.
APLICACIÓN PROPUESTA  Cubra la lámina con la solución colorante
Azul de metileno 0,1% durante 1 min.
Para tinción de estafilococos Gram positivos, Bacilos  Enjuague con agua corriente.
Acidos – Alcohol resistente. .“PARA USO IN  Deje secar la lámina.
VITRO”. .  Vierta sobre la lámina 1 gota de aceite
de inmersión.
MATERIALES ADICIONALES  Observe las láminas al microscopio con lente
de inmersión
Microscopio óptico, lámina portaobjeto,  El resultado es positivo si se observan los St.
aureus teñidos de azul
cronómetro y pipeta.
ALMACENAMIENTO:
PREPARACION DEL REACTIVO:
Para el producto intacto: de 25a 30 ºC
El reactivo está listo para usar.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
MUESTRA: Cepa de estafilococo.
1. Manual de técnicas de laboratorio clínico.
Instituto Cubano del Libro, 1969.

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Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
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Reactivo para tinción  Con un aplicador de madera tomar una muestra
(2400 Determinaciones) de heces (en muestra con mucus y sangre elegir
esa parte para estudiarla).
CONTENIDO DEL ESTUCHE  Mezclar con el Lugol concentrado procurando
hacer una suspensión y no un frotis.
Reactivo 1: Eosina 1%.  Quitar de la suspensión fibras y otros
Solución colorante. elementos sólidos.
(1 frasco por 120 mL)  Colocar un cubre objeto.
APLICACIÓN PROPUESTA  Repetir estas operaciones con la gota
de eosina.
Para la determinación de siderositos y sideroblastos en  Examinar en el microscopio con
heces fecales. “PARA USO IN VITRO” objetivo 10 x y 40 x.
 El resultado es positivo si la
MATERIALES ADICIONALES sustancia crómica de los quistes se ve de un
rosado intenso
Microscopio óptico, lámina portaobjeto,
cronómetro y pipeta. ALMACENAMIENTO:

PREPARACION DEL REACTIVO: Para el producto intacto: de 25a 30 ºC

El reactivo está listo para usar REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

MUESTRA: Heces fecales. 1. Manual de técnicas de laboratorio clínico.


Instituto Cubano del Libro, 1969.
TÉCNICA DE ANÁLISIS:

 Ponga en un porta objeto por separado (en


cada extremo) una gota de la solución de Eosina y
otra de Lugol.

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Reactivo para tinción  Seque la lámina.
(24 Determinaciones)
 Añada el reactivo, pásele la llama del
quemador por debajo hasta que observe la emisión
CONTENIDO DEL ESTUCHE de vapores sin que hierva.
 Lave con agua corriente; añada solución
Reactivo 1: Fuschina Básica de Ziehl Neelsen.
decolorante de alcohol clorhídrico para arrastrar el
Solución colorante.
exceso de la muestra y lave nuevamente con agua
(1 frasco por 120 mL)
corriente.
APLICACIÓN PROPUESTA
 Cubra la lámina con solución colorante Azul de
metileno 0,1 %, déjela secar durante 2 min.
Para la tinción de Ziehl Neelsen en el diagnóstico de
Bacilos Ácido – Alcohol resistentes. “PARA USO IN
VITRO”  Lave con agua corriente y deje secar la lámina.

MATERIALES ADICIONALES  Vierta sobre la lámina 1 gota de aceite


de inmersión.
Microscopio óptico.
 Observe la lámina al microscopio con lente de
PREPARACION DEL REACTIVO: inmersión
 El resultado es positivo si se observan los
El reactivo está listo para usar bacilos ácido - alcohol resistentes teñidos de rojo
sobre un fondo azul.
MUESTRA: Esputo.

TÉCNICA DE ANÁLISIS: ALMACENAMIENTO:

 En una lámina portaobjetos, extienda la muestra Para el producto intacto: de 25a 30 ºC


de esputo utilizando un asa de platino.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
 Fije con calor pasando suavemente la lámina 3
veces por la llama del quemador. 1. Manual de técnicas de laboratorio clínico. Instituto
Cubano del Libro, 1969.

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Para 100 determinaciones solución que provoca la decoloración de los Gram (-). A
continuación se utiliza la solución de Safranina como
CONTENIDO DEL ESTUCHE: colorante de contraste presentándose los gérmenes Gram
(-) de color rosado y los Gram (+) se mantienen violeta.
Reactivo 1.

Violeta Cristal. Solución colorante PREPARACION DE LOS REACTIVOS:


(120mL)
Violeta Cristal 2% El juego de reactivos está listo para usar.
Oxalato de Amonio monohidratado
0.8% PROCEDIMIENTO:
Alcohol etílico 20%
1. Preparación y fijación de las
Reactivo 2. muestras:
- Hacer la extensión de la muestra sobre un
Lugo de Gram. solución colorante portaobjeto, dejar secar al aire y fijar con calor y
(120mL) alcohol.
Yodo metálico 20% 2. Tinción:
Yoduro de Potasio 1% - Cubrir el portaobjeto con el Reactivo 1, dejar en
contacto 30 s y lavar suavemente con agua.
Reactivo 3. - Cubrir con el Reactivo 2, dejar en contacto 30 s y
lavar suavemente con agua.
Safanina. Solución colorante (120 - Efectuar la decoloración con alcohol y lavar
mL) suavemente con agua.
Safanina 0.25% - Cubrir con el Reactivo 3, dejar en contacto 30 s,
Alcohol etílico 10% lavar suavemente con agua y secar.
- Observar con objetivo de inmersión.

APLICACIÓN: ALMACENAMIENTO:

Método para la detección y diferenciación de De 25 a 30 C.


gérmenes Gram (+) y Gram (-).

PRECAUCIONES:
MATERIALES ADICIONALES:
Se deben utilizar portaobjetos muy limpios. La Tinción de
Gram debe hacerse sobre cultivos recientes (24 a 48 h) ya
- Portaobjetos que con el tiempo, estos se hacen mas sensibles a la
- Microscopio óptico decoloración.

PRINCIPIO DEL METODO: BIBLIOGRAFIA:

Los gérmenes se tiñen con la solución colorante 1. J. Salle, Bacteriología


Violeta Cristal que se fija con el yodo liberado 2. E. Merck, Certistain Standard
por el Lugol de Gram, luego se añade una 3. M. Frobisher, Microbiología

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Reactivo para tinción  Con un aplicador de madera tomar una
(24 Determinaciones) muestra de heces (en muestra con mucus y sangre
elegir esa parte para estudiarla).
CONTENIDO DEL ESTUCHE:  Mezclar con el Lugol concentrado procurando
hacer una suspensión y no un frotis.
Reactivo 1: Lugol concentrado.
Solución colorante.  Quitar de la suspensión fibras y otros
(1 frasco por 120 mL) elementos sólidos.

APLICACIÓN PROPUESTA:  Colocar un cubre objeto.


Para buscar trofozoitos de protozoos, huevos y larvas  Repetir
de Helmintos. “PARA USO IN VITRO” estas operaciones con la gota de eosina.

MATERIALES ADICIONALES:
 Examinar en el microscopio con objetivo 10 x y 40
x.
Microscopio óptico.  El resultado es positivo si la sustancia crómica de
los diversos quistes se destacan sobre el citoplasma
PREPARACION DEL REACTIVO: pardo amarillento.
El reactivo está listo para usar
ALMACENAMIENTO:
MUESTRA: Heces fecales.
Para el producto intacto: de 25a 30 ºC
TÉCNICA DE ANÁLISIS:
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

 Ponga en un porta objeto por separado (en 1. Manual de técnicas de laboratorio clínico.
cada extremo) una gota de la solución de Eosina y Instituto Cubano del Libro, 1969.
otra de Lugol.

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Símbolo/Color Negro Rojo Verde Azul
Penicilina Colimicina 10g Estreptomicina Oxacilina
6g 10 UI 1g
_________ Eritromicina Carbenicilina 100 g Tetraciclina Cefuroxima
15 UI 30 UI 30 g
ººººººº Meticlina Ampicilina Cloranfenicol Azlocilina
5g 10 g 30 g 75 g
+++++++ Gentamicina Cefaloridina Novobiocina Cefazolina
10 UI 30 UI 30 UI 30 g
- - - - - -- - - Kanamicina Ceftriaxona Amikacina Ciprofloxacina
30 UI 30g 30 g 5g
Vancomicina 30 UI Cefotaxima Sulfametoxazol/ Ceftazidima
30 µg Trimetroprim 30 g
(23,75 g/1,25 g)

CONTENIDO DEL ESTUCHE:


Estuche por 4 bulbos por 90 discos para 360 determinaciones

APLICACIÓN:
Para la determinación de la sensibilidad bacteriana a los agentes antimicrobianos.
“PARA USO IN VITRO”

MATERIALES ADICIONALES:
 Incubadora bacteriológica (37 °C)
 Nevera de 2 a 8 °C
 Hisopo
 Placa Petri 90 mm ó 150 mm
 Pinza
 Regla milimetrada Vd: 1 mm
 Solución patrón de turbiedad ó Standard de Mc Farland
 Agar Mueller – Hinton
 Solución Cloruro de sodio 0,85 %
 Caldo de cultivo
 Tubos para ensayo
 Mechero
 Timer
 Desecadora
 Asa o aguja de inoculación
 Caldo cultivo Triptona – Soya o Caldo corazón
 Cepas controles

PRINCIPIO DEL MÉTODO:


El ensayo se basa en el enfrentamiento de un disco impregnado con el antibiótico, en la superficie de un medio de
cultivo donde crece el microorganismo aislado en el laboratorio microbiológico. Este medio, permite la difusión del
antibiótico. A medida que aumenta el radio de difusión, hay una reducción logarítmica de la concentración del

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antibiótico hasta que se alcanza un punto en el que el desarrollo bacteriano en la superficie del agar ya no es inhibido.
El resultado es una zona de inhibición del desarrollo del microorganismo con bordes bien delineados (halo de
inhibición), el cual permite al analista determinar si el antibiótico en cuestión es adecuado para el tratamiento de la
enfermedad infecciosa. El halo de inhibición se mide utilizando una regla milimetrada Vd: 1mm

FRECUENTES CAUSAS DE ERROR QUE PUEDEN INFLUIR EN LOS RESULTADOS:


I- Medio de cultivo:
 Preparación incorrecta del Mueller – Hinton agar.
 Uso de medios en mal estado o placas mal almacenadas.
 Uso de placas con signos de deterioro en la superficie del agar.

II- Preparación del inóculo


 Uso de cultivos mezclados o contaminados.
 Inadecuada normalización de la densidad del inóculo. Suspensión del inóculo demasiado
fuertes o demasiado débil.
 Inadecuada preparación y/o almacenaje del patrón de turbiedad (Debe ser almacenado en
tubos muy bien tapados y mantenido en la oscuridad).
 Inadecuada agitación del cultivo antes de ser utilizado con la comparación (debe ser agitado
vigorosamente).
 Tiempo excesivo transcurrido entre los pasos de la manipulación desde la preparación del
inóculo a la incubación de las placas.

III- Inoculación
 Hisopo muy saturado cuando se inoculan las placas.
 Incubación a temperaturas inferiores a la óptima.
 Uso del método para bacterias anaerobias o de crecimiento lento.
 Secado incorrecto de las placas (deben secarse durante 15 min a 37 °C antes de la
aplicación de los discos).

IV- Aplicación de los discos


 Inadecuada conservación de los discos, tape firmemente el bulbo y guárdelo nuevamente de 2 a 8 °C en un
ambiente seco.
 Al sacar el bulbo para su uso, espere una o dos horas a que este alcance temperatura ambiente para su
aplicación.
 Los discos deben colocarse a una distancia no menor de 15 mm del centro del mismo al borde de la placa y
una separación entre ellos no menor de 25 mm para evitar la superposición de halos de inhibición.
 Procurar no colocar discos de antibióticos bactericidas (Ej: Penicilina, Cefalosporina, Aminoglucósidos,
Vancomicina) al lado de antibióticos bacteriostáticos (Ej. Cloranfenicol, Tetraciclina, Sulfonamidas) para evitar el
antagonismo antibiótico.

V- Prueba de control de los resultados

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 Lecturas prematuras antes de las 16 a 18 h. de incubación
 Fallas en la lectura de la zona de inhibición
 Fallas en el uso de las cepas control

MUESTRA:
Inóculo.
Preparación del inóculo: Tomar 5 ó 10 colonias de morfología similar, provenientes de un cultivo puro del
microorganismo aislado, valiéndose de un asa ó aguja de inocular y transferir a un tubo para ensayo que contiene de 3
a 5 mL de un caldo de cultivo adecuado (Triptona – Soya o Caldo corazón) e incubar de 35 a 37 °C durante 2 a 5 h .

La turbiedad producida durante este tiempo corresponde al comienzo del crecimiento (Fase exponencial) del
microorganismo. Ajuste la opacidad del inóculo con caldo o solución de cloruro de sodio 0,85 %. El ajuste se realiza
contra la Solución patrón de turbiedad ó Standard de Mc Farland obtenido, añadiendo 0,5 mL de Solución de cloruro
de bario dihidratado 0,048 M (1,175 % M/V) a 99,6 mL de Acido sulfúrico 0,36 N (1 % V/V). Este patrón deberá
agitarse para una adecuada homogeneidad antes de ser usado y deberá descartarse y volver a prepararse mensualmente.
Se almacena en unos tubos bien tapados y mantenidos en la oscuridad. La suspensión bacteriana se ajusta al % de
transmitancia según microorganismo, teniendo en cuenta lo establecido en los procedimientos de laboratorio, usando
un colorímetro a una longitud de onda de 580 nm.

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PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO:
El disco para Antibiograma está listo para usar. Sacar de refrigeración y esperar a que alcance temperatura ambiente
por una o dos horas. Después de utilizar el bulbo tápelo firmemente y guárdelo nuevamente de 2 a 8 °C en un ambiente
seco. Nunca deje un bulbo que contenga discos para Antibiograma expuesto innecesariamente a la humedad ambiental
para evitar la degradación del antibiótico.

CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:


Los valores individuales de los tamaños de la zona de inhibición de las cepas de referencia deben quedar
comprendidos dentro del intervalo de variación previsto.
Para verificar el estado de los discos de sensibilidad utilice las siguientes cepas: S. aureus ATCC 25923, E. coli ATCC
25922 y Ps. aeruginosa ATCC 27853.

Producto Intervalos de variación previsto para el diámetro


(mm)
S. aureus E. coli Ps. Aeruginosa
ATCC 25923 ATCC 25922 ATCC 27853
Amikacina 30 g 20-26 19-26 18-26
Ampicilina 10 g 27-35 16-22 -
Azlocilina 75 g - - 24-30
Carbenicilina 100 g - 23-29 18-24
Cefaloridina 30 UI 29-37 15-21 -
Cefazolina 30 g 29-35 23-29 -
Cefotaxima 30 µg 25-31 29-35 18-22
Ceftazidima 30 g 16-20 25-32 22-29
Ceftriaxona 30g 22-28 29-35 17-23
Cefuroxima 30 g 27-35 20-26 -
Ciprofloxacina 5g 22-30 30-40 25-33
Cloranfenicol 30 g 19-26 21-27 -
Colimicina 10 g - 11-15 -
Eritromicina 15 UI 22-30 - -
Estreptomicina 10 UI 14-22 12-20 -
Gentamicina 10 UI 19-27 19-26 16-21
Kanamicina 30 UI 19-26 17-25 -
Meticilina 5 g 17-22 - -
Novobiocina 30 UI 22-31 - -
Oxacilina 1g 18-24 - -
Penicilina 6 g 26-37 - -
Sulfametoxazol/ 24-32 24-32 -
Trimetroprim
(23,75 g/1,25 g)
Tetraciclina 30 UI 19-28 18-25 -
Vancomicina 30 UI 15-19 - -

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PROCEDIMIENTO:
1- Preparación del medio de cultivo Mueller – Hinton el cual se considera el más satisfactorio
para la realización del Antibiograma por el bajo contenido de inhibidores y su elevado índice de
reproducibilidad. Preparar según indicaciones del proveedor. La calidad del agua es determinante ya
que la misma debe estar libre de iones metálicos. Variaciones de cationes divalentes, principalmente
Calcio y Magnesio, afectará los resultados con aminoglucósidos, y Tetraciclina, cuando se prueba ante
Ps. aeruginosa. Un contenido excesivo en catión, puede dar un inaceptable aumento en el tamaño de la
zona.
2- Servir el agar en placas petri de 90 ó 150 mm de diámetro interior. La temperatura del medio
antes de verterlo debe estar de 48 a 50 °C.
 Volumen medio: 25 mL para placas de 90 mm de diámetro interior
 Volumen medio: 60 mL para placas de 150 mm de diámetro interior
 Profundidad del agar: 4 mm
3- Las placas que contienen el medio deben secarse durante 15 min. a 37 °C antes de su uso
para eliminar el exceso de humedad para no diluir el inóculo bacteriano
4- El medio Mueller – Hinton puede enriquecerse con el 5% de sangre desfibrinada cuando se
cultivan bacterias de difícil crecimiento (Streptococcus, haemophilus, Neisseria patógenas, etc)
5- No usar placas que muestren signos de deterioro en la superficie del agar
6- Las placas con el medio Agar Mueller – Hinton se inoculan utilizando un hisopo de algodón
sobre aplicador de madera de la manera siguiente:
 Sumerja el hisopo en el inóculo ajustado. Elimine el exceso de líquido rotando y presionando
el hisopo sobre las paredes internas del tubo, por encima del nivel del líquido.
 Estríe toda la superficie del agar en tres direcciones, girando la placa alrededor de 60 ° cada
vez para garantizar una inoculación uniforme.
 Deje secar la placa durante 15 min previo a la inoculación de los discos
7- Aplicación de los discos:
 Los discos se colocan con pinzas, flameando cada vez, a una distancia no menor de 15 mm
del centro del mismo al borde de la placa y una separación entre ellos no menor de 25 mm para
evitar superposición de los halos de inhibición.
 Incubar a 37 °C y realizar la lectura a partir de las 16 h. de aplicado el disco hasta las 48 h.

LECTURA E INTERPRETACIÓN:
La zona de inhibición es el área que rodea al disco donde el crecimiento ha sido completamente inhibido, sin embargo
con las cepas de Proteus, la zona puede aparecer invadida aunque se define claramente. No se debe tener en cuenta esta
invasión.
Existe un sistema de lectura directa, muy fácil de reproducir, que funde la lectura e interpretación en un solo paso: Se
confeccionan láminas circulares transparentes con círculos concéntricos cuyos diámetros delimitan zonas que se
corresponden con las categorías: “Sensible”, “Intermedio” y “Resistente” que aparece en la tabla de interpretación de
Bauer – Kirby. Basta con hacer coincidir el disco cuyo halo de inhibición se debe leer con el círculo central de la
lámina de lectura. El límite de la zona de inhibición, caerá en una de las tres zonas concéntricas.

CRITERIOS DE ACEPTACIÓN BASADOS EN EL MÉTODO DE BAUER – KIRBY:


Antimicrobiano Resistente Intermedio Sensible
(mm) (mm) (mm)
Amikacina 30 g 14 ó menos 15-16 17 ó más
Ampicilina 10 g en pruebas con 13 ó menos 14-16 17 ó más

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microorganismos entéricos Gram - negativos
Ampicilina 10 g en pruebas con Estafilococos 28 ó menos - 29 ó más
Ampicilina 10 g en pruebas con enterococos 16 ó menos - 17 ó más
Ampicilina 10 g en pruebas con Streptococcus 21 ó menos 22-29 30 ó más
(no enterococos)
Ampicilina 10 g en pruebas con Listeria 19 ó menos - 20 ó más
monocytogenes
Azlocilina 75 g en pruebas con Pseudomona 17 ó menos - 18 ó más
Carbenicilina 100 g en pruebas con especies 17 ó menos 18-22 23 ó más
de Proteus y con Escherichia coli
Carbenicilina 100 g en pruebas con 13 ó menos 14-16 17 ó más
Pseudomonas aeruginosas
Cefaloridina 30 UI cuando se le registra la 14 ó menos 15 -17 18 ó más
sensibilidad a la cefaloridina, cefaclor,
cefadroxil, cefalotina, cefalexina, cefapirina,
cefazolina, cefacetrilo y cefradina
Cefazolina 30 g 14 ó menos 15-17 18 ó más
Cefotaxima 30 µg 14 ó menos 15-22 23 ó más
Ceftazidima 30 g 14 ó menos 15-17 18 ó más
Ceftriaxona 30g 13 ó menos 14-20 21 ó más
Cefuroxima 30 g 14 ó menos 15-17 18 ó más
Ciprofloxacina 5g 15 ó menos 16-20 21 ó más
Cloranfenicol 30 g 12 ó menos 13-17 18 ó más
Colimicina 10 g 8 ó menos 9-10 11 ó más
Eritromicina 15 UI 13 ó menos 14 -22 23 ó más
Estreptomicina 10 UI 11 ó menos 12-14 15 ó más
Gentamicina 10 UI cuando se registra la 12 ó menos 13-14 15 ó más
sensibilida a la gentamicina y a la sisomicina
Kanamicina 30 UI 13 ó menos 14 - 17 18 ó más
Meticilina 5 g en pruebas con Staphylococcus 9 ó menos 10-13 14 ó más
Novobiocina 30 UI 17 ó menos 18-21 22 ó más
Oxacilina 1g en pruebas con Staphylococcus y 10 ó menos 11-12 13 ó más
neumococos
Oxacilina 1g en pruebas para Penicilina G 19 ó menos - 20 ó más
susceptibles
Penicilina 6 g en pruebas con Estafilococos 10 ó menos 21-28 29 ó más
Penicilina 6 g en pruebas con otros 11 ó menos 12-21 22 ó más
microorganismos
Sulfametoxazol / Trimetroprim 10 ó menos 11-15 16 ó más
(23,75 g/1,25 g)
Tetraciclina 30 UI 14 ó menos 15-18 19 ó más
Vancomicina 30 UI en pruebas con otros 9 ó menos 10-11 12 ó más
Gram - positivos
Vancomicina 30 UI en pruebas con 14 ó menos 15-16 17 ó más
enterococos

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TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
De 2 a 8 C. Protéjase de la humedad ubicando en desecadora.

ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:


12 días de 2 a 8 C. Protéjase de la humedad

PRECAUCIONES:
 Al sacar el bulbo para su uso, espere a que este alcance temperatura ambiente.
 Siempre que un disco haya sido extraído del bulbo, este deberá guardarse en un desecador
que cierre perfectamente.
 Los discos deben colocarse a una distancia no menor de 15 mm del centro del mismo al
borde de la placa .
 Manipule las cepas aisladas utilizando las medidas de protección y Bioseguridad para evitar
que el microorganismo entre en contacto con la piel y las mucosas y provoque infección

BIBLIOGRAFÍA:
1. Informe 32 OMS Comité de expertos de la OMS en Patrones Biológicos: P 153 – 190. Serie de informes
Técnicos No. 673. Ginebra 1982
2. Gavan, T. “Prueba in vitro de susceptibilidad antimicrobiana” Clin. Med. Nort. AMER. 58:493-504, 1974
3. Ericsson, A. M. y Sherris., J. D. Acta Patkol. Microbiol. Scond. Suppl 217 (B), 1971
4. Sdigmon, S. J. Post Grad Med. J. 40 (Suppl), 1964
5. Antibiotics in Laboratory Medicine. Victor Lorian M. D. Editor Williams & Welkins. Baltimore – London.
Los Angeles. Sydney Pág 27 – 60 Second Edition 1986

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CODIGOS
337.2.032545 AMIKACINA 30 µg
337.2.032590 AMPICILINA 10 µg
337.2.034077 AZLOCILINA 75 µg
337.2.090950 CARBENICILINA 100 µg
337.2.091015 CEFALORIDINA 30 UI
337.2.154181 CEFOTAXIMA 30 µg
337.2.094223 CEFTRIAXONA 30 µg
337.2.094161 CEFAZOLINA 30 µg
337.2.094211 CEFTAZIDINA 30 µg
337.2.094232 CEFUROXIMA 30 µg
337.2.091095 CLORANFENICOL 30 µg
337.2.185900 ERITROMICINA 15 UI
337.2.186500 ESTREPTOMICINA 10 UI
337.2.242500 GENTAMICINA 10 UI
337.2.364500 KANAMICINA 30 UI
337.2.488005 NOVOBIOCINA 30 UI
337.2.544632 OXACILINA 1 µg
337.2.573990 PENICILINA 6 µg
337.2.154763 Sulfametoxasol Trimetropina 23.75 µg/1,25µg
337.2.692450 TETRACICLINA 30 UI
337.2.154864 VANCOMICINA 30 UI

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DIAGNOSTICOS
(60 determinaciones) De acuerdo a la rapidez con que se inicia la aglutinación y
el tamaño de los agregados dentro del período de tiempo
CONTENIDO DEL ESTUCHE: señalado (2 min.) se puede efectuar un estimado de
clasificación de +,++, +++, ++++.
R1: Látex – FR. Frasco por 4 mL Para una valoración más precisa puede recurrirse a:
R2: Suero control positivo. Frasco por 0,5 mL (de origen Prueba semicuantitativa por diluciones seriadas:
humano)  Colocar en una gradilla 10 tubos para ensayo (13 x
R3: Suero control negativo. Frasco por 0,5 mL (de origen 100) mm, enumerados del 1 al 10.
humano)  Pipetear 1,9 mL de solución de cloruro de sodio 0,85
APLICACIÓN PROPUESTA: % en el tubo No. 1 y 1 mL en el resto de los tubos.
Para la determinación del Factor Reumatoideo en suero  Añadir 0,1 mL de suero problema al tubo No. 1,
por aglutinación en lámina. “PARA USO IN VITRO” mezclar bien y transferir 1 mL de la mezcla al tubo No.
2.
MATERIALES ADICIONALES:
 Láminas portaobjeto, aplicador,
 Mezclar bien y transferir 1 mL de la mezcla del tubo
No. 2 al tubo No. 3 y así sucesivamente hasta el último
solución cloruro de sodio 0,85 %, gradilla, tubos tubo.
para ensayo (13x100) mm y pipetas
 De cada dilución realizada en tubo se toma una gota y
PRINCIPIO DEL MÉTODO: se deposita en una lámina portaobjeto y se procede de igual
La detección del Factor Reumatoideo en suero por forma que en la prueba cualitativa.
aglutinación en lámina, es una reacción inmunoquímica Tubo No. 1 2 3 4 5
que se basa en la capacidad de unión del Factor Solución de 1,9 1 1 1 1
Reumatoideo (FR) con la Inmunoglobulina G adsorbida cloruro de
sobre un portador. Si el suero muestra es positivo al FR se sodio
debe observar la reacción de aglutinación a simple vista
antes de 2 min y si es negativo no ocurre aglutinación. Suero 0,1
CRITERIO DEL DESEMPEÑO Y LIMITACIONES Problema
DEL MÉTODO: Dilución 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320
El intervalo en que debe aparecer la aglutinación es de 2
min. y el tamaño de los agregados lo podemos clasificar Tubo No. 6 7 8 9 10
de +, ++, +++, ++++. Solución 1 1 1 1 1
Todas las pruebas de Látex para la determinación de de cloruro
Factor Reumatoideo son de gran sensibilidad, pero al de sodio
mismo tiempo pueden dar algunos falsos positivos, a pesar Suero
de la dilución inicial 1:20, por lo que deben tenerse Problema
siempre presente. Dilución 1/640 1/1280 1/2560 1/5120
MUESTRA: Interpretación :
Suero: Cuando no pueda efectuarse la prueba El título del suero es el recíproco de la más alta dilución
inmediatamente después de obtenido el suero, éste puede en la que se observa una clara aglutinación.
conservarse en refrigeración de 2 a 8 C durante 3 días Los títulos de 1/20 y 1/40 deben ser considerados como
como máximo. De lo contrario el suero debe congelarse. débilmente positivos.
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD: Títulos de 1/ 80 o superiores deben considerarse
Los reactivos R2 y R3 son los controles internos, donde el francamente positivos.
R1 debe aglutinar con R2 y no R3. Recomendaciones:
PROCEDIMIENTO:  No utilizar suero contaminado. Cuando no puede
Prueba cualitativa: efectuarse la prueba inmediatamente después de
 Diluir el suero problema 1:20 en solución de obtenido el suero, este puede conservase a una
cloruro de sodio 0,85 % (1mL de solución de cloruro temperatura de 2 a 8 C durante 3 días como máximo.
de sodio 0,85 % más una gota (0,05 mL) de suero De lo contrario el suero debe congelarse.
problema)  Los controles positivo y negativo deben usarse
 Depositar una gota del suero diluido sobre una directamente sin diluir
lámina portaobjeto. TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
 Añadir una gota de reactivo de Látex – FR De 2 a 8 C. No congelar el reactivo R1.
 Mezclar ambas gotas con un aplicador ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
 Homogeneizar moviendo de forma circular y 30 días de 2 a 8 C. No congelar el reactivo R1.
suavemente el portaobjeto. PRECAUCIONES:
R2 y R3 son “POTENCIALMENTE INFECCIOSOS”
 Efectuar la lectura frente a una lámina de BIBLIOGRAFÍA:
iluminación tangencial en un intervalo de 2 min. y
sobre una superficie negra.
1. Sonnerwirth Alex C., Jarret Leonard. Métodos y
Diagnósticos del laboratorio. Tomo 3. 1983. Editorial
Positivo: Aglutinación claramente visible Científico Técnica.
Negativo: No se produce aglutinación en el período de 2. Bernabei Dante. Seguridad Manual para el
tiempo antes mencionado. Laboratorio. Merck. Editorial E. Merck. 1994.

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Código 337.2. 392900
EPB “Carlos J. Finlay” Infanta 1162 CP 10300 Teléfono: 870-6016 FAX (537) 8795734
Email: cjfimefa@infomed.sld.cu, comercial@quimefa.minbas.cu
Web: WWW.biofinlay.sld.cu
DIAGNOSTICOS

(80 determinaciones) siembra y lo homogeneizamos perfectamente en la


gota de reactivo Látex-STAF.
CONTENIDO DEL ESTUCHE:  Efectúe la lectura frente a una lámpara de
Estuche por un frasco con 4 mL. iluminación tangencial en un intervalo de un minuto y
sobre una superficie negra para observar la reacción.
APLICACIÓN PROPUESTA:
Para la identificación rápida del Staphylococcus Técnica indirecta:
aureus (coagulasa positivo) por aglutinación en lámina  Sobre una lámina portaobjeto, deposite una
“PARA USO IN VITRO” pequeña cantidad (25 L) de solución salina, a
continuación y procediendo tal y como se señaló para
MATERIALES ADICIONALES: el cultivo en el método directo, homogenice
 Láminas portaobjeto perfectamente en la solución de cloruro de sodio 8,5
g/L .
 Asa de siembra o aguja
 Añadir una gota de reactivo Látex-STAF.
 Solución Cloruro de sodio 8,5 g/L
 Mezcle ambas gotas mediante un suave
 Cronómetro
movimiento de balanceo y con el empleo de la aguja
 Lámpara de iluminación tangencial
de siembra.
 Pipetas de 50 y 25 L
 Efectúe la lectura frente una lámina de
iluminación tangencial en un intervalo de un minuto y
PRINCIPIO DEL MÉTODO: sobre una superficie negra para observar la reacción.
La identificación del Staphylococcus aureus por
aglutinación en lámina, es una reacción
Interpretación:
inmunoquímica.
Positivo: aparición de una franca aglutinación con
agregados de tamaño considerable
CRITERIO DEL DESEMPEÑO Y
Negativo: No se produce aglutinación y la mezcla se
LIMITACIONES DEL MÉTODO: mantiene homogénea con aspecto lechoso,
El intervalo en que debe aparecer la aglutinación es de transcurrido el tiempo de observación.
1 min. y el tamaño de los agregados deben ser
considerables.
TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO:
De 2 a 8 C. NO CONGELAR.
MUESTRA:
La muestra consiste en una o más colonias del
ESTABILIDAD DEL PRODUCTO EN USO:
microorganismo aislada en un medio de cultivo y
El producto en uso es estable 30 d.
comprobado por microscopía óptica, que se
corresponde con un estafilococo.
A partir de esta colonia o un subcultivo de la misma, PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
se procede a realizar la reacción de acuerdo al La muestra debe ser manipulada como material
procedimiento que se describe a continuación. infeccioso y se deben cumplir las regulaciones
establecidas en los laboratorios de microbiología.
CONTROL INTERNO DE LA CALIDAD:
Reacción positiva: Staphylococcus aureus ATCC BIBLIOGRAFÍA:
25923 1. Klein, F. Et al. Characterization of two diferent
agglutinators in the latex fixation test occuring in normal
Reacción negativa: Staphylococcus epidermidis human sera. Inmunol. 10:87, 1966.
ATCC 12228 2. Atwater, E. et al: The latex fixation test patients with
liver disease. Ann. Int. Med. 58:419, 1963
PROCEDIMIENTO: 3. K. D .Piatkin, YU. S. Krivoshein. Microbiología. 2da
Técnica directa: Edición. 271. Editorial “MIR” Moscú. 1981.
 Se deposita una gota (50 L) del reactivo Látex- 4. J. Vandepitte, K. Engbaek, P. Piot, C. C. Heuk. Métodos
básicos de laboratorio en bacteriología clínica. OMS. Ginebra.
STAF, sobre una lámina portaobjeto 1993.
 Del cultivo que queremos identificar, ya sea de 5. El control de las enfermedades transmisibles. OMS.
colonias sobre una placa de petri, o del crecimiento Informe oficial de la asociación Estadounidense de Salud
sobre una cuña de medio agarizado, tome el Pública. Pag 161.Décimoséptima edición. 2001
equivalente a tres o cuatro colonias con aguja o asa de

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