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FILIAL LA MERCED

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

E. F. P. EN ING

ENIERIA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

PRACTICA N° 10

MORFOLOGIA DE LEVADURAS

CATEDRATICO:

Blgo: IBAÑEZ OJEDA, Julio

CATEDRA:

MICROBIOLOGIA GENERAL

ALUMNO:

MUÑOZ CISNEROS, Diana

SEMESTRE :

“V”

LA MERCED – CHANCHAMAYO

2018
MORFOLOGIA DE LEVADURAS

I. INTRODUCCIÓN:

No podemos hablar de Levaduras sin relacionarlas con el avance e impulso del


hombre. Se cree que hace aproximadamente nueve mil años, los Chinos ya fabricaban
vino y hace seis a ocho mil años de antigüedad los Sumerios, fabricaban la cerveza
como medio para poder disponer de cereales durante todo el año; ambos procesos
como resultado de la fermentación alcohólica que producen las levaduras. Además
los Egipcios hace seis mil años ya fabricaban pan con levaduras. La influencia de
estas bebidas alcohólicas, el pan y muchas otras cosas más que se fermentan por las
levaduras, ha sido de enorme importancia para la economía y civilización de todos
los pueblos.
El término “levadura” se aplicó por primera vez a la porción de masa fermentada que
se mezclaba con otra para hacerla alterarse y lograr así el levantamiento de la masa
en la elaboración de pan.
Los primeros fundamentos científicos del cultivo y uso en grandes cantidades, de las
levaduras, fueron descubiertos por Louis Pasteur, en el siglo XIX, Hoy se utilizan en
diferentes tipos de fermentación, y algunos de sus usos son: como fuente de vitaminas
del complejo B y de tiamina, en algunas fases de producción de antibióticos y
hormonas esteroides y alimentos para animales y seres humanos.
OBJETIVOS:

 Reconocer y manejar la técnicas de coloración para levaduras de los géneros


Saccharomyces, Schizosaccharomyces sp., Zygosaccharomyces sp y/o
Candeda sp. asociados a fermentaciones y alteraciones en alimentos.

 Determinar, morfológicamente y con ayuda del microscopio óptico, los


géneros Saccharomyces, Schizosaccharomyces sp., Zygosaccharomyces sp
y/o Candida sp. haciendo uso de las técnicas de tinción simples para
levaduras.
II. MARCO TEORICO:
2.1.Levadura:
Desde que se descubrieron las levaduras, y con los primeros estudios de las
mismas, se ha tratado de dar un concepto, pero conforme avanzaron los
conocimientos sobre ellas, ese concepto se hizo más difícil, pues constituyen
un grupo de microorganismos que no está bien definido ni homogeneizado.
Los límites de su posición taxonómica son varios y sujetos a decisiones
arbitrarias.
Pero para objeto de éste estudio optaremos por la opción de denominar
levadura a cualquiera de los diversos hongos microscópicos unicelulares que
son importantes por su capacidad para realizar la descomposición mediante
fermentación de diversos cuerpos orgánicos, principalmente los azúcares o
hidratos de carbono, produciendo distintas sustancia.
2.2. MORFOLOGIA:

Las levaduras son muy parecidas a bacterias macroscópicamente pero son


más cremosas y los colores que presentan son blancos, beiges o un poco más
oscuros. Algunas son rosadas o rojas porque tienen carotenoides; son
unicelulares; sus células tienen forma y dimensiones diversas, desde las
esféricas ovoides y elipsoidales, a las cilíndricas que pueden ser muy
alargadas y aun filamentosas. Como son polimorfas adopta distintas formas
dentro de la misma especie y aun en el mismo cultivo, lo cual depende de
diversos factores, especialmente del sustrato e que viven y de la edad de los
cultivos. Debido a esto la forma no siempre puede tomarse como carácter
taxonómico.

En ocasiones al reproducirse las células, quedan unidas formando pequeñas


o largas cadenas que son los seudomicelios; asimismo, algunas de ellas
pueden desarrollar largos filamentos que constituyen un micelio verdadero.
Las dimensiones más comunes de las células varían entre 2 y 4 µm de ancho
y 2 a 8 µm de largo; sin embargo, se encuentran levaduras alargadas que
tienen 10, 15 o 25 µm de longitud, y aquellas que constituyen filamentos
llegan a tener hasta 50, 70 y más micrómetros.
A. Pared celular
Las levaduras presentan partes de una célula completa: pared celular y
protoplasma; éste último contienen la membrana fundamental (plasmalema),
el citoplasma y el núcleo. La pared celular o cápsula en muy delgada o gruesa
según la edad de la célula y especie de levadura; está formada principalmente
de polisacáridos constituidos por mananas, β-glucanas y algo de quitina.

B. Membrana fundamental
Tiene estructura, constitución y funciones semejantes a las de otras células y
en los fenómenos de plasmosis se contrae junto con el citoplasma. Juega un
papel importante en la regulación del flujo de todos los materiales tanto hacia
el interior como hacia el exterior de la célula.

C. El citoplasma
En él se encuentran diversas estructuras metaplasmáticas (mitocondrias,
vacuolas y retículo endoplásmatico), así como granulaciones
paraplasmáticas (glucógeno y glóbulos metacromáticos).

D. El núcleo

Está rodeado por una doble membrana. En su interior se alberga un área


densa, en forma de media luna, a la que se denomina nucléolo. Los
cromosomas no son distinguibles, pero hay pruebas genéticas que indican la
existencia de al menos 17 pares y varios fragmentos en las células diploides.
El núcleo siempre está muy cercano a la zona donde está la gema (célula con
otra al lado o encima).
La estructura del núcleo de las levaduras puede variar según el grupo
taxonómico al que pertenecen.
2.3.TAXONOMIA

Las levaduras pertenecen al Reino Fungi y dentro de él a la división


Eumicota que agrupa a los hongos verdaderos. En esta división, las levaduras
se incluyen en 2 de las 5 subdivisiones de los Eumicetos. La Ascomycotina
representada por las levaduras capaces de producir ascosporas, llamadas por
ello esporógenas, y la Deuteromycotina representadas por las levaduras
incapaces de formar esporas llamadas no esporógenas. Los géneros de las
levaduras esporógenas englobados todos ellos en la familia
Saccharomycetaceae, se distribuyen en 3 subfamilias. Los géneros de las
levaduras no esporógenas constituyen la familia Cryptococcaceae. Además
las levaduras pueden ser clasificadas por debajo de los taxones género y
especie, en subespecies y variedades, que a menudo adquieren rango de
especie tras nuevas revisiones taxonómicas, o varias especies son unificadas
en una sola como subespecies de la misma, con lo que la clasificación se
complica aún más y se incrementa el número de sinonimias.

Pero también existe una sistematización más sencilla que se usa para
clasificar a las levaduras; durante muchos años, se han definido a las
levaduras en grupos utilitarios, teniendo en cuenta las actividades que
desarrollan los cultivos que se emplean en las fermentaciones industriales.

2.4. REPRODUCCIÓN
Tipos de reproducción
Las levaduras verdaderas pueden reproducirse por esporulación, gemación o
fisión.
A. Gemación

Proceso asexual, en el cual la célula progenitora reparte sus constituyentes


celulares con una célula hija (sin división del núcleo); las dos células son
iguales en su madurez.
B. Esporulación
Proceso de reproducción sexual; en el ciclo sexual, una célula diploide
normal (una célula con dos conjuntos de cromosomas y por consiguiente con
dos dotaciones de genes) da lugar a dos ascas o células esporogéneas, que
contienen cuatro ascosporas haploides (más fácil: células con una sola
dotación cromosómica y de genes). as ascosporas son de dos tipos sexuales:
a y alpha. Cada tipo puede desarrollar células haploides por gemación. La
unión de una célula haploide “a” con con otra “alpha” da lugar a una célula
normal diploide a/alpha. Las células haploides del mismo sexo pueden
también unirse ocasionalmente, formando células diploides anormales (a/a o
alpha/alpha) que sólo pueden reproducirse asexualmente por gemación.
C. Fisión
Reproducción vegetativa o asexual, semejante al proceso reproductor de las
bacterias. Las células aumentan de tamaño y se alargan, el núcleo se divide
y se originan dos células semejantes.
2.5. LEVADURAS PATÓGENAS

Casi todas las levaduras son saprofitas, y sus actividades, provechosas para
el hombre. Pero existen también algunas especies que pueden causar
enfermedades en las plantas y en los animales. La más importante de las
levaduras patógenas para los vegetales es la Nematospora coryli, que puede
infectar y producir manifestaciones patológicas en ciertas frutas y verduras.

Muchas de las levaduras relacionadas con los animales de sangre caliente no


son patógenas, o por lo menos lo son solo ligeramente. Normalmente, parece
que las bacterias del tracto intestinal mantienen reprimidas a las levaduras.

Las infecciones humanas por levaduras pueden adoptar la forma de


enfermedades de la piel (dermatofitosis), o de infecciones de los aparatos
respiratorio e intestinal. La causa más común de enfermedades por levaduras
en el hombre es el de Candida albicans, que produce con frecuencia
infecciones de la piel, uñas y mucosas. En algunas ocasiones, la C. albicans
da origen a infecciones generalizadas de bronquios y pulmones.
III. MATERIALES Y METODOS:

A. MATERIALES:

A) MATERIALES

- Muestra: Levaduras granuladas o pasta - Alcohol de 70% (Fleshmman)


- Lugol
- Agua destilada
- Mechero de alcohol
- Placas petri
- Laminas portaobjeto y cubreobjeto
- Microscopio óptico compuesto
- Cubeta de tinción.

B) PROCEDIMIENTO
1. Observación de Saccharomyces sp., Schizosaccharomyces sp. y/o
Zygosaccharomyces sp.
Técnica:
a. Inactivación de las ascosporas de S. cerevisiae u otras levaduras con fenol al 10%
por 10 minutos dentro en la placa petri.
b. Fijar en Carnoy (ácido acético glacial 1 volumen: alcohol 95° 3 volúmenes).
c. Colorear con Giemsa diluido en agua destilada: 1/10 por 10 minutos (se puede
emplear Giemsa diluido 1/40 por 1 hora).
d. Retirar la lámina portaobjetos y con una pinza levantar la lámina cubreobjeto pero
con sumo cuidado, ya que puede romperse las hifas y variar su disposición natural
en la lámina cubreobjeto. e. Añadir 1 ml. del fijador
f. Luego, dejar reposar hasta que se evapore por 3 a 5 minutos.
g. Enjuagar con alcohol.
h. Agregar Giemsa en cantidad suficiente para cubrir las estructuras.
i. Enjuagar con agua destilada, dejar secar al medio ambiente.
j. Luego, secar por lo menos 10 minutos, aclarar con xilol para montar con bálsamo
de Canadá.
k. Observar al microscopio a menor aumento.
IV. RESULTADOS Y DISCUSION:
4.1. RESULTADOS
En la práctica realizada de morfología de levaduras se trabajó con la levadura de
pan que es el Saccharomyces cerevisiae.
Cuando se llevó acabo a ver por el microscopia se pudo observar las levaduras
esparcidos en las placas.

4.2. DISCUSIONES
Según Wikipedia (2018). Nos menciona que Saccharomyces cerevisiae es un
hongo unicelular, un tipo de levadura utilizado industrialmente en la fabricación
de pan, cerveza y vino. En su ciclo de vida alternan dos formas, una haploide y
otra diploide. Ambas formas se reproducen de forma asexual por gemación. En
condiciones muy determinadas la forma diploide es capaz de reproducirse
sexualmente. En estos casos se produce la meiosis en la célula formándose un asca
que contiene cuatro ascosporas haploides.
En la práctica
En la práctica realizada se trabajo con la levadura
Saccharomyces cerevisiae como muestra y se pudo
observa bastantes hongos unicelulares como
mencipona dicho autor.
V. CONCLUSIONES:

 Se reconoció en la práctica realizada la técnicas de manejo de coloración de la


levaduras de los géneros Saccharomyces (Saccharomyces cerevisiae) que están
asociados a fermentaciones y alteraciones en alimentos.

 Se Determinó morfológicamente y con ayuda del microscopio óptico, los géneros


Saccharomyces, haciendo uso de las técnicas de tinción simples para levaduras.
VI. BIBLIOGRAFIA:
 https://www.azc.uam.mx/cbi/quimica/microbiologia/p06.pdf
 https://www.tiposdecosas.com/flagelos.html
 https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Leifson
 https://es.wikipedia.org/wiki/Saccharomyces_cerevisiae
VII. CUESTIONARIO:
1. Esquematice una levadura indicando sus principales estructuras internas.

2. Mencione al menos ocho ejemplos de especies de hongos levaduriformes.

 Candida
 Cryptococcus

3. Diga Ud. 5 diferencias estructurales entre levaduras y mohos.
Los mohos son organismos que no son ni plantas ni animales. Ellos son parte del
reino de los hongos. A diferencia de las plantas, los mohos no obtienen su energía
del sol a través de la fotosíntesis. De hecho la luz ultravioleta del sol inhibe el
crecimiento de moho
4. Detalle Ud. el mecanismo bioquímico por el cual las levaduras realizan
fermentaciones.
Las levaduras se alimentas de los azucares y luego de consumir los azucares pues
expulsa sus eses y esos tiende a la fermentación del producto.
5. En las observaciones de levaduras, ¿Cómo actúa el reactivo Carnoy?

Gemación: