DETERMINACIÓN DE FOSFATOS POR

COLORIMETRÍA (MÉTODO AMARILLO

DEL ÁCIDO
VANADOMOLBDOFOSFÓRICO).
En una solución diluida de ortofosfato, el molibdato amónico
reacciona en condiciones ácidas para formar un heteropoliácido,
ácido molibdofosfórico. En presencia de vanadio forma ácido
vanadomolibdofosfórico amarillo. La intensidad del color amarillo
es proporcional a la concentración de fosfatos.

 Materiales y reactivos

- Espectrofotómetro UV-visible para uso a 400-490 nm o bien

un fotómetro de filtro provisto de un filtro azul o violeta con
transmitancia máxima entre 400 y 470 nm.
- Material de vidrio de laboratorio
- Aparato de filtración y papel de filtro
- Solución acuosa de indicador de fenolftaleína.
- Ácido clorhídrico 1:1. Se puede utilizar H2SO4, HClO4 o
HNO3 debido a que la concentración ácida no es crítica para la
determinación, pero se recomienda una concentración final en la
muestra de 0,5N.
- Carbón activado. Lo utilizamos para eliminar las partículas
finas por lavado con agua destilada.
Solución A: Se disuelven 25 g
de molibdato amónico,
(NH4)6Mo7O24·4H2O, en 300 mL
de agua destilada.
Solución B: Se disuelven 1,25
g de metavanadato de amonio,
NH4VO3, calentando hasta
- Reactivo vanadato-
ebullición en 300 mL de agua
molibdato
destilada. Dejar enfriar y
añadir 330 mL de HCl
concentrado. Una vez enfriada
la solución B
a temperatura ambiente, vertir
la solución A sobre la B,
mezclar y diluir a 1 L.
- Solución patrón de Disolver 219,5 mg de
fosfatos. KH2PO4 anhidro en agua
 destilada y diluir a 1000 mL,
donde 1 mL equivale a una
concentración de 50,0 mg de
PO4-3- P

 Procedimiento

Debes realizar los siguientes pasos previos para eliminar

interferencias y conservar la muestra:
- Ajusta el pH de la muestra: Si el pH de la muestra es mayor de
10, añade 0,05 mL (una gota) de indicador de fenolftaleína a 50,0
mL de muestra y decolora el color rojo con HCl 1+1 antes de diluir
a 100 mL.
- Elimina el color de la muestra: Elimina el excesivo color de la
muestra agitando unos 50 mL con 200 mg de carbón activado en
un erlenmeyer durante 5 minutos y filtrando para eliminar el
carbón. Comprueba los fosfatos de cada lote de carbón porque
algunos poducen blancos con mucho reactivo.
- Desarrollo de color en la muestra: Pon 35 mL de muestra o
menos que contenga de 0,05 a 1,0 mg P, en un matraz aforado
de 50 mL. Añade 10 mL de reactivo vanadato-molibdato y diluye
hasta la señal con agua destilada. Debes preparar un blanco con
35 mL de agua destilada en lugar de la muestra. Al cabo de 10
minutos o más, mide la absorvancia de la muestra frente a un
blanco a longitud de onda de 400 a 490 nm en función de la
sensibilidad deseada. El color es estable durante días y su
intensidad no es afectada por las variaciones de la temperatura
ambiente.
- Se prepara la curva de calibrado: debes preparar una curva de
calibrado utilizando volúmenes adecuados de solución patrón de
fosfato y procediendo como el apartado anterior. Cuando el ion
Fe3+ sea suficiente bajo para no interferir, elabora un conjunto de
rectas de calibrado de una serie de soluciones patrón para varias
longitudes de onda. Esta acción permite una amplia gama de
concentraciones en una serie de determinaciones. Analiza,
al menos, un patrón con cada juego de muestras.

 Expresión de resultados

Para determinar la concentración de P expresados en mg/L se

aplica el siguiente cálculo:

50 mg P (en 50 mL volumen final) · 1000

mg P/L = ---------------------------------------
----
 mL muestra

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DETERMINACIÓN DE FOSFATOS POR

COLORIMETRÍA (MÉTODO AZUL DEL
ÁCIDO ASCÓRBICO).
Este método se aplica a la determinación de P inorgánico u
ortofosfatos. Se basa en la reacción en medio ácido entre el anión
fosfato y el molibdato amónico en presencia de tartrato de K y Sb,
para generar ácido fosfomolíbdico el cual es reducido mediante
ácido ascórbico generando una coloración azul debida al Mo y
susceptible de determinación colorimétrica.
 Materiales y Reactivos

- Espectrofotómetro o colorímetro equipado para lecturas en

zona infrarroja a 880 nm con cubetas de 2 cm de paso óptico.
- Material de vidrio de laboratorio y en especial, matraces
aforados de 100 mL.
- Disolución de H2SO4

- Disolución de molibdato
amónico al 4%.
- Disolución de ácido
ascórbico.
- Disolución de tartrato
doble de potásio y
antimonio.
- Reactivo de color (se
debe preparar cada vez que
se aplica el método)
Disuelve 20 g de (NH4)6Mo7O24·
4H2O en agua destilada y
enrasa a 500 mL.
Disuelve 1,76 g de sólido en
agua destilada y enrasa a 100
mL. Esta disolución es
fácilmente alterable y se debe
preparar cada vez que vaya a
utilizar.
Disuelve 1,3715 g de
K(SbO)C4H4O6·1/2H2O en agua
destilada y lleva la solución a
un total de 500 mL.
Mezcla 50 mL de disolución de
sulfúrico 5N, 30 mL de
disolución extemporánea de
ácido ascórbico, 15 mL de
disolución de molibdato
 amónico y 5 mL de disolución
de tartrato. Desecha este
reactivo si presenta coloración
azulada o verdosa.
Disuelve 0,877 g de
KH2PO4 sólido puro
(previamente desecado en la
estufa a 100ºC durante 24
horas) en agua destilada,
enrasa a 1000 mL. Si se diluye
esta disolución 1/100, se
- Disolución patrón de 200
obtiene un patrón de
mg/L de P.
2000 mg/L que se utiliza para
preparar disoluciones patrón
de fosfato (50 mL de volumen)
utilizables para la cofección de
la curva de calibrado, en un
rango de entre 5 y 500 mg/L
de P.
 Prodedimiento

- Pipetea 50 mL de muestra problema previamente centrifugada

durante cinco minutos a 5000 rpm y vierte el contenido en un
tubo de Nessler. Si se va a operar con la disolución patrón,
añade el contenido del matraz aforado de 100 mL a un tubo de
Nessler. Debes realizar juntamente con los patrones y las
muestras un blanco de patrones y uno de muestras.
- Si el agua se colorea con fenolftaleína (pH>8,3) neutraliza con
algunas gotas de ácido sulfúrico 5N.
- Añade 8 mL de reactivo de color, tapa y agita el tubo tres
veces.
- Espera 20 minutos para que reaccione y se desarrolle el
color.
- Efectua las lecturas en el espectrofotómetro. Una vez que
obtienes las lecturas de transmitancia de patrones y muestras,
construye la curva de calibrado.

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 Expresión de resultados

De la curva de calibrado se obtiene la concentración de la

muestra. El material de vidrio que se vaya a utilizar debe ser
lavado cuidadosamente con mezcla crómica con el fin de eliminar
posibles contaminaciones muy posibles por el uso de detergentes
de limpieza.
La presencia de arseniatos (0,1 mg/L de As) puede interferir este
ensayo. El cromo hexavalente y nitritos pueden reducir la
sensbilidad del método, mientras no existe interferencia por parte
de sulfuros y silicatos presentes en agua.

MÉTODO COLORIMÉTRICO DEL

FÓSFORO TOTAL.
La digestión con persulfato amónico de la muestra convierte la
mayoría de compuestos orgánicos de P, polifosfatos,
hexametafosfatos y fosfitos inorgánicos en ortofosfatos
susceptibles en las determinaciones colorimétricas explicadas en
los puntos anteriores.

 Materiales y reactivos

- Placa calefactora
Adiciona sobre 100 mL de
- Ácido sulfúrico agua destilada, 31
concentrado mL de ácido sulfúrico
concentrado comercial.
- Disolución ácido sulfúrico 0,5 M
- Persulfato de amonio sólido
Disuelve 40 g de sólido en
- Disolución de hidróxido
agua destilada,
de sodio 1 M
enrasando a 1000 mL

 Procedimiento

- Toma 50 mL de muestra en un recipiente termoresistente y

añade 1 mL de sulfúrico concentrado y 0,4 g de persulfato de
amonioo sólido. Llévalo a ebullición en placa, reduciendo su
volumen hasta unos 10 mL.
- Alcaliniza la muestra después de enfriar a temperatura
ambiente, con NaOH 1M hasta pH 7,5-8,0. Ajusta el pH, si es
necesario, con sulfúrico 0,5M.
- Enrasa la muestra a un total de 50 mL con agua destilada.
Una vez realizada la digestión puedes analizar la muestra a
 partir de los dos métodos, clica en uno de ellos o en ambos:

-metodo azul del acido ascórbico

-amarillo del acido vanadomolbdofosforico