HISTOLOGIA

HUMANA
GUIA DE PRÁCTICAS

PROFESORES

DR. ROLANDO URIA LOPEZ

DR. DANIEL LEON ARANDA
DR. JOSE JIMENEZ APARCANA
DR. MANUEL INJANTE INJANTE
DR. JESUS PACHECO BERTOLOTTI
DRA. MARIA MAYTA GARCIA

ALUMNO: ______________________________________________

GRUPO: ____________________

ICA-PERU
Lamina No. 1

Título : Corte Histológico con artefactos

Coloración : Hematoxilina Eosina
Los estudiantes traerán a la práctica: 1 paquete de algodón de 25 gramos, un huevo cocido, una
naranja, una hoja de bisturí No. 21 o 22, 15 cm. de ligadura de jebe

Procedimiento:
1.- Se fija con formol al 10% por un lapso mínimo de 6 horas y luego se le somete a un lavado
en agua corriente.
2.- Formación del bloque en parafina:
a. Deshidratar el tejido en una batería de alcoholes de concentración creciente de 70 hasta
100 grados,6 horas en cada uno.
b. Pasar el tejido por una batería de xilol, el que ocupara los espacios dejados por el agua,
unos 3 baños.
c. Con la ayuda de la estufa a 55 grados, se consigue que la parafina, con el xilol primero
y luego la parafina sola penetren en el tejido, en el lapso de unas 3 horas.
d. Formación del bloque: en un molde metálico o de papel se vierte parafina licuada. En
el fondo se coloca el tejido ya procesado, que la solidifica y está listo para ser cortado.

3.- Con la ayuda de un micrótomo con cuchilla de excelente filo, se procede a cortar el tejido
a 5 micras de grosor.
4.- Obtenido el corte se extiende en agua tibia, se le recoge en portaobjeto impregnado en
albúmina de Meyer y se coloca en una estufa a 45 grados por 20 minutos.
5.- Coloración con Hematoxilina-Eosina:
a. Desparafinizacion con dos baños de xilol.
b. Hidratación del tejido en una batería de alcoholes descendentes, durante unos 3
minutos y luego sumergirlo en agua.
c. Coloración con Hematoxilina: colorea el núcleo de color azul rojizo, en lapso de unos
8 minutos, el agua amoniacal y el ácido clorhídrico al 1 % ,por espacio de unos
segundos, hacen virar la hematoxilina a un azul más estable. Lavar el exceso con agua
corriente.
d. Coloración con Eosina al 1% :Colorea el citoplasma y el nucleolo de un color rosado
en el lapso de 1 minuto .Lavar de inmediato con agua corriente.
e. Deshidratar en una batería de alcoholes ascendentes, medio minuto cada uno.
f. Aclarar y diafanizar el tejido con dos baños de xilol.
g. Montaje: Cubrir el tejido con una laminilla con bálsamo de Canadá, sumergir en
h. xilol y limpiar el excedente y la lámina quedara lista para ser observada al
i. Microscopio.

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Cuando todos los pasos indicados no se siguen con el suficiente cuidado o el técnico no tiene
la suficiente experiencia, los cortes histológicos saldrán quemados, crudos, gruesos, arrugados,
doblados, plegados ,rasgados, con grumos de colorante, con polvo, con pelos, con burbujas, etc.
Todos estos errores de técnicas histológicas reciben el nombre de ARTEFACTOS.
Esquematice todos los pasos de la Técnica Histológica Estándar

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Enfoque con el menor aumento y recorra metódicamente el preparado y observara que en esta
lamina a propósito se han producido artefactos. Así por defecto de extendido observara arrugas
en cualquier zona, dobleces en los bordes libres del tejido, pliegues por superposición de dos o
más dobleces. Por defecto en la cuchilla del micrótomo pueden producirse desgarros, que se
reconocen fácilmente por sus bordes irregulares.
Los dientes o melladuras de la cuchilla dejan en el tejido una huella clara e inconfundible que
hay que aprender a reconocer.
Es posible encontrar zonas mal coloreadas, algunas fallas en el proceso de fijación o por error
en el proceso de coloración, pudiendo encontrarse además grumos o precipitados de colorantes.
Algunas laminas se encuentran contaminadas con materiales extraños entre los que se pueden
reconocer fibras vegetales, pelos de animales de laboratorio, partículas de polvo, etc. Es fácil
identificar estos elementos extraños porque generalmente se encuentran superpuestos en el
preparado y moviendo el micrométrico aparecen en otro plano de enfoque.
Cuando el montaje ha sido defectuoso se observan burbujas de diferentes tamaños, que se les
identifica por su contorno, generalmente doble y brillante(birrefringentes).

Aumento: _____________________

Coloración: ____________________

1.- ___________________________

2.- ___________________________

3.- ___________________________

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5.- ___________________________

6.- ___________________________

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8.- ___________________________

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Lamina No. 2
Título: Observación de células aisladas. Células de descamación de la mucosa oral
Coloración: Hematoxilina-Eosina (H. E)
Procedimiento:
Esta preparación deberá ser realizada por cada uno de los alumnos de la manera siguiente:
1.- Recolección de células por raspado suave de la mucosa gingival. Para esta operación puede
usarse el borde de un portaobjeto con el que se recoge una porción de células mezcladas
con saliva y se procede inmediatamente a la extensión en el centro de otra lámina
portaobjeto bien limpia.
2.- Se deja secar unos segundos y se coloca la lámina en el fijador que en este caso es el
alcohol éter (alcohol de 95 grados y éter en partes iguales),donde debe permanecer
aproximadamente 5º
3.- Hidratar gradualmente:
a. Alcohol absoluto por 30 segundos
b. Alcohol de 95 grados por 30 segundos
c. Agua destilada, de 30” a 1 minuto
4.- Colorear el núcleo con Hematoxilina 1 minuto
5.- Virar el color con agua corriente en 1-5 minutos
6.- Colorear el citoplasma con Eosina 1 minuto (Eosina nueva) o 2 minutos (Eosina vieja)
7.- Deshidratar gradualmente:
a. Alcohol de 95 grados por 30 segundos
b. Alcohol absoluto por 30 segundos.
8.- Aclarar con xilol ( xiloles I-II-III ,1 minuto en cada uno)
9.- Montar con bálsamo de Canadá.
Dibuje todos los pasos indicados:

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Observación: Con objetivo de pequeño aumento se aprecian las células aisladas o en grupos.
Examine su forma y tamaño y elija el grupo mejor extendido y coloreado para observar con el
siguiente aumento.
Es fácil identificar el núcleo de las células por su color azul (basofilo). Trate de ver la estructura
nuclear diferente de un núcleo a otro. En algunos se aprecian gránulos de cromatina de diferente
tamaño, otros presentan la cromatina densa y homogénea (núcleos picnoticos). El citoplasma
adquiere un color rosa pálido con la Eosina (Eosinofilo o Acidofilo), su aspecto es homogéneo,
pero no es raro apreciar algunas partículas puntiformes de color azul que corresponden a restos
de cromatina de otros núcleos destruidos o gérmenes que abundan en la boca. Generalmente
estas partículas se encuentran en otro plano de enfoque.

Aumento: _____________________

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