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PRÁCTICA 1

LÍQUIDOS CORPORALES Y OSMOLARIDAD

Objetivos :
 Calcular el volumen de los líquidos corporales de un animal.
 Calcular la osmolaridad de diversas soluciones y determinar su tonicidad.
 Identificar los efectos de la alteración de la osmolaridad del líquido extracelular sobre el volumen y la
integridad celular.

Temas de estudi o:
 Distribución y composición de los líquidos  Ósmosis
corporales  Características de las soluciones isotónicas,
 Molaridad y osmolaridad hipotónicas e hipertónica

Cuestionari o:

1. ¿Cómo se distribuye el agua en el organismo 8. ¿Cuál es la relación entre la molaridad y la


animal? osmolaridad de una solución cuyas moléculas de
2. Mencione el porcentaje del peso corporal al que soluto NO se disocian?
corresponden el agua corporal total (ACT), el 9. ¿Cuál es la relación entre la molaridad y la
líquido intracelular (LIC) y el líquido extracelular osmolaridad de una solución cuyas moléculas de
(LEC). soluto se disocian?
3. Calcule los valores de ACT, LIC y LEC en un perro 10.¿Cuál es el valor normal de osmolaridad de los
adulto que pesa 22 kg. líquidos corporales en los animales domésticos?
4. ¿Qué es el mol? 11.¿Qué es la ósmosis?
5. ¿Qué es una solución 1 molar? 12.Mencione qué caracteriza a una solución
6. ¿Qué es un osmol? isotónica, una hipotónica y una hipertónica.
7. ¿Qué indica la osmolaridad de una solución?

INTRODUCCIÓN
Los líquidos corporales comprenden el líquido intracelular (LIC) y el extracelular (LEC), que incluye el
plasma, el líquido intersticial y los líquidos transcelulares. El agua es el elemento más abundante de los líquidos
corporales y del organismo, ya que constituye aproximadamente el 60% del peso corporal del animal; de este
porcentaje, aproximadamente el 40% forma parte del LIC y el otro 20% del LEC. Sin embargo, el porcentaje del
peso corporal que corresponde al agua corporal total (ACT) y por lo tanto, al LIC y al LEC, depende de diversos
factores como la edad, el sexo, el contenido de grasa, el estado fisiológico. Así, el porcentaje del peso corporal
que corresponde al ACT puede encontrarse entre el 60-80% o inclusive, ligeramente por fuera de estos límites.
El LIC y el LEC están constituidos por agua, iones (Na+, K+, Cl-, Ca++, Mg++, H+), bicarbonato, fosfatos,
glucosa, aminoácidos, proteínas, lípidos, entre otras sustancias, las cuales se encuentran en una concentración
particular en cada uno de estos líquidos. El volumen y concentración de sus componentes confieren a los

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líquidos corporales características como el pH, la presión y la osmolaridad, que es una medida de la
concentración de solutos osmóticamente activos.
En esta práctica abordaremos el estudio de aspectos relacionados con la osmolaridad de algunas
soluciones, como los líquidos corporales y para ello, a continuación, revisaremos brevemente algunos
conceptos.
El mol, que es la unidad de medida de la cantidad de sustancia del Sistema Internacional de Unidades,
corresponde a la cantidad de sustancia que contiene 6.022 X 1023 (número de Avogadro) unidades elementales
(átomos en el caso de los elementos químicos, moléculas cuando se trata de compuestos químicos, etc.). La
cantidad de un elemento químico equivalente a su peso atómico expresado en gramos contiene 6.022 X 1023
átomos y por lo tanto, dicha cantidad corresponde a un mol de ese elemento; mientras que, la cantidad de un
compuesto químico equivalente a su peso molecular expresado en gramos contiene 6.022 X 1023 moléculas,
por lo tanto, dicha cantidad corresponde a un mol de ese compuesto; por ejemplo:
Elemento: Sodio (Na) Compuesto: Cloruro de sodio (NaCl)
Peso atómico del sodio: 23 Peso molecular del NaCl: 58.5
1 mol de Na = 23 gramos 1 mol de NaCl = 58.5 gramos
23 23
23 gramos de Na contienen 6.022x10 átomos de Na 58.5 gramos de NaCl contienen 6.022x10 moléculas de NaCl

Una solución está formada por uno o varios solutos y un solvente o disolvente, los cuales pueden
encontrarse en diferentes concentraciones que confieren a las soluciones su molaridad y osmolaridad. La
molaridad es una forma de expresar la concentración de las soluciones que está determinada por la cantidad
de moles de soluto presentes en cada litro de solución; por ejemplo, si una solución contiene un mol de soluto
por litro de solución, su molaridad es de 1. La molaridad se representa con la letra M (molar) y generalmente se
expresa en moles por litro (mol/l). Al indicar la molaridad debe especificarse el soluto implicado; por ejemplo,
la molaridad de una solución que contiene un mol de glucosa por litro de solución puede expresarse como:
solución 1 M de glucosa, solución 1 molar de glucosa o solución de glucosa con molaridad de 1 mol/l.
Los conceptos de mol y molaridad permiten, por ejemplo, disponer de soluciones, de compuestos
distintos, con igual concentración de moléculas y, reconocer que la concentración de moléculas puede ser
diferente, entre soluciones que contienen igual cantidad de masa de compuestos distintos. Estos aspectos son
de gran importancia en fisiología ya que muchos fenómenos biológicos dependen de la concentración de los
átomos o moléculas involucradas en ellos.
La osmolaridad de una solución indica la cantidad de osmoles de soluto por litro de solución. Un osmol
(osm) corresponde a un mol de partículas discretas o separadas (que pueden ser átomos o moléculas)
presentes en una solución. En soluciones cuyo disolvente es el agua, las moléculas de algunos compuestos
pueden disociarse, mientras que las de otros no. Así, por ejemplo, cada molécula de cloruro de sodio (NaCl)
puede disociarse en un ion sodio (Na+) y un cloruro (Cl-), en tanto que, cada molécula de cloruro de potasio
(KCl) puede disociarse en un ion potasio (K+) y un cloruro (Cl-); sin embargo, al disolver en agua cristales de
glucosa (C6H12O6) o de urea (CON2H4), las moléculas de estos compuestos no se disocian en los átomos que las
constituyen. Debido a esto, la cantidad de partículas discretas que aporta una determinada cantidad de moles
de un compuesto, depende del grado de disociación de las moléculas que lo conforman. Así, un litro de
solución que contiene un mol de urea, contiene un mol de partículas discretas (en este caso moléculas), esto
es, contiene un osmol y su osmolaridad es de 1 osm/l. Mientras que, en un litro de solución que contiene un
mol de NaCl (considerando que todas las moléculas se disociaran) habría un mol de Na+ y un mol de Cl- y, toda
vez que cada uno de estos moles correspondería a un osmol, la solución contendría dos osmoles y su
osmolaridad sería de 2 osm/l.

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Por lo tanto, la osmolaridad de una solución es igual a su molaridad multiplicada por el número de
partículas en las que se disocia la molécula del soluto. Si las moléculas del soluto no se disocian al dispersarse
en el solvente, la osmolaridad de la solución tendrá el mismo valor numérico que su molaridad.

1 mol de Na+ 1 osmol

1 mol de urea 1 osmol 1 mol de NaCl

1 mol de Cl- 1 osmol

Soluto cuya molécula no se disocia Soluto cuya molécula se disocia en dos partículas

Los líquidos corporales tienen un valor de osmolaridad de aproximadamente 280-300 miliosmoles/litro


(mOsm/l), la cual, como se mencionó antes, está dada por la presencia en el medio acuoso de concentraciones
específicas de diversas sustancias. La osmolaridad de los líquidos corporales es un elemento determinante del
movimiento de agua a través de la membrana plasmática mediante el proceso de ósmosis.
La ósmosis se define como la difusión neta o flujo neto, de agua a través de una membrana
semipermeable (membrana permeable al agua, pero impermeable o parcialmente permeable a los solutos), del
compartimiento de mayor concentración de agua (menor concentración de solutos o menor osmolaridad) al
compartimiento de menor concentración de agua (mayor concentración de solutos o mayor osmolaridad).
Muchos procesos fisiológicos, como la absorción y secreción de agua en el tracto gastrointestinal, así
como la reabsorción tubular de agua en los riñones, dependen de la ósmosis, en tales tejidos se establecen
gradientes de osmolaridad entre los compartimientos, que generan un flujo neto de agua; por ejemplo, de la
luz del intestino al interior los enterocitos y de ellos al espacio intersticial, de donde puede ingresar a los vasos
sanguíneos (absorción intestinal de agua). Sin embargo, en muchos tejidos, el LEC y el LIC tienen el mismo valor
de osmolaridad, por lo que no hay flujo neto de agua a través de la membrana plasmática y esta condición es
esencial para que el volumen intracelular se conserve; por lo que, si por alguna causa la osmolaridad de los
líquidos se altera, puede presentarse un desplazamiento neto de agua que cambie el volumen y la
concentración del líquido en el interior de las células, con consecuencias de diversa gravedad, que pueden
incluso causar la muerte del animal. Por tal razón, el mantenimiento de la osmolaridad de los líquidos
corporales, dentro de límites adecuados, es fundamental para el óptimo funcionamiento del organismo; el
cual, cuenta con mecanismos que permiten lograr dicho mantenimiento y, en medida de lo posible, corregir o
minimizar las alteraciones que sufra la osmolaridad. Así, por ejemplo, la pérdida de agua del LEC incrementa su
osmolaridad, lo que estimula la secreción de hormona antidiurética (ADH) y la sed, debido a lo cual, puede
incrementarse el volumen de agua del LEC y restablecerse el valor adecuado de osmolaridad.
En medicina, reviste gran importancia el conocimiento de la osmolaridad de las soluciones por el
impacto que su uso puede tener sobre el flujo transmembranal de agua y por consiguiente, sobre el volumen
celular; con base en ello, las soluciones pueden ser isotónicas, hipotónicas e hipertónicas. Una solución es
isotónica si al estar en contacto con las células del organismo no genera flujo neto de agua a través de la
membrana plasmática; una solución es hipotónica si provoca flujo neto de agua del exterior al interior de la
célula y es hipertónica si produce flujo neto de agua del interior al exterior de la célula.

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MATERIAL Y EQUIPO REQUERIDO
Por estudiante:
 Bata  Cinta adhesiva (masking tape)
 Manual de prácticas  Tabla periódica de los elementos
 Calculadora  Un par de guantes de látex

Equipo, material y sustancias proporcionadas por el laboratorio:


Para uso general:
 Una charola de metal  Un tubo con una muestra de sangre
 Una gradilla de metal
Por equipo:
 Una charola de metal  2 pipetas Pasteur de plástico
 Una gradilla de metal  2 microscopios ópticos
 Una piseta  5 portaobjetos
 4 vasos de precipitados de 100 ml  5 cubreobjetos
 3 matraces volumétricos de 100 ml  350 ml de agua destilada
 4 tubos de ensaye  Un sobre con 0.6 gramos de NaCl
 4 pipetas de vidrio de 1 o 2 ml  Un sobre con 0.9 gramos de NaCl
 Una propipeta  Un sobre con 1.4 gramos de NaCl

ACTIVIDADES
 Presentación del video “Difusión y ósmosis”.
 Demostración de los fenómenos de difusión simple y ósmosis con el programa PhysioEx 8.0®, que puede
ser consultado en la dirección:
http://www.morgancc.edu/faculty/smith,l/Physio/PysioEx8.0/bc_physioex_8/627400.cw/-/t/index.html

PROCEDIMIENTO
A. Cálculo y compar ación de los val ores de osmolaridad
1. Calcule los valores requeridos en la tabla para cada solución de cloruro de sodio. Con base en el valor de
osmolaridad real aproximada, indique la tonicidad de las soluciones.
Gramos de NaCl Gramos de NaCl Osmolaridad Osmolaridad real
Molaridad
Solución por litro de por 100 ml de calculada aproximada * Tonicidad
(moles/litro)
solución solución (mOsm/litro) (mOsm/litro)
NaCl al 0.9 %

NaCl al 0.6 %

NaCl al 1.4 %

NaCl al 5.85 %

Agua destilada **

* Calcule este valor considerando un coeficiente osmótico de 0.93 ó 93%.


** No es una solución propiamente dicha, ya que no contiene solutos, pero se incluye para comparación.

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B. Preparación de s oluciones de clorur o de sodio con di fer ente concentració n
1. Usando cinta adhesiva, identifique los cuatro vasos de precipitados de la siguiente manera:
 Agua destilada
 Solución de NaCl al 0.9 % (isotónica)
 Solución de NaCl al 0.6 % (hipotónica)
 Solución de NaCl al 1.4 % (hipertónica)
2. Rotule también los matraces volumétricos, con las tres soluciones a preparar.
3. Coloque en el matraz volumétrico la cantidad de cloruro de sodio necesaria para preparar la solución en
cuestión
4. Con la piseta, vierta agua destilada en el matraz hasta aproximadamente la mitad de su capacidad.
5. Coloque y sujete el tapón del matraz. Agite vigorosamente para disolver el NaCl.
6. Afore a 100 ml con agua destilada y vuelva a agitar.
7. Vierta la solución en el vaso de precipitados correspondiente.
8. Repita el procedimiento desde el paso 3 para preparar las demás soluciones.

C. Mezcla de la s angr e con l as sol uciones de cloruro de sodio


1. Identifique cuatro tubos de ensayo con cinta adhesiva como se indica a continuación y colóquelos en la
gradilla.
 Solución de NaCl al 0.9 % (isotónica)
 Solución de NaCl al 0.6 % (hipotónica)
 Solución de NaCl al 1.4 % (hipertónica)
 Agua destilada
2. Con una pipeta de vidrio coloque, en el fondo de cada uno de los tubos de ensayo, 0.1 ml de la sangre
proporcionada por el laboratorio.
3. Adicionalmente, con las pipetas de vidrio, coloque 0.4 ml de cada una de las soluciones preparadas y de
agua destilada, en los tubos correspondientes. Con movimientos suaves y circulares del tubo de ensayo,
mezcle hasta homogeneizar.

D. Preparación de frotis sanguí neos


1. Identifique tres portaobjetos con el nombre y tonicidad de cada una de las soluciones de cloruro de
sodio.
2. Etiquete un portaobjetos con la leyenda, “agua destilada” y otro con la leyenda, “sangre sola”.
Nota: Es recomendable preparar y observar los frotis en el siguiente orden: 1) sangre sola, 2) solución
isotónica, 3) solución hipotónica, 4) agua destilada y 5) solución hipertónica.
3. Para preparar el frotis o extendido de sangre sola, utilice la técnica de barrido descrita en la Figura 1
con la finalidad de evitar el amontonamiento de células y así facilitar su identificación al microscopio:
Paso 1. Coloque un portaobjetos en una superficie plana y firme. Con ayuda de una pipeta, deposite
una pequeña gota de sangre a 1cm de uno de los extremos.
Paso 2. Recargue el borde de un segundo portaobjetos sobre la superficie del primero. Acerque
cuidadosamente el segundo portaobjetos en dirección a la gota. Cuando el segundo portaobjetos y la
gota de sangre entren en contacto, espere tiempo suficiente para que la sangre se distribuya por
capilaridad a todo lo largo del borde del portaobjetos.

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Paso 3. Incline el segundo portaobjetos formando un ángulo de 45° aproximadamente respecto al
primero. Con un movimiento rápido y uniforme deslice el segundo portaobjetos dejando una capa de
sangre delgada en la superficie del primero. Deje secar completamente la muestra antes de observarla
al microscopio.

4. Para preparar los frotis faltantes, utilice la técnica de preparación húmeda descrita en la Figura 2:
Paso 1.Coloque una pequeña gota de la mezcla de sangre con solución salina o agua destilada al centro
del portaobjetos correspondiente.
Paso 2. Coloque un portaobjetos sobre la gota y observe al microscopio.

5. Proceda de manera similar con las tres muestras restantes.

Nota: Observe los frotis al microscopio conforme los vaya preparando ya que la evaporación del agua afecta
la osmolaridad de la solución, alterando los resultados.

E. Observaci ón de frotis al microscopi o


1. Observe el frotis al microscopio, empezando por el objetivo de menor aumento.
2. Una vez enfocado, cambie de objetivo. Repita este paso hasta llegar al objetivo de 40X.
3. Observe cuidadosamente el primer frotis (sangre sola) y describa, junto con su equipo, las características
generales de los glóbulos rojos haciendo énfasis en el tamaño y la forma individual de las células. Realice
un dibujo de lo observado y haga sus anotaciones en la tabla de resultados.
4. Observe cuidadosamente cada uno de los frotis restantes en el orden indicado y junto con su equipo,
describa las alteraciones observadas en los eritrocitos como resultado de la exposición a diferentes
soluciones. Realice las anotaciones pertinentes y dibuje lo observado.

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REPORTE DE LA PRÁCTICA
Sobre la base de la revisión de los aspectos teóricos del tema de esta práctica, discuta los resultados obtenidos.
Proporcione la información que se le pide y utilícela para elaborar su reporte de la práctica.
1. Complete la siguiente tabla :
Descripción de la
Imagen observada
Frotis morfología de los ¿A qué atribuye esta morfología?
al microscopio
eritrocitos

Sangre sola

Eritrocitos
expuestos a
solución
isotónica
(NaCl al 0.9%)

Eritrocitos
expuestos a
solución
hipotónica
(NaCl al 0.6%)

Eritrocitos
expuestos a
solución
hipertónica
(NaCl al 1.4%)

Eritrocitos
expuestos a
agua destilada

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2. Complete los siguientes enunciados escribiendo la información faltante en los espacios:
A) Cuando las células se exponen a un medio hipotónico, como la solución de NaCl _____%, se presenta
un flujo neto de agua del _______________________ al _______________________ de las células, lo
que provoca que el volumen del líquido intracelular _______________________ y las células
___________________________.
B) Cuando las células se exponen a un medio hipertónico, como la solución de NaCl _____%, se presenta
un flujo neto de agua del _______________________ al _______________________ de las células, lo
que provoca que el volumen del líquido intracelular _______________________ y las células
___________________________.
3. Discuta en media cuartilla la importancia que tiene para el organismo el mantenimiento de la
osmolaridad dentro de límites adecuados.

LITERATURA RECOMENDADA
Literatura básica
 Barrett KE, Barman SM, Boitano S y Brooks HL: Ganong. Fisiología Médica. 24ª ed. McGraw-Hill Interamericana,
México, 2013. (Clasificación en Biblioteca: QP31G32182013) Texto completo en formato electrónico disponible en www.
librunam.dgbiblio.unam.mx, ISBN: 9781456212124).
 Hall JE y Guyton AC: Tratado de Fisiología Médica. 12ª ed. Elsevier, España, 2011 (Clasificación en Biblioteca: QP34.5 G818 2011).
 Ruckebush Y, Phaneuf LP y Dunlop R: Fisiología de Pequeñas y Grandes Especies. Manual Moderno, México, 1994.
(Clasificación en Biblioteca: SF768 R8318).
 Smith EKM: Líquidos y electrolitos. Manual Moderno, 1994, México (Clasificación en Biblioteca: QP90.5 S54 1994).

Literatura c omplementaria
 Crockford HD y Knight SB: Fundamentos de Fisicoquímica. 4ªed. Compañía Continental, México, 1981. (Clasificación en
Biblioteca: QD453 C815195).
 Jiménez Vargas J y Macarulla JM: Fisicoquímica Fisiológica. 6ªed. Interamericana, México, 1984. (Clasificación en Biblioteca:
QD453 J522).

GLOSARIO
Mezcla homogénea, de tipo molecular o iónico, de dos o más sustancias que no reaccionan entre sí
Solución
y cuyos componentes se encuentran en proporción variada.
Flujo neto de moléculas de agua del compartimiento de menor concentración de soluto al
Ósmosis compartimiento de mayor concentración de soluto, a través de una membrana impermeable al
soluto pero permeable al agua.
Membrana
Membrana permeable al agua pero impermeable a los solutos.
semipermeable
Corresponde a la cantidad de gramos de una sustancia igual a su peso atómico, en el caso de los
Mol
elementos, o a su peso molecular, en el caso de los compuestos.
Molaridad Indica el número de moles de soluto contenidos en un litro de solución total.
Es un mol de partículas discretas (individuales) presentes en una disolución.
Osmol Equivale al peso molecular en gramos de una sustancia dividido por el número de partículas en
movimiento libre que cada molécula libera en solución.
Osmolaridad Indica el número de osmoles de soluto contenidos en un litro de solución total.
Expresa la desviación del comportamiento osmótico real sobre el coeficiente osmótico teórico.
Coeficiente
Indica la fracción de la osmolaridad calculada con un 100% de disociación, que corresponde a la
osmótico
osmolaridad real de una solución.
Término usado para referirse a la relación entre la osmolaridad de una solución y la del plasma y sus
Tonicidad
efectos sobre la difusión neta de agua a través de la membrana plasmática.

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