PREPARACIÓN Y PROCESAMIENTO DE HEMOCOMPONENTES

La SE puede separarse en cada uno de sus componentes, permitiendo obtener

un hemocomponente espeáfico para el tratamiento de más de un receptor. Los
bancos. de sangre deben planificar y coordinar el tipo de bolsa de extracción
(doble, triple, etc.) a los fines de producir los diferentes componentes necesarios
cada día. La SE extraída se deriva al laboratorio de preparación de
hemocomponentes donde se emplea como principal mecanismo de
fraccionamiento la centrifugación diferencial.

La FDA exige que la sangre se extraiga en bolsas libres de pirógenos, estériles,

incoloras y transparentes. Estas bolsas de plástico están herméticamente
selladas y permiten que la preparación de hemocomponentes se desarrolle en
un sistema o circuito cerrado. La bolsa de extracción de sangre no deberla ser
abierta y puesta en uso excepto con los propósitos de extraer sangre o transferir
los componentes a un contenedor distinto. El material del contenedor no debe
provocar un efecto adverso sobre la inocuidad, pureza o potencial de la sangre.
En algunos casos, es necesario el uso de CET -aprobados por la FDA-e incluso
se alienta su uso, sobre todo porque puede surgir la necesidad de abrir un
circuito. Algunos ejemplos incluyen la preparación de CRIOs en "pooles"
múltiples preparados prealmacenamiento, GRD lavados o concentrados
plaquetarios o GRD deglicerolizados. Los componentes preparados mediante
circuito abierto pueden requerir una reducción en la fecha de expiración.

El objetivo de la preparación de los hemocomponentes es separar la SE en sus

componentes más importantes mientras se reduce el contenido de otros
componentes. Por ejemplo, uno de los objetivos es la reducción de leucocitos no
deseados en una unidad de GRD. En Europa, la reducción de estos leucocitos
se logra parcialmente mediante la centrifugación que permite separar la capa
leucoplaquetaria (buffy-coat) de los glóbulos rojos, y luego llevar a cabo la
reducción extrayendo el buffy coat. En Estados Unidos, el principal método para
reducción de leucocitos es la filtración. Además de la variedad de métodos
aplicados en Europa y Estados Unidos, muchos otros parámetros de extracción
y preparación de componentes afectan la calidad de los productos.
Dichas variables se resumen en la Tabla. Recientemente se progresó en el
aumento de la obtención de componentes por medios automatizados en los
bancos de sangre como, por ejemplo, GRD leucorreducidos (LR), plaquetas y
plasma. La extracción automatizada de componentes reduce la necesidad de
una producción centralizada de componentes. El incremento de la
leucorreducción en la etapa previa al almacenamiento lleva a los laboratorios de
componentes a considerar tecnologías más complejas como la citometría de flujo
para poder llevar a cabo recuentos de leucocitos residuales. Se ha vuelto más
necesaria la cantidad de pruebas de control de calidad (CC) de
hemocomponentes LR, lo que tiene como resultado un aumento en los recursos
necesarios para el CC El número de procedimientos que requieren el uso de un
CET también aumenta la complejidad de las tareas realizadas en el laboratorio.
El armado de pooles de plaquetas para un almacenamiento de 5 días y la
evaluación de contaminación bacteriana de plaquetas también están cambiando
la naturaleza del trabajo que se lleva a cabo en el laboratorio.

Transporte de sangre entera

La SE que se obtiene en las campañas de extracción de sangre ambulatorias o

en las postas fijas debe transportarse tan pronto como sea posible al laboratorio
central de preparación de los componentes. Los requerimientos regulatorios y de
calidad establecen la temperatura y el momento en que la sangre debe
transportarse luego de la extracción. Una vez que se completa la flebotomía, la
bolsa de sangre al estar en contacto con el aire reduce su temperatura a
alrededor de 30 °C. Si dichas unidades se dejan a temperatura ambiente, el
índice de enfriamiento es bastante lento y se necesitan aproximadamente 6
horas más para que las unidades alcancen los 25 °C. Las unidades se ubican
típicamente en ambientes específicos de almacenamiento dependiendo del
componente que se prepare. Por ejemplo, las unidades de las cuales se harán
plaquetas se conservan a temperatura ambiente controlada (20 a 24°C). Algunos
bancos utilizan placas de enfriamiento que proporcionan una temperatura
estable de 20°c Estas placas refrigerantes contienen 1-4 butanodiol en cera
derretida, cuya temperatura de licuefacción es de 20 °c y sirve como absorbente
del calor. Con estas placas refrigerantes, se necesitan aproximadamente 2 horas
para que la sangre extraída alcance los 20 °C18 En el caso de no prepararse
plaquetas, la SE se ubica por lo general en un lugar para almacenamiento con
una temperatura de refrigeración (1-7 °C). Las bolsas de empaque que se utilizan
para el transporte deben ser validadas para asegurar que se mantenga la
temperatura correcta. Dicha validación se lleva a cabo con cantidades variables
de unidades en el contenedor y con una cantidad fija de hielo o paquetes de gel
para determinar el número de unidades que pueden almacenarse y transportarse
manteniendo la temperatura adecuada. Existen monitores portátiles para
registrar continuamente la temperatura. El plasma rico en plaquetas (PRP) debe
separarse de los GRs dentro del período de tiempo especificado en las normas
para el uso del sistema de extracción, procesamiento y almacenamiento de
sangre. En Europa, se permite una espera de 24 horas en 20-24 °C para preparar
plaquetas utilizando el método de buffy-coat.
Las unidades de Plasma Fresco Congelado (PFC) se transportan con hielo para
permitirles su enfriamiento entre 1°C- 10°C. El PFC debe separarse de la SE y
congelarse dentro del período de tiempo especificado en las normas para el uso
del sistema de la extracción, procesamiento y almacenamiento de sangre. En
Estados Unidos, el plasma que se separa de la unidad de SE y se coloca en el
congelador dentro de las 824 horas posteriores puede ser rotulado como
"Plasma Congelado Dentro de las 24 Horas Luego de la Flebotomía". En Europa,
si la SE se refrigera, el plasma puede separarse dentro de las 18 horas; si la SE
se mantiene entre 20-24 °C para la producción de plaquetas, el plasma puede
separarse dentro de las 24 horas, congelarse y rotularse como PFC.

Separacion primaria por centrifugación

La centrifugación de la SE es el primer paso en el procesamiento para la

elaboración de los tres hemocomponentes más importantes: GRD, plaquetas y
plasma. Llamamos a esta etapa de "Separación Primaria". Los Métodos 6-4, 6-
10 y 6-13 describen respectivamente la preparación de los tres
hemocomponentes mencionados obtenidos de SE.

Las tres variables más importantes que inciden directamente sobre la

recuperación de células desde la SE mediante centrifugación diferencial son: el
tamaño del rotor, la velocidad de centrifugación y la duración de la misma. Hay
múltiples trabajos publicados que habitualmente se refieren a la fuerza de
centrifugación relativa (fuerza g) cuyas unidades g se obtienen de una relación
entre el radio del rotor de la centrifuga y las revoluciones del rotor.

La adecuada combinación de dichos parámetros puede proporcionar un

rendimiento óptimo de plaquetas en los concentrados plaquetarios. Para una
determinada centrifuga, el tamaño del rotor es invariable en general. En
consecuencia, las otras dos variables (velocidad y duración de la centrifugación)
pueden alterarse paulatinamente como una estrategia Simplex a fin de
determinar las condiciones óptimas para preparar PRP. Cuando los CC
muestran que los recuentos de plaquetas en los concentrados no son
satisfactorios, esta estrategia permite identificar y modificar parámetros del
proceso para optimizar la calidad de los concentrados plaquetarios. Luego de
que el PRP y los GRD se separan mediante el primer paso de centrifugación,
llamado de centrifugación suave. En el estrato superior se reconoce al PRP como
sobrenadante de los GRD. Este PRP se transfiere a una bolsa satélite. La
mayoría de los laboratorios utilizan métodos manuales para transferir el plasma
sobrenadante de los GRD de la bolsa primaria. También se emplean equipos
semiautomatizados para esta etapa del proceso.

Separación secundaria por centrifugación

La bolsa con el PRP es sometida a una nueva centrifugación, llamada

centrifugación secundaria (giro intenso) cuyo patrón básico es emplear una
mayor Fuerza g para lograr que las plaquetas queden en la parte más distal de
la bolsa como consecuencia de la fuerza centrífuga. El plasma sobrenadante
pobre en plaquetas (PPP) resultante se transfiere a otro contenedor o bolsa
satélite, dejando aproximadamente 40-70 mL de PPP con el concentrado
plaquetario. Se deja que el concentrado de plaquetas descanse por un mínimo
de 1 hora y luego es resuspendido en el plasma. Una vez que las plaquetas se
resuspenden, se almacenan a temperatura ambiente (entre 20 -24 °C) en
agitación continua durante el tiempo regulado por la FDA para el método y el
material empleado. En Europa, el método de extracción de la capa
leucoplaquetaria buffy coat, requiere de una centrifugación primaria más intensa,
permitiendo en consecuencia obtener en el primer paso una mayor recuperación
de plasma.

En el día de la preparación, algunas unidades de concentrados plaquetarios

pueden contener “grumos” en realidad compuestos por agregados de plaquetas.
En la práctica de rutina, no es posible determinar precisamente el número y
tamaño de estos agregados. Una forma de control es la inspección visual, a fin
de determinar el grado de agregación y cuando éste es muy alto, asegurarse que
las unidades con excesiva cantidad de grumos no sean liberadas para su uso.
La mayoría de los grumos observados en el día 0 desaparecen al día 1 de
almacenamiento en agitación continua, particularmente aquellas con moderada
cantidad de grumos. La temperatura en la cual se preparan las plaquetas puede
influenciar la presencia de grumos. Las plaquetas preparadas a 24 °C aparentan
mostrar la menor cantidad de grumos cuando se compara a este concentrado
con aquellas preparadas a menos de 24 °C.
Las inspecciones visuales luego de preparar los concentrados de plaquetas
muestran la ausencia visible de glóbulos rojos en la mayor parte de unidades, lo
que implica que las unidades contienen menos de 0.4 x 10 9 glóbulos rojos.
Generalmente, el número de glóbulos rojos en una unidad de plaquetas no debe
exceder 1.0 x 109.

Preparación automatizada de hemocomponentes

Existen equipos para obtención de hemocomponentes serniautomatizados.

Luego de la centrifugación primaria, se coloca la SE en el prensa-plasma y una
placa de presión impulsa la salida de componentes de la bolsa contenedora.
Dicha salida puede surgir desde la parte superior o inferior del contenedor
dependiendo de la bolsa de extracción de SE. Cuando el sensor óptico del
equipo detecta una interfase celular, automáticamente se obtura la tubuladura
de salida con el empleo de un clamp mecánico y extrínseco. Estos equipos
pueden mejorar la estandarización de componentes, pero no son ampliamente
empleados en Estados Unidos.

Existe un sistema automatizado en Europa que realiza varias funciones hasta

preparar concentrados de plaquetas de donante múltiples obtenidos de la SE
mediante el método de extracción de capa leucocitaria. Los pasos automatizados
incluyen agrupamiento, lavado, centrifugado, transferencia, filtrado y sellado.

DESCRIPCION DE LOS HEMOCOMPONENTES MÁS RELEVANTES

Sangre entera

La extracción de sangre de un donante se realiza en una bolsa que contiene una

solución anticoagulante-conservante, diluyendo el número relativo de GRD
originando un valor de hematocrito más bajo. Las unidades de SE, entonces,
usualmente tienen un hematocrito de alrededor del 33%. La SE por 10 general
se fracciona en hemocomponentes y rara vez se utiliza como SE para
transfusiones. Los factores de coagulación lábiles disminuyen a medida que el
intervalo de almacenamiento aumenta. La SE puede reconstituirse mediante la
combinación de GRD y PFC para lograr el nivel de hematocrito deseado, por
ejemplo, cuando se utiliza para exanguinotransfusiones neonatales.
Glóbulos rojos desplasmatizados

Los GRD conservados en CPD- o CP2D tienen un tiempo de caducidad de 21

días y un hematocrito que oscila entre el 65%-80%. Para transfusiones a
neonatos o pacientes pediátricos son preferidos los GRD conservados en CPD,
y con un período de almacenamiento igual o menor a 7-10 días. Se puede
agregar AS a los GRD con CPD o CP2D para extender su tiempo de caducidad
a 42 días. Dicha AS debería agregarse a los GRD teniendo en cuenta las
instrucciones del fabricante - generalmente dentro de las 72 horas de la
extracción de sangre. Estos conservantes son diseñados a fin de minimizar
hemólisis a menos del 1 % durante el almacenamiento. La cantidad de AS que
se agrega a los GRD de una extracción de SE de 450 mL es de 100 mL; en el
caso de una extracción de 500 mL, la cantidad agregada es de 110 mL. Las
soluciones AS-1 y AS-5 contienen manitol, no así la AS-3. El plasma residual en
una unidad de GRD con AS es por lo general < 50 mL. El hematocrito de estas
unidades varía entre 55% a 65%. Dicho nivel de hematocrito facilita índices de
flujo excelentes durante la transfusión, obviando la necesidad de agregar
solución salina a la bolsa. Los GRD pueden, además, extraerse y conservarse
en CPDA-1 (hematocrito <80%) con un período de caducidad de 35 días.

Se pueden reducir la carga leucocitaria de los GRDs mediante el filtrado de SE

con un filtro interpuesto entre la tubuladura de la bolsa de extracción madre y el
resto o interponiendo un filtro con un CET. En cualquiera de los casos, los
leucocitos residuales no deberían exceder los 5 x l06· por unidad en Estados
Unidos o 1.0 x l06· por unidad en Europa. La mayoría de las unidades de GRD
se leucorreducen dentro de las 72 horas y siempre no excediendo las 120 horas
desde la extracción, siguiendo recomendaciones del fabricante del filtro de
leucorreducción.

El contenido de hemoglobina por unidad de GRD es variable ya que los niveles

de hemoglobina varían de donante a donante. En Estados Unidos, no se ha
establecido el nivel menor en la cantidad de hemoglobina presente en una
unidad. En el caso de una unidad de GRD estándar en Europa, el nivel menor
es de 45 gramos según los estándares del Consejo Europeo.
Aunque una unidad de GRO preparada de una extracción de SE de 450-500 mL
típicamente contiene un mínimo de 45 gramos de hemoglobina, dicha cantidad
se reduce a aproximadamente 40 gramos en los componentes leucorreducidos
(LR). La cantidad de hemoglobina por unidad se determina para cada sistema
automatizado de extracción de componentes y se basa en el nivel de
hemoglobina del donante y en su peso. La cantidad de hemoglobina presente en
las unidades de GRD obtenida mediante métodos automatizados es mucho más
consistente que en unidades derivadas de extracción de SE. Algunos autores
han recomendado que la cantidad de hemoglobina por unidad de GRD sea
estandarizada en 50 gramos.

Aquellos GRD rotulados corno unidades de bajo volumen están listos para
transfusión cuando: se obtienen 300-404 mL de SE con volumen anticoagulante
conservante calculado para 450 ± 45 mL, o cuando se extraen 333-449 mL de
SE en un volumen anticoagulante-conservante calculado para 500 ± 50 mL.
Aunque los GRD resultantes pueden utilizarse para transfusiones, no deben
prepararse plaquetas, PFC o CRlOs desde estas unidades de bajo volumen.

Luego de la extracción de SE, la tubuladura, donde originalmente estaba soldada

la aguja de la venopuntura, debe "segmentarse" en más de 3 segmentos.
Usualmente esta tubuladura queda dividida en 13-15 segmentos. Dichos
segmentos pueden utilizarse para pruebas de compatibilidad o para una
investigación futura por efectos adversos a la transfusión. En cada segmento se
conserva el número único de bolsa impreso por el fabricante. Un número ID de
donación impreso se envuelve alrededor del segmento archivado para
propósitos de investigación en caso de alguna reacción adversa a la transfusión.
Los segmentos retenidos se conservan en los bancos de sangre por 7 días luego
de la fecha de caducidad de la unidad, así como también en el servicio de
transfusión del hospital. La identificación de hemólisis en un segmento mediante
inspección visual por lo general no se corresponde con la presencia de hemólisis
en la unidad. En un estudio, aproximadamente tres cuartas partes de las
evaluaciones visuales no se correspondieron con los niveles de hemoglobina
medidos mediante métodos químicos, indicando un alto porcentaje de índices
falsos-positivos con la evaluación visual.
La inspección visual de las unidades de GRD puede detectar partículas blancas,
color anormal causado por contaminación bacteriana, hemólisis y coágulos. Se
puede observar un color anormal causado por contaminación bacteriana en
segmentos que lucen más claros que el color del contenido de la bolsa. El
contenido de la bolsa puede verse púrpura con o sin hemólisis y existir grandes
coágulos. La unidad puede centrifugarse para facilitar la inspección del
sobrenadante en el caso de posible contaminación bacteriana y una inspección
visual de dicho sobrenadante puede revelar la presencia de un líquido turbio,
marrón o rojo. No obstante, la inspección visual no detectará todas las unidades
contaminadas. Los coágulos de sangre en las unidades de GRD por lo general
son muy pequeños para ser detectados por inspección visual. Algunas veces los
coágulos se manifiestan durante la transfusión cuando causan obstrucción del
filtro o en el laboratorio de producción de componentes cuando las unidades se
filtran a través de un filtro de LR. Aquellas unidades con coágulos no deben
utilizarse para transfusiones.

Plaquetas

Se utilizan dos métodos para preparar concentrados plaquetarios de SE. El

primero es el método PRP el cual consiste en una centrifugación suave seguido
de una intensa. Recientemente se ha cuestionado la necesidad de dejar
“descansar” el concentrado de plaquetas resultante en el plasma antes de la
resuspensión, lo que es una metodología aceptada. En dicho estudio, se
compararon períodos de descanso de 0 a 5 minutos, 1 hora y 4 horas. Se
compararon tanto las propiedades in-vitro como la viabilidad in-vivo entre los tres
períodos de descanso. Las plaquetas normalmente se suspenden en 40-70 mL
de plasma, aunque hay estudios que han demostrado buenos índices de
recuperación y sobrevida cuando las plaquetas se almacenaron en volúmenes
de plasma de 35-40 mL. El plasma contenido en los concentrados plaquetarios
proporciona algunos factores de coagulación estables, aunque la concentración
de los factores lábiles de coagulación como el V y VIII disminuyen con el
almacenamiento.

El segundo método (recuperación de plaquetas de la "capa leucoplaquetaria" o

buffy coat) consiste en una centrifugación intensa de la unidad de SE que permite
la remoción hacia las bolsas de transferencia de PPP sobrenadante en la parte
superior de la bolsa y los GRD en la parte inferior. La capa leucocitaria que
permanece en la bolsa primaria se utiliza para recolectar plaquetas. Las
plaquetas pueden prepararse utilizando este método de SE almacenada a
temperatura ambiente (no menor a 20°C) durante 24 horas. El método PRP se
utiliza casi universalmente en Estados Unidos y el método de procesamiento del
buffy coat se utiliza en Europa y Canadá. Una de las ventajas de este último
método es que existe menos activación de plaquetas que con el método PRP ya
que las plaquetas se "amortiguan" con los glóbulos rojos durante la
centrifugación intensa. Aquellas plaquetas que se preparan con el método PRP
permiten que un 21 % del plasma y un 19% de las plaquetas permanezcan en el
concentrado de glóbulos rojos. En consecuencia, el hematocrito de los GRD
producido con el método PRP es menor (51 %) que con el método de reducción
de capa leucocitaria (60% ),18 La obtención de1 buffy coat provoca una pérdida
del 13% de los glóbulos rojos donados, Si los GRD preparados durante el
procedimiento de obtención de buffy coat son sometidos a filtración para LR, la
pérdida de glóbulos rojos donados es de aproximadamente un 15%,17 Aquellas
plaquetas preparadas mediante cualquiera de los dos métodos pueden
leucorreducirse con filtros de LR.

Las plaquetas deben estar en continuo movimiento durante el almacenamiento

a una temperatura entre 20°C y 24°C. Sin embargo, no se agitan durante el
transporte hacia hospitales desde el departamento de distribución del banco de
sangre ni durante transporte aéreo de larga distancia cuando los componentes
se intercambian entre los bancos de sangre, Los estudios in-vitro demostraron
que las plaquetas no se dañan cuando se almacenan sin movimiento durante 24
horas ni cuando se almacenaron a 37 °C durante 6 horas seguido por
almacenamiento a temperatura ambiente sin movimiento por otras 18 horas.

Las plaquetas podrían transportarse a regiones distantes durante clima frío y en

consecuencia ser expuestas a temperaturas menores a los 20°C Los estudios
han demostrado que el almacenamiento a 18,5 °C durante 3 días se asocia con
una reducción de la sobrevida plaquetaria si se compara con un almacenamiento
a 21,5 OC" Aquellas plaquetas almacenadas a 12 °C durante 17 horas tuvieron
como resultado una disminución de recuperación in-vivo de 48%-38%.
Asimismo, las plaquetas almacenadas a 16°C durante 17 horas tuvieron como
resultado una disminución de recuperación de 49% a 42%.32 Aún más, se ha
observado que la sobrevida plaquetaria ha disminuido a 2 días a 12 °C y a 3,5
días a 16 °C, Por lo tanto, se deben tener en cuenta los pasos correctos a fin de
mantener la temperatura requerida durante el almacenamiento en el banco de
sangre y durante el transporte.

Plasma fresco congelado

En los Estados Unidos, el PFC se separa de la SE y se almacena en el

congelador dentro de las 8 horas de haberse extraído la sangre o según las
instrucciones del fabricante para la utilización del sistema de extracción de
sangre, procesamiento y almacenamiento. El PFC tiene un tiempo de caducidad
de 12 meses mientras se almacene a -18 °c o menos. Según los Estándares de
la AABB, el PFC que se almacena a -65 °c podría almacenarse durante 7 años,
pero dicho almacenamiento requiere de la aprobación de la FDA. El Consejo de
Europa permite el almacenamiento hasta de 36 meses si el PFC se mantiene a
-25 °C o menos, y de 3 meses si el PFC se almacena dentro de una temperatura
de -18 °C a -25 °C. Los métodos de la preparación de PFC que se encuentran
detallados en los estándares del Consejo de Europa incluyen lo siguiente:

1. plasma que se separa dentro de las 6-18 horas luego de obtenerse la

unidad si está refrigerada.
2. plasma que se separa de las unidades de SE conservadas a una
temperatura de entre 20 °C-24 °C hasta 24 horas. Se puede lograr un
rápido congelamiento de plasma utilizando un ultra congelador, hielo
seco, o una mezcla de hielo seco y etanol o anticongelante.

Si no es posible el monitoreo continuo de la temperatura de los componentes

durante el almacenamiento, la FDA exige que dichos componentes sean
almacenados de tal forma que permita detectar un descongelamiento. Para
reconocer el descongelamiento inadvertido, la bolsa de líquido de plasma puede
"marcarse" utilizando una banda elástica alrededor de la bolsa o presionando un
tubo contra dicha bolsa antes que se congele. La hendidura desaparecerá
entonces si hubo descongelamiento.
Una bolsa de plasma congelada en posición horizontal y luego almacenada en
forma vertical permitirá además detectar descongelamiento al rastrear la burbuja
de aire ubicada en la parte superior de la bolsa en caso de descongelamiento.

El volumen de plasma por unidad varía de acuerdo al método utilizado para

obtener plasma. En los últimos años, muchos bancos de sangre de Estados
Unidos han incrementado la cantidad de SE extraída de 450 a 500 mL, lo cual
tiene como resultado una mayor cantidad de plasma por unidad. Una unidad
puede contener de 500 a 800 mL de plasma cuando la extracción se realiza
mediante plasmaféresis automatizada (de un solo donante).

El PFC contiene cantidades normales de factores de coagulación, antitrombina

y ADAMTS13. El número de glóbulos blancos presente en el PFC varía de
acuerdo con el método de centrifugación que se utilice. Existe registro de
linfocitos viables en PFC descongelado. Con el método de centrifugación suave,
el número de linfocitos viables es de 0.04 a 3.6 x 106. El método de centrifugación
intensa da como resultado un número de linfocitos viables de 0.47 a 45.4 x 106.
Con el método de segunda centrifugación, el número es de 0.4 a 37.2 x 106
leucocitos. Aún más, en el caso de los métodos de centrifugación intenso y
segunda centrifugación, 92% a 86% de las bolsas tenían recuentos de <5 x 106,
respectivamente. El PFC leucorreducido (PFCLR) preparado utilizando un filtro
puede lograr recuentos de <2.0, x 105 pudiendo procesarse hasta 5 unidades por
filtro. Algunas de las desventajas del PFC-LR incluyen niveles reducidos de
algunos factores de coagulación (Factores V, VIII, IX, XI, Y XII), pérdida de
volumen de 5% a 10% durante el filtrado y posible activación de los factores de
coagulación. Una vez que se descongela el PFC, tiene un tiempo de caducidad
de 6 horas si se lo conserva a 1 °C-6 °C. La extensión de dicho tiempo de 6 horas
a 24 horas luego del descongelamiento significó una variación de la 21 CFR
606,122 (m)(3) de la FDA. Sin embargo, al final del intervalo, el plasma puede
rotularse como plasma descongelado, puede almacenarse por un período de 4
días adicionales a 1 C-6 °C. El Plasma Descongelado preparado de PFC y
almacenado durante 5 días contiene niveles reducidos de Factor V (>60%) y
Factor VIII (>40%). Los niveles de ADAMTS13 son bien conservados durante 5
días a 1 °C-6 °C en el plasma descongelado. El PFC que no se utiliza para
transfusiones puede utilizarse para ser fraccionado e industrializados para
fabricar derivados plasmáticos.

Plasma congelado dentro de las 24 horas luego de la flebotomía

El plasma que se congela dentro de las 24 horas de extracción puede rotularse

como "plasma congelado dentro de las 24 horas luego de la flebotomía". Una
vez descongelado, el PF24 tiene un tiempo de caducidad de 6 horas a 1°C -6 °c.
La extensión de dicho tiempo de 6 horas a 24 horas luego del descongelamiento
es un requerimiento de variación de la 21 CFR 606,122(m)(3) de la FDA. Sin
embargo, al final del intervalo, el plasma puede re-rotularse como plasma
descongelado, que puede almacenarse por un período de 4 días adicionales a 1
°C-6 °C. Este componente contiene cantidades normales de Factor V, pero de
alguna manera tiene niveles reducidos de Factor VIII.

Plasma sobrenadante de CRIOs (PSC)

El PSC es un subproducto de la producción de CRIOs y tiene un tiempo de

caducidad de 12 meses a partir de la fecha de extracción en un almacenamiento
de -18 °C. El producto contiene un nivel normal de Factor V (85%); incluso luego
de la remoción de CRIOs, el producto tiene un nivel de fibrinógeno de
aproximadamente 200 mg/Dl. El PSC se utiliza para tratar a pacientes con
púrpura trombótica trombocitopénica. Los niveles de los siguientes factores de
coagulación han demostrado ser normales: I, VII, X, ∝2 -antiplasmina,
antitrombina, proteína C y proteína S. Existe una disminución del Factor VIII, el
factor von Willebrand (vWF), de la actividad del vWF, del fibrinógeno y del Factor
XIII.

Plasma liquido (PL)

El PL para transfusiones puede separarse de la SE en cualquier momento

durante el almacenamiento y conservarse a una temperatura de 1 °C-6 °C hasta
5 días luego del tiempo de caducidad de la SE.
Plasma recuperado (PH)

Los bancos de sangre por lo general convierten el plasma y el plasma líquido en

un componente sin licencia, “PR (plasma para manufactura)", el cual usualmente
se envía a una planta fraccionadora y se procesa en derivados como la albúmina
y/o inmunoglobulinas. Para enviar el plasma recuperado, la entidad recolectora
debe tener un "acuerdo de intercambio" con el fabricante. Debido a que el PR no
tiene tiempo de caducidad, los registros de dicho componente deben retenerse
indefinidamente. Las condiciones de almacenamiento del PR son establecidas
por la planta fraccionadora.

Plasma Inactivado (PI)

El plasma puede tratarse para inactivación de agentes microbianos a fin de lograr

reducción de flora patógena. Existen tres métodos que se utilizan en Europa,
pero no en Estados Unidos: el azul de metileno, psoraleno (amotosalen), y
tratamiento con solventes/detergentes.

El azul de metileno (aproximadamente 0,085 mg/unidad de plasma) puede

agregarse al PFC descongelado, seguido de una activación utilizando una luz
blanca. Luego de la remoción del azul de metileno con un filtro (concentración
residual: 0,3 umol), el plasma puede congelarse. El plasma tratado con azul de
metileno contiene aproximadamente un 15%-20% menos de Factor VIII y
fibrinógeno.

El plasma preparado de SE o mediante métodos automatizados puede tratarse

con 15 mL de amotosalen por 250 mL de plasma, seguido de iluminación con luz
ultravioleta A (320-400 nrn) con 3.0 J/cm2. Una vez que el amotosalen se
remueve al exponer el plasma tratado a un equipo de absorción, la unidad se
congela para almacenarse a -18 °C. Existe un registro de los valores promedios
de las actividades de los factores para coagulación y antitrombóticos que ubican
estos productos dentro de las variantes de referencia del plasma no tratado.

El plasma tratado con solvente/detergente (plasma SD) se prepara en base a un

grupo de plasma de varios donantes (no más de 2500) que es sometido a
tratamiento con 1 % de fosfato de tri-n-butyl fosfato (TNBF, por sus siglas en
inglés) y 1 % de Tritón X-100 para reducción de patógenos. El tratamiento ha
demostrado una significativa inactivación de los virus con envoltura lipídica. El
plasma SD se realiza en establecimientos que pueden manejar producciones a
gran escala a diferencia de los bancos de sangre. Cada unidad contiene 200 mL
de plasma que se almacena congelado· a -18 °C con un tiempo de caducidad de
12 meses. Todos los factores de coagulación caen un 10% en el plasma SD,
excepto por el Factor VIII, que cae un 20%. Además, el plasma SD contiene
50% menos de proteína S funcional en comparación con el PFC no tratado. El
producto se rotula con el grupo sanguíneo ABO y, una vez descongelado, debe
utilizarse dentro de las 24 horas. El plasma SD se encuentra disponible en
Europa, pero ya no es distribuido por el fabricante en los Estados Unidos.

Crioprecipitado (CRIO)

El CRIO se obtiene del PFC. Esta proteína insoluble en frío, que precipita cuando
el PFC se descongela a 1 °C -6 °C, y se obtiene por centrifugación. El plasma
sobrenadante (plasma sobrenadante de CRIO) se transfiere a una bolsa satélite;
y el precipitado se resuspende en una pequeña cantidad de plasma residual,
generalmente 15 mL, y luego se congela nuevamente. El descongelamiento del
PFC para preparar CRIO puede llevarse a cabo colocando el PFC en un
refrigerador (1 °C -6 °C) durante la noche o en un baño de agua circulante de 1
°C -6 °C. También se ha descripto un método alternativo que utiliza microondas
para descongelar. El CRIO se congela dentro de la hora de preparación para ser
almacenado a -18 °C durante 12 meses a partir de la fecha original de extracción.

Los Estándares de la MBB requieren que el CRIO contenga por 10 menos 80

unidades internacionales (UI) de Factor VIII y 150 mg de fibrinógeno por unidad,
aunque generalmente el promedio de contenido de fibrinógeno es de 250 mg.
Se ha informado sobre preparaciones más actuales con mayor cantidad de
fibrinógeno (media, 388 mg/unidad). Además, contiene la actividad del Cofactor
de Ristocetina-vWF (aproximadamente 170 unidades/bolsa), Factor XIII
(aproximadamente 60 unidades/bolsa), y fibronectina. A aquellas unidades que
contienen 15 mL de plasma o más a menudo se las denomina "CRIO húmedo"
mientras que el término "CRIO seco" por lo general tiene menos de 10 mL de
plasma por unidad. El CRIO seco contiene menores cantidades de fibrinógeno
en comparación al CRIO húmedo (90 vs 140 mg/bolsa)." El congelamiento rápido
del PFC aumenta el rendimiento del Factor VIII en el CRIO. Los niveles de
ADAMTS13 son normales en el CRIO. Tanto los anticuerpos naturales con
especificidad anti-A y anti-B están presentes en el CRIO, pero la cantidad
combinada de dichos anticuerpos de la unidad de plasma es sólo de 1,15% del
total. El CRIO congelado se almacena a temperatura ambiente (20 °C-24 °C),
durante el cual los índices de disminución de los niveles de Factor VIII en 2, 4 y
6 horas son aproximadamente de 10%, 20% y 30%, respectivamente. El CRIO
de los grupos sanguíneos A y B tiene niveles más altos de Factor VIII cuando se
los compara con aquellos derivados de los donantes con grupo sanguíneo O
(aproximadamente 120 vs 80 UI por bolsa, respectivamente).

Los CRIO pueden prepararse para transfusiones de tres maneras:

1. Una unidad simple puede almacenarse durante 6 horas luego del

descongelamiento.
2. Los "pools" - utilizando un sistema "abierto" (sin usar un CET) pueden
almacenarse durante 4 horas luego del descongelamiento.
3. Los pools utilizando un sistema" cerrado" (empleando un CET) tanto antes
del almacenamiento congelado, como después del descongelamiento,
pueden conservarse por 6 horas luego del descongelamiento o
preparación de un "pool".

CONTROL DE CALIDAD DE LOS HEMOCOMPONENTES

La evaluación del CC de los hemocomponentes es necesaria para cumplir con

los requisitos de la FDA y otros requerimientos regulatorios. Dichos
requerimientos son estándares mínimos y un banco de sangre podría establecer
estándares más estrictos en forma individual. Las fallas del CC pueden servir
como un indicador de reactivos o materiales subóptimos inesperados. Aún más,
los datos del CC revelan variaciones previamente no reconocidas de
procedimientos validados. La detección oportuna proporciona un enfoque
proactivo para la identificación temprana y resolución de un problema en la
producción.
Las limitaciones del CC se demuestran, por ejemplo, en aquellas fallas que no
son fallas de proceso sino asociadas con las variantes relacionadas con el
donante que no pueden controlarse. Algunos ejemplos incluyen bacteriemia
oculta del donante o viremia y una falla en la LR por la presencia de rasgo
drepanocítico de hemoglobina y la obstrucción del filtro.

En Estados Unidos, la FDA proporciona instrucciones específicas para las cuales

deben aplicarse medidas de CC. En el caso de ciertos hemocomponentes, puede
resultar poco práctico llevar a cabo los pasos de CC. Por ejemplo, la FDA o el
Consejo de Europa no requieren CC de filtros de LR de uso corriente aliado de
la cama del paciente.

Los equipos para CC son necesarios para asegurar que los hemocomponentes
logren alcanzar las propiedades deseadas de manera consistente.

Se ha sugerido un proceso de control estadístico para el CC. Se espera que

dicho enfoque proporcione definición sobre la conformidad de un producto sobre
un estándar con una probabilidad dada. Este enfoque además permite que se
establezca un límite para no conformidades, facilita la implementación de
acciones correctivas y permite que los CC se individualicen para los distintos
hemocomponentes.