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PUNO
MONOGRAFIA
PRESENTADO POR:
DOCENTE:
MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA II
PUNO - PERU
2018
DEDICATORIA
A nuestros padres, que nos trajeron al mundo con mucho amor, quienes han compartido alegrías
y tristezas; que con abnegación, consejos y sabiduría nos han ido formado por el buen camino,
sembrando con paciencia la semilla del amor, valores y la responsabilidad, la cual ha venido
germinando en cada uno de nosotros.
A cada uno de mis docentes; que sin escapar uno solo de ellos, han sabido transmitir su
conocimiento durante este tiempo de estudios y por lo cual espero saber llevar en alto sus
enseñanzas.
AGRADECIMIENTOS
A Dios, ser todo poderoso creador de todo cuanto existe, quien con su infinita misericordia y
ternura me ha dado su guía, su sabiduría y fortaleza para mantenerme firme en este largo caminar,
me ha dado todo lo necesario para que salga adelante victorioso en este camino de mi sueño de ser
profesional.
RESUMEN
Esta monografía nos muestra la importancia que tiene en conocer las estructuras micóticas
puesto que en laboratorio de microbiología es común que se tenga que analizar muestras para
diagnosticar alguna infección que puede ser causado por este tipo de microorganismos (hongos),
para ello es imprescindible poder identificar las características, morfología y estructura tanto
macroscópica y microscópicamente, las que nos permite diferenciar a los diferentes géneros
importancia). Para ello tiene que seguirse una serie de procesos desde la obtención de la muestra,
Contenido
DEDICATORIA ........................................................................................................................ 2
AGRADECIMIENTOS ............................................................................................................. 3
RESUMEN ............................................................................................................................. 1
I. INTRODUCCION ........................................................................................................ 1
2.2.1.2. Blastomicetos................................................................................................... 21
MUESTRAS ......................................................................................................................... 36
2.2.3. MANEJO............................................................................................................. 38
MUESTRAS ......................................................................................................................... 39
I. INTRODUCCION
Los hongos son organismos muy comunes en la naturaleza, puesto que viven prácticamente en
Comprende aquellas enfermedades producidas por los hongos directamente (Micosis) y a las
enfermedades producidas por los metabolitos de estos (hongos), después de la ingesta de alimentos
contaminados (Micotoxicosis). Esta ciencia ti ene sus orígenes en el periodo de los primeros
microscopistas, en el siglo XVI, con personajes importantes como los doctores, Leeuwenhoek,
Los aportes que dieron a esta ciencia fueron: enmarcarlos en su propio reino, y clasificar la
taxonomía, hábitos nutricionales, reproducción y sus diagnósticos. Los hongos patógenos, como
importancia, sin obviar la acción de sus metabolitos y las técnicas de recolección de muestras y
diagnóstico.
todo las de tipo oportunista, ello ha significado la aparición de nuevas formas clínicas de micosis
Actualmente se reconocen entre 300 y 400 especies de hongos causantes de micosis sistémicas,
las cuales constituyen un pequeño porcentaje del total de más de 100.000 especies catalogadas.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 2
La mayoría de las micosis oportunistas siguen siendo ocasionadas por las especies clásicas:
2.1. GENERALIDADES
2.1.1. HONGOS
Los hongos son organismos eucariotes cuyas células contienen mitocondrias, un núcleo bien
definido y otros organelos rodeados de membrana, carecen de clorofila y cloroplastos, por lo que
no fotosintetizan. Las células de los hongos están rodeadas de paredes celulares constituidas por
Dado que son heterótrofos, son incapaces de sintetizar su propia materia orgánica, pero no
ingieren alimento. Los hongos secretan enzimas digestivas y después absorben al alimento pre
organismos vivos a los que parasitan o de materia orgánica muerta a la que descomponen (Solomon
La mayoría de los hongos están constituidos por finas fibras que contienen protoplasma,
llamadas hifas. Éstas a menudo están divididas por tabiques llamados septos. En cada hifa hay uno
o dos núcleos y el protoplasma se mueve a través de un diminuto poro que ostenta el centro de
cada septo (Fig. 1). También existen hifas llamadas cenocíticas porque no se dividen en células
individuales, sino que tienen el aspecto de una célula gigante multinucleada alargada. (Guzman
et. al., 1993). La proliferación de hifas, resultante de este crecimiento, se llama micelio.
Los hongos se desarrollan mejor en hábitats oscuros y húmedos, requieren humedad y pueden
obtener agua de una atmósfera húmeda así como del medio en que viven. Cuando el ambiente se
torna demasiado seco, los hongos sobreviven entrando en una fase latente o produciendo esporas
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 4
resistentes a la desecación. El pH óptimo para ellos es de 5.6, sin embargo alguno hongos toleran
soluciones azucaradas como jalea, que dificultan o impiden la proliferación de bacterias. Los
hongos también prosperan en un amplio intervalo de temperatura (Guzman et. al., 1993).
Los hongos se reproducen por medio de esporas microscópicas, que carecen de flagelos y son
estructuras reproductivas inmóviles, dispersadas por el viento o por animales. Suelen tener hifas
aéreas en contacto con la atmósfera, lo que permite que las esporas sean llevadas por el viento a
nuevas zonas. En algunos hongos las hifas aéreas forman estructuras reproductivas grandes y
complejas en las cuales se producen esporas. Estas estructuras se denominan cuerpos fructíferos o
Los hongos pueden producir esporas de manera sexual o asexual. Las células fungales por lo
general poseen núcleo haploide. En la reproducción sexual, las hifas de dos tipos de apareamiento
genéticamente distinto se reúnen y sus núcleos se fusionan, formando un cigoto diploide. En dos
grupos de hongos (ascomicetos y basidiomicetos), las hifas se fusionan pero los dos núcleos
fungal. Cuando la espora fungal entra en contacto con una fuente de alimento adecuada, germina
y comienza a desarrollarse. Una hifa filiforme emerge de la diminuta espora y crece, ramificándose
con frecuencia (Guzman et. al., 1993 y Solomon et. al., 2000).
2. Anticuerpo. Son glicoproteínas del tipo gamma globulina, que se encuentran de forma
soluble en la sangre u otros fluidos corporales de los vertebrados, y son empleados por el
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 5
sistema inmunitario para identificar y neutralizar elementos extraños tales como hongos,
cadenas.
5. Cápsula. Envoltura hialina y gelatinosa que rodea a una célula, formada generalmente por
mucopolisacáridos.
conidióforo.
conideos.
10. Dermatofito. Hongo queratonofílico que pertenece a uno de los géneros siguientes:
11. Dimorfismo. Propiedad que tienen algunos hongos patógenos de presentar una morfología
12. Escamas. Son colecciones de partículas del epitelio queratinizado de piel, uñas y/o pelo.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 6
13. Espora. Estructura producida por un proceso sexual (oospora, zigospora, ascospora,
14. Esporas fúngicas. Son células reproductivas producidas por los hongos.
18. Esterigma. Punto de estrechamiento que origina una basidiospora sobre un basidio.
19. Equipo colector Zefon A-6 de partículas microbianas. Es un instrumento que está
basado en el principio del muestreador de aire Andersen, el cual aspira aire a través de 400
equivalente a un 1 ACFM (28,3 L por minuto). El flujo de aire resultante es dirigido sobre
una placa Petri estándar de agar. Después del ciclo de colección, la placa Petri es incubada
20. Fermentación. Capacidad de algunos hongos de utilizar diversos azúcares como fuente
los conideos en forma basipeta; el primer conidio es holoblástico y los siguientes son
enteroblásticos.
22. Gemación. Forma de multiplicación de las levaduras en donde la célula hija se desarrolla
23. Halo de inhibición. Este es un resultado cualitativo, cuyo diámetro será directamente
24. Hifa. Se visualiza como elemento hialino de forma alargada y/o tabicada. Representa la
27. Hidróxido de potasio al 10%. Es una solución que disuelve la queratina y aclara la capa
cornea de la piel y los anexos cutáneos, sin afectar la morfología de los elementos fúngicos,
células que poseen una acción específica contra el microorganismo causante de una
anticuerpo.
30. Levadura. Se visualizan como elemento hialino de forma esférica u ovalada que pueden
asexualmente.
33. Macroconidia. Se denomina también cloterosporos o husos. Son conidias que pueden
alcanzar tamaño muy grande por estar constituidas por varias células pueden tener una o
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dos paredes externas, lisas o rugosas; poseen dos extremos, uno basal, que les sirve para
insertarse, y otro distal; este último puede ser puntiagudo, rombo o doblado; las
34. Metula. Rama estéril situada debajo de las fialides en los géneros Aspergillus y
Penicillium.
36. Micelio Aéreo. Micelio que se desarrolla sobre el sustrato y en el cual se encuentran las
estructuras reproductoras.
37. Micelio vegetativo. Conjunto de hifas que se desarrollan en el interior del sustrato y su
40. Queratina. Proteína fibrosa y resistente que representa la mayor parte del material
41. Septo. Elemento formado de la pared de la hifa, limitando una articulación, pero
permitiendo la circulación citoplasmática entre las células por uno o varios poros.
permanecen unidos por sus extremos, aunque la separación entre cada célula es completa
la elección del tratamiento antimicótico. Se utilizan diferentes métodos como difusión con
46. Uniseriado. Cabeza aspergilar en la cual se observa que las fialides se originan
formación de esporas, presencia de quitina en sus paredes y cuerpos fructíferos. Después de las
(Alexopoulus, 1995).
2.1.3.1. Chytridiomycota
Dentro de los que ahora consideramos reino Hongos, los Chytridiomycetes son los únicos que
producen células móviles en su ciclo de vida, aunque con un solo flagelo posterior en forma de
látigo, es el único grupo de hongos verdaderos que presentan esporas flageladas (Alexopoulus,
1995).
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2.1.3.2. Zygomycota
Están caracterizados por un micelio aseptado, cenocítico, con septos en la base de las estructuras
ciclo de una zigospora característica. Producen esporas sexuales llamadas cigosporas. Casi todos
son descomponedores que viven en el suelo sobre la materia animal o vegetal en descomposición
(Alexopoulus, 1995).
2.1.3.3.Ascomycota
Los Ascomycetes están caracterizados por la presencia en su ciclo de vida, de una célula fértil,
Esta célula ascógena proviene de un ascogonio y en general está dispuesta en una capa de
Los representantes de este grupo prácticamente se encuentran poblando todo tipo de hábitat, y
pueden presentar cualquier tipo de forma de nutrición, ya sea saprobios, parásitos o simbiontes
(Alexopoulus, 1995).
2.1.3.4.Basidiomycota
Los Basidiomycetes están caracterizados por la presencia de una célula fértil en su ciclo de
tétrade, desde un basidio por medio de un esterigma que es una prolongación del ápice del basidio,
desde donde, generalmente, son violentamente expulsadas, por lo que reciben el nombre de
balistosporas.
Los hongos están formados por dos estructuras principales: el micelio y las esporas.
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A. Micelio
Consta de una masa de fi lamentos llamadas hifas que se entrecruzan las cuales le dan un aspecto
algodonoso, lanoso o aterciopelado del moho. Las hifas según la función que realizan, pueden ser:
vegetativas cuando son las encargadas de suministrar el alimento del medio) y fértiles (cuando
tienen fines reproductivos o sea, producen conidios o esporas). Las hifas pueden presentar tabiques
B. Esporas
Son los órganos que proporcionan color a la colonia y pueden ser: negros, verdes, azules,
marrón, etc. Además son los órganos encargados de la reproducción ya sea sexual (en los cuales
intervienen órganos masculinos y órganos femeninos) o asexual (se producen a partir de una parte
del hongo, el tallo, o de sus esporas). Las esporas presentan diferentes formas: de huso, ovalada,
granada y otras.
gemación. Representan un tipo de vegetal más perfecto que las bacterias, aunque algunas de ellas
esporangio en el que se desarrollan las esporas, llamadas corrientemente ascas de donde deriva el
nombre de Ascomycetos que ha recibido este grupo de microorganismos. Las levaduras falsas no
producen esporas, pero en lo demás son similares a las verdaderas. (García, 1985).
Las levaduras son organismos unicelulares de forma esférica, elíptica o cilíndrica, el tamaño
varían según los distintos ti pos morfológicos. En general, son mayores que las bacterias, aunque
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las más grandes de estas, pueden alcanzar el tamaño de las células de lavadura, es decir 4-5μm de
diámetro. La mayor parte de las levaduras verdaderas se muestran como individuos aislados; sin
embargo, las células hijas recientemente formadas por gemación, pueden permanecer unidas a la
célula materna durante algún tiempo. Algunas especies de levaduras producen formas fi
lamentosas alargadas que, al entrecruzarse unas con otras, dan origen al micelio. Se parecen mucho
en estos a los mohos. Las levaduras originan varios ti pos de colonias; las formas patógenas, las
En las levaduras podemos encontrar las mismas estructuras halladas en las células de plantas y
animales. El ectoplasma, o parte externa limitante del protoplasma celular, forma la membrana,
que en las células viejas es muy evidente. La pared celular se compone de una sustancia
forman cápsulas, no poseen flagelos. El núcleo de las levaduras es relativamente grande, y junto
y luego a la nueva célula hija. Son frecuentemente las vacuolas, que pueden reconocerse como
corpúsculos muy refringentes. Aumentan de tamaño y número cuando las reservas alimenticias de
mismo han sido hallados en las vacuolas. En ciertos ti pos de levaduras se han apreciado gotitas
de grasa, se sabe que tales células son capaces de convertir sustancias elementales en grasa. El
Reciben el nombre de mohos, todos los hongos que crecen dando colonias compuestas de fi
estas formas están relacionadas con las algas cianofíceas y se incluyen en los Phycomycetos; otros
se agrupan con los Ascomycetos; algunos están relacionados con los tizones y setas o
Basidiomycetos; otros no tienen morfología definida y se encuadran con las formas imperfectas,
es decir, los Fungi imperfeco. (García, 1985). Los mohos son seres pluricelulares y en
consecuencia, se distinguen fácilmente de las bacterias y levaduras. El moho consta de una masa
lamento miceliano o hypha (plural hyphae, en castellano hifas). Las hifas como se mencionó
anteriormente realizan dos misiones: las vegetativas suministran alimentos al moho y las fértiles
se diferencian con fines reproductivos para la formación de esporas. Las hifas de los mohos más
comunes poseen numerosos tabiques transversales denominados septas (septos, tabiques), que
separan unas células de otras. Algunas especies, sin embargo, no son tabicadas, de acuerdo con
esto, los mohos se clasifican en “tabicados” y “no tabicados”. Las células de los mohos se parecen
contiene uno o más núcleos, según las hifas sean tabicadas o no. En la primera, cada célula está
bien definida por los septos de separación y contiene un solo núcleo. En los mohos no tabicados,
a lo largo de la hifa aparecen numerosos núcleos sumergidos en una masa protoplasmática común.
El protoplasma de los mohos ti ene aspecto granuloso, probablemente por la presencia de gránulos
2.1.4. REPRODUCCION
La mayoría de las levaduras se multiplican por gemación. Por este pequeño procedimiento se
desarrolla una pequeña yema en la pared de la célula madre, conteniendo todas las estructuras
estrangula por el punto de unión de ambas células para quedar convertida en un nuevo ser
independiente. Cuando las circunstancias del medio y las disponibilidades de principios nutritivos
bacterias. Una levadura típica produce ocho esporas, mientras que cada bacteria solo produce un
esporo. Parece ser que la formación de las ascosporas de las levaduras no está influenciada por los
factores que estimulan la producción de esporos bacterianos, por lo que parecen representar un
Las ascosporas se forman solamente en presencia de agua, cuando la célula está bien nutrida y
la temperatura oscila en torno de 25°C. El asca resulta de la fusión de dos levaduras que actúan
como gametos. El contenido de una célula pasa a la otra a través de un minúsculo tubo o canal de
copulación. El núcleo de la nueva célula formada se divide en el número preciso de partes para
formar ascosporas, cada una de las cuales, junto con el protoplasma circundante, se rodea de una
membrana.
y dan origen a fi lamentos ramificados. Las esporas pueden ser de origen sexual o asexual, siendo
más frecuente lo primer. La morfología de las partes en que habrán de originarse las esporas es
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 15
diferente en los distintos mohos. En las formas asexuadas hay tres ti pos: los que forman un
receptáculo o sporangium (esporangio); los que originan esporas no capsuladas, conidias; las
formando una columnilla (columnilla) y las esporas están contenidas en el receptáculo hasta su
madurez. Cuando la han alcanzado se rompe el esporangio como lo hace una vaina de legumbre,
y las esporas se liberan. En la formación de conidias las hifas portadoras de las mismas se llaman
conidióforos y llevan aquellas en sus extremos. Hay dos ti pos de conidióforos en los mohos más
rama se desarrollan las conidias formando largas cadenas. Las ramas de cada conidióforo se
mantienen estrechamente unidas de modo que ellas y las cadenas de conidias formadas dan la
apariencia de brocha. El termino Penicillium es una palabra latina que significa brocha pequeña,
y de ellas nacen las conidias. Estas esporas, como en el caso anterior, se unen unas a otras y forman
largas cadenas que cubren totalmente la parte distal del conidióforo. Por cualquiera de estos dos
procedimientos se forman gran número de esporas o conidias. Esto explica porque los mohos son
tan prolíficos. Los oidios se forman al romperse las hifas en segmentos de apariencia esporular.
Algunos creen que tales fragmentos representan fases de descanso de la célula aunque, al parecer,
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 16
poseen todas las propiedades de las esporas. Algunos hongos, particularmente el del tizan de los
cereales, forma unas esporas llamadas clamidosporas. No hay una distinción precisa entre oidios
y clamidosporas. No obstante, estas dos últimas son de color marrón oscuro y de pared engrosada.
Se forman en puntos irregulares a lo largo de las hifas y no parecen ser el resultado de un proceso
de fragmentación.
tabicado, de las cuales es un buen ejemplo Mucor mucedo. Es este modo de reproducción se forman
esporas sexuales, las zygosporas, como resultado de la fusión de dos hifas sexualmente
diferenciadas. Después de esta fusión ti ene lugar la articulación de dos gametos y dos suspensores.
Luego se desarrolla la pared celular y se engruesa formando la Zygospora todavía sostenida, por
las partes suspensoras del moho. Al madurar, la Zygospora se libera de la célula madre y puede
funcionar como cualquier otro ti po de moho. En medios favorables puede germinar formando un
tronco esporángico. Las colonias de los distintos ti pos de mohos son diferentes. Algunos crecen
en forma de masas algodonosas resueltas que cubren rápidamente el objeto sobre el que el moho
crece. Otros dan lugar a colonias algodonosas pequeñas. Otras forman colonias bajas, planas y
aterciopeladas. Unos pocos producen colonias cretáceas, todas las colonias de mohos tienen
colores, que deben a las esporas, entre ellos el negro, azul, verde y marón. El color es un elemento
que reciben el nombre de aspergilosis. Unas pocas especies de las claramente patógenas son
parasitas de la piel del hombre y de los animales, en los que producen las tiñas.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 17
En la clasificación se establece una gran división de los hongos Eumicetos en dos grupos
principales, teniendo en cuenta el carácter morfológico estudiado ya, o sea, si es septado su micelio
2.2.HONGOS PATÓGENOS
Las enfermedades micóticas serán clasificadas según donde ellas causen patologías y
Son adquiridas por contacto directo de las personas o animales afectados con los hongos, los
dermatofitos son los principales productores de estas micosis, ejemplo: “la tiña”, causada por
Geófilos, aquellos que se hallan en el suelo y pueden afectar a los animales y al hombre, por
ejemplo, Microsporum gypseum. b) Zoofílicos, aquellos que parasitan en los animales y pueden
contagiar al ser humano, por ejemplo, Microsporum canis. c) Antropofí licos, los que viven
exclusivamente sobre el humano o sea, son huésped permanente. Los animales son resistente a
Se adquieren en lugares contaminados donde las esporas son inhaladas por el hombre o por los
animales, o a través de heridas originadas por fragmentos vegetales que contengan el hongo. Una
vez en el organismo; este se transforma para asentarse en los tejidos y adquiere formas redondas,
estrelladas levaduriformes, de cigarro, etc. Después, invaden y pueden llegar a vencer las barreras
de defensa que el huésped presenta con el fi n de eliminarlo, por esta cuestión es muy difícil que
ocurra.
Los mohos toxigénicos producen intoxicaciones alimentarias, las que ocurren cuando se
ingieren alimentos contaminados con metabolitos tóxicos producidos por los mohos de la flora de
campo o del deterioro avanzado a este tipo de presentación se le conoce con Micotoxicosis y no
es considerada una micosis. (Ministerio de educación de la Habana, 1992). Entre las enfermedades
micóti cas más importantes se hallan: la tricofitosis bovina (tiña), causada por Trichophytum
originada por Cryptococeus neoformans. Los factores ecológicos desempeñan un papel destacado
en el crecimiento de los mohos y levaduras, y en la producción de sus toxinas. De todos estos, los
factores físicos son los más importantes e incluyen: la humedad, la temperatura y la luz y sin obviar
la acción del PH. Los hongos se cultivan en condiciones aerobias, a temperatura de 22-37°C, en
medios que contengan sustancias nitrogenadas y carbonadas. Crecen en un pH que oscila entre 3
y 10, el valor óptico es de 6-6,5. El oxígeno y el dióxido de carbono, de los factores químicos, son
los que más intervienen en su desarrollo. En general, los factores nutricionales son de gran
importancia, al igual que los biológicos, entre los cuales desempeña un papel fundamental la flora
competitiva.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 19
La clasificación de los hongos para el hombre y los animales sigue dos métodos. Uno se basa
hay una tercera clasificación que se basa por su papel patógeno (tejidos atacados y enfermedad
Toda clasificación de un agente infeccioso, excepto la de los virus filtrables, que se base en la
especie animal afectada o en el tipo de tejido infectado, puede conducir a fusionismo. Además,
existe el peligro de hacer creer al estudiante que el agente infeccioso solamente se encuentra en un
tipo de tejido. Se admite que, por lo que respecta a los hongos patógenos, esta clasificación puede
ser admisible desde el punto de vista médico. Las variaciones morfológicas de estos
microorganismos son tan complejas, que la clasificación sistemática es sumamente difícil, y los
y Packer, Tercera Edición, 1980). La edición básica empleada en 1949, de la Medical Mycology
siguiente:
2.2.1.1.Ficomicetos
Los mohos de este grupo no se sabe que produzcan en los animales enfermedades específicas,
pero en algunos procesos morbosos se han encontrado especies de los géneros Mucor, Absidia y
Rhizopus. La enfermedad provocada por estos géneros se denomina “mucormicosis” ya que son
considerados hongos del orden “mucorales”. Las cepas más termorresistentes más patógenas
Mucor Spp. Que se clasifica en un nuevo género denominado Rhizomucor. Estos hongos
monomórficos ubicuos son habitantes comunes del suelo, estiércol y material en descomposición.
Las infecciones son a menudo oportunistas y secundarias a trastornos como la acidosis metabólica
o la inmunodepresión.
Los hongos causan pápulas cutáneas en las tortugas y lesiones granulomatosas en varios
órganos de distintas especies, bovina, porcina, ovina, equina, canina, felina y algunos animales
salvajes por ejemplo primates, roedores y aves. Las lesiones pueden ser locales que afectan la
superficie corporal, los ganglios linfáticos y parte del aparato gastrointestinal y también de manera
de manera diseminada, con las lesiones en los diversos órganos. La mucormicosis es especialmente
Los mohos del genero Mucor han sido aislados de tejidos animales infectados. En 1880.
fue aislado de las fosas nasales de ovejas por Zurn y de un tumor del caballo por Frank Gilman y
Frank aislaron un Mucor del tejido placentario de una vaca, Bendixen y Plum, en Dinamarca,
también lo encontraron examinando placentas bovinas. Jungherr. En Connecti cut, hallo una
especie de este género, Mucor Pusillus, en infecciones micóticas de la placenta bovina (Merchant
y Packer, 1980). Los mohos de género Mucor están muy difundidos en la naturaleza. Se reconocen
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 21
por el micelio algodonoso que forman en medios apropiados. El micelio no produce estolones o
rizoides. Los esporangioforos producidos por estos hongos son únicos, erectos y generalmente
simples, aunque a veces se observan ramificaciones. Cada rama termina en un esporangio que
En 1920, Theobald Smith aisló a un moho de las membranas fetales de un feto bovino. Este
hongo fue denominado Rhizopus Equinus rhizopodiformis, pero Dodge la considera como
Rhizopus rhizopodiformis (R. cohnni) fue hallado en el tejido placentario bovino por Jungherr.
El género Rhizopus produce un micelio que se parece al de los otros dos géneros. Los estolones
del micelio aéreo se unen al medio en los nudos. De estos nacen los esporangios en grupos o
aislados.
2.2.1.2.Blastomicetos
Los blastomicetos o levaduras son células ovales o redondas que se multiplican mediante un
proceso de gemación. Las yemas recientemente formadas permanecen unidas a la célula madre
hasta alcanzar la madurez, en cuyo momento forman, a su vez, nuevas yemas. En algunos casos,
las células maduras se separan de la materna, pero en otros, cierto número de ellas permanecen
La criptococosis es una enfermedad micótica sistémica que puede afectar el tracto respiratorio,
SNC, ojos y piel (particularmente en la cara y cuello de los perros y gatos). El agente etiológico,
ambiente y en los tejidos en forma de levadura. Aunque la infección presenta una distribución
excrementos de las aves, especialmente en las heces de paloma. La transmisión se realiza por la
presentarse en forma no encapsulada, de solo 1μm de tamaño, que pueden inhalarse y llegar hasta
lo más profundo de los pulmones. La criptococosis se puede presentar más comúnmente en perros
y gatos, pero también ocurre en el ganado bovino caballos, ovejas, cabras, aves y en animales
la Habana, 1992).
En torno a este género ha existido mucha confusión en la literatura científica, por la descripción
de multitud de especies diferentes. Como patógena para los animales, solamente se considera una
de forma mundial en gran variedad de animales, causadas por especies del hongo levaduriforme
infección por Candida albicans son la pérdida de la integridad de la mucosa; los caracteres
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 23
frecuentemente a la aves, afectando a la mucosa oral, esófago y buche. En los cerdos y los potros
se han descritos infecciones superficiales limitadas a las membranas mucosas del tracto digestivo.
candidiasis es poco común aunque se ha descrito asociadas con afecciones orales, enfermedades
de las vías respiratoria altas, piotórax, lesiones oculares, enfermedades digestivas y urocistitis. Las
infecciones por Candida son raras en los perros y los caballos. No obstante, la Candida Spp ha
sido considerada como agente etiológico de la artritis equina y de mastitis y abortos en vacunos
Macroscópicamente los cultivos a 25º C y 37º C en 1-3 días dan colonias blancas, blancas
cremas, lisas y brillantes con bordes enteros y consistencia cremosa y olor a levadura, más tarde
observándose colonias de color blancas, blancas cremas, lisas y brillantes con bordes enteros.
horas se forman un tubo germinal si es la C. albicans. También se forma tubo germinal en agar
eosina azul de metileno de Levine en microaerofilia a 37º C pero a las 24 horas se incubación.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 24
hombre y los animales, enfermedad caracterizada por lesiones erosivas persistentes en la piel y
levaduriforme, de 3-6μm de tamaño, que forman yemas. Puede cultivarse fácilmente en agar-
glucosa de Sabouraud a 37° C. y a la temperatura de la habitación. Las colonias son lisas y viscosas,
dando el olor característico de las levaduras. A medida que las colonias aumentan de tamaño se
hacen rugosas y estriadas, con un centro que recuerda un panal de abeja. Fermenta glucosa y
maltosa con formación de acido y gas. Forma acido en la sacarosa, pero no fermenta la lactosa. El
germen produce la muerte en 4-5 días con formación de abscesos en los riñones.
2.2.1.3.Dermatofitos
La dermatofitosis es una infección de los tejidos queratinizados (piel, pelo, garras)por uno de
Trichophyton. Estos hongos distribuidos mundialmente y todos los animales domésticos son
susceptibles. En los países desarrollados, las mayores consecuencias para la economía y la salud
humana provienen de las dermatofitosis de los gatos domésticos y del ganado bovino.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 25
Unas pocas especies de dermatofitos habitan en el suelo (geofílicas), por ejemplo el M.gypseum
y T. terrestre y causan enfermedad a los animales que están expuestos al escarbar la tierra o
arrancar plantas de la raíz, otras especies son hospedadores específicos del hombre
(antropofílicas), por ejemplo, M. audouinii y T.rubrum y raramente infectan a otros animales. Sin
embargo los agentes patógenos más importantes que afectan más a los animales en todo el mundo
especien tienen la capacidad de contagiar al humano y causarles tiña, especialmente a partir de las
infecciones por gatos domésticos por M.canis y por T. verrucosum. Las especies zoofílicas se
transmiten principalmente por contacto con los individuos y fómites contaminados sin embargo el
comportamiento de acicalado del animal y el estado nutricional, la infección ti ene como resultado
una inmunidad específica, tanto humoral como celular, que confiere una resistencia incompleta y
de corta vida a la infección o enfermedad subsiguiente. Los dermatofitos por lo general crecen en
el tejido queratinizado y el avance de la infección se detiene al llegar a las células vivas o al tejido
desarrollan las hifas fi lamentosas a partir de las artrosporas infectantes de los elementos hifales
fúngicos. Las hifas pueden penetrar en el tallo del pelo y debilitarlo, lo que, junto a la inflamación
folicular, lleva a una pérdida de pelo en forma de parches, según madura la infección, se
desarrollan grupos de artrosporas en la superficie externa de los tallos de los pelos infectados. Los
pelos rotos con esporas asociadas son una fuente importante de difusión de la enfermedad. Según
infección, aunque este proceso puede necesitar varias semanas, por eso en la mayoría de los
huéspedes adultos sanos, las infecciones por dermatofitos son en son autolimitantes. Animales
jóvenes o debilitados y hasta cierto punto en razas de gatos domésticos con pelo largo, la infección
Los Trichophyton, son parásitos de la epidermis y otros tejidos queratinizados de los mamíferos.
La enfermedad que producen se llama tiña y se caracteriza por una lesión concéntrica típica. El
antiguo nombre griego de herpes se aplica con frecuencia a esta enfermedad, pero no debe
confundirse con el herpes de origen vírico, como el “herpes febrilis”. Los romanos relacionaron
estas enfermedades con las producidas por piojos y les dieron el nombre de “ti nea” (tiña). Este es
el termino con que se designa frecuentemente como nombre común, aun en los países sajones, que
emplean nombre como “ringworm” (ring: anillo, worm: gusano) alusivos a l aspecto anular de las
lesiones (Merchant y Packer, 1980). La tricofitosis producida por los hongos del género
Trichophyton constituye un problema serio en varios países del mundo, tanto por la afectación
económica como por su conocido carácter zoonósico. Trichophyton verrucosum es el agente causal
de la tricofitosis bovina. Los miembros de este género producen micelios dimorficos que contienen
invadiendo los folículos pilosos y rodeando el pelo con una envoltura de micelio y pequeñas
etc., por esta razón es una fuente constante de infección. Esta micosis la padecen los animales
jóvenes fundamentalmente, debido a que los adultos ya la han padecido cuando jóvenes y por
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 27
tanto, son inmunes a esta. Clínicamente las lesiones son circulares, discretas, costosas; es usual
que se encuentre en la cabeza, el cuello, la región pelviana, la espalda y la cola; los animales se
Distribución
No todos los dermatofitos se aíslan con la misma frecuencia en las distintas
localizaciones que pueden presentar las dermatofitosis (Morejón y Navarro 2011).
Animal Dermatofitos
cabras y ovejas de producción. En los corderos, las lesiones se aprecian sobre todo en la cabeza,
pero en los corderos esquilados se hacen evidentes las lesiones que se encuentran ampliamente
difundidos bajo la lana, hay pocas evidencia de que los corderos con un rumen funcional absorban
la griseofulvina. El tratamiento tópico se realiza mejor al tratarlas con hipoclorito sódico, en los
Macroscopicamente los dermatofitos son hongos hialinos que forman colonias que presentan
en general colores claros, con gamas de color restringidas a tonos blanquecinos, amarillentos y
marronáceos. En pocas ocasiones se observan colonias con colores oscuros u otras tonalidades
(azules, verdosas, negras, etc.). Si bien la coloración de las colonias y su textura pueden ayudar a
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 28
identificar estas especies, las características microscópicas son las que determinan su
estos hongos (clamidosporas, distintos ti pos de hifas, etc.). No obstante, la forma y distribución
este motivo, para utilizar la clave de identificación que se adjunta, es precisa la caracterización de
Existen especies que no forman, o lo hacen raramente, macroconidios y/o microconidios (ej. T.
violaceum). Por otra parte, algunas cepas pertenecientes a determinadas especies identificables
morfológicamente por producir algún tipo de estas estructuras, no las suelen producir. Así, por
ausencia de aleurosporas en la mayoría de las especies. Casi todas producen tiña en el hombre y
unas pocas en los animales. En las lesiones naturales la base del pelo aparece cubierta por una
vaina de pequeñas artrosporas, no dispuestas en cadena, sino irregularmente. En los perros más o
menos el 70% de los casos de tiña son provocados por M.canis, el 20% por M. gypseum y el 10%
al género Trichophyton, en los gatos 98% de las tiñas son causadas por M.canis. La lámpara de
Wood es útil para establecer el diagnostico presuntivo de dermatofitosis en perros y gatos, pero no
se puede usar para descartar a este tipo de infección. El diagnóstico definitivo se establece por el
cepillando la capa con un cepillo de dientes nuevo, e inoculándolo en una placa de cultivo haciendo
presión con las cerdas del cepillo sobre la superficie del medio de cultivo.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 29
intenso prurito y el microorganismo se difunde por los arañazos, sin embargo el aspecto
clínico de la tiña en los gatos suele ser muy variable Ha sido encontrado también en el
afectan más a menudo. Las lesiones típicas consisten en alopecia focal, descamación y
extremidades. Los gatos con una infección clínica inaparente aun pueden servir como
fuente de infección para otros gatos o aun para el humano. A veces la dermatofitosis
felina provocada por esta especie causa dermatitis miliar y es pruriginosa. Los gatos con
por medio de los pelos infectados. En el hombre produce tiña tonsurante microspórica
y herpes circinatus (Merchant y Packer, 1980). Las lesiones de los perros son
clásicamente placas alopécicas escamosas, con pelos quebrados. Los perros también
pueden desarrollar foliculitis regional o generalizada con pápulas o pústulas. Una forma
diagnóstico diferencial en perros para las lesiones clásicas de la tiña debe establecerse
gallina, perro, caballo, ratón, mono y tigre. También en el hombre. (Merchant y Packer,
1980).
innumerables esporas, que se diseminan rápidamente por medio de aire y polvo. Este hongo es uno
de los contaminantes más frecuentes de los medios de laboratorio. Los Aspergillus tienen dos ti
pos de reproducción: sexual y asexual. En la reproducción sexual dos fi lamentos del hongo se
unen formando una estructura semejante a un sacacorchos, los contenidos celulares de cada fi
lamento se unen entre si y se efectúa la fertilización. Esta célula recientemente formada se cubre
entonces de una densa casa de fi lamentos que forman un cuerpo irregular esférico denominado
estas ascosporas germinan y dan lugar a un nuevo hongo. En la reproducción asexual se forma un
conidióforo a parti r de una hifa diferenciada para este fi n. Los conidióforos se alargan en su
Aspergillus tí pico los esterigmas permanecen aislados. Los esporos o conidias nacen de los
esterigmas y se unen formando largas cadenas. Las esporas son esféricas u ovales, y pueden ser de
color verde, negro, marrón o amarillo. El hongo debe su color al de las esporas.
Todos los mohos de este género son saprofitos, excepto uno: Aspergillus Fumigatus.
A. Aspergillus Fumigatus: Este hongo fue considerado por primera vez como agente de
palomo, canario, papagayo, cigüeña, cuervo, flamenco, halcón, pinzón, avefría, faisán,
avestruz y cisne. En los mamíferos ha sido observado en caballo, vaca, oveja, perro y
Este moho no difiere de las características generales que hemos descrito para el grupo.
Produce esporas de color azul-verdoso que dan a los micelios maduros el color típico.
Pertenecen a este grupo todos los hongos cuyo ciclo vital no se conoce totalmente. A medida
que pasan los años, este grupo va haciéndose menos numeroso y es muy probable que en el futuro
todos los miembros del mismo se revisen. Estudiaremos los hongos que tienen una fase de levadura
Este género se caracteriza por sus hifas irregularmente ramificadas; los conidióforos no están
diferenciados, o pueden tener solamente un conidio sobre un corto fi lamento terminal o lateral.
infección limitada a los tejido subcutáneos y linfáticos ambas se diagnostican por la presencia de
nódulos, la primera presentan nódulos esféricos duros en el sitio de la herida por punción en el
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 32
tejido tegumentario. Que por último se ulcera y drena. En el segundo caso los nódulos se presentan
y posteriormente, se desarrollan ulceras a lo largo de los vasos linfáticos del tipo de linfangitis
Los miembros del género hallados en los animales, solamente atacan al caballo. La identidad
exacta de estos hongos es desconocida. Han sido considerados variablemente como Sporotrichum
beurmanni, Sporotrichum equi y Sporotrichum schencki. Las especies de estos hongos que afectan
Parecen ser similares, si no idénti cas, a las especie humana denominada Sporotrichum schencki
var, S. beurmanni. Este esporotrico es causa de una linfangiti s del caballo, que puede confundirse
farciminosus). En los tejidos, el esporotrico produce células levaduriformes más pequeñas que las
pequeña, gris-blanquecina y ribeteada. A medida que envejece se torna de color marrón oscuro,
arrugada y con el centro elevado. Al examen microscópico se comprueba que la colonia está
compuesta de fi lamentos micelianos. Las conidias están unidas a los lados y extremos de las hifas
Sabouraud a 25 y 30ºC, pero aparece en forma de levadura en los tejidos y medios a 37ºC. Es
vacas, mulas, aves, cerdos y el hombre aunque ha sido descrita también en otros
por las manifestaciones clínicas muy variadas, es una micosis intracelular que daña el sistema
retículo endotelial y a todos los órganos. Las lesiones internas producen leucopenia, anemia,
considera que se trata de un proceso sistémico que afecta al reticuloendotelio. Estudios recientes
de histoplasmosis han demostrado que existe en el hombre un tipo leve de enfermedad que produce
enfermedad granulomatosa crónica, no contagiosa, diseminada y que está causada por el hongo
histoplasmosis fue descrito por Darling en 1906. Creyó que el agente era un protozoario y le dio
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 34
el nombre de Histoplasma capsulatum. La naturaleza micótica del agente fue advertida por Da
Rocha-Lima (1912-1913), pero la prueba defi niti va de que se trataba de un hongo fue aportada
primer investi gador que consiguió el aislamiento del germen, a partir de un caso de infección
natural en el perro, en 1939. Desde esta fecha ha sido aislado de perros y otras especies de animales,
como ratas, ratones, mofetas, vacas, ovejas, cerdos, gallinas, pavos, palomas, geomíes, zorra
La fase de levadura de este microorganismo es más patógena que la fase micelial, la cual no
hombre, en 1892. Rixford descubrió un caso humano en California en 1894. Giltner fue el primero
que observó un caso bovino, también en California, en 1918. Dickson y Giff ord demostraron en
1936 la relación existente entre el granuloma coccidioide y la “fiebre del valle de San Joaquín”
(San Joaquín Valley Fever), al comprobar que ambas enfermedades eran producidas por
de células esféricas, con pared doble, gruesa, llenas de numerosas esporas elipsoides.
micelio grande, compuesto de hifas entrecruzadas. Las hifas son tabicadas, pero cada
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 35
célula ti ene más de un núcleo. En las hifas se forman numerosas artrosporas, que se
fragmentan y liberan cuando el cultivo envejece. Estas artrosporas son muy infectantes,
Este género es poco frecuente en los animales domésticos, sin embargo, este se ha aislado en
casos de dermatofitosis felina, también en casos de celulitis orbital, sinusitis y neumonía en gatos.
Mientras que en los perros se ha logrado aislar en los casos de la enfermada invasiva de los tejidos
nasales, en lesiones invasivas de los pulmones, y en los sacos aéreos de las aves. Penicillium spp.
alimentos y forrajes.
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
manipulación para mantener la viabilidad del agente etiológico y evitar posibles contaminaciones
adecuada, así como la identificación e interpretación correcta de los aislamientos. Únicamente con
infeccioso. A la hora de valorar un crecimiento fúngico hay que tener siempre presente la necesidad
MUESTRAS
periódicamente.
cualificado.
la lesión (cuando se sospecha una micosis pulmonar es preferible una muestra respiratoria
que un hemocultivo).
5. Se debe evitar la utilización de hisopos siempre que el tipo de lesión lo permita, pues están
(conducto auditivo, faringe, vagina, cérvix) no pueden ser recogidas de otra forma.
6. Las muestras de lesiones cerradas y abscesos suelen presentar un gran rendimiento. Deben
aspirarse con jeringa y transferirse a un contenedor estéril con solución salina, prestando
7. El raspado de lesiones de piel y faneras puede realizarse con distintos materiales; los más
9. El recipiente de recogida se identificará con los datos del enfermo (nombre y localización),
10. Las muestras deben ir acompañadas obligatoriamente del volante de petición para
del paciente (nombre y apellidos, número de historia clínica, fecha de nacimiento y sexo);
b. Frascos estériles de boca ancha con tapón de rosca: orinas, esputos, heces, fragmentos
de tejidos, etc.
2.2.2. TRANSPORTE
Todas las muestras deben enviarse al laboratorio rápidamente, sin conservantes. Las muestras
deben transportarse en un recipiente estéril, humidificado y a prueba de vertidos; sin embargo, las
fotografía negro, entre dos portas). En general, no deben introducirse en medios de transporte, a
no ser que sea fácil retirar la muestra del medio. Las muestras en que se sospeche la presencia de
Si esto no fuera posible, se usarán medios de transporte adecuados o se conservaran a 4 ºC. Las
2.2.3. MANEJO
peligrosos. Cuando una muestra se recibe en el laboratorio, y antes de procesarse, debe someterse
a una inspección previa para asegurarse que ha sido bien seleccionada, recogida y transportada. Se
contactará con el médico solicitante para pedir nueva muestra o solucionar el problema de la
misma.
2.2.4. PROCESAMIENTO
transporte en condiciones idóneas y que no se demore su cultivo. Aunque hay pocos estudios sobre
la disminución de la viabilidad de los hongos a temperatura ambiente o por la acción del hielo
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 39
seco, es conocida la dificultad de recuperar Rhizopus arrhizus en muestras en las que se demora el
MUESTRAS
2. Registrar toda la información necesaria que pudiera afectar a la calidad de la muestra y que
represente interés diagnóstico (aspecto, color, olor, consistencia, coágulos, etc.), así como
3. Durante el procesamiento, deben seguirse todas las medidas de seguridad necesarias, tanto
4. El procesamiento debe llevarse a cabo tan pronto como sea posible para garantizar la
adecuada.
pruebas de sensibilidad.
muestra.
muestra, aunque algunas se pueden inocular directamente sin que sea necesaria su manipulación
previa. Todas las muestras deben observarse macroscópicamente y seleccionar la parte más
representativa. Buscándose en los tejidos las zonas con pus, caseificación o necrosis.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 40
destruir a los hongos no septados. El troceado puede realizarse con tijeras o bisturí, el
proceso puede realizarse en una placa de Petri añadiendo unas gotas de agua destilada
estéril.
cultivo. Las fluidas deben concentrarse por centrifugación (1500xg durante 10 minutos)
Cuando la muestra sea muy viscosa habrá que fluidificarla, sin diluirla excesivamente,
con igual volumen de la muestra y dejándola actuar a temperatura ambiente hasta que
centrifugación.
poro), siempre que haya suficiente cantidad. Sembrar el sedimento. Estas muestras
cultivo.
E. Orina: No está claro qué recuento de levaduras en orina es significativo. Para algunos,
un recuento ≥ 103 UFC/ml sería indicativo de patología; pero algunos autores sostienen
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 41
que cualquier recuento sería válido, sobre todo si se acompaña de signos de enfermedad.
Por ello, se puede hacer la siembra directamente para recuento (igual que para bacterias,
F. Biopsias: Cortar con escarpelo en pequeñas fracciones de 1 mm, sobre todo si no hay
estudio anatomopatológico.
del hongo a partir del cultivo, lo que supone con frecuencia, varios días o semanas de dilación. Las
muestra clínica es el examen microscópico de la misma. Este examen puede aportar, en ocasiones,
confirmación definitiva por cultivo. Por lo tanto, es un procedimiento que debería realizarse en
todos los laboratorios ya que utiliza técnicas sencillas, permitiendo un cultivo mejor dirigido,
seleccionando los medios más apropiados. Sin embargo, si la muestra es escasa, el cultivo debe
ser prioritario. Las técnicas moleculares comienzan a ser una realidad y permitirán un diagnóstico
más rápido que el cultivo, si bien están menos desarrolladas que para las bacterias o los virus.
2.2.6.1.OBSERVACION MACROSCÓPICA
Las muestras, antes de ser procesadas, tienen que observarse macroscópicamente, en busca de
2.2.6.2.OBSERVACION MICROSCÓPICA
El examen microscópico directo de una muestra clínica correctamente tomada es el medio más
simple y rápido de detectar una infección fúngica. Cuando los elementos fúngicos están presentes
una terapia antifúngica, siendo éste uno de los factores esenciales en el pronóstico de las micosis
en los pacientes inmunocomprometidos. La microscopía sigue siendo una de las herramientas más
antiguas y útiles del micólogo clínico. Con frecuencia los hongos tardan en desarrollar las
utilidad que a la vez que se inoculan los medios de cultivo, se realicen las técnicas microscópicas
que, en tiempo real (menos de 10 min), puedan orientar de forma preliminar la etiología del
o las esférulas de Coccidiodes immitis. En algunos casos, el diagnóstico microscópico puede ser
Los métodos usados para la visualización fúngica difieren en algunos aspectos de los de las
bacterias; el mayor tamaño de los hongos hace, generalmente, innecesarios la tinción de frotis
secos; en su lugar son más utilizadas las preparaciones directas en fresco con o sin líquidos de
montaje y clarificación. La observación microscópica se realiza con bajo aumento, seguida de alto
aumento en seco y, si es necesario, con aceite de inmersión. Las dos formas observadas
habitualmente son levaduras y/o elementos miceliares. La mayoría de los hongos se pueden
detectar sin tinción, en la mayor parte de las muestras clínicas como esputos, orinas, exudados y
LCR, usando siempre que sea posible microscopia de contraste de fases. No obstante, se han
desarrollado una serie de tinciones (tinta china, Giemsa, argénticas, agentes quimiofluorescentes,
etc.) para mejorar la sensibilidad de la técnica. Las técnicas microscópicas directas son de gran
utilidad en el estudio de muestras clínicas de pacientes con micosis que afectan a la piel y mucosas,
pero también son muy útiles en el diagnóstico de micosis subcutáneas y profundas. Son múltiples
las técnicas de observación microscópica para el diagnóstico de las micosis. Se utilizan montajes
húmedos, tinciones fijas y diversas técnicas histológicas para las muestras de tejidos. En los
muestra, mientras que la adición de glicerol, mejora la conservación de las estructuras fúngicas.
requiere menos experiencia en el caso de las tinciones basadas en métodos fluorescentes. De entre
las tinciones fijas e histológicas, las tinciones argénticas y el PAS son las más adecuadas para la
observación de estructuras fúngicas. En la tabla 2 se resumen las técnicas que se pueden utilizar.
Las limitaciones y los problemas del examen microscópico también deben tenerse en cuenta:
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 44
técnica puede estar entre 103_105 elementos fúngicos por ml y puede depender del lugar
neoformans en la tinción con tinta china, fibras de colágeno o del hisopo que se
confunden con elementos fúngicos, gotas de grasa con levaduras en gemación, etc.).
Estos posibles errores pueden minimizarse con un segundo examen o con la experiencia
del observador.
c. El examen microscópico debe realizarse, al menos, en todas las muestras con alta
sospecha de micosis; aunque lo ideal sería realizarlo siempre que fuese posible.
2.3.1. CLASIFICACIÓN
impidiendo el de otros. Los componentes más utilizados como agentes selectivos son
F. Especializados: Son aquellos medios que contienen algún componente (por ejemplo,
2.3.2. PREPARACIÓN
identificación de los hongos; por lo tanto, cuando se utilicen medios comerciales es necesario tener
medio deshidratado deben seguirse rigurosamente las instrucciones del fabricante, evitando errores
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 46
que no se afecte la calidad del producto final. Algunos antibióticos deben añadirse al medio una
vez esterilizado y a la temperatura adecuada, para que no se inactiven por las altas temperaturas
de la esterilización.
Para asegurar la correcta utilización de los medios, deben controlarse periódicamente sus
se puede evaluar utilizando las cepas de control adecuadas para cada medio.
2.3.4. ALMACENAMIENTO
Los medios se deben guardar refrigerados a 2-8ºC. Para mejorar su conservación y prevenir la
desecación, es aconsejable invertir las placas e introducirlas en bolsas de plástico. Las placas de
Petri suelen conservarse en buen estado unos tres meses, mientras que los medios semisólidos o
líquidos en tubo de tapón de rosca se conservan bien hasta 6 meses. Sin embargo, ciertos medios,
estado tanto tiempo. También hay que tener presente que algunos componentes de ciertos medios
pueden verse afectados por la luz, por lo que estos medios deben almacenarse en contenedores
opacos. Como norma general, todos los medios deben utilizarse antes de la fecha de caducidad
indicada por el fabricante y, antes de su utilización, deben atemperarse, durante unos minutos, a
temperatura ambiente.
Los medios más utilizados en el cultivo de hongos son: agar Sabouraud glucosa (AGS),
infusión cerebro corazón (BHI) con o sin sangre de cordero al 5%, con o sin antibacterianos; agar
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 47
inhibidor para mohos (MIA); y agar patata glucosa (APG). Sin embargo, los hongos también
incuban el tiempo suficiente. La elección y el número de medios a utilizar están condicionados por
el coste, la disponibilidad y las preferencias personales, pero siempre se deben incluir medios con
hongos considerados contaminantes, ayuda especialmente en las micosis de la piel, aunque pueda
inhibir algunos patógenos fúngicos importantes; por ello, debe utilizarse siempre en combinación
con otro medio sin cicloheximida. Los medios de cultivo más empleados en micología pueden
aislamiento, la utilización de 3-4 medios prácticamente cubre todas las necesidades: AGS con/sin
antimicrobianos; un medio con cicloheximida y agar infusión cerebro corazón, para las micosis
sistémicas endémicas. Para la identificación, puede ser necesario un número mayor de medios que
dependerá del número de muestras, las etiologías más probables en la zona geográfica, las
Aspergillus spp.
C. Agar de Staib. Agar semillas de níger (Guizottia abyssinica): utilizado para aislar
Cryptococcus spp. y C. neoformans. Este último es el único que posee fenol oxidasa,
F. Agar infusión de cerebro corazón: puede utilizarse como medio enriquecido para
sangre o sin ella. En general, está indicado para el aislamiento de una gran variedad de
sangre de carnero al 10%, se utiliza para el aislamiento de todos los hongos, incluyendo
dermatitidis).
saprofitos.
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 50
2.3.6. INCUBACIÓN
embargo, Sporothrix schenckii es una excepción, crece más rápido a 27–28 ºC. Hay laboratorios
que utilizan la temperatura ambiente en lugar de 30ºC, pero no es recomendable, ya que los
cambios de temperatura son notables entre el día y la noche en la mayoría de los laboratorios. La
temperatura de 37ºC no se recomienda por dos razones principales: 1) muchas muestras contienen
abundantes bacterias que crecen muy bien a esta temperatura; 2) algunos hongos crecen mal a esta
temperatura o no crecen, especialmente los hongos que infectan la piel. No hay ventaja en incubar
simultáneamente a 30°C y a 37°C. La temperatura de 37°C debe reservarse para hongos dimórficos
o algún hongo que se desarrolle mejor a esta temperatura. No obstante, también es necesaria una
estufa a 37°C para verificar la tolerancia a esta temperatura. Sin embargo, utilizar 37°C para el
son morfológicamente indistinguibles de otras levaduras. Los cultivos de hongos deben incubarse
durante 3-4 semanas antes de ser desechados, y no deben desecharse cuando se aísla un hongo,
sino que debe completarse el periodo de incubación. Sin embargo, hay muestras que se pueden
eliminar antes (por ejemplo, exudado vaginal), a los 7 días, cuando se realizan cultivos habituales.
2.4.IDENTIFICACIÓN
y reverso.
o papel de celofán, que consiste en tocar la superficie de la colonia con la cinta adhesiva
además, una gota de azul de lactofenol sobre el celofán y se deposita un cubre sobre
ella.
por las técnicas anteriores, es necesario hacer un microcultivo. Esta técnica consiste en
depositar sobre un porta un trozo de agar de Sabouraud, o del medio recomendado según
observar crecimiento; entonces se toma el cubre, que es donde se han depositado las
formas de reproducción, y se coloca sobre un porta que lleva una gota de azul de
descripción excede los propósitos de este documento y que pueden ser consultados en
de árboles filogenéticos.
2.4.2. LEVADURAS
levaduras de otras procedencias, sobre todo cuando ocurre de forma reiterada en diferentes
muestras clínicas del mismo paciente, y siempre que se asuma que se trata de un organismo
sangre, agar chocolate, agar Cled, etc.). Sin embargo, el AGS, con o sin antibióticos añadidos, es
el medio de aislamiento por excelencia para la identificación de levaduras. En el medio AGS las
mantecosa, lisa o rugosa, con olor dulzón agradable, volviéndose más pastosas a medida que la
colonia envejece. Por lo general, las colonias de levaduras no desarrollan micelio aéreo, aunque
2.5.1.1.HONGOS AMBIENTALES
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 54
2.5.1.2.HONGOS OPORTUNISTAS
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 55
2.5.1.3.DERMATOFITOS
Sporothix schenckii
Encabezado: IDENTIFICACIÓN DE ESTRUCTURAS MICÓTICAS. 56
III. CONCLUSIÓN
que existen microrganismos fúngicos causantes de enfermedades micoticas tales como las micosis;
existiendo así hongos que producen daño en la piel a nivel superficial, subcutáneo y otras causantes
Para ello se sigue procesos como: Desde la toma de muestra (micosis), cultivo, tinción y
IV. BIBLIOGRAFIA
P.j Quinn, B.k Markey. 2005. Elementos de microbiologia veterinaria. Blakwell. Publish
2006.