UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA FORESTAL

ASIGNATURA: Fisiología Vegetal

TEMA: Determinación de la respiración por el método manométrico

INTEGRANTES:
 Chegne Escobal, Oscar.

 Rodas Romero, Delmer David.

 Ventura Guevara, Any Lisbet.

Docente: Ing. Santa Cruz Padilla Ángel Esteban

GRUPO: A2

Cajamarca, noviembre de 2018

I. Introducción.
En la respiración de las plantas, estas toman oxigeno de la atmosfera y utilizan las reservas de
hidratos de carbono para expulsar CO 2 Y H2O en vapor a la atmosfera permitiendo que las
células obtengan energía en forma de ATP.
Respiración por el método manométrico o de Warburg: El oxígeno utilizado se mide con respecto
al tiempo anotando la disminución de presión en el recipiente donde se está realizando la
respirometrías, que tiene volumen constante, es hermético y se ha de mantener a una
temperatura constante. En el recipiente se introduce la muestra a analizar dejando una cámara
de aire y, además, se ha de colocar un vaso con una solución de hidróxido potásico o hidróxido
sódico.
Para que absorba el anhídrido carbónico producido de tal forma que la disminución de la presión
sea una medida del oxígeno consumido. Este es otro ejemplo de Respirómetro GSS, en el que la
medida de la concentración de oxígeno se realiza de manera indirecta y tanto la muestra líquida
como el gas permanecen de manera estática en el interior del recipiente, sin que exista
renovación alguna de ambos durante la determinación respirométricas.
En el método manométrico, se mide el vacío creado por el consumo de oxígeno causado por la
muestra. Para esto, se requiere absorber el CO 2 formado de alguna manera. De lo contrario no
habría cambio de presión en las botellas ya que el volumen de CO 2 producido podría ser igual o
casi igual al volumen de oxígeno consumido.
II. Objetivos.
II.1. Objetivo General
 Medir el consumo de oxigeno (velocidad de respiración) durante la respiración de
semillas de frijol empleando el método manométrico.
II.2. Objetivos específicos
 Conocer la importancia del uso del método manométrico.
 Determinar los principales factores fisiológicos que intervienen en el proceso de
respiración de las plantas.
III. Materiales y Métodos
III.1. Materiales
 Matraces.
 Erlenmeyer de 250 ml.
 Trozos de tubo de vidrio doblados en un ángulo de 90° (en forma de L).
 2 Tapones para matraz con una perforación del tamaño del tubo de vidrio.
 2 frasquitos pequeños.
 1 pipeta pasteur.
 Un vaso de precipitados de 400 ml.
  Una regla de plástico.
 Una pinza de disección.
 1 probeta de 200 ml.
 Vaselina.
 Algodón.
 Una hoja blanca.
Material biológico.
 20 gramos de semillas de frijol germinadas (5 días en germinación).
Sustancias
 Azul de metileno al 1%.
 Solución de KOH al 20%.
III.2. Metodología
III.2.1. Fase de gabinete
En la fase de gabinete se procedió a sistematizar, ordenar, analizar y procesar la información
de la clase obtenida para poder desarrollar el cuestionario, para que finalmente sea
plasmada en el respectivo informe.
IV. Revisión bibliográfica
IV.1. Respirómetro
Un Respirómetro está formado por:
 Una bomba de aire.
 un difusor fino de burbujas.
 una columna de aireación.
 un depurador de anhídrido carbónico para medir el consumo de oxígeno.
La bomba proporciona una circulación continua de aire a través de un sistema de aire cerrado, el
cual consiste en una columna de aireación y un depurador.
El difusor de burbuja fina permite transferir el oxígeno de la fase gaseosa a la fase disuelta, y
proporciona oxígeno disuelto a un ritmo más rápido que el índice de consumo de oxígeno de los
microorganismos.
Tanto la difusión de burbuja fina como la recirculación constante de aire producen una vigorosa
agitación, de modo que los sólidos se mantienen en suspensión.
IV.2. Tipos de Respirómetro:
Respirómetro manométrico o de Warburg: El oxígeno utilizado se mide con respecto al tiempo
anotando la disminución de presión en el recipiente donde se está realizando la respirometrías, que
tiene volumen constante, es hermético y se ha de mantener a una temperatura constante. En el
recipiente se introduce la muestra a analizar dejando una cámara de aire y, además, se ha de
colocar un vaso con una solución de hidróxido potásico para que absorba el anhídrido carbónico
producido de tal forma que la disminución de la presión sea una medida del oxígeno consumido. En
el que la medida de la concentración de oxígeno se realiza de manera indirecta y tanto la muestra
líquida como el gas permanecen de manera estática en el interior del recipiente, sin que exista
renovación alguna de ambos durante la determinación respiro métrico.
 Respirómetro volumétrico: De forma análoga al Respirómetro de Wargurg, el oxígeno
consumido se mide en función de la disminución de volumen que se produzca en el recipiente
adecuado que mantenga la presión y la temperatura constantes. También se trata, al igual que el
de Warburg, de un Respirómetro GSS en que sólo cambia la tecnología empleada para medir la
concentración de oxígeno.
 Respirómetro electrolítico: Está formado por el recipiente donde se lleva a cabo la respiración
dotada en su interior de un “absorbedor de CO 2” (recipiente con sosa), una célula electrolítica y
un manómetro, todos interconectados. A medida que los microorganismos consumen el oxígeno
para la oxidación de la materia orgánica, se produce una disminución de presión en el sistema,
que es registrada por el manómetro. Éste, a su vez, a través de un sistema de control, activará
la célula electrolítica en función de dicha disminución de presión, tratando así de mantener la
presión constante. La cantidad de oxígeno liberado en la electrólisis es proporcional a la
cantidad de energía eléctrica que ha sido necesaria suministrar.
 Respirómetro continuo: continuo o discontinuo hace alusión al modo de aporte del gas. Es un
Respirómetro continuo, el aire circula de manera continua en el recipiente donde se lleva a cabo
la determinación. Se mide caudal y concentración de oxígeno en el aire a la entrada y a la salida
de forma permanente, para así poder determinar por diferencia el consumo instantáneo de
oxígeno. A partir de la curva de consumos instantáneos de oxígeno frente a tiempo se podrán
obtener por derivación las velocidades instantáneas de consumo de oxígeno. Se trata
claramente de un Respirómetro GFS, donde la medida se realiza en fase gas, existe un flujo
continuo de gas y el medio líquido permanece estático en el interior del reactor biológico donde
se lleva a cabo la determinación respirométrico.
 Respirómetro discontinuo (Batch): El aporte de oxígeno depende de dos valores de consigna, un
máximo y un mínimo de concentración de oxígeno dentro del recipiente donde se lleva a cabo la
respirometrías. Se inyecta aire hasta alcanzar el valor máximo de concentración de oxígeno
establecido. Una vez alcanzado se deja inyectar oxígeno y se espera a que los microorganismos
lo consuman, hasta llegar, esta vez a la consigna mínima y se volverá a airear. Se mide el
 tiempo que se emplean en consumir el oxígeno, con lo que se obtiene la velocidad instantánea
de consumo de oxígeno. Este proceso se repite cíclicamente. En cada ciclo este Respirómetro
funciona como un GSS.
 Respirómetro de Bartha: La evolución de CO 2 es usada como un indicador de la actividad
microbiana y descomposición relativa del contaminante. A tal fin se utilizan equipos según lo
descripto por Pramer y Bartha (1965). Estos equipos están constituidos por un Erlenmeyer, el
cual tiene adosado un tubo lateral. El erlenmeyer contiene el suelo que está siendo evaluado, y
el tubo lateral NaOH 0,097 N donde es retenido el CO 2 liberado por el metabolismo de los
microorganismos presentes. Ambos recipientes deben permanecer cerrados mediante tapones
de goma. El tapón correspondiente al Erlenmeyer, está atravesado con una jeringa para
inyección de agua, y un filtro de aire que permite el libre intercambio gaseoso reteniendo el CO 2
del aire que ingresa en el sistema. El tapón el tubo lateral, está atravesado también, por una
jeringa para inyección de NaOH.
IV.3. Absorción Del CO 2.
En el método llamado método manométrico, se mide el vacío creado por el consumo de oxígeno
causado por la muestra. Para que el método basado en la medición manométrica del vacío causado
en la botella funcione adecuadamente es necesario absorber el CO 2 formado de alguna manera. De
lo contrario no habría cambio de presión en las botellas ya que el volumen de CO 2 producido podría
ser igual o casi igual al volumen de Oxígeno consumido.

V. Procedimiento.
▪ 5 días antes de la práctica colocar 20 g de semillas de frijol a remojar durante toda la noche,
eliminar el agua y colocarlas sobre papel toalla húmeda en un lugar fresco y con luz difusa.

A B
 Figura 01. A. Semillas de frijol germinadas, Figura 02, B. semillas de frijol en estado de
germinación con algodón y papel absorbente
▪ En el laboratorio pesar una porción de 20g de semillas de frijol en germinación. Hervir por 5
minutos una de las porciones en un vaso de precipitados de 400 ml y luego dejar enfriar.
▪ Introducir el tubo de vidrio en los tapones de hule perforados utiliza jabón o aceite para que
sea más fácil el desplazamiento en los tubos. Medir el diámetro interno del tubo de vidrio.

Figura 03: el tubo de vidrio está tapado con vaselina.

▪ Tomar 1 matraz Erlenmeyer de 250 ml y colocar en el fondo, una base de papel absorbente
humedecido y sobre esta base colocar la semilla de frijol (la semilla no hervida en un matraz
la semilla hervida). Insertar un frasquito con solución de kOH al 20% al matraz cuidando que
no se derrame el KOH y tapar el matraz con el tapón de hule que tiene insertado el tubo de
vidrio de manera que el ángulo del tubo de vidrio quede fuera del matraz. Sellar con vaselina
cualquier orificio en la boca del matraz. Rotular el matraz (“control y “experimento”).
 Figura 04: el matraz introducido con el frasquito KOH al 20%.
▪ En un pedazo de hoja blanca marcar una longitud de 15 cm, centímetro a centímetro y con
sus mililitros. Recortarla y pegarla sobre la parte libre del tubo de vidrio.

Figura 05: Material empleado para medir el recorrido de la burbuja

▪ Con la pipeta de Pasteur colocar con cuidado una gota de colorante en el extremo de la
parte libre del tubo en forma de L. esperar 2 minutos y observar el desplazamiento de la
gota del colorante a través del tubo de vidrio, con la graduación que pegaste en el podrás
medir este desplazamiento según el tiempo.
Figura 06:
Procedimiento listo para que recorra la burbuja
▪ Durante los siguientes minutos registra de distancia de desplazamiento del colorante en
intervalos de 10 minutos. Como experimental. Anota en el eje de la “Y” el tiempo en minutos
y en el día de la “X” en cm3
 Figura 07: el trayecto de la burbuja por el tubo fue de 12 cm de recorrido hacia el matraz lo cual
fue medido con una regla

VI. Resultados.
Con los datos obtenidos elabora una gráfica del consumo de oxígeno en centímetros
cúbicos tanto de las semillas de frijol control, como experimental. Anota en el eje de la “Y” el
tiempo en minutos y en el de la X el consumo en cm 3.
VII. Cuestionario.
1. ¿cuál es el fundamento del experimento para medir la respiración mediante el
manómetro? (control y experimento)

Evaluar la cantidad de oxigeno consumido en un determinado tiempo absorbido por el

hidróxido de potasio.
2. ¿Para qué se pusieron a germinar las semillas antes de la práctica?
Las semillas se pusieron a germinar antes de la práctica con la finalidad, de propiciar lo más
antes posible el desarrollo del embrión, así como también el de la plúmula y la radícula,
etapas donde hay mayor actividad celular y los procesos fisiológicos de respiración son más
intensos, permitiendo medir con más precisión la respiración haciendo uso del método
manométrico.
3. ¿Qué función cumple el K (OH)?

Hidróxido potásico es el que tiene la capacidad de absorber el anhídrido carbónico (CO 2)

producido de tal forma que la disminución de la presión sea una medida del oxígeno
consumido.
4. ¿Por qué crees que es necesario que estén muertas las semillas que colocaste en el
Respirómetro control?

Porque si están muertas no consumen oxígeno, por lo tanto, el respirómetro marcara cero.
5. ¿cómo puedes saber que realmente que el oxígeno consumido alteró la presión dentro
del manómetro?

Se sabe que dentro del manómetro la traspiración es menor y por el cual la presión atmosférica
es afectada, es decir que a mayor presión atmosférica es menos la menos traspiración porque al
consumirse el oxígeno la presión aumente en gran cantidad.
6. ¿Qué es el cociente respiratorio y cómo varía con el tipo de sustrato?

Cociente respiratorio (cr). Sí como sustratos respiratorios se oxidan por completo, sacarosa,
fructosa, glucosa o almidón, el volumen de O 2 absorbido es igual al volumen de CO 2 liberado, el
cociente respiratorio es uno. Las semillas de cereales y de muchas legumbres tienen valores
cercanos a uno, cuando se oxidan grasas y aceites durante la respiración, a menudo el cociente
respiratorio es 0.70. Por ejemplo, cuando se oxida el tripalmitato de glicerol:

2 C51H 98O6 + 145 O2 102 CO2 + 98 H2O

El CR es: 102/145 = 0.70
Si se oxida un sustrato más rico en oxígeno, el CR es mayor de 1, por ejemplo: la oxidación de
ácido málico:
C4H 6O5 + 3 O2 4 CO2 + 3 H2O
El CR es: 4/3 = 1,33
El cociente respiratorio de proteínas es cercano a 1,0. Conociendo los valores del cociente
respiratorio, se puede obtener información del tipo de sustrato que es usado en la respiración.
7. ¿cómo se mide la intensidad respiratoria?

La intensidad respiratoria de un fruto depende de su grado de desarrollo y se mide como la cantidad

de CO2 en miligramos que desprende un Kilogramo de fruta en una hora. A lo largo del crecimiento
se produce, en primer lugar, un incremento de la respiración, que va disminuyendo lentamente hasta
el estado de maduración. En general, la velocidad de respiración, medida por la producción de
dióxido de carbono o por el consumo de oxígeno, es una buena medida de la velocidad de
metabolismo y sirve para predecir el almacenamiento de frutas y verduras.
VIII. Conclusiones.
 El fundamento del experimento fue Evaluar la cantidad de oxigeno consumido en un
determinado tiempo absorbido por el hidróxido de potasio.
 La intensidad respiratoria de un fruto depende de su grado de desarrollo y se mide como la
cantidad de CO2 en miligramos que desprende un Kilogramo de fruta en una hora.
 La principal función del Hidróxido potásico es el que tiene la capacidad de absorber el anhídrido
carbónico (CO2) producido de tal forma que la disminución de la presión sea una medida del
oxígeno consumido.
Bibliografía.
file:///E:/FISIOLGIA%20POSCOSECHA/intensidad%20respiratoria.pdf
http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/respiracion/#cociente respiratorio
http://www.fao.org/docrep/x5055s/x5055s02.htm
http://www.enciclopediaespana.com/Respir%C3%B3metro.html
http://www.salud180.com/salud-z/respiracion