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TEMA:

Identificación de agentes micóticos como Cándida en cérvix con coloración de PAS

OBJETIVO:

Identificar agentes micóticos como Cándida en cérvix con coloración de PAS

MARCO TEORICO:

COLORACIÓN DE PAS

La tinción de PAS (ácido periódico-de Schiff) permite la determinación del glucógeno,


delas mucinas, de los mucopolisacáridos neutros así como de los filamentos y
esporasmicelianos. El ácido periódico transforma los glicoles en aldehído. El reactivo de
Schiff, desteñido por el ácido sulfúrico, reacciona con los aldehídos libres formando un
producto de condensación de color rojo, contra teñido con la hematoxilina. La
manipulación de este producto queda reservada a los profesionales.

PRINCIPIO DEL MÉTODO

Durante la tinción de PAS, el ácido periódico es un oxidante potente capaz de romper el


enlace covalente entre dos funciones ±OH de una glucopiranosa. Las dos funciones de
aldehídos creadas reducen el leuco derivado de la fucsina básica de Schiff, que se vuelve
rosa a rojo púrpura. La hematoxilina se usa como contra colorante para intensificar el
contraste.

Los diagnósticos tan solo pueden darse por personas autorizadas y preparadas.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO Y LÍMITES DE LAS PRESTACIONES

El par de la solución Q Path reactivo de Schiff y de la solución Q Path ácido periódico se


utiliza en el marco de un procedimiento de tinción especial que variará en función de los
usuarios y puede ser adaptado por el patólogo que realiza el diagnóstico para alcanzar la
intensidad y la especificidad requeridas. Este método es repetitivo y reproducible dentro
delos límites del carácter subjetivo del procedimiento. La tinción excesiva o la tinción
deficiente que solamente podrán apreciarse al finalizar el procedimiento requerirán repetir
la tinción de una sección, procurando respetar los tiempos indicados en el protocolo.
Debido al carácter subjetivo de la tinción, resulta imposible prever los tiempos exactos
de cada etapa. Las soluciones de tinción muy usadas perderán su poder de coloración y
los tiempos de tinción deberán ser prolongados o será preciso utilizar soluciones nuevas.

INSTRUCCIONES DE USO REACTIVO DE SCHIFF

La calidad óptima del colorante será validada por el paso de una lámina testigo antes de
arrancar con las tinciones diarias.

Un contacto demasiado prolongado con el ácido periódico, así como una solución cuyo
PH sea excesivamente ácido darán unos falsos positivos a consecuencia de la
sobreoxidación de los aldehídos en carboxilos.

ADVERTENCIA Y PRECAUCIONES A TOMAR

1. Es preciso filtrar la solución a diario para evitar toda contaminación por células o
tejidos.

2. Es preciso sustituir la solución por una solución fresca con la mayor frecuencia posible.

3. La tinción de un gran número de láminas puede acarrear la dilución de la solución. Se


recomienda, por lo tanto, llevar a cabo una rotación de las cubetas de tinción para evitar
una dilución excesiva.

4. Es preciso realizar a diario una prueba en una sección de control antes de iniciar los
trabajos para alcanzar los mejores resultados.

5. Es preciso utilizar un volumen adecuado de solución en las cubetas de tinción para


asegurar que la sección quede totalmente recubierta durante la tinción.

6. No utilizar este producto después de vencida la fecha de caducidad.

7. No mezclar con otra solución de reactivo de Schiff u otros colorantes.

MICROORGANISMOS MICÓTICOS

Los microorganismos micóticos u hongos como Cándida presentan estructuras eucariotas


las cuales contienen paredes gruesas formadas por quitina y ergosteroles en sus
membranas celulares. Estos microorganismos micóticos se pueden desarrollar como
formas unicelulares llamadas levaduras o como unas formas filamentosas denominadas
hifas, las cuales pueden ser tabicada o no tabicadas.

En la actualidad los hongos que antes se consideraban no patógenos son causa de


enfermedades frecuentes en pacientes inmunocomprometidos. Por otra parte, los
avances en el diagnóstico radiológico y en apoyo al paciente han permitido una mayor
capacidad de diagnóstico mediante muestras de biopsia de tejidos de diferentes sitios
del cuerpo que antes no eran posibles para el examen histopatológico.

El examen histopatológico de los tejidos para detectar hongos seguirá siendo una
herramienta importante a la hora de definir un diagnóstico por infecciones fúngicas.

La Histopatología también puede proporcionar un rápido diagnóstico presuntivo de


microorganismos micóticos en relación a la espera de los resultados de un cultivo de
hongos.

El examen histopatológico de los tejidos para detectar hongos seguirá siendo una
herramienta importante a la hora de definir un diagnóstico por infecciones fúngicas.

OBSERVACIÓN MACROSCOPICA

CONCLUSIONES:

Se debe comenzar siempre con la tinción de rutina H & E, en el examen histopatológico de


muestras de biopsia, especímenes quirúrgicos y autopsia, en cambio la tinción de Grocott y la
tinción de PAS deben efectuarse si se sospecha de hongos después 22 de la revisión de los tejidos
por una alta sospecha clínica y porque existe una respuesta inflamatoria en el tejido.
La Tinción de PAS tiene un papel protagónico en la identificación de microorganismos micóticos
como cándida,

BIBIBLIOGRAFÍA:

Scribd disponible en: https://es.scribd.com/doc/80688931/Tincion-PAS

MacAdam, A. J., & Sharpe, A. H. (2013). Patología general de las enfermedades infecciosas. En
V. Kumar, A. K. Abbas, & J. C. Aster, Patología humana de Robbins Novena edición (pág. 313).
Barcelona: Elsevier.

Guarner, J., & Brant, M. E. (2011). Histopathologic Diagnosis of Fungal Infections in the 21st
Century. Clinical Microbiology Reviews, 247-280. Recuperado el 17 de Julio de 2016, de
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3122495/