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4.

Espectrometría infrarroja por Transformadas de Fourier (IR – TF)

El presente artículo centra su atención en la espectrometría infrarroja por


Transformadas de Fourier (FTIR), una herramienta muy versátil utilizada para
detectar contaminantes comunes, subproductos de la degradación del aceite y
aditivos.
FTIR es una de las herramientas más usadas en los laboratorios de análisis de
aceite. Su principal valor reside principalmente en que es una prueba donde el
instrumento es la base de toda la prueba (no se requiere de una preparación de
la muestra o química húmeda), se ejecuta rápidamente y es capaz de detectar
simultáneamente varios parámetros, incluyendo agua, combustible, glicol,
oxidación, hollín y algunos aditivos. De hecho, desde el punto de vista de su
valor, parece la solución ideal para proporcionar análisis rápidos y económicos.
FTIR está basada en los principios de la espectroscopía molecular. Esta área
de amplio alcance en física y química cubre una gran cantidad de técnicas
experimentales, algunas de las cuales se encuentran en otras pruebas del
análisis de lubricantes y otras que son tan sofisticadas que sólo son de
importancia en los laboratorios de investigación.
El principio básico detrás de la espectrometría molecular es que las moléculas
absorben energía de la luz en longitudes de ondas específicas, conocidas
como sus frecuencias de resonancia (vibración). Por ejemplo, las moléculas de
agua resuenan (vibran) alrededor del número de onda de 3450 (se indica como
cm-1), en la región infrarroja del espectro electromagnético.
Un espectrómetro infrarrojo funciona con una pequeña muestra que es
colocada en una celda infrarroja, donde es sometida a una fuente de luz
infrarroja, la cual hace un barrido desde las longitudes de onda de 4000 cm-1
hasta 600 cm-1. La intensidad de la luz transmitida a través de la muestra es
medida en cada número de onda, lo que permite que la cantidad de luz
absorbida por la muestra sea calculada por la diferencia entre la intensidad de
la luz antes y después de pasar por la celda de muestra. Esto se conoce como
el espectro infrarrojo de la muestra.
Un número de onda, representado por el símbolo cm-1, es simplemente el
inverso de la longitud de onda. Por ejemplo, 3450 cm-1, es la frecuencia de
resonancia del agua correspondiente a una longitud de onda de luz de
0.00000290 m, 2.9 x 10-6 m, en la región infrarroja del espectro
electromagnético. En lugar de usar una unidad tan engorrosa de 10-6 m, el
analista simplemente toma el inverso de ese número, el cual es más fácil y
cómodo de usar.
7. analizador de muestras 5400

Los sistemas Agilent Fragmento Analyzer emplean varias características de


diseño único para aliviar los puntos de control del estrangulador de calidad
común. Estas características incluyen, mayor disponibilidad de instrumentos,
operaciones flexibles y fiables, y se ejecuta personalizables ayudar a alcanzar
resultados más rápidamente.
El uso de electroforesis capilar automatizado en paralelo, los sistemas
Fragmento Analyzer ofrecen control de calidad de ácidos nucleicos para una
gama de aplicaciones, incluyendo bibliotecas de NGS y cfDNA QC. preparación
simple de la muestra, el funcionamiento automatizado, y el software de análisis
intuitivo contribuyen a la medición eficiente y precisa.

ANALIZADOR DE
FRAGMENTOS 5400
El analizador de fragmentos 5400
redefine los límites del análisis de
control de calidad automatizado
de los ácidos nucleicos. Capaz de
interactuar con sistemas robóticos
líderes en el mundo, el análisis de
muestras de ADN y ARN ahora se
puede realizar durante todo el día.

Sistema de ultra alta rendimiento


para la automatización robótica
ejecución de más de dos placas
de 96 pocillos por día.

El analizador de fragmentos 5400, especialmente diseñado para laboratorios


de alto rendimiento de todo tipo, se basa en el marco comprobado
del analizador de fragmentos que utiliza nuestra matriz de 96 capilares
de última generación. La coordinación con los principales desarrolladores de
automatización robótica ha asegurado que el 5400 “Fragment Analyzer” se
integre sin esfuerzo en la mayoría de los flujos de trabajo robóticos. Cabe
destacar que cada cajón es controlado y capaz de interactuar con un brazo
robótico.
Con una integración perfecta en un flujo de trabajo automatizado, el analizador
de fragmentos 5400 puede dimensionar, calificar y cuantificar muestras de
ácido nucleico durante todo el día sin intervención humana, analizando más de
2,400 muestras de ácido nucleico por día.
El analizador de fragmentos 5400 es compatible con los mismos kits de
reactivos de alta calidad disponibles para el analizador de fragmentos. Realice
un análisis a gran escala del ADN genómico para los flujos de trabajo
de NGS o busque mutaciones inducidas por CRISPR . Independientemente de
su aplicación, el analizador de fragmentos 5400 es la solución ideal de alto
rendimiento para análisis de ADN y análisis de ARN.
¿Qué es el analizador de fragmentos 5400?
El analizador de fragmentos 5400 es el único instrumento de electroforesis
capilar paralelo para el análisis de control de calidad de ácidos nucleicos
capaces de incorporarse sin problemas a los sistemas de automatización de
laboratorio. Capaz de analizar miles de muestras de ADN y ARN por día, el
analizador de fragmentos 5400 lleva el análisis de ácidos nucleicos al siguiente
nivel. No importa cuántas muestras deban analizarse, el análisis de datos
posterior a la separación es muy sencillo con el software de análisis
de datos ProSize y el procesamiento automático de datos.

¿Qué tan sensible es el analizador de fragmentos?


ProSize Software de análisis de datos
Un flujo de trabajo eficiente es crucial para los laboratorios de alto
rendimiento. Resultados rápidos y de calidad significa que las aplicaciones
posteriores se alcanzan antes y las conclusiones se hacen más rápido. Con la
opción de procesamiento de datos por lotes, el software de análisis de datos
ProSize reduce los cuellos de botella de datos posteriores a la electroforesis,
brindándole los resultados que necesita, cuando los necesita. La integración
con un sistema LIMS permite el etiquetado automático de muestras en el
software, optimizando aún más su flujo de trabajo.
Aplicaciones
El analizador de fragmentos 5400 se adapta bien a las mismas aplicaciones
que el analizador de fragmentos, pero a una capacidad de rendimiento mucho
mayor. Capaz de realizar más de 2,400 muestras por día sin intervención
humana, el analizador de fragmentos 5400 es ideal para genotipado de alto
rendimiento, detección de mutaciones CRISPR y flujos de trabajo NGS.
- CRISPR / Cas9: la edición de genes CRISPR ha barrido las ciencias de
la vida por la tormenta utiliza el poder de la CE para agilizar los flujos de
trabajo CRISPR con un control de calidad confiable de los reactivos y un
proceso de selección simple y preciso, al mismo tiempo que se diluye la
cigosidad de los clones positivos.

- NGS: el control de calidad de la biblioteca de NGS es esencial para la


generación de resultados de secuencia exitosa. Se han desarrollado
varias soluciones para hacer frente a los desafíos de control de calidad de
varios tipos de biblioteca NGS, desde las plataformas de secuenciación
de lectura corta a lectura larga, ChiP-seq, RNA-seq, y más.

- ADN genómico: una comprensión precisa de la calidad y tamaño del ADN


genómico es importante para numerosas metodologías, incluida la
evaluación del éxito del aislamiento y la NGS. Existen métodos para
evaluar la cantidad, calidad y el tamaño del ADNg, aunque muchos no
pueden resolver de manera confiable los desafíos asociados con e
análisis del ADN genómico.

- Fragmentos de PCR: la determinación del taño y a concentración del


amplicón es un aspecto crucial en el análisis posterior a la reacción de la
PCR. Los métodos tradicionales de análisis de fragmentos de PCR
carecen de sensibilidad y la resolución exigida por muchas aplicaciones.

- ARN: activo e innumerables procesos biológicos, el ARN es el objetivo de


muchas aplicaciones, desde microarrays hasta NGS. Con diversos tipos
de ARN, ARN pequeño, ARNm, ARNr y mas, se plantean desafíos
analíticos únicos. Se han desarrollado varias soluciones para la
cuantificación, calificación y dimensionamiento de las muestras de ARN,
aunque muchas no abordan completamente los desafíos analíticos.

- cfDNA: El ADN libre de células (cfDNA, por sus siglas en inglés) es de


creciente interés para los médicos e investigadores como un biomarcador
prometedor para varios estados de enfermedad. cfDNA requiere una
evaluación rigurosa de la calidad antes de su uso en los flujos de trabajo
de NGS para garantizar resultados de secuencia exitosos.

- TILLiNG: comúnmente empleado en genética de plantas TILLiNG


(focalización de lesiones locales inducidas en genomas) es un enfoque
de genética inversa utilizado para descubrir mutaciones pequeñas y
puntuales, como los SNP. La detección de mutaciones inducidas por
TILLiNG depende de los ensayos de heteroduplex.

- ADN plasmidico: la evaluación de la cantidad de ADN plasmidico


superenrrollado en una muestra es una medida critica para muchas
aplicaciones, tales como: purificaciones, vacunas de ADN y productos
de terapia genética. El kit de análisis de ADN plasmidico (DNF-940)
ofrece un tamaño y una cuantificación relativa de alta calidad del
plásmido superenrrollado.

Las muestras de ácido nucleico comúnmente analizadas incluyen:


 ADN genómico  Restricción de las enzimas
 Gran fragmento de ADN  Pequeñas bibliotecas
de ARN NGS
 Pequeño fragmento de ADN
 ARNm
 ADN libre de células (cfDNA)
 sgRNA
 Bibliotecas NGS (Illumina y
PacBio)  ARN pequeño / micro ARN
 Plásmido (supercoild y lineal)  Total de ARN ribeteado
 RSS / Microsatélites  ARN total
 PCR amplicones  FFPE extrae ácidos nucleicos

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