ESPECTROFOTOMETRIA RAMAN

El fenómeno descrito como efecto RAMAN, fue descrito por el físico indio Chandrasekhara
Venkata RAMAN, en el año de 1930. Este científico dio nombre al fenómeno inelástico de
dispersión de la luz que permite el estudio de rotación y vibración molecular. El efecto de
dispersión RAMAN surge a partir de la interacción de la luz incidente con los electrones de una
molécula iluminada. En la dispersión RAMAN la energía de la luz incidente no es suficiente para
excitar la molécula a un nivel electrónico de mayor energía. Así el resultado de la dispersión
RAMAN es cambiar el estado vibracional de la molécula.

La espectroscopia RAMAN se considera una técnica de análisis no destructiva debido a que se

realiza directamente sobre el material sin necesidad de ningún tratamiento previo además de que
el uso de luz normalmente no causa daños en la muestra a menos que ésta sea fotosensible o se
irradie con demasiada intensidad por periodos prolongados de tiempo. El hecho de que el
espectrómetro RAMAN este acoplado a un microscopio óptico, permite obtener espectros con
bandas más definidas, mayor intensidad y mejor resolución. La espectroscopia RAMAN es una
técnica fotónica utilizada para obtener en pocos segundos información química y estructural de
diversas sustancias. El análisis por espectroscopia RAMAN se basa en la medición de la luz
dispersada por un material sobre el cual se hace incidir un haz monocromático. La luz dispersada
presenta cambios en la longitud de onda respecto al haz incidente dependiendo de la estructura
química de la muestra. Esto también permite determinar semi cuantitativamente la cantidad de
sustancia en una muestra de casi cualquier material o compuesto para su identificación, detectar
vibraciones en moléculas y caracterizar fases puras y mezclas de minerales con un
empaquetamiento atómico similar.

Método 1

El análisis mediante espectroscopía Raman consiste en hacer incidir un haz de luz monocromática
de frecuencia ν sobre una muestra cuyas características moleculares se desean determinar. Los
fotones del haz incidente pueden experimentar los siguientes efectos:

1) Colisiones elásticas con los átomos de la muestra, prácticamente sin pérdida de energía y
conservando la misma frecuencia con la que incidieron generando la llamada dispersión Rayleigh (f
la cual, no aporta ninguna información sobre la composición de la muestra debido a que las
moléculas vuelven al mismo nivel de energía que tenían antes del choque.

2) Colisiones inelásticas con los átomos de la muestra en donde se presentan transferencia de

energía que modifican la frecuencia de los fotones dispersados (1 fotón de cada 1011 que inciden)
que forman la llamada dispersión RAMAN la cual contiene información sobre la composición y
estructura de la muestra debido a que las moléculas son excitadas a un estado vibracional
distintos del que tenían antes del choque en dos formas posibles:

a) El fotón incidente transmite energía a la molécula con la que choca, (dispersión Stokes),
induciendo vibraciones moleculares, y disminuyendo su frecuencia por la pérdida de energía al
chocar.

b) El fotón absorbe energía al chocar con moléculas excitadas, (dispersión anti – Stokes)
aumentando su frecuencia al ganar energía durante el choque.
COMPONENTES DEL ESPECTROMETRO MICRO-RAMAN RENISHAW

El espectrómetro In via micro-Raman de la marca Renishaw del laboratorio de espectroscopía

Raman, contiene los siguientes componentes:

a) Fuente de luz monocromática (laser). El espectrómetro está equipado con dos laseres, uno
verde de 514 nm y 20 mW marca Spectra-Physic y otro rojo de 633 nm y 50 mW marca Renishaw.
b) Sistema de iluminación de la muestra que recolecte la luz dispersada (microscopio).

c) Medio para filtrar toda la luz excepto por la dispersión Raman (Filtros holográficos Notch o
filtros dieléctricos).

d) Rejilla de difracción para dividir la luz dispersada en longitudes de onda.

e) Un fotodetector para medir la luz dispersada (cámara CCD). El espectrómetro está conectado a
una computadora para la obtención, registro y manipulación de los espectros Raman.

0PREPARACIÓN DE MUESTRA
Las muestras sólidas se pueden manipular de dos formas:

1. Colocando la muestra directamente sobre una porta objetos de vidrio. Esta opción se
recomienda cuando se desea recuperar el cien por ciento del material a analizar o cuando la
muestra consiste en fragmentos sólidos.

2. Montando la muestra sobre cinta de doble cara colocada previamente en un porta objetos de
vidrio. Esta alternativa se recomienda cuando la muestra presenta estatica o tiene una superficie
irregular de forma que la cinta permite fijar el material para evitar que se mueva de la porta
objetos.

Debido a que la cantidad de material que se requiere para medir los espectros Raman es muy
pequeña, se pueden montar varias muestras en un mismo porta objetos. Existe la posibilidad de
analizar algunas muestras líquidas, principalmente aquellas que tienen presencia de solidos
dispersos en algún liquido volátil. Este tipo de muestras se monta colocando una gota de muestra
directamente sobre la porta objetos esperando a que se evapore el exceso de líquido. Todo esto
se utiliza un con un software llamado “WIRE 3.4”

Método 2

La espectroscopía Raman convencional mide la intensidad de la radiación como una función de la

frecuencia (o del número de onda). Por otro lado, los instrumentos FT miden la intensidad de la luz
de muchas longitudes de onda simultáneamente [3]. Este espectro se convierte en uno
convencional por medio de una transformada de Fourier. La forma de la onda en el experimento
FT-Raman se ilustra en la Figura 1. La Figura 1b muestra la transformada de Fourier, la cual
produce un pico a una frecuencia ν. En la Figura 1c. se representa la suma de dos ondas de
diferente frecuencia El resultado de la transformada de Fourier da (Fig. 1d) un espectro con dos
picos: uno en ω0 y el otro en 10ω0, donde la frecuencia más baja es la misma que la de la Figura
1b y la otra es diez veces más grande. La característica esencial de la técnica FT es que se detectan
todas las longitudes de onda al mismo tiempo. Esto proporciona una mejora en la resolución, en el
tiempo de adquisición del espectro y en la razón señal-ruido (S/R) sobre la espectroscopía Raman
convencional.

Tanto los instrumentos Raman por transformada de Fourier (FT-R) como los instrumentos
infrarrojos por transformada de Fourier (FT-IR) miden luz absorbida o emitida por una muestra;
esta medida provee información valiosa acerca de la composición química del material estudiado.
Los componentes principales de un sistema por transformada de Fourier son: la fuente de
iluminación de la muestra, un colector de la luz dispersada (espejo), el interferómetro y un sistema
de detección consistente en un detector, un amplificador y un dispositivo de salida. En particular,
describiremos un módulo Raman acoplado a un espectrómetro FT-IR modelo 800 de la marca
Nicolet. Éste sistema se controla con una estación de trabajo modelo 680 que trae integrado un
sistema operativo denominado NICOS (NIColet Operating System) que produce la misma
compañía. La fuente usada es un láser Nd:YAG, el cual tiene una línea a 1064 nm (9395 cm-1). El
uso de este láser en el infrarrojo cercano (NIR) hace que la intensidad de la luz dispersada sea 16
veces menor que cuando se usa un láser en el visible de 514.5 nm, dado que la sección transversal
de la dispersión Raman obedece la relación de ν 4 [4, 5]. La máxima potencia del láser es de
alrededor de 5W, sin embargo, generalmente se usa una potencia de 1W.

Preparación y montaje de las muestras.

El montaje de la muestra depende de las características físicas y ópticas de

la misma. Existen tres categorías:

+ Polvos y líquidos

+ Líquidos viscosos

+ Sólidos

Para polvos y líquidos se usa un tubo de NMR (resonancia magnética

nuclear) o un tubo capilar de pyrex; esta técnica es de mucha ayuda cuando se

tiene una cantidad pequeña de muestra. ilustra cómo se coloca la

muestra.
Siguiendo con la descripción de los componentes básicos de un instrumento FT-Raman llegamos al
interferómetro, el cual se usa para medir todas las frecuencias ópticas simultáneamente; también
modula la intensidad de las frecuencias individuales de la radiación antes de llegar al detector. Al
resultado de un barrido del interferómetro se le llama interferograma, que consiste en una gráfica
de intensidad de la luz contra posición del espejo móvil y es una suma de todas las longitudes de
onda (ondas coseno) emitidas por la muestra. El interferograma no puede ser interpretado en su
forma original, pero usando un proceso matemático llamado transformada rápida de Fourier (FT),
se convierte en un espectro, que representa la emisión de la muestra para todas las frecuencias
medidas y se usa para la identificación de la sustancia.

Dispositivo de detección

En la espectroscopía FT-Raman se usa un láser en el infrarrojo cercano (NIR), específicamente un

láser Nd/YAG que tiene una línea a 1064 nm. Para detectar este tipo de radiación se pueden usar
distintos detectores. El detector más usado en los instrumentos FT-Raman es el de arsenuro de
indio y galio (IGA, indium galium arsenide). Un detector de 1mm tiene un nivel de ruido del orden
de 10-14 o menor cuando es enfriado. Otro detector es el de germanio (Ge) de muy alta pureza. El
nivel de ruido en este detector se aproxima a 10-15 y pueden obtenerse espectros hasta 3500 cm-
1 . Desgraciadamente, es susceptible a la radiación cósmica y por tanto se debe de proteger de
dicha radiación para obtener una señal adecuada.

También se puede usar un detector de antimonuro de indio (InSb). Su nivel de ruido es de 10-12
sin usar ningún filtro. Generalmente se usa con láseres que operan en el infrarrojo. Se han
propuesto otros tipos de detectores, tales como el IGA de silicio con 256 elementos y, el de silicio-
platino con 1024 elementos. La eficiencia cuántica de estos detectores llega al diez por ciento pero
el intervalo espectral se amplía a 5µm. La Figura 6 muestra un diagrama de la óptica usada en un
espectrómetro FT-Raman. Se observa que la radiación del láser se dirige a la muestra por medio de
una lente y un espejo parabólico recoge la luz dispersada haciéndola pasar a través de un divisor
de haz y un par de espejos (uno móvil y otro fijo) que componen la parte interferométrica.
Después de esto, la radiación pasa a través de una serie de filtros dieléctricos para luego ser
enfocada en un detector de germanio (Ge) enfriado con nitrógeno líquido. El detector envía una
señal a un sistema computacional, el cual se encarga de convertir el interferograma en un
espectro convencional por medio de una transformada de Fourier.