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QUÍMICA ANALÍTICA

Aspectos básicos del proceso


analítico

Prof. Nora Alvino


UNFV-Química 2018-2
CONTENIDO

1. Generalidades:
Análisis Cualitativo y Análisis Cuantitativo

2. Conceptos básicos en Análisis Químico

3. Clasificación de los métodos de Análisis

4. El proceso analítico
1. GENERALIDADES

CIENCIA DE LA MEDICIÓN: separa, identifica y cuantifica los


componentes de una muestra.
Para ello desarrolla y mejora métodos
e instrumentos

QUÍMICA ANALÍTICA

ANÁLISIS QUÍMICO

Parte práctica de la Química Analítica que aplica los métodos


de análisis para resolver problemas
OTRAS DEFINICIONES

 La Química Analítica es la ciencia que estudia el conjunto de


principios, leyes y técnicas cuya finalidad es la determinación de la
composición química de una muestra.

 El conjunto de técnicas operativas puesto al servicio de dicha


finalidad constituye el Análisis Químico.

 La Química Analítica es la ciencia creadora de dichas técnicas.

 Rama de la química que estudia los métodos de:

 Separación
 Identificación
 Determinación de los componentes o la cantidad relativa de
componentes que constituyen una muestra de materia.
QUÍMICA ANALÍTICA:

“ La Química analítica es una ciencia metrológica que desarrolla,


optimiza y aplica herramientas de amplia naturaleza, que se concretan en
procesos de medida encaminados a obtener información Química y
Bioquímica de calidad, tanto parcial como global sobre materias o
sistemas de amplia naturaleza (química, bioquímica y biológica) en el
espacio y en el tiempo, para resolver problemas científicos, técnicos,
económicos y sociales “.

Working Party on Analytical Chemistry


(WPAC) Edimburgo, 1993
TIPOS DE ANÁLISIS EN QUÍMICA ANALÍTICA

ANÁLISIS QUÍMICO

Análisis Cualitativo Análisis Cuantitativo

Identificación de las especies Determinación de la cantidad relativa


que componen la muestra de los componentes de la muestra en
(elementos, iones o compuestos). términos numéricos
Sangre Glucosa 100 mg/dL
Colesterol total 200 mg/dL
Glucosa, colesterol total, Triglicéridos 160 mg/dL
triglicéridos, hierro, Ácido úrico 5 mg/dL
ferritina, albúmina, Fe 150 µg/dL
ácido úrico…. Ferritina 200 µg/dL
Albúmina 5 g/dL
IMPORTANCIA DE LA QUÍMICA ANALÍTICA

Geología Biología
Ciencias
Ambientales
Química

Agricultura QUÍMICA
ANALÍTICA
Ingeniería

Ciencias
Sociales
Medicina

Ciencias de Física
los materiales
2. CONCEPTOS BÁSICOS EN ANÁLISIS QUÍMICO

• MUESTRA: parte representativa de la materia objeto de análisis.


• ALÍCUOTA: fracción o porción de muestra.
• ANALITO: especie química objeto del análisis.
• MATRIZ DE LA MUESTRA: especies químicas que acompañan al analito
en la muestra.
• TÉCNICA ANALÍTICA: medio empleado para obtener información sobre el
analito.
• MÉTODO ANALÍTICO: secuencia de operaciones y técnicas aplicadas
para el análisis de una muestra.

Ejemplo: Análisis de glucosa en sangre.


Muestra: Sangre
Analito: Glucosa
Matriz: Proteínas, sales minerales, colesterol…
Técnica analítica: Espectrofotometría de absorción molecular visible
Método analítico: Implica desde la toma de muestra hasta la obtención del resultado
final.
NATURALEZA DE LA MUESTRA Y ANALITO

MUESTRA ANALITO EJEMPLO


Inorgánica Inorgánico Oro en minerales
Inorgánica Orgánico Pesticida en suelo
Inorgánica Bioquímico Moléculas en meteoritos
Orgánica Inorgánico Metales en fármacos
Compuestos orgánicos
Orgánica Orgánico
nitrogenados en petróleos
Actividad enzimática en
Orgánica Bioquímico
disolventes orgánicos

Bioquímico Inorgánico Calcio en fluidos biológicos

Bioquímico Orgánico Drogas y sus metabolitos en orina

Bioquímico Bioquímico Contenido proteínico de la leche


Ejemplo: Determinación de Calcio en leche

Composición de la leche
(incompleta) Matriz

Leche

Agua (87%) Extracto seco total


(13%)

Extracto
Grasa (3,9%)
seco no graso

Minerales Hidratos de Proteínas


(0.7%) carbono (lactosa) (3.2%)
(4,6%)

Na
K Ca
Caseínas Proteínas del suero
P Fe (2.6%) (0.6%)

Analito
OTROS CONCEPTOS IMPORTANTES

• INTERFERENTE: especie química distinta del analito que aumenta o


disminuye la respuesta del analito bajo el método aplicado.
Ejemplo: Analito: Ca2+
Al3+ es un interferente si la determinación se lleva a cabo por valoración
con EDTA. Interferencia positiva

• ENMASCARAMIENTO: transformación del interferente en otra especie


química que no es detectada con la técnica analítica empleada.
Ejemplo: Al3+ + 3OH- → Al(OH)3

• DISOLUCIÓN ESTÁNDAR: disolución conteniendo el analito en


concentración perfectamente conocida.
Ejemplo: Disolución acuosa de glucosa con una concentración exacta de
75 mg/dL

• CURVA DE CALIBRADO: gráfica que representa la señal analítica


monitorizada frente a la concentración del analito.
- Peso o volumen de muestra
Mediciones en - Cantidad proporcional a la cantidad de analito en la
Análisis Cuantitativo muestra.

3. CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE ANÁLISIS

 Métodos clásicos:
Se basan en propiedades químicas de los analitos.
Volumetrías y gravimetrías.

 Métodos instrumentales:
Se basan en propiedades químico-físicas de los analitos.
Se clasifican según la propiedad que se mide (espectroscópicos, electroquímicos,
misceláneos…).

 Métodos de separación:
La finalidad inicial de estos métodos era separar interferentes antes de proceder a
aplicar la técnica analítica seleccionada. En la actualidad, existen métodos de
separación que son métodos de análisis en sí mismos, como por ejemplo la
cromatografía.
4. EL PROCESO ANALÍTICO

El Análisis Químico alcanza sus objetivos mediante el PROCESO ANALÍTICO,


que es la aplicación del método científico:

Problema

Elección del
método analítico MÉTODO ANALÍTICO

Toma de Tratamiento Proceso de Tratamiento


muestra de la muestra medida de los datos

Valoración de
los resultados

Informe y
conclusiones
ETAPAS DEL PROCESO ANALÍTICO

4.1. Definición del problema: En esta 1ra etapa se plantea el tipo de


análisis requerido y la escala de trabajo.

Ejemplo: se pretende contrastar el contenido real de ácido acetilsalicílico (AAS) en un


producto farmacéutico con el valor suministrado por el fabricante

4.2. Selección del método de análisis: Etapa crucial para el éxito


de los resultados finales
Consideraciones importantes:
☺ Exactitud requerida en los resultados
☺ Disponibilidad de tiempo y de dinero Volumetría
ácido-base
☺ Número de muestras a analizar NaOH

☺ Concentración esperada del analito en la muestra


☺ Complejidad de la muestra bajo análisis

Buscar en la bibliografía procedimientos apropiados y de ser necesario, poner AAS


a prueba nuevos procedimientos analíticos antes de llevar a cabo el análisis.
4.3. Toma de muestra o muestreo

 Plan de muestreo: estrategia a seguir para garantizar que los resultados


obtenidos reflejen la realidad del material analizado.

 Características que ha de cumplir la muestra:

 ser representativa del material a analizar.


 ser homogénea, lo que significa que debe ser igual en todas sus
partes.

Se reduce el error en los resultados


4.4. Tratamiento de la muestra

Son escasos los problemas que se resuelven sin necesidad de tratamiento


de la muestra.

Lo habitual, es que la muestra necesite algún tipo de tratamiento, con el fin


de:

1. Preparar la forma y tamaño de la muestra, así como la concentración del


analito, más adecuada para la técnica analítica seleccionada.

2. Eliminar interferencias matriciales.


CONSIDERACIONES IMPORTANTES DURANTE LA
ETAPA DE PREPARACIÓN DE MUESTRA

1) La preparación de la muestra no puede implicar pérdidas de analito, ni


tampoco contaminaciones.

2) Se debe transformar el analito en la mejor forma química para el método


analítico seleccionado.

3) Si es necesario, se eliminarán las interferencias de la matriz, mejorando


así la selectividad del método.

4) No se deben introducir nuevas interferencias.

5) Debe considerarse la dilución o preconcentración del analito, de manera


que se halle en el intervalo de linealidad del método seleccionado.
Para la mayoría de las técnicas analíticas: MUESTRA EN ESTADO LÍQUIDO

Si la muestra es sólida
Si el análisis no Almacenamiento:
Molienda: Disminución tamaño va a ser inmediato luz, To, tipo de recipientes…
de partícula
Pilón

Mortero

“Liofilización previa”

Si la muestra es líquida

Evaporación del Si el analito es un gas disuelto en un líquido


disolvente
Doble recipiente sellado
para su almacenamiento
EPA: Environmental
Protection Agency
PTFE: politetrafluoroetileno (Teflón)
MUESTRA EN ESTADO LÍQUIDO

Obtención de la Preparación de la
Elección del método
muestra muestra

Extracción del analito ¿Se encuentra el analito


a una fase líquida
No disuelto?

¿Es mensurable la
propiedad analítica?

Agitación Centrifugación Decantación Recogemos el líquido


el sobrenadante
Disolvente
(H2O, EtOH, Líquido
MeOH) Suspensión sobrenadante
del sólido
en el Residuo Residuo
Muestra disolvente sólido sólido
sólida
Determinación del AAS en productos farmacéuticos mediante volumetría ácido-
base

Trituración del
fármaco y disolución
en etanol

En ocasiones, se requieren condiciones más enérgicas para la


extracción del analito a la fase líquida:

Disoluciones acuosas de:


- ácidos fuertes
- bases fuertes
- agentes oxidantes
- agentes reductores
- combinaciones de reactivos

Aplicación de energía externa:


- microondas
- ultrasonidos…
Obtención de la Preparación de la
Elección del método
muestra muestra

Extracción del analito ¿Se encuentra el analito


a la fase líquida
No disuelto?

¿Es mensurable la
Cambio de la forma propiedad analítica?
química del analito
No
Especie fluorescente Sí
Eliminar interferencias si
las hubiere

Ej. Sulfonamida

MÉTODOS DE SEPARACIÓN
Adicionamos reactivos (para la determinación
mediante fluorimetría)
DEFINICIÓN DE RÉPLICAS DE UNA MUESTRA

El proceso de medida debe llevarse a cabo con varias alícuotas de muestra,


todas ellas idénticas entre sí.

1 mL 110 mg/dL
Finalidad

1. Establecer el rango
1 mL 109,6 mg/dL de variabilidad del
análisis.
2. Evitar un error grave

1 mL 187,5 mg/dL
LA INCERTIDUMBRE
ES TAN
IMPORTANTE
COMO LA MEDIDA
1mL 110,3 mg/dL MISMA

X ± SD
4.5. Proceso de medida
La mayoría de los métodos necesitan de disoluciones estándar o patrón

VOLUMETRÍAS: se mide la cantidad de equivalentes químicos de valorante


en el punto final de la valoración.

Señal analítica = K x CA K= constante de proporcionalidad


CA= concentración de analito

Disolución patrón Disolución problema

CA = 80 mg/dL CA = ?
S = 0,199 S = 0,261

0,199 = K 80 0,261 = 0,0025 CA


K = 0,0025 dL/mg CA = 104,4 mg/dL
4.6. Tratamiento de los datos a través de ecuaciones de calibración
Curva de calibración con patrones externos
0.6
Concentración, Señal analítica
mg/dl 0.5
0 0,001

Señal analítica
0.4
40 0,101
80 0,199 0.3

120 0,303 0.2


160 0,401
0.1
200 0,498
0.0
0 50 100 150 200 250

Concentración, ppm
mg/dl

Señal analítica = ordenada origen + K x CA

Señal analítica = 0,00129 + 0,0024 x CA


CÁLCULO DE CA EN LA MUESTRA A TRAVÉS DE LA CURVA DE CALIBRADO

0.6 Señal analítica = 0,0013 + 0,0024 x CA

0.5
0,261 = 0,0013 + 0,0024 x CA
Señal analítica

0.4

0.3 CA = 108,2 mg/dL


0.2

0.1
Aplicación de factores de
0.0 dilución ó preconcentración,
0 50 100 150 200 250 si procede
Concentración, ppm
mg/dl

El método de calibración frente a patrones externos es válido si una determinada


CA tanto en la muestra como en la disolución estándar proporciona la misma
respuesta analítica.
Si las respuestas analíticas para un mismo valor de CA en la disolución
estándar y en la muestra son diferentes:

Método del estándar interno Método de adiciones estándar

El patrón interno es una especie de referencia (R), Se agregan cantidades conocidas de analito
con propiedades químicas y físicas parecidas a la muestra
a las del analito (A)

SA/SR SA

CA CA añadida a la muestra

Concentración de analito en la muestra


4.7. Evaluación de los resultados, informe y conclusiones

Los resultados han de ser evaluados por estimación de su fiabilidad.

El informe dirigido al solicitante del análisis ha de:


1. Indicar claramente los resultados
2. Las condiciones experimentales empleadas
3. Limitaciones concretas de la técnica analítica empleada

1. Concentración de As en orina
glucosa obtenida:
X ± SD 1. ND (no detectado)
2. Técnica 2. Espectrometría de absorción atómica
espectrofotométrica … con atomización electrotérmica (ETAAS)
3. LD (Límite de detección): 50 ppt
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ…
Conclusiones
El analista puede o no implicarse en lo que se vaya a hacer con su
información.
Como mínimo debería asegurarse que las conclusiones que se extraigan de
sus datos sean coherentes con los mismos.

1. Concentración de glucosa:
520 ± 1 mg/dL
1. Técnica espectrofotométrica …
Ingreso hospitalario del individuo
2. Intervalo de linealidad,
LD, LQ…

1. Concentración de As en orina:
403 ± 2 ng/L Envenenamiento crónico del individuo
2. Técnica HG-AAS
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ…
Obtención de la Preparación de la
Elección del método
muestra muestra

Extracción del analito ¿Se encuentra el analito


a la fase líquida
No disuelto?

¿Es mensurable la
Cambio de la forma propiedad analítica?
química del analito
No

Eliminar interferencias si
las hubiere
Estimar la fiabilidad
de los resultados Medir la propiedad
Calcular los resultados
analítica

Informe Conclusiones