You are on page 1of 2

pHix

pHix
Buffer de Fosfatos Concentrado
Buffer de Fosfatos Concentrado
Para usarse como un buffer salino en ensayos de Hemaglutinación para la
detección de anticuerpos o para Capture®.
Para usarse como un buffer salino en ensayos de
Hemaglutinación para la detección de anticuerpos o para
Capture®.

No Contiene conservadores
No lo utilice si esta marcadamente
No existe estándar de potencia US
turbio

Immucor, Inc.
Norcross, GA 30071 USA
USO:
El Buffer de Fosfatos concentrado, se utiliza como un buffer El Buffer Concentrado de Fosfatos pHix debe ser una
salino en los ensayos de hemaglutinación para la detección solución clara e incolora con o sin cristales incoloros. No
de anticuerpos o para Capture. utilice el pHix si muestra turbidez o si ha desarrollado algún
color. El cambio en la turbidez o color puede indicar
RESUMEN DE LA PRUEBA: contaminación.
Varios factores afectan la eficiencia con los anticuerpos
unidos a antígenos. Uno de estos factores es el pH del No existe un estándar de potencia U.S.
medio de prueba. Se puede estimular la disociación de los
anticuerpos y sus antígenos haciendo a este medio, muy PRECAUCIONES:
ácido ó muy alcalino. Para uso de diagnóstico in-vitro.

Barnes mostró que la unión del anti-D se disminuyó No congelar. No se recomienda refrigerarse.
significativamente cuando el pH del medio de prueba
estaba por debajo de 6.4 o por arriba de 8.4.1 En contraste, No contiene conservadores. Manéjelo con especial
otros investigadores han mostrado que los anticuerpos para cuidado para evitar contaminación microbiana. La
los antígenos M y P reaccionan mejor a un pH de 6.0 o 6.5.2,3 contaminación causará un efecto adverso en el
Bruce et al mostró que algunos ejemplos de anti-D, -S, -s, - funcionamiento del producto durante su vida útil. No utilice
Fya y –Jka no reaccionan o lo hacen débilmente en pruebas reactivos contaminados. No lo utilice si ha llegado a su
de detección de anticuerpos mediante hemaglutinación fecha de caducidad. No utilice frascos con fugas. No
que emplean salina con un pH de 6.5 o menos.4 Estos utilice frascos sin etiquetar.
autores sugieren que los ensayos de hemaglutinación para
la detección de anticuerpos utilizan salina a un pH de 7.0- No le adicione agua destilada o desionizada. El agua
7.2. tratada con pHix no será isotónica, por lo tanto no se
puede utilizar en ensayos de hemaglutinación o de
Rolih et al5 mostraron que la salina acidificada altera los adherencia eritrocitaria en fase sólida.
resultados de los ensayos de adherencia eritrocitaria en
fase sólida. Las reacciones verdaderamente positivas PREPARACIÓN Y RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA:
disminuyeron su fuerza y se presento un incremento No se requiere de una preparación especial de las
concomitante en los resultados falsos positivos. Estos autores muestras del paciente o donador. Recolecte las muestras
mostraron que tales resultados no solo se debían a una mediante métodos de rutina para obtener suero/plasma,
disminución de la unión del anticuerpo sino también a la eritrocitos o plaquetas para pruebas de detección de
pérdida de reactivo de membranas eritrocitarias unidas a la anticuerpos o antígenos. Consulte las instrucciones de uso
superficie sólida. Los mejores resultados se obtuvieron en de la prueba de antígeno o de los reactivos para la
sistemas de prueba de fase sólida en lo que se utilizó un detección de anticuerpos empleadas para determinar las
buffer salino a un pH de 7.0-7.5. restricciones de la toma de muestra.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA: PROCEDIMIENTO:


El pHix es una solución concentrada de sales disueltas Reactivo Proporcionado: pHix frasco de 200 mL, listo para
monopotásicas y dipotásicas. Un frasco (aproximadamente utilizarse.
200 mL) del concentrado se adiciona a 20 L de solución
salina isotónica no regulada para obtener un pH de 6.9-7.2. Materiales Adicionales Requeridos:
La salina regulada así preparada esta lista para usarse en 1. 20 litros de Solución Salina Isotónica no regulada
pruebas serológicas como ensayos de hemaglutinación o diseñada para uso en Bancos de Sangre.
ensayos de adherencia eritrocitaria en fase sólida, donde 2. Papel pH capaz de leer pH de 6.5 ó 7.5 o bien
se requiere mantener un pH en el medio. El pHix se potenciómetro calibrado para estándares altos en
recomienda para regular el pH de las salinas no reguladas sales.
empleadas en los ensayos de adherencia eritrocitaria en 3. Reactivos y muestras de pacientes y/o donador
fase sólida Capture-R, Capture-P, Capture-CMV y Capture- requeridos para la detección de anticuerpos o
S. antígeno.

REACTIVO: Frasco con 200 mL. MÉTODO DE PREPARACIÓN:


pHix: solución concentrada de sales monopotásicas y 1. Observe el Buffer para evidenciar cristalización. Si los
dipotásicas de fosfatos disueltas. Almacene los frascos a cristales están presentes en el frasco, caliente el
temperatura ambiente (18-30 °C). Almacenarlo en concentrado a 35-40 °C hasta que se hayan disueltos.
refrigeración puede ocasionar la precipitación y 2. Adicione el contenido del frasco a 20 litros de salina no
cristalización de las sales. El material que ha sido refrigerado regulada. Mezcle suavemente durante 1 minuto.
o muestra evidencia de cristalización se puede calentar de 3. Cheque el pH de la salina. Después de la adición del
35-40 °C para facilitar la solubilización. buffer se debe registrar un pH de 6.9 a 7.2. Si el pH es
menor de 6.5 o mayor de 7.5 no utilice la salina BIBLIOGRAFÍA:
regulada. 1. Barnes AE. The specificity of pH and ionic stregth
4. La fecha de caducidad de la salina regulada es de 31 effects on the kinetics of the Rh(D)-anti-Rh (D) systems.
días a partir de la fecha de preparación o de la fecha J Immunol 1966;96:854-64.
de caducidad designada por el fabricante de la 2. Judd WJ. A pH dependent autoagglutinin with anti-P
salina. Indicar en el frasco contenedor de la salina que specificity. Transfusion 1975;15:375-6.
el contenido se ha regulado. Escriba el pH y la fecha 3. Beattie KM, Zuelzer WW. The frecuency and properties
de caducidad en el contenedor de la salina. No la of pH dependent anti-M. Transfusion 1965;5:322-6.
utilice después de esta fecha. 4. Bruce M, Watt AH, Hare W et al. A serious source of
5. La salina regulada esta ahora lista para utilizarse en error in antiglobulin testing. Transfusion 1986;26:177-81.
ensayos de hemaglutinación o de adherencia 5. Rolih S. Thomas R, Fisher R, Talbot J. Solid phase test
eritrocitaria en fase sólida. errors due to acidic or unbuffered salines.
Immunohematology, 1993;9:15-9.
LIMITACIONES:
Pueden ocurrir resultados de prueba erróneos por
contaminación química o bacteriana de la salina regulada.
Es más, se pueden presentar errores si el procedimiento en
el cual se ha utilizado la salina regulada no se esta llevando
a cabo correctamente.

La salina regulada con pHix no debe causar cambios en la


apariencia de los eritrocitos o plaquetas o causar lisis de
estos elementos celulares. La salina regulada que cause
cambios en suero/plasma o elementos celulares no se debe
de utilizar.

El pHix no esta hecho para adicionarse a agua destilada o


desionizada. El agua tratada con pHix causará hemólisis de
los elementos celulares debido a que no es isotónica. Esto
ocasionará resultados falsos positivos o negativos en
ensayos de hemaglutinación o en resultados de prueba en
fase sólida.

La salina regulada con pHix no se debe de utilizar para


preparar soluciones enzimáticas de ficina o papaína, ya
que estas proteasas requieren de un ambiente ácido para
una actividad óptima.

Los reactivos de grupo sanguíneo preparados en diluyentes


ácidos pueden producir reacciones inesperadas con
eritrocitos suspendidos en salina regulada a un pH de 6.9-
7.2. En particular, los reactivos anti-B monoclonales
preparados a partir de líneas celulares ES4 se puede
preparar en un diluyente con un pH de 6.0 para disminuir la
detección del antígeno B adquirido. La línea celular ES4 es
utilizada por varios fabricantes como su fuente de Anti-B
monoclonal. Cada fabricante ha formulado un diluyente
adecuado para diluir su anticuerpo. Es posible que la salina
regulada a un pH de 6.9-7.2, cuando se utiliza para
preparar suspensiones de eritrocitos, anule los efectos del
buffer ácido en los diluyentes fabricados y de este modo
cambian las características de la reacción del Anti-B. Revise
el instructivo de uso del fabricante para ver si el Anti-B
monoclonal del fabricante se puede usar con eritrocitos Fabricado en USA por: Immucor, Inc., 3130 Gateway Drive, Norcross, GA
suspendidos en salina regulada. 30071.

CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO:


La habilidad del pHix para regular soluciones normales de Importado por: Laboratorios LICON, S.A.
salina a un pH de 6.9-7.2 se ha demostrado en pruebas Camino Antiguo a Santa Mónica No. 7, Col. Jardines de Santa Mónica,
internas. Los estudios comparativos de reactividad y Tlalnepantla, C.P. 54050, Estado de México, México (Domicilio Fiscal).
potencia llevados a cabo con anticuerpos seleccionados
al azar han demostrado que un pH neutral de Acondicionado y Distribuido por: Laboratorios LICON, S.A.
Av. Industria Eléctrica de México No. 3, Col. Xocoyahualco, Tlalnepantla,
aproximadamente 7.0 es el adecuado para la detección
C.P. 54080, Estado de México, México.
del anticuerpo. 4,5
Tel.: (55) 5362-0299
Fax: (55) 5362-1792
www.licon.com.mx

Rev.: 07/09/2015 - IN-270