"AÑO DE LA LUCHA CONTRA LA

CORRUPCIÓN E IMPUNIDAD"

Práctica N°05
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS
Docente:
Jesús Ruiz Baca
Alumno:
Muñoz Cochayalle Fernando
Curso:
Bioquímica Vegetal

PERÚ-2019
 DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS
I-. INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son compuestos orgánicos, formados primordialmente por carbono,
hidrógeno y oxígeno. Se encuentran en muchos productos naturales y son una de las fuentes
principales de energía para los organismos quimiotróficos.
La unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacáridos, estos son
polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas.
Los monosacáridos se combinan, con la pérdida de moléculas de agua uniéndose mediante
enlaces glicosídicos, formándose oligosacáridos y polisacáridos.
En presencia de ácidos no oxidantes, los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el
monosacárido es una pentosa o hidróximetilfurfural, si el monosacárido es una hexosa.
Cuando la reacción de deshidratación se efectúa con la ayuda del ácido sulfúrico concentrado
y el color se desarrolla con alfa naftol, la prueba se denomina reacción de Molisch.
Otra prueba basada en la formación de furfural es la prueba de Seliwanoff. Esta prueba
consiste en la reacción del resorcinol (1,3 dihidróxibenceno) con las cetosas deshidratadas
por el HCI concentrado. Se observa la formación de un complejo rojo.
La prueba de Bial se utiliza para identificar pentosas y consiste en calentar la pentosa con
HCI conc. se forma furfural que se condensa con orcinol en presencia de iones férricos para
dar un color verde azuloso.
Prueba para azúcares reductores: Las propiedades reductoras de los azúcares dependen de
la presencia de grupos aldehídos o cetonas, reales o potenciales. Al calentar ciertas
soluciones de azúcares, en presencia de determinados iones metálicos, el grupo carbonilo se
oxida y el ión metálico se reduce.
Algunas de éstas pruebas son: La de Benedict, que identifica carbohidratos en general y es
positiva cuando se observa la aparición de un precipitado amarillo, anaranjado o rojo ladrillo;
y la prueba de Barfoed, que es similar a la de Benedict, excepto que el reactivo es ligeramente
ácido o sirve para detectar la presencia de monosacáridos.
Los polisacáridos son cadenas muy largas o polímeros de monosacáridos, lineales o
ramificados. Se dividen en heteropolisacáridos y homopolisacáridos dependiendo si la
forman distintos o iguales unidades simples.
Algunos polisacáridos de reserva importante lo son el almidón formado por dos
constituyentes: amilosa y amilopectina; y el glucógeno llamado “almidón animal”, se
encuentra en el hígado y músculos.
II. OBJETIVOS
 Reconocer los diferentes tipos de carbohidratos
 Identificar la presencia de azúcares reductores provenientes de la hidrólisis ácida de
muestras de carbohidratos.

III. EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS

 EQUIPOS
 Balanza
 Baño maría

 MATERIALES Y REACTIVO
PROPORCIONADO POR EL ALUMNO
 Una papa
 5gr de almidón
PROPORCIONADO POR EL LABORATORIO
 Solución de glucosa 1%
 Solución de sacarosa 1%
 Solución de maltosa 1%
 Solución de almidón 1%
 Solución de fructosa 1%
 Solución alcohólica de Alfa naftol 5%
 Ácido sulfúrico Q.P.
 Reactivo de Bradford
 Ácido clorhídrico 1,5%
 Solución de Hidróxido de potasio 1%
 Solución de Fehling “A”
 Solución de Fehling “B”
 Tubos de ensayo
 Pipetas de 1,5 y 10 ml
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Reacción de selivanoff:
1er tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Fructosa 1%
2do tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Glucosa 1%
3er tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Sacarosa 1%
4to tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Maltosa 1%
Posteriormente se le agrego 5.0ml de Rx. Selivanoff a los 4 tubos

Reacción de Barfoed:
1er tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Fructosa 1%
2do tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Glucosa 1%
3er tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Sacarosa 1%
4to tubo:
Se echó 1.0ml de sol. Maltosa 1%
Posteriormente se le agrego 5.0ml de Rx. Barfoed a los 4 tubos

Acción de los alcalis sobre los carbohidratos:

Se trituró en un mortero la mitad de la papa sin cáscara, luego se agregó 10 ml de
agua, se mezcló y decanto en un vaso de precipitación.
Se utilizó dos tubos de ensayo, a uno de ellos se colocó 2 ml del sobrenadante y en el
otro se agregó 2 ml de solución de almidón; se añadió 2 ml de HCl a cada uno.
 Se calentó los tubos de ensayo en baño maría hasta que hierva durante unos 15
minutos, se dejó enfriar y se adiciono 5 gotas de KOH.
Luego se agregó 1 ml de fehling A y B y luego se volvió a someter a ebullición durante
5 minutos.

V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

 RESULTADOS

TUBOS I II III IV
Fructuosa con + -
H2SO4
Rx. Selivanoff + + - -
Rx. Barfoed + + - -

 DISCUSIÓN
En la práctica de laboratorio, mediante la reacción de Benedict pudimos identificar
azúcares reductores y comprobar que la reducción que se lleva a cabo es por la
presencia del grupo aldehído.
Se debe tener muy claras las estructuras de los carbohidratos y la función de cada uno
de los reactivos para poder saber cuál reaccionará y cuál no; como en el caso de la
sacarosa con el reactivo de Benedict que arrojó un resultado positivo pero que
teóricamente y mirando su estructura daba negativo ya que ésta carece de carbonos
anoméricos libres.

VI. CONCLUSIONES
 Se reconoció los diferentes tipos de carbohidratos.
 Se identificó la presencia de azucares reductores provenientes de la hidrolísis acida
de muestras de carbohidratos.
 Los ácidos clorhídricos vuelven derivados furfurilicos a los monosacáridos.
 El cambio de coloración rojizo en la prueba de polisacáridos para reconocerlos
mediante la prueba de reducción.
VII. CUESTIONARIO
1-. ¿Cuál de las pruebas permite diferenciar aldosas de cetosas? Fundamente su
respuesta
La prueba de Seliwanoff es una prueba química que se usa para distinguir aldosas y cetosas.
Los azúcares son distinguidos a través de su función como cetona o aldehído. Si el azúcar
contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta
prueba está basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido
que las aldosas.
2. ¿El almidón ingerido por el ser humano sufre el mismo tipo de hidrólisis ácida
realizada en la práctica? ¿Cómo se hidroliza?
El almidón puede ser hidrolizado de dos formas: por acción d elos acidos y enzimáticamente.
La α amilasa hidroliza o α 1,4 glucan en polisacáridos conteniendo tres o más unidades D-
glucosa en lazadas 1-4 y actuando al azar sobre almidon, glucógeno, polisacáridos
relacionados y oligosacáridos. La β amilasa o β 1-4 glucan maltohidrolasa hidroliza los
enlaces α -1,4- glucan en polisacáridos de modo que se separa sucesivas unidades maltosa de
los finales no reductores de las cadenas. Actúan sobre el almidón, glucógeno, polisacáridos
relacionados y oligosacáridos produciendo beta maltosa por una inversión. La hidrolisis acida
por acción del HCl a 100°C produce una hidrolisis total del almidon y forma glucosa, maltosa
e isomaltosa. Se produce un rompimiento total de los enlaces que mantienen unidos a los
monómeros del almidón.

3. Cuáles son las unidades monoméricas de:

 Lactosa : Glucosa + Galactosa

 Maltosa: Glucosa + Glucosa
 Sacarosa: Glucosa + Fructuosa
 Celulosa: B-D-Glucosa

4. Representa la unión de moléculas en la formación del almidón, glucógeno y celulosa.

Almidón Glucógeno
 Celulosa

5. ¿De los siguientes azucares? ¿Cuál no es reductor? ¿Por qué?

 Glucosa, si es reductor por ser un monosacárido

 Lactosa, no es reductor por ser un disacárido
 Sacarosa, no es reductor por ser un disacárido
 Fructuosa, si es un reductor por ser un monosacárido

La sacarosa no es reductor, porque son aquellos que se unen por enlaces glucosilicos de tipo
alfa o beta cuando dos monosacáridos iguales o diferentes se unen y forma disacárido, estos
por condensación liberan una molécula de agua y son azucares no reductores ya que el grupo
hidroxilo (OH) de una hexosa se combina con el grupo aldehído (CHO) de otro hexosa
liberando una molécula de agua, el licor de feeling no tiene efecto sobre ellos los cual los
determina como azucares no reductores.

VIII. ANEXOS

 Reacción de Barfoed
Primero, llenamos los 4 tubos de ensayos con los diferentes reactivos y las cantidades
adecuadas tal cual se observa en el cuadro anterior.
Luego, mezclamos bien y lo sometimos al baño maría hirviente por espacio de 5
minutos.

Al retirarlo de agua hirviendo, aparecieron las reacciones positivas (precipitado rojo

naranja)
Reacción de selivanoff

 Tubo 1. observo que su reacción es positiva porque su decoloración es rojo

 Tubo 2. observo que su reacción es negativo
 Tubo 3. observo que su reacción es positiva poque su decoloración es rojo

Reacción de la fructosa con el H2SO4

 Tubo 1. Observo que la solución de su reacción es negativa, debido a la

evidencia de la ausencia de azucares.

 Tubo 2. Observo que la solución de su reacción es positiva, debido que

cambio de color, porque la condensación de los furfurales está formado por
ácido alfanafol.
IX. BIBLIOGRAFÍA

 Villavicencio, M. 1993. Bioquímica. A&B S.A. Editores, Lima - Perú

 Ordoñez Quezada, R. (2014). Generalidades de los carbohidratos. Recuperado de:

https://es.slideshare.net/richardordonez940/bioquimica-practica-4

 Ernesto, J. 2010. Bioquímica: Carbohidratos, San Juan de Pasto.