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Si usted tiene un residuo líquido a tratar de 0.5 m 3/s que contiene 500 mg/L de
pesticida y requiere abatir la concentración de éste en un 95%:
a) ¿Cuál debe ser la tasa de dilución y el volumen de la laguna de aireación?
b) ¿Cuál es la masa microbiana en Ton producida por día de operación?
Considere que Yx/s de 0.6 g X/g S.
4. La bacteria Pseudomona sp. tiene una tasa máxima específica de crecimiento
de 0.4 h-1, cuando es cultivada en acetato. La constante de saturación usando
este sustrato es 1.3 g/L, y el coeficiente de rendimiento de células en acetato es
de 0.46 g cel/ g acetato. Si se opera este sistema como un quimiostato, con un s 0
de 38 g/L, realice el siguiente análisis:
a) ¿Cuál es la tasa de dilución crítica?
b) ¿Cuál es la concentración de células cuando la tasa de dilución es la mitad de la
crítica?
c) ¿Cuál es la concentración de sustrato cuando la D es un 80% de la crítica?
d) ¿Cuál es la productividad celular a la D en c)?
e) Encuentre Dópt para la productividad celular, ¿qué porcentaje de D crítico es éste?
5. Un biorreactor continuo se opera con un volumen de trabajo de 120 L y un flujo
de alimentación de 20 L/h. La población bacteriana presenta un tiempo de
duplicación mínimo de 3.15067 h y un Ks de 1 g/L. El rendimiento expresado en g
de células por g de sustrato se ha estimado en 0.28. Ensayos preliminares hacen
recomendable trabajar a una velocidad de dilución igual al 82% del valor crítico.
a) ¿Cuál es la velocidad específica máxima, μmax?
b) ¿Cuál es la concentración de sustrato en la alimentación?
c) ¿Cuál es la concentración de sustrato en la descarga?
d) ¿Cuál es la concentración celular en estado estacionario?
e) ¿Cómo cambian las respuestas b) y c) si el flujo de alimentación se disminuye a
15 L/h?
6. La Pseudomonas sp. tiene un tiempo de duplicación de masa de 2.4 h cuando
crece en acetato. La constante de saturación usando este sustrato es de 1.3 g/L y
el rendimiento celular en acetato es 0.6 g de células/g acetato. Si se opera en un
Quimiostato con una corriente de alimentación que contiene 38 g/L de acetato,
encuentre:
a) La concentración celular cuando la tasa de dilución es un medio de la máxima
b) La concentración del sustrato cuanto la tasa de dilución es 0.8 Dmax
c) La máxima tasa de dilución.
d) La productividad celular a 0.8 Dmax.
7. Un fermentador tanque agitado de 5 m3 opera en continuo con una concentración
de sustrato alimentado de 20 kg/m3. El microorganismo cultivado en el reactor
presenta las siguientes características: μmax=0.45 h-1, Ks=0.8 kg/m3, Yx/s=0.55 kg/kg.
Se supone que se cumple la ecuación de Monod. Calcule:
a) ¿Qué caudal de alimentación se necesita para alcanzar una conversión de
sustrato del 90%?
b) ¿Cuál es la producción de biomasa correspondiente a una conversión de sustrato
del 90% en comparación con la máxima posible?
8. En la siguiente tabla se presentan los datos obtenidos en un proceso de
fermentación llevado a cabo en un bio-reactor continuo de tanque agitado operado
en estado estacionario a varias velocidades de dilución.
a) Determinar Ks y μmax.
b) Dada una concentración de sustrato a la entrada del reactor de 120 g/L y
asumiendo una alimentación estéril, calcular el rendimiento de sustrato.
c) Determinar el caudal de alimentación que podrá ser procesado en un reactor
similar de 100 m3 en estado estacionario, si se pretende convertir el 80% de una
alimentación estéril que contiene 120 g/L de sustrato.
9. Un quimiostato simple de 5 litros de volumen útil, presenta algunos problemas de
diseño que ocasionan una agitación imperfecta. El equipo se va a utilizar para
cultivar levadura con μmax=0.48 h-1, Ks=0.072 g/L. El flujo de alimentación será de
1.1 L/h, con una concentración de nutriente limitante de 6 g/L, y Y x/s de 0.43 g/g. Se
supone que un 35% del flujo de alimentación no pasa por el fermentador, sino que
se une a la corriente de salida y que el resto ingresa al quimiostato. Determinar Fmax
(Dopt, Xopt), μ, y s a la salida del fermentador.
10. En el desarrollo de una tecnología microbiana para tratar un efluente industrial
se requiere de un quimiostato de 120 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20
L/h. La población presenta un μmax de 0.22 h-1, Ks de 1000 ppm y Yx/s de 0.28 g/g.
Los ensayos preliminares hacen recomendable trabajar a D = 0.82D c. Determinar la
concentración de sustrato en la alimentación y en la descarga y también la
concentración celular en estado estacionario.
11. En un quimiostato de 500 L se cultiva un microorganismo bio-lixiviante que en
las condiciones de operación presenta un μmax de 0.17 h-1, un Ks de 1.2 g/L y un
rendimiento de sustrato limitante de 0.019 g/g. Se sabe que a una tasa de dilución
de 0.08 h-1 se obtiene una concentración celular de 0.9 g/L. Calcule la concentración
de alimentación de nutriente limitante, la productividad máxima en células, a que
tasa de dilución se produce ésta y con qué concentración celular.
12. En el desarrollo de una tecnología microbiana para tratar un efluente industrial
se requiere de un quimiostato de 100 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20
L/h. La población presenta un μmax de 0.26 h-1, Ks de 500 ppm y Yx/s de 0.28 g/g. Los
ensayos preliminares hacen recomendable trabajar a D=0.82*Dc. Determinar la
concentración de sustrato en la alimentación y en la descarga y también la
concentración celular en estado estacionario.
13. La velocidad de crecimiento de E. coli en un medio sintético puede ser
expresada por la cinética de Mondon como: μmax=0.935 h-1, Ks = 0.71 g/L. Se
cultivará E. coli en estado estacionario CSTF trabajando un volumen de 10 L con
una velocidad de flujo de 7 L/h. La concentración inicial es 10 g/L y el rendimiento
celular constante es 0.6. La corriente de alimentación es estéril.
a) ¿Cuál sería el tiempo de duplicación y la velocidad de división de las células en
el CSTF?
b) ¿Cuál sería la concentración de células y sustrato fuera del tanque?
14. Si se tiene un microorganismo que sigue una cinética del tipo Monod con los
siguientes parámetros: μmax=0.7 h-1, Ks= 5 g/L, Yx/s de 0.65. El flujo de alimentación
es de 500 L/h con 85 g/L de sustrato.
a) Si se utilizan un fermentador que opera en forma continua y perfectamente
agitada, ¿de qué tamaño debe ser este reactor si opera en forma óptima?
b) ¿Cuál es la conversión de sustrato?
c) ¿Cuál es la concentración de biomasa a la salida?
d) Indique los supuestos aplicados.
15. Se tiene un fermentador para producir biomasa. El volumen del reactor es de
0.5 m3. El sistema está siendo operado de tal modo que el fermentador sólo se
produce el crecimiento de biomasa. La concentración de sustrato en la alimentación
es de 10 kg/m3. Los parámetros cinéticos y de recuperación son:
Yx/s=0.5 kg/kg, Ks=1.0 kg/m3, μmax=0.12 h-1, ms=0.025 kg/kg h.
Asumiendo que la síntesis de producto es despreciable. Determine:
a) Concentración de biomasa a la salida del primer fermentador, si se sabe que la
conversión de sustrato en este fermentador es del 40%.
b) ¿Es significativo el término de mantención y por qué?
16. Se tiene un microorganismo que sigue una cinética del tipo Monod. Con los
siguientes parámetros: μmax=0.45 h-1, Ks=0.8 g/L, Yx/s=0.55. Se utiliza un
fermentador de 5 m3 operado en forma continua con una alimentación a una
concentración de 20 kg/ m3.
a) ¿Cuál es el flujo requerido para obtener una conversión del 90%? Compare con
condiciones óptimas de operación.
b) ¿Cuál es la productividad de biomasa cuando se ha convertido el 90% de
sustrato? Compárela con la máxima posible.
Mencione todos los supuestos considerados en sus cálculos.
17. En la tabla que se muestra a continuación se presentan los datos obtenidos en
un proceso de fermentación, llevado a cabo en un biorreactor continúo de tanque
agitado operado en estado estacionario a varias velocidades de dilución.
x(g/L) 5.96 5.98 5.99 6.00 6.01
s(g/L) 0.57 0.33 0.23 0.14 0.11
D (h-1) 0.38 0.33 0.29 0.235 0.232
Determinar las condiciones de salida de cada etapa si F=35 L/h, F’=3 L/h, s 0 es de
20 g/L, s’0 es de 50 g/L, μmax=048 h-1; Yx/s=0.44 g/g e Yp/s=0.66 g/g.
1. Las condiciones de operación con que se lleva a cabo un cultivo por lote
alimentado con alimentación constante de una determinada bacteria se señalan a
continuación junto con algunos de sus principales parámetros:
V0: 59,983 L, μmax: 0.26 h-1, S: 6 g/L Ks: 50 mg/L, X0: 3 g/L, Yx/s: 0.5 (limitante), Vf:
80,000 L, F:1,250 L/h
Durante el cultivo se ha tomado una muestra que indica que la concentración celular
en ese momento es de 15-3 g/L. Podría Ud. ¿Cuántas cuantas horas faltan para el
término de la fermentación?
2. Se quiere diseñar un trabajo práctico de batch alimentado (BA). Si las condiciones
operativas deberán ser las siguientes: F(L/h)=constante, s(g/L)=constante, volumen
inicial=2 L, volumen de alimentación=2 L, tiempo de alimentación=6 horas.
a) Calcular la concentración del sustrato limitante en la alimentación.
b) Qué valor tendrá la velocidad específica de crecimiento a las 3 horas de
alimentación
Parámetros del batch: Yx/s=0.45 g sust/g biom μmax=0.40 h-1, X0=7.0 g/L, S0=0 (al
inicio de la alimentación).
Considere que no existe formación de producto y que el mantenimiento es nulo.
3. Lactobacillus casei son cultivadas en un fermentador que opera forma fed-batch,
en estado cuasiestacionario, con un flujo de alimentación de 4 m 3/h y una
concentración de sustrato en la alimentación de 80 kg/m3. Las características de
esta cepa son: μmax=0.35 h-1, Yx/s=0.23 kg biomasa/kg sustrato, Ks=0.15 kg/m3,
ms=0.135 kg/kg h (coeficiente de mantención). Al cabo de 6 horas de operación el
volumen de líquido en el bio-reactor es de 40 m 3. Determine la cantidad de biomasa
y sustrato en el bio-reactor al cabo de 6 horas de operación. Considere que la
concentración inicial de biomasa es despreciable. Indique todos los supuestos
aplicados.
4. Una empresa recientemente compró un nuevo microorganismo para producir un
producto P. Los datos cinéticos de este nuevo microorganismo son: μmax=0.3 h-1;
Ks=0.1 g/L; Yx/s=0.4 g b.s./g sustrato; Yp/x= 0.5 g P/g b.s h. Se sabe que la formación
de producto está directamente asociada a crecimiento. De acuerdo con la empresa
que distribuye el microorganismo, la mejor forma de operación es del tipo Fed-
Batch. Así, se le pide a usted determinar los siguientes puntos:
a) El tiempo después del cual usted puede comenzar a alimentar el biorreactor para
operar un cultivo Fed-batch en estado pseudo-estacionario. Suponga las siguientes
condiciones iniciales: S0=10 g/L; x0=0.5 g/L; p0=0.02 g/L.
b) Si las condiciones de operación recomendadas para un Fed-Batch en estado
pseudoestacionario son: F=85 L/h; V0=1000 L; s1=12 g/L, con F y s1 constantes,
calcular el tiempo de operación, la masa total de células y la masa total de producto
si el volumen máximo del reactor es de 3000 L.
c) ¿Qué pasaría si el reactor comenzara a alimentarse a un tiempo t=2.5 h después
de iniciar el sistema en discontinuo? ¿Cuál será el tiempo de transición? ¿Los
valores de X y P?
Alimentación exponencial
Las características de la bacteria cultivada son μmax= 0.4 h-1, y Ks = 0.01 g/L para el
nutriente limitante utilizado.
a) Determine el tipo de alimentación usado sabiendo que sf es constante.
b) Calcule las condiciones iniciales de concentración de sustrato y célula si el
volumen inicial era de 140 L.
2. Se tiene un fermentador operando en estado transitorio, donde la tasa específica
de crecimiento celular se describe mediante la ecuación de Monod. Se tiene como
objetivo conseguir 600 kg de células secas. Se pide para las siguientes condiciones:
Sf = 90 g/L constante, KS = 0.055 g/L, Yx/s = 0.44 gcel/ gsust, x0 = 6 g/L, μmax = 0.46
h-1, μ = 0.33 h-1 constante, V0 = 10,000 L.
a) Tiempo de alimentación en h.
b) Concentración de nutrientes limitantes en la alimentación en g/L.
c) Volumen final en el fermentador en L.
d) Valor de F a t = 0 h
e) El valor del flujo a la mitad del tiempo del proceso en L/h.
3. Un bio-reactor del tipo Fed Batch (lotes alimentados) se opera de tal forma que
la concentración de sustrato se mantenga constante durante la operación s=2 g/L.
Datos:
s0=20 g/L; x0= 2 g/L; V0=2000 L; μ =0.4 h-1; Yx/s=0.4 g/g
a) ¿Cuál es la concentración de células después de 4 horas de fermentación?
b) ¿Cuál es el volumen de fermentación después de 4 horas de operación?
c) Si se realizara una fermentación batch (por lotes) con la misma concentración
inicial, ¿cuál sería la concentración después de 4 horas de fermentación?
d) Compare sus respuestas a las preguntas formuladas en las letras a) y c) y
explique las diferencias.
4. Un bio-reactor es operado en la modalidad por lotes alimentados. Para la
fermentación se ocupará una cepa microbiana que tiene las siguientes
características:
μmax=0.6 h-1, Ks = 8 mg/L, Yx/s = 0.5 g. célula/g. sustrato.
La concentración de sustrato se mantendrá en 3 g/L durante la operación del cultivo
por lotes alimentado. Por lo tanto se ha optado por tener un flujo de alimentación
exponencial y una concentración de sustrato constante en la alimentación e igual a
23 g/L. Para efectos prácticos se puede considerar que μ = μmax si μ> 0.99 μmax. El
volumen inicial es de 2000 L y la concentración inicial de células es de 2 g/L.
Después de 6 h, desafortunadamente, se produce un desperfecto y se corta el flujo
de alimentación. Usted, como jefe de planta, decide que la fermentación continúe
en modalidad batch hasta que la concentración de sustrato (que es constantemente
medida) sea igual a 1 g/L.
a) ¿Cuál era la masa celular en el bio-reactor a las 6 horas de operación?
b) ¿Cuál era el volumen de fermentación a las 6 horas de operación?
c) ¿Cuál era la concentración de células a las 6 horas de operación?
d) ¿Por cuánto tiempo se prolongó la fermentación batch?
e) ¿Cuál era la concentración de células al término de la fermentación batch?
f) ¿Hasta qué concentración de sustrato se podría llegar de tal forma que todavía
las células sigan creciendo a μmax?
5. Un bio-reactor es operado en la modalidad por lotes alimentados. Para el
desarrollo de la fermentación se ocupará una cepa microbiana que tiene las
siguientes características fisiológicas:
μmax. = 0.4 h-1, Ks = 5 mg/L, Yx/s = 0.4 g. célula/g. sustrato
La concentración de sustrato se mantendrá en 2 g/L durante la operación del cultivo
por lotes alimentado. Por lo tanto se ha optado por tener un flujo de alimentación
exponencial y una concentración de sustrato constante en la alimentación e igual a
22 g/L. Para efectos prácticos se puede considerar que μ = μ max si μ > 0,99 μmax. El
volumen inicial es de 2000 L y la concentración inicial de células es de 2 g/L.
Después de 5 h, desafortunadamente, se produce un desperfecto y se corta el flujo
de alimentación. Usted, como jefe de planta decide que la fermentación continúe en
modalidad batch hasta que la concentración de sustrato (que es constantemente
medida) sea igual a 1 g/L.
a) ¿Cuál era la masa celular en el bio-reactor a las 5 horas de operación?
b) ¿Cuál era el volumen de fermentación a las 5 horas de operación?
c) ¿Cuál era la concentración de células a las 5 horas de operación?
d) ¿Por cuánto tiempo se prolongó la fermentación batch?
e) ¿Cuál era la concentración de células al término de la fermentación batch?
f) ¿Hasta qué concentración de sustrato se podría llegar de tal forma que todavía
las células sigan creciendo a μmax?
6. Se lleva a cabo un cultivo por lotes seguido por un cultivo por lotes alimentados
para la producción de biomasa, con alimentación exponencial. El volumen inicial de
fermentación es de 10 L, la concentración inicial de células es de 0.2 g/l, la
concentración inicial de sustrato es 12 g/l, el rendimiento de sustrato es de 0.46 g/g,
la velocidad específica máxima de crecimiento es 0.4 h -1, Ks=10 mg/L y la
concentración de sustrato en la alimentación es de 100 g/L.
Calcular:
a) El tiempo al que se inicia la alimentación del C.L.A., si en cultivo por lotes
alimentados se desea mantener una concentración de sustrato de 0.8 g/L.
b) Flujo del cultivo por lotes alimentados.
c) El tiempo total de fermentación (batch + C.L.A) y la concentración celular al
momento de alcanzar un volumen de 20 L.
7. Se quiere instalar un sistema de cultivo por lote alimentado en el cual se obtenga
un crecimiento exponencial a flujo constante y con una concentración del sustrato
limitante (glucosa) variable con el tiempo.
a) Determine el tiempo de alimentación y la masa de glucosa si el fermentador
inicialmente con 22 m3 de líquido se desea obtener 640 kg de biomasa seca a un
μ=05 h-1.
b) Volumen final en el fermentador.
Datos: x0: 8 g/L, Yx/s: 0.4, μmax: 0.62 h-1, F: 1 m3/h, Ks: 0.045 g/L.
Alimentación lineal