SOLUCIONES Y DETERMINACIÓN DE pH

Práctica 5. Determinación de pH y soluciones

amortiguadoras

OBJETIVOS

 Determinar el pH de diferentes sustancias y fluidos biológicos.

 Preparar correctamente una solución amortiguadora.
 Relacionar los cambios que se producen en una solución amortiguadora al
adicionar ácido o base fuerte.
 Reconocer la importancia de las soluciones amortiguadoras en los organismos
vivos.

INTRODUCCIÓN

El pH es un parámetro fundamental para el mantenimiento de los fluidos biológicos,

la actividad enzimática para llevar a cabo las reacciones bioquímicas, el cultivo de
microorganismos, para permitir la solubilidad de muchas sustancias en solución y es
una de las mediciones más comunes de laboratorio porque muchos procesos químicos
y biológicos dependen de esta variable.

El pH de una solución describe la acidez en relación con la concentración de iones

hidrógeno y tiene importancia vital para todos los organismos vivos. Por ejemplo
cambios en el pH de los líquidos corporales (sangre, orina, líquido cefalorraquídeo,
saliva, jugo gástrico, entre otros) producen cambios notables en procesos fisiológicos
que afectan el funcionamiento de las células.

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Todos los organismos vivos requieren regular la concentración de iones hidrógeno en

un margen estrecho de pH. Para ello utilizan soluciones amortiguadoras conocidas
como tampones o buffer. Un tampón es una solución acuosa de un ácido débil y su sal
o una base débil y su sal. La solución amortigua el pH porque el ácido débil reacciona
en cualquier cantidad de OH- agregado, mientras que la base reacciona con el H+
introducido. Esto impide que se perturbe el equilibrio químico del cual depende el pH
de la solución.

Específicamente, el pH de la sangre arterial es entre 7.35 y 7.45, una alteración en

equilibrio ácido-base ocasionada por enfermedades como la cetoacidosis diabética, la
acidosis láctica o por vómitos y la ingesta excesiva de HCO3- puede causar acidosis o
alcalosis, respectivamente que afectan el funcionamiento del ser vivo. Por esta razón,
en la sangre existen diferentes sistemas amortiguadores, que junto con los pulmones y
los riñones trabajan coordinadamente para mantener el pH sanguíneo dentro del valor
normal.

MATERIALES Y EQUIPOS

Tubos de ensayo (10)

Pipetas 5, 10 mL
Cinta indicadora
pH-metro

SOLUCIONES Y REACTIVOS
Solución de HCI 0.01N, 0.1 N
Soluciones de NaOH 0.01 N, 0.05 N, 0.1 N
Solución de CH3COOH 0.5 N
Solución de CH3COONa 0.5 N

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DESARROLLO EXPERIMENTAL

1. Mida el valor del pH de las siguientes sustancias y califíquelas como ácidas o

básicas (Tabla 10) utilizando la cinta indicadora de pH y el pH-metro

Tabla 11. Determinación de pH de diferentes sustancias y fluidos biológicos.

Sustancia pH pH
(cinta indicadora (pH-metro)
de pH)
Coca-Cola
Vive 100
Zumo de limón
Vinagre
Alkaseltzer
Leche
Orina
Saliva
Jabón de manos
Jugo de tomate
Agua
Sudor
Plasma

2. Sistemas amortiguadores

Para comparar el funcionamiento de sistemas amortiguadores presentes en algunos

fluidos biológicos, un antiácido, agua y solución salina se preparan 12 muestras de
acuerdo a la tabla 12 y realice las anotaciones respectivas.

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 SOLUCIONES Y DETERMINACIÓN DE pH

Tabla 12. Efecto de la adición de un ácido y una base fuerte sobre la orina, el suero
sanguíneo, un antiácido, agua y solución salina.

Muestra NaOH HCl pH

2.5 mL 0,01N 0,01N
Orina -- --
Orina 0.5 mL
Orina 0.5 mL
Suero -- --
Suero 0.5 mL
Suero 0.5 mL
Solución salina -- --
Solución salina 0.5 mL
Solución salina 0.5 mL
Agua destilada -- --
Agua destilada 0.5 mL
Agua destilada 0.5 mL
Antiácido -- --
Antiácido 0.5 mL
Antiácido 0.5 mL

3. Preparación de una solución buffer

Prepare 50 mL de una solución de ácido acético 0.5 N
Lea el pH de la solución de ácido acético: ______________________
Prepare 50 mL de acetato de sodio 0.5 N
Lea el pH de la solución de acetato de sodio: ________________________
Mezcle 25 mL de solución de ácido acético con 25 mL de solución de acetato de
sodio.

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Lea el pH de la solución resultante: ______________.usted acaba de preparar un

buffer.
Para llevar a cabo el estudio de las propiedades de la solución buffer prepare 5
soluciones y haga las anotaciones respectivas (Tabla 13):
Tabla 13. Efecto de la adición de un ácido o una base fuerte sobre una solución
amortiguadora de ácido acético.

Solución 1 2 3 4 5
Buffer 50 mL 20 mL 20 mL
Agua 20 mL 20 mL
NaOH 0.1N 1 mL 1 mL
HCI 0.1N 1 mL 1 mL
pH

CONSULTA PRELIMINAR

Explique cómo funciona un buffer o solución amortiguadora.

¿Cuáles son las principales soluciones amortiguadoras que se encuentran en la

sangre? ¿Cuáles de estos buffer tienen mayor capacidad de resistir los cambios en el
pH de la sangre? ¿Por qué?

Explique cómo funciona un potenciómetro.

BIBLIOGRAFÍA

Baynes, J., y Dominiczak. M. (2014). Medical Biochemistry. 4th Edition. New York,
NY: Saunders

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 SOLUCIONES Y DETERMINACIÓN DE pH

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Edition. London, UK: Churchill Livingstone.

McMurry, J., Ballantine, D., Hoeger, C., Peterson, V. (2010). Fundamentals of

general, organic, and biological chemistry. New York, NY: Pearson
Prentice Hall

Rodwell, V., Bender, D., Botham, K., Kennelly, P., y Weil, P. (2016). Harper.
Bioquímica ilustrada, 30e. México, D. F: McGraw-Hill

Uribe, S., Heredia, P., Sánchez, S., y Garzón de la Mora, P. (2014). pH y

amortiguadores. En S. Enríquez; L. Alvarado; C. Díaz; P. Chávez (Ed.).
Manual de prácticas de laboratorio de bioquímica, 3e. New York, NY:
McGraw-Hill. Recuperado de
http://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1496&ion
id=100109634.

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 SOLUCIONES Y DETERMINACIÓN DE pH

ACTIVIDAD DE ANÁLISIS

Estudio de caso: Acidosis Láctica

Diagnóstico: acidosis metabólica con anión gap elevado

Causa: Metformina

Descripción: Paciente femenina de 56 años se presenta en el servicio de urgencia por

compromiso del estado general, mialgias generalizadas y disminución del apetito
durante 2 días de evolución. Tiene antecedentes de tabaquismo activo, diabetes
mellitus tipo 2 no insulino requirente (DM2 NIR) e hipertensión arterial (HTA), así
que requiere tratamiento diario con losartán (50 mg), aspirina (100 mg),
linagliptina/metformina (2,5/1.000) y cada 12 horas, glibenclamida (5 mg). En el
momento de su ingreso, se realizó diferentes pruebas de laboratorio, los resultados
están indicados en la siguiente tabla:

Tabla 14. Datos de análisis de laboratorio de la paciente.

Parámetro Valores
Ácido láctico (mg/ dL) 173
Creatinina (mg/ dL) 5,88
BUN (mg/dL) 100
K+ (mEq/L) 6,17
HCO3-(mEq/L) 5.2
Glucosa (mg/dL) 46
pH 6.8
PaCO2 ( mmHg) 21.4

Se evidencia que la concentración de ácido láctico esta elevada. Luego, la paciente se

traslada a la unidad de tratamiento intensivo, presentando un episodio de hipertensión,
bien perfundida, pero bajo efectos de sedación y bloqueo neuromuscular post
intubación. Por otra parte, el valor de la concentración de glucosa esta alterado por

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este motivo, se realizó un tratamiento con 2 ampollas de solución glucosada al 30% y

suero glucosado al 10% en infusión continua.

La determinación de gases en sangre arterial (GSA) revela que el valor de pH de 6,8

está fuera del rango normal con un anión gap de 38. Por tal razón, se administra a la
paciente 500 mL de bicarbonato 2/3 M durante 2 h logrando subir el pH hasta 7,1 y

luego este tratamiento se complementó con hemofiltración de alto volumen (HFAV),

lo cual permitió normalizar el pH (7,4) y su situación hemodinámica. Posteriormente,
el estado de la paciente mejoró rápidamente, logrando extubarse, y suspender el
tratamiento de drogas vasoactivas y la HFAV.

Comentario: En el cuerpo humano, los tampones o amortiguadores biológicos, los

pulmones y los riñones son fundamentales en la regulación del pH de los líquidos
corporales que incluyen la sangre y la orina. Cambios significativos en el pH de los
líquidos corporales pueden afectar los procesos bioquímicos en el interior de las
células y producir trastornos en equilibrio ácido-base (Figura 11). Estos trastornos
incluyen la acidosis y la alcalosis. La acidosis se caracteriza por un aumento en el
cociente entre el bicarbonato plasmático y la pCO2 mientras que la alcalosis consiste
en una disminución en el cociente entre el bicarbonato y la pCO2. La acidosis es más
frecuente que la alcalosis y puede ser tanto respiratoria como metabólica.

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Figura 3. Trastornos del equilibrio ácido-base

La determinación de los gases arteriales (pO2, y pCO2) el pH, el bicarbonato, el hiato

aniónico o anión gap son parámetros útiles en la evaluación de diversas situaciones
metabólicas que pueden producir un desequilibrio del estado ácido-base.

La ingestión de algunos fármacos como la metformina puede causar un incremento de

las concentraciones plasmáticas del lactato, lo cual puede producir acidosis láctica
poniendo en peligro la vida. Existen dos tipos de acidosis láctica, la tipo A se
relaciona con un insuficiente aporte de oxígeno en los tejidos mientras que la tipo B
(como es el caso de esta paciente) se asocia al uso de la metformina..

Para analizar

Explique cuáles son los parámetros que evidencian que el paciente presenta acidosis
metabólica.

¿Cómo se calcula el hiato aniónico o anión gap? Interprete el valor de este parámetro
en la paciente?

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¿Por qué la metformina puede causar este trastorno en el equilibrio ácido-base?

¿Cómo actúa la metformina en el metabolismo humano?

Mencione algunos ejemplos que pueden causar este tipo de desequilibrio

BIBLIOGRAFÍA

Baynes, J., y Dominiczak. M. (2014). Medical Biochemistry. 4th Edition. New York,
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Rodwell, V., Bender, D., Botham, K., Kennelly, P., y Weil, P. (2016). Harper.
Bioquímica ilustrada, 30e. México, D. F: McGraw-Hill

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