Punica granatum L.

(Pomegranate) Extract: In Vivo Study of Antimicrobial Activity

against Porphyromonas gingivalisin Galleria mellonella Model

 Curva de supervivencia de G. mellonella con extracto glicólico de granada. Se inocularon

diferentes concentraciones de PGE (200 mg / ml, 100 mg / ml, 25 mg / ml, 12,5 mg / ml,
6,25 mg / ml, 3,1 mg / ml y 2,5 mg / ml) diluidas en PBS en el último proleg De cada larva.
Se utilizaron 15 larvas por grupo. El número de muertos G. mellonella se registró
diariamente durante 168 horas para el análisis de la curva de supervivencia. La inyección
de alta concentración (200, 100 y 25 mg / mL) de PGE mostró un efecto tóxico,
conduciendo a G. mellonella a la muerte.

El extracto glicólico de la granada a concentraciones de 200 mg / mL, 100 mg / mL y 25 mg / mL

demostró ser tóxico para las larvas, conduciéndolas a la muerte y sobrevivieron a concentraciones
de 12,5 mg / mL, 6,25 mg / Ml, 3,1 mg / ml y 2,5 mg / ml . El grupo PBS no mostró ninguna muerte
después de 168 horas en todos los experimentos, demostrando así ninguna interferencia con los
resultados obtenidos
  Curva de supervivencia de G. mellonella infectada con P. gingivalis en diferentes
concentraciones de extracto de granada. Las concentraciones de PGE (12,5 mg / ml, 6,25
mg / ml, 3,1 mg / ml y 2,5 mg / ml) diluidas en PBS se inocularon en el último proleg de cada
larva. Se utilizaron 15 larvas por grupo. El número de muertos G. mellonella se registró
diariamente durante 168 horas para el análisis de la curva de supervivencia. Las larvas
sobrevivieron a concentraciones de 12,5 mg / ml, 6,25 mg / ml, 3,1 mg / ml y 2,5 mg / ml.

Las concentraciones que demostraron ser no letales a las larvas presentaron los siguientes
resultados cuando fueron inoculadas en G. mellonella infectadas por P. gingivalis: 12,5 mg / mL
dieron como resultado la muerte del 6% después de 48 horas, 6,25 mg / mL resultaron en la muerte
de 13 % Después de 72 horas, 3,1 mg / ml dieron como resultado la muerte de 13% después de 72
horas, y 2,5 mg / ml no produjeron la muerte de G. mellonella., el grupo control (infectado con P.
gingivalis sin ningún tratamiento) condujo a la muerte del 46% de las larvas después de 48 horas.
The non-mammalian host Galleria mellonella can be used to study the virulence of the fungal
pathogen Candida tropicalis and the effi cacy of antifungal drugs during infection by this
pathogenic yeast

Primero se analizó la supervivencia de larvas infectadas con Diferentes cepas y diferentes

concentraciones de células de levadura A dos temperaturas (30 y 37 ° C) ; Las cepas mataron a las
larvas, lo que indica que G. mellonella es un modelo de hospedaje factible para estudiar diversos
aspectos de la virulencia De este patógeno fúngico. Encontramos diferencias entre la virulencia de
las cepas y que el 50% de supervivencia Variaron según el tamaño del inóculo.

Con el bajo inóculo (5x10*5),, el 50% de las larvas murió después de 8.8+/-1,2 días, Exceptuando los
inoculados con ATCC 200956 que no fueron afectados por el hongo (100% de supervivencia)
durante el tiempo Del experimento (10 días).

Cuando las concentraciones de inóculo Fueron aumentados a 10*6 células / larva, 50% del tiempo
de supervivencia disminuyo (6.3 +/-1,2 días), excepto para la cepa ATCC Que parecen tener poco
efecto sobre la supervivencia. Con Los niveles más altos de inóculo de 2x10*6 y 4x10*6, el tiempo
Requerido para 50% de muerte de larvas disminuyó significativamente, es decir, 3.8+/-2.2 y 1.4+/-
0,8 días, respectivamente (Figura 1).

Estos estudios incluyeron dos aislamientos clínicos y dos ATCC cepas de C. tropicalis. Aislados
clínicos y ATCC 750 fueron más virulentas en el sistema modelo que ATCC 200956

Figura 1

Muerte de Galleria mellonella por diferentes cepas de Candida tropicalis Depende del inóculo.
Grupos de 20 larvas de G. mellonella donde Infectados como se describe en Material y Métodos con
diferentes cepas de C. tropicalis, y la supervivencia se controló todos los días. El experimento de
supervivencia fue Realizada a 37ºC (A) 5x10*5, (B) 10x6, (C) 2x10*6 , (D) 4x10*6 células per larva,
respectivamente.
A 30 ° C las cepas fueron menos virulentas que con larvas Se incubaron a 37 ◦ C. La supervivencia
al 50% a 30 ◦ C y 37 ◦ C Con un inóculo 2 10 6 de la cepa ATCC 750 fue de 7 y 3 días, respectivamente;
Para la cepa ATCC 200956 fue de 10 y 7 días, y para la cepa CL-7119 fue de 5 y 3 días. mSin
embargo, aunque la diferencia en la supervivencia del Larvas inoculadas con la cepa CL-7868 fue
mínima (4 y 3 días a 30 ° C y 37 ° C, respectivamente), se produjo el 100% de muerte A 10 días a
30ºC en lugar de 5 días a 37ºC.

La virulencia de Candida tropicalis depende de la temperatura de incubación de las larvas. Las

larvas fueron infectadas con 2x10*6 levaduras de C. tropicalis , Y luego se incubaron a 30ºC o
37ºC (A), cepa ATCC 200956, (37ºC); 30ºC, (B) cepa CL - 7868, (37ºC) y control de PBS.

La diferencia entre las temperaturas fue significativa en ambas cepas (P <0,0001).