DETERMINACION DE pH Y PREPARACION DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS Carol Ibarra, Andrés Rosero Laboratorio de Bioquímica I Programa de Química, Facultad de Ciencias Exactas

y Naturales Universidad de Nariño, Ciudad Universitaria Torobajo, AA 1157 San Juan de Pasto. RESUMEN: Se prepararon 3 soluciones a partir de soluciones con concentración conocida; se mezclaron cantidades diferentes de estas en 6 tubos de ensayo a los cuales se les agrego indicador creando una escala de pH de 3 a 5. Luego se tomaron 10 tubos de ensayo a los cuales se les agrego soluciones diferentes con concentración conocida, se agrego un indicador y se procedió a medir el pH patrón basándose en la escala anterior, se les midió el pH con papel tornasol, con el pH metro y se calculo el pH teórico; como siguiente paso se midió el pH de diferentes sustancias, luego se preparo la solución buffer y se le realizando diferentes pruebas para medir la variación de pH, por último se realizaron diferentes cálculos para preparara una solución amortiguadora problema de fosfato 0.5 M a un pH de 7,5. PALABRAS CLAVE: Indicador, Concentración, Variación de pH, soluciones amortiguadores

INTRODUCCION

Según la definición de Bronsted (1879– 1947) y Thomas Lowry (1874–1936) en 1923 un acido está definido como una molécula que cede protones (H+) y una base como la molécula que acepta el protón. El ejemplo más claro es la molécula de agua ya que ella es anfiprotica ósea se comporta como un acido liberando el protón y formando el Ion hidroxilo.

El ion acetato es la base conjugada del acido acético y el ion amonio es el acido conjugado del amoniaco. La acidez y la alcalinidad de una solución se la expresa por medio del logaritmo negativo de la concentración (mol / L) de los iones H+ presentes en ella; al valor obtenido se le llama pH de la solución.

Cuando se comporta como una base, acepta un protón para formal el ion hidronio (H3O+). Cuando un ácido y una base reaccionan, los productos son un nuevo ácido y base, los cuales respectivamente se les llama acido y base conjugados. Por ejemplo:

Ahora si se conoce el valor de la concentración de iones hidronio (H3O+) se puede calcular el valor de la concentración de iones hidroxilo (OH) utilizando la siguiente ecuación

Donde en soluciones acuosas KW se conoce como el producto iónico del agua el cual es de 1x10-14 a 250C.

aumentando la cantidad de ácido HA y disminuyendo los iones de A-. El método potenciometrico utiliza el sistema del electrodo que consiste de un sensor cuyo voltaje varia proporcionalmente a la actividad de iones hidrogeno de la solución y un electrodo de referencia que proporciona un voltaje de referencia constante y estable. MATERIALES Y REACTIVOS Reactivos: . Una disolución amortiguadora debe contener una concentración relativamente grande de ácido para reaccionar con los iones OH. Las disoluciones amortiguadoras o tampón son muy importantes en los sistemas químicos y biológicos. HA. Si estas mismas moles de ácido fuerte se agregan al agua el pH cambia bruscamente. se mantienen gracias a las disoluciones. o bases débiles con sales. por ejemplo. Para la mayoría de los casos.Las soluciones amortiguadoras son soluciones de ácidos. en donde la concentración del anion común A.0 y 8.que se añadan. por ejemplo. En la mayor parte de los casos. se usa el pHmetro. aquellos requieren de un rango de pH entre 4. Estas substancias se conocen como indicadores. Estos requerimientos se satisfacen con un par ácido-base conjugado. un ácido débil y su base conjugada (suministrada por una sal) o una base débil y su ácido conjugado (suministrada por una sal). por un electrométrico o por cálculos analíticos. El pH en el cuerpo humano varía mucho de un fluido a otro. de estos electrolitos. que tienen un ion común y poseen la propiedad de mantener el pH de las soluciones más o menos constantes a pesar de adiciones de cantidades pequeñas de ácidos o bases fuertes. NaA. El equilibrio involucrado es el del ácido o la base débil. La medición de pH se efectúa ya sea por un método calorimétrico. para lo cual se desplaza en el sentido inverso. el pH de la sangre es alrededor de 7. y también debe contener una concentración semejante de base para que reaccione con la cantidad de iones H+ que se añadan. HA= H+ + AKa = [H+] x [ HCO3-] [HA] [H+] = Ka [HA] [A-] Ka = [ ácido ] [ sal ] Ka es un valor constante y. proviene casi exclusivamente de la sal. tratando de disminuir la [H+] aumentada.4. El sistema trata de restablecer el equilibrio. NaA. Además. El método calorimétrico se basa en el uso de colorantes orgánicos complejos que cambian de color de acuerdo al valor del pH de una soluciona acuosa. se conoce el pH de la solución sacando el logaritmo a la ecuación que esta igualada a [H] y queda así: pH = pKa + log [A+] [HA] (Ec de Henderson Hasselbalch) Cada vez que se adiciona cierto número de moles de ácido fuerte se observa un aumento de la [H+] y el equilibrio se rompe momentáneamente. en tanto que el jugo gástrico humano es alrededor de 1. Para este último. estos valores de pH que son críticos para el funcionamiento adecuado de las enzimas y del balance de la presión osmótica. los componentes ácidos y básicos del amortiguador no deben consumirse el uno al otro en una reacción de neutralización.5. manteniendo el pH más o menos constante.4.

1 M Sln CH3COOH 0.0 5.1 N 1.0 3.1 N a partir de NaOH 0. siendo este el pH patrón. a los cuales se les agrego 3 gotas de indicador azul de bromofenol. Se realizaron los cálculos para preparar las siguientes soluciones: – – – 50 ml de HCL 0.4.1 M 0. En cada tubo se mezclo diferentes volúmenes de las soluciones anteriormente preparada de CH3COOH.55 0.1 M A las anteriores soluciones preparadas a partir de soluciones de laboratorio se les determino los siguientes valores: a.85 1.83 5. NaOH ml 0. pH patrón y pH potenciometrico.7 0. 5ml.0 3. NaOH y agua destilada como se muestra en la tabla 1: Tabla 1.58 5.0 5.01 M 0. Tabla 2.0 2.1 M Fosfato di acido de sodio 1M Fosfato acido de sodio 1M Indicador azul de bromofenol 5.9 5.4 3.45 Materiales: – – – – – Probeta: 100ml 8 beakers: 250ml Pipeta: 1ml.1 M METODOLOGÍA 1.6 CH3COOH ml de 0. 10ml 16 tubos de ensayo Balón volumétrico: 100ml.– – – – – – – – – – pH metro Papel indicador Sln HCl 0.5 ml de CH3COOH 0. tubo Sustancia(12 ml) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Agua destilada Agua de la llave HCl HCl HCl HCl CH3COOH NH4OH NH4Cl Acetato amonio Concentración (N) ----------------------------------------0.42 1.0 5.15 4. pH 3. A las soluciones se les determino el pH por medio del papel tornasol siendo esta valoración el pH de papel.1 M 0. Se tomo 10 tubos de ensayo y se agrego a cada uno 6 ml de sustancias con concentración conocida preparadas en laboratorio a las cuales se les determino el pH teórico.5 N 0.1 M Acetato de amonio 0. A cada tubo de ensayo se le agrego 3 gotas de azul de bromofenol y se busco el equivalente más cercano de acuerdo a la escala de pH que ya se había elaborado anteriormente.1 N a partir de HCL 0.0 5.1 M Sln NH4Cl 0.0 5.0 .1 M Sln NH4OH 0.0001 M 0.001 M 0. Las sustancias preparadas en el laboratorio se muestran en la tabla 2.5N 50 ml de NaOH 0.4 en 0.1 M 0.1 H2O ml 5. 25ml 2.8 4. b. Se preparo una escala coloreada de pH en 6 tubos numerados de 3 a 5 con unidades de 0.0 5.2 4.

V1 = C2V2 / C1 Se procede a remplazar los valores: V1 = 0. 2. A las soluciones se les determino el pH por medio del pHmetro. en A se colocaron 20 ml de acido acético 0.6 (azul violeta o púrpura).5M y a F se le adiciono 2 ml de NaOH 0. En D se colocaron 20 ml de agua destilada + 3ml de NaOH 0. hidróxido de sodio y agua especificados en la tabla 1. Este es un compuesto orgánico cuya forma no disociada tiene un color diferente al de su acido o base conjugados. Se obtuvo una escala de pH como se muestra en la figura 1: Figura 1. La disociación del indicador (Ec 3). se tomo el pH. al beaker E se le adiciono 2 ml de HCl 0. En C se coloco 20ml de agua destilada + 2ml de HCl 0.5M. Determinación de pH por diferentes métodos: . C1V1 = C2V2 Despejando V1 se tiene: Ec 2. Por último se calculo teóricamente el pH de cada solución.c.5M. In + H2O ↔ LnH+ + OH- 3.pH 4.1 x 6 / 0.se acompaña de cambios en su estructura interna y concominante cambio de color Ec 3. Se rotularon 6 beakers (A – F).5 y se midió su efectividad agregándole a este acido y base por separado para medir el pH observando así la capacidad amortiguadora. se midió el pH a cada una de ellas. se midió el pH. en b se colocaron 20ml de acetato de sodio. A los beaker E y F se les coloco 20 ml de la solución resultante de A y B.5M a pH 7. Preparación de la escala coloreada Con la combinación de los volúmenes de acido acético. ANALISIS DE RESULTADOS 1. Preparación de soluciones: Las soluciones iníciales fueron preparadas utilizando la ley de la disolución la cual se expresa de la siguiente ecuación: Ec 1. su estructura molecular se muestra en la figura 2: Fig 2. siendo este valor el pH potenciometrico. Por último se realizo los cálculos para preparar un amortiguador de fosfato 0.5M.0 (amarillo) . es irritante y poco nocivo.5 = 1. se mido el pH.5M. 6. d.2 ml Este procedimiento se aplica para prepara las soluciones del primer punto y para preparar las soluciones utilizadas para hacer la escala del pH de la tabla 1 y las soluciones utilizadas para la determinación del pH de la tabla 2. tiene un olor característico este tiene un Intervalo de transición visual: pH 3. pH 3 pH 5 El azul de bromofenol es un indicador orgánico de formula C19H10O5SBr4. siendo este el pH calculado. luego se mezclaron midiendo el nuevo pH.

5 M y pH 7.42 NaOH 2.096 3.20 = log [A+] [HA] .5 – 7.8 4 – El pH teórico de la tabla 3 se cálculo de la siguiente forma: Para el agua no se calcula el pH porque se supone que es neutra Para las diferentes concentraciones de HCl el cual es acido fuerte se dice que: Ec 4.94 7 ------1 2 3 4 2.34 Solución A + B 4.98 E (A + B)+ 2mL de HCl 4. Beaker pH medido A 10 ml ac acético 2.15 8.4 3.): Tabla 3.68 B 10 ml acetato de sodio 8. Preparación de una solución amortiguadora: Tabla 4.12 7 4 4 3 3.86 11. pH = -Log (H+) Para el acido acético: Ec 5.5: pKa: 7. pH = ½ pKA.57 F (A + B)+ 2mL de 4. pH = pkw – ½ pKB + ½ log [NH4OH] 1.03 2.74 11.2 3.2 5 3.02 5.80 C+ 2mL de HCl 1. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 – 5 6 1 2 3 4 3 11 5 9 6.20 pH: 7. pH = ½ pkw – ½ pKB + ½ log [NH4Cl] – El pH patrón corresponde a los valores de pH aproximados obtenidos de la escala que se realizo con las variaciones de color del indicador azul de bromofenol con los valores de la tabla 1.Para el cloruro de amonio: Se determino el pH de las 10 soluciones que están descritas en la tabla 2.45 --------1. Preparación de una solución buffer de fosfato 0. El valor potenciometrico corresponde a los valores de pH medidos en el pHmetro.04 2.83 D + 2mL de NaOH 11.6 3.5 Concentración: 0.½ log [CH3COOH] Para el hidróxido de amonio: Ec 6.57 C + D + 20 ml de agua 5. tubo pH papel pH Potencio pH teorico pH Patron Ec 7.97 3. Obteniendo los valores (tabla 3.13 5.5 M Aplicamos la formula de Henderson– Hasselbalch: pH = pKa + log [A+] [HA] 7.

33 % Base Por lo anterior podemos decir que se necesitan 33.3 ml de fosfato bibásico.5 y el pH experimental es de 7.995 = [A+] [HA] Relación (Base) (Acido) 1.08 En la tabla 1 se observa que no hay una variación significativa de pH lo cual puede ser porque el agua tenía un grado de acidez bajo (medido: 6.33 0.5 y se lo aforo. los posibles cambios en la energía eléctrica también pueden ser factores de Se calculan los volúmenes para preparar 100ml: Volumen de base: .3166 mol de la base Moles del acido: 100 mol 33.1 M Buffre + 1 ml de NaOH 0. Como la relación de porcentaje supera la mitad. Para observar la variación de pH se le agrego al buffer obtenido inicialmente 1 ml de HCl y 1ml de NaOH obteniendo el siguiente resultado: ( Tabla 5. Con respecto a los valores obtenidos con el pHmetro (Tabla 2) se puede decir que estos como son de uso general no estaban correctamente calibrados lo cual se evidencia en lo que ellos tardan en dar un valor estable dando origen a un error.3166 mol = 0.1L X = 33.3166 M 1L sln Para el acido: M = 0.06) Buffrer + 1ml de HCl 0.1 M Para el acido: 3 100% 1 X X = 33.02). Los recubrimientos del electrodo. este es diferente al teórico por las impurezas que el agua puede contener.33 % Acido Moles de la base: 100 mol 63.995 aprox = 3 Para la base: 3 100% 1.33 0.1666mol = 0.57 7.5 mol X X = 0.Antilog 0. Sln (buffer pH 7.633 L (633 ml) V1 para el acido = 0.) Tabla 5.1L X = 63.1666 mol del acido Concentración para preparar un litro de de solución: Para la base: M = 0.2 ml Parte total: 1. se le agrego unas gotas de NaOH hasta alcanzar el pH de 7.995 1 Volumen de acido: 332 ml 1L X 0.1666 M 1L sln Se calculas los volúmenes de acido y de base con la formula de las disoluciones (Ec 1): – – V1 para la base = 0.995 + 1 = 2. se calcula el volumen para cada uno de los componentes determinando las cantidades de acido y de base para preparar la solución buffer.3 ml 1.06.5 mol X X = 0.2 ml de fosfato acido mas 63. el pH teórico es de 7.99 X X = 66.332 L (332 ml) pH 6.3 = [A+] [HA] 633 ml X 1L 0.

interferencia además de esto igualmente también puede influir el medio de trabajo y la limpieza del material. MURRAY RK et al. Los amortiguadores se usan en todos los tipos de reacciones químicas en las que se desean mantener el pH de una solución a un nivel relativamente constante 2. Química Analítica. 2004 4. McKEE y McKEEE J. México 1998. SKOOG. esta selección no solo da el valor de pH correcto del sistema amortiguador sino que asegura que tengan cantidades comparables del ácido y su base conjugada de la disolución. Bioquímica. Colombia 1998 Séptima edición 2. Bioquímica de Harper. que son prerrequisitos para el sistema amortiguador funcione con eficacia. Ed Mc Graw Hill. se seleccionara un ácido débil cuyo pKa sea parecido al pH deseado. Los datos de la tabal 2 explican los cambios que se dan cuando agregamos al medio una cantidad de acido o base fuerte reflejándose este en la gran variación de pH ya que aumentan o disminuyen la cantidad de iones hidronio en el medio que se está trabajando. Holler. BIBLIOGRAFIA 1. McGraw-Hill-Interamericana. West. Para preparar una disolución amortiguadora a un pH especifico.5 el pH calculado fue muy cercano al calculado. Bioquímica. quinta edición. La capacidad amortiguadora de una solución se define como el número de moles de un ácido o de una base fuerte que ocasiona un cambio de una unidad de pH a un litro del amortiguador. editorial Adisson Westey. 3. En la preparación del buffer de fosfato 0. Cuando se realizo la prueba de amortiguamiento se observo que la variación de pH fue muy pequeña lo cual nos confirma la capacidad de amortiguamiento de la solución ya que mantuvo un rango del pH. Esta premisa es de suma importancia en las ciencias ya que un cambio brusco de pH en un sistema biológico puede causar perjuicios que afecten la integridad del humano. 3. CONCLUSIONES 1. México 2003 . 16° edición.5 M a pH 7. Bohinski R.

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