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DETERMINACION DE pH Y PREPARACION DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS Carol Ibarra, Andrés Rosero Laboratorio de Bioquímica I Programa de Química, Facultad de Ciencias Exactas

y Naturales Universidad de Nariño, Ciudad Universitaria Torobajo, AA 1157 San Juan de Pasto. RESUMEN: Se prepararon 3 soluciones a partir de soluciones con concentración conocida; se mezclaron cantidades diferentes de estas en 6 tubos de ensayo a los cuales se les agrego indicador creando una escala de pH de 3 a 5. Luego se tomaron 10 tubos de ensayo a los cuales se les agrego soluciones diferentes con concentración conocida, se agrego un indicador y se procedió a medir el pH patrón basándose en la escala anterior, se les midió el pH con papel tornasol, con el pH metro y se calculo el pH teórico; como siguiente paso se midió el pH de diferentes sustancias, luego se preparo la solución buffer y se le realizando diferentes pruebas para medir la variación de pH, por último se realizaron diferentes cálculos para preparara una solución amortiguadora problema de fosfato 0.5 M a un pH de 7,5. PALABRAS CLAVE: Indicador, Concentración, Variación de pH, soluciones amortiguadores

INTRODUCCION

Según la definición de Bronsted (1879– 1947) y Thomas Lowry (1874–1936) en 1923 un acido está definido como una molécula que cede protones (H+) y una base como la molécula que acepta el protón. El ejemplo más claro es la molécula de agua ya que ella es anfiprotica ósea se comporta como un acido liberando el protón y formando el Ion hidroxilo.

El ion acetato es la base conjugada del acido acético y el ion amonio es el acido conjugado del amoniaco. La acidez y la alcalinidad de una solución se la expresa por medio del logaritmo negativo de la concentración (mol / L) de los iones H+ presentes en ella; al valor obtenido se le llama pH de la solución.

Cuando se comporta como una base, acepta un protón para formal el ion hidronio (H3O+). Cuando un ácido y una base reaccionan, los productos son un nuevo ácido y base, los cuales respectivamente se les llama acido y base conjugados. Por ejemplo:

Ahora si se conoce el valor de la concentración de iones hidronio (H3O+) se puede calcular el valor de la concentración de iones hidroxilo (OH) utilizando la siguiente ecuación

Donde en soluciones acuosas KW se conoce como el producto iónico del agua el cual es de 1x10-14 a 250C.

4. El método potenciometrico utiliza el sistema del electrodo que consiste de un sensor cuyo voltaje varia proporcionalmente a la actividad de iones hidrogeno de la solución y un electrodo de referencia que proporciona un voltaje de referencia constante y estable. manteniendo el pH más o menos constante. El equilibrio involucrado es el del ácido o la base débil. se usa el pHmetro. proviene casi exclusivamente de la sal. El método calorimétrico se basa en el uso de colorantes orgánicos complejos que cambian de color de acuerdo al valor del pH de una soluciona acuosa. por un electrométrico o por cálculos analíticos. Estos requerimientos se satisfacen con un par ácido-base conjugado.Las soluciones amortiguadoras son soluciones de ácidos. El sistema trata de restablecer el equilibrio.5. y también debe contener una concentración semejante de base para que reaccione con la cantidad de iones H+ que se añadan. un ácido débil y su base conjugada (suministrada por una sal) o una base débil y su ácido conjugado (suministrada por una sal). se conoce el pH de la solución sacando el logaritmo a la ecuación que esta igualada a [H] y queda así: pH = pKa + log [A+] [HA] (Ec de Henderson Hasselbalch) Cada vez que se adiciona cierto número de moles de ácido fuerte se observa un aumento de la [H+] y el equilibrio se rompe momentáneamente. El pH en el cuerpo humano varía mucho de un fluido a otro. NaA. para lo cual se desplaza en el sentido inverso.que se añadan. NaA. los componentes ácidos y básicos del amortiguador no deben consumirse el uno al otro en una reacción de neutralización. por ejemplo. HA= H+ + AKa = [H+] x [ HCO3-] [HA] [H+] = Ka [HA] [A-] Ka = [ ácido ] [ sal ] Ka es un valor constante y. La medición de pH se efectúa ya sea por un método calorimétrico. HA. estos valores de pH que son críticos para el funcionamiento adecuado de las enzimas y del balance de la presión osmótica. de estos electrolitos. Si estas mismas moles de ácido fuerte se agregan al agua el pH cambia bruscamente. en donde la concentración del anion común A. aquellos requieren de un rango de pH entre 4. en tanto que el jugo gástrico humano es alrededor de 1. tratando de disminuir la [H+] aumentada. se mantienen gracias a las disoluciones.0 y 8. que tienen un ion común y poseen la propiedad de mantener el pH de las soluciones más o menos constantes a pesar de adiciones de cantidades pequeñas de ácidos o bases fuertes. Para este último. por ejemplo. o bases débiles con sales. Para la mayoría de los casos. Las disoluciones amortiguadoras o tampón son muy importantes en los sistemas químicos y biológicos. En la mayor parte de los casos. Además. Una disolución amortiguadora debe contener una concentración relativamente grande de ácido para reaccionar con los iones OH. MATERIALES Y REACTIVOS Reactivos: .4. Estas substancias se conocen como indicadores. aumentando la cantidad de ácido HA y disminuyendo los iones de A-. el pH de la sangre es alrededor de 7.

Tabla 2.0 2.1 M 0.1 N a partir de HCL 0.1 M 0.1 M 0.9 5.1 M Sln NH4OH 0.– – – – – – – – – – pH metro Papel indicador Sln HCl 0.1 M Sln NH4Cl 0. 25ml 2.58 5.2 4.1 M Fosfato di acido de sodio 1M Fosfato acido de sodio 1M Indicador azul de bromofenol 5. pH 3.1 H2O ml 5.42 1. Se realizaron los cálculos para preparar las siguientes soluciones: – – – 50 ml de HCL 0. Se preparo una escala coloreada de pH en 6 tubos numerados de 3 a 5 con unidades de 0.5N 50 ml de NaOH 0.4 en 0. a los cuales se les agrego 3 gotas de indicador azul de bromofenol.15 4. En cada tubo se mezclo diferentes volúmenes de las soluciones anteriormente preparada de CH3COOH.8 4.1 N a partir de NaOH 0.6 CH3COOH ml de 0. A cada tubo de ensayo se le agrego 3 gotas de azul de bromofenol y se busco el equivalente más cercano de acuerdo a la escala de pH que ya se había elaborado anteriormente.0 5.45 Materiales: – – – – – Probeta: 100ml 8 beakers: 250ml Pipeta: 1ml.1 N 1.0 5.7 0.0 5.5 N 0. pH patrón y pH potenciometrico. 5ml.5 ml de CH3COOH 0. 10ml 16 tubos de ensayo Balón volumétrico: 100ml. NaOH y agua destilada como se muestra en la tabla 1: Tabla 1. Se tomo 10 tubos de ensayo y se agrego a cada uno 6 ml de sustancias con concentración conocida preparadas en laboratorio a las cuales se les determino el pH teórico. b.85 1.01 M 0.0001 M 0.1 M Acetato de amonio 0.1 M Sln CH3COOH 0.1 M A las anteriores soluciones preparadas a partir de soluciones de laboratorio se les determino los siguientes valores: a.0 .0 3. A las soluciones se les determino el pH por medio del papel tornasol siendo esta valoración el pH de papel.4 3. tubo Sustancia(12 ml) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Agua destilada Agua de la llave HCl HCl HCl HCl CH3COOH NH4OH NH4Cl Acetato amonio Concentración (N) ----------------------------------------0.83 5. siendo este el pH patrón.1 M METODOLOGÍA 1.0 5. NaOH ml 0.0 5.0 3.4. Las sustancias preparadas en el laboratorio se muestran en la tabla 2.001 M 0.0 5.55 0.

2 ml Este procedimiento se aplica para prepara las soluciones del primer punto y para preparar las soluciones utilizadas para hacer la escala del pH de la tabla 1 y las soluciones utilizadas para la determinación del pH de la tabla 2.6 (azul violeta o púrpura). A las soluciones se les determino el pH por medio del pHmetro. en A se colocaron 20 ml de acido acético 0. siendo este valor el pH potenciometrico.5M a pH 7. hidróxido de sodio y agua especificados en la tabla 1. es irritante y poco nocivo. Por último se calculo teóricamente el pH de cada solución. Preparación de la escala coloreada Con la combinación de los volúmenes de acido acético. 6. se mido el pH. en b se colocaron 20ml de acetato de sodio. A los beaker E y F se les coloco 20 ml de la solución resultante de A y B.5M y a F se le adiciono 2 ml de NaOH 0. Determinación de pH por diferentes métodos: .se acompaña de cambios en su estructura interna y concominante cambio de color Ec 3. d.5M. C1V1 = C2V2 Despejando V1 se tiene: Ec 2. 2. pH 3 pH 5 El azul de bromofenol es un indicador orgánico de formula C19H10O5SBr4. Por último se realizo los cálculos para preparar un amortiguador de fosfato 0. al beaker E se le adiciono 2 ml de HCl 0. siendo este el pH calculado.5M.5M. Preparación de soluciones: Las soluciones iníciales fueron preparadas utilizando la ley de la disolución la cual se expresa de la siguiente ecuación: Ec 1. se tomo el pH. Este es un compuesto orgánico cuya forma no disociada tiene un color diferente al de su acido o base conjugados.5 y se midió su efectividad agregándole a este acido y base por separado para medir el pH observando así la capacidad amortiguadora. luego se mezclaron midiendo el nuevo pH. ANALISIS DE RESULTADOS 1.5 = 1.5M. La disociación del indicador (Ec 3).c. In + H2O ↔ LnH+ + OH- 3. tiene un olor característico este tiene un Intervalo de transición visual: pH 3.pH 4. Se obtuvo una escala de pH como se muestra en la figura 1: Figura 1.0 (amarillo) . su estructura molecular se muestra en la figura 2: Fig 2.1 x 6 / 0. Se rotularon 6 beakers (A – F). En D se colocaron 20 ml de agua destilada + 3ml de NaOH 0. En C se coloco 20ml de agua destilada + 2ml de HCl 0. se midió el pH a cada una de ellas. V1 = C2V2 / C1 Se procede a remplazar los valores: V1 = 0. se midió el pH.

tubo pH papel pH Potencio pH teorico pH Patron Ec 7.5: pKa: 7.8 4 – El pH teórico de la tabla 3 se cálculo de la siguiente forma: Para el agua no se calcula el pH porque se supone que es neutra Para las diferentes concentraciones de HCl el cual es acido fuerte se dice que: Ec 4.45 --------1.5 – 7.2 3. Preparación de una solución buffer de fosfato 0. pH = pkw – ½ pKB + ½ log [NH4OH] 1.57 F (A + B)+ 2mL de 4.15 8.80 C+ 2mL de HCl 1.13 5.Para el cloruro de amonio: Se determino el pH de las 10 soluciones que están descritas en la tabla 2.20 pH: 7.½ log [CH3COOH] Para el hidróxido de amonio: Ec 6.12 7 4 4 3 3.04 2. El valor potenciometrico corresponde a los valores de pH medidos en el pHmetro.86 11.5 Concentración: 0. pH = ½ pKA.42 NaOH 2. Obteniendo los valores (tabla 3.096 3.4 3.5 M y pH 7.97 3.34 Solución A + B 4. pH = -Log (H+) Para el acido acético: Ec 5.98 E (A + B)+ 2mL de HCl 4. Beaker pH medido A 10 ml ac acético 2.): Tabla 3.83 D + 2mL de NaOH 11. pH = ½ pkw – ½ pKB + ½ log [NH4Cl] – El pH patrón corresponde a los valores de pH aproximados obtenidos de la escala que se realizo con las variaciones de color del indicador azul de bromofenol con los valores de la tabla 1.20 = log [A+] [HA] . 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 – 5 6 1 2 3 4 3 11 5 9 6.68 B 10 ml acetato de sodio 8.5 M Aplicamos la formula de Henderson– Hasselbalch: pH = pKa + log [A+] [HA] 7.57 C + D + 20 ml de agua 5. Preparación de una solución amortiguadora: Tabla 4.94 7 ------1 2 3 4 2.74 11.2 5 3.6 3.02 5.03 2.

5 mol X X = 0. Sln (buffer pH 7.3 ml 1.33 0.1L X = 33. se le agrego unas gotas de NaOH hasta alcanzar el pH de 7. Los recubrimientos del electrodo. los posibles cambios en la energía eléctrica también pueden ser factores de Se calculan los volúmenes para preparar 100ml: Volumen de base: .57 7. Como la relación de porcentaje supera la mitad.3 ml de fosfato bibásico. el pH teórico es de 7.3 = [A+] [HA] 633 ml X 1L 0.02).332 L (332 ml) pH 6.1L X = 63.995 aprox = 3 Para la base: 3 100% 1. Para observar la variación de pH se le agrego al buffer obtenido inicialmente 1 ml de HCl y 1ml de NaOH obteniendo el siguiente resultado: ( Tabla 5.Antilog 0.5 y el pH experimental es de 7.2 ml de fosfato acido mas 63.1 M Buffre + 1 ml de NaOH 0.3166 mol = 0.1 M Para el acido: 3 100% 1 X X = 33.06) Buffrer + 1ml de HCl 0.33 0.2 ml Parte total: 1.5 mol X X = 0.995 + 1 = 2. este es diferente al teórico por las impurezas que el agua puede contener. se calcula el volumen para cada uno de los componentes determinando las cantidades de acido y de base para preparar la solución buffer.06.5 y se lo aforo.995 1 Volumen de acido: 332 ml 1L X 0.08 En la tabla 1 se observa que no hay una variación significativa de pH lo cual puede ser porque el agua tenía un grado de acidez bajo (medido: 6.) Tabla 5.995 = [A+] [HA] Relación (Base) (Acido) 1.633 L (633 ml) V1 para el acido = 0.1666 M 1L sln Se calculas los volúmenes de acido y de base con la formula de las disoluciones (Ec 1): – – V1 para la base = 0. Con respecto a los valores obtenidos con el pHmetro (Tabla 2) se puede decir que estos como son de uso general no estaban correctamente calibrados lo cual se evidencia en lo que ellos tardan en dar un valor estable dando origen a un error.1666 mol del acido Concentración para preparar un litro de de solución: Para la base: M = 0.33 % Acido Moles de la base: 100 mol 63.99 X X = 66.1666mol = 0.3166 M 1L sln Para el acido: M = 0.33 % Base Por lo anterior podemos decir que se necesitan 33.3166 mol de la base Moles del acido: 100 mol 33.

CONCLUSIONES 1. editorial Adisson Westey.5 M a pH 7. que son prerrequisitos para el sistema amortiguador funcione con eficacia. BIBLIOGRAFIA 1. Cuando se realizo la prueba de amortiguamiento se observo que la variación de pH fue muy pequeña lo cual nos confirma la capacidad de amortiguamiento de la solución ya que mantuvo un rango del pH. Holler. McKEE y McKEEE J.interferencia además de esto igualmente también puede influir el medio de trabajo y la limpieza del material. Bioquímica de Harper. Para preparar una disolución amortiguadora a un pH especifico. 3. se seleccionara un ácido débil cuyo pKa sea parecido al pH deseado. esta selección no solo da el valor de pH correcto del sistema amortiguador sino que asegura que tengan cantidades comparables del ácido y su base conjugada de la disolución.5 el pH calculado fue muy cercano al calculado. Química Analítica. Los amortiguadores se usan en todos los tipos de reacciones químicas en las que se desean mantener el pH de una solución a un nivel relativamente constante 2. Colombia 1998 Séptima edición 2. Los datos de la tabal 2 explican los cambios que se dan cuando agregamos al medio una cantidad de acido o base fuerte reflejándose este en la gran variación de pH ya que aumentan o disminuyen la cantidad de iones hidronio en el medio que se está trabajando. 3. West. Bioquímica. SKOOG. MURRAY RK et al. México 1998. En la preparación del buffer de fosfato 0. 2004 4. quinta edición. Ed Mc Graw Hill. Esta premisa es de suma importancia en las ciencias ya que un cambio brusco de pH en un sistema biológico puede causar perjuicios que afecten la integridad del humano. Bioquímica. Bohinski R. 16° edición. La capacidad amortiguadora de una solución se define como el número de moles de un ácido o de una base fuerte que ocasiona un cambio de una unidad de pH a un litro del amortiguador. México 2003 . McGraw-Hill-Interamericana.