Prinsip Pemeriksaan Polimorfisme Panjang Fragmen restriksi (RFLP

)
Analisis RFLP (polimorfisme panjang fragmen) pengukuran fragmen restriksi DNA yang mengandung urutan pendek yang bervariasi dari satu orang ke orang lain, yang disebut SRTNV. Setelah mengekstrak DNA dari sampel dan memperkuat itu dengan teknik yang dikenal sebagai Polymerase Chain Reaction, seorang teknisi menambahkan enzim restriksi yang memotong DNA pada titik-titik speci Fragmen yang dihasilkan dapat diurutkan menurut panjangnya menggunakan teknologi elektroforesis gel untuk menentukan seberapa sering suatu pengulangan VNTR diberikan. RFLP adalah salah satu aplikasi pertama analisis DNA untuk penyidikan forensik. RFLP adalah salah satu aplikasi pertama analisis DNA forensik untuk penyidikan. Dengan perkembangan baru, teknik DNA-analisis yang lebih efisien, RFLP tidak digunakan sebanyak dulu karena membutuhkan jumlah yang relatif besar DNA. Selain itu, sampel rusak oleh faktor lingkungan, seperti kotoran atau cetakan, tidak bekerja baik dengan RFLP. Source : www.dnatech.com/rflp.htm

Polimorfisme Panjang Fragmen restriksi (RFLP) analisis ukuran fragmen DNA yang mengandung urutan pendek yang bervariasi dari orang ke orang, disebut VNTRs. Polimorfisme Panjang Fragmen restriksi (RFLP) adalah teknik di mana organisme dapat dibedakan dengan analisis pola yang berasal dari pembelahan DNA mereka. Jika dua organisme berbeda dalam jarak antara situs pembelahan pembatasan tertentu

endonuklease, panjang fragmen yang dihasilkan akan berbeda ketika DNA dicerna dengan enzim restriksi. spesies Kesamaan (dan pola bahkan yang dihasilkan dari dapat satu digunakan sama untuk lain.

membedakan

jenis)

Polimorfisme diwarisi perbedaan ditemukan di antara individu-individu di lebih dari 1% dari populasi normal. Aplikasi RFLP: RFLPs dapat digunakan dalam pengaturan yang berbeda untuk mencapai tujuan yang berbeda. 1. RFLPs dapat digunakan dalam kasus-kasus ayah atau kasus kriminal untuk menentukan sumber sampel DNA. (Yakni memiliki aplikasi forensik).

air liur. dua huruf pertama dari spesies. Fragmen bermigrasi ke arah elektroda positif. enzim menjadi restriksi bagian dari terisolasi pertahanan dari sel berbagai terhadap bakteri invasi virus dan bakteri. Umumnya. Namun. (Mis. Isolasi DNA yang cukup untuk analisis RFLP memakan waktu dan tenaga. Sampel DNA yang telah diperlakukan dengan enzim restriksi yang ditempatkan di jalur yang terpisah pada slab gel elektroforesis di seluruh yang menempatkan sebuah medan listrik. yang memisahkan potongan-potongan DNA berdasarkan ukuran mereka. PCR dapat digunakan untuk memperkuat jumlah yang sangat kecil DNA. semakin pendek urutan pengakuan. Endonuklease pembatas adalah enzim-enzim yang memotong DNA molekul pada nukleotida spesifik urutan tergantung pada enzim tertentu yang digunakan. 2. ke tingkat yang diperlukan untuk analisis RFLP. Jika molekul berbeda dalam urutan nukleotida.2. . bisa digunakan dalam deteksi mutasi muations terutama dikenal) 3. diperkirakan Enzim ini dinamai dengan menggunakan huruf pertama dari genus. RFLPs dapat digunakan menentukan status penyakit individu. RFLPs dapat digunakan untuk mengukur tingkat rekombinasi yang dapat menyebabkan genetik peta dengan jarak antara lokus RFLP diukur dalam centiMorgans. semakin besar jumlah fragmen yang dihasilkan. Contoh penggunaan RFLP di Mengetik DNA: 1. fragmen ukuran yang berbeda dapat dihasilkan. Ekstraksi Langkah pertama dalam mengetik DNA ekstraksi DNA dari sampel. biasanya dalam 2-3 jam. baik itu darah. Pengenalan enzim biasanya 4 sampai 6 basis pasangan panjangnya. lebih banyak sampel dapat dianalisa dalam waktu pendek. Elektroforesis Fragmen restriksi memiliki muatan negatif dan dapat dipisahkan oleh teknik yang disebut Gel Elektroforesis. dan urutan penemuan. air mani atau beberapa sampel biologis lainnya. Pembatasan Produksi Fragmen DNA dimurnikan kemudian dipotong menjadi fragmen oleh enzim pembatas. Oleh karena itu. Fragmen dapat dipisahkan dengan elektroforesis gel. 3.

Pendekatan DNA yang diperlukan cukup mencetak sampel bahan biologis dalam rangka untuk mendapatkan hasil yang wajar.fragmen yang lebih kecil bergerak lebih cepat daripada fragmen yang lebih besar. . sehingga memisahkan DNA sampel ke band berbeda. Untuk forensik yang lebih modern. RFLP telah digantikan oleh metodologi berdasarkan reaksi berantai polimerase yang hanya memerlukan waktu dalam hitungan menit saja. 4. Deteksi Band-band dapat divisualisasikan menggunakan pewarna luminescent.

Related Interests