1. Pengenalan Sulit membayangkan sebuah laboratorium analisis organik tanpa kromatografi gas.

Dalam waktu yang sangat singkat kromatografi gas, GC, telah menjadi utama teknik untuk pemisahan dan analisis senyawa atsiri. Itu telah digunakan untuk menganalisis gas, cairan, dan padatan-kedua biasanya dilarutkan dalam pelarut volatile. Kedua bahan organik dan anorganik dapat dianalisis, dan berat molekul dapat berkisar dari 2 sampai lebih dari 1.000 Daltons. chromatographs Gas adalah instrumen analisis yang paling banyak digunakan di dunia [1] kolom Efisien. kapiler memberikan resolusi tinggi, memisahkan lebih dari 450 komponen aroma kopi, misalnya, atau komponen dalam produk alami yang kompleks seperti minyak peppermint (lihat Gambar 1.1).. Peka detektor seperti detektor ionisasi nyala-dapat quantitate 50 ppb organik senyawa dengan standar deviasi relatif sekitar 5%. Otomatis sistem dapat menangani lebih dari 100 sampel per hari dengan minimum bawah waktu, dan semua ini dapat dicapai dengan investasi kurang dari $ 20.000. SEJARAH SINGKAT Kromatografi dimulai pada pergantian abad ketika Ramsey [2] dipisahkan campuran gas dan uap pada adsorben seperti arang dan Michael Tswett [3] pigmen tumbuhan dipisahkan dengan kromatografi cair. Tswett adalah

1

dikreditkan sebagai "bapak kromatografi" terutama karena ia

menciptakan istilah kromatografi (menulis secara harfiah warna) dan ilmiah menggambarkan proses. kertas Nya telah diterjemahkan ke dalam bahasa Inggris dan ulang [4] karena pentingnya ke lapangan. Hari ini, tentu saja, yang paling analisis kromatografi dilakukan pada bahan yang tidak berwarna. kromatografi gas adalah bentuk kromatografi di mana gas adalah fase bergerak. Pekerjaan mani penting adalah pertama kali diterbitkan pada tahun 1952 [5] ketika Martin dan rekan kerja James bertindak atas saran yang dibuat 11 tahun sebelumnya oleh Martin sendiri dalam memenangkan hadiah Nobel-kertas di partisi kromatografi [6]. Ini dengan cepat menemukan bahwa GC sederhana, cepat, dan berlaku untuk banyak pemisahan volatile terutama bahanpetrokimia, yang destilasi pilihan metode pemisahan pada waktu itu. Teori menggambarkan proses itu mudah diuji dan dipimpin untuk teori masih lebih maju. Bersamaan permintaan untuk instrumen 2

memunculkan industri baru yang merespon dengan cepat dengan mengembangkan gas baru chromatographs dengan kemampuan lebih baik. Perkembangan kromatografi dalam segala bentuknya telah sepenuhnya dieksplorasi oleh Ettre yang telah menulis hampir 50 publikasi pada kromatografi sejarah. Tiga dari artikel yang paling relevan adalah: satu fokus pada karya Tswett, Martin, Synge, dan James [7]; satu menekankan pengembangan instrumen GC [8], dan yang ketiga, yang berisi lebih dari 200 referensi pada pengembangan keseluruhan kromatografi [9]. GC Hari ini adalah teknik matang dan sangat penting. seluruh dunia ini pasar untuk instrumen GC diperkirakan sekitar $ 1 miliar atau lebih dari Instrumen 30.000 per tahun. DEFINISI Untuk mendefinisikan kromatografi memadai, beberapa istilah yang dan simbol perlu diperkenalkan, tetapi bab berikutnya adalah sumber informasi utama pada definisi dan simbol.
Chromatography

Kromatografi merupakan metode pemisahan dimana komponen-komponen partisi sampel antara dua fase: salah satu tahap adalah stasioner tempat tidur dengan area permukaan besar, dan yang lainnya adalah gas yang percolates melalui tidur stasioner. Sampel ini menguap dan dibawa oleh mobile gas fasa (gas pembawa) melalui kolom. Contoh partisi (Menyeimbangkan) ke fase cair stasioner, didasarkan pada kelarutan mereka di suhu yang diberikan. Komponen dari sampel (disebut zat terlarut atau analit) terpisah dari satu sama lain berdasarkan tekanan uap relatif mereka dan afinitas untuk tidur stasioner. Jenis proses kromatografi

"Resmi" definisi Uni Internasional Murni dan Terapan Kimia (IUPAC) adalah: "Kromatografi merupakan metode pemisahan fisik di mana komponen yang akan dipisahkan didistribusikan antara dua tahap, salah satunya adalah stasioner (fase diam) sementara yang lain (yang mobile fase) bergerak dalam arah tertentu. kromatografi Elusi adalah 3

prosedur di mana fase gerak terus melewati atau sepanjang tempat tidur kromatografi dan sampel dimasukkan ke dalam sistem sebagai keong hingga "[10]. Proses kromatografi berbagai diberi nama sesuai dengan keadaan fisik tahap selular. Jadi, dalam kromatografi gas (GC), yang fase gerak adalah gas, dan kromatografi cair (LC) fase mobile adalah cairan. subklasifikasi A dibuat sesuai dengan keadaan stasioner tahap. Jika fase diam adalah padatan, teknik GC disebut gassolid kromatografi (GSC), dan jika itu adalah cair, kromatografi gas-cair (GLC). Jelas, penggunaan gas untuk tahap selular mengharuskan sistem terkandung dan kebocoran-bebas, dan ini dicapai dengan kaca atau logam, tabung disebut sebagai kolom. Sejak kolom berisi diam fase, biasanya untuk nama kolom dengan menetapkan fase diam, dan untuk menggunakan kedua istilah ini secara bergantian. Misalnya, orang dapat berbicara tentang kolom OV-101a, yang berarti bahwa fase cair stasioner OV-101 (lihat Bab 4). Skema klasifikasi lengkap ditunjukkan pada Gambar 1.2. Catatan khususnya nama-nama yang digunakan untuk menggambarkan pipa terbuka (OT) dan kolom GC kolom LC; mereka tidak sesuai dengan pedoman yang baru saja disajikan. Namun, segala bentuk GC dapat dimasukkan dalam dua subdivisi, GLC dan GSC; beberapa dari kolom kapiler merupakan GLC dan lain-lain, GSC. Dari dua utama jenis, GLC adalah jauh lebih banyak digunakan, dan akibatnya, ia akan menerima perhatian lebih besar dalam pekerjaan ini.
The Chromatographic Process

Gambar 1.3 adalah representasi skematis dari proses kromatografi. Garis horisontal mewakili kolom, setiap baris adalah seperti sebuah snapshot dari proses pada waktu yang berbeda (meningkat dalam waktu dari atas ke bawah). Di snapshot pertama, sampel, terdiri dari komponen A dan B, diperkenalkan ke kolom di zona sempit. Hal ini kemudian dilakukan melalui kolom (dari kiri ke kanan) dengan fase gerak. Setiap partisi komponen antara dua fase, seperti ditunjukkan oleh distribusi atau puncak di atas dan di bawah garis. Puncak di atas garis merupakan jumlah komponen tertentu dalam tahap selular, dan puncak di bawah garis jumlah dalam fase diam. Komponen A

4

memiliki distribusi yang lebih besar dalam fase gerak dan sebagai akibatnya adalah dibawa menuruni kolom lebih cepat dari komponen B, yang menghabiskan lebih banyak yang waktu di fase diam. Jadi, pemisahan dari A dari B Terjadi sebagai mereka melakukan perjalanan melalui kolom. Akhirnya komponen meninggalkan kolom dan melewati detektor seperti yang ditunjukkan. Sinyal output dari detektor menimbulkan suatu kromatogram ditampilkan di sebelah kanan Gambar 1.3. Perhatikan bahwa angka menunjukkan bagaimana sebuah puncak kromatografi individu memperlebar atau memperluas saat berjalan melalui proses kromatografi. Itu tepat sejauh ini perluasan, yang hasil dari proses kinetik di tempat kerja selama kromatografi, akan dibahas dalam Bab 3. Kecenderungan dari komponen yang diberikan kepada tertarik ke stasioner fasa dinyatakan dalam istilah kimia sebagai konstanta kesetimbangan disebut distribusi konstan, Ke, kadang-kadang juga disebut koefisien partisi. distribusi konstan pada prinsipnya mirip dengan koefisien partisi yang menguasai ekstraksi cair-cair. Pada kromatografi, semakin besar nilai konstanta, semakin besar daya tarik untuk fase diam. Atau, daya tarik dapat digolongkan relatif terhadap jenis penyerapan oleh zat terlarut. Penyerapan pada permukaan fase diam adalah disebut adsorpsi dan penyerapan ke dalam sebagian besar fase cair stasioner disebut penyerapan. Istilah-istilah tersebut digambarkan dengan cara lucu dalam Gambar 1.4. Namun, kebanyakan chromatographers menggunakan istilah untuk menggambarkan partisi proses penyerapan. Jadi, mereka berbicara tentang adsorpsi di permukaan dari fase diam dan partisi sebagai melewati ke dalam sebagian besar fase stasioner. Biasanya salah satu proses yang dominan untuk diberikan kolom, tapi keduanya bisa hadir. distribusi konstan memberikan nilai numerik untuk menghitung total serapan 5

oleh zat terlarut pada atau dalam fase diam. Karena itu, mengungkapkan sejauh mana interaksi dan mengatur pergerakan zat terlarut melalui kromatografi tidur. Singkatnya, perbedaan dalam distribusi konstanta

(Parameter dikendalikan oleh termodinamika) efek pemisahan kromatografi. Beberapa kromatografi Syarat dan Simbol The IUPAC telah berusaha menyusun kromatografi istilah, simbol, dan definisi untuk semua bentuk kromatografi [10], dan mereka rekomendasi akan digunakan dalam buku ini. Namun, sampai publikasi IUPAC pada tahun 1993, tidak ada keseragaman dan dapat mengakibatkan kebingungan dari membaca lebih tua publikasi. Tabel 1.1 membandingkan beberapa konvensi lama dengan yang baru Rekomendasi IUPAC. Distribusi konstan, Ke, baru saja dibahas sebagai pengendali faktor dalam kesetimbangan partisi antara zat terlarut dan stasioner tahap. Ini didefinisikan sebagai konsentrasi zat terlarut A dalam diam fase dibagi dengan konsentrasinya dalam tahap selular.

Konstan ini adalah nilai termodinamik yang benar tergantung suhu; itu menyatakan kecenderungan relatif suatu zat terlarut untuk mendistribusikan sendiri antara dua fase. Perbedaan dalam distribusi konstanta hasil diferensial tingkat migrasi zat terlarut melalui kolom. Gambar 1.5 memperlihatkan sebuah kromatogram yang khas untuk zat terlarut tunggal, A, dengan tambahan kecil pada awal puncak kromatogram itu. Zat terlarut seperti A dipertahankan menurut kolom dan ditandai oleh volume retensi mereka, VR; yang volume retensi A terlarut digambarkan dalam gambar sebagai jarak dari titik injeksi ke puncak maksimum. Ini adalah volume gas pembawa

6

diperlukan untuk elute A. terlarut ini karakteristik dari terlarut juga bisa ditentukan oleh waktu retensi, TR, kolom laju alir ifthe, E; adalah "konstan.

Kecuali ditentukan lain, laju alir diasumsikan konstan dan retensi waktu sebanding dengan volume retensi dan keduanya dapat digunakan untuk mewakili konsep yang sama. Puncak merupakan awal kecil terlarut yang tidak sorb dalam diam melewati fase-langsung melalui kolom tanpa berhenti. Dalam GC, perilaku ini sering ditunjukkan oleh udara atau metana, dan puncak sering disebut sebuah puncak udara. VM simbol, terkadang disebut volume terus-up atau void volume, berfungsi untuk mengukur interstisial atau interpartikel volume kolom. Lain IUPAC disetujui simbol termasuk Vo dan VG, mewakili volume fasa gas mobile di kolom. Volume mati panjang, sementara tidak dianjurkan, juga banyak digunakan. Persamaan 3, salah satu persamaan kromatografi fundamental ", berkaitan volume retensi kromatografi untuk distribusi teoritis konstan.

b Karena kromatografi kolom di bawah tekanan, volume gas pembawa adalah kecil. pada inlet tekanan tinggi, tapi memperluas dalam melewati melalui kolom sebagai tekanan 7

menurun. Topik ini dibahas dalam Bab 2. C Untuk turunan dari persamaan ini, lihat: B. L. V merupakan volume dan subskrip R, M, dan S berdiri untuk retensi, mobile, dan stasioner, masing-masing. VM dan Vs mewakili volume mobile fase dan fase diam dalam kolom masing-masing. retensi ini volume, VR dapat dijelaskan dengan mengacu pada Gambar 1.5. Pemahaman tentang proses kromatografi dapat disimpulkan oleh reexamining persamaan 3. Total volume gas pembawa yang mengalir selama dengan elusi dari terlarut dapat dianggap terdiri dari dua bagian: gas yang mengisi kolom, atau sebaliknya, volume melalui mana zat terlarut harus lulus dalam perjalanannya melalui kolom yang diwakili oleh VM, dan, kedua, volume gas yang mengalir sementara terlarut tidak bergerak tetapi stasioner pada atau di tempat tidur kolom. Yang terakhir ini ditentukan oleh distribusi konstan (zat terlarut's kecenderungan untuk sorb) dan jumlah stasioner fase di kolom, Vs. Hanya ada dua hal yang terlarut dapat dilakukan: bergerak dengan aliran fase gerak ketika sedang dalam tahap selular, atau sorb ke fase diam dan tetap bergerak. Jumlah ini dua efek adalah volume retensi total, VR ' TINJAUAN: Keuntungan dan Kerugian GC memiliki beberapa keuntungan penting diringkas dalam daftar di bawah ini. Keuntungan dari Kromatografi Gas • Cepat analisis, biasanya menit • Efisien, memberikan resolusi tinggi • Sensitif, mudah mendeteksi ppm dan sering ppb • tak rusak, memungkinkan kopling on-line, misalnya, untuk spektrometer massa • Sangat analisis kuantitatif yang akurat, RSDs khas dari 1-5% • Membutuhkan kecil sampel, biasanya IJ-L • Handal dan relatif sederhana • Murah Chromatographers selalu tertarik pada analisis cepat, dan GC telah menjadi tercepat dari mereka semua, dengan instrumentasi komersial saat ini memungkinkan analisis dalam hitungan detik. Gambar 1,6 menunjukkan minyak jeruk tradisional pemisahan mengambil 40 menit, waktu analisis khas, dan sebanding satu selesai pada hanya 80 detik dengan instrumen yang dirancang khusus untuk analisis cepat. Efisiensi tinggi GC terlihat pada Gambar 1.1. Efisiensi dapat dinyatakan dalam jumlah pelat, dan kolom kapiler biasanya memiliki piring jumlah beberapa ratus ribu. Seperti yang diharapkan, informal persaingan tampaknya ada untuk melihat siapa yang dapat membuat kolom dengan

8

piring terbesar menghitung-yang "terbaik" kolom di dunia-dan karena kolom meningkatkan efisiensi dengan panjang kolom, hal ini menyebabkan persaingan untuk membuat kolom terpanjang. Saat ini, rekor paling lama terus menerus kolom dipegang oleh Chrompack Internasional [11] yang membuat 1.300-m menyatu silika kolom (ukuran terbesar yang cocok di dalam oven GC komersial). Itu memiliki plat nomor 1,2 juta yang lebih kecil dari yang diperkirakan, karena sebagian untuk batas dalam kondisi operasional. Baru-baru ini, lebih efisien kolom dibuat dengan menghubungkan sembilan 50-m kolom ke dalam satu dari total panjang 450 m [12]. Meskipun lebih pendek dari kolom Chrompack, efisiensinya hampir 100% dari teoritis, dan dihitung untuk memiliki jumlah sepiring 1,3 juta dan ditemukan mampu memisahkan 970 komponen dalam suatu sampel bensin. Karena GC sangat baik untuk analisis kuantitatif, telah ditemukan digunakan secara luas untuk aplikasi yang berbeda. Sensitif, detektor kuantitatif menyediakan cepat, analisis akurat, dan dengan biaya yang relatif rendah. Sebuah pestisida pemisahan menggambarkan kecepatan tinggi, sensitivitas, dan selektivitas GC ditampilkan di 9

Gambar 1.7. GC telah menggantikan distilasi sebagai metode yang disukai untuk memisahkan volatile material. Dalam kedua teknik, temperatur adalah variabel utama, tetapi kromatografi gas pemisahan juga tergantung pada bahan kimia alam (polaritas) dari fase diam. Hal ini membuat variabel tambahan GC lebih kuat. Selain itu, kenyataan bahwa konsentrasi terlarut sangat encer dalam kolom GC menghilangkan kemungkinan azeotropes, yang sering distilasi diganggu perpisahan. Kedua metode tersebut terbatas pada sampel stabil. Sebuah suhu atas praktis batas untuk operasi GC adalah tentang 380aC sehingga sampel harus memiliki tekanan uap yang cukup (60 torr atau lebih) pada suhu tersebut. Zat terlarut biasanya tidak melebihi titik didih 500aC dan berat molekul

1.00 Daltons. Keterbatasan utama GC tercantum di bawah ini bersama dengan lainnya kelemahan G'C, Solid Dukungan Fase Cair Kekurangan dari Kromatografi Gas • Terbatas untuk sampel volatile • Tidak cocok untuk sampel termal labil • Agak sulit untuk besar, preparatif sampel • Membutuhkan spektroskopi, spektroskopi biasanya massa, untuk konfirmasi puncak identitas Singkatnya: untuk pemisahan bahan volatile, GC biasanya metode pilihan karena kecepatan, kemampuan resolusi tinggi, dan kemudahan penggunaan. 12 Gambar. 1,9. Skema representasi (yang penuh) kolom dan (b) membuka kolom tabung. Instrumentasi 1 / 8 "o.d. (Kolom) Dikemas 0,25 mm i.d. (B) kapiler orWCOT Gambar 1.8 menunjukkan bagian-bagian dasar kromatografi gas pembawa sederhana gas, pengontrol aliran, injektor, kolom, detektor, dan sistem data. Lebih detail 10

diberikan dalam bab berikutnya. Inti kromatograf adalah kolom, yang pertama adalah logam tabung dikemas dengan mendukung inert yang dilapisi cairan stasioner. Saat ini, kolom paling populer adalah yang terbuat dari leburan silika dan terbuka tabung (PL) dengan dimensi kapiler. Fase cair stasioner dilapisi pada permukaan dalam dinding kapiler. Kedua jenis ditunjukkan dalam

Gambar 1.9 dan masing-masing jenis diperlakukan dengan kolom terpisah bab-dikemas dalam Bab 5 dan kolom kapiler dalam Bab 6. DAFTAR PUSTAKA Gambar 1.9 dan masing-masing jenis diperlakukan dengan kolom terpisah bab-dikemas dalam Bab 5 dan kolom kapiler dalam Bab 6. 1. McNair. H.. LC-GC, 10.239 (1992). 2. Ramsey, W., Proc. Roy. Soc. A76, 111 (1905). 3. Tswett, M. • Ber. embun. botan. Perlambangan., 24.316 dan 384 (1906). 4. Strain, H. H. • dan Sherrna, J. • J. Chern. Educ., 44.238 (1967). 5. James. A. T.. dan Martin, A. J. P. • Biochem. J., 50.679 (1952). 6. Martin. A. J. P.. dan Synge. R. L. M. • Biochem. J., 35, 1358 (1941). 7. Ettre. L. S. • Anal. Chern., 43, *14+, 20A-31A (1971) 8. Ellre. L. S., LC-GC, 8,716-724 (1990). 9. Ettre. L. S.. J. Chrornatogr. 112, 1-26 (1975). 10. Ettre, L. S.. Pure & Appl. Chern., 65, 819-872 (1993). Lihat juga. Ettre, L. S.. LC-GC, 11, 502 (1993). 11. de Zeeuw, J., Chrompack International BY, Middleburg, Belanda. pribadi komunikasi, 1996. 12. Berger. T. A.. Chromatographia, 42,63 (1996).

11

2. Alat Ikhtisar
Instrumentasi dalam kromatografi gas telah terus berkembang sejak pengenalan sistem komersial pertama di 1954.The komponen dasar sistem, tipikal modern kromatografi gas dibahas secara individu dalam bab ini. Gambar 2.1 menunjukkan bagan sistem gas kromatografi. Komponen yang akan dibahas meliputi: (1) gas pembawa; (2) kontrol aliran; (3) sampel inlet dan perangkat sampling; (4) kolom; (5) suhu dikendalikan zona (oven); (6) detektor, dan (7) sistem data. Singkatnya, sebuah fungsi kromatografi gas sebagai berikut. Pembawa inert gas (seperti helium) mengalir terus menerus dari sebuah silinder gas besar melalui port injeksi, kolom, dan detektor. Laju aliran dari carrier gas dikontrol dengan hati-hati untuk memastikan waktu retensi reproducible dan drift meminimalkan detektor dan kebisingan. Sampel diinjeksikan (biasanya dengan microsyringe) ke port injeksi dipanaskan di mana itu menguap dan dibawa ke dalam kolom, biasanya kolom kapiler 15-30 m panjang, dilapisi di bagian dalam dengan (tipis 0,2 JLm) film didih tinggi cair (yang diam tahap). Partisi sampel antara fase bergerak dan stasioner, dan dipisahkan menjadi komponen-komponen individu berdasarkan kelarutan relatif fase cair dan relatif uap tekanan. Setelah kolom, gas pembawa dan melewatkan sampel melalui suatu detektor. Perangkat ini mengukur jumlah sampel, dan menghasilkan sebuah listrik sinyal. Sinyal ini pergi ke suatu sistem data / integrator yang menghasilkan suatu kromatogram (Catatan tertulis dari analisis). Dalam kebanyakan kasus penanganan data-

sistem secara otomatis mengintegrasikan kawasan puncak, melakukan penghitungan dan print laporan dengan hasil kuantitatif dan waktu retensi. Setiap tujuh komponen ini akan dibahas secara lebih rinci.

12

PERUSAHAAN GAS sistem secara otomatis mengintegrasikan kawasan puncak, melakukan penghitungan dan print laporan dengan hasil kuantitatif dan waktu retensi. Setiap tujuh komponen ini akan dibahas secara lebih rinci. Helium Helium atau nitrogen Sangat kering atau nitrogen Argon, metana 5% Detektor Gas Carrier Konduktivitas termal Flame ionisasi Elektron menangkap Tujuan utama dari gas pembawa adalah untuk membawa sampel melalui kolom. Ini adalah fase gerak dan itu adalah inert dan tidak berinteraksi secara kimia dengan sampel. Tujuan sekunder adalah untuk menyediakan suatu matriks yang cocok untuk detektor untuk mengukur komponen sampel. Berikut adalah gas carrier yang lebih disukai untuk berbagai detektor:

Untuk detektor konduktivitas termal, helium yang paling populer. Sementara hidrogen umumnya digunakan di beberapa bagian dunia (di mana helium adalah sangat mahal), tidak dianjurkan karena potensi kebakaran dan ledakan. Dengan detektor ionisasi nyala, baik nitrogen atau helium dapat digunakan. Nitrogen memberikan sensitivitas sedikit lebih, tetapi lebih lambat analisis dari helium. Untuk detektor penangkapan elektron, sangat kering, oxygenfree nitrogen, atau campuran argon dengan metana 5% dianjurkan. Kemurnian Adalah penting bahwa menjadi gas pembawa kemurnian tinggi karena kotoran seperti oksigen dan air kimiawi dapat menyerang fase cair di kolom dan menghancurkannya. Polyester, polyglycol dan kolom poliamida adalah khususnya rentan. Trace jumlah air juga dapat desorb lainnya kolom kontaminan dan menghasilkan latar belakang detektor tinggi atau bahkan "Hantu puncak." Trace hidrokarbon dalam gas pembawa menyebabkan background dengan detektor ionisasi paling dan dengan demikian membatasi pendeteksian mereka. Salah satu cara untuk mendapatkan gas pembawa kemurnian tinggi untuk membeli gas kemurnian tinggi silinder. Daftar berikut membandingkan kemurnian dan harga untuk helium tersedia di Amerika Serikat:

13

Harga dikutip untuk silinder berisi 49 liter (kapasitas air) dan rate pada 2400 psi. Jelas, membeli gas pembawa kemurnian memadai ekonomis tidak layak untuk laboratorium yang paling. Praktek yang lebih umum adalah untuk membeli kelas dan Kemurnian Tinggi membersihkannya. Air dan jejak hidrokarbon dapat dengan mudah dihilangkan dengan memasang 5A filter saringan molekuler antara silinder gas dan instrumen. Pengeringan tabung tersedia secara komersial, atau mereka dapat dengan mudah dibuat oleh mengisi 6-ft. sebesar 114 "kolom dengan saringan GC molekul kelas 5A. Dalam salah kasus, setelah dua tabung gas telah digunakan, saringan diremajakan dengan memanaskan sampai 300 ° C selama 3 jam dengan arus lambat nitrogen kering. Jika buatan sendiri, 6-ft. kolom dapat digulung untuk menyesuaikan dengan mudah ke dalam kromatografi kolom oven untuk regenerasi mudah. Oksigen lebih sulit untuk menghapus dan memerlukan filter khusus, seperti katalisator BTS dari BASF, Ludwigshaven am Rhein, Oxisorb dari Supelco, atau Dow Gas pembersih dari Alltech. Flow Control dan Pengukuran 17 PENGENDALIAN DAN PENGUKURAN ARUS Pengukuran dan pengendalian flowis gas pembawa penting untuk kedua kolom efisiensi dan untuk analisis kualitatif. Kolom efisiensi tergantung pada tepat kecepatan gas linier yang dapat dengan mudah ditentukan dengan mengubah laju alir sampai nomor plat maksimal tercapai. Khas optimal nilainya: 75-90 mLimin untuk 114 "diameter luar (od) kolom dikemas; 25 mLimin untuk 118 "od kolom dikemas; dan 0,75 mLimin untuk JLm 0,25 i.d. buka tabung kolom. Nilai-nilai ini hanyalah pedoman; optimum nilai untuk kolom tertentu harus ditentukan secara eksperimental. Untuk analisis kualitatif, adalah penting untuk memiliki konstan dan reproducible laju alir sehingga waktu retensi bisa direproduksi. Perbandingan retensi kali adalah teknik tercepat dan termudah untuk identifikasi senyawa. Perlu diketahui bahwa dua atau lebih senyawa mungkin memiliki retensi yang sama waktu, tetapi senyawa tidak mungkin memiliki dua kali retensi yang berbeda. Dengan demikian, waktu retensi adalah karakteristik dari zat terlarut, tetapi tidak unik. Jelas, flow control yang baik sangat penting untuk metode identifikasi. Kontrol Kontrol pertama dalam sistem aliran adalah regulator dua tahap terhubung ke pembawa gas silinder untuk mengurangi tekanan tangki 2.500 psig ke tingkat useable dari 20-60 psig. Ini harus mencakup katup pengaman dan 14

inlet filter untuk mencegah partikel masuk itu. A stainless steel diafragma dianjurkan untuk menghindari kebocoran udara ke dalam sistem. Itu gauge pertama menunjukkan tekanan kiri di silinder gas. Dengan memutar katup pada tahap kedua, tekanan meningkat akan dikirimkan ke kromatografi gas dan akan ditunjukkan pada pengukur kedua. Yang kedua tahap regulator tidak bekerja dengan baik pada tekanan rendah dan dianjurkan bahwa minimum 20 psi digunakan. Untuk operasi isotermal, tekanan konstan cukup untuk memberikan arus konstan tingkat, dengan asumsi bahwa kolom tersebut memiliki penurunan tekanan konstan. Untuk sederhana, chromatographs gas murah yang hanya berjalan isotermal, bagian kedua dari sistem kontrol aliran dapat menjadi katup jarum sederhana; ini, bagaimanapun, tidak cukup untuk sistem penelitian. Dalam pemrograman suhu, bahkan ketika tekanan inlet konstan, laju alir akan menurun dengan naiknya temperatur kolom. Sebagai Misalnya, pada tekanan inlet dari 24 psi dan laju alir mLimin 22 (helium) pada 50 ° C, laju alir menurun sampai 10 mLimin pada 200 ° C. Penurunan ini disebabkan oleh peningkatan viskositas gas pembawa pada temperatur yang lebih tinggi. Dalam semua diprogram suhu-instrumen, dan bahkan di beberapa lebih baik isotermal yang, sebuah flowcontroller diferensial digunakan untuk memastikan laju alir massa konstan. Kadang-kadang, bagaimanapun, tidak diinginkan untuk mengendalikan laju aliran dengan seperti kontroler. Sebagai contoh, split dan injeksi sampel splitless baik denend pada: NRP l konstan. ~ ~ lJrp untuk fllnrtinninn rorrprt rnnd <: r nr "lnt" mempertahankan laju aliran yang sama melalui kolom, independen dari pembukaan dan penutupan katup pembersihan. Dengan kondisi tersebut, carrier tekanan gas dapat ditingkatkan secara elektronik selama menjalankan diprogram di Untuk mempertahankan aliran konstan. Sebuah sensor elektronik digunakan untuk mendeteksi tersebut (penurunan) laju alir dan meningkatkan tekanan ke kolom, sehingga memberikan laju alir konstan dengan mengontrol tekanan elektronik (LH). Pengukuran Arus Dua perangkat yang paling umum digunakan adalah laju alir-gelembung sabun dan aliran mengukur perangkat elektronik digital (Gambar 2.2). Para penunjuk laju alir sabun-film hanyalah sebuah tabung dikalibrasi (biasanya pipet dimodifikasi atau buret) melalui yang mengalir carrier gas. Dengan meremas bola karet, sabun adalah solusi mengangkat ke jalur gas yang mengalir. Setelah beberapa gelembung sabun diperbolehkan untuk membasahi tabung, satu gelembung secara akurat dihitung melalui didefinisikan volume dengan stopwatch. Dari pengukuran ini, laju alir gas pembawa di mlzmin mudah dihitung. Beberapa meter aliran elektronik berdasarkan prinsip yang sama, tetapi pengukuran yang dibuat dengan cahaya balok. Di dengan biaya sekitar $ 300, sebuah flow meter elektronik lebih cepat dan lebih mudah

15

digunakan dan menyediakan pembacaan tiga-digit dari laju aliran.

digabungkan dengan mikroprosesor untuk izin akurat untuk pengukuran aliran berbagai gas tanpa menggunakan gelembung sabun. Sebuah sensor silicon-on-keramik dapat digunakan untuk mengukur laju aliran 0,1-500 ml / menit untuk udara, oksigen, nitrogen, helium, hidrogen, dan argon 5% pada metana. Biaya untuk ini perangkat adalah sekitar $ 500. Harga Sangat aliran kecil seperti yang ditemui dalam kolom tabung terbuka, tidak dapat diukur secara handal dengan meter. Aliran rata-rata linier kecepatan di kolom Perjanjian Lama, ii, dapat dihitung dari persamaan 1:

dimana L adalah panjang kolom (mereka) dan TM adalah waktu retensi untuk puncak nonretained seperti udara atau metana (detik). Sejak api detektor tidak mendeteksi udara, metan biasanya digunakan untuk pengukuran ini, tapi kondisi kolom harus dipilih (suhu tinggi cukup) sehingga bahwa hal itu tidak ditahan. Konversi kecepatan linier di Ern / detik mengalir

16

tingkat (dalam mLimin) dicapai dengan mengalikan dengan luas penampang kolom (1Tr2). Lihat Lampiran IV. Kompresibilitas Carrier Gas Sejak ~ Carr gas eh masuk kolom GC berada di bawah tekanan dan IS kolom outlet biasanya pada tekanan atmosfer, p adalah tekanan inlet greate ~ daripada tekanan outlet, Po. Akibatnya, gas comp; es ~ ed di Inlet itu sebuah? mengembang saat melewati kolom; yang volumetrik Meningkatkan laju alir juga! rom kepala kolom untuk outlet. Kami ~ sekutu laju aliran volumetnc diukur di outlet mana di m ~ a ~ I um. Untuk mendapatkan laju alir rata-rata, Fe, aliran outlet harus multIphed oleh faktor kompresibilitas yang disebut, j:

Beberapa nilai khas j diberikan dalam Lampiran VII. Jika salah menghitung volume retensi dari waktu retensi, avera e laju alir ~ bahu digunakan, dan volume retensi yang dihasilkan disebut e ~ t mengoreksi volume retensi

masa jabatannya ~ sh uld tidak bingung dengan volume retensi disesuaikan e disajikan dalam bab berikutnya. SAMPEL lubang DAN ALAT SAMPLING 17

inlet The.samPle harus menangani berbagai macam sampel termasuk gas eOhds: dan, akhirnya mengizinkan mereka untuk menjadi cepat dan kuantitatif intro ~ Ke UCE t e c ~ ~ rner gas.str am. berbeda jenis kolom yang berbeda memerlukan v Idealnya, sampel adalah segera disuntikkan ke kolom, tetapi dalam praktek ini adalah mustahil dan tujuan lain yang lebih realistis adalah untuk memperkenalkan sebagai tajam simetris band. Kesulitan menjaga sampel tajam dan sempit dapat dihargai dengan mempertimbangkan penguapan dari microliter 1,0 sampel benzena. Setelah injeksi, benzen, menguap menjadi 600 uL dari uap. Dalam kasus kolom kapiler (pada laju alir 1 mLlmin), 36 detik akan diperlukan untuk membawanya ke kolom. Ini akan sangat lambat bahwa pita lebar awal akan menghasilkan hasil dan kolom sangat miskin kinerja (N rendah). Jelas, sampling merupakan bagian yang sangat penting dari proses kromatografi dan ukuran sampel sangat penting. Tidak ada satu ukuran sampel optimum. Beberapa pedoman umum tersedia, namun. Tabel 2.1 daftar ukuran sampel yang khas untuk tiga jenis kolom. Untuk bentuk puncak terbaik dan resolusi maksimum, yang terkecil ukuran sampel mungkin harus selalu digunakan. Semakin banyak komponen hadir dalam sampel, semakin besar ukuran sampel mungkin perlu. Dalam kebanyakan kasus, kehadiran komponen lainnya tidak akan mempengaruhi lokasi dan bentuk puncak dari suatu zat terlarut tertentu. Untuk melacak pekerjaan, dan untuk pekerjaan-skala preparatif, sering terbaik untuk menggunakan ukuran sampel besar bahkan meskipun mereka akan "membebani" kolom. Puncak utama mungkin parah terdistorsi, tetapi (jejak) yang diinginkan puncak akan lebih besar, sehingga memungkinkan untuk mencapai hasil yang diinginkan. Gas Sampling metode sampling Gas mengharuskan seluruh sampel dalam fase gas di bawah kondisi yang digunakan. Campuran gas dan cairan pose khusus masalah. Jika memungkinkan, campuran baik harus dipanaskan, untuk mengkonversi semua komponen untuk gas, atau bertekanan, untuk mengkonversi semua komponen untuk cairan. Sayangnya, hal ini tidak selalu memungkinkan.

jarum suntik Gas-gas sampling ketat dan katup yang paling sering digunakan metode untuk sampling gas. jarum suntik adalah lebih fleksibel, lebih murah dan perangkat yang paling sering digunakan. Sebuah katup gas-sampling di tangan memberikan pengulangan yang lebih baik, membutuhkan keterampilan kurang dan dapat lebih mudah otomatis. Lihat Bab 5 untuk rincian lebih lanjut tentang katup. 18

Sampliug Cair Sejak cairan memperluas jauh ketika mereka menguap, hanya sampel kecil ukuran yang diinginkan, biasanya microliters. Jarum suntik hampir yang universal Metode injeksi cairan. Yang paling umum digunakan ukuran untuk cairan adalah 1, 5, dan 10 microliters. Dalam situasi di mana cairan sampel dipanaskan (seperti pada semua jenis menguap penyuntik) untuk memungkinkan penguapan cepat sebelum in.to bagian kolom, perhatian harus diambil untuk menghindari overheating yang dapat mengakibatkan Dalam dekomposisi termal.

Solid Sampling Padatan yang terbaik ditangani dengan melarutkan mereka dalam pelarut yang sesuai, dan dengan menggunakan jarum suntik untuk menyuntikkan solusi. Sarankan terjemahan yang lebih baik
Jarum suntik Gambar 2.3 menunjukkan jarum cair IO-microliter biasanya digunakan untuk menyuntik satu untuk FIV ~ ~ icroliters?. ~ cairan atau larutan. The plunger baja stainless cocok erat di dalam tong terbuat dari kaca presisi borosilikat. Jarum, stainless steel juga, adalah epoxyed ke laras. Model-model lain memiliki removable jarum yang sekrup ke ujung laras. Untuk volume yang lebih kecil 1-m ~ c ~ jarum suntik olit.er juga tersedia. Sebuah jarum suntik gas-ketat IO-mililiter adalah kita ~ d untuk mjectmg sampel gas sampai sekitar 5 mililiter dalam ukuran. Yang berguna saran adalah untuk selalu menggunakan jarum suntik yang jumlah volume sampel paling sedikit dua kali lebih besar dari volume yang harus disuntikkan. Menggunakan sebuah jarum suntik Dalam mengisi jarum microliter dengan cairan, adalah diinginkan untuk menyingkirkan semua udara awalnya. Ini bisa dicapai dengan berulang kali menarik cairan ke jarum suntik dan cepat mengusir kembali ke dalam cairan. cairan viskos harus tertarik ke dalam tabung suntik perlahan; pengusiran yang sangat cepat dari cairan kental

bisa membelah jarum suntik. Bila terlalu kental, sampel dapat diencerkan dengan pelarut yang sesuai. . . Buatlah lebih cair ke dalam jarum suntik dari Anda berencana untuk Inject. Pegang jarum suntik secara vertikal dengan jarum mengarah ke atas sehingga udara yang masih dalam tabung suntik akan pergi ke puncak laras. Plunger menekan sampai membaca nilai yang diinginkan; kelebihan udara seharusnya dikeluarkan. Bersihkan jarum dengan tisu, dan menarik udara segar ke dalam jarum suntik sekarang bahwa volume yang 19

tepat cairan telah diukur. udara ini akan melayani dua tujuan: pertama, ia akan sering memberikan puncak pada kromatogram, yang dapat digunakan untuk mengukur tm; kedua, udara mencegah cairan dari hilang jika plunyer sengaja ditekan. Untuk suntik, gunakan satu tangan untuk memandu jarum ke dalam septum dan lainnya untuk menyediakan kekuatan untuk menembus septum dan juga untuk mencegah plunger dari yang ditiup oleh tekanan di GC. Hal yang terakhir ini penting ketika volume besar sedang disuntikkan (misalnya, gas sampel) atau ketika tekanan inlet sangat tinggi. Dengan kondisi tersebut, jika tidak peduli dieksekusi, plunger akan ditiup keluar dari tabung suntik. Masukkan jarum cepat melalui septum dan sampai ke injeksi port mungkin dan menekan plunger, menunggu menarik atau dua detik, kemudian jarum (menjaga plunger tertekan) sebagai cepat dan lancar mungkin. Perhatikan bahwa prosedur alternatif yang sering digunakan dengan terbuka tubular kolom. Hati-hati; port injeksi kebanyakan dipanaskan dan Anda dapat dengan mudah membakar diri sendiri. Antara sampel, tabung suntik harus dibersihkan. Ketika cairan mendidih tinggi sedang digunakan, maka harus dicuci dengan pelarut metilen seperti volatile klorida atau aseton. Ini dapat dilakukan dengan berulang kali menarik cairan cuci ke dalam jarum suntik dan mengusir itu. Akhirnya, plunyer akan dihapus dan jarum suntik kering dengan menarik udara melalui dengan sebuah pompa vakum (tepat terperangkap) atau aspirator air. Tarik udara melalui jarum sehingga debu tidak bisa masuk ke laras untuk menyumbat itu. Lap plunger dengan tisu dan masukkan kembali. Jika jarum akan tumpul, bisa diasah pada batu asah kecil Autosamplers Sampel dapat disuntikkan secara otomatis dengan alat mekanis yang sering ditempatkan di atas chromatographs gas. Autosamplers ini meniru proses injeksi manusia yang baru saja dijelaskan dengan menggunakan jarum suntik. Setelah pembilasan dengan pelarut, mereka menyusun beberapa kali sampel yang diperlukan dari sebuah botol tertutup dan kemudian menyuntikkan volume yang tetap ke dalam inlet GC standar. Autosamplers terdiri dari sebuah nampan yang mengandung sejumlah besar sampel, standar, dan mencuci pelarut, semua yang dirotasi ke posisi bawah jarum suntik sebagai diperlukan. Mereka dapat berjalan tanpa pengawasan, sehingga memungkinkan banyak sampel yang akan dijalankan semalam. Autosamplers memberikan presisi lebih baik dari manual injectiontypically 0,2% standar deviasi relatif (RSD).
Septa

20

Syringe injeksi dilakukan melalui septum diri penyegel, suatu polimer silikon dengan stabilitas temperatur tinggi. Banyak jenis septa secara komersial tersedia, beberapa terdiri dari lapisan dan beberapa memiliki film Teflon '"di sisi kolom. Dalam memilih salah satu, sifat yang seharusnya dipertimbangkan adalah: stabilitas suhu tinggi, jumlah septum "berdarah" (Dekomposisi), ukuran, seumur hidup, dan biaya. Kolom Gambar 2.4 menunjukkan bagan kolom dikemas dalam longitudinal lintas bagian. Kolom itu sendiri biasanya terbuat dari stainless steel dan dikemas erat dengan fase diam pada dukungan solid inert dari diatome bumi dilapisi dengan lapisan tipis cairan. Fase cair biasanya merupakan 3, 5, atau 10% dari berat total fase diam. Dikemas kolom 'biasanya tiga, enam, atau dua belas meter panjangnya. Itu diameter luar biasanya 114 "atau 118". Stainless steel digunakan paling sering, terutama karena kekuatannya. Kaca kolom yang inert lagi, dan mereka sering digunakan untuk melacak pestisida dan sampel biomedis yang mungkin bereaksi dengan pipa baja stainless lebih aktif. kolom Dikemas mudah untuk membuat dan mudah digunakan. Berbagai besar fase cair tersedia. Karena kolom yang padat dengan partikel kecil, panjang lebih dari 20 meter tidak praktis, dan hanya sederhana Jumlah piring biasanya dicapai (sekitar 8.000 maksimum). Dikemas kolom dibahas secara rinci dalam Bab 5. kolom kapiler adalah kolom chromatograpic sederhana, yang tidak diisi dengan bahan paking. Sebaliknya, sebuah film tipis mantel fasa cairan dalam dinding tabung leburan silika 0,25 mm. kolom tersebut dengan benar

disebut "dinding berlapis tubular terbuka" atau hanya WCOT kolom. Karena tabung terbuka, perlawanannya terhadap aliran sangat rendah untuk itu ~, panjang leng hs ~, sampai 100 meter, yang mungkin. Ini panjang panjang sangat efisien izin ~ ~ Parations dari campuran sampel kompleks. Capilla leburan silika colu y ~ ~ ~ s adalah yang paling inert. Buka tabung (OT) kolom tercakup m m detail Bab 6. . h. Tabel 2.2 membandingkan dua tipe utama kolom dan daftar t err keuntungan, kerugian, dan beberapa aplikasi khas. 21

SUHU ZONA Kolom ini thermostated sehingga separatio baik ~ w.ill terjadi dalam jumlah waktu yang wajar. Hal ini sering diperlukan untuk mempertahankan kolom pada berbagai suhu, dari ambien o ~ 360 ° C. T ~ e kendali suhu adalah salah satu yang paling mudah dan efektif v: a.ys ~ o mempengaruhi pemisahan. Kolom ini tetap bet.ween port injeksi dipanaskan. dan detektor panas, begitu tampaknya appropnate untuk membahas tingkat suhu di mana komponen ini dioperasikan. Temperatur Injeksi-port Port injeksi harus cukup panas ~ o. ~ Va orize tersebut. sampel dengan cepat sehingga bahwa tidak ada kerugian dalam hasil efisiensi dari techmque injeksi. Di sisi lain tangan, suhu injeksi-port harus cukup rendah sehingga termal dekomposisi atau penataan ulang avoid.ed kimia. .. . Untuk injeksi flash penguapan, aturan umum IS memiliki injeksi suhu sekitar 50 ° C lebih panas daripada mendidih ~ n ~ P? int sampel. A tes praktis adalah untuk menaikkan suhu port mjecnon. Jika kolom

~ ~ ~ Ci;; ~ ~ ~ atau Pteat bentuk meningkatkan, suhu injeksi-port terlalu . e en waktu kembali ION, daerah puncak atau h sha. suhu mungkin terlalu tinggi dan 'de. ~ E c anges drastis, composmon h atau rearrangeme t ave mungkin terjadi. Untuk injeksi on-kolom inlet n t lebih rendah. 'Emperature dapat 26 Alat Ikhtisar Temperatur Kolom Suhu kolom harus cukup tinggi sehingga sam le com ~ Pa s melalui ini dengan kecepatan easonable ~. Ini tidak perlu tht fhan tinggi ~ ~ ~ n. ts POInto! sampel; Pada kenyataannya adalah biasanya lebih disukai jika t Colum 01 mg ~ ~; Ke ~ ~ Side abIY di bawah titik didih. Jika yang tampaknya tidak logis: l, e ~~;: oper umn co ~ ~ tes pada temperatur di mana sampel di va itu negara-It tidak perlu Dalam keadaan gas Di GC saya th por menjadi:: ~ I: t; e "~ e ~ ~ Poin 'dari' sam? le: i: t ~ ~ ~: ~ v e ::~~ ep: ~ ~ ~ 110, dan 1300C '~ t ~ 5; ctahr ~ pada sampel IS dijalankan pada kolom yang sama di 75, . e uap tekanan saya sam rendah dan mereka bergerak perlahan melalui kolom. Dua adalah ~; e ~ ~ ~ fon: NTS
22

diselesaikan dengan baik sebelum eak-8 C: h "ane oc panjang, pada 24 menit. p, owever, waktu analisis sangat 12 Pada te lebih tinggi ~ ~ perat res, retensi kali menurun. Pada 110 ° C Cpeak yang IS keluar Dalam 8 menit dan 130 ° C yang saya. . . t b 'ySIS sebuah IS lengkap dalam 4 mmu es, ut resolusi menurun. Perhatikan bahwa t. tidak lagi diselesaikan di t tinggi ane oc Isomer adalah analisis kali lagi, tetapi Bette ~ r: s ~ fu ~~~ kembali. suhu rendah berarti Isotermal vs, Suhu Programmed (PTGC) isotermal menunjukkan analisis kromatografi pada satu colu konstan suhu. Programmed temperatur mengacu pada peningkatan linear kolom Sarankan terjemahan yang lebih baik

suhu dengan waktu. Suhu pemrograman sangat berguna untuk lebar sampel campuran mendidih dan sangat populer. Rincian lebih lanjut dapat ditemukan dalam Bab 9. Suhu detektor Suhu detektor tergantung pada jenis detektor yang digunakan. Sebagai aturan umum, namun, detektor dan koneksi dari kolom keluar harus cukup panas untuk mencegah kondensasi dari sampel dan / atau fase cair. Jika suhu terlalu rendah dan kondensasi terjadi, puncak memperluas dan bahkan total kerugian puncak adalah mungkin. Suhu detektor konduktivitas termal harus dikendalikan untuk ± Ol ° C atau lebih baik bagi stabilitas baseline dan detectivity maksimum. Ionisasi detektor tidak memiliki persyaratan yang ketat; suhu mereka harus dipertahankan cukup tinggi untuk menghindari larutan sampel dan juga air atau dengan produk-terbentuk dalam proses ionisasi. Sebuah wajar suhu minimum untuk detektor ionisasi nyala adalah 125 ° E.
DETECTORS

Sebuah detektor merasakan limbah dari kolom dan memberikan catatan kromatografi dalam bentuk sebuah kromatogram. Detektor sinyal adalah proporsional dengan jumlah masing-masing zat terlarut (analit) yang memungkinkan analisis kuantitatif. Detektor yang paling umum adalah detektor ionisasi nyala, FID. Hal ini 23

karakteristik yang diinginkan sensitivitas yang tinggi, linieritas, dan detectivity namun itu adalah relatif sederhana dan murah. Detektor populer lainnya sel konduktivitas termal (TCD) dan detektor menangkap elektron (ECD). Ini dan beberapa orang lainnya yang dijelaskan dalam Bab 7. SISTEM DATA Sejak kolom OT menghasilkan puncak cepat, persyaratan utama yang baik sistem data adalah kemampuan untuk mengukur sinyal GC dengan cepat sampling tukar. Saat ini ada sebuah array dari perangkat keras, yang dimungkinkan oleh kemajuan teknologi komputer, yang dengan mudah dapat melakukan fungsi ini. Secara umum, ada dua jenis sistem yang sama digunakan-integrator dan komputer. Mikroprosesor integrator berbasis kabel hanya keras, berdedikasi mikro prosesor yang menggunakan analog-ke-digital (A-to-D) converter untuk menghasilkan baik kromatogram (sinyal analog) dan digital untuk laporan kuantitatif analisis. Mereka pada dasarnya perlu menghitung awal, puncak, akhir, dan luas puncak masing-masing. Algoritma untuk melakukan fungsi-fungsi ini telah tersedia untuk Kebanyakan integrator melakukan persen daerah, persen tinggi, standar internal, eksternal standar, dan perhitungan normalisasi. Untuk detektor nonlinier, beberapa standar dapat disuntikkan, meliputi daerah puncak bunga, dan perangkat lunak dapat melakukan kalibrasi bertingkat. Operator kemudian memilih sebuah kalibrasi rutin integrator yang cocok untuk output detektor tertentu. Banyak integrator menyediakan program BASIC, kontrol digital instrumen parameter, dan analisis otomatis, dari injeksi untuk pembersihan kolom dan injeksi sampel berikutnya. Hampir semua integrator menyediakan antarmuka RS-232-C sehingga output GC kompatibel dengan "di rumah" jaringan digital. sistem berbasis komputer pribadi kini telah berhasil dipindahkan ke kromatografi laboratorium. Mereka menyediakan cara mudah untuk menangani tunggal atau kromatografi beberapa sistem dan memberikan output baik lokal maupun remote terminal. Komputer memiliki fleksibilitas yang lebih besar dalam memperoleh data, instrumen kontrol, reduksi data, display dan transfer ke perangkat lain. Memori meningkat, kecepatan pemrosesan dan user interface fleksibel membuat mereka lebih populer daripada integrator berdedikasi. Saat ini berbasis komputer mengandalkan sistem terutama pada kartu A-to-D, yang dihubungkan ke PC utama bingkai. Versi sebelumnya menggunakan kotak terpisah yang berdiri sendiri A-to-D atau yang dihubungkan ke integrator berdiri sendiri. Seperti menurunkan biaya untuk PC, popularitas mereka niscaya akan meningkat. 3. Konsep Dasar dan Syarat Dalam Bab 1, definisi dan istilah yang disajikan untuk memfasilitasi deskripsi sistem kromatografi. Dalam bab ini, istilah tambahan diperkenalkan dan terkait dengan teori dasar kromatografi. Silahkan lihat untuk Tabel 1.1 dalam Bab 1 untuk daftar beberapa simbol. Membuat khusus catatan dari orang-orang yang direkomendasikan oleh IUPAC, mereka adalah orang-orang yang 24

digunakan dalam buku ini. Bab ini dilanjutkan dengan presentasi dari Teori Rate, yang menjelaskan proses yang terlarut adalah puncak diperluas karena mereka lulus melalui kolom. Tingkat teori memperlakukan aspek kinetika kromatografi dan memberikan pedoman untuk mempersiapkan efisien kolom-kolom yang terus memperluas ke puncak minimum. DEFINISI, SYARAT, DAN SIMBOL Konstan Distribusi Sebuah kesetimbangan termodinamika konstanta yang disebut konstanta distribusi, K; disajikan pada Bab 1 sebagai parameter pengendali dalam menentukan seberapa cepat bergerak terlarut diberikan ke kolom GC. Untuk terlarut atau analit ditunjuk A,

dimana tanda kurung menunjukkan konsentrasi molar dan subskrip Pasir M mengacu pada fase stasioner dan mobile masing-masing. Semakin besar distribusi konstan, semakin Sorbs zat terlarut dalam fase stasioner, dan semakin lama disimpan di kolom. Karena ini adalah keseimbangan konstan, orang akan menganggap kromatografi yang merupakan proses keseimbangan. Jelas tidak, karena fasa gas mobile terus bergerak terlarut molekul bawah kolom. Namun, jika kinetika transfer massa cepat, sistem kromatografi akan beroperasi dekat dengan keseimbangan dan dengan demikian distribusi konstan akan menjadi deskripsi yang memadai dan bermanfaat. Asumsi lain biasanya tidak lain adalah bahwa zat terlarut tidak berinteraksi , Dengan satu sama lain. Artinya, molekul zat terlarut A melewati melalui kolom seolah-olah tidak ada zat terlarut lainnya yang hadir. Asumsi ini masuk akal karena konsentrasi yang rendah dalam kolom dan karena zat terlarut semakin terpisah satu sama lain ketika mereka melalui kolom. Jika interaksi terjadi, hasil kromatografi akan menyimpang dari yang diperkirakan oleh teori; bentuk puncak dan volume retensi mungkin akan terpengaruh. Faktor Retensi Dalam memanfaatkan distribusi konstan dalam kromatografi, akan sangat berguna untuk mematahkannya menjadi dua istilah.

3 adalah rasio volume fasa dan k adalah faktor retensi.

25

Untuk kolom kapiler yang tebal film, d-, dikenal, (3 dapat dihitung dengan menggunakan persamaan 4,

mana rc adalah jari-jari kolom kapiler. Jika, seperti yang biasanya terjadi, rc ~ d., persamaan 4 tereduksi menjadi:

Untuk kolom kapiler, khas (3-nilai ratusan, sekitar 10 kali nilai di kolom yang dikemas (3 adalah tidak mudah dievaluasi. Rasio volume fasa adalah parameter yang sangat berguna untuk mengetahui dan dapat membantu dalam memilih kolom yang tepat. Beberapa nilai yang khas yang diberikan dalam Tabel 3.1. Faktor retensi, k, adalah rasio jumlah zat terlarut (bukan concentraion zat terlarut) dalam fase diam dengan jumlah di mobile fase:

Semakin besar nilai ini, semakin besar jumlah yang diberi zat terlarut dalam fase diam, dan karenanya, semakin lama itu akan disimpan pada kolom. Dalam hal ini, faktor retensi mengukur sejauh mana suatu zat terlarut adalah ditahan. Dengan demikian, hal itu sama berharga parameter sebagai distribusi konstan, dan merupakan salah satu yang dapat dengan mudah dievaluasi dari kromatogram tersebut. Untuk sampai pada suatu definisi kerja yang berguna, persamaan 2 adalah ulang dan Persamaan 3 adalah diganti ke dalamnya, menghasilkan:

Mengingat persamaan dasar kromatografi diperkenalkan pada Bab 1,

26

dan mengatur ulang menghasilkan sebuah istilah baru, V ~, volume retensi disesuaikan.

Ini adalah volume retensi disesuaikan yang berbanding lurus dengan distribusi termodinamik konstan dan karena itu sering parameter digunakan dalam persamaan teoretis. Pada dasarnya ini adalah waktu retensi diukur dari puncak nonretained (udara atau metana) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1.5. Menata ulang persamaan 9 dan mensubstitusikan ke persamaan 7 menghasilkan , Berguna bekerja definisi k:

Karena kedua volume retensi, V ~ dan VM, dapat diukur secara langsung dari kromatogram, sangat mudah untuk menentukan faktor retensi untuk terlarut seperti yang diilustrasikan pada Gambar 3.1. nilai relatif k termasuk dalam Tabel 3.1 untuk membantu dalam perbandingan jenis kolom tabel di sana. Perhatikan bahwa semakin banyak suatu zat terlarut merupakan milik fase diam, yang lebih besar adalah volume retensi dan semakin besar adalah faktor retensi. Dengan demikian, meskipun distribusi konstan mungkin tidak dikenal untuk suatu zat terlarut, faktor retensi dari kromatogram mudah diukur, dan dapat digunakan sebagai pengganti distribusi konstan untuk mengukur sejauh relatif penyerapan oleh zat terlarut. Namun, jika / 3 dikenal (seperti yang biasanya terjadi untuk OT kolom), distribusi konstanta dapat dihitung dari persamaan 2. Karena definisi volume retensi disesuaikan diberikan di atas, dan definisi terkait volume retensi dikoreksi diberikan dalam Bab 2 (persamaan 4), kita harus memastikan bahwa kedua tidak bingung dengan satu sama lain. Masing-masing memiliki definisi sendiri khusus nya: yang volume retensi disesuaikan, V ~ adalah volume retensi termasuk kekosongan

27

volume (diukur dari metana atau udara puncak) seperti yang ditunjukkan dalam persamaan 9; volume retensi dikoreksi, ~, adalah nilai mengoreksi untuk compres-

sibility dari gas pembawa dan berbasis pada tingkat aliran rata-rata. Masih volume retensi lain yang mewakili nilai yang baik disesuaikan dan dikoreksi, akan tetapi disebut volume retensi bersih, VN:

Akibatnya, untuk GC, persamaan 9 harus lebih tepat ditulis sebagai:

Tergantung pada titik tertentu mereka membuat, chromatographers gas merasa bebas untuk menggantikan volume retensi disesuaikan dalam situasi di mana mereka harus menggunakan volume retensi bersih. Di LC, tidak ada yang signifikan kompresibilitas fase mobile dan dua nilai dapat digunakan secara bergantian. Faktor keterbelakangan Cara lain untuk mengungkapkan perilaku retensi dari terlarut adalah untuk membandingkan kecepatannya melalui kolom, / L, dengan kecepatan "rata-rata mobile fase gas, u:

Parameter baru yang didefinisikan oleh persamaan 13 disebut faktor keterbelakangan, R. Meskipun tidak terlalu banyak digunakan, juga dapat dihitung secara langsung dari Data hasil kromatografi, dan beruang hubungan menarik untuk k. Untuk sampai pada suatu definisi komputasi, kecepatan terlarut dapat dihitung dengan membagi panjang kolom, L, dengan waktu retensi dari diberikan zat terlarut,

dimana L adalah dalam cm atau mm dan waktu retensi dalam hitungan detik. Demikian pula, kecepatan linear rata-rata gas dihitung dari waktu retensi untuk nonretained puncak seperti udara:

28

sebuah Ingat dari Bab 2 bahwa kecepatan linear dari fase mobile bervariasi melalui kolom karena kompresibilitas gas pembawa, sehingga nilai yang digunakan dalam persamaan 12 adalah kecepatan linear rata-rata, biasanya ditunjuk sebagai u. Menggabungkan persamaan 10, 13, dan 14 hasil definisi komputasi faktor keterbelakangan:

Karena volume kedua dapat diperoleh dari kromatogram, yang faktor retardasi mudah dievaluasi, seperti yang terjadi untuk faktor retensi. Perhatikan bahwa k Rand yang berbanding terbalik terkait. Untuk sampai pada hubungan yang tepat, persamaan 16 adalah disubstitusikan ke persamaan 8, menghasilkan:

Faktor keterbelakangan mengukur sejauh mana suatu zat terlarut adalah terbelakang dalam bagian melalui kolom, atau tingkat pecahan di mana suatu zat terlarut bergerak. Nilainya selalu akan sama dengan, atau kurang dari, satu. Hal ini juga merupakan bagian dari zat terlarut dalam fase gerak pada setiap diberikan waktu dan, sebagai alternatif, fraksi waktu rata-rata menghabiskan zat terlarut dalam tahap selular. Sebagai contoh, sebuah terlarut khas, A, mungkin retensi faktor 5, yang berarti bahwa saldo 5 kali lebih lama dari sebuah nonretained puncak. Its faktor retardasi, 1 / (1 + k), adalah 1 / 6 atau 0,167. Ini berarti bahwa sebagai zat terlarut melewati kolom, 16,7% dari itu berada di mobile fasa dan 84,3% berada di fase diam pada saat tertentu. Untuk lain terlarut, B, dengan faktor retensi 9, persentase relatif adalah 10% di fase gerak dan 90% pada fase stasioner. Jelas, zat terlarut dengan afinitas lebih besar untuk sorbing dalam fase stasioner, B dalam contoh kita, persentase lebih besar menghabiskan waktu dalam fase diam, 90% versus 84,3% untuk A. Faktor keterbelakangan juga dapat digunakan untuk menjelaskan bagaimana pada-kolom injeksi bekerja. Ketika B disuntikkan pada-kolom, 90% dari itu Sorbs ke stasioner fasa dan hanya 10% masuk ke negara uap. Angka ini menunjukkan bahwa tidak perlu untuk "menguap" semua bahan disuntikkan, bahkan, sebagian besar zat terlarut pergi langsung ke fase diam. Demikian pula, dalam Bab 9, R akan membantu dalam pemahaman kita tentang Gc suhu diprogram. Faktor keterbelakangan hanya didefinisikan untuk kromatografi kolom adalah sama faktor RF dalam kromatografi lapis tipis, memungkinkan chromatographers cair untuk menggunakan dua parameter untuk membandingkan data TLC dan HPLC. 29

Dan akhirnya, mungkin membantu dalam memahami makna dari retensi faktor untuk dicatat bahwa konsep ini serupa pada prinsipnya untuk fraksi diekstraksi konsep dalam ekstraksi cair-cair. Bentuk Puncak Kami telah mencatat bahwa molekul zat terlarut bertindak independen individu satu lain selama proses kromatografi. Sebagai hasilnya, mereka menghasilkan

agregasi acak kali retensi setelah diulang sorptions dan desorptions. Hasil untuk terlarut diberikan adalah distribusi, atau puncak, yang bentuk dapat diperkirakan sebagai normal atau Gaussian. Ini adalah puncak bentuk yang mewakili ideal, dan ditampilkan dalam semua tokoh dalam buku kecuali bagi mereka yang puncak kromatogram nyata tidak ideal. Nonsymmetrical puncak biasanya menunjukkan bahwa beberapa interaksi yang tidak diinginkan telah terjadi selama proses kromatografi. Gambar 3.2 menunjukkan beberapa bentuk-bentuk yang kadang-kadang terjadi pada sampel yang sebenarnya. Broad puncak seperti (b) Gambar 3.2 lebih sering terjadi pada kolom dikemas dan biasanya menunjukkan bahwa kinetika perpindahan massa terlalu lambat (lihat Teori Rate dalam bab). Kadang-kadang, seperti di beberapa kolom aplikasi dikemas GSC (lihat Bab 5), sedikit dapat dilakukan untuk memperbaiki situasi. Namun, itu adalah chromatographer adalah tujuan untuk membuat puncak sempit seperti mungkin dalam rangka untuk mencapai perpisahan terbaik. puncak asimetris dapat diklasifikasikan sebagai tailing atau fronting tergantung pada lokasi asimetri. Besarnya asimetri didefinisikan sebagai tailing faktor (TF) (Gambar 3.3).

A dan b diukur sebesar 10% dari tinggi puncak sebagai shown.b Seperti terlihat dari persamaan, puncak tailing akan memiliki TF yang lebih besar dari satu. Simetri berlawanan sepertinya mendukung, akan menghasilkan TF kurang dari satu. Sementara

30

Definisi ini dirancang untuk memberikan ukuran tingkat tailing dan Dinamakan demikian, itu juga mengukur fronting. Puncak doublet, seperti (e) pada Gambar 3.2, dapat mewakili sepasang zat terlarut yang tidak cukup dipisahkan, lain tantangan bagi chromatographer tersebut. Pengulangan dari puncak doublet harus diverifikasi karena seperti bentuk puncak juga dapat hasil dari teknik injeksi salah, terlalu banyak sampel, atau kolom rusak (lihat Bab 11). Untuk diskusi teoritis dalam bab ini, bentuk ideal Gaussian puncak akan diasumsikan. Karakteristik bentuk Gaussian dikenal; Gambar 3.4 menunjukkan puncak kromatografi yang ideal, The poin infleksi terjadi di ketinggian 0,607 dari puncak dan garis singgung titik-titik ini menghasilkan segitiga dengan lebar dasar, Wb, sama dengan empat deviasi standar, 40 ', dan lebar pada ketinggian setengah, Wh dari 2,3540 '. Lebar puncak adalah 20 'di infleksi yang titik (60,7% dari ketinggian). Ciri ini digunakan dalam definisi dari beberapa parameter, termasuk nomor pelat. Plat Nomor Untuk menggambarkan efisiensi kolom kromatografi, kita perlu mengukur lebar puncak, tapi satu yang relatif terhadap waktu retensi puncak karena lebar meningkat dengan waktu retensi seperti yang telah kita dicatat sebelumnya. Tokoh 3,5 memperluas menggambarkan fenomena yang merupakan konsekuensi alamiah dari proses kromatografi. Ukuran paling umum efisiensi sistem kromatografi adalah nomor plat, N:

31

Gambar 3.6 menunjukkan pengukuran yang dibutuhkan untuk membuat perhitungan ini. Berbeda istilah timbul karena pengukuran 0 'dapat dilakukan di berbagai ketinggian di puncak. Di dasar puncak, Wb adalah 40 ", sehingga numerik konstan adalah 42 atau 16. Pada ketinggian setengah, Wh adalah 2,3540 'dan konstan menjadi 5,54 (lihat Gambar 3.4).. Independen simbol-simbol yang digunakan, baik pembilang dan penyebut harus diberikan dalam satuan yang sama, dan oleh karena itu, N unitless. Khas baik waktu retensi dan lebar puncak diukur sebagai jarak pada

32

bagan kromatografi. Atau, keduanya bisa berada di volume baik unit atau unit waktu. Tidak peduli yang dibuat perhitungan, nilai besar untuk N menunjukkan kolom efisien yang sangat diinginkan. Untuk puncak kromatogram yang berisi banyak, nilai N bagi individu puncak dapat bervariasi (mereka harus meningkatkan sedikit dengan waktu retensi)

tergantung pada keakuratan pengukuran yang dilakukan. Hal ini praktek umum, namun, untuk memberikan nilai pada kolom tertentu berdasarkan hanya pada satu pengukuran meskipun nilai rata-rata akan lebih baik. Plat Tinggi Sebuah parameter yang terkait yang menyatakan efisiensi kolom adalah piring tinggi, H,

dimana L adalah panjang kolom. H memiliki satuan panjang dan lebih baik daripada N untuk membandingkan efisiensi dari kolom-kolom panjang yang berbeda. Hal ini juga disebut Height Setara ke Satu Teoritis Plate (HETP), istilah yang 33

dibawa dari terminologi distilasi. diskusi lebih lanjut dapat H ditemukan kemudian dalam bab ini. Sebuah kolom yang baik akan memiliki N besar dan H. Kecil Resolusi Lain ukuran kolom efisiensi adalah resolusi, Rs. Seperti di lain teknik analisis, resolusi istilah digunakan untuk menyatakan derajat puncak yang berdekatan dipisahkan. Untuk kromatografi, definisi ini,

dimana d adalah jarak antara puncak maksima untuk dua zat terlarut, A dan B. Gambar 3.7 mengilustrasikan cara resolusi dihitung. Garis singgung tertarik ke titik infleksi untuk menentukan lebar dari puncak di markas mereka. Biasanya, daerah puncak dekat sama akan memiliki lebar puncak yang sama, dan (Wb) A akan sama (Wb) B. Oleh karena itu, persamaan 21 adalah dikurangi menjadi:

Dalam Gambar 3.7, garis singgung hanya menyentuh sehingga d = Wb dan Rs = 1.0. Itu lebih besar nilai resolusi, semakin baik pemisahan; dasar lengkap, pemisahan memerlukan resolusi 1.5. Sebenarnya, persamaan 21 dan 22 hanya berlaku bila ketinggian dari dua puncak yang sama, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3.7. Untuk rasio lainnya ketinggian puncak, kertas oleh Snyder [2] harus berkonsultasi untuk komputer

Tabel 3.2 berisi ringkasan yang paling penting kromatografi definisi dan persamaan, dan daftar lengkap simbol dan akronim adalah termasuk dalam Lampiran I. TEORI RATE 34

Upaya awal untuk menjelaskan band kromatografi perluasan adalah berdasarkan model keseimbangan yang kemudian dikenal sebagai Plate Teori. Sementara itu nilai tertentu, itu tidak berurusan dengan yang nonequilibrium kondisi yang benar-benar ada dalam kolom dan tidak mengatasi penyebab pelebaran band. Namun, pendekatan alternatif menggambarkan kinetik faktor segera disajikan; itu dikenal sebagai Teori Rate. Persamaan van Deemter Asli Makalah paling berpengaruh menggunakan pendekatan kinetik diterbitkan oleh van Deemter, Klinkenberg, dan Zuiderweg pada tahun 1956 [3]. Ini mengidentifikasi tiga efek yang berkontribusi untuk memperluas band di kolom dikemas; difusi pusaran (A-istilah), difusi molekul longitudinal (B-panjang), ~ d massa transfer dalam fase cair diam (C-panjang). Perluasan adalah dinyatakan dalam tinggi piring, H, sebagai fungsi. av ~ marah kecepatan gas linear, U. Dalam bentuk sederhana, van Deemter Persamaan IS:

Karena tinggi berbanding terbalik plat nomor plat, nilai kecil menunjukkan puncak-sempit kondisi yang diinginkan. Dengan demikian, masing-masing dari tiga konstanta, A, B, dan C harus diminimalkan untuk memaksimalkan kolom efisiensi. Persamaan Golay Sejak kolom tubular atau kapiler terbuka tidak memiliki kemasan, mereka persamaan laju tidak memiliki A-panjang. Kesimpulan ini menunjukkan oleh Golay [4], yang juga mengusulkan istilah baru untuk menangani difusi

35

proses dalam fase gas kolom tabung terbuka. persamaan-Nya memiliki dua C-istilah, satu untuk perpindahan massa dalam fase diam, Cs (mirip dengan van Deemter), dan satu untuk perpindahan massa dalam fase gerak, CM. Sederhana persamaan Golay adalah:

B-persamaan jangka waktu 24 account untuk difusi molekuler terkenal. Persamaan yang mengatur difusi molekul,

mana Da adalah koefisien difusi zat terlarut dalam gas pembawa. Tokoh 3,8 menggambarkan bagaimana sebuah zona molekul berdifusi dari daerah tinggi konsentrasi dengan konsentrasi yang lebih rendah dengan waktu. Persamaan yang memberitahu kita bahwa nilai kecil untuk koefisien difusi diinginkan sehingga difusi seminimal mungkin, menghasilkan nilai kecil untuk B dan untuk H. Secara umum, rendah koefisien difusi dapat dicapai dengan menggunakan gas pembawa dengan yang lebih besar molekul berat seperti nitrogen atau argon. Dalam persamaan Golay (persamaan 24), istilah ini dibagi dengan kecepatan linear, sehingga kecepatan besar atau aliran juga akan meminimalkan tingkat kontribusi B-panjang untuk keseluruhan puncak pelebaran. Artinya, kecepatan tinggi akan mengurangi waktu terlarut menghabiskan dalam kolom dan dengan demikian mengurangi waktu yang tersedia untuk difusi molekul. C-istilah dalam persamaan Golay berhubungan dengan perpindahan massa zat terlarut, baik dalam fase diam atau dalam tahap selular. Idealnya, cepat solut

penyerapan dan desorpsi akan menjaga molekul terlarut berdekatan dan band terus memperluas ke sebuah mimimum. Perpindahan massa dalam fase stasioner dapat dijelaskan dengan mengacu pada Gambar 3.9. Dalam kedua bagian dari gambar, puncak atas merupakan 36

distribusi suatu zat terlarut di fase gerak dan puncak yang lebih rendah distribusi pada fase stasioner. Sebuah distribusi konstan 2 digunakan dalam contoh sehingga puncak yang lebih rendah telah dua kali daerah yang atas. Pada kesetimbangan, mencapai distribusi zat terlarut relatif seperti yang ditunjukkan pada bagian (a), tapi sesaat kemudian gas mobile bergerak kurva atas hilir menimbulkan situasi yang ditunjukkan pada (b). Molekul zat terlarut dalam diam fasa stasioner; molekul-molekul zat terlarut dalam fasa gas telah pindah depan orang-orang di fase diam sehingga memperbesar zona keseluruhan molekul. Molekul zat terlarut yang telah bergerak maju sekarang harus partisi ke dalam fase diam dan sebaliknya bagi mereka yang berada di fasa diam, seperti yang ditunjukkan oleh panah. Semakin cepat mereka bisa membuat ini transfer, semakin sedikit akan menjadi band perluasan. The Cs-panjang dalam persamaan Golay adalah,

dimana d. adalah rata-rata ketebalan film fase diam cair dan Ds adalah koefisien difusi zat terlarut dalam fasa diam. Untuk meminimalkan kontribusi istilah ini, ketebalan film harus kecil dan difusi koefisien besar. difusi yang cepat melalui film tipis memungkinkan molekul zat terlarut untuk tetap dekat bersama. film tipis dapat dicapai dengan lapisan kecil jumlah cairan di dinding kapiler, tetapi difusi koefisien biasanya tidak dapat dikendalikan kecuali dengan memilih viskositas rendah stasioner cairan. Minimalisasi hasil Cs panjang ketika perpindahan massa masuk dan keluar dari cairan stasioner adalah secepat mungkin. Sebuah analogi akan mempertimbangkan orang melompat masuk dan keluar dari kolam renang, apakah air dangkal, proses dapat dilakukan dengan cepat; jika dalam, tidak bisa. Jika fase diam adalah, solid modifikasi pada C-istilah yang diperlukan untuk menghubungkannya dengan kinetika adsorpsi-desorpsi sesuai. Sekali lagi, semakin cepat proses kinetika, semakin dekat adalah keseimbangan, dan kurang adalah perluasan band. Bagian lain dari Cs-panjang adalah rasio k / (l + kf besar nilai k Hasil dari kelarutan tinggi pada fase stasioner. Rasio ini diminimalkan sebesar nilai besar k, tapi sangat sedikit penurunan terjadi di luar nilai-k sekitar 20. Karena nilai-nilai besar retensi hasil analisis faktor dalam waktu lama, sedikit keuntungan diperoleh oleh k-nilai yang lebih besar dari 20. Perpindahan massa dalam tahap selular dapat divisualisasikan dengan mengacu pada Gambar 3.10 yang menunjukkan profil dari zona terlarut sebagai konsekuensi dari

37

non-turbulen aliran melalui tabung. Pencampuran yang tidak memadai (lambat kinetika) di fase gas dapat menghasilkan band memperluas karena molekul zat terlarut di tengah kolom bergerak mendahului mereka di dinding. Diameter Kecil kolom meminimalkan perluasan ini karena jarak transfer massa relatif kecil. persamaan Golay untuk istilah CM adalah,

mana rc adalah jari-jari kolom. Kepentingan relatif dari kedua istilah C-dalam persamaan laju tergantung terutama pada ketebalan film dan jari-jari kolom. Ettre [5] telah menerbitkan 38

perhitungan untuk beberapa zat terlarut pada beberapa khas 0,32 mm id kolom. Ringkasan perhitungan-Nya diberikan dalam Tabel 3.3 menunjukkan bahwa dalam tipis film (0,25 JLm) 95% dari total C-istilah yang timbul dari perpindahan massa fase gerak, (CM), sedangkan untuk film tebal (5,0 JLm) hanya 31,5%.

Perpanjangan dari perhitungan-Nya untuk kolom diameter lain menunjukkan bahwa pada diameter lebih kecil (misalnya, 0,25 mm), CMterm kurang mendominasi dan untuk diameter yang lebih besar (misalnya, 0,53 mm) itu adalah sekitar tiga kali lebih besar, hingga sekitar 50%. Sebagai generalisasi, kita dapat menyimpulkan bahwa untuk film tipis «0,2 / Lm), yang C-istilah ini dikendalikan oleh transfer massa dalam fase gerak; untuk film tebal (2-5,0 / Lm), itu dikendalikan oleh transfer massa pada fase stasioner, dan untuk film-film intermediate (0,2-2,0 / Lm) kedua faktor perlu dipertimbangkan. Untuk lebih besar "lebar-menanggung" kolom (lihat Bab 6), pentingnya perpindahan massa dalam fase gerak adalah jauh lebih besar. Terakhir, kami mencatat bahwa C-istilah dikalikan dengan kecepatan linear dalam persamaan 24, sehingga mereka dapat diminimalkan dengan kecepatan rendah. Lambat kecepatan memberikan waktu bagi molekul untuk berdifusi masuk dan keluar dari fase cair dan untuk berdifusi di kolom dalam fasa gas mobile. Handphone Tahap Misa Transfer pada Kolom Dikemas Sebagai awalnya diusulkan oleh van Deemter et ai., A-istilah ditangani dengan pusaran difusi seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3.11. Jalan difusi tiga molekul diperlihatkan pada gambar. Semua mulai tiga pada posisi awal yang sama, tetapi mereka menemukan jalur yang berbeda melalui packed bed dan tiba pada akhir kolom, karena jarak perjalanan yang berbeda. Karena tingkat aliran pembawa gas konstan, mereka tiba pada waktu yang berbeda dan terpisah dari masing-masing lainnya. Dengan demikian, untuk sejumlah besar molekul, proses difusi pusaran atau hasil efek multi-path dalam memperluas band seperti ditunjukkan. A-istilah dalam persamaan Deemter van adalah, 39

mana dp adalah diameter partikel dikemas dalam kolom dan A adalah faktor kemasan. Untuk meminimalkan A, partikel kecil yang harus digunakan dan mereka seharusnya akan semakin penuh sesak. Dalam prakteknya, batas bawah pada ukuran partikel ditentukan oleh penurunan tekanan di kolom dan kemampuan untuk pak seragam partikel sangat kecil. ukuran Mesh sekitar 100/120 adalah common. "rentang Kecil dalam ukuran juga mempromosikan kemasan yang lebih baik (A minimal), sehingga 1001120 adalah berbagai mesh lebih baik daripada mengatakan 80/120. Karena persamaan van asli Deemter tidak termasuk panjang CM, sebuah persamaan van diperpanjang Deemter yang meliputi panjang A dan CMterm telah diusulkan [6]. Sebuah versi sederhana dari persamaan diperpanjang adalah:

dimana w adalah faktor hambatan bagi tempat tidur dikemas (fungsi dari padat dukungan). Persamaan ini telah menemukan penerimaan umum meskipun beberapa orang lain telah diusulkan dan dibahas pada bagian berikutnya. Juga harus dicatat bahwa B-istilah dalam Deemter van asli persamaan termasuk faktor tortuositas, 'Y, yang juga rekening untuk alam tempat tidur penuh sesak. Tidak ada faktor seperti di B-istilah untuk membuka tabung kolom, tentu saja. Persamaan Rate lain modifikasi tambahan untuk persamaan van Deemter asli telah diusulkan oleh pekerja lain. Misalnya, orang dapat berargumentasi bahwa difusi pusaran (A-jangka) adalah bagian dari massa transfer fase mobile (orang-istilah CM) atau digabungkan dengan itu. Giddings [7] telah sepenuhnya membahas perpindahan massa dan lebih suka istilah digabungkan menggabungkan difusi eddy dan transfer massa untuk menghasilkan persamaan baru. Lain telah menetapkan persamaan laju yang akan melayani GC dan LC [8]. Sebuah diskusi yang menarik banyak meringkas pekerjaan ini telah diterbitkan oleh Hawkes 9 []. persamaan ringkasan Nya dalam bentuk yang sama seperti Golay's, tetapi kurang spesifik. Referensi dapat dikonsultasikan untuk informasi lebih lanjut. Van Deemter Plot Ketika persamaan laju diplot (H vs u), van disebut Deemter Plot mengambil bentuk hiperbola nonsymmetrical, ditunjukkan pada Gambar 3.12. Sebagai yang diharapkan dari suatu persamaan di mana satu istilah yang dikalikan dengan kecepatan sementara yang lain dibagi dengan itu, ada minimum dalam kurva-an kecepatan optimal yang memberikan efisiensi tertinggi dan terkecil piring tinggi.

40

Ini adalah logis untuk mengasumsikan kromatografi yang akan dilakukan pada (Optimum) diwakili oleh kecepatan minimum di kurva karena hasil puncak paling perluasan. Namun, jika kecepatan dapat meningkat, analisis waktu akan berkurang. Akibatnya, chromatographers telah mengabdikan waktu mereka untuk memanipulasi persamaan van Deemter untuk mendapatkan kinerja terbaik untuk analisis waktu terpendek. Dengan memeriksa relatif pentingnya istilah individu secara keseluruhan persamaan di Gambar 3.12, satu melihat bahwa kemiringan ke atas sebagai kecepatan meningkat datang sekitar dari kontribusi yang semakin meningkat dari istilah-C. Oleh karena itu, perhatian yang paling memiliki terfokus pada meminimalkan mereka, sebuah topik yang akan dibahas segera. Sedangkan tingkat teori adalah konsep teoritis, itu adalah satu berguna dalam praktek. Hal ini umum untuk memperoleh plot van Deemter untuk kolom seseorang dalam rangka untuk mengevaluasi dan kondisi operasi. Sebuah terlarut dipilih dan menjalankan isotermal pada berbagai laju aliran, yang lupa untuk memberikan waktu yang cukup untuk keseimbangan tekanan setelah setiap perubahan. Nomor pelat dievaluasi dari setiap kromatogram dengan menggunakan persamaan 19 dan kemudian digunakan untuk menghitung piring tinggi (persamaan 20). Ketinggian plat nilai diplot versus linear kecepatan (diperoleh dengan persamaan 15). Kecepatan minimum adalah juga tercatat sebagai sebagai kemiringan kurva pada kecepatan yang lebih tinggi. Perbandingan antara kolom akan membantu dalam pemilihan kolom yang terbaik. Van Deemter persamaan jarang digunakan untuk menghitung H.

41

Ringkasan dari Persamaan Laju Deemter van dan Golay Mari kita menyimpulkan diskusi ini dengan mempertimbangkan hanya dua tingkat persamaan-satu untuk kolom tabung terbuka dan satu untuk kolom dikemas. Yang pertama adalah diwakili oleh persamaan Golay:

dan yang terakhir oleh persamaan Deemter diperpanjang van;

nilai mereka dalam meningkatkan kinerja kromatografi diringkas dalam bagian berikut.
Implikasi Praktis Kembali ke saran sebelumnya kami yang chromatographers mencari cara untuk meminimalkan kedua H dan waktu analisis, mari kita bandingkan efek dari carrier gas pada persamaan laju untuk kolom kapiler. Satu dapat memilih untuk mengoptimalkan efisiensi kolom (nomor pelat) atau waktu analisis. Untuk diberikan kolom, gas molekul berat yang lebih tinggi akan menghasilkan lebih banyak piring sejak yang difusivitas terlarut diminimalkan (B-istilah). Nitrogen, memiliki tinggi berat molekul, menunjukkan minimum yang lebih rendah H. Jika seseorang ingin mengoptimalkan kecepatan analisis, Namun, lebih baik memilih gas pembawa ringan, seperti helium, atau hidrogen. Mengacu pada Gambar 3,13, orang melihat nitrogen yang memiliki perusahaan H minimal dengan kecepatan gas linear 12 Ern / detik. The minimum untuk helium dan hidrogen terjadi pada sekitar 20 dan 40 em / detik, masing-masing. Jika semua gas dijalankan pada H minimum, nitrogen akan piring menghasilkan sekitar 15% lebih, tetapi pada waktu analisis 3,3 kali lebih lama dari hidrogen. Akhirnya, kita harus memeriksa kemiringan kurva luar minimum dalam Gambar 3.13. Kita melihat bahwa hidrogen, gas ringan, memiliki terkecil

42

lereng. Ini berarti bahwa dengan meningkatnya laju aliran hidrogen, kecil kerugian pada kolom efisiensi dapat diimbangi dengan keuntungan besar dalam kecepatan analisis ". Jika kita dapat memilih panjang kolom untuk mengoptimalkan pemisahan yang diberikan, carrier gas ringan akan menyediakan piring maksimum per detik, dan dengan demikian analisis tercepat kali. Seperti telah kita lihat, C-istilah mendominasi dengan kecepatan tinggi dan kolom optimasi dicapai dengan mengoptimalkan mereka. Faktor apa yang berkontribusi untuk sebuah C dioptimalkan panjang? Yang paling penting adalah ketebalan film yang harus kecil. Komersial kolom yang tersedia dengan film 0,1 p, m meskipun 0,25 p, film m lebih umum. Sementara film tipis memberikan efisiensi tinggi dan baik untuk tinggi-senyawa mendidih, harus diingat bahwa mereka hanya bisa mengakomodasi ukuran sampel yang sangat kecil. diameter kolom Kecil diinginkan (r kecil, dalam jangka-CM), terutama jika dilapisi dengan film tipis. Kolom komersial terkecil adalah 0,10 mm diameter (i.d.). Sekali lagi, ukuran sampel yang kecil diperlukan. Juga, kami telah mencatat bahwa hidrogen adalah gas pembawa yang lebih disukai untuk cepat, analisis efisien, namun, perawatan khusus harus diambil untuk digunakan dan terjamin keamanannya. Untuk kolom dikemas, tipis film, kolom yang sempit, dan helium atau hidrogen gas pembawa juga diinginkan untuk operasi yang efisien. Ketebalan film tidak dapat diukur dengan mudah, dan sebagai alternatif, persen menurut beratnya fase cair biasanya diberikan. cakupan ini tergantung pada permukaan wilayah dan kepadatan dukungan solid; beberapa beban diberikan setara dalam Bab 5 (Tabel 5.3). Jika cairan stasioner terlalu sedikit diterapkan pada padat dukungan, sebagian akan tetap terbuka dan tidak dilapisi, biasanya menghasilkan adsorpsi yang tidak diinginkan dan tailing. Biasanya kolom dengan o.d. dari 1/8inch adalah yang terkecil yang tersedia secara komersial, meskipun disebut micropacked kolom 0.75mm i.d. (O.d. 1/6-inch) tersedia untuk beberapa tahap. Selain itu, partikel harus seragam ukuran kecil (misalnya 100-120

43

mesh) dan seragam ketat dan dikemas dalam kolom. inertness The dari dukungan yang solid sangat penting dan dibahas dalam Bab 5. Sebuah Redefinisi H Sekarang kita telah terkait tinggi piring, H, untuk variabel-variabel penting dalam persamaan laju, hal ini mungkin berguna untuk melihat dari perspektif lain. Konsep berasal dari plat tinggi teori penyulingan di mana kolom digambarkan sebagai mengandung piring atau "teoritis" piring. Setiap lempeng menempati ruang tertentu (tinggi) di kolom penyulingan, atau, jika ada ada piring fisik, setiap tahap kesetimbangan itu dianggap sebagai salah satu plat teoritis. Jadi, tinggi piring adalah ketinggian kolom diduduki oleh satu piring. Dalam kromatografi kami telah melanjutkan penggunaan istilah-istilah dan ada teori piring yang memperlakukan kromatografi kolom sebagai meskipun isinya piring teoritis. Namun, kami diskusi tentang laju teori telah mengembangkan konsep tinggi piring sebagai tingkat puncak memperluas untuk terlarut saat melewati kolom. Jadi, lebih istilah yang tepat mungkin kolom dispersivity atau tingkat band pelebaran. Bahkan, definisi lain-Nya,

wher cr ~ adalah varians atau kuadrat dari standar deviasi yang mewakili lebar puncak, dan L mengacu pada panjang (atau jarak) gerakan suatu zat terlarut. . A ~ unde lebih baik standingof makna H dapat diperoleh dengan combinmg beberapa persamaan disajikan sebelumnya, dimulai dengan definisi H sama dengan PBB. Mengganti definisi N (persamaan 19), kita mendapatkan:

Sekarang kita menyamakan persamaan 32 dan 33:

dan memecahkan, Akibatnya, makna dari L untuk situasi ini (GC) merupakan retensi waktu, dan konsep H untuk GC yang terbaik dinyatakan sebagai:

atau varians (lebar puncak) per satuan waktu, atau, mengatur: Persamaan 37 memberikan kita defintion H yang juga menyediakan jawaban atas pertanyaan tentang sejauh mana puncak memperluas selama kromatografi proses: lebar puncak, dinyatakan dalam (T, sebanding dengan akar kuadrat waktu retensi. Jadi, pada kolom tertentu, suatu zat terlarut dengan retensi waktu dua kali yang lain akan memiliki lebar puncak 1,4 kali (square root 2) lebar lainnya. Atau, bila menggunakan satu terlarut untuk membandingkan dua kolom yang berbeda hanya dalam panjang, lebar puncak zat terlarut di

44

kolom lagi akan akar kuadrat dari rasio panjang mereka, kali lebar pada kolom lebih pendek.

ATAS PENCAPAIAN DARI SEPARAnON Kita telah melihat bagaimana sebuah zona analit menyebar atau memperluas saat melewati kromatografi kolom. Mungkin kelihatannya zona ini memperluas bertindak bertentangan dengan niat kami untuk zat terlarut terpisah dan bisa mencegah kromatografi dari menjadi efektif. Hal ini kontraproduktif, tetapi tidak tidak mencegah kita dari mencapai pemisahan dengan kromatografi. Pertimbangkan persamaan yang disederhanakan untuk resolusi disajikan di awal bab ini:

Meskipun benar bahwa lebar puncak, di sini diwakili oleh Wb, meningkat sebagai akar kuadrat dari panjang kolom, L, jarak antara dua puncak, d, meningkat secara langsung dengan L. Jadi,

resolusi sebanding dengan akar kuadrat dari panjang kolom. Efek ini ditunjukkan secara grafis dalam Gambar 3.14, dimana d dan Wb adalah berkomplot melawan L. Pada beberapa nilai L, ditandai dengan garis putus-putus, d menjadi lebih besar dari Wb dan pemisahan dicapai. kesimpulan kami adalah bahwa kromatografi bekerja, dan selama dua zat terlarut memiliki beberapa perbedaan dalam konstanta distribusi mereka, itu harus mungkin untuk memisahkan mereka jika kolom dapat dibuat cukup lama. Artinya, proses kromatografi adalah efektif meskipun menghasilkan puncak perluasan. Dalam prakteknya, tentu saja, satu jarang menggunakan kolom panjang meningkat sebagai satu-satunya metode untuk mencapai pemisahan.

45

3. Stationary Phases
Dari dua keputusan penting dalam membuat analisis kromatografi gas, memilih kolom terbaik (biasanya fase terbaik stasioner) adalah lebih penting. Yang lain, memilih suhu kolom, kurang penting karena suhu dapat dengan mudah diprogram melalui berbagai nilai untuk menemukan nilai optimum. (Lihat Bab 9.) Bab ini membahas jenis fase stasioner, mereka klasifikasi, mereka aplikasi, dan kriteria yang digunakan dalam memilih cairan yang tepat fasa untuk pemisahan tertentu. Dengan kolom dikemas, pemilihan fase diam adalah kritis, tetapi kurang begitu untuk kolom tabung terbuka karena efisiensi yang lebih tinggi. Masing-masing bab mengabdikan diri untuk masing-masing jenis kolom dua, dan bab ini lebih relevan untuk dikemas kolom (Bab 5). PEMILIHAN KOLOM A Bagian ini menyangkut dasar ilmiah untuk memilih fase diam, tapi pertama-tama kita harus mengakui bahwa ada cara lain untuk memilih kolom GC. Cara termudah dan tercepat adalah dengan meminta seseorang yang tahu. Orang itu mungkin bekerja di laboratorium atau di gang. Jika ada chromatographer berpengalaman terdekat atau dapat diakses untuk Anda, Anda tidak perlu ragu-ragu bertanya. Ada juga rumah pasokan kromatografi dengan informasi lengkap, banyak yang sudah diterbitkan-beberapa di katalog mereka. Semakin, aplikasi data sedang dibuat tersedia dalam bentuk komputerisasi. Chrompack telah memproduksi CD-ROM yang disebut CP-SCANVIEW dan sebuah disket disebut CP-SCAN yang mengandung lebih dari 1250 aplikasi GC dan LC. Mereka juga meletakkan data-data ini di situs Web mereka di Internet seperti yang J & W Ilmiah, yang telah membuat sastra aplikasinya yang tersedia pada web. Ajukan pertanyaan-pertanyaan; memberikan aplikasi apotik mereka panggilan. Cara lain adalah untuk membuat pencarian pustaka. GC adalah dewasa ilmu pengetahuan; itu sangat mungkin bahwa GC telah diterapkan ke jenis sampel sudah ada lebih dari 100.000 GC publikasi. Dengan akses siap Kimia Abstracts on-line, seorang ilmuwan sastra berpengalaman harus dapat datang dengan saran untuk membantu Anda. Sebuah pilihan ketiga adalah pergi ke laboratorium dan membuat percobaan beberapa berjalan. Beberapa kolom yang baik dan kondisi khas yang disarankan pada Tabel 4.1. Dengan mereka, Anda dapat dengan mudah membuat lari cepat kepramukaan pada sampel baru Anda. KLASIFIKASI TAHAPAN statis selama GLC Dalam Bab 1, tercatat bahwa fase diam dapat berupa cairan atau padat. Cairan yang lebih umum dan menimbulkan subklasifikasi yang dikenal sebagai kromatografi gas-cair, GLC. Padat dan kromatografi gas-padat, GSC, akan dibahas nanti dalam bab ini. Untuk menggunakan cairan sebagai fase diam di GC, beberapa cara harus ditemukan untuk menahan cairan di dalam kolom. Untuk kolom dikemas, cairan dilapisi pada dukungan solid, dipilih untuk daerah permukaan yang tinggi dan inertness. 46

Dukungan dilapisi kering-dikemas ke dalam kolom seketat mungkin. Untuk kolom tubular terbuka (OT) atau kapiler, cairan dilapisi pada bagian dalam kapiler. Untuk membuatnya lebih baik mematuhi, fase cair sering cross-linked luas dan kadang-kadang resin ke menyatu permukaan silika. Lihat Bab 6 untuk rincian lebih lanjut. Fase Cair Persyaratan Ratusan cairan telah digunakan sebagai fase stasioner karena hanya persyaratan adalah tekanan uap yang rendah, stabilitas termal, dan jika mungkin,

telah melakukan proses seleksi yang rumit dan beberapa skema klasifikasi diperlukan untuk menyederhanakannya. . '. Beberapa contoh akan membantu untuk menggambarkan efek dari o polanty? seleCtIVI ~ y, Agar efektif sebagai fase diam, cairan yang dipilih harus berinteraksi dengan komponen sampel yang akan dianalisis. Apotek aturan praktis "Seperti larut seperti" menunjukkan bahwa kutub cair harus digunakan untuk menganalisis kutub analit dan cairan untuk analit nonpolar nonpolar. Gambar 4.1 menunjukkan ~ pemisahan campuran pestisida pada dua kolom: sebuah ~ nonpolar E-30 dan OV-210b • lebih polar Jelas, pemilihan yang tepat stasioner cair sangat penting, dalam hal ini kolom worke baik kutub ~ f? r kutub pestisida. SE nonpolar-30 adalah pelana yang baik ~ mn (efisiensi tinggi) tetapi tidak efektif untuk sampel (faktor pemisahan kecil,; melihat next section). . " Dalam perbandingan dua fase stasioner yang ekstrim berbeda nces ~ dalam polaritas, urutan elusi dapat sepenuhnya terbalik. ~ O ~ exam.p! E, FIg.ure 4.2 menunjukkan pemisahan dari empat senyawa yang memiliki titik didih sama

47

di kedua kolom polar, Carbowaxf 20MC, dan non olar ~ c ~ lumn, SE-30 [1]. Urutan elusi dibalik. Hasil dari perubahan-fase stasioner

Masalahnya kimia adalah untuk memprediksi perilaku retensi untuk zat terlarut sementara kekurangan sistem yang baik untuk menentukan polaritas. Kita lihat dalam Bab 3 bahwa volume retensi disesuaikan berbanding lurus dengan distribusi konstan Kc 'sehingga bisa menjadi ukuran polaritas, tetapi distribusi konstanta umumnya tidak diketahui. Yang terbaik yang bisa kita lakukan dalam konteks teks singkat ini adalah untuk membahas beberapa prinsip dasar polaritas berdasarkan pada pengetahuan kita tentang gaya antar. Polaritas dan antarmolekul Angkatan Menentukan polaritas fase stasioner adalah rumit dan tidak mudah diukur. Polaritas ditentukan oleh gaya antar yang kompleks dan sulit untuk memprediksi dalam sistem kromatografi. Polaritas dari murni cair dapat ditentukan oleh momen dipol nya. Sifat fisik lainnya, seperti titik didih dan tekanan uap, mencerminkan tingkat antarmolekul pasukan. Sebuah momen dipol besar dan titik didih yang tinggi akan mencerminkan tinggi polaritas dan gaya antarmolekul yang kuat. Namun, parameter ini berhubungan untuk cairan murni, dan di GLC, kami tertarik pada gaya antar antara dua molekul yang berbeda-suatu zat terlarut di negara uap dan cairan fase stasioner. Sistem semacam ini rumit dan tidak mungkin di waktu untuk menghasilkan skala numerik tunggal yang dapat digunakan untuk mewakili 48

semua mungkin interaksi. c Klasik, gaya antarmolekul telah diklasifikasikan sebagai van der Waals gaya (tercantum pada Tabel 4.2) dan ikatan hidrogen. Dari van der Waals pasukan, dispersi hadir antara semua senyawa organik, bahkan nonpolar yang. Akibatnya, dispersi tidak menarik banyak kecuali jika nonpolar hidrokarbon adalah zat terlarut. Induksi dan orientasi memberikan kekuatan selektivitas untuk sistem kromatografi, dan mereka menyebabkan polaritas kami telah membahas. Namun, upaya-upaya untuk memperbaiki ini chromatographers generalisasi polaritas ke parameter yang lebih berguna belum dari banyak nilai praktis. Ikatan hidrogen lebih baik dipahami dan dibuktikan hanya jika salah satu molekul memiliki atom hidrogen terikat pada atom elektronegatif seperti nitrogen atau oksigen. Contohnya adalah alkohol dan amina yang dapat keduanya menyumbangkan dan menerima atom hidrogen untuk membentuk ikatan hidrogen. Lain molekul seperti eter, aldehida, keton, dan ester hanya dapat menerima proton-mereka tidak untuk donasi. Oleh karena itu mereka dapat membentuk ikatan hidrogen hanya dengan donor seperti alkohol dan amina. ikatan hidrogen relativitas

TIV ~ ly kekuatan yang kuat dan mereka ver ~ penting dalam kromatografi; participatmg molekul biasanya digolongkan sebagai donor ikatan hidrogen dan / atau ikatan hidrogen akseptor. Kekuatan ikatan hidrogen juga dapat menyebabkan interaksi yang tidak diinginkan. Zat terlarut mampu ikatan hidrogen dapat menjadi melekat pada dinding injeksi port, mendukung solid, dan tabung kolom. Seringkali adsorpsi mengakibatkan desorptions lambat sehingga menimbulkan puncak nonsymmetrical disebut tailing puncak. Ini tidak diinginkan dalam bentuk asimetri puncak seringkali dapat dihilangkan derivatizing permukaan oleh gugus hidroksil pada dinding dan pada dukungan solid permukaan. Silanization dari solid mendukung dibahas dalam Bab 5. Efek gabungan dari semua kekuatan antarmolekul tidak dapat diperlakukan secara teoritis untuk menghasilkan polaritas "" nilai untuk sebuah molekul tertentu. Sebaliknya, empiris pengukuran, dan indeks dihitung dari pengukuran empiris, telah dirancang untuk mewakili polaritas molekul. Faktor Pemisahan Faktor pemisahan, sebuah, adalah parameter mengukur distribusi relatif konstanta; nilai dapat ditentukan dari suatu kromatogram. Selama dua puncak berdekatan, faktor pemisahan adalah rasio dari mereka relatif disesuaikan volume retensi

49

didefinisikan sehingga (VR.) 2 adalah puncak eluting kedua. Seperti tercantum dalam persamaan 1, faktor pemisahan ini juga sama dengan rasio faktor retensi atau rasio konstanta distribusi untuk dua puncak. Dengan demikian, itu merupakan relatif interaksi antara masing-masing zat terlarut dan fase diam dan dapat digunakan untuk mengekspresikan gaya antarmolekul yang relatif dan besarnya kesamaan atau perbedaan. Dalam prakteknya, ia memberitahu kita bagaimana sulitnya adalah untuk memisahkan kedua zat terlarut-semakin besar nilai dari sebuah, semakin mudah pemisahan. Jika = 1,00, tidak ada kelarutan diferensial dan tidak ada pemisahan mungkin. Untuk meringkas: K; dan k adalah konstanta yang menunjukkan sejauh gaya antarmolekul antara terlarut dan fase stasioner, sedangkan menyatakan kelarutan diferensial untuk dua zat terlarut pada diberikan stasioner tahap. Hubungan antara a dan resolusi yang diberikan oleh persamaan 2.

Dengan menggunakan persamaan ini, dan membuat asumsi masuk akal, dapat dihitung bahwa seorang yang baik, kolom dikemas mampu menyelesaikan puncak dengan anilai sekitar 1,1; kolom kapiler, memiliki nomor plat yang lebih besar yaitu diperlukan untuk resolusi zat terlarut dengan sma ler ~ a-nilai, d? WN untuk kira-kira! 1,02. Meningkatkan pemisahan dapat mempengaruhi accomphshed oleh banyak perubahan dari tiga parameter, N, k atau a. Untuk kolom dikemas, adalah seringkali parameter dengan pengaruh terbesar. Mengubah itu acco ~ ~ sually plished b.y mengubah fase diam dan dengan demikian mengubah polanty tersebut. Yaitu mengatakan, jika seseorang memiliki pemisahan buruk pada kolom dikemas, ia / dia biasanya memilih fase stasioner yang berbeda. Prosedur ini akan bekerja pada kolom PL juga, tapi kolom OT memiliki seperti efisiensi yang tinggi (N-nilai) yang mengubah kolom kurang sering. Itu Parameter ketiga, k, dapat ditingkatkan dengan menurunkan suhu kolom, biasanya strategi yang efektif, terutama dengan kolom PL yang beroperasi di suhu yang lebih rendah daripada dibandingkan dikemas kolom. Namun, meningkatkan k di atas nilai 10 tidak akan menghasilkan keuntungan banyak dalam resolusi dan retensi kali akan lebih panjang. Sangat menarik untuk membandingkan efek pada resolusi perubahan ini parameter. Persamaan 2 dapat diatur kembali untuk menghitung jumlah piring diperlukan untuk mencapai resolusi 1,0 dengan berbagai nilai-nilai k dan:

Retensi Kovats Indeks Untuk membuat skala polaritas, kita perlu suatu metode yang handal untuk menetapkan dan mengukur perilaku retensi zat terlarut. Parameter 50

seperti volume retensi dan faktor retensi tampaknya cocok, tetapi mereka tunduk pada variabel terlalu banyak. nilai relatif jauh lebih baik, dan satu parameter seperti awalnya didefinisikan oleh Kovats [2] telah dengan baik diterima. Menggunakan serangkaian homolog n-paraffins sebagai standar terhadap

yang disesuaikan volume retensi zat terlarut diukur untuk kepentingan. -Nya pilihan n-paraffins didasarkan tidak hanya pada ketersediaan relatif mereka tetapi polaritas mereka juga sangat rendah dan kebebasan mereka dari ikatan hidrogen. Indeks retensi Kovats, l, memberikan nilai dari 100 kali jumlah karbon untuk setiap paraffins-n. Jadi, heksana memiliki nilai 600 dan heptana 700 pada semua fase cair. Ketika serangkaian hidrokarbon homolog adalah dikromatografi, gaya antarmolekul yang relatif konstan dan pemisahan dikendalikan terutama oleh perbedaan tekanan uap (Sebagaimana tercermin dalam titik didih). Kromatogram yang dihasilkan menunjukkan hubungan logaritmik antara jumlah karbon dan disesuaikan retensi kali, mencerminkan kecenderungan titik didih antara anggota seri homolog. Hubungan linear dipamerkan ketika log dari retensi disesuaikan waktu (atau volume) diplot versus indeks Kovats sebagai ditunjukkan pada Gambar 4.3. Untuk menemukan indeks Kovats untuk terlarut diberikan pada fase diam yang diberikan, beberapa anggota dari seri homolog parafin yang dikromatografi dan diplot. Kemudian zat terlarut dijalankan di bawah kondisi yang sama dan yang Indeks nilai ditentukan dari grafik. Cara terbaik adalah jika paraffins dipilih braket volume retensi analit itu. Jika laju alir dijaga konstan selama pengumpulan data ini, kemudian disesuaikan waktu retensi dapat diplot. Atau, index dapat dihitung dari persamaan 4,

dimana u subskrip berdiri untuk analit yang tidak diketahui dan x dan (x + 1) berdiri untuk jumlah karbon di paraffins eluen sebelum dan setelah analit, masing-masing.

51

Indeks Kovats telah menjadi metode yang populer untuk pelaporan data GC, mengganti parameter retensi mutlak. McReynolds [3] telah diterbitkan PU ~ buku referensi indeks konsisten diri untuk ~ 350 zat terlarut pada 77 stasioner fase pada dua suhu. Dari data tersebut dapat dilihat bahwa Kovats indeks suhu sangat tidak tergantung dan yang berdekatan anggota. dari seri apapun homologus akan memiliki nilai indeks ~ diff cincin oleh sekitar 100 ~ ~ mt. Dengan menggunakan pendekatan ini, seseorang dapat memperkirakan yang dn ~ ~ x untuk kimia apa pun jika indeks untuk satu anggota senes homolog yang dikenal. Sementara paraffins mewakili seperangkat standar universal untuk menetapkan indeks, seri homolog lainnya telah digunakan dalam industri partic Lar ~ mana seri lain yang umumnya digunakan [4]. Sebagai contoh, empat indeks sistem baru-baru ini telah dibandingkan untuk mencirikan asam nitrogen dan obat netral [5]. The alkylhydantoins dan alkylmethylhydantoins berbalik keluar menjadi standar indeks yang paling layak untuk retensi senyawa dipelajari. Rohrschneider-McReynolds Konstanta Mari kita kembali ke diskusi kita mengenai penentuan polaritas fase stasioner dengan mulai contoh menggunakan Kovats retensi indeks. Dari McReynolds [3] kita menemukan bahwa toluen memiliki retensi Kovats indeks 773 pada fase squalane nonpolar dan 860 di lebih polar dioctylphthalate. Perbedaan dalam indeks, 87, menyediakan mengukur polaritas relatif dari peningkatan dioctylphthalate relatif terhadap squalane. Perbedaannya dapat ditunjuk sebagai l1.I. Rohrschneider [6] mengusulkan daftar lima bahan kimia yang dapat digunakan sebagai probe test (seperti toluena terlarut) untuk membandingkan indeks retensi pada squalane (nonpolar standar universal) dan setiap fase cair lainnya. -Nya pilihan yang tercantum di bawah ini (probe McReynolds 'juga terdaftar).

52

Semua lima pesawat kini berjalan di squalane dan pada fase diam yang polaritas yang akan ditentukan, dan satu set nilai lima AI ditentukan. Masing-masing berfungsi untuk mengukur sejauh mana interaksi antarmolekul antara probe dan fase diam, dan bersama-sama mereka memberikan mengukur dari polaritas fase diam. keterangan lebih lanjut tentang prosedur dapat ditemukan di koran oleh Supina dan Rose [7]. Pada tahun 1970 McReynolds [8] pergi satu langkah lebih jauh. Dia beralasan sepuluh probe akan lebih baik dari lima dan bahwa beberapa dari lima asli harus digantikan oleh homologs lebih tinggi. Hal ini ternyata bahwa sepuluh probe dan sepuluh maka nilai indeks terlalu banyak. Kebanyakan kompilasi dari RohrschneiderMcReynolds daftar nilai hanya 5. Tabel 4.4 memberikan nilai AI selama 13 stasioner fase. Apakah McReynolds jumlah penggunaan dalam menentukan polaritas? Pengaturan ini di Tabel 4.4 adalah sesuai dengan nilai peningkatan rata-rata lima nomor dan jelas menunjukkan bahwa peningkatan polaritas sebagai salah satu turun meja. Tapi seberapa banyak? Itu adalah dimana sistem jatuh pendek. Siapapun nilai dapat menunjukkan interaksi sangat kuat. Sebagai contoh, tricresylphosphate memiliki nilai yang sangat tinggi untuk n-butanol, menunjukkan bahwa berinteraksi kuat dengan alkohol, mungkin dengan membentuk ikatan hidrogen. Apakah ada kegunaan Sistem McReynolds? Pertimbangkan-OY 202 dan OY-21O. Mereka memiliki nilai sama menunjukkan bahwa kedua polimer

53

identik kecuali perbedaan panjang rantai dan viskositas (yang memiliki sedikit mempengaruhi polaritas). Jenis perbandingan itu penting pada awal hari GC saat polimer baru dibuat untuk menggantikan pasokan lelah polimer tua, misalnya OY-210 diganti OF-aku. The McReynolds nilai diberikan bukti persamaan mereka. Juga, jumlah dari lima nilai McReynolds telah digunakan untuk memverifikasi kenaikan polaritas polimer yang mengandung silikon meningkatkan persentase kelompok fenil. Gambar 4.4 menunjukkan plot selama lima polimer silikon pada kolom berikat WCOT leburan silika (kecuali untuk SP,-2.250 yang berasal dari dikemas data kolom). Contoh-contoh ini menunjukkan beberapa utilitas untuk metode ini, tapi jelas kita masih kurang alat sederhana untuk memilih yang baik diam fasa untuk pemisahan tertentu. Studi lain Berbagai kelompok pekerja telah berusaha untuk memperbaiki atau memperpanjang empiris McReynolds data dengan menggunakan berbagai pendekatan teoretis. Paling mengasumsikan bahwa tiga atau empat jenis gaya antarmolekul akan cukup untuk mencirikan fase stasioner: Pasukan dispersi, interaksi dipolar, dan satu atau dua jenis ikatan hidrogen. Upaya ini belum memiliki banyak dampak pada proses pemilihan tahap diam dan tidak akan akan dijelaskan lebih lanjut di sini. Untuk informasi lebih lanjut, karya-karya Hartkopf [9], Hawkes [10], Snyder [11], Risby [12], dan Carr [13] dapat dikonsultasikan. Kegiatan Koefisien Ada satu cara yang umum lain untuk mengungkapkan interaksi antara terlarut dan fase diam dan itu muncul dari pertimbangan termodinamika solusi. Hukum Raoult's menyatakan hubungan antara tekanan uap solusi di atas, PA dan tekanan uap dari zat terlarut murni, .. PJ,

54

mana XA adalah fraksi mol dari A. Zat terlarut terlarut dianalisis oleh GC sering menunjukkan kurang dari perilaku ideal dan mengikuti Hukum Henry yang sebuah proporsionalitas konstan menggantikan tekanan uap zat terlarut murni. Untuk memungkinkan untuk non-idealistis, Hukum Raoult yang dapat dimodifikasi dengan memperkenalkan konsep kegiatan koefisien y:

Jadi kegiatan hubungan koefisien beruang ke gaya antar antara zat terlarut dan pelarut. Jika dapat diukur, juga akan memberikan ukuran dari kekuatan ini. Persamaan 7 menunjukkan hubungan antara aktivitas dan koefisien distribusi konstan, K;

1 (adalah gas konstanta, T adalah temperatur, d; adalah densitas dari stasioner fase, dan (MW) s adalah berat molekul fase diam. Pertimbangkan dua zat terlarut, A dan B, yang dikromatografi. Rasio konstanta distribusi mereka adalah sama dengan rasio retensi mereka disesuaikan volume sebagaimana dinyatakan dalam Persamaan 1, dan mensubstitusikan persamaan 7 ke persamaan 1 hasil:

Karena mengungkapkan tingkat pemisahan A dan B, persamaan 8 menunjukkan bahwa pemisahan ini tergantung pada dua faktor: rasio uap tekanan (atau titik didih), dan rasio koefisien aktivitas (atau antarmolekul kekuatan-kekuatan antara zat terlarut dan fase diam). Hal ini untuk ini alasan bahwa kedua parameter tersebut ditentukan dalam Bab 1 sebagai dua variabel penting dalam mendirikan sistem GC. Ini adalah rasio aktivitas koefisien yang memberikan GC meningkatkan kemampuan untuk mencapai pemisahan dibandingkan Salah satu contoh klasik pemisahan dua zat terlarut dengan hampir titik didih Arne adalah benzena (pb 80,1 ° C) dan cyclohexane (B.P '81,4 ° C). Bahkan meskipun mereka sangat Simi boilin ar ~? poin (~ a. d uap tekanan), mereka dengan mudah dipisahkan oleh GC usmg statlOn sebuah hqU1 ~ ~ ry fasa polaritas yang moderat dan berinteraksi lebih kuat dengan awan-pi benzena daripada yang dilakukannya dengan cyclohexane kurang polar:

Kegiatan koefisien dapat dihitung dari data GC menurut persamaan 10: 55

di mana V adalah volume retensi tertentu (volume retensi bersih pada O ° C dan per gram fase diam). Jika b: nzene dan y.clohexan ~ ~. Adalah dikromatografi dinonylphthalate pada 325 K, koefisien aktivitas mereka ditemukan untuk masing-masing 0,52 dan 0,82 [14] dan 1,6 = = 0.82/0.52. Benzene adalah saldo lebih dari cyclohexane oleh dinonylphthalate kutub karena interaksi yang lebih besar yang antarmolekul. Sementara aktivitas koefisien tidak biasanya ditentukan untuk tujuan ini, jelas bahwa mereka adalah berlaku berarti untuk mengekspresikan interaksi antarmolekul di Gc. LIQUID stationary TAHAPAN (GLC) Squalane telah dibahas sebagai fase cair dianggap memiliki polaritas sedikit. Ini adalah hidrokarbon jenuh dengan bentuk ~ l ~ <: 30 H6z; strukturnya ditunjukkan pada Gambar 4.5. suhu batas atas Its IS hanya 125 ° C, sehingga parafin yang lebih besar, Apolane 87, dengan rumus Cs7H176 sering digunakan sebagai pengganti meskipun sedikit lebih polar (lihat Tabel 4.4).

Silikon Polimer polimer silikon memiliki kestabilan suhu yang baik dan diubah silikon polimer sekarang mendominasi fase cair yang umum digunakan. Berbagai polaritas dapat disediakan dengan mengubah persentase kelompok kutub, untuk contoh fenil dan kelompok cyanopropyl. Yang paling polar adalah sebuah dimethylsilicone struktur yang ditunjukkan pada Gambar 4.6; itu dijual di bawah nama OY-1 dan OY-101 oleh Ohio Valley Specialty Kimia, yang pertama menjadi sebuah permen karet dan yang kedua cairan. Keduanya termasuk dalam daftar lengkap silikon fase pada Lampiran VI. "Dari konstanta McReynolds (Tabel 4.4), dapat dilihat bahwa OY-1 dan OY-101 telah dasarnya polaritas yang sama dan sedikit lebih polar dari Apolane 87. Sebagai kelompok metil digantikan oleh lebih polar kelompok fenil dan cyanopropyl, polaritas meningkat dengan dibuktikan oleh McReynolds meningkatkan konstanta. Tabel 4.5 daftar beberapa sebutan alternatif yang digunakan untuk polimer dengan produsen lain. Pase Umum Lain Bahkan ini daftar panjang polimer silikon tidak memenuhi kebutuhan semua chromatographers yang mencari cairan dengan polaritas yang lebih tinggi dan / atau lebih tinggi suhu operasi. Serangkaian polimer polietilen telah memenuhi beberapa kebutuhan polaritas yang lebih tinggi karena bahan-bahan tersebut dapat hidrogen obligasi. Struktur polimer ini diberikan pada Gambar 4.7. The perkiraan

56

berat molekul diberikan sebagai nilai numerik pada nama. Untuk contoh Carbowax 20m ® memiliki berat molekul 20,000; itu adalah yang tertinggi

berat molekul yang tersedia secara komersial dan dapat digunakan sampai dengan 225 ° C dikemas kolom dan 280 ° C dalam beberapa berikat kolom kapiler. Serangkaian polimer silikon carborane (lihat Gambar 4.8). Telah dirancang terutama untuk kerja suhu tinggi. Mereka pertama kali disintesis pada tahun 1964 oleh Olin Kimia dan dijual dengan nama dagang Dexsil.v Dexsil300 ® adalah yang paling polar, setelah semua kelompok metil pada rantai. Hal ini dapat digunakan sampai untuk 400 ° C. Fitur Alat Tulis Phases Untuk alasan praktis, adalah diinginkan untuk hanya memiliki jumlah minimum kolom yang akan memecahkan masalah yang paling sering seseorang pemisahan. Buka kolom tubular sangat efisien yang lebih sedikit dari mereka yang biasanya diperlukan, tetapi itu adalah umum untuk memiliki dua menjadi empat tahap yang berbeda dan beberapa film yang berbeda ketebalan dan panjang. informasi yang lebih spesifik diberikan dalam masing-masing masing-masing bab pada kolom kapiler dan dikemas. Memilih Alat Tulis Fase Cair Hal ini jelas dari pembahasan sebelumnya bahwa tidak ada sistem yang mudah digunakan memiliki telah ditemukan untuk membimbing proses seleksi. Tentu saja kita tidak dapat mengandalkan McReynolds konstanta saja. Peribahasa sederhana yang umum digunakan adalah salah satu yang kami mulai bagian ini-"seperti larut seperti." Yang mengatakan, memilih salah satu kolom nonpolar untuk campuran nonpolar dan kolom polar untuk campuran kutub. Pengecualian terhadap generalisasi ini terjadi ketika salah satu upaya untuk memisahkan zat terlarut yang mirip seperti isomer, Sebagai contoh, semua isomer xylene kurang lebih nonpolar dan memiliki titik didih yang sama. Sebuah stasiun-nonpolar

57

er fase tidak akan memuaskan untuk pemisahan mereka karena mereka tidak banyak bervariasi baik titik didih atau polaritas. Untuk menonjolkan kecil perbedaan polaritas membutuhkan fase diam polar seperti DB-lilin. ® Gambar 4.9 menunjukkan pemisahan yang baik pemisahan ini menantang. Setelah aturan polaritas umum dan menggunakan kolom dikemas, ringan dimuat (5%), kolom empat kaki, 2 mm id, OV-lol akan menjadi pilihan yang baik untuk sampel nonpolar dan Carbowax serupa 20m ® kolom untuk kutub sampel. Antara dua ekstrim, salah satu polimer silikon tentang intermediet polaritas (seperti OV-17) dapat digunakan. Kemasan khusus lainnya dibahas dalam Bab 5. Untuk kolom tubular membuka pilihan fase diam jauh lebih kecil kritis. Sebuah film tipis (0,25 # Lm) metil silikon kolom l5 meter (OV-lol)

58

akan baik untuk skrining umum. Serupa, tetapi lebih polar silikon polimer (misalnya cyano-derivatif, OV-225 atau OV-275) akan lebih baik untuk sampel lebih kutub. Kolom kapiler yang setara dari Carbowax 20m ® (seperti DB-Wax ®) adalah pilihan yang logis juga, meskipun ini kolom yang mudah teroksidasi dan memiliki daya tahan yang berguna yang relatif singkat. Sebuah pertimbangan terakhir dalam memilih fase cair keterbatasan suhu. Pada ujung atas, suhu tercapai dimana tekanan uap cairan terlalu tinggi dan berdarah dari kolom memberikan latar belakang yang tinggi detektor sinyal. Pada temperatur tinggi seperti umur pendek dan kolom kromatografi adalah miskin karena berdarah. Tabel dari umum cair fase dalam bab ini telah termasuk batas-batas suhu atas untuk fase ketika digunakan dalam kolom dikemas. Batas kolom tabung terbuka mirip-biasanya sedikit lebih tinggi jika terikat pada kolom. Suhu rendah biasanya batas titik beku atau suhu transisi gelas polimer. Contoh klasik adalah "Carbowax '20m yang padat di suhu ruang dan mencair sekitar 60 ° C, batas suhu yang lebih rendah. SOLID stationary TAHAPAN (GSC) Padatan digunakan dalam GSC secara tradisional berjalan di kolom dikemas, subjek bab berikutnya. Namun, daftar padatan umum diberikan dalam Tabel 4.6. Seperti mendukung padat digunakan dalam GLC, padatan ini seharusnya kecil ukuran partikel dan seragam-misalnya rentang 80/100 mesh. Beberapa makanan padat telah dilapisi pada dinding dalam kapiler kolom dan disebut mendukung kolom dilapisi tubular atau Scot terbuka. Informasi lebih lanjut tentang mereka yang termasuk dalam Bab 6.

4. Dikemas Kolom dan inlet
Semua pekerjaan awal dalam kromatografi gas dilakukan pada kolom dikemas dan instrumen komersial pertama diterima hanya dikemas kolom. Kemudian, ketika membuka kolom kapiler tubular ditemukan, hanya satu produsen (Perkin-Elmer) diproduksi mereka, sehingga sebagian besar chromatographers terus dikemas menggunakan kolom. Akibatnya, banyak literatur awal hanya melaporkan dikemas kolom perpisahan. Hari ini, diperkirakan bahwa lebih dari 80% dari semua analisis yang dibuat pada kolom kapiler. Kedua jenis kolom yang cukup berbeda yang masing-masing akan dibahas dalam bab tersendiri. Persyaratan instrumental juga agak berbeda, sehingga sistem inlet masing untuk setiap jenis termasuk di tiap bab. Dikemas kolom biasanya terbuat dari baja stainless dan luar 59

diameter 1 / 4 atau 1 / 8 inci dan panjang 2 sampai 10 kaki. Untuk aplikasi inertness membutuhkan lebih besar, bahan alternatif telah digunakan termasuk kaca, nikel, polimer fluorocarbon (Teflon "), dan baja yang dilapisi dengan kaca atau Teflon ", Tembaga dan aluminium yang mudah lunak untuk mudah pembengkokan, tetapi tidak dianjurkan karena reaktivitas mereka.

SOLID DUKUNG
Untuk kolom dikemas, fase cair stasioner dilapisi pada dukungan solid yang dipilih untuk daerah permukaan yang tinggi dan inertness. Banyak bahan

telah digunakan, tapi yang dibuat dari tanah diatome (Chromosorbw) telah ditemukan untuk menjadi yang terbaik. Sifat-sifat dari jenis utama terdaftar pada Tabel 5.l. Permukaan bumi mendukung diatome sering terlalu aktif untuk sampel GC kutub. Mereka mengandung bebas hidroksil-kelompok yang dapat membentuk tidak diinginkan ikatan hidrogen dengan molekul terlarut dan menyebabkan tailing puncak. Bahkan bahan yang paling inert (putih Chromosorb W ®) perlu asam dicuci (ditunjuk AW) dan silanized untuk membuatnya masih lebih [lembam 1]. Beberapa reagen silanizing khas adalah dimethyldichlorosilane (DMDCS) dan hexamethyldisilazane (HMDS). Mendukung putih dinonaktifkan diketahui dengan nama seperti Supelcoporrs, Chromosorb W-Hp ®, Gas Cr Q II ®, dan Q ® Anachrom. Salah satu kelemahan dari penonaktifan adalah bahwa ini mendukung menjadi hidrofobik, dan pelapisan mereka dengan cairan polar dapat stasioner sulit. Seperti tercantum dalam Bab 3, kisaran sempit partikel kecil menghasilkan lebih banyak kolom efisien. Ukuran partikel biasanya diberikan sesuai dengan berbagai mesh, ditentukan oleh ukuran pori dari saringan yang digunakan untuk penyaringan (lihat Tabel 5.2). pilihan umum untuk GC adalah 80/100 atau 100/120 mesh. Jumlah fase cair dilapisi pada dukungan solid bervariasi dengan dukungan dan dapat berkisar antara 1 menjadi 25%. Tabel 5.3 menunjukkan bahwa 15% cair fase pada ® p Chromosorb adalah setara loading menjadi hampir dua kali jumlah (25,7%) pada Chromosorb W ® karena perbedaan mereka dalam kerapatan dan permukaan

60

daerah. Chromosorb G ® hanya bisa menampung sejumlah kecil cairan (biasanya 3-5%). beban rendah lebih baik untuk efisiensi tinggi dan tinggi senyawa mendidih, dan beban tinggi yang lebih baik untuk sampel besar atau volatile zat terlarut-gas misalnya. Solusi dari fase stasioner dibuat di dalam suatu pelarut yang mudah menguap, dicampur dengan dukungan yang solid, dan menguap untuk menghapus pelarut. Itu akhir materi, bahkan mereka dengan 25% fase diam cair (pada Chromosorb P ®) akan muncul kering dan akan mudah pak ke kolom. LIQUID TAHAPAN Alat Tulis Hampir setiap cair nonvolatile ditemukan di sebuah laboratorium kimia umum telah diuji sebagai fase stasioner mungkin. Akibatnya, ada adalah fase cair terlalu banyak tercantum dalam katalog pemasok komersial "(biasanya sekitar 200 dari mereka). Masalahnya adalah untuk membatasi daftar panjang tahap ke yang akan memecahkan beberapa masalah yang paling analitis. Untuk mengakhiri ini beberapa pekerja telah menerbitkan daftar mereka dari fase pilihan. Beberapa pilihan-pilihan ini tercantum pada Tabel 5.4. Secara umum, mereka menyertakan kolom nonpolar seperti

metil silikon, beberapa polaritas menengah, sebuah silikon yang sangat polar seperti OV-275, dan Carbowax polyglycollike ", Sebuah pertimbangan sekunder adalah jumlah yang dibutuhkan untuk fase diam mantel dukungan solid. Tabel 5.1 tercantum batas atas untuk beberapa mendukung. Batas bawah biasanya jumlah minimum yang akan memberikan lengkap 61

cakupan permukaan dukungan, jumlah yang bergantung pada permukaan daerah (juga tercantum pada Tabel 5.1). Namun, pelapis seragam sulit terutama untuk cairan mencapai kutub, dan persentase minimum biasanya ditentukan oleh trial and error. Pertimbangan ketiga adalah panjang kolom, tetapi tidak penting jika instrumen tersebut, an mampu suhu diprogram (lihat Bab 9). Kolom panjang biasanya pendek (1 sampai 3 meter) untuk kenyamanan dalam kemasan baik dan penanganan. Memilih kolom terbaik (fase cair) untuk sampel yang diberikan telah dibahas dalam Bab 4, tapi referensi yang berguna menyediakan hampir 200 contoh aktual pemisahan pada kolom dikemas telah tersedia baru-baru ini oleh Supelco [2]. pemasok lain juga memberikan informasi aplikasi. SOLID stationary TAHAPAN (GSC) padatan adsorben seperti gel silika umum dan alumina digunakan di GSC, tetapi sebagian besar padatan digunakan sebagai fase stasioner telah dikembangkan untuk spesifik aplikasi di GSC. Tabel 4.6 tercantum beberapa dari mereka dan bab ini akan menggambarkan beberapa pemanfaatan bersama mereka. Sebuah pemisahan khas gas tetap pada gel silika ditunjukkan dalam Gambar 5.1. Meskipun bentuk puncak dan nomor plat yang agak baik dalam contoh ini, banyak makanan padat yang digunakan dalam GSC menghasilkan bentuk miskin (biasanya tailing) dan mengecewakan efisiensi. Catatan udara yang tidak dipisahkan menjadi oksigen dan nitrogen pada gel silika. Sangat mudah untuk memisahkan oksigen dan nitrogen dengan menggunakan padatan dikenal sebagai molekul saringan, Zeolit alami dan bahan-bahan sintetis seperti logam alkali aluminoscilicates. Pemisahan klasik pada saringan molekul sintetik adalah ditunjukkan pada Gambar 5.2. Saringan ini diberi nama sesuai dengan mereka perkiraan ukuran pori efektif, misalnya, 5A memiliki 5 A pori-pori dan 13X, 9 A pori-pori. Pemisahan oksigen dan nitrogen adalah hampir sama di kedua saringan, tetapi CO mengambil dua kali lebih lama untuk elute dari saringan Amolecular 5. Carbosievesv adalah tipikal dari padatan yang telah dibuat untuk GC, dalam hal ini kasus dengan pirolisis dari polimer prekursor yang menghasilkan karbon murni mengandung pori-pori kecil dan berfungsi sebagai saringan molekul. The Carbosieves '"akan terpisah oksigen dan nitrogen dan dapat diganti untuk saringan molekul hanya dijelaskan. Mereka juga menemukan gunakan untuk pemisahan berat molekul rendah hidrokarbon dan formaldehida, metanol dan air. Lainnya nama dagang adalah Ambersorbv dan Carboxen '".

62

Lain kelas grafitisasi adsorben karbon jelaga karbon yang adalah nonporous dan spesifik dan terpisah molekul organik sesuai untuk struktur geometris dan polaritas. Seringkali mereka juga ringan dilapisi dengan fase cair untuk meningkatkan kinerja dan meminimalkan tailing. Tokoh 5,3 menunjukkan pemisahan khas dari campuran pelarut. Satu umum perdagangan nama untuk materi-materi ini adalah Carbopackw, Pada tahun 1996 Hollis [3] disusun dan dipatenkan polimer berpori yang telah dipasarkan di bawah "nama dagang Porapak ', ini memberikan solusi yang baik terhadap masalah memisahkan dan menganalisis air dalam pelarut polar. Karena kecenderungan kuat untuk hidrogen-ikatan, air biasanya ekor pada kebanyakan buruk fase stasioner, tapi Porapakv memecahkan masalah seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5.4.

63

Awalnya ada lima polimer yang berbeda, yang ditunjuk melalui T P di kepolaran meningkat, sekarang ada delapan versi. Air sangat elutes cepat pada Porapak P dan Q membuat mereka ideal untuk aplikasi yang dimana air dinyatakan akan mengganggu senyawa dari bunga. Porapak Q ® juga dapat digunakan untuk memisahkan oksigen dan nitrogen pada -78 ° C. Sebuah kompetitif serangkaian polimer yang dijual dengan "nama dagang Chromosorb 'Century Seri. Untuk contoh lebih lanjut dari aplikasi berkonsultasi dengan literatur yang tersedia dari rumah pasokan kromatografi (lihat Lampiran VIII).
GAS ANALYSIS

Analisis gas adalah salah satu aplikasi utama kolom dikemas GSC. Karakteristik kolom dikemas yang membuat mereka ideal untuk gas analisis adalah: adsorben * memberikan daerah permukaan yang tinggi untuk interaksi maksimal dengan gas yang mungkin sulit untuk mempertahankan atas fase stasioner cair; 64

* Besar sampel dapat diakomodasi, menyediakan deteksi absolut lebih rendah batas; * Beberapa kolom dikemas GCS dapat dikonfigurasi untuk dijalankan di bawah ambien suhu yang juga akan meningkatkan retensi dari gas zat terlarut; * Unik kombinasi dari beberapa kolom dan / atau valving yang membuatnya mungkin untuk mengoptimalkan sampel tertentu. Gambar 5.5 menunjukkan satu aplikasi seperti untuk gas minyak serpih. katup gas sampling juga umum pada instrumen ini. A umum konfigurasi adalah katup 6-port yang ditunjukkan pada Gambar 5.6. Hal ini dioperasikan dalam satu dari dua posisi: satu untuk mengisi loop sampel dan satu untuk "menyuntik" sampel. Ada dasarnya tidak memiliki volume mati dengan sampel gas katup dan pengulangan sangat baik. Katup dapat ditampung dalam oven terpisah untuk menjamin reproducible kuantitatif sampling. Tekanan sampel dalam katup penting bagi akurat kuantisasi. Namun, jika loop sampel pada tekanan ambien dan inlet kolom pada tekanan tinggi yang diperlukan untuk analisis, yang agak baseline pergeseran besar sering diamati seperti tampak pada Gambar 5.7. Akibatnya, loop sampel sering terisi dalam tekanan yang lebih tinggi untuk menghilangkan masalah ini. Atau, kolom dapat dioperasikan pada tekanan konstan, bukan arus konstan yang lebih umum. Katup juga dapat digunakan untuk beralih ke kolom mencapai konfigurasi unik untuk pemisahan tertentu. Peninjauan oleh Willis [4] berisi banyak berbeda valving pengaturan. Backflushing juga dapat dicapai dengan tepat valving dan ini adalah teknik yang umum digunakan dalam analisis gas. Gas chromatographs digunakan untuk analisis gas biasanya dipasang dengan thermal detektor konduktivitas (TCD), yang bersifat universal, stabil, dan menengah sensitif dan biasanya dijalankan dengan gas pembawa helium. Karena yang paling panas Detektor konduktivitas yang berbeda dan memiliki dua elemen aktif, baik

65

66

elemen dapat digunakan untuk pengaturan kolom khusus termasuk dual kolom operasi. Salah satu jenis sampel yang tidak dapat dianalisis dengan Ted dan helium pembawa gas hidrogen dalam campuran gas. Hidrogen's konduktivitas termal sangat dekat dengan helium bahwa bentuk puncak sering tidak teratur-biasanya dengan W-bentuk dan hasil kuantitatif sehingga tidak mungkin [5]. Itu konduktivitas termal dari campuran biner dari helium dan hidrogen bukan fungsi linear sederhana. Lebih diskusi dan beberapa solusi yang mungkin untuk ini masalah dapat ditemukan dalam monografi Thompson [6]. Ketika sebuah detektor yang lebih sensitif adalah diperlukan, TCD tidak memadai dan yang FID seringkali tidak memuaskan karena tidak universal. Dalam situasi ini, seperti mungkin terjadi dalam analisis gas lingkungan, salah satu ionisasi lainnya detektor adalah lebih baik. Ada tersedia secara komersial ionisasi detektor yang telah memenuhi kebutuhan ini [7].

67

Lubang UNTUK SAMPEL CAIR DAN SOLUSI

Contoh pengantar untuk cairan pada kolom dikemas seringkali dilaksanakan dengan microsyringe melalui septum silikon menutup diri seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5.8. Dalam gambar ini, kolom berbaris colinearly dengan tabung suntik jarum menyediakan salah satu dari dua mode injeksi mungkin: on-kolom atau flash penguapan. Untuk operasi on-kolom, kolom diposisikan seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5,8 dengan kolom kemasan mulai dari posisi hanya dicapai oleh jarum. Ketika jarum suntik didorong sejauh mungkin akan masuk ke pelabuhan, perusahaan isi akan diserahkan ke bagian pertama dari kolom packing-idealnya pada wol kaca kecil plug digunakan untuk menyimpan kemasan dalam kolom. Sana yang analit akan diserap ke kolom atau menguap tergantung pada

mereka relatif distribusi konstanta. Untuk sebagian besar sampel, sebagian besar sampel akan masuk ke dalam fase diam (lihat perhitungan pada Bab 3); maka nama pada kolom. Ketika membeli kolom komersial untuk on-kolom injeksi, perlu untuk menentukan panjang kolom yang harus dibiarkan kosong sesuai dengan persyaratan geometrik hanya dibahas. Sebuah alternatif lain adalah dengan menggunakan liner pra-kolom yang dapat diganti atau dibersihkan bila kotor. Pada konfigurasi kedua, kolom ditempatkan sedemikian rupa sehingga ujung depan (Dan packing nya) nyaris meluas ke port injeksi dan tidak dapat dicapai dengan jarum suntik. Efisien sampling untuk konfigurasi ini mengharuskan sampel menguap dengan cepat (penguapan flash) ketika disuntikkan ke pelabuhan. Operasi ini difasilitasi oleh pemanasan injeksi port ke suhu di atas titik didih sampel untuk memastikan penguapan cepat. Salah satu kelemahan yang mungkin dari metode ini adalah bahwa sampel mungkin akan bersentuhan dengan dinding panas pelabuhan dan dapat mengalami dekomposisi termal. Untuk alasan ini, lapisan kaca inert sering dimasukkan ke port injeksi. GCS kolom Dikemas hampir selalu dioperasikan pada arus konstan gas pembawa. Sebuah katup untuk tujuan ini adalah penting untuk suhu diprogram bekerja. operasional arus konstan yang lebih disukai untuk konduktivitas termal detektor seperti yang dijelaskan dalam bab detektor (Bab 7).
SPECIAL COLUMNS

68

termasuk untuk analisis tertentu yang tidak dapat dengan mudah dicapai dengan kemasan biasa dan orang-orang dengan dimensi yang tidak biasa seperti kolom microbore disebut. KHUSUS Kolom 82 Dikemas Kolom dan inlet Gambar. 5.8. Sederhana port injeksi untuk injeksi on-kolom. Aplikasi Khusus Ada beberapa fase stasioner yang telah dirancang untuk memberikan khusus selektivitas untuk analisis sulit. Beberapa tercantum pada Tabel 5.5. Telah ditemukan bahwa pencampuran cairan beberapa tahapan yang berbeda dalam satu kolom akan menghasilkan selektivitas berbanding lurus dengan jumlah bagian dicampur bersama [12/08]. Biasanya tidak masalah jika fase disimpan terpisah dalam kolom atau dicampur bersama. Seorang yang sedikit berguna tercantum pada Tabel 5.5. Beberapa tersedia secara komersial, misalnya, mereka digunakan dalam metode EPA untuk analisis limbah cair. Karena fleksibilitas ini tidak dapat mudah dicapai dengan kolom kapiler, kemasan merupakan salah satu campuran keuntungan unik dari kolom dikemas. Sebagai aturan umum, sampel yang sangat asam atau sangat dasar sulit untuk kromatograf karena reaktivitas tinggi dan hydrogenbonding kuat. Untuk mengatasi dampak ini telah menjadi umum untuk menambahkan kecil Jumlah (1-2%) modifier ke fase cair untuk menutupi yang paling aktif

situs. Sebagai contoh, natrium atau kalium hidroksida digunakan untuk menonaktifkan kemasan yang digunakan untuk dasar seperti senyawa amina dan asam fosfat untuk senyawa asam seperti asam bebas dan fenol. kolom khusus lainnya yang tercantum dalam Tabel 5.5.Most yang tersedia secara komersial di kolom dikemas. kemasan kiral yang lain adalah penting; mereka lebih sering digunakan pada kolom kapiler dan itu dibahas dalam Bab 10. Microbore Kolom Kolom meningkatkan kinerja sebagai diameter kolom menurun, tetapi sangat diameter kecil merupakan kasus khusus karena kesulitan packing dan penurunan tekanan tinggi hasil itu. Dikemas dalam kolom dengan diameter 750 mikrometer secara komersial tersedia untuk beberapa tahap. Mereka digunakan ketika sebuah kompromi antara kolom dikemas normal dan normal kolom tubular terbuka diperlukan. Beberapa contoh adalah: (a) untuk mencapai keduanya efisiensi tinggi dan kapasitas sampel yang tinggi, (b) untuk contoh yang sangat mudah menguap; (C) untuk kecepatan yang lebih besar daripada yang dimungkinkan dengan kolom dikemas 69

normal; atau (D) untuk memperoleh keuntungan selektivitas dari suatu pengepakan campuran. UPGRADE untuk kolom kapiler Sementara kolom dikemas lebih disukai untuk beberapa analisis, kolom kapiler lebih efisien dan lebih disukai untuk penggunaan umum. Tua, dikemas-kolom chromatographs gas dapat dipasang di lapangan untuk menerima kolom kapiler, sehingga mereka di upgrade biaya minimal. Perubahan utama yang dibutuhkan adalah instalasi ~ capillar: r . . d penambahan gas make-up untuk detektor. Kit ini Injector h KNI d urpose tersedia dari rumah pasokan lab, dan sebuah McMurtrey. tg t ] P13 menggambarkan pembangunan yang buatan sendiri. The EAS ~ est [con 'Pada saya'S dari dikemas untuk lebar kolom-kolom membosankan [14]; Jennings [15] English Version. . th. Aku ' telah dibahas secara rinci prosedur. The convers ~ IS SIMP eh e ra, sebagai sebuah ml.n 'Imum, semua orang perlu beberapa alat kelengkapan dan tubing. Theseflcolum.ns.are useable dengan detektor konduktivitas termal [16] serta ionisasi ame detektor.

and Inlets
kolom kapiler diperkenalkan pada tahun 1959, tetapi tidak digunakan secara luas sampai sekitar tahun 1980, setelah itu mereka terus tumbuh dalam popularitas. Hari ini, diperkirakan bahwa lebih dari 80% dari semua aplikasi yang berjalan pada kolom kapiler. kolom kapiler hanya kolom yang tabung terbuka. Artinya, mereka tidak diisi dengan bahan paking. Sebaliknya, sebuah film tipis fase cair melapisi dinding dalam. Seperti telah dibahas sebelumnya, kolom tersebut benar disebut "Berbentuk tabung terbuka (OT) kolom." Sejak tabung terbuka, perlawanannya terhadap aliran sangat rendah, dan panjang panjang, sampai 100 meter yang mungkin. Ini panjang panjang memungkinkan pemisahan sangat efisien kompleks sampel campuran. Gambar 6.1 adalah kromatogram khas dari teks standar campuran pada OT silika 30-m menyatu. Perhatikan simetris puncak tajam diperoleh untuk senyawa polar, asam, dan dasar. JENIS PL Kolom Kolom kapiler yang asli, yang diciptakan dan dipatenkan oleh Dr Marcel Golay [1], terdiri dari tabung dengan lapisan tipis fasa cair dilapisi pada di bawah permukaan. Hal ini tepat disebut kolom dinding dilapisi tabung terbuka atau WCOT, yang ditunjukkan pada Gambar 6.2. tabung ini dapat terbuat dari leburan silika, kaca, atau stainless steel. Hampir semua kolom kapiler komersial sekarang dibuat dari leburan silika.

70

Wall-kolom kapiler dilapisi memberikan resolusi tertinggi semua gas kromatografi kolom. Tubing diameter internal 0.10,0.20,0.25,0.32, dan 0,53 mm secara komersial tersedia. panjang biasanya bervariasi dari 10-50 meter, walaupun 100 meter kolom telah digunakan sesekali dan secara komersial tersedia. panjang kolom Long, bagaimanapun, memang membutuhkan analisis panjang kali. Film ketebalan lapisan bervariasi dari 0,1 sampai 5.0micrometers. film tipis memberikan resolusi tinggi dan analisis cepat, tetapi mereka telah membatasi sampel kapasitas. film tebal memiliki kapasitas sampel yang lebih tinggi, tetapi menunjukkan lebih rendah resolusi dan biasanya digunakan untuk hanya senyawa sangat fluktuatif. Jenis lain dari kolom kapiler diperlihatkan pada Gambar 6.3, di Skotlandia atau kolom dukungan berlapis tubular terbuka, di sebelah kiri, dan plot atau , Lapisan berpori kolom tabung terbuka, di sebelah kanan. kolom Scot mengandung lapisan teradsorpsi dukungan solid sangat kecil (seperti "Celite ') dilapisi dengan fase cair. Scot kolom dapat menyimpan lebih banyak fase cair, dan memiliki lebih tinggi sampel kapasitas ketimbang film tipis umum untuk kolom WCOT awal. 71

Namun, dengan pengenalan teknik cross-linking, stabil tebal film yang mungkin untuk kolom WCOT, dan kebutuhan untuk kolom Scot telah menghilang. Sebuah kolom Scot sedikit yang masih tersedia, tetapi secara komersial hanya di tubing stainless steel. kolom plot berisi lapisan berpori yang solid adsorben seperti alumina, saringan molekuler, atau Porapak '". kolom plot sangat cocok untuk analisis gas tetap cahaya dan senyawa volatile. Seorang yang baik Contohnya adalah pemisahan kripton, neon, argon, oksigen, nitrogen, dan xenon pada kolom plot molekul saringan seperti tampak pada Gambar 6.4. Alur kolom mewakili «kecil 5%) namun berbagi penting dari GC kolom pasar.

or COLUMN TUBING
Banyak jenis kolom tubing termasuk kaca, tembaga, nilon, dan stainless baja telah digunakan, namun leburan silika sejauh ini merupakan hari paling populer.

Stainless steel diperkenalkan pada awal GC kapiler, namun itu sangat tidak efisien dan terlalu aktif untuk senyawa yang sangat reaktif seperti sebagai steroid,, amina dan asam bebas. kolom Glass, sayangnya, yang rapuh. silika Fused diperkenalkan di 95 1979 [2] dan hari ini di% dari seluruh kapiler kolom yang dijual terbuat dari leburan silika. silika Fused fleksibel dan mudah 72

menangani. Itu juga merupakan bahan tubing paling inert tersedia dan mudah menghasilkan resolusi tinggi kolom. Energi permukaan leburan silika cocok baik dengan tegangan permukaan silikon fase cair. silikon Tahapan "Basah" tubing dengan sangat baik, menghasilkan film tipis yang sangat seragam dan sangat kolom efisien. silika Fused dibuat oleh reaksi SiC4 dan uap air di api. Produk ini, Si02 murni, mengandung hidroksil sekitar 0,1% atau silanol kelompok pada permukaan dan kurang dari 1 ppm kotoran (Na, K, Ca, dll). Tinggi kemurnian leburan silika bertanggung jawab atas sangat inert sifat kimia. A suhu kerja dari sekitar 18o O ° C diperlukan untuk melunakkan dan menggambar menyatu silika ke dimensi kapiler. kolom silika Fused diambil pada mahal mesin canggih dengan menggunakan teknologi serat optik canggih. silika Fused memiliki kekuatan tarik tinggi dan paling kromatografi kolom memiliki dinding yang sangat tipis, sekitar 25 mikrometer. Hal ini membuat mereka fleksibel dan mudah untuk menangani. Dinding tipis, bagaimanapun, adalah tunduk pada korosi yang cepat dan kerusakan, bahkan saat terkena atmosfer laboratorium normal. Oleh karena itu, sarung pelindung tipis polimida diterapkan untuk bagian luar slang seperti muncul dari oven gambar. Lapisan ini polimida, yang menggelapkan dengan usia, melindungi leburan silika dari kelembaban atmosfer. Inilah polimida lapisan yang

membatasi kolom silika paling fusi maksimum operasi suhu 360 ° C (jangka pendek 380 ° C). Untuk h
KEUNTUNGAN Kolom OT Tabel 6.1 menjelaskan mengapa kolom kapiler yang begitu populer. Karena mereka tabung terbuka, ada penurunan tekanan sedikit di antara mereka; sehingga panjang panjang, misalnya 60 meter, dengan mudah dapat digunakan. Dikemas kolom, di sisi lain, yang erat dikemas dengan dukungan yang solid, menghasilkan penurunan tekanan yang lebih besar dan panjang panjang membuat praktis. Sebuah panjang kolom dikemas khas adalah dua meter. kolom kapiler mungkin akan dilapisi dengan fasa, cair tipis seragam karena halus permukaan leburan silika itu, inert, yang menghasilkan tinggi efisiensi, biasanya 3.000 sampai 5.000 pelat teoritis per meter. Penuh sesak kolom, di sisi lain, telah lebih tebal, sering tidak seragam film, dan hanya menghasilkan 2.000 piring per meter. Dengan demikian, total yang tersedia di piring lama kolom kapiler berkisar dari 180.000 menjadi 300.000, sementara dikemas kolom biasanya hanya menghasilkan 4.000 piring dan menunjukkan resolusi lebih rendah. Gambar 6.5 menunjukkan kromatogram dari sampel yang sama pada yang penuh dan kolom kapiler. Di atas adalah pemisahan dikemas-kolom AROCHLOR ® 1260, komersial campuran senyawa polychlorinated biphenyl. twometer A kolom dari dua milimeter, id, kaca digunakan dengan menangkap elektron detektor. Kromatogram ini menunjukkan sejumlah sepiring sekitar 1.500, dan kita amati sekitar 16 puncak dengan sampel ini. Kromatogram bawah menunjukkan contoh yang sama berjalan di 50 meter kolom kapiler. Karena kolom kapiler memiliki kapasitas yang relatif rendah, sampel menguap terpecah, sehingga hanya satu bagian pada 31 memasuki kolom. The "split injeksi" teknik memungkinkan jumlah yang sangat kecil 73

sampel harus disuntikkan dengan cepat. kromatogram ini menunjukkan resolusi lebih baik, lebih dari 65 puncak, dan analisis yang lebih cepat-52 menit dibandingkan dengan 80 menit untuk kolom dikemas. Arochlorv jelas sangat kompleks campuran, dan bahkan kolom ini kapiler resolusi tinggi dengan 150.000 piring tidak menyelesaikan semua puncak.

KOLOM SELEKSI Lima parameter kritis untuk kolom kapiler adalah: 1) diameter; 2) panjang kolom, 3) ketebalan film; 4) fase stasioner komposisi; dan 5) laju alir. Setiap akan dibahas secara singkat. Kolom Internal Diameter, i.d. Internal diameter kolom untuk rentang leburan silika 100-530 mikrometer (0,10-0,53 mm). Beberapa kaca kapiler memiliki diameter internal bahkan lebih besar. Satu-ratus mikrometer kolom, baris salah satu dari Tabel 6.2, terbatas kapasitas sampel, dan tidak cocok untuk analisis jejak. Kemudahan operasi juga terbatas karena kapasitas sampel yang sangat terbatas. I.d. ini kecil kolom memiliki efisiensi yang sangat baik dan membuat analisa cepat (lihat Gambar 6.6)., tapi teknik sampling khusus dan data kecepatan tinggi diperlukan sistem untuk mewujudkan potensi mereka sepenuhnya. kolom kapiler Banyak internal diameter 250 atau 320 mikrometer, baris dua dari Tabel 6.2. s i.d. ini 'merupakan kompromi terbaik antara resolusi, kecepatan, kapasitas sampel, dan kemudahan operasi. Ini adalah kolom referensi terhadap yang semua diameter internal lainnya diukur.

74

Lima-ratus-dan-tiga puluh-mikrometer atau "widebore" kolom, terlihat di tiga baris dari Tabel 6.2, kerugian menunjukkan dalam resolusi dibandingkan dengan analitis

kolom kapiler. Keterbatasan ini adalah offset pada aplikasi yang paling oleh mereka meningkatkan kapasitas dan kemudahan operasi. Sebagai contoh, langsung di kolom injeksi jarum suntik adalah mungkin, seringkali memberikan hasil yang lebih baik daripada kuantitatif dikemas kolom. Widebore ini atau "megabore" kolom juga menunjukkan baik kecepatan analisis. Kolom Panjang Plat nomor, N, berbanding lurus dengan panjang kolom, L; semakin lama kolom, pelat lebih teoritis, semakin baik pemisahan. Resolusi, R, Namun, hanya sebanding dengan akar kuadrat dari panjang kolom. Ini berarti bahwa jika panjang kolom adalah dua kali lipat, nomor plat dua kali lipat, tetapi resolusi hanya meningkat sebesar akar kuadrat dari dua, atau 41%. Retensi waktu, TR, juga sebanding dengan panjang kolom, begitu lama kolom 75

dapat menyebabkan memperlambat waktu analisis. Tapi ketika resolusi tinggi sangat penting, panjang kolom yang diperlukan. Dengan mengacu pada Tabel 6.3, kolom yang 60 meter panjang disarankan untuk produk-produk alam seperti rasa dan aroma-in Bahkan, untuk setiap sampel dengan lebih dari 50 komponen. Ingat, bagaimanapun, bahwa analisis kali akan lama. Untuk analisis cepat sampel sederhana, kolom singkat sekitar sepuluh meter harus digunakan. Hanya resolusi moderat adalah mungkin, namun kecepatan analisis dapat mengesankan. Gambar 6.6 menunjukkan analisis cepat pada onemeter sangat singkat,, film tipis-kolom kapiler. A 50 mm i.d. kolom digunakan dengan rasio split 50011. Catatan resolusi dasar dari benzena, toluena, dan o-xilena dalam waktu kurang dari tiga detik! Sedang kolom panjang 25 atau 30 meter direkomendasikan untuk sebagian besar aplikasi. Mereka memberikan kompromi yang baik antara resolusi dan kecepatan analisis. Ketebalan Film Sebuah ketebalan film standar sebesar 0,25. Urn adalah titik awal yang wajar. Itu merupakan kompromi antara resolusi tinggi dapat dicapai dengan tipis

film dan kapasitas tinggi yang tersedia dengan film tebal. kapasitas tinggi berarti yang tidak hanya dapat jumlah sampel yang lebih besar ditampung, tetapi biasanya teknik injeksi juga sederhana. Dengan film JLm 0,25, suhu operasi praktis dapat digunakan dengan perhatian minimal untuk kolom berdarah, karena kolom berdarah sebanding dengan jumlah fase cair dalam kolom. Akhirnya, dengan ketebalan film, kolom tersebut dapat dioptimalkan untuk kecepatan tinggi menggunakan laju aliran cepat atau tinggi resolusi menggunakan laju aliran lambat. film tebal (1,0 JLm atau lebih) yang dimungkinkan saat ini karena peningkatan teknik menghubungkan lintas fase cair, dan juga ke inert lebih menyatu , Silika permukaan. Cross-linking teknik akan dibahas nanti dalam bab ini. tebal film tersebut menunjukkan peningkatan retensi contoh komponen-penting untuk senyawa atsiri. Selain itu, kapasitas yang tinggi memungkinkan injeksi sampel yang lebih besar, hal ini dapat menjadi penting ketika spektrometer massa atau Fourier mengubah-inframerah spektrometer yang akan digunakan untuk analisis berikutnya. Penurunan efisiensi adalah satu kelemahan dari film tebal. Jadi, lebih besar panjang mungkin diperlukan untuk mengimbangi angka yang lebih rendah mereka piring. Juga, suhu operasi yang lebih tinggi diperlukan untuk elute senyawa dari tebal film. suhu yang lebih tinggi, pada gilirannya, menghasilkan lebih tinggi berdarah tarif dan / atau lebih 76

kebisingan. Juga, karena kolom berdarah adalah sebanding dengan jumlah cairan tahap dalam kolom, film berdarah lebih tebal lakukan. Gambar 6.7 adalah aplikasi film khas tebal, pemisahan alam komponen gas menggunakan kolom 50 meter. Ketebalan film lima mikrometer dari polydimethylsiloxane, resin. Catatan resolusi yang sangat baik metana, etana, propana, dan n-butana: puncak satu, dua, tiga, dan empat. Kolom ini cocok untuk senyawa atsiri tetapi tidak harus digunakan untuk sampel berat molekul tinggi, karena akan memerlukan berlebihan

suhu tinggi dan waktu analisis yang panjang, Catatan, misalnya, bahwa benzena (Puncak 14) membutuhkan waktu 20 menit untuk elute bahkan pada 140 ° C. Keuntungan utama film tipis, yang didefinisikan sebagai kurang dari 0,2 JLm, tinggi efisiensi dan, karenanya, resolusi yang lebih tinggi. Jadi lebih pendek dapat kolom digunakan untuk berbagai aplikasi (lihat kembali Gambar 6.6).. Selain itu, lebih rendah suhu operasi dapat digunakan, memberikan kolom kurang berdarah. Alat Tulis Fase Cair Fase cair untuk kolom kapiler yang sangat mirip dengan yang digunakan untuk dikemas kolom. Dalam kedua kasus fase cair harus menunjukkan selektivitas yang tinggi, sebuah, untuk senyawa dari bunga. Selain itu, mereka harus mampu operasi pada suhu tinggi dengan kolom minimal berdarah. Ini khususnya penting untuk detektor sensitif seperti FID, ECD, dan MS yang digunakan untuk analisis jejak. Tabel 6.4 daftar fase cair paling sering digunakan untuk kedua dikemas dan kolom kapiler. Pada dasarnya, ada dua jenis fase cair di digunakan saat ini. Salah satunya adalah polimer siloxane, yang OV-1, SE-30, DB-1 (100% metil Polisiloksan) dan OV-17, OV-275, DB-1701, DB-710 (campuran Polisiloksan metil, fenil, dan cyano) yang paling populer. Yang lainnya fase cair yang umum adalah polietilen glikol (Carbowax 20m, Superox '" dan DB-lilin ®). Skema struktur dari kedua Polisiloksan dimetil dan polietilen sebuah fase cair glikol diberikan dalam Bab 4. Namun ada, satu perbedaan antara kolom dikemas dan fase cair kolom kapiler: kapiler fase kolom secara luas cross-linked. Dengan memanaskan baru disiapkan kolom kapiler pada suhu tinggi (tanpa kolom aliran) metil yang bentuk kelompok-kelompok radikal bebas yang siap lintas-link ke formulir yang lebih stabil, 77

tinggi berat molekul fase gusi. Bahkan ada beberapa ikatan kimia dengan kelompok silanol pada permukaan leburan silika. Ini cross-linked dan ikatan kimia fase suhu lebih stabil, tahan lama dan dapat dibersihkan dengan membilasnya dengan pelarut ketika dingin. Kebanyakan komersial kapiler kolom adalah cross-linked. Carrier Gas dan Laju Alir Van Deemter plot yang ditampilkan dalam Bab 3, dan mereka menggambarkan efek kolom laju aliran pada perluasan band, H. Ada laju alir optimal untuk minimal band pelebaran. Dengan kolom dikemas, dan juga dengan kolom film tebal megabore, nitrogen adalah gas pembawa pilihan sejak van Deemter istilah B (difusi longitudinal dalam fasa gas) mendominasi. Nitrogen yang lebih berat daripada helium meminimalkan istilah B dan menghasilkan lebih efisiensi. Dalam kolom kapiler, bagaimanapun, terutama yang dengan film tipis, hidrogen adalah gas carrier yang paling baik (lihat Gambar 3.12). Dengan kolom kapiler efisiensi (N) biasanya lebih dari cukup dan penekanannya pada

78

kecepatan. Jadi, kolom kapiler biasanya dijalankan pada aliran lebih cepat dari yang optimal tingkat di mana istilah CM, perpindahan massa dalam fase gerak, mendominasi. Hidrogen memberikan analisis yang jauh lebih cepat dengan kerugian minimal di efisiensi karena memungkinkan difusi lebih cepat dalam fase gerak dan meminimalkan CM istilah dalam persamaan Golay. Sebagai contoh, lihat kembali ke kromatogram cepat dalam Gambar 6.6 di mana hidrogen gas pembawa digunakan pada 5 kali lebih cepat dari laju alir optimal. Analisis ini berkecepatan tinggi adalah tidak mungkin dengan kolom dikemas atau bahkan film tebal kolom kapiler. , Inlet kapiler SISTEM kolom kapiler memiliki persyaratan yang sangat ketat untuk injeksi sampel: The profil injeksi harus sangat sempit (cepat suntikan) dan kuantitas 79

harus sangat kecil, biasanya kurang dari 1 mikrogram. Sebuah khas 25-m kapiler kolom mengandung sekitar 10 mg fase cair, dibandingkan dengan 2-3 g untuk 6-ft dikemas kolom. Hal ini menjelaskan mengapa sampel yang sangat kecil harus disuntikkan; itu perlu untuk menghindari "over-loading" kolom. puncak kapiler biasanya sangat sempit, seringkali memiliki lebar puncak dari beberapa detik, suntikan sehingga sangat cepat diperlukan untuk meminimalkan band memperluas dari injeksi lambat. Ada banyak teknik injeksi digunakan dalam kapiler GC, bahkan seluruh buku telah ditulis tentang topik [3], tetapi di sini kita hanya akan membahas teknik yang paling umum. Split Injeksi Split injeksi adalah yang tertua, paling sederhana, dan mudah untuk menggunakan teknik injeksi. Prosedur ini melibatkan suntik 1 sakit sampel dengan jarum standar ke dalam port injeksi panas yang berisi kapal kaca dinonaktifkan. Itu sampel dengan cepat menguap, dan hanya sebagian kecil, biasanya 1-2%, dari uap masuk kolom (lihat Gambar. 6.8). Sisanya menguap sampel dan besar aliran gas pembawa membagikan melalui split atau katup pembersihan. Ada beberapa keuntungan untuk membagi suntikan. Teknik ini sederhana karena operator hanya untuk mengontrol rasio split yang dilakukan oleh pembukaan atau penutupan perpecahan (pembersihan) katup. Jumlah sampel diperkenalkan ke kolom sangat kecil (dan mudah dikontrol), dan laju alir sampai titik split cepat (jumlah kolom dan ventilasi baik tingkat aliran). Hasilnya adalah highresolution perpisahan. Keuntungan lainnya adalah bahwa "rapi" sampel dapat diperkenalkan, biasanya dengan menggunakan rasio split yang lebih besar, sehingga tidak perlu untuk mencairkan sampel. Keuntungan terakhir adalah bahwa "kotor" sampel dapat diperkenalkan dengan memasang plug dari wol kaca dinonaktifkan dalam inlet liner untuk menjebak nonvolatile Senyawa. Salah satu kelemahan adalah bahwa jejak analisis terbatas karena hanya pecahan sampel masuk kolom. Akibatnya, splitless atau on-kolom teknik injeksi direkomendasikan untuk analisis jejak.

Kelemahan kedua adalah bahwa proses pemecahan kadang-kadang mendiskriminasikan terhadap tinggi berat molekul zat terlarut dalam sampel sehingga sampel 80

masuk kolom tidak respresentative sampel disuntikkan. Splitless Injeksi Splitless injeksi menggunakan hardware yang sama dengan injeksi split (Gambar 6.9), tetapi katup split awalnya ditutup. Sampel diencerkan dalam pelarut volatile (Seperti heksana atau metanol) dan 1-5 sakit disuntikkan di suntik dipanaskan pelabuhan. Sampel ini menguap dan perlahan-lahan (aliran laju sekitar 1 mLimin) membawa ke kolom dingin di mana baik sampel dan pelarut yang kental. Setelah 45 detik, katup membuka split (laju alir sekitar 50 mLlmin), dan setiap uap meninggalkan sisa di pelabuhan injeksi dengan cepat menyapu keluar dari sistem. membersihkan Septum sangat penting dengan suntikan splitless. Kolom sekarang diprogram suhu, dan awalnya hanya volatile pelarut menguap dan dibawa melalui kolom. Sementara ini terjadi, yang analit sampel sedang memfokuskan kembali menjadi band sempit residu pelarut. Pada beberapa waktu kemudian, ini analit yang menguap oleh kolom panas dan dikromatografi. Resolusi tinggi ini lebih tinggi mendidih analit diamati. Keuntungan yang besar dari injeksi splitless adalah sensitivitas meningkat lebih dari split. sampel lebih Biasanya 20 - 50 kali lipat memasuki kolom dan Hasil analisis jejak ditingkatkan untuk lingkungan, farmasi, atau sampel biomedis.

Splitless memiliki beberapa kelemahan. Hal ini memakan waktu, Anda harus mulai dengan kolom dingin, dan Anda harus program suhu. Anda juga harus encer sampel dengan pelarut mudah menguap, dan mengoptimalkan baik awal kolom suhu dan waktu pembukaan katup split. Akhirnya, splitless injeksi tidak cocok untuk senyawa atsiri. Untuk kromatografi baik puncak pertama dari bunga harus memiliki titik didih 30 ° C lebih tinggi daripada pelarut. Lain lubang Tiga jenis lubang kapiler "injeksi langsung," "pada kolom" dan "dingin di-kolom." injeksi langsung melibatkan penyuntikan sampel kecil (Biasanya 1 sakit atau lebih kecil) ke dalam kapal uap gelas mana dilakukan langsung ke kolom. On-kolom berarti memasukkan tepat sejajar jarum ke dalam kolom kapiler, biasanya 0,53-mm-id megabore, dan membuat suntikan di dalam kolom. Kedua teknik ini membutuhkan tebal film dan kolom kapiler dengan diameter lebar dengan lebih cepat dari biasanya aliran 81

Harga (-10 mLlmin). Bahkan dengan resolusi tindakan pencegahan ini tidak sebagai baik seperti split atau injeksi splitless. Keuntungan bisa lebih baik jejak analisis dan kuantisasi baik. Kedua resolusi tinggi dan hasil kuantisasi baik dari dingin pada kolomsuntikan. Contoh cair disuntikkan ke dalam kapal inlet baik dingin atau dingin kolom. Injector dingin dengan cepat dipanaskan dan sampel menguap dan dilakukan melalui kolom. Minimal dekomposisi sampel diamati. Untuk senyawa termolabil, dingin di-kolom adalah teknologi injeksi terbaik

nique. Sayangnya, penyuntik ini adalah aksesori mahal saat ini dan tidak umum digunakan. Satu aplikasi, ditunjukkan dalam Gambar 6.10, adalah pemisahan amina yang dingin injeksi on-kolom adalah [optimal 4].

82

Dengan beberapa pengecualian, sebagian besar digunakan dalam GC detektor diciptakan khusus untuk teknik ini. Pengecualian utama adalah konduktivitas termal detektor (TCD, atau katharometer) yang sudah ada sebelumnya sebagai penganalisis gas ketika GC mulai, dan spektrometer massa (atau detektor selektif massa, MSD) yang disesuaikan untuk menerima volume besar dan cepat pemindaian tingkat diperlukan untuk puncak GC. Baru-baru ini, teknik spektroskopi lainnya seperti IR dan emisi plasma atom telah digabungkan ke efluen dari gas chromatographs, menjabat sebagai GC detektor. Secara total, mungkin ada lebih dari 60 detektor yang telah digunakan dalam Gc. Banyak dari "diciptakan" detektor didasarkan pada pembentukan ion per satu cara atau lain, dan dari jumlah ini, detektor ionisasi nyala (FID) telah menjadi yang paling populer. Detektor yang paling umum adalah tercantum pada Tabel 7.1; orang-orang yang sangat selektif begitu ditunjuk dalam dua kolom. Dalam salah satu buku awal detektor, David [1] dibahas delapan detektor secara rinci (lihat Tabel 7.1) dan selusin sebentar lain, menunjukkan bahwa 20 detektor adalah yang paling populer di tahun 1970-an. Baru-baru ini, Hill dan McMinn [2] telah mengedit sebuah buku yang menggambarkan dua belas detektor yang mereka anggap yang paling penting dalam Gc kapiler. Scott baru buku tentang kromatografi detektor [3] mencakup FID, NPD, dan detektor fotometri dalam satu bagian, jenis ionisasi argon (termasuk la ionisasi dan ECD) di bagian kedua, dan jenis katharometer (termasuk TCD, Gade, dan radiometrik) dalam ketiga. Sebuah detektor sedikit yang benar-benar selektif dijelaskan

dalam buku yang diedit oleh Sievers [4]; itu sangat khusus dan ditujukan terutama untuk analisis unsur. Ini dan lainnya referensi pada Tabel 7.1 dapat berkonsultasi untuk informasi lebih lanjut. Dalam bab ini, FID, TCD, dan detektor penangkapan elektron (ECD) akan tampil karena mereka adalah tiga detektor yang paling banyak digunakan. A beberapa yang lain dari Tabel 7.1 akan dijelaskan secara singkat, di samping itu, kombinasi GC dan MS sangat penting yang diperlakukan secara terpisah dalam Bab 10. Pertama, beberapa klasifikasi dan sifat umum 83

akan dibahas dalam rangka untuk menyediakan kerangka kerja yang komprehensif untuk bab ini. CLASSIFikasi DARI DETEKTOR Dari lima sistem klasifikasi tercantum di bawah ini, tiga yang paling penting yang dibahas dalam bagian ini, dua lainnya cukup jelas. Termasuk dalam daftar adalah klasifikasi untuk FID, TCD, dan ECD.

Antara detektor mereka yang mengukur konsentrasi analit dalam gas pembawa dibandingkan yang secara langsung mengukur jumlah absolut analit terlepas dari volume gas pembawa. Catatan dalam contoh pertama dalam daftar di atas bahwa TCD dan ECD konsentrasi dan jenis dan FID adalah laju aliran massa jenis. Salah satu konsekuensi dari perbedaan ini adalah bahwa puncak wilayah dan ketinggian puncak dipengaruhi oleh perubahan tarif aliran gas pembawa. Untuk memahami penyebab perbedaan ini dalam jenis detektor, pertimbangkan efek pada sinyal TCD jika arus benar-benar berhenti. Detektor sel tetap diisi dengan konsentrasi tertentu analit dan yang termal konduktivitas terus diukur pada tingkat konstan. Namun, untuk laju aliran massa seperti detektor FID di mana sinyal timbul dari pembakaran sampel, berhenti sama sekali di tingkat aliran akan menyebabkan pengiriman analit untuk detektor untuk berhenti dan sinyal akan turun ke nol. Gambar 7.1 menunjukkan pengaruh laju alir menurun di puncak dari dua jenis detektor: untuk jenis konsentrasi, daerah meningkat dan tinggi yang tidak berubah, karena massa jenis laju aliran, ketinggian puncak berkurang dan daerah tersebut tidak berubah. Akibatnya, data kuantitatif diperoleh pada laju aliran yang berbeda akan terpengaruh. Meskipun variasi ini dapat dihilangkan dengan menggunakan standar atau regulator arus elektronik, sering kasus bahwa tingkat aliran akan berubah selama menjalankan individu bila kromatograf yang sedang dioperasikan pada tekanan konstan selama suhu diprogram operasi (seperti, misalnya, berikut split / sampling injeksi splitless). Untuk alasan ini, operasi di flowmay konstan diperlukan untuk kuantitatif GC analisis suhu terprogram, dan mudah dicapai hari ini dengan menggunakan pengendali arus elektronik. Untungnya, jika ada yang melakukan analisis kuantitatif dengan suhu diprogram pada tekanan konstan dengan FID, daerah puncak tidak akan terpengaruh. Perbedaan kinerja memiliki dua konsekuensi lainnya. Pertama-tama, sulit untuk membandingkan sensitivitas dari kedua jenis detektor 84

karena sinyal mereka memiliki unit yang berbeda; perbandingan yang lebih baik antara kuantitas minimum yang terdeteksi memiliki satuan massa untuk kedua jenis. Dan kedua, perbandingan yang valid antara jenis detektor memerlukan spesifikasi dari laju alir dan konsentrasi. Operasi dari semua detektor dioptimalkan ketika volume internal mereka kecil, sejak band memperluas dengan demikian diminimalkan. Namun, konsentrasi detektor memiliki volume sel di mana deteksi yang terjadi dan besarnya itu volume pentingnya khusus. Misalkan volume sel konsentrasi detektor adalah begitu besar sehingga seluruh sampel bisa terdapat dalam satu sel volume. Bentuk puncak yang dihasilkan akan sangat diperluas dan terdistorsi. Perkiraan dapat dibuat dari persyaratan volume sel yang ideal, karena lebar puncak dapat dinyatakan dalam satuan volume (lebar dasar, 4a, dimana x-axis itu dalam satuan mL). Sebuah puncak kecil dari sebuah kolom kapiler mungkin lebar sekecil 1 detik, yang merupakan volume 0,017 mL (17 sakit) pada laju alir 1 Mumin. Jika volume detektor adalah sama atau lebih besar, puncak seluruh bisa terkandung di dalamnya pada satu waktu dan puncak akan sangat luas. Sebuah detektor ideal untuk situasi ini harus memiliki volume secara signifikan lebih kecil, katakanlah 2 sakit. Bila hal ini tidak mungkin, make-up gas dapat ditambahkan ke kolom limbah untuk menyapu sampel melalui detektor lebih cepat. Obat ini akan sangat membantu untuk laju alir massa detektor tapi kurang begitu untuk detektor konsentrasi. Dalam kasus terakhir ini, membuat gas melemahkan-up sampel, menurunkan konsentrasi serta menghasilkan sinyal-bukan solusi yang memuaskan dalam beberapa ~ cas s. Akibatnya, detektor konsentrasi harus memiliki volume yang sangat kecil Jika mereka harus berhasil digunakan untuk Gc kapiler. Make-up gas juga dapat digunakan dengan mereka, tetapi pada penurunan risiko sinyal. Universal vs Selektif Detektor kategori ini mengacu pada nomor atau persentase analit yang dapat dideteksi oleh sistem tertentu. Sebuah detektor mendeteksi secara teoritis universal semua zat terlarut, sedangkan tipe selektif menanggapi jenis tertentu atau kelas senyawa. Ada yang berbeda derajat dasarkan ~ selecti; yang FID. tidak 85

sangat selektif dan mendeteksi semua senyawa organik sedangkan IS sangat ECD selektif dan hanya mendeteksi spesies yang sangat elektronegatif, seperti halogencontaining pestisida. Kedua jenis detektor memiliki kelebihan. Detektor universal adalah digunakan bila seseorang ingin memastikan semua zat terlarut eluen terdeteksi. Ini penting bagi penapisan kualitatif sampel baru dengan komposisi yang tidak diketahui. Di sisi lain, detektor selektif yang telah ditingkatkan sensitivitas untuk kelas kecil senyawa dapat provid.e analisis jejak. untuk bahwa kelas bahkan di hadapan senyawa lain konsentrasi yang lebih tinggi. Hal ini dapat menyederhanakan sebuah kromatogram kompleks dengan mendeteksi hanya beberapa senyawa ini, dan selektif "mengabaikan '." ~ Ia beristirahat. Sebagai contoh., FPD selektif yang dapat mendeteksi hanya hutan-contammg senyawa sulfur ma puncak hidrokarbon dalam bensin atau sampel bahan bakar jet. Merusak vs, tak rusak tak rusak-jenis detektor diperlukan jika analit terpisah adalah harus direklamasi untuk analisa lebih lanjut, seperti, misalnya, ketika identifikasi adalah yang akan dilakukan dengan menggunakan instrumen tambahan. Salah satu cara untuk memanfaatkan destruktif detektor dalam situasi seperti ini akan membagi aliran limbah cair dan mengirim hanya bagian dari ke detektor, mengumpulkan sisanya untuk analisis. KARAKTERISTIK DETEKTOR Karakteristik detektor yang paling penting adalah sinyal yang dihasilkannya, dari Tentu saja, tapi dua karakteristik penting lainnya adalah kebisingan dan waktu yang konstan. Dua yang terakhir akan dibahas pertama untuk memberikan latar belakang diskusi tentang sinyal. Kebisingan Noise adalah sinyal yang dihasilkan oleh detektor karena tidak ada sampel. Itu disebut juga latar belakang dan muncul di baseline. Biasanya diberikan dalam satuan yang sama dengan sinyal detektor normal. Idealnya,. baseline tidak harus menunjukkan kebisingan, tapi fluktuasi acak melakukan Anse dari komponen elektronik dari amplifier yang dibuat, dari nyasar sinyal dalam lingkungan, dan dari kontaminasi dan kebocoran. Sirkit desain dapat menghilangkan kebisingan beberapa; perisai dan landasan dapat mengisolasi detektor dari lingkungan; dan pretreatment sampel dan murni kromatografi gas bisa menghilangkan beberapa suara dari kontaminasi. Definisi kebisingan digunakan oleh ASTM (American Society sebelumnya untuk Pengujian dan Material) digambarkan pada Gambar 7.2. Dua garis sejajar ditarik antara maxima puncak ke puncak dan melampirkan minimum kebisingan, diberikan dalam mV dalam contoh ini. Selain itu, angka menunjukkan jangka panjang kebisingan atau drift terjadi selama 30 menit. Jika memungkinkan, yang sumber dari kebisingan dan drift harus ditemukan dan dieliminasi atau diminimalkan , Karena mereka membatasi sinyal minimum yang dapat dideteksi. Beberapa saran untuk mengurangi kebisingan dapat ditemukan dalam referensi 6. Rasio sinyal terhadap kebisingan adalah karakteristik nyaman 86

kinerja detektor. Hal menyampaikan informasi lebih lanjut tentang batas bawah deteksi daripada suara saja. Biasanya, sinyal terkecil dapat dikaitkan dengan analit adalah salah satu yang sinyal-to-noise rasio atau SIN, adalah 2 atau lebih. Sebuah rasio SIN dari 2 ditunjukkan pada Gambar 7.3, dapat dilihat bahwa ini tentu saja merupakan nilai minimum untuk membedakan puncak dari kebisingan latar belakang. Sharp spike yang melebihi suatu SIN dari 2 tidak boleh diartikan sebagai puncak seperti ini sering timbul dari kontaminasi dan mewakili berbagai jenis detektor ketidakstabilan.

komponen elektronik dari amplifier yang dibuat, dari nyasar sinyal dalam lingkungan, dan dari kontaminasi dan kebocoran. Sirkit desain dapat menghilangkan kebisingan beberapa; perisai dan landasan dapat mengisolasi detektor dari lingkungan; dan pretreatment sampel dan murni kromatografi gas bisa menghilangkan beberapa suara dari kontaminasi. Definisi kebisingan digunakan oleh ASTM (American Society sebelumnya untuk Pengujian dan Material) digambarkan pada Gambar 7.2. Dua garis sejajar ditarik antara maxima puncak ke puncak dan melampirkan minimum kebisingan, diberikan dalam mV dalam contoh ini. Selain itu, angka menunjukkan jangka panjang kebisingan atau drift terjadi selama 30 menit. Jika memungkinkan, yang sumber dari kebisingan dan drift harus ditemukan dan dieliminasi atau diminimalkan , Karena mereka membatasi sinyal minimum yang dapat dideteksi. Beberapa saran untuk mengurangi kebisingan dapat ditemukan dalam referensi 6. Rasio sinyal terhadap kebisingan adalah karakteristik nyaman 87

kinerja detektor. Hal menyampaikan informasi lebih lanjut tentang batas bawah deteksi daripada suara saja. Biasanya, sinyal terkecil dapat dikaitkan dengan analit adalah salah satu yang sinyal-to-noise rasio atau SIN, adalah 2 atau lebih. Sebuah rasio SIN dari 2 ditunjukkan pada Gambar 7.3, dapat dilihat bahwa ini tentu saja merupakan nilai minimum untuk membedakan puncak dari kebisingan latar belakang. Sharp spike yang melebihi suatu SIN dari 2 tidak boleh diartikan sebagai puncak seperti ini sering timbul dari kontaminasi dan mewakili berbagai jenis detektor ketidakstabilan.

Sinyal Output sinyal detektor atau kepentingan khusus bila suatu analit terdeteksi. Besarnya sinyal ini (tinggi puncak atau daerah puncak) adalah proporsional dengan jumlah analit dan merupakan dasar untuk kuantitatif analisis. Its karakteristik sangat penting karena analisis kuantitatif 88

adalah aplikasi penting bagi Gc. Spesifikasi sinyal untuk didefinisikan adalah sensitivitas, pendeteksian minimum, berbagai linier, dan jangkauan dinamis. Kepekaan Kepekaan detektor, S, sama dengan sinyal output per unit konsentrasi atau per unit massa suatu analit dalam gas pembawa. Satuan sensitivitas didasarkan pada pengukuran luas puncak dan berbeda untuk dua utama detektor klasifikasi, konsentrasi dan laju alir massa [8]. Untuk jenis detektor konsentrasi, kepekaan dihitung per unit konsentrasi analit dalam fasa gas mobile,

dimana A adalah luas puncak terpadu (dalam satuan seperti saya / min), E adalah puncak tinggi (dalam mV), C adalah konsentrasi analit dalam gas pembawa (dalam mg / mL), Wis massa masa kini analit (dalam mg), dan Fe adalah pembawa laju alir gas (dikoreksi ") dalam mL / menit. dihasilkan dimensi untuk sensitivitas detektor konsentrasi mV mL / mg. Untuk detektor laju alir massa jenis, sensitivitas dihitung per unit massa analit dalam fasa gas mobile,

dimana M adalah laju aliran massa analit memasuki detektor (dalam mg! sec), Wis massa analit (dalam mg), daerah puncak adalah di ampere-detik, dan tinggi puncak dalam ampere. Dalam hal ini, dimensi untuk sensitivitas adalah ampere-sec/mg atau coulomb / mg. Seperti disebutkan sebelumnya, perbedaan di unit sensitivitas antara dua jenis detektor membuat perbandingan sensitivitas sulit. Gambar 7.6 memperlihatkan plot sinyal detektor untuk konsentrasi versus Ted, detektor jenis konsentrasi. Kemiringan garis ini adalah detektor sensitivitas menurut persamaan 1. Sebuah detektor lebih peka akan kemiringan yang lebih besar dan sebaliknya. Karena berbagai konsentrasi sampel sering meluas sampai ke beberapa kali lipat, plot ini biasanya dibuat

89

Seperti terlihat di ujung atas grafik, linieritas hilang dan akhirnya sinyal gagal meningkat dengan peningkatan konsentrasi. Fenomena akan dibahas kemudian dalam bagian tentang linieritas. Minimum pendeteksian Titik terendah pada Gambar 7.6, mewakili batas bawah yang dapat terdeteksi, telah dipanggil oleh berbagai nama seperti minimum terdeteksi kuantitas (MDQ), batas deteksi (LOD), dan detectivity. The IUPAC [8] telah mendefinisikan pendeteksian minimum, D, sebagai,

dimana N adalah tingkat kebisingan dan S adalah sensitivitas sebagai hanya didefinisikan. Perhatikan bahwa pembilang dikalikan dengan 2 sesuai dengan definisi dibahas sebelumnya bahwa sinyal terdeteksi harus dua kali tingkat kebisingan. Unit dari pendeteksian adalah mg / mL untuk detektor jenis konsentrasi dan mg / detik untuk jenis laju aliran massa. Jika pendeteksian minimum adalah dikalikan dengan lebar puncak puncak analit yang diukur, dan jika unit yang tepat digunakan, hasil nilai yang memiliki satuan mg dan merupakan massa minimum yang dapat dideteksi chromatographically, memungkinkan untuk dilusi dari sampel yang dihasilkan dari proses tersebut. Beberapa menyebutnya nilai MDQ. Dengan demikian, itu adalah ukuran yang mudah digunakan untuk membandingkan batas deteksi antara detektor dari berbeda jenis. Sebuah istilah yang terkait adalah batas kuantisasi (LOQ) yang harus di atas LOD itu. Sebagai contoh, pedoman ACS pada analisis lingkungan [9] menetapkan bahwa LOD harus tiga kali SIN dan sepuluh kali LOQ SIN tersebut. Definisi dari USP adalah sama dan juga menyatakan bahwa LOQ seharusnya tidak kurang dari dua kali LOD itu [10]. lembaga lain mungkin memiliki pedoman lainnya, tapi semua prihatin dengan kebutuhan yang sama untuk menentukan deteksi dan batas kuantisasi, dan hubungan di antara mereka. Mereka tidak sama. Range Linear Garis lurus pada Gambar 7.6 melengkung off dan menjadi nonlinier di tinggi konsentrasi. Hal ini menjadi perlu untuk menetapkan batas atas linieritas dalam rangka untuk mengukur rentang linier. Sejak Gambar 7.6 sering diplot pada skala log-log, penyimpangan dari linieritas dapat diminimalkan dan kurva adalah tidak baik digunakan untuk menunjukkan penyimpangan. Sebuah plot yang lebih baik adalah salah satu kepekaan versus konsentrasi seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7.7. Berikut konsentrasi analit dapat pada skala log untuk mendapatkan berbagai macam sedangkan sumbu y (sensitivitas) dapat akan linear. Menurut spesifikasi ASTM, batas atas linieritas adalah konsentrasi analit yang berhubungan dengan sensitivitas sebesar 95% dari sensitivitas maksimum diukur. Garis putus-putus atas pada gambar adalah

90

yang ditarik melalui titik yang mewakili sensitivitas maksimum, dan garis putus-putus adalah 0,95 lebih rendah dari nilai tersebut.

Setelah menetapkan kedua ujung rentang linear, detectivity minimum dan batas atas, rentang linier didefinisikan sebagai hasil bagi mereka:

Karena kedua istilah diukur dalam satuan yang sama, rentang berdimensi linear. Jelas, nilai besar yang diinginkan untuk parameter ini. Rentang linier tidak harus bingung dengan rentang dinamis yang ditunjukkan pada Gambar 7.6 sebagai mengakhiri pada titik di mana kurva tingkat off dan tidak menunjukkan sinyal semakin meningkat dengan peningkatan konsentrasi. Batas atas rentang dinamis akan lebih tinggi dari batas atas rentang linier yang merupakan konsentrasi atas di mana Ringkasan Spesifikasi dan seleksi karakteristik ini sangat detektor penting, terutama untuk analisis kuantitatif (lihat Bab 8). Seorang yang baik diskusi tentang memilih pengaturan detektor yang tepat, meringkas banyak bahan dari bagian ini telah diterbitkan baru-baru ini oleh Hinshaw [11]. DETECfOR ionisasi nyala (Flo) Flo adalah GC detektor yang paling luas digunakan, dan merupakan contoh dari detektor ionisasi diciptakan khusus untuk Gc. Kolom effluen dibakar dalam api oxy-hidrogen skala kecil yang menghasilkan beberapa ion dalam proses. Ion-ion dikumpulkan dan membentuk sebuah arus kecil yang menjadi sinyal. Ketika tidak ada sampel dibakar, harus ada ionisasi kecil, kecil saat ini (10-14 a) yang timbul dari kotoran dalam persediaan hidrogen dan udara. Jadi, Flo adalah detektor tipe properti khusus dengan karakteristik sensitivitas tinggi. Desain Flo tipikal ditunjukkan pada Gambar 7.8. Kolom effluen dicampur dengan hidrogen dan menyebabkan tip burner kecil yang dikelilingi oleh 91

aliran udara yang tinggi untuk mendukung pembakaran. Sebuah alat penyala disediakan untuk remote pencahayaan dari nyala api. Elektroda kolektor bias relatif sekitar 300 V ke ujung api dan arus dikumpulkan diperkuat oleh impedansi tinggi sirkuit. Karena air yang dihasilkan dalam proses pembakaran, detektor harus dipanaskan sampai setidaknya 125 ° C untuk mencegah kondensasi air dan tinggi mendidih sampel. FIOs Kebanyakan berjalan pada 250 ° C atau lebih panas. Mekanisme pasti dari ionisasi api masih belum diketahui. Sternberg et al. [12] mempresentasikan teori awal dan Sevcik et al. [13] telah disajikan diskusi yang lebih baru. Flo yang merespon semua senyawa organik yang terbakar dalam nyala api oxy-hidrogen. sinyal ini sebanding dengan kandungan karbon, sehingga menimbulkan ke sama apa yang disebut per karbon aturan. A

publikasi baru-baru ini tampaknya untuk mengkonfirmasi bahwa alasan respon konstan faktor ini disebabkan oleh konversi seluruh atom karbon dalam organik metana terlarut ke dalam proses pembakaran Flo [14]. Jadi, semua hidrokarbon harus menunjukkan respon yang sama, setiap atom karbon. Ketika heteroatoms seperti oksigen atau nitrogen yang hadir, tetapi, penurunan faktor. nilai respon relatif sering ditabulasikan sebagai nomor karbon yang efektif, ECN, misalnya, metana memiliki nilai 1.0, etana, 2.0, dll Tabel 7.2 daftar nilai ECN eksperimental dan teoritis untuk beberapa sederhana organik senyawa [15]. Jelas faktor respon yang diperlukan untuk baik kuantitatif analisis (lihat Bab 8 untuk beberapa nilai bobot respons). Untuk operasi yang efisien, gas (hidrogen dan udara) harus murni dan bebas dari bahan organik yang akan meningkatkan ionisasi latar belakang. laju aliran mereka harus dioptimalkan untuk desain detektor tertentu (Dan pada tingkat lebih rendah, yang analit tertentu). Seperti ditunjukkan dalam Gambar 7.9, yang laju alir hidrogen berjalan melalui sensitivitas maksimum untuk setiap operator laju alir, yang terjadi optimum pada tentang laju aliran kolom. Untuk kolom tubular terbuka yang memiliki arus sekitar 1 ml / menit, make-up gas ditambahkan ke gas pembawa untuk membawa total sampai sekitar 30 ml / menit. Hidrogen dapat digunakan sebagai gas pembawa, tetapi perubahan arus gas (a

92

sumber terpisah hidrogen masih diperlukan) dan desain detektor adalah dibutuhkan [16] selain tindakan keselamatan yang harus diambil.

Laju aliran udara kurang kritis, dan nilai dari 300-400 MLI min sudah cukup bagi kebanyakan detektor, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7.10. Senyawa organik tidak mengandung karbon tidak terbakar dan tidak terdeteksi. Yang paling penting tercantum pada Tabel 7.3. Paling signifikan antara orang-orang yang tercantum adalah air, senyawa yang sering menghasilkan buruk ekor puncak. Ketiadaan air puncak izin FID yang akan digunakan untuk analisis sampel yang mengandung air karena tidak ikut campur dalam kromatogram ". Khas aplikasi termasuk kontaminan organik dalam air, anggur dan minuman beralkohol lainnya, dan produk makanan. Daftar pada halaman 116 meringkas karakteristik FID. -Nya keuntungan adalah sensitivitas yang baik, sebuah linieritas besar, kesederhanaan, ketidakrataan, dan kemampuan beradaptasi terhadap semua ukuran kolom.

93

Detektor ionisasi nyala (Flo) Karakteristik 1. MDQ-IO-LLG (-50 ppb) 2. Respon-senyawa organik saja, tidak tetap gas atau air 3. Linieritas-c-ltr'-c-baik 4. Stabilitas-baik, sedikit efek aliran atau perubahan suhu 5. Suhu batas-400 ° C 6. Carrier gas nitrogen atau helium DETEKTOR KONDUKTIVITAS THERMAL (TCD) Hampir semua instrumen GC awal dilengkapi dengan konduktivitas termal detektor. Mereka tetap populer, terutama untuk dikemas kolom dan analit anorganik seperti HzO, CO, coz, dan Hz (lihat Bab 5). The TCD adalah detektor diferensial yang mengukur konduktivitas termal dari analit dalam gas pembawa, dibandingkan dengan konduktivitas termal murni gas pembawa. Dalam detektor konvensional setidaknya dua rongga sel yang diperlukan, 94

walaupun sel dengan empat rongga lebih umum. Rongga yang dibor menjadi balok logam (baja stainless biasanya) dan masing-masing berisi resistensi kawat atau filamen (kawat panas yang disebut). Filamen yang baik yang dipasang di pemegang, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7,11, atau diadakan secara konsentris dalam silinder rongga, desain yang memungkinkan volume sel harus diminimalkan. Mereka terbuat dari tungsten atau tungsten paduan-renium (disebut WX filamen) resistensi tinggi. Filamen digabungkan ke dalam rangkaian Jembatan Wheatstone, yang klasik metode untuk mengukur resistensi (Gbr. 7.12). Sebuah arus DC lewat melalui mereka untuk panas mereka di atas suhu blok sel, menciptakan sebuah diferensial suhu. Dengan gas pembawa murni melewati keempat unsur-unsur, rangkaian jembatan adalah seimbang dengan "nol" kontrol. Ketika analit elutes, konduktivitas termal dari campuran gas di dua sampel rongga menurun, suhu filamen mereka meningkat sedikit, menyebabkan perlawanan filamen untuk meningkatkan sangat, dan jembatan menjadi -yang tidak seimbang tegangan berkembang di sudut-sudut yang berlawanan dengan

95

jembatan. tegangan itu dijatuhkan di sebuah pembagi tegangan (yang disebut attenuator) dan kemudian seluruh atau sebagian diumpankan ke recorder, integrator, atau sistem data lain. Setelah analit sepenuhnya eluen, konduktivitas termal dalam rongga sampel kembali ke nilai semula dan jembatan kembali untuk menyeimbangkan. Semakin besar pemanasan arus diterapkan pada filamen, semakin besar suhu diferensial dan semakin besar sensitivitas. Namun, tinggi filamen suhu juga mengakibatkan kehidupan filamen lebih pendek karena kecil pengotor oksigen mudah mengoksidasi kabel tungsten, akhirnya menyebabkan mereka untuk gelandangan keluar. Untuk alasan ini, sistem GC harus bebas dari kebocoran dan dioperasikan dengan gas pembawa oksigen bebas. Jembatan Wheatstone dapat dioperasikan pada tegangan konstan atau konstan saat ini, tetapi sebuah rangkaian yang lebih rumit dapat digunakan untuk menjaga konstan temperatur filamen. Dengan demikian, kontrol detektor dapat menetapkan pengaturan arus, tegangan, temperatur, atau perbedaan suhu (i1D, tergantung pada jenis tertentu dari kontrol. Mengontrol suhu filamen 96

untuk menjaga jumlah konstan nulling Jembatan, tidak seperti sirkuit sederhana yang secara langsung mengukur jembatan tidak seimbang. Nulling menyediakan lebih besar rentang linier, amplifikasi yang lebih besar, batas deteksi rendah, dan lebih sedikit noise [17]. Seperti disebutkan sebelumnya dalam bab ini, volume sel kecil yang diinginkan untuk setia reproduksi bentuk puncak dan kepekaan yang lebih besar. Biasanya, TCD sel-sel sudah volume sekitar 140 sakit yang sangat bagus untuk kolom dikemas atau lebar membosankan kapiler. Penggunaannya dengan kapiler sempit belum menjadi rutin, tetapi sel-sel yang tersedia dengan volume ke 20 sakit dan beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa kromatogram yang baik dapat diperoleh di beberapa kasus [18, 19]. gas Make-up biasanya diperlukan bila kolom kapiler digunakan dengan TCDs. Sebuah sel yang sangat kecil telah dilakukan oleh sebuah etsa NL volume pada chip silika untuk instrumen mikro-GC. produsen lain menggunakan volume kecil (5 sakit) tunggal-sel TCD; dalam operasinya gas dua stream (contoh dan referensi) yang lulus bergantian melalui sel di frekuensi 10 kali per [detik 5]. Gas pembawa digunakan dengan TCD harus memiliki konduktivitas termal (TC) yang sangat berbeda dengan sampel yang akan dianalisis, sehingga sebagian besar umum digunakan gas helium dan hidrogen yang memiliki TC tertinggi nilai [20]. Hal ini dapat dilihat dari nilai-nilai relatif yang tercantum dalam Tabel 7.4 bahwa semua gas lainnya serta memiliki cairan dan padatan jauh lebih kecil nilai TC. Jika nitrogen digunakan sebagai gas pembawa, seseorang dapat mengharapkan untuk mendapatkan puncak biasa bentuk, seringkali dalam bentuk W karena inversi puncak parsial [21]. Itu efek yang sama terjadi jika seseorang berusaha untuk menganalisis hidrogen menggunakan helium sebagai gas pembawa [22]. Tabel 7.4 juga mengandung beberapa nilai relatif untuk respon eksperimental sampel terdaftar. Meskipun respon TCD tidak berhubungan langsung dengan nilai TC, jelas faktor kalibrasi yang diperlukan untuk kuantitatif analisis, sama seperti untuk FID. Ringkasan karakteristik Ted diberikan dalam daftar berikut ini.. TCD adalah detektor, kasar universal dengan sensitivitas yang moderat. Konduktivitas Thermal Detector (TCD) Karakteristik 1. MDQ-10-9g (-10 ppm) 2. Respon-semua senyawa 3. -Linieritas e-ltr ' 4. Stabilitas yang baik 5. Carrier gas helium 6. Suhu batas-400 ° C Penemuan ECD (untuk GC) umumnya dikaitkan dengan Lovelock, berdasarkan publikasi pada 1961 [23]. Ini adalah detektor selektif yang menyediakan sensitivitas sangat tinggi bagi mereka senyawa yang "menangkap elektron." Ini termasuk bahan halogenasi senyawa seperti es ~ pestici dan, akibatnya, menggunakan salah satu utamanya adalah dalam analisis residu pestisida.

97

Ini adalah detektor ionisasi-jenis, tapi tidak seperti kebanyakan detektor kelas ini, sampel terdeteksi dengan menyebabkan penurunan dalam tingkat ionisasi. Ketika analit tidak hadir, beta 63Ni radioaktif memancarkan partikel seperti yang ditunjukkan dalam persamaan (5):

Ini berbenturan partikel bermuatan negatif dengan gas pembawa nitrogen dan menghasilkan lebih banyak elektron (persamaan 6):

analit elektronegatif adalah eluen dari kolom dan memasuki detektor, ia menangkap beberapa elektron bebas dan berdiri saat ini menurun memberikan puncak negatif:

Ion-ion negatif yang terbentuk mempunyai mobilitas lebih lambat daripada elektron bebas dan tidak dikumpulkan oleh anoda. Hubungan matematis untuk proses ini mirip dengan bir Hukum (Digunakan untuk menjelaskan proses penyerapan untuk radiasi elektromagnetik). Dengan demikian, tingkat penyerapan atau menangkap sebanding dengan konsentrasi dari analit itu. Beberapa nilai respon relatif diberikan dalam Tabel 7,5 [24]; selektivitas tinggi untuk bahan halogenasi dapat dilihat dari data-data ini. Gas pembawa yang digunakan untuk dapat ECD nitrogen sangat murni (seperti ditunjukkan dalam mekanisme disajikan) atau campuran metana 5% pada argon. Ketika digunakan dengan kolom kapiler beberapa gas make-up biasanya diperlukan, dan yang nyaman untuk digunakan nitrogen murah sebagai make-up dan helium sebagai gas pembawa. Skema dari ECD tipikal ditunjukkan pada Gambar 7.13. 63Ni ditampilkan sebagai yang emitor beta meskipun tritium juga telah digunakan; nikel biasanya 98

disukai karena dapat digunakan pada suhu yang lebih tinggi (sampai dengan 400 ° C) dan memiliki aktivitas yang lebih rendah (dan lebih aman). Telah terbukti bahwa peningkatan kinerja diperoleh jika diterapkan tegangan berdenyut daripada diterapkan secara terus menerus. Sebuah pulsa gelombang persegi sekitar - 50 V diterapkan pada frekuensi yang mempertahankan arus yang konstan apakah atau tidak analit yang ada di dalam sel; akibatnya frekuensi denyut adalah lebih tinggi bila analit yang hadir. The ESD berdenyut memiliki MDQ rendah dan akibatnya rentang linier yang lebih besar. Contoh residu pestisida analisis di tingkat femtogram ditunjukkan pada Gambar 7.14.

Salah satu kelemahan dari ECD adalah kebutuhan untuk menggunakan sumber radioaktif yang mungkin memerlukan lisensi atau setidaknya pengujian radiologi biasa. A ~ ne inovasi adalah ECD dioperasikan dengan debit berdenyut (~ DD) ~ jadi th t Ini tidak memerlukan sumber radioaktif [25]. detektor ini IS komersial tersedia dan juga dapat dioperasikan sebagai detektor ionisasi helium bawah kondisi yang berbeda. The ESD adalah salah satu detektor yang paling mudah terkontaminasi dan merugikan dipengaruhi oleh oksigen dan air. Ultra murni, gase.s kering, fr.eed ~ m dari kebocoran dan contoh yang bersih diperlukan. Bukti kontaminasi biasanya IS a noi ~ baseline y atau puncak yang negati kecil: e dips sebelum er ~ af a.nd puncak masing-masing. Membersihkan kadang-kadang dapat accomphshed oleh Pera l ~? N? Dengan hidrogen gas pembawa pada suhu tinggi untuk membakar impunties, tapi pembongkaran sering diperlukan. Daftar di halaman 123 memberikan karakteristik ECD. I.n ringkasan, itu adalah detektor sensitif dan selektif untuk matenals halogenasi tapi satu yang mudah terkontaminasi dan lebih rentan terhadap masalah.

99

Ringkasan Karakteristik ECD 1. MDQ-1o-9 untuk 1o-12g 2. Respon-sangat selektif 3. Linieritas-1W sampai 10 " 4. Stabilitas-wajar DETEKTOR LAIN Tabel 7.1 mendaftarkan detektor utama yang tersedia secara komersial dan dalam umum digunakan. Deskripsi singkat dari beberapa dari mereka termasuk di sini, dan Gambar 7.15 menunjukkan perbandingan rentang linier banyak dari mereka. Ketika detektor ini diciptakan oleh Karmen dan Giuffrida pada tahun 1964 [26] itu dikenal sebagai detektor ionisasi nyala alkali (AFID) karena terdiri dari sebuah FlD yang ditambahkan sebutir garam logam alkali. Sebagaimana telah lanjutan berkembang, namanya juga telah berubah dan telah dikenal sebagai termionik detektor ionisasi (TID), detektor api termionik (FTD), sebuah termionik 100

spesifik detektor (TSD), dll Pada dasarnya, Karmen dan lain-lain telah menemukan bahwa FID menunjukkan selektif sensitivitas yang lebih tinggi bila garam logam alkali hadir di sekitar dari nyala. Dalam konfigurasi saat ini, sebutir cesium rubidium atau garam dipanaskan dengan listrik di wilayah di mana terjadi ionisasi nyala. Sementara

mekanisme ini belum dipahami dengan baik, detektor tidak menunjukkan peningkatan detectivity untuk-fosfor, nitrogen dan beberapa halogen yang mengandung zat. Photoionization Detector (PID) Ini detektor tipe ionisasi juga telah melalui beberapa desain kencan kembali ke 1960. Dalam bentuknya yang sekarang, sebuah lampu ultraviolet (misalnya, 10,2 eV) memancarkan energi foton cukup tinggi untuk mengionisasi langsung banyak senyawa organik. Ion-ion yang dihasilkan dikumpulkan dan diperkuat untuk membentuk sinyal. Jenis terkait detektor menggunakan api untuk menghasilkan foton energi tinggi yang menghasilkan ionisasi sampel. detektor ini disebut ionisasi debit detektor (DID). Ini menemukan aplikasi dalam analisis gas tetap rendah tingkat dari dapat ditentukan dengan TCD. Flame Detector Photometric (FPD) Flame fotometri diadaptasi untuk digunakan dengan jenis api FID untuk digunakan dalam GC pada tahun 1966. Aplikasi untuk analisis organik terutama untuk senyawa belerang (Di 394 nm) dan senyawa fosfor (pada 526 nm) sebagai ditemukan residu pestisida dan polusi udara. Gas Density Saldo (Gade) Detektor ini, yang diciptakan oleh Martin dan James [27] pada tahun 1956, adalah tidak secara luas digunakan namun masih tersedia secara komersial dan memiliki beberapa unik karakteristik. Hal ini dapat digunakan untuk analisis kuantitatif tanpa kalibrasi jika kepadatan analit dikenal karena itulah prinsip pada yang didasarkan. Hal ini juga dapat digunakan untuk menentukan berat molekul analit jika analisis dilakukan dalam dua gas pembawa yang berbeda [28].

101

Detektor Mass Selective (MSD) spektrometer massa dapat digunakan sebagai detektor GC. Mereka harus memiliki kompatibel karakteristik dan benar digabungkan ke kromatograf tersebut. Beberapa dari mereka yang disebut sebagai detektor selektif massa (MSD), yang menunjukkan bahwa mereka dianggap detektor GC, namun teknik gabungan dapat juga disebut GC / MS, yang menunjukkan kopling dua instrumen analisis. Apa pun namanya, penggunaan spektrometer massa dengan gas kromatograf adalah sangat kuat, berguna, dan populer kombinasi, dan itu diperlakukan secara lebih rinci dalam Bab 10. Untuk informasi lebih lanjut tentang ini dan detektor lainnya pada Tabel 7.1, berkonsultasi referensi yang diberikan dalam tabel.

102

Analisis Kuantitatif
Gas cromatography dapat digunakan untuk baik kualitatif dan kuantitatif analisis '. Karena itu IS lebih bermanfaat untuk analisis kuantitatif, sebagian besar ini cha ~ ter .. s dikhususkan untuk topik itu, namun ia dimulai dengan sekilas analisis kualitatif. ANALISIS KUALITATIF parameter kromatografi ~ e digunakan untuk analisis kualitatif adalah retentron yang volume atau beberapa parameter yang berhubungan erat. Namun, karena retensi parameter tidak dapat memastikan identitas puncak, biasanya untuk beberapa massa ~ ~ Pectr meter (MS) ke GC (GC-MS) untuk analisis kualitatif. GC-MS IS sehingga banyak digunakan yang dibahas secara rinci dalam Bab 10 . Tabel 8.1 daftar metode yang paling umum digunakan untuk analisis kualitatif di Gc. Referensi 1 adalah ringkasan yang baik dari ini dan metode lainnya. Retensi Parameter ~ R waktu itu tarik f? Ra diberikan terlarut dapat digunakan untuk identitasnya jika Ollo ~ ~ ~ n colu mg ~ ~ anabl s disimpan konstan: panjang, fasa diam dan ITS ketebalan (pembebanan cairan), suhu, dan tekanan (pembawa aliran gas

rate). Sebagai contoh, perhatikan bahwa sampel tidak diketahui menghasilkan kromatogram ditunjukkan pada Gambar 8.1a. Jika seseorang ingin tahu yang mana dari komponen itu n-alkohol, serangkaian standar n-alkohol dapat dijalankan dalam kondisi yang sama menghasilkan kromatogram seperti Gambar 8.1b. Sebagai ditunjukkan dalam gambar, orang-orang puncak yang retensi kali persis sama dengan yang standar dapat diidentifikasi sebagai alkohol n-. Proses ini hanya akan bekerja jika komponen-komponen yang tidak diketahui ini alkohol. Prosedur ini tidak akan efektif jika jumlah senyawa mungkin adalah besar volume retensi tidak karakteristik itu. Karena ada lebih dari 30.000 senyawa organik yang umum digunakan, dengan kromatografi gas dengan sendirinya tidak dapat digunakan untuk mengidentifikasi senyawa tunggal dari antara kelompok besar. kali Retensi merupakan ciri khas dari sistem GC, tetapi mereka tidak unik, sehingga waktu retensi GC tidak dapat digunakan untuk konfirmasi kualitatif. Namun, volume retensi relatif lebih reproducible dari individu volume retensi, sehingga data kualitatif harus dilaporkan pada kerabat 103

dasar. Indeks retensi disebabkan Kovats (lihat Bab 4) telah menjadi metode yang handal untuk pelaporan data retensi. Jika sebuah parameter retensi yang akan digunakan untuk identifikasi kualitatif atau klasifikasi, yang Kovats retensi indeks adalah metode yang bagus untuk memilih. Detektor selektif dan Dual Detektor Selektif GC detektor kadang-kadang dapat digunakan untuk membantu mengidentifikasi kelas senyawa yang mereka menunjukkan sensitivitas yang tinggi. Daftar detektor di Bab 7 dapat dikonsultasikan untuk informasi lebih lanjut dan referensi.

Lebih menarik. Adalah menggunakan dua detektor yang berbeda secara paralel pada keluar dari saluran deteksi GC-kolom yang disebut dual. Detektor dipilih harus memiliki perbedaan besar dalam sensitivitas untuk kelas yang berbeda senyawa. Bot ~ sinyal dicatat secara bersamaan menghasilkan paralel kromatogram seperti yang ditunjukkan pada Gambar 8.2. Identifikasi dapat dibuat

104

oleh pemeriksaan kromatogram (Gambar 8.3) atau dari rasio dari detektor tanggapan. Yang terakhir ini sering karakteristik kelas senyawa. Gambar 8.4 menunjukkan bahwa rasio dari data pada Gambar 8.3 jelas membedakan antara paraffins, olefin, dan aromatic dalam contoh ini. Ketika dikombinasikan dengan indeks retensi, rasio dapat menyebabkan identifikasi dari homolog tertentu dalam kelas tertentu. Off-line Instrumen dan Pengujian Pada prinsipnya, orang bisa mengumpulkan efluen dari kolom GC dan mengidentifikasi pada berbagai instrumen yang cocok. Sebuah setup sederhana untuk mengumpulkan limbah dalam perangkap dingin ditunjukkan pada Gambar 8.5. Sampel yang terjebak bisa ditransfer untuk suatu instrumen untuk identifikasi (MS, FTIR, NMR, UV), dikenakan mikro, atau bereaksi dengan pereaksi kimia untuk menghasilkan karakteristik derivatif. Umumnya, instrumen yang paling berguna (MS dan FTIR) adalah biasanya digabungkan on-line. Metode lain yang dapat digunakan untuk identifikasi pirolisis, derivatization, dan berat molekul kromatograf. Referensi untuk metode ini diberikan dalam Tabel 8.1. On-line Instrumen GC-MS telah disebutkan sebagai metode utama untuk kualitatif analisis (lihat Bab 10). Teknik komplementer adalah identifikasi Fourier Transform inframerah digabungkan untuk kromatografi gas (GC-FTIR).

105

Peningkatan sensitivitas metode Fourier Transform data penanganan telah contnbuted sangat besar manfaatnya. Interface IR dua yang umum digunakan adalah pipa cahaya [8] dan apa yang disebut isolasi matriks [9]. Pada metode sebelumnya, kolom efluen dilewatkan melalui sel gas dipanaskan IR (pipa cahaya), dan yang terakhir, itu kental dan beku ke dalam matriks yang cocok untuk analisis oleh IR [10].

106

Karena IR adalah tak rusak, adalah mungkin untuk pasangan baik IR dan MS dengan kromatografi gas yang sama, produksi GC-FfIR-MS. Khusus persyaratan dan beberapa aplikasi telah diuraikan [8, 14].
QUANTITATIVE ANALYSIS

Membuat pengukuran kuantitatif selalu disertai dengan kesalahan dan menuntut pemahaman dari detektor (lihat Bab 7) dan sistem data (Lihat Bab 2). Sampling, persiapan sampel, instrumen dan metode validasi, dan jaminan mutu adalah bagian penting dari proses. analisis Trace, yang menjadi semakin populer, mensyaratkan bahwa semua

langkah-langkah dalam analisis dilakukan dengan hati-hati. Sebagai contoh pedoman yang umum di jejak analisis, laporan Kimia Amerika Sub-komite Masyarakat Lingkungan Kimia Analitik dapat dikonsultasikan [15]. Ini membahas masalah data akuisisi dan evaluasi kualitas data. Sebuah tinjauan singkat dari metode analisis statistik untuk menangani kesalahan diberikan di sini, diikuti oleh diskusi singkat tentang kesalahan khas. Lalu, umum metode analisis yang disajikan. Statistik Perhitungan Kuantitatif Kesalahan pengukuran dapat diklasifikasikan sebagai penentuan atau tak tentu. Yang terakhir adalah acak dan dapat diperlakukan secara statistik (statistik Gaussian); adalah mantan tidak, dan sumber kesalahan acak harus ditemukan dan dieliminasi. Distribusi kesalahan acak harus mengikuti Gaussian atau normal kurva jika jumlah pengukuran cukup besar. Bentuk Gaussian distribusi diberikan dalam Bab 3 (Gambar 3.4). Hal ini dapat ditandai bytwo variabel-kecenderungan pusat dan variasi tentang simetris t.!!. e pusat kecenderungan. Dua ukuran kecenderungan sentral mean, X, dan median. Salah satu nilai-nilai ini biasanya diambil sebagai "benar" nilai untuk analisa, walaupun secara statistik tidak ada "benar" nilai tetapi bukan yang "paling mungkin" nilai. Kemampuan analis untuk menentukan nilai ini yang paling mungkin disebut sebagai akurasi nya. Penyebaran data di sekitar titik tengah biasanya diukur sebagai standar deviasi, sebuah

107

dimana n adalah jumlah pengukuran. Kuadrat dari standar deviasi disebut variance. Kemampuan analis untuk memperoleh data dengan kecil yang disebut presisi-nya. Presisi dan akurasi dapat direpresentasikan sebagai gambar pada sasaran seperti yang ditunjukkan dalam Gambar 8.6. Gambar 8.6a menunjukkan akurasi yang baik dan presisi; 8.6b Gambar presisi yang baik tapi akurasi miskin; dan 8.6c Gambar miskin presisi yang akan menghasilkan akurasi yang buruk kecuali sejumlah besar gambar diambil. Itu situasi di Gambar 8.6b menunjukkan bahwa kesalahan menentukan hadir; mungkin gunsight yang tidak sejajar. Dua istilah lainnya yang umum digunakan untuk membedakan dua tipe presisi. Salah satunya adalah pengulangan, yang mengacu pada ketepatan dalam satu laboratorium, oleh seorang analis, dan pada satu instrumen. Yang lainnya adalah reproduktibilitas, yang mengacu pada presisi antara laboratorium yang berbeda dan akibatnya berbeda analis dan instrumen yang berbeda. Kami mengharapkan dan biasanya menemukan reproduksibilitas yang tidak sebaik pengulangan.

Sebuah istilah terkait digunakan oleh Amerika Serikat Pharmacopeia (USP) untuk menentukan reproduktibilitas instrumen kekerasan. Ini menyatakan suatu kondisi pengujian yang ketat ketika metode pengujian yang sama digunakan dalam berbagai laboratorium atas suatu periode waktu yang panjang. Dalam sebuah set data, standar deviasi relatif, RSD, membawa informasi lebih dari standar deviasi itu sendiri. Standar deviasi relatif, atau koefisien variasi seperti yang kadang-kadang disebut didefinisikan sebagai:

Informasi minimum yang biasanya diberikan untuk menggolongkan hasil analisis masing-masing adalah salah satu dari dua variabel yang telah kita bahas-biasanya mean dan standar deviasi relatif. Tabel 8.2 berisi dua set

108

data yang diperoleh oleh dua analis yang berbeda. Sementara kedua telah memperoleh nilai rata-rata sama, X, kimiawan B memiliki standar deviasi relatif lebih kecil dan karena itu dianggap sebagai analis yang lebih baik atau yang bekerja dengan sistem yang lebih baik. Salah satu langkah dalam semua prosedur kuantitatif adalah langkah kalibrasi. Kalibrasi penting, dan sering kali merupakan faktor pembatas untuk memperoleh ketepatan dalam jejak analisis. Baik kalibrasi dan berhati-hati presisi hasil akurasi yang tinggi. Kesalahan harus dihindari dalam Membuat Pengukuran Dalam analisis kuantitatif, pemisahan dengan kromatografi gas hanya satu langkah dalam prosedur total. Kesalahan yang terjadi pada langkah apapun dapat membatalkan analisis kromatografi terbaik, sehingga perhatian harus diberikan pada semua langkah. Langkah-langkah dalam analisis biasanya meliputi: sampling, sampel persiapan dan hasil pemeriksaan, pemisahan (kromatografi), deteksi analit, analisis data termasuk integrasi kawasan puncak, dan perhitungan. Dengan kemajuan besar dalam instrumentasi GC dan integrasi dalam 20 terakhir tahun, sumber utama dari kesalahan GC biasanya sampling dan sampel persiapan, terutama jika matriks kotor yang terlibat. Dalam pengambilan sampel, tujuannya adalah untuk mendapatkan contoh kecil yang mewakili dari keseluruhan. persiapan Contoh dapat mencakup teknik seperti: penggilingan dan menghancurkan, melarutkan, penyaringan, menipiskan, ekstraksi, berkonsentrasi, dan derivatizing. Dalam setiap langkah perawatan harus dilakukan untuk menghindari kerugian dan kontaminasi. Jika standar internal (dibahas nanti dalam bab ini) digunakan, maka harus ditambahkan pada sampel sebelum memproses sampel dimulai. Pemisahan kromatografi gas harus dilakukan mengikuti nasehat yang diberikan dalam hal ini dan risalah kromatografi lainnya; beberapa tujuan adalah: resolusi yang baik dari semua puncak, puncak simetris, tingkat kebisingan yang rendah, pendek analisis kali, ukuran sampel dalam kisaran linear dari detektor, dll Analisis data dan sistem data yang disajikan dalam Bab 2. Khusus bunga adalah konversi dari sinyal analog ke data digital. Tugas ini dapat dicapai oleh salah satu dari dua cara-integrasi kawasan di bawah puncak atau pengukuran ketinggian puncak. Dengan integrator elektronik saat ini dan komputer, daerah puncak adalah metode paling disarankan, terutama jika ada mungkin perubahan dalam kondisi kromatografi selama menjalankan, seperti suhu kolom, laju alir, atau reproduktibilitas injeksi sampel. Namun, pengukuran ketinggian puncak kurang dipengaruhi oleh puncak tumpang tindih, kebisingan, dan garis miring. Dalam diskusi berikut, semua data akan disajikan sebagai daerah puncak.

109

Metode Analisis Kuantitatif Lima metode analisis kuantitatif akan dibahas secara singkat, melanjutkan dari yang paling sederhana dan paling akurat kepada orang-orang mampu akurasi yang lebih tinggi. Normalisasi Area Seperti namanya, normalisasi daerah benar-benar merupakan perhitungan daerah persen yang diasumsikan sama dengan berat persen. Jika X adalah tidak diketahui analit,

mana Ax adalah daerah X dan penyebut adalah jumlah dari semua daerah. Untuk metode ini akurat, kriteria berikut harus dipenuhi: • Semua analit harus eluen. • Semua analit harus terdeteksi. • Semua analit harus memiliki kepekaan yang sama (respon / massa). Ketiga kondisi ini jarang ditemui, namun metode ini sangat sederhana dan sering berguna jika analisis semiquantitative sudah cukup atau jika beberapa analit belum diidentifikasi atau tidak tersedia dalam bentuk murni (untuk digunakan dalam penyusunan standar). Area Normalisasi dengan Respon Faktor Jika standar yang tersedia, pembatasan ketiga dapat dihapus dengan menjalankan standar untuk mendapatkan faktor respons relatif, f. Satu substansi (dapat menjadi analit dalam sampel) dipilih sebagai standar, ~ sebuah tanggapan faktor f, diberikan nilai sewenang-wenang seperti 1,00. Campuran, menurut beratnya, yang dibuat standar dan analit lainnya, dan mereka dikromatografi. Itu daerah dari dua puncak-As dan Ax untuk standar dan tidak diketahui, masing-diukur, dan faktor respons relatif tidak diketahui, lx, dihitung,

mana wx / ws adalah rasio berat tidak diketahui untuk standar. faktor respons relatif dari beberapa senyawa umum telah diterbitkan untuk GC detektor yang paling umum, dan beberapa nilai perwakilan dari karya awal oleh Dietz [16] diberikan dalam Tabel 8.3 untuk FID dan TCD. Nilai-nilai ini ± 3%, dan karena mereka telah diperoleh dengan menggunakan dikemas kolom mereka mungkin mengandung beberapa kolom berdarah. Untuk akurasi tertinggi, orang harus menentukan / nya itu faktor sendiri. Bila sampel tidak diketahui dijalankan, masing-masing wilayah diukur dan dikalikan oleh faktor tersebut. Kemudian, persentase dihitung seperti sebelumnya:

110

Untuk contoh perbandingan.sebuah campuran etanol, heksana, benzen, dan etil asetat dianalisis dengan Ted. Area yang diperoleh diberikan dalam Tabel 8,4 bersama dengan faktor tanggapan yang diambil dari Tabel 8.3. Setiap daerah dikalikan dengan faktor tanggapan:

111

Sekarang, setiap wilayah dikoreksi menjadi normal untuk mendapatkan persen, misalnya:

Ini dan nilai-nilai lain yang diberikan dalam Tabel 8.4 yang berisi selesai analisis (% berat) menggunakan faktor respon. Kesalahan yang terjadi dengan tidak menggunakan faktor respon juga disertakan pada kolom terakhir dari Tabel 8.4. Mereka adalah perbedaan antara dikoreksi% nilai bobot dan (tidak dikoreksi) nilai-nilai daerah dinormalisasi%. Untuk setiap analisis mengingat kesalahan yang sebenarnya akan tergantung pada kesamaan atau perbedaan antara nilai respon individu, tentu saja. Ini perhitungan hanya berfungsi sebagai contoh yang khas. Standar eksternal Metode ini biasanya dilakukan secara grafis dan dapat dimasukkan dalam perangkat lunak sistem data. Dikenal dari jumlah analit dari bunga dikromatografi, daerah diukur, dan kurva kalibrasi diplot. Jika solusi standar bervariasi konsentrasi, volume harus konstan diperkenalkan pada kolom untuk semua sampel dan standar. Manual injeksi biasanya tidak memuaskan dan batas nilai metode ini. Hasil yang lebih baik diperoleh dari autosamplers yang menyuntikkan setidaknya satu microliter. Jika kurva kalibrasi tidak dibuat dan sistem data digunakan untuk membuat perhitungan, prosedur yang sedikit berbeda diikuti. Campuran kalibrasi diolah dari standar murni dibuat oleh berat dan dikromatografi. Faktor kalibrasi absolut, sama dengan yang dihasilkan gram per daerah, adalah disimpan dalam sistem data untuk masing-masing analit. Ketika campuran yang tidak diketahui lari, faktor-faktor ini dikalikan kali wilayah masing masing-masing analit dalam diketahui menghasilkan nilai untuk masing-masing massa analit. Ini adalah prosedur kalibrasi satu titik, dibandingkan dengan kurva multipoint dijelaskan sebelumnya, dan agak kurang tepat. Perhatikan juga bahwa kalibrasi ini faktor yang tidak sama dengan faktor respons relatif digunakan dalam metode normalisasi daerah. Standar Internal Metode dan yang berikutnya sangat berguna untuk teknik-teknik yang 'Tidak terlalu direproduksi, dan untuk situasi di mana seseorang tidak (atau tidak dapat) kalibrasi kembali sering. Metode standar internal tidak memerlukan tepat atau volume sampel konsisten atau faktor respon sejak terakhir ini dibangun ke metode, maka, itu baik untuk suntikan manual. Standar dipilih untuk metode ini tidak dapat menjadi komponen dalam sampel dan dapat tidak tumpang tindih puncak setiap sampel. Sejumlah diketahui standar ini akan ditambahkan ke masing-masing sample-maka nama standar internal, I.S. LS. harus memenuhi beberapa kriteria: • Harus elute dekat puncak bunga, tapi, • Harus diselesaikan baik dari mereka • Harus kimia mirip dengan analit kepentingan dan tidak bereaksi dengan komponen-komponen sampel • Seperti standar apa pun, harus tersedia dalam kemurnian tinggi

112

standar tersebut akan ditambahkan ke sampel di tentang konsentrasi yang sama sebagai analit (s) bunga dan sebelum setiap derivatization kimia atau reaksi lainnya. Jika banyak analit harus ditentukan, beberapa internal standar dapat digunakan untuk memenuhi kriteria sebelumnya. Tiga atau lebih campuran kalibrasi yang dibuat dari sampel murni analit (s). Sejumlah dikenal standar internal ditambahkan ke setiap kalibrasi campuran dan tidak diketahui. Biasanya jumlah yang sama standar volumetrically ditambahkan, misalnya, 1,00 mL. Semua daerah diukur dan dirujuk ke daerah dari standar internal, baik oleh sistem data atau dengan tangan. Jika beberapa standar digunakan, grafik kalibrasi seperti yang ditunjukkan dalam Gambar 8.7 diplot mana kedua sumbu adalah relatif terhadap standar. Jika jumlah yang sama dari standar internal ditambahkan ke setiap campuran kalibrasi dan diketahui, absis hanya dapat mewakili konsentrasi, tidak relatif konsentrasi. diketahui ditentukan dari kurva kalibrasi atau dari data kalibrasi di stasiun data. Dalam kedua kasus, setiap variasi dalam kondisi dari satu lari ke yang berikutnya dibatalkan oleh referensi semua data ke standar internal. Metode ini biasanya menghasilkan akurasi yang lebih baik, tetapi tidak membutuhkan langkah-langkah lebih dan membutuhkan waktu lebih lama. Beberapa metode EPA lihat spiking dengan standar disebut sebagai pengganti. Persyaratan pengganti dan alasan untuk menggunakannya sangat mirip dengan standar internal. Namun, pengganti adalah tidak digunakan untuk analisis kuantitatif sehingga dua istilah yang tidak sama dan

113

sangat reproducible sampel volume, batasan dengan suntikan suntik manual. Prinsip metode ini adalah bahwa, sinyal tambahan incremental diproduksi dengan menambahkan standar sebanding dengan jumlah standar ditambahkan, dan proporsionalitas ini dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi dari analit dalam sampel asli. Persamaan dapat digunakan untuk membuat diperlukan perhitungan, tetapi prinsipnya lebih mudah dilihat secara grafis. Gambar 8.8 memperlihatkan plot Selain khas kalibrasi standar. Catatan bahwa sinyal hadir bila tidak ada standar ditambahkan; itu merupakan yang asli konsentrasi, yang akan ditentukan. Seperti meningkatkan jumlah standar ditambahkan ke sampel, peningkatan sinyal, menghasilkan garis lurus kalibrasi. Untuk menemukan "asli tidak diketahui" jumlah, garis lurus diekstrapolasi sampai melintasi absis; nilai absolut pada absis adalah konsentrasi yang asli. Dalam praktek, penyiapan sampel dan hasil perhitungan dapat dilakukan dengan beberapa cara berbeda [17]. Matisova dan rekan kerja [18] telah menyarankan bahwa kebutuhan untuk direproduksi suatu volume sampel bisa dihilangkan dengan menggabungkan penambahan standar metode dengan metode standar di situ internal. Dalam kuantitatif analisis hidrokarbon dalam minyak bumi, mereka memilih etil benzena sebagai standar untuk penambahan, tapi mereka menggunakan sebuah puncak tetangga diketahui sebagai standar internal yang mereka direferensikan data. Prosedur ini 114

menghilangkan ketergantungan pada ukuran sampel dan diberikan kuantisasi yang lebih baik dibandingkan dengan metode normalisasi daerah mereka menggunakan. Ringkasan hasil GC bisa sangat akurat, turun menjadi sekitar 0,1% RSD dalam ideal kasus. Beberapa hasil khas ditunjukkan pada Tabel 8.5.

9. Suhu diprogram
diprogram kromatografi gas suhu (PTGC) adalah proses mcreasmg suhu kolom selama menjalankan GC. Hal ini sangat efektif metode untuk mengoptimalkan analisis dan sering digunakan untuk skrining baru sampel. Sebelum menjelaskan secara terperinci, marilah kita mempertimbangkan efek umum temperatur pada gas kromatografi hasil.
TEMPERATURE EFFECTS

Suhu merupakan salah satu dari dua variabel yang paling penting dalam GC yang lain menjadi sifat fase diam. Retensi kali dan retensi faktor penurunan temperatur karena meningkatnya distribusi konstanta t ~ mperature-tergantung sesuai dengan Clausius-Clapeyron persamaan,

the vapor pressure of the solute decreases logarithmically. A decrease in vapor pressure results in a decrease in the relative amount of solute in the mobile phase, viz, an increase in the retention factor, k, and an increase in retention time. Figure 9.1, a plot of the log of net retention volume versus 1ff for a few typical solutes illustrates this relationship. Straight lines are obtained over a limited temperature range in accordance with our prediction based on equation 1. The slope of each line is proportional to that solute's enthalpy of vaporization and can be assumed to be constant over the temperature range shown.

115

To a first approximation, the lines in Figure 9.1 are parallel, indicating that the enthalpies of vaporization for these compounds are nearly the same. A closer inspection reveals that many pairs of lines diverge slightly

pada temperatur rendah. Dari pengamatan kita dapat menarik generalisasi yang berguna bahwa pemisahan GC biasanya lebih baik pada suhu yang lebih rendah. Tapi melihat pada kedua zat terlarut, n-oktana dan m-fluorotoluene; garis mereka salib di sekitar 140 ° C. Pada suhu itu, 140 ° C, mereka tidak dapat dipisahkan; di suhu yang lebih rendah toluen yang elutes pertama, namun pada temperatur tinggi sebaliknya adalah benar. Meskipun tidak umum untuk perintah elusi untuk membalikkan, dapat terjadi, sehingga kesalahan identifikasi puncak. Lihat misalnya pekerjaan dari Hinshaw dengan pestisida klor [1]. Di bawah ini adalah daftar dari konsekuensi dari peningkatan suhu untuk peningkatan efek temperature • Retensi waktu dan penurunan volume retensi • Faktor Retensi menurun • Selektivitas (a) perubahan (biasanya menurun) • Efisiensi (N) sedikit meningkat Pengaruh suhu terhadap efisiensi cukup rumit [2] dan tidak selalu meningkat. Biasanya merupakan efek kecil dan kurang penting daripada efek pada kolom termodinamika (selektivitas). Secara keseluruhan, bagaimanapun, suhu efek yang sangat signifikan dan PTGC sangat kuat. Keuntungan dan kerugian dari PTGC

116

Jika sampel yang dianalisa oleh GC berisi komponen yang tekanan uap (Titik didih) memperpanjang rentang luas, sering tidak mungkin untuk pilih satu suhu yang akan cocok untuk menjalankan isotermal. Sebagai Misalnya, mempertimbangkan pemisahan berbagai homologs seperti sampel minyak tanah yang ditunjukkan pada Gambar 9.2a. Sebuah menjalankan isotermal pada 1S0 ° Cprevents komponen yang lebih ringan «Cs) dari yang sepenuhnya terpisah dan masih membutuhkan lebih dari 90 menit untuk elute yang parafin CI5 yang tampak seperti yang terakhir. Meskipun demikian, ini mungkin suhu isotermal terbaik untuk pemisahan ini. Pemisahan dapat ditingkatkan dengan menggunakan suhu diprogram. Gambar 9.2b menunjukkan menjalankannya diprogram seperti yang suhu mulai SO ° C, kurang dari suhu isotermal digunakan pada Gambar 9.2a, dan diprogram pada 8 derajat per menit hingga 2S0 ° C, temperatur lebih tinggi daripada suhu isotermal. Peningkatan suhu selama menjalankan menurun koefisien partisi dari analit masih di kolom, sehingga mereka bergerak lebih cepat melalui kolom, menghasilkan penurunan retensi kali. Beberapa perbedaan utama antara kedua menjalankan menggambarkan keuntungan

mudah menyelesaikan beberapa puncak sebelum puncak Cs sementara meningkatkan jumlah paraffins terdeteksi. Puncak CI5 elutes jauh lebih cepat (dalam waktu sekitar 21 menit) dan ternyata bukan puncak terakhir-enam hidrokarbon diamati oleh PTGC. Semua lebar puncak yang hampir sama di PTGC; dalam jangka isotermal, beberapa fronting dibuktikan dalam lebih tinggi boiler. Karena tidak lebar puncak peningkatan PTGC, tinggi badan analit akhir-eluting meningkat (daerah puncak yang konstan), memberikan

117

detectivity lebih baik. Daftar di bawah ini merangkum keuntungan dan kerugian dari PTGc. 3. pemisahan yang lebih baik dari titik didih luas jangkauan 4. Improve.d deteksi batas, bentuk puncak, dan presisi, terutama f puncak atau akhir eluting 5. Excellent berarti kolom membersihkan Kekurangan 1. instrumentasi yang lebih kompleks diperlukan 2. Noiser sinyal pada suhu tinggi 3. Terbatas jumlah fase cair yang cocok 4. Mungkin lebih lambat, mengingat waktu pendinginan . Anoth.er e ~ cukup dari applic.ation dari PTGC untuk mengoptimalkan pemisahan IS s ~ ~ sendiri dalam FIgur 9.3: ~ u ~ Berikut langkah-langkah pemrograman tIple digunakan untuk mendapatkan optlI ~ Lum pemisahan dalam waktu nnrumum. Modern biasanya programmer menyediakan sebanyak lima ramps suhu. ~ Pro menabrak ure ~ suhu operasi yang baik untuk memeriksa sampel baru. A.max mu ~ ~ ~ mount. informasi tentang komposisi sampel obtained dalam waktu mirumum. Biasanya satu dapat mengetahui bahwa seluruh sampel telah telah eluen, seringkali sulit untuk membuat penilaian dengan operasi isotermal. PERSYARATAN DARI PTGC

Instrumentasi Persyaratan PTGC 1. Kering gas pembawa 2. Suhu programmer 3. Tiga terpisah oven (injektor, kolom, detektor) 4. Arus controller (diferensial pneumatik atau elektronik) 5. kompensasi Dual kolom atau kolom untuk rell10ve drift 6. Cocok fase cair Yang terpenting adalah kemampuan untuk mengendalikan kenaikan suhu diprogram dalam oven kolom sambil menjaga detektor dan port injeksi pada temperatur konstan. Seorang programmer diperlukan suhu elektronik bersama dengan desain oven yang memiliki massa rendah, penggemar volume tinggi, dan ventilasi ke udara luar, juga dikendalikan oleh prograll1mer tersebut. Beberapa berarti biasanya diberikan untuk mengontrol aliran gas pembawa. Dalam dikemas kromatografi kolom, ini biasanya accoll1plished dengan sebuah diferensial 118

aliran katup kontrol pneumatik ditempatkan di garis gas hulu port injeksi. Dalam kromatografi kolom kapiler, regulasi tekanan konstan diperlukan untuk split / sampling splitless dan katup kontrol aliran tidak dapat digunakan. Akibatnya, laju aliran gas pembawa menurun selama suhu diprogram berjalan karena peningkatan viskositas gas. Sejak penurunan tekanan di kolom PL relatif rendah, perubahan dalam aliran Tingkat kurang berat daripada di kolom dikemas. Salah satu solusinya adalah untuk menetapkan awal laju alir diatas nilai optimal dan lebih dekat dengan aliran yang diharapkan tentang 70% jalan melalui program ini. Ini akan menjamin arus yang cukup pada semakin tinggi suhu. Namun, kontrol tekanan elektronik (EPC) adalah tersedia pada beberapa instrumen dan dapat digunakan untuk menjaga konstan aliran dengan meningkatkan tekanan selama [3] run Persyaratan lainnya ditempatkan pada gas pembawa dan stasioner tahap. Sebagaimana ditunjukkan dalam daftar instrumentasi PTGC, gas pembawa yang digunakan harus menjadi kering untuk mencegah akumulasi air (dan kotoran volatile) pada inlet kolom cool (sebelum memulai menjalankan) sejak fenomena ini akan menghasilkan puncak hantu selama jangka PTGC. Salah satu solusi untuk umum masalah ini adalah dengan memasukkan saringan dryer SA molekul gas di baris sebelum instrumen. Di bawah ini adalah daftar beberapa persyaratan fase cair.

Fase cair yang memenuhi persyaratan dan telah ditemukan berguna disajikan pada Tabel 9.1. Ingatlah bahwa kolom PL leburan silika yang dilapisi dengan polimida tidak dapat digunakan di atas 380 ° C tanpa menurunkan lapisan.
THEORY OF PTGC

119

Teori PTGC telah sepenuhnya diperlakukan oleh Harris dan Habgood [4] dan oleh [Mikkelsen 5]. Diskusi berikut telah diambil dari sederhana namun cukup perawatan oleh Giddings [6]. Ketergantungan volume retensi pada suhu digambarkan dalam Gambar 9.1. Mari kita menentukan apa kenaikan suhu tersebut diperlukan untuk mengurangi volume retensi disesuaikan dengan 50%, yaitu:

Karena rasio retensi disesuaikan volume berbanding terbalik log dari rasio dari tekanan uap zat terlarut menurut terintegrasi bentuk persamaan Clausius-Clapeyron, kita dapat menyimpulkan bahwa,

mana aT adalah perbedaan antara dua temperatur T1 dan T2 • Mengambil logaritma dan menyusun ulang itu, kita peroleh,

Dengan asumsi Trouton's Aturan bahwa: JIITboil = 23 dan temperatur didih 227 ° C (5000K) untuk sampel yang khas,

Sebagai perkiraan, lalu, peningkatan suhu 30 ° C akan memotong retensi volume setengah. Pedoman ini juga berguna untuk operasi isotermal. Pengaruh suhu terhadap program migrasi khas analit melalui kolom ditampilkan pada Gambar 9.4, dimana nilai 30 derajat digunakan untuk menghasilkan fungsi langkah. Oleh karena itu, tingkat migrasi relatif akan berlipat ganda untuk setiap elusi 30 ° C. Akhir dari kolom tersebut diambil sewenang-wenang seperti yang terjadi pada 265 ° C, seperti ditunjukkan pada gambar. Pada kenyataannya, gerakan yang analit melalui kolom bisa melanjutkan dengan kurva halus (juga

120

ditampilkan dalam fi.gure itu) karena pemrograman suhu akan berangsur-angsur dan tidak bertahap, seperti yang diasumsikan oleh model kita. Jika x diambil sebagai jarak analit ~ ia bergerak melalui kolom dalam yang terakhir ~ O derajat kenaikan, maka satu-setengah x adalah jarak itu pindah 30 sebelumnya derajat, seperempat x pada 30 derajat sebelum iklan yang sebagainya. Jumlah ini fraksi pendekatan 2, yang harus sama dengan 'ke ~ l L panjang kolom (2x = L). Oleh karena itu, analit menempuh perjalanan melalui terakhir ha ~ f. 3 / 4 kolom dalam 30 terakhir ° C, melalui dari kolom dalam 60 ° C dll Awalnya zat terlarut adalah "beku" pada inlet kolom tapi h ' itu b "w en ~ egan.to bermigrasi, laju migrasi dua kali lipat untuk setiap derajat 30 ' m kenaikan suhu. . . Pengoperasian PTGC dapat dibayangkan sebagai berikut: sampel adalah disuntikkan ke akhir kolom dingin, dan komponen-komponennya tetap kental di sana, seperti meningkatkan re perat ~ te ~, yang analit menguapkan dan bergerak turun c ~ lu ~ n dengan harga meningkat. sampai mereka elute. Hal ini untuk ini alasan bahwa teknik injeksi ini tidak begitu penting dalam PTGC dan bahwa semua puncak ave ~ tentang lebar puncak yang sama-mereka mengeluarkan dana yang sama waktu aktif partisi bawah kolom. Untuk suatu varietas? F. operasi othermal easons ~, i ~ sering pilihan dalam wo ~ kp ~ ace. Jika screemng awal dilakukan oleh PTGC, orang mungkin ingin mengetahui yang ~ ~ Apakah suhu September rmal akan menjadi orang yang terbaik untuk digunakan. Giddings memiliki disebut. INI suhu isotermal suhu yang signifikan, 'T. Menggunakan reasomng berdasarkan nilai 30 derajat, ia telah menemukan bahwa

121

dimana T adalah suhu akhir, suhu di mana analit (s) t bunga menjalankan eluen m ~ e PTGC. Jadi, misalnya, eluting terlarut di suhu 225 C pada lari PTGC akan dijalankan isotermal terbaik pada suhu 180 ° C. Tiga variabel penting lainnya adalah laju alir pemrograman tingkat dan panjang kolom. Secara umum, orang tidak bervariasi panjang tetapi menggunakan sebuah ~ Colum pendek (dan lo.wer suhu) dan laju aliran relatif tinggi. Tingkat programmmg IS sering dipilih untuk menjadi cukup cepat untuk menghemat waktu tapi Sl ~ w cukup untuk mendapatkan pemisahan yang memadai, di suatu tempat antara 4 dan 10 ° C! biarawati. Namun, untuk kolom Perjanjian Lama, satu kelompok pekerja menyimpulkan bahwa Tingkat lambat (sekitar 2'soC! menit) dan tingkat aliran tinggi (sekitar 1 mLimin) adalah pr.eferable [7]. Studi lain oleh Hinshaw [1] dari pestisida klor campuran menemukan bahwa 8 C / mm, lebih baik lebih lambat (ke aku, SOC / min) atau lebih cepat (hingga 30 ° C / mm) harga.
SPECIAL TOPICS

Analisis Kuantitatif Data yang disajikan dalam bab ini dengan jelas menunjukkan pengaruh PTGC pada ukuran dan bentuk dari puncak masing-masing. Hal ini dapat mengakibatkan satu untuk menyimpulkan yang PTGC tidak dapat digunakan untuk analisis kuantitatif. Hal ini tidak terjadi. Mempertimbangkan data yang diberikan dalam Tabel 9.2 untuk analisis suatu sintetis campuran n-paraffins dianalisis oleh GC PTGC dan isotermal. Mereka menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan antara PTGC dan GC isotermal saat kalibrasi dilakukan secara konsisten dengan teknik baik. Modern instrumen memiliki kemampuan untuk mempertahankan suhu konstan pada detektor bahkan selama operasi suhu diprogram dari kolom, sehingga kuantisasi oleh detektor tidak terpengaruh dan independen temperatur kolom. Cryogenic Operasi Beberapa chromatographs disediakan dengan oven yang dapat dioperasikan di bawah ini Ambient temperatur, sehingga memperluas jangkauan pemrograman suhu. Contoh-contoh dapat ditemukan dalam kajian ekstensif oleh GC cryogenic Brettell dan [Grob 8]. TABEL 9,2 Perbandingan Data Kuantitatif Khas GC Suhu Tinggi Ada alwaysbeen kepentingan dalam mendorong GCto suhu tertinggi mungkin. Beberapa instrumen komersial suhu batas atas di oven kolom dan detektor oven 400 ° C. Beberapa kolom dapat dioperasikan pada suhu tinggi, tetapi kerja telah dilaporkan di mana kolom diprogram secara rutin sampai dengan 400 ° C. Penelitian ini telah menimbulkan teknik khusus yang disebut GC tinggi suhu, HTGC, yang didefinisikan sebagai suatu rutinitas kolom suhu lebih dari 325 ° C [9]. Dalam sebuah percobaan HTGC, kolom OT pendek, ringan dimuat digunakan, sesuai dengan pengetahuan yang ada teori GC. Yang paling sulit aspek HTGC, dan satu yang paling perhatian telah terfokus, merupakan pengantar sampel. split Konvensional / splitless metode untuk kolom PL tidak cocok karena diskriminasi mendidih tinggi komponen yang terjadi dalam proses penguapan. Pada kolom-teknik melakukan pekerjaan tetapi menyebabkan kontaminasi besar dari inlet kolom. Diprogram

122

temperatur injeksi (PTV) yang bekerja dengan baik dengan suhu normalGC telah terbukti ideal untuk HTGC 9 []. Dengan pemrograman injektor setinggi 600 ° C, berat molekul tinggi sampel telah dijalankan dengan sukses. Satu kertas baru-baru ini [9] laporan analisa tersebut. SIS dari standar polyethylene dengan berat molekul rata-rata 1000 Daltons dan pemisahan sukses dan deteksi karbon 100 polimer dengan berat molekul sekitar 1500. Rincian lebih lanjut dapat ditemukan III makalah ini dan referensi tercantum di dalamnya.

10. Topik Khusus
Bahkan dalam buku pelajaran dasar seperti yang satu ini ada kebutuhan untuk membahas khusus topik seperti GC-MS, pemisahan kiral, persiapan sampel, dan derivatif. Banyak penelitian sekarang ini difokuskan pada teknik-teknik khusus digabungkan untuk OC, Yang paling penting adalah GC-MS, singkatan umum untuk teknik di mana sebuah kromatograf gas secara langsung digabungkan ke bangku-top spektrometer massa. Spektrometer massa telah disebutkan dalam Bab 7 sebagai satu khusus GC detektor, di MSD, tetapi mencakup lebih teliti dalam bab ini. topik lain yang tercakup secara singkat adalah: pemisahan senyawa kiral, beberapa teknik sampling khusus (headspace dan microextraction fase padat) dan derivatization.
GC-MS

Hari ini diperkirakan terdapat lebih dari 25.000 sistem GC-MS bangku-top penjualan di seluruh dunia dan tahunan melebihi 2.000 unit per tahun. Apa yang membuat kombinasi begitu kuat dan begitu populer? Seperti yang telah kita catat sebelumnya, GC adalah Tehnik analisis utama untuk pemisahan senyawa atsiri. Menggabungkan kecepatan analisis, resolusi, kemudahan operasi, hasil kuantitatif yang sangat baik, dan biaya moderat. Sayangnya, 123

GC sistem tidak dapat memastikan identitas atau struktur dari puncak apapun. Retensi kali berhubungan dengan koefisien partisi (Bab 3), dan sementara mereka adalah karakteristik dari sebuah sistem yang jelas, mereka tidak unik. GC Data saja tidak dapat digunakan untuk mengidentifikasi puncak. spektroskopi Misa di sisi lain merupakan salah satu yang paling informationrich detektor. Ini hanya membutuhkan mikrogram sampel, tetapi menyediakan data baik untuk identifikasi kualitatif senyawa yang tidak diketahui (struktur, unsur komposisi, dan berat molekul), serta kuantisasi mereka. Selain itu, mudah digabungkan dengan sistem GC. informasi lengkap lebih lanjut tentang GC-MS dapat ditemukan dalam monograf terdaftar [1-5], tapi pengantar ke topik berikut. Instrumentasi Gambar 10.1 adalah skematik dari sebuah spektrometer massa resolusi rendah khas jenis yang umum digunakan dengan Gc. Karena ukurannya yang kecil, sering disebut sebagai MS bangku-top. Contoh lubang Sebuah inlet sampel memungkinkan untuk pengenalan jumlah yang sangat kecil sampel dari berbagai sumber. Bola gas besar dapat digunakan untuk memperkenalkan gas sampel melalui lubang jarum kecil ke sumber ionisasi. An inlet dengan septum akan memungkinkan pengenalan cairan yang mudah, atau larutan padatan; dan akhirnya, sistem interlock vakum adalah cara umum untuk pendahuluan

Gambar 10.2 menunjukkan skematis yang digabung dengan sebuah tem sy GC ~ ke sistem. Kedua sistem tersebut dipanaskan (200-300 ° C), baik Bit ~ Dengan senyawa dalam keadaan uap, dan keduanya membutuhkan sampel kecil (mikro-atau na ~ o-gram). GC dan MS sistem sangat kompatibel. Satu-satunya masalah adalah bahwa 124

Tekanan atmosfer output dari GC harus dikurangi ke kekosongan 10-5 ke 10-6 torr untuk masuk MS. Penggabungan antara e ~ t ~ tw harus dilakukan dengan penurunan tekanan, dan dicapai Dengan interface. Fi · 10.3A gure menunjukkan antarmuka umum di hari ini u.se .. M, ost Sh GCT-HMI sistem menggunakan kolom kapiler, dan leburan silika tabung ~ permi s yang mer, ig efisiensi langsung transfer antara dua ~ ~ ystem. Untuk tingkat aliran kapiler 5 mLlmin atau kurang, sebuah antarmuka langsung adalah mungkin. Bench-top GC-MS sistem dengan mudah dapat menangani laju aliran yang rendah, dan ~ y th memberikan yang lebih baik sensitivitas (transfer total sampel) dan pelestarian yang lebih baik dari hasil GC.

Lama GC-MS digunakan sistem kolom dikemas, biasanya 2 mm id, dengan aliran tingkat sekitar 30 mLimin. Sistem ini diperlukan suatu kolom dikemas antarmuka jet pemisah yang ditunjukkan pada Gambar 1O.3B. pemisah ini terdiri dari 2 tabung kaca sesuai dengan jarak kecil (- 1mm) di antara mereka. Sebagian besar gas pembawa (biasanya Dia) masuk dari kolom GC dipompa pergi oleh sistem vakum terpisah. Molekul-molekul sampel yang lebih besar mempertahankan mereka momentum dan lulus preferentially ke kapiler kedua dan ke MS sumber. Contoh pengayaan terjadi dan tekanan atmosfer awal sangat berkurang, yang memungkinkan vakum MS untuk menangani aliran kecil Tingkat. Baik suhu dan permukaan aktivitas jet kaca pemisah harus dikontrol dengan hati-hati baik untuk memaksimalkan transfer sampel dan melestarikan sampel integritas. molekul analit pertama harus terionisasi agar tertarik (atau ditolak) oleh medan magnet atau listrik yang tepat. Ada banyak ionisasi teknik, tapi dampak elektron (EI) adalah yang tertua, paling umum dan sederhana. Sumber ionisasi dipanaskan dan di bawah vakum sehingga sampel yang paling mudah menguap dan kemudian terionisasi. Ionisasi ini biasanya dicapai oleh dampak dari sinar elektron sangat energik (70 ev). Sumber khas secara skematis diperlihatkan pada Gambar 10.4. Efluen dari kolom GC melewati menjadi sumber dipanaskan di vakum ionisasi rendah. Elektron ditarik keluar dari filamen tungsten oleh tegangan kolektor 70 ev. tegangan yang digunakan untuk filamen mendefinisikan energi elektron. Ini elektron energi tinggi pemogokan molekul analit netral, menyebabkan

125

ionisasi (biasanya kehilangan sebuah elec ~ ron) dan. Kain ~ ~ entation. ionisasi ini teknik menghasilkan hampir secara eksklusif ion positif:

Alternatif cara untuk mencapai ionisasi ionisasi kimia termasuk (CI), ionisasi kimia negatif (NCI), dan atom ast ~ b ~ mbardment (FAB). Dalam CI, gas metana reagen seperti diakui Ion amber c ~ dimana terionisasi, menghasilkan kation yang mengalami reaksi lebih lanjut menghasilkan ion sekunder. Sebagai contoh:

Ion sekunder (CHt dalam contoh ini) berfungsi sebagai reagen untuk mengionisasi sampel lembut. Biasanya proses ini menghasilkan fragmentasi kurang dan lebih spektrum massa sederhana. MS utama puncak yang biasanya adalah hasil (M + 1), (M), (M - 1), dan (M + 29), di mana M adalah massa analit yang sedang dipelajari. . Untuk melakukan ionisasi kimia, volume ion spectro.me itu! Er IS biasanya berbeda dari yang digunakan untuk EI, yang ~ s tekanan operasi yang lebih tinggi (Sebagian karena gas reagen tambahan), dan t ~ et ~ mperature IS rendah. Beberapa jenis molekul juga menghasilkan spektrum Ion baik negatif oleh NCI, menyediakan pilihan lain untuk analisis. H ~ wever, paling atas bangku-GC-MS instrumen tidak mampu operasi CI. Sebuah perbandingan spektrum EI CI dan ditunjukkan pada Gambar 1.0.5 untuk ortal, sebuah barbiturat dengan berat molekul 240. Puncak spektrum basis 10 CI adalah 241, yang (diharapkan M + 1) puncak. Ada beberapa? Ada, ~ ~ semua puncak, tetapi spektrum ini menunjukkan nilai metode CI 10 memberikan tugas dari berat molekul. The EI spektrum, di sisi lain tangan, menunjukkan ion orangtua sangat kecil dengan puncak utama pada 140 dan 156.These ion fragmen dapat digunakan untuk membantu dalam penugasan yang structureinformation tidak disediakan oleh CI. Analisa dan Detektor Setelah ionisasi, partikel-partikel bermuatan yang ditolak dan tertarik oleh muatan? lensa ke analyzer massa. Berikut spesies ion yang dipisahkan oleh mereka 126

massa terhadap rasio biaya (m / z) dengan baik medan magnet atau listrik. Khas massa untuk analisa GC-MS adalah quadrupoles atau perangkap ion. O! Analyz nya ~ rs adalah: satu-fokus sektor magnetik; double-fokus sektor magnetik (tinggi resolusi, lebih mahal); dan waktu penerbangan. . . Penganalisa massa quadrupole terdiri dari empat hy ~ batang erboh.c di sebelah kanan sudut satu sama lain (lihat Gambar 10.6).. Sebuah tegangan DC IS apphed untuk r semua? Ds (Batang berdekatan memiliki tanda berlawanan) dan tanda-tanda tegangan adalah dengan cepat

terbalik. A.radio frekuensi juga diterapkan pada empat batang. Tergantung pada kombinasi frekuensi radio dan potensi arus searah Ion rasio hanya satu massa-untuk-biaya akan melewati batang dan mencapai detektor. Ion dengan rasio mlz lain akan mogok batang dan dimusnahkan.

Penganalisa quadrupole memiliki kelebihan kesederhanaan, ukuran kecil, moderat biaya, dan cepat scanning yang membuatnya ideal untuk sistem GC-MS. Hal ini dibatasi untuk sekitar 2.000 Daltons dan memiliki resolusi rendah bila dibandingkan untuk ganda fokus spektrometer massa. Gambar skematis menunjukkan 10,7 perangkap ion analyzer massa yang dikembangkan secara khusus untuk GC-MS. Ini adalah versi sederhana dari quadrupole 127

di mana cincin elektroda, yang hanya memiliki frekuensi radio diterapkan pada itu, dasarnya berfungsi sebagai monopol untuk menentukan daerah stabil untuk spesies dibebankan di dalam ruang elektroda melingkar. Ada dua topi akhir di bagian atas dan bawah cincin melingkar elektroda. Efluen dari GC memasuki bagian atas topi akhir, beberapa analit yang terionisasi dan kemudian terjebak di lintasan stabil cincin dalam elektroda. Frekuensi radio bisa diubah untuk mengeluarkan berurutan ion dengan rasio mlz dipilih dari perangkap ion dan meneruskannya melalui tutup akhir detektor. Ion perangkap juga sederhana dalam desain, sederhana dalam biaya, dan mampu cepat pemindaian untuk aplikasi GC-MS. Spektrum yang dihasilkan sering berbeda dari Spektrum quadrupole klasik, dan beberapa ion dapat mengalami disosiasi atau tabrakan ion molekul / ion di dalam perangkap. Setelah pemisahan ion-ion yang dihasilkan, detektor, biasanya terus menerus versi dynode dari elektron multiplier, digunakan untuk menghitung ion dan menghasilkan spektrum massa. Seperti detektor yang secara skematis diperlihatkan pada Gambar 10,8. Ion dari pemogokan massa analyzer permukaan semi-konduktif dan merilis kaskade elektron. Ini adalah dipercepat oleh beda potensial lain bagian dari permukaan semi-konduktif mana yang lebih besar riam hasil elektron. Proses ini diulang beberapa kali sampai amplifikasi dari masukan lemah asli diperbesar tentang l-juta kali lipat. Perhatikan bahwa sistem MS seluruh bawah vakum tinggi. Ini adalah penting kebutuhan untuk menghindari hilangnya spesies yang dibebankan oleh tabrakan dengan lainnya ion, molekul, atau permukaan. Spektrum massa hanyalah sebidang kelimpahan ion sebagai fungsi m / z. Di bawah kondisi yang terkendali, rasio ion kelimpahan dan

Penganalisa quadrupole memiliki kelebihan kesederhanaan, ukuran kecil, moderat biaya, dan cepat scanning yang membuatnya ideal untuk sistem GC-MS. Hal ini dibatasi untuk sekitar 2.000 Daltons dan memiliki resolusi rendah bila dibandingkan untuk ganda fokus spektrometer massa. 128

Gambar skematis menunjukkan 10,7 perangkap ion analyzer massa yang dikembangkan secara khusus untuk GC-MS. Ini adalah versi sederhana dari quadrupole di mana cincin elektroda, yang hanya memiliki frekuensi radio diterapkan pada itu, dasarnya berfungsi sebagai monopol untuk menentukan daerah stabil untuk spesies dibebankan di dalam ruang elektroda melingkar. Ada dua topi akhir di bagian atas dan bawah cincin melingkar elektroda. Efluen dari GC memasuki bagian atas topi akhir, beberapa analit yang terionisasi dan kemudian terjebak di lintasan stabil cincin dalam elektroda. Frekuensi radio bisa diubah untuk mengeluarkan berurutan ion dengan rasio mlz dipilih dari perangkap ion dan meneruskannya melalui tutup akhir detektor. Ion perangkap juga sederhana dalam desain, sederhana dalam biaya, dan mampu cepat pemindaian untuk aplikasi GC-MS. Spektrum yang dihasilkan sering berbeda dari Spektrum quadrupole klasik, dan beberapa ion dapat mengalami disosiasi atau tabrakan ion molekul / ion di dalam perangkap. Setelah pemisahan ion-ion yang dihasilkan, detektor, biasanya terus menerus versi dynode dari elektron multiplier, digunakan untuk menghitung ion dan menghasilkan spektrum massa. Seperti detektor yang secara skematis diperlihatkan pada Gambar 10,8. Ion dari pemogokan massa analyzer permukaan semi-konduktif dan merilis kaskade elektron. Ini adalah dipercepat oleh beda potensial lain bagian dari permukaan semi-konduktif mana yang lebih besar riam hasil elektron. Proses ini diulang beberapa kali sampai amplifikasi dari masukan lemah asli diperbesar tentang l-juta kali lipat. Perhatikan bahwa sistem MS seluruh bawah vakum tinggi. Ini adalah penting kebutuhan untuk menghindari hilangnya spesies yang dibebankan oleh tabrakan dengan lainnya ion, molekul, atau permukaan. Spektrum massa hanyalah sebidang kelimpahan ion sebagai fungsi m / z. Di bawah kondisi yang terkendali, rasio ion kelimpahan dan Kemampuan GC-MS GC-MS mengkombinasikan keuntungan kedua teknik: tinggi menyelesaikan daya dan kecepatan analisis GC dipertahankan, sedangkan MS menyediakan baik identifikasi positif dan analisis kuantitatif sampai ke tingkat ppb. Massa berkisar 1-60 Daltons biasa digunakan untuk sistem biaya rendah, dan sampai dengan 1000 Daltons untuk sistem yang lebih mahal. Biaya berkisar dari $ 40K sampai $ 75K untuk sistem bangku-top sederhana. Keterbatasan Sistem GC-MS GC-MS instrumen adalah item biaya modal; mereka lebih rumit untuk beroperasi dari GC, dan ada kurangnya operator GC-MS terampil. Beberapa perguruan tinggi melatih siswa pada GC-MSsystems karena kedua kurangnya sistem untuk tujuan pengajaran dan kurangnya keahlian dosen banyak. Analisis Data Sebuah kromatogram kapiler khas dari sampel hidrokarbon berjalan di GC-MS memiliki tampilan yang sama seperti itu akan dengan FID (lihat Gambar. 10,9). Perhatikan lebar puncak sempit, biasanya sekitar 1 detik atau kurang di ketinggian setengah. Ini berarti bahwa sistem MS harus memindai puncak GC sekitar 10 kali per kedua untuk mendapatkan spektrum massa baik. Gambar 10,10 menunjukkan mekanisme yang diusulkan untuk fragmentasi nhexane (Puncak pada Gambar 4. 10,9) dalam sumber ion sistem GC-MS. Sebuah pemogokan elektron molekul induk, mendepak satu elektron dan menghasilkan ion molekul (m / z = 86). Spesies ini tidak stabil, bagaimanapun, dan

129

cepat terurai menjadi fragmen yang lebih stabil, dalam hal ini m / z 71, 57, 43 dan 29 Daltons. Bahwa fragmen dengan kelimpahan tertinggi, mlz = 57,

disebut puncak dasar, dan sistem data plot sebagai 100% dari spektrum skala. puncak lain diplot relatif terhadap basis puncak, dan hasilnya adalah spektrum massa khas n-heksana (lihat Gambar 10,11).. Data dapat digambarkan dalam dua cara; baik sebagai total scan (TIC-Total Ion Kromatogram) atau sebagai sejumlah kecil ion individu (SIM-Dipilih Ion Monitoring) karakteristik dari suatu senyawa tertentu (lihat Gambar 10,12).. A total ion kromatogram digunakan untuk mengidentifikasi senyawa yang tidak diketahui. A rentang massa tertentu dipindai-misalnya 4-40 Daltons. Semua puncak dilaporkan sehingga spektrum massa dapat diambil dari komputer dan

130

digunakan untuk mengidentifikasi setiap puncak. Basis data komputer cepat com ~ ar.es setiap spektrum massa tidak dikenal dengan lebih dari 150.000 referensi spektrum m Its perpustakaan file. Pencocokan spektrum hanya memerlukan beberapa detik dengan. terbaru data sistem, mencapai analisis kualitatif yang diinginkan ', Data aCuIsItIOn tingkat yang diperlukan untuk memindai semua ion dalam kisaran yang dipilih IS lambat; sensItIVlty IS terbatas, dan biasanya kuantisasi tidak optimal (terlalu sedikit data P? MTs). . Dalam pemantauan ion dipilih, tetapi, hanya sejumlah kecil Ion (biasanya sebanyak 6) dimonitor. Ada akuisisi data rate lebih cepat selama masa puncak GC (~ 1 detik), sehingga ~ ~ adalah kuantitatif di lebih baik dan sensitivitas sangat ditingkatkan. SIM tidak dapat digunakan untuk kualitatif analisis (tidak semua massa di-scan), tetapi modus terbaik untuk jejak analisis senyawa target, sering turun ke tingkat ppb. Sebuah versi terbaru dari perangkap ion [7] memungkinkan untuk dioperasikan sedemikian rupa bahwa fragmen asli dari proses ionisasi yang lagi terkena energik molekul gas menyebabkan sekunder. fragmentasi dari. itu tabrakan-induced disosiasi (CID). Hasil IS mirip dengan yang diperoleh oleh spektrometer massa tahap ganda (biasanya disebut sebagai MS / MS), dan memberikan selektivitas lebih tinggi. Mode operasi ini disebut. dipilih reaksi pemantauan (SRM) dan IS tersedia dalam beberapa perangkap yang lebih baru ION GC-MS instrumen. Kiral ANALISIS DENGAN GC

131

pemisahan kiral baik oleh GC atau HPLC merupakan langkah penting dalam syn itu ~ h.esis, karakterisasi dan pemanfaatan senyawa kiral (obat-obatan, pestisida, rasa, pheremones, dll). Sebagai pemahaman tentang pentingnya kiralitas pada meningkatkan aktivitas biologis, undang-undang yang mengatur chir compou l ~ ~ ds menjadi lebih luas dan ketat, dan kebutuhan untuk lon ~ resolu tinggi teknik pemisahan meningkat. pemisahan kiral oleh GC kapiler menyediakan efisiensi yang tinggi, sensitivitas, dan kecepatan analisis, tetapi dibatasi oleh kebutuhan untuk volatilitas. Menggabungkan fase kiral ke Polisiloksan telah mengakibatkan Peningkatan stabilitas suhu. GC pemisahan dari enantiomer dapat dilakukan baik secara langsung (penggunaan a. fase diam kiral, CSP) atau tidak langsung (off-kolom konversi ke diastereomeric derivatif dan pemisahan fase stasioner by.non-kiral). Metode langsung lebih disukai sebagai sederhana dan meminimalkan kerugian dunng kunci sampel preparation.The, tentu saja, adalah untuk menemukan kiral stasioner fase dengan kedua selektivitas dan stabilitas suhu. ada. tiga jenis utama fase stasioner GC kiral:. (1) kiral Turunan asam amino [10/08], (2) senyawa kiral koordinasi logam [11], dan (3) siklodekstrin derivatif [12-14]. Fase siklodekstrin memiliki terbukti paling fleksibel untuk kromatografi gas. KHUSUS METODE SAMPLING Headspace Sampling Sampel yang mengandung bahan nonvolatile masalah hadir untuk chromatogr gas aphy. Non-volatiles tidak dapat disuntikkan ke dalam GC karena mereka akan cepat plug up port injeksi dan dapat merusak kolom GC. Umum sampel persiapan langkah-langkah untuk mengisolasi volatiles dari nonvolatile liqqid sampel-cair ekstraksi matrix.include, ekstraksi fase padat (SPE), fase sohd rmcroextraction (SPME), ekstraksi cairan superkritis (SFE), dan headspace. SPE dan GC SPME untuk dibahas dalam sebuah tinjauan terbaru Artikel oleh Penton [15]. sampling Headspace adalah. pr.obably teknik sederhana dan termudah. A bnef pengantar topik sudah diterbitkan oleh Hinshaw [16], dan lengkap. co ~ erage teori dan praktek baru saja muncul [17]. Itu sampel (cair atau sohd) ditempatkan pada botol tertutup dan dipanaskan sampai yang telah ditetapkan suhu untuk jangka waktu yang tetap. Komponen volatile Parti sampel ~ Ion antara dan fase ~ sebagai sampel, biasanya mencapai eqUlibrum. monomer sisa berdifusi lambat dari beberapa yang sangat crosshnked polimer, waktu yang cukup sehingga harus diizinkan untuk penguapan tersebut dari sampel. . A ~ por ion dari bahan mudah menguap dalam fasa gas (headspace) adalah. Dihapus dan Ke menyuntikkan gas chroma!. Ograph. Teknik transfer paling sederhana adalah kami ~ sebuah ~ panas d gas synnge-ketat dan sampel secara manual dari nyaman wadah (kaleng cat untuk residu pembakaran, botol minuman untuk rasa dan Parfum, dll). Presisi dan akurasi yang lebih baik diperoleh dari headspace otomatis samplers, botol volume w.herefixed adalah thermostated pada suhu dikendalikan suatu kali ~, dan headspace secara otomatis dialihkan ke GC melalui Inert (leburan silika) jalur transfer panas. Dalam Condi dikendalikan

132

headspace konsentrasi analit sebanding dengan yang asli konsentrasi dalam sampel. Klasik prosedur kalibrasi kuantitatif seperti standar internal, penambahan standar dan standar eksternal dapat digunakan untuk meningkatkan presisi. Fase padat Microextraction (SPME) SPME adalah teknik persiapan sampel terbaru untuk melacak analisis GC [18]. Ini adalah metode yang sederhana, bebas pelarut yang menggunakan serat nonpolar (biasanya Dimetilpolisiloksan) untuk mengekstrak analit dari matriks kutub (biasanya air). Sebuah serat leburan silika dilapisi dengan film tipis (7, 30, atau 100 /-Lm) fase stasioner. Ukuran kecil dan silinder geometri memungkinkan mudah penggabungan serat dilapisi ke GC jarum suntik biasa. Yang dilapisi serat terkena sampel matriks atau headspace, dan analit yang teradsorpsi (diekstrak) dari matriks sampel. Setelah serat akan dihapus dari sampel, maka dipindahkan ke inlet dipanaskan sistem GC dan yang analit adalah termal desorbed untuk analisis. Teknik ini bekerja dengan baik dengan melacak jumlah analit nonpolar dan semipolar dalam air. Gambar skematis 10,13 menunjukkan dua langkah utama, (ekstraksi) (Adsorpsi; Langkah AC) dari matriks sampel dan (b) desorpsi (Langkah-langkah D-F) ke dalam Gc. Langkah A: jarum suntik dengan serat bagian dalam menembus septum dari botol sampel. Seringkali sampel adalah matriks cairan, atau solusi dari sampel solid. Langkah B: serat yang kecil diperpanjang dari jarum suntik dan direndam dalam larutan untuk waktu yang telah ditetapkan (aduk

membantu) untuk mencapai keseimbangan analit antara serat padat dan cair matriks sampel. Langkah C: serat tersebut ditarik kembali ke dalam lebih mekanis stabil jarum suntik dan dikeluarkan dari botol sampel. Langkah-langkah ini dapat dilakukan secara manual atau secara otomatis oleh autosamplers GC diubah. Langkah D: jarum suntik sekarang menembus septum dari GC dan serat adalah terkena port injeksi dipanaskan di mana terjadi desorpsi termal (Langkah E). serat yang dapat dibiarkan di pelabuhan injeksi selama analisis GC di Untuk membersihkan serat secara menyeluruh untuk jangka berikutnya. F Langkah, serat adalah ditarik kembali di dalam tabung suntik, jarum suntik akan dihapus dari pelabuhan injeksi, dan proses siap untuk sampel berikutnya. Ada beberapa keuntungan dari teknik ini: 1) tidak organik Pelarut 133

digunakan untuk ekstraksi; 2) teknik ini sederhana, dan dalam modus manual, biaya yang kecil; 3) teknik presisi diterima menunjukkan, 10-15% RSD di tingkat jejak (turun sampai 100 ppb). Ada baik nonpolar dan kutub coating yang tersedia. Dimetilpolisiloksan adalah yang paling populer nonpolar satu, dan film 7 JLm tipis yang terbaik untuk tinggi berat molekul analit; film 30 JLm lebih baik untuk midrange (Pestisida), dan 100 JLm film untuk bahan mudah menguap. Efisiensi Ekstraksi tergantung pada banyak faktor: sifat kimia dari analit, sampel matriks dan lapisan polimer, waktu ekstraksi dan temperatur; yang derajat pengadukan dan konsentrasi analit. Langkah desorpsi tergantung terutama pada temperatur port injeksi, volatilitas dari analit, dan ketebalan film. Volatile sampel dapat diekstraksi dengan hanya mengungkapkan serat ke headspace di atas sampel (matriks padat atau cair). Solid sampel dapat ditangani baik oleh teknik headspace atau dengan solusi yang sesuai pelarut. Dalam beberapa kasus, penambahan garam ("pengasinan keluar") meningkatkan efisiensi ekstraksi nonpolars dari larutan air. Gambar 10,14 menunjukkan aplikasi SPME khas. Dua puluh umum pestisida dan standar internal di tingkat 200 ppt di minum air diekstraksi dengan serat 100 polydimethylsiloxane JLm direndam selama 15 menit. di mL air minum 4. Sebuah kajian baru-baru ini [19] dan [buku baru 20] dapat berkonsultasi untuk aplikasi lain. DERIVATIZATION Ada banyak alasan untuk melakukan reaksi kimia pada sampel untuk bentuk derivatif. Dua alasan yang menguntungkan untuk gas kromatografi analisis adalah: derivatization penyebab sampel nonvolatile menjadi

134

135

136

volatile, atau meningkatkan pendeteksian dari derivatif. Diskusi ini terutama menyangkut peningkatan volatilitas yang dapat mencegah kolom fouling, masalah yang umum untuk bio-pemisahan [21]. Selain itu, derivatization sering memiliki efek sekunder diinginkan sejak derivatif mungkin juga termal lebih stabil. Beberapa monograf pada derivatization terdaftar dalam Referensi [22-25] bersama dengan beberapa publikasi yang relevan dengan rumah-rumah pasokan laboratorium [2628]. Klasifikasi Reaksi Reaksi untuk memproduksi turunan atsiri dapat diklasifikasikan sebagai silylation, asilasi, alkilasi, dan kompleksasi koordinasi. Contoh pertama tiga jenis termasuk dalam Tabel 10.1 yang diselenggarakan oleh fungsional kelompok termasuk: asam karboksilat, hidroksil, amina, dan karbonil. Amina memerlukan pertimbangan khusus bahkan jika mereka stabil. Mereka yang kuat kecenderungan ke-ikatan hidrogen sering membuatnya sulit untuk elute mereka dari kolom GC. Akibatnya, sering amina harus derivatized apakah mereka volatile atau tidak. Sebuah review subjek ini telah muncul baru-baru ini [29]. Tipe keempat reaksi, kompleksasi koordinasi, digunakan dengan logam, dan reagen khas adalah trifluoroacetylacetone dan hexafluoroacetylacetone [30]. Drozd [31] telah mengkaji bidang ini dan memberikan lebih dari 600 referensi dan tidak ada diskusi lebih lanjut yang disajikan di sini. Silylation reaksi sangat populer dan perlu penjelasan lebih lanjut. A berbagai reagen secara komersial tersedia, dan kebanyakan dirancang untuk memperkenalkan kelompok trimethylsilyl ke analit untuk membuatnya stabil. reaksi khas adalah satu di antara bis-trimethylsilylacetamide (BSA) dan

Sebuah reagen erat terkait berisi grup trifluoroacetamide dan menghasilkan reaksi yang lebih stabil dengan-produk (bukan derivatif lebih tidak stabil); reagen adalah bis (trimethylsilyl)-trifluoroacetamide (BSTFA). Perintah reaktivitas dari reagen silylation "adalah: 137

Jika-pelarut yang digunakan, biasanya adalah salah satu kutub; basis DMF dan piridin biasanya digunakan untuk menyerap asam oleh-produk. Suatu katalis asam seperti sebagai trimethylchlorosilane (TMCS) dan pemanasan kadang-kadang diperlukan untuk mempercepat reaksi. Metode Derivatization Metode derivatization dapat dibagi menjadi beberapa kategori: preand post-kolom metode dan off-line dan metode on-line. Sebagai contoh, pembentukan turunan atsiri untuk GC ini biasanya dibuat off-line di botol yang terpisah sebelum injeksi ke dalam kromatograf (precolumn). Sana beberapa pengecualian dimana reagen dicampur dan disuntikkan bersama-sama; derivatization reaksi terjadi di pelabuhan GC injeksi panas (on-line). Precolumn reaksi yang tidak pergi ke penyelesaian akan menghasilkan campuran yang lebih kompleks daripada sampel awal. Akibatnya reagen, kelebihan biasanya digunakan untuk menggerakkan reaksi untuk penyelesaian, sehingga membuat kelebihan dari reagen dalam sampel. Kecuali langkah pemisahan sebelum digunakan, Metode kromatografi harus dirancang untuk memisahkan tambahan kotoran. Ketika dilakukan off-line, teknik precolumn dapat digunakan dengan reaksi lambat dan dipanaskan untuk memberikan hasil kuantitatif yang lebih baik. Peningkatan detectivity biasanya muncul dari penggabungan suatu kromofor ke analit. Dalam GC, salah satu contoh adalah penggabungan ke dalam analit kelompok fungsional yang akan meningkatkan etectivity ya ~ ~ mereka. ~ sele tive seperti detektor ECD. Tujuan pembentukan turunan IS untuk meningkatkan batas deteksi atau selektivitas atau keduanya. Contoh lain adalah penggunaan reagen rate deute untuk membentuk turunan yang dapat dengan mudah dibedakan dengan berat molekul tinggi mereka ketika dianalisis dengan GC-MS. Ringkasan Derivatization menawarkan satu metode untuk menganalisis sampel relatif nonvolatile GC, tetapi ada orang-orang yang merasa bahwa akan lebih baik untuk melakukan analisis tersebut dengan cara lain, sehingga kita harus memutuskan untuk dirinya sendiri. ~ T sebuah minimum, pembentukan turunan memasukkan langkah tambahan atau langkah-langkah ke prosedur analitis, meningkatkan kemungkinan kesalahan tambahan dan memerlukan validasi metode ekstra. . . . Pendirian derivatization menjadi metode analisis kuantitatif dapat difasilitasi dengan menggunakan standar internal (lihat Bab 8). Di kasus itu, standar internal harus ditambahkan ke sampel sebelum derivatization dilakukan.

138

11. Troubleshooting GC Systems
Halaman-halaman berikut ini telah dimasukkan untuk membantu menafsirkan chromatographer puncak yang berbeda bentuk yang dihadapi dalam kromatografi gas. Itu berbagai kromatogram yang diperoleh adalah hasil dari expenences kita sendiri dikombinasikan dengan pencarian literatur menyeluruh. Titik injeksi pada setiap kromatogram ditunjukkan oleh ~ merusak tanda centang pada baseline seperti ditunjukkan pada contoh 1. Sumbu waktu berjalan dari kiri ke kanan (Lihat panah).

139

140

141

142

143

144

145

146

LAMPIRAN II. PEDOMAN UNTUK SELECfING Kolom kapiler I. Panjang A. Peraturan: Gunakan kolom berguna terpendek 1. Hemat waktu 2. Lebih murah 147

3. Mengurangi efek samping (dikurangi waktu tinggal) 4. Jika Rs lebih dibutuhkan, mempertimbangkan mengurangi df dan / atau id II. Internal Diameter A. Megabore (0.53mm id) pilihan ketika pembawa laju alir tinggi yang diinginkan 1. Wikipedia teknik injeksi langsung 2. Primitif tetap termasuk volume mati, titik-titik dingin, aktif bahan, bagian-bagian yang tidak dapat dibersihkan 3. Contoh transfer dari filter penyerap (ruang kepala, SFC, SPE teknik) B. kolom berukuran medium (i.d. 0,25 0.35mm) 1. Umumnya digunakan sebagai kompromi yang baik C. Persempit kolom (0.10mm id) untuk meningkatkan efisiensi pemisahan dan kecepatan 1. panjang pendek menjadi mungkin dan lebih cepat analisis 2. Keterbatasan a. rasio split diperlukan Tinggi (500 / 1) b. Terbatas jejak analisis c. tekanan gas pembawa yang diperlukan Tinggi d. Peralatan dan manipulasi yang lebih kritis III. Ketebalan Film A. Keuntungan dari film tebal 1. Peningkatan retensi; sering penting untuk volatiles; ketebalan film dapat mengganti panjang kolom 2. Peningkatan kapasitas; penting untuk GC / MS atau FTIR 3. Elusi bergeser ke suhu yang lebih tinggi (semua komponen sampel lihat kolom hangat), sehingga mengurangi efek adsorpsi B. Keuntungan dari film tipis 1. Maksimum efisiensi pemisahan 2. Elusi bergeser ke suhu yang lebih rendah (contoh melihat pendingin kolom) 3. Analisis lebih cepat IV. Fase stasioner Mulailah dengan fase nonpolar seperti DB-l atau DB-5 A.. Lebih efisien, lebih inert dan umumnya berguna untuk jenis sampel yang paling. Non-polar karakter menunjukkan kelarutan rendah untuk senyawa polar, sehingga memungkinkan kolom suhu yang lebih rendah untuk digunakan. Ini berarti stabilitas yang lebih baik untuk senyawa termolabil. B. Jika selektivitas lebih besar diperlukan, coba fase lebih polar, OV-1701 V. Carrier-Gunakan Gas H2 atau Dia (lebih cepat daripada N2) A. Kelebihan H2 atas Dia 1. Pemisahan efisiensi sedikit lebih tinggi 2. Analisis waktu sekitar 50% lebih cepat (isotermal saja) 3. Better sensitivitas (puncak tajam) 4. Kolom reguI ~ rly berjalan pada suhu yang lebih rendah, sehingga peningkatan resolusi dan hidup lagi kolom B. Keterbatasan 1. Potensi bahaya; dapat menyebabkan ledakan jika lebih dari 5% di udara dan percikan. Tidak disarankan, terutama bukan untuk GC / MS.

148

LAMPIRAN III. GC: CARA MENGHINDARI MASALAH I. Carrier Gas A. Gunakan gas kemurnian tinggi, minimal 99,9%; 99,999 untuk GC-MS. B. Gunakan scrubber saringan molekul pada gas semua silinder untuk menghapus H20 dan metana. C. Penggunaan scrubber O2 on line gas pembawa sangat penting bagi elektron menangkap detektor; direkomendasikan untuk suhu tinggi kapiler kolom. D. Gunakan Dia (atau H2) untuk TCD. N2 tidak sensitif (juga memberikan baik + dan - puncak). Gunakan Dia atau N2 untuk FID. Gunakan tulang kering, Orfree N2 untuk ECD. E. Tahu Deemter van (atau Golay) plot untuk kolom Anda. Ii memilih. adalah 12, 20, dan 40 em / detik untuk N2, H2 Dia dan masing-masing. H vs II. Mengukur harian II (menyuntikkan metana). Ii = L (cm) / TM (melihat). II. Penyuntik A. Dikemas Kolom-kolom digunakan pada-penyuntik; inert lagi, suhu yang lebih rendah dari inlet dipanaskan off-kolom. Gunakan hanya bagian kecil silanized wol kaca. Jangan pak beberapa inci pertama (lihat Anda manual) dari kolom untuk memungkinkan ruang untuk jarum. Gunakan terendah mungkin masuk suhu yang menghasilkan band paling perluasan. B. Kolom kapiler 1. Split-split dalam kisaran 20 / 1 sampai 200 / 1. Sebuah titik awal yang baik 50 / 1. split rasio rendah memberikan sensitivitas yang lebih baik, tapi akhirnya mengarah pada resolusi rendah. Untuk katup gas sampel, pembersihan dan perangkap, dan antarmuka SFE meningkatkan rasio split sampai R; dimaksimalkan. Gunakan teknik injeksi cepat, sebaiknya dengan sebuah autosampler. 2. Splitlessa. Encerkan sampel dalam pelarut heksana seperti volatile, iso-oktan, atau metilen klorida. b. Mengatur suhu kolom di b.p. pelarut. c. Menyuntikkan perlahan, 1-5 sakit, "jarum panas" teknik. d. suhu mulai program; split katup terbuka setelah 1 menit. III. Kolom A. Beli kolom baik dari produsen terpercaya. Jangan mencoba untuk menyimpan beberapa dolar. Periksa semua kolom secara teratur. Anda Jalankan tes campuran; mengukur N, ex, k, dan R; B. Bersihkan kolom secara teratur. Cara terbaik untuk membersihkan kolom: 1. Panggang keluar semalam; 2. Potong 10 pertama mereka setidaknya sebulan sekali. 3. Jika perlu, keluarkan kolom, bilas dengan pelarut (hanya terikat fase), kering juga, instal ulang dan kondisi perlahan-lahan. Ingat: Kinerja Buruk sampel tidak selalu berarti kolom sangat buruk; menjalankan pemeriksaan standar pada kolom. C. Kolom kapiler 1. Panjang-mulai dengan 25 juta; kolom pendek lebih cepat, kolom lagi memiliki lebih banyak piring (tapi lambat). Hal ini lebih baik menggunakan thinfilm, ld kecil, dan ukuran sampel kecil untuk meningkatkan efisiensi kolom. 2. l.d.-mulai dengan 250 atau 320 J.tm. Megabore (530 J.tm) tidak sebagai 149

efisien; 100 J.tm memerlukan sangat kecil, suntikan sangat cepat. 3. Gas pembawa digunakan atau H2 Dia; N2 terlalu lambat. 4. dr-mulai dengan 0,2 atau 0,5 J.tm. Tebal film untuk bahan mudah menguap, tetapi biasanya kurang efisien. IV. Detektor A. Selalu gunakan gas pembawa yang tepat, salah kemurnian tinggi. B. Gunakan scrubber untuk menghapus H20 dan hidrokarbon ringan. C. Jika perlu, gas menggunakan make-up. Penting untuk ECD dan TCD; sering meningkatkan sensitivitas dengan FID. D. Jauhkan detektor panas; menghindari kondensasi sampel. LAMPIRAN IV. PERHITUNGAN DARI RASIO UNTUK SPLIT SPLIT INJEKSI pada kolom PL Pertama, mengukur laju alir keluar split lubang menggunakan flow meter yang cocok (Sabun film flow meter atau flow meter elektronik). Lalu, menyuntikkan microliter 5 sampel metan dan merekam waktu retensi. Hitunglah kecepatan linier rata-rata gas pembawa,

dimana L = panjang kolom di em. dan TM adalah waktu retensi untuk metana dalam hitungan detik. Satuan untuk kecepatan linear rata-rata biasanya cm / s. Untuk mengkonversi ke kecepatan laju aliran, FC, kecepatan harus dikalikan oleh luas penampang kolom:

Mengalikan dengan 60 akan mengkonversi unit untuk mLlmin. Akhirnya, menghitung rasio split: Rasio = Split laju alir / kolom laju alir Jika kedua nilai-nilai di mLlmin, unit akan membatalkan.

150

151

LAMPIRAN VII. BEBERAPA FAKTOR KOREKSI TEKANAN (j)

LAMPIRAN VIII. DAFTAR BEBERAPA kromatografi PENAWARAN RUMAH 1. Alltech Associates, Inc 2051 Chicago menuju Waukegan Road Deerfield, IL 60015 847-948-8600 152

2. Chrompack, Inc 1130 Route 202 Raritan, NJ 08869 800-526-3687 3. J & W Ilmiah 91 Jurang Blue Road Folsom, CA 95630-4714 916-985-7888 4. Restek Corporation 110 Benner Circle Bellefonte, PA 16823-8812 800-356-1688 5. Inc Supelco Supelco Park Bellefonte, PA 16823 800-359-3041 Plus produsen alat seperti: 1. Hewlett-Packard Company Kelompok Produk Analitik P.O. Box 9000 San Fernando, CA 91341-9981 2. Perkin Elmer761 Avenue Utama Norwalk, CT 06859 3. Varian Analitik Instrumen Hanson Way 811, B111 Palo Alto, CA 94303-1031 LAMPIRAN IX. SUMBER LAINNYA Beberapa Buku Terbaru (lihat juga referensi bab) 1. Baugh, PJ, Kromatografi Gas: Pendekatan Praktis, Oxford Univ. Tekan, 1994. 2. Braithwaite, A., dan Smith, FJ, Metode kromatografi, edisi kelima, Chapman dan Hall, 1996. 3. Fowlis, IA, Kromatografi Gas, edisi kedua, Seri ACOL, Wiley, Chichester, 1995. 4. Grant, DW, Kromatografi Gas kapiler, Wiley, New York, 1996. 5. Grob, RL, Ed., Modern Praktik Kromatografi Gas, edisi ketiga, Wiley, New York, 1995. 6. Hinshaw, JV, dan Ettre, LS, Pengantar Kromatografi Kolom Terbuka-Tubular Gas, Advanstar, Cleveland, 1994. 7. Rood, D., Sebuah Panduan Praktis untuk Pemeliharaan, Pemeliharaan, dan Pemecahan Masalah dari kapiler Sistem kromatografi gas, edisi kedua, Huthig, Heidelberg, 1995. , 8. Scott, RPW, Teknik, dan Praktek Kromatografi, Dekker, 1995. 153

154

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful