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UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
MICROBIOLOGÍA Y BIOANÁLISIS
INMUNOLOGÍA Y LABORATORIO 2007-I

DILUCIONES

1. Dilución Simple (Método del factor de dilución)
Una dilución simple es aquella en la cual una unidad de volumen de un material
líquido de interés se combina con un volumen apropiado de un solvente líquido para
alcanzar la concentración deseada. El factor de dilución es el número total de
unidades de volumen en los cuales su material será disuelto. El material diluido se
debe mezclar muy bien para alcanzar una dilución verdadera.

Ejemplo: La pulpa de jugo congelada generalmente se debe diluir en 4 vasos de agua
(el solvente de la dilución) dando un factor de dilución 5. Es decir, el concentrado de
jugo representa 1 unidad de volumen al cual usted le adiciona 4 unidades más de
volumen (el agua). De esta forma, su pulpa de jugo está distribuida en las 5 unidades
de volumen. Esta sería una dilución 1:5 y ahora la pulpa de jugo es 1/5 del
concentrado original. Así pues, en una dilución simple usted agrega una unidad de
volumen de solvente de acuerdo con el factor de dilución deseado.

2. Dilución seriada
Una dilución seriada es simplemente una serie de diluciones simples que amplifican el
factor de dilución rápidamente, comenzando con una pequeña cantidad inicial de
muestra (cultivo de bacterias, un reactivo químico, un jugo, etc.). La fuente del material
para diluir en cada paso viene del material diluido en el tubo anterior. En una dilución
seriada el factor de dilución total en cualquier punto es el producto del factor de
dilución individual en cada uno de los tubos.

Ejemplo: En el laboratorio de microbiología usted realizará una dilución seriada 1:100
de un cultivo de bacterias en tres pasos (ver figura). El paso inicial combina 1 unidad
de volumen del cultivo con 99 unidades de volumen de caldo = dilución 1: 100. En el
siguiente paso usted combina 1 unidad de volumen del cultivo diluido 1:100 con 99
unidades de volumen de caldo de cultivo. Usted ahora tiene una dilución 1:10.000
(1:100 x 100 = 1:10000). En el tercer paso usted combina 1 unidad de volumen del
cultivo diluido 1:10000 con 99 unidades de volumen de caldo de cultivo. Usted ahora
tiene una dilución 1:1.000.000 (1:100 x 10,000 = 1:1,000,000). La concentración del
cultivo es ahora una millonésima parte menos que en la muestra original.

C1 = 100 mg/ml (la concentración de la solución madre) V2 = 200 ul (volumen total de la solución que usted va a preparar con una nueva concentración). Cómo hacer volúmenes fijos de concentraciones específicas: Método de V1C1=V2C2 Con frecuencia usted necesita hacer una cantidad determinada de una solución con una concentración conocida debido a la disponibilidad limitada de materiales (algunos químicos son muy costosos y solo se venden o utilizan en pequeñas cantidades e. C = concentración. C2 = 25 mg/ml (la nueva concentración) Por ordenamiento algebraico: V1 = (V2 x C2) / C1 V1 = (0. microgramos) o para evitar el desperdicio de material. donde: V = volumen. g. en cualquier unidad que usted esté trabajando (Atributos de la solución fuente) V1C1=V2C2 (atributos de la nueva solución) Ejemplo: Suponga que usted tiene 3 ml de una solución madre de ampicilina a una concentración de 100 mg/ml y usted quiere hacer 200 ul de una solución que tenga una concentración de 25 mg/ml. V1 = El volumen de la solución madre con el cual usted partirá para hacer la segunda solución.3. Este valor es desconocido para usted. Usted necesita saber qué volumen de la solución madre necesita usar para hacer los 200 ul del volumen total necesitado. La fórmula V1C1 = V2C2 es un método rápido para calcular tales diluciones.2 ml x 25 mg/ml) / 100 mg/ml = 0.05 ml = 50 ul .

50 ul de la solución madre y diluirla con 150 ul de solvente para lograr los 200 ul de la solución con una concentración de 25 mg/ml (recuerde que la cantidad de solvente utilizada se basa en el volumen final que se necesita de tal forma que usted debe restar el volumen inicial del volumen final para poder calcular la cantidad de solvente). 4. es decir. Ejemplo: Si usted quiere hacer una solución de etanol al 70%.Por lo tanto. Usted puede usar Molaridad en la ecuación de arriba en lugar de otras unidades de concentración.0 Molar (1.0 L) de solvente (usualmente agua). # ml / 100 ml. .0 g de NaCl en 100 ml de agua (o el equivalente para el volumen que usted necesita). Cuando se trabaja con químicos secos este se mezcla como masa seca (g) por volumen donde # g/100 ml = Concentración en porcentaje.025 L) de una solución de 0. usted debe tomar 0. Una solución 1.05 ml.0 M) es equivalente a un peso fórmula (pm) (g/mole) de reactivo químico disuelto en 1 litro (1.15 M (= moles/L). i.675 g/25 ml 5. Soluciones con concentraciones en porcentaje Muchos reactivos se mezclan como concentraciones en porcentaje.025 L x 0. Cuántos gramos deben disolverse en 25 ml de agua para hacer esta solución? g?/25 ml = 0.15 mole/L x 180 g/mole = 0. El peso fórmula o peso molecular siempre está registrado en la etiqueta del reactivo. usted debe mezclar 70 ml de etanol al 100% con 30 ml de agua (o el equivalente para el volumen que usted necesita).e. Ejemplo: Un químico tiene un peso molecular de 180 g/mol y usted necesita 25 ml (0. Soluciones Molares (unidad = M = moles/L) Algunas veces puede ser más eficiente usar Molaridad cuando se están calculando concentraciones. Cuando se usan reactivos líquidos la concentración en porcentaje se basa en volumen por volumen. Ejemplo: Si usted quiere hacer una solución de NaCl al 3% usted debe disolver 3..

2 M? (p. Cuanto NaCl (en gramos) debe disolver para preparar 200 ml de una solución de NaCl 0. . Si ud.3 gr) 4.m. de la IgM = 900000 daltons). 10.25M? (Na: 23gr. Cuántos gr de dextrosa hay en 45 ml de una solución 0.5 gr de sucrosa en suficiente agua para producir 100 ml de solución.75 % (P/V) que contiene 4375 gr de soluto. Si ud. Calcule el volumen de una solución al 1. de la sucrosa = 342. 7. 6. Calcule el número de gramos en 0. de la dextrosa = 180. Cuál es la concentración de la aspirina en términos de % P/V? 2. normalidad.1M de IgM (p. 11. 8. tiene 10 ml de una solución stock 10 mM y realiza 5 diluciones seriadas base 10.14% (% P/V). TALLER Teniendo como base los elementos teóricos suministrados en el documento guía. Calcule el peso de sulfato de anfetamina contenido en 70 ml de una solución al 0. Se disolvieron 0.m. 1. Cual es la Normalidad de una solución de H3PO4 2M? 9. Calcule la molalidad de una solución que contiene 45 gr de MgCl2 disueltos en 620 gr de agua.3 g de agua. resuelva el siguiente taller relacionado con el tópico de soluciones y diluciones.m.48 gramos de aspirina en 30 ml de agua. Calcule la concentración en molaridad. cuál es la molaridad y la molalidad de esta solución? (Densidad del agua = 1gr/ml).92 gr de NaCl y 252. molalidad y % en masa de 25 gramos de KBr disueltos en 750 ml de solvente. Cl: 35. cual es la concentración final de la solución? 12. 3.2 gr) 5. Este se socializará al inicio del laboratorio para lo cual será imperativa su participación. tiene una solución hecha con 1. Se disolvieron 1.5gr ). Cuál es la molaridad (M) de la sucrosa en esta solución? (p.