Antioksidan kegiatan dan pemisahan senyawa fenolik dari glandulosum Origanum dari Aljazair utara dengan kromatografi cair

kinerja tinggi (HPLC) Abstrak Glandulosum Origanum merupakan tanaman endemik daerah Afrika Utara (Aljazair dan Tunisia), digunakan untuk melawan infeksi seperti batuk rejan dan bronkitis. Dalam studi ini, aktivitas antioksidan yang dievaluasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pengaruh terhadap DPPH scavenging sama dengan 6730 mg / ml (IC50). Namun, efek pemulung H2O2 diperkirakan sebesar 60,78% sangat kuat dibandingkan dengan efek dari BHA, BHT dan - tokoferol masing diperkirakan pada 19, 25 dan 23%. Pengaruh H2O2 pemulung sangat kuat dibandingkan dengan mengais-ngais dari DPPH. Sebuah efek pembilasan tinggi umumnya akibat tingginya kadar senyawa fenolik, asam fenolik dan flavonoid. Hasilnya mungkin menunjukkan bahwa ekstrak O. glandulosum memiliki senyawa dengan aktivitas antioksidan, zat ini dapat memainkan peran penting dalam pencegahan penyakit yang disebabkan radikal bebas. Kata kunci: senyawa fenolik, glandulosum Origanum, HPLC, antioksidan, flavonoid

PENDAHULUAN glandulosum Origanum adalah endemik luas takson dari wilayah Afrika Utara (Aljazair dan Tunisia). Hal ini dianggap sebagai belukar (Quezel dan Santa, 1963; Leclerc, 1990; Bendahou et al, 2008.). Beberapa studi telah menunjukkan bahwa takson glandulosum O. kaya akan minyak esensial, senyawa fenolik seperti flavonoid dan asam fenolat (Benzanger-beauquesne et al, 1980, 1990; Nakiboglu et al, 2007..). Di Aljazair, tanaman ini digunakan untuk melawan infeksi seperti batuk rejan, batuk, demam dan bronkitis (Bendahou et al, 2008.). Tujuan penelitian ini adalah perkiraan dari kandungan total fenol glandulosum O. menggunakan Klasik Folin reagen Ciocalteu, penentuan aktivitas antioksidan mereka menggunakan 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH assay), efek scavenging H2O2 dan analisis komposisi kimia dari ekstrak metanol dengan kromatografi HPLC, untuk memperkirakan jumlah komponen utama dari tanaman ini. Pemilihan penelitian ini didasarkan pada dua kriteria, pertama, ada beberapa studi di domain ini di Aljazair dan kriteria kedua adalah pemanfaatan tradisional glandulosum O.. BAHAN DAN METODE Tanaman bahan Sampel udara bagian (daun, ranting dan bunga) dari individu tanaman dikumpulkan di wilayah Boukhlifa (Bejaia) (36 ° '19 °, 39' 41 N; '26 °, 56' 5 ° 06 S; alt.1.00 km) selama bulan Juni 2007. Identifikasi tanaman dibuat oleh laboratorium botani Bejaia University. Crude ekstrak

Tanaman obat yang dikumpulkan dipanen, kering dan tanah menjadi bubuk halus oleh pabrik multi-Kenwood. senyawa fenolik diekstraksi menurut metode yang dijelaskan oleh Sousek et al. (1999). Bahan tanaman udara kering diekstraksi dalam alat Soxhlet dengan metanol selama 30 menit. Solusi ini digunakan untuk analisis senyawa fenolik total dan estimasi kandungan flavonoid-nya. Reagen kimia 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH), Folin-Ciocalteu reagen yang dibeli dari sigma Aldrich. Penentuan kadar fenol total Kandungan fenolik total ditentukan dengan menggunakan metode Folin Ciocalteu kolorimetrik menurut Javanmardi (2003) dengan sedikit modifikasi. Tepat uji sampel dilusian (0,5 ml) direaksikan dengan 2,5 ml Folin-Ciocalteu (1 / 10 N) reagen. Reaksi kemudian dinetralkan dengan 2 ml natrium karbonat jenuh (75 g / l) dan memungkinkan untuk berdiri selama 15 menit dalam kegelapan pada 45 ° C. Kemudian absorbansi warna biru yang dihasilkan diukur pada 765 nm. Kuantifikasi dilakukan atas dasar kurva standar dengan asam galat. Hasil dinyatakan sebagai setara gram asam \ gallic (GAME) per 100 g berat kering. Penentuan kadar flavonoid Kandungan flavonoid diperkirakan dengan memakai metode Djerridane et al. (2006). 1,5 ml amonium klorida (2%) ditambahkan dengan volume yang sama sampel uji. Absorbansi diukur pada 430 nm setelah periode inkubasi pada suhu kamar selama 15 menit. Kontrol dipersiapkan dengan larutan amonium klorida dan volume yang sama metanol. Penentuan aktivitas antioksidan DPPH assay Aktivitas antioksidan sampel ditentukan dengan menggunakan metode Gachtar et al. (2007). 50 ßl sampel ditambahkan dengan 5 ml larutan DPPH (0,004%). Campuran dibiarkan untuk berdiri selama 30 menit dalam gelap pada suhu kamar dan absorbansi diukur pada 517 nm. H2O2 assay Pengaruh pemulungan H2O2 ditentukan menurut metode Atmani et al. (2009). 1,2 ml H2O2 (40 mM) ditambahkan dengan 2 ml sampel. Setelah masa inkubasi selama 10 menit pada suhu kamar, absorbansi diukur pada 230 nm. Analisis HPLC Analisis KCKT dilakukan pada sistem Perkin Elmer 200 seri dengan C18 (penemuan Supelco ODS) Nucleosil, 5 pM 250 x 16 HASIL DAN PEMBAHASAN

senyawa fenolik dan flavonoid isi Evaluasi senyawa fenolik dan flavonoid menunjukkan bahwa glandulosum O. berisi 55,15 dan 6,88 mg / g berat kering masing-masing. Kandungan senyawa fenolik dari glandulosum O. adalah tiga kali lipat lebih rendah dari yang diperoleh untuk ekstrak air Origanum vulgare Spanyol (175 mg / g) (Rodriguez-meizoso et al, 2006.) Dan lebih rendah dari yang diperoleh untuk vulgare O. Slovenia (Skerget et al, 2005.). Namun, lebih tinggi dibandingkan yang diperoleh untuk ekstrak metanol O. vulgare Polandia (22,21 mg / g) (Capecka et al, 2005.). Namun, isi dari flavonoid untuk glandulosum O. diperoleh dalam penelitian ini adalah sebagian besar lebih tinggi daripada yang diperoleh untuk vulgare O. Slovenia (Skerget dkk, 2005.). Perbedaan ini dapat dijelaskan dengan metode ekstraksi zat aktif yang digunakan dalam studi setiap, perbedaan antara spesies tanaman dan kondisi iklim (Fiamegas et al, 2004.). Aktivitas Antioksidan DPPH assay The IC50 dievaluasi untuk ekstrak metanol gladulosum O. sama dengan 6730 mg / ml. Namun, efek pemulung dibandingkan dengan yang diperoleh untuk asam galat (IC50 = 43 mg / ml), tidak dapat diabaikan (Tabel 1). Sebuah efek pemulung tinggi umumnya akibat tingginya kadar senyawa fenolik, asam fenolik dan flavonoid (Samarth et al, 2008;. Kouri et al, 2007, Capecka et al, 2005..). Kandungan flavonoid dalam penelitian ini sangat rendah. Hal ini sebagian dapat menjelaskan pengaruh scavenging rendah glandulodum O. ekstrak. Pemulung efek H2O2 Pengaruh pemulung H2O2 oleh ekstrak metanol glandulosum O. diperkirakan 60,78% untuk konsentrasi 66 mg / ml. Antioksidan sintetis seperti BHA, BHT dan-tokoferol? Memiliki efek pemulungan 19, 25 dan 23%, masing-masing (Tabel 2). Efek ini sebagian besar lebih rendah daripada yang diperoleh untuk ekstrak. Hal ini dapat dijelaskan oleh adanya senyawa fenolik pada ekstrak metanol glandulosum O., yang dapat membebaskan elektron (Balasundram et al, 2005; Elmastas et al, 2006..). Analisis HPLC senyawa fenolik dapat didefinisikan sebagai rangkaian besar kandungan kimia yang memiliki setidaknya satu cincin aromatik, bantalan hidroksil dan lain-unsur sub (Ribereau-Gayon, 1968). RP-HPLC analisis adalah metode yang paling digunakan untuk identifikasi tanaman senyawa fenolik. Karena keragaman dan kompleksitas fenolat alam di tanaman obat, sulit untuk menggambarkan setiap senyawa dan penentuan strukturnya. Namun, tidak sulit untuk mengidentifikasi kategori utama senyawa fenolik.
Tabel 1. Pengaruh ekstrak metanol glandulosum O. dan asam kontrol positif gallic pada scavenging radikal bebas (DPPH).

Tabel 2. Pemulungan pengaruh kontrol positif (BHA, BHT dan-tokoferol).

H2O2

oleh

ekstrak

metanol

dan

Dalam penelitian ini, identifikasi fenolat dari glandulosum O. dengan HPLC dilakukan dengan perbandingan waktu retensi mereka dengan yang diperoleh oleh Proestos et al. (2006). Sebuah kromatogram HPLC khas glandulosum O. disajikan pada Gambar 1. Menurut literatur, senyawa fenolik dari glandulosum O. dapat turut asam galat (35 menit), asam vanilat (40 menit), asam coumaric (50 menit), rutin (60 menit), asam ferrulic (70 menit) dan naringenin (85 menit). Kesimpulan Radikal bebas dapat memainkan peran penting dalam asal usul kehidupan dan evolusi biologi. Hal ini menunjukkan efek menguntungkan mereka pada organisme. Sebagai contoh, radikal oksigen mengerahkan tindakan kritis seperti transduksi sinyal dan transkripsi gen. Namun, radikal bebas dan spesies terkait lainnya juga bisa menyebabkan oksidasi biomolekul yang mengakibatkan cedera dan kematian sel. Pada dekade belakangan ini, senyawa fenolik telah sangat menarik karena mereka telah di produk alami. Pameran glandulosum O. efek antioksidan tinggi dibandingkan dengan yang diperoleh dengan BHA, BHT dan-tokoferol. Oleh karena itu, hasilnya mungkin menunjukkan bahwa glandulosum O. memiliki senyawa dengan sifat antioksidan seperti asam ferrulic dan galat yang dapat diisolasi dan kemudian digunakan sebagai antioksidan untuk pencegahan dan pengobatan radikal bebas gangguan yang terkait. REFERENSI Balasundram N, TY Ai, R Sambanthamurthi, K Sundram, Samman S